专利名称：生物活性的亚甲基蓝衍生物(2)的研发的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物活性的光敏剂，其光细胞毒性较强且可用于光动力疗法(PDT)领域，涉及它们的组合物，它们作为药剂，特别是治疗癌症，及治疗和预防微生物感染的用途，它们诊断和检测医学病症的用途和在光化学内在化、癌症疫苗生产和光消毒或光灭菌方面的相关用途。本发明还涉及光敏剂的共轭物及复合物，其可用于光消毒或光灭菌。
背景技术：
已知某些有机化合物(“光敏剂”)可在有氧条件下通过光的吸收而诱导细胞死亡。该细胞毒性作用涉及I型和/或II型光氧化。人们发现这类光敏剂可使用光治疗癌症和其它疾病或感染(光动力疗法)并通过光-诱导的微生物的破坏将表面和流体灭菌(包括消毒)。在上下文中，术语灭菌是指在特定情况下，微生物的减少或清除。还已知某些有色的吩噻嗪化合物(例如亚甲基蓝)可参与I型和II型光氧化过程，但是迄今为止，该类型的化合物已被证实作为用于光动力疗法的光敏剂是不适宜或低效的，或显示较低的光化学抗微生物活性，或在使用中具有潜在的问题，这是因为它们为Ames阳性。
对于在PDT中应用，一种好的光敏剂须具有至少一些且优选全部下列性质●它应在光(优选波长约600-800nm)照射时，有效引起靶细胞(例如肿瘤细胞或细菌细胞)的破坏●它应在靶组织和正常组织之间显示高度选择性●它应具有相对较小的暗毒性●它应对患者皮肤较少引起光敏感性或不会引起光敏感性
●它应对于患者和住院的方便性而言具有较短的药物-光照射间隔并使治疗费用达到最少●它应适于体内使用，特别是它不应是诱变的●在光灭菌中应用时，一种好的光敏剂必须对广谱的微生物显示出较强的光毒性作用，理想地在使用环境光线时，且不应很容易地发生光漂白。
在肿瘤学中，若干不同类型的光敏剂已经用于治疗实体瘤和中空器官如食管和膀胱的薄壁肿瘤。然而，这些光敏剂的使用已经受到限制，这部分因为在肿瘤和健康组织之间缺少选择性且部分因为可引起皮肤光敏感性延长。因此需要一种新的光敏剂，其引起较少的皮肤光敏感性或不会引起皮肤光敏感性且其选择性破坏肿瘤细胞。
虽然先前PDT已经用于治疗肿瘤，但它仍然没有在临床上用于抗细菌和其它微生物所引起的感染。抗生素治疗细菌感染的应用正在受到挑战，这是由于许多细菌种类对常用的抗生素，如四环素和β-内酰胺的耐药性增加。医源性抗生素耐药感染，如MRSA尤其成为难以解决的问题。光动力抗菌治疗对于局部治疗而言是一种有前景的抗生素替代疗法。
随着抗菌剂的发展，必须克服的主要问题是药物摄入到细菌细胞中。革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌的外表面组成不同，对抗微生物剂的反应也不同，特别是在摄取方面。由于革兰氏阴性细菌的表面带有较高负电荷，因此它们对中性或阴离子药物，包括最常使用的光敏剂相对不能渗透。可有效抗革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的抗微生物光敏剂的研发对于替代由于耐药性而变得越来越无效的常用抗生素而言是非常有益的。
已经在细菌中研究出很多不同类型的光敏剂。这些包括吩噻嗪化合物、酞菁、二氢卟酚和天然存在的光敏剂。对于摄入到革兰氏阴性细菌中而言，公认阳离子衍生物是最有效的。
吩噻嗪化合物是在600-700nm波长之间具有最大吸收的蓝色染料。对它们的非-光动力抗菌性质已有研究，但是除亚甲基蓝和甲苯胺蓝之外，很少进行光动力学研究。
Wainwright等人(1998)研究了一系列吩噻嗪亚甲基蓝衍生物在肿瘤细胞系和细菌中的作用。新的亚甲基蓝(NMB)和二甲基亚甲基蓝(DMMB)在灭活MRSA方面有效，且显示在作用于染色的黑瘤细胞系时，它是比亚甲基蓝更为有效的光敏剂。Wagner等人(1998)研究了这些染料，此外还研究了灭活包膜病毒的疏水衍生物。
亚甲基蓝抗菌作用的准确方式还未可知，但其中一个假设认为是由于它的立体化学，它可插入到DNA中，且光动力学作用可引起DNA损害。已经显示出亚甲基蓝本身作为抗肿瘤剂是无效的。此外，已知亚甲基蓝容易发生光漂白，这在某些应用中是一个严重的不利之处。因为亚甲基蓝这些公认的限制，抗肿瘤PDT和抗微生物PDT将从新的、以吩噻嗪为基础的光敏剂的研发中受益。
PCT申请PCT/GB02/02278描述了某些吩噻嗪化合物，它们是生物活性的且表明在一系列N，N，N，N-四正-C1-6烷基衍生物中，四正-丁基衍生物是最有效的，随着链中碳原子数增加，活性迅速降低。
令人吃惊地是，已经发现其它吩噻嗪化合物衍生物是生物活性的且适于用作药剂，特别是用作预防微生物感染和治疗微生物感染的药剂。
因此，本发明提供一种用作预防微生物感染的抗微生物剂的式(I)的吩噻嗪化合物 其中R1、R2、R3和R4各自独立是任选取代的直链、支链或环状烃基；或R1和R2或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-或7-元环；
XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
为了预防伤口感染，应将伤口部位灭菌，在本说明书中，灭菌是指伤口部位之上、之中或周围载负的细菌显著减少，从而帮助促进有效的伤口愈合或使伤口感染发生的机会达到最小。
式(I)化合物用于预防感染的用途优选通过PDT进行，其中将该化合物涂在伤口部位，接着进行光照射。常规抗微生物剂的缺点在于它们预防感染的期限较短且需要反复使用，如反复擦洗，从而维持它们的有效性。式(I)化合物的性质较之先前已知且使用的抗微生物药物而言有所提高，这是因为预防效果延长且可根据需要，通过进一步光照射而再次活化，而无需再次给予该组合物。可通过持续用适宜波长的光照射或在需要时，通过间歇使用适宜波长的光而维持伤口部位处于无菌状态下。
根据本发明又一特征，提供一种用作抗病毒剂的式(II)的吩噻嗪化合物，其中式(II)的化合物具有与式(I)化合物相同的结构，但是其中R1、R2、R3和R4各自独立是任选取代的直链、支链或环状烃基；或R1和R2或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-或7-元环；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
用于预防微生物感染并作为抗病毒剂时，由R1、R2、R3和R4代表的直链和支链烃基优选含有1-12个碳原子。在由R1、R2、R3和R4代表的烃基相同的化合物中，优选它是直链或支链的且含有4或5个碳原子。在R1＝R2且R3＝R4且R1/R2与R3/R4不同的化合物中，优选它是直链或支链的且含有1-6个碳原子，且进一步地，R1、R2、R 3和R4中的碳原子总数为8-18。
根据本发明又一特征，提供一种用作治疗微生物感染的抗微生物剂的式(III)的吩噻嗪化合物，其中式(III)的化合物具有与式(I)的化合物相同的结构，但是其中i)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个是C7-12-烷基；或
ii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是支链或环状的；或iii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2可以相同或不同且R3和R4可以相同或不同，条件是R1和R2中的至少一个与R3和R4中的至少一个不同；或iv)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2不同，或R3和R4不同；或v)R1、R2、R3和R4各自独立选自C1-12-烷基且R1和R2、或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-、或7-元环。
根据本发明又一特征，提供一种用作药剂或用作抗癌剂的式(IV)的吩噻嗪化合物，其中式(IV)的化合物具有与式(I)的化合物相同的结构，但是其中i)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个是C7-12-烷基；或ii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是支链或环状的；或iii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2可以相同或不同且R3和R4可以相同或不同，条件是R1和R2中的至少一个与R3和R4中的至少一个不同，除了其中R1和R2都是HO(CH2)2-且R3和R4都是正-丁基或正-戊基的化合物；或iv)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2不同，或R3和R4不同；或v)R1、R2、R3和R4各自独立选自C1-12-烷基且R1和R2、或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-、或7-元环，除了其中R1和R2与和它们相连的N原子共同形成4-吗啉基环且R3和R4都是正-丁基的化合物；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
根据本发明又一特征，提供一种式(V)的吩噻嗪化合物，其中式(V)的化合物具有与式(I)的化合物相同的结构，但是其中i)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个是C7-12-烷基；或ii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是支链或环状的；或iii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2可以相同或不同且R3和R4可以相同或不同，条件是R1和R2中的至少一个与R3和R4中的至少一个不同，除了其中R1和R2都是HO(CH2)2-且R3和R4都是正-丁基或正-戊基的化合物；或iv)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2不同，或R3和R4不同；或v)R1、R2、R3和R4各自独立选自C1-12-烷基且R1和R2、或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-、或7-元环，除了其中R1和R2与和它们相连的N原子共同形成4-吗啉基环且R3和R4都是正-丁基的化合物；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
通常，式(I)-(V)任何一种化合物中由R1、R2、R3和R4代表的直链和支链烃基可包括一个或多个不饱和键，例如一个或多个烯基，且可任选被选自H、F、Cl、Br、I、-OH、-OC1-6-烷基、-CN、-OCOC1-6-烷基或芳基，如苯基的基团取代。这些直链和支链烃基优选未被取代且优选为饱和烃基。
式(I)-(V)任何一种化合物中由R1、R2、R3和R4代表的环状烃基可包括3-8个碳原子，优选4-6个碳原子且更优选6个碳原子。这些环状烃基可包括一个或多个不饱和键，它们可被任选取代且可任选包括杂原子如氮。
当式(I)-(V)任何一种化合物中的R1和R2和/或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-或7-元环时，该环可包含其它杂原子且可任选被取代。杂原子优选N、O或S。当杂原子是S时，可被O取代，当杂原子是N时，可被H、-COC1-6-烷基或C1-6-烷基取代，其任选被-OH取代，优选的取代杂原子选自SO2、NH、NCH3、NC2H5、NCH2CH2OH和NCOCH3。任选的环取代基可选自-C1-6-烷基、-OH、-OC1-6-烷基、-OCOC1-6-烷基。例子包括 其中Z是CH2、CH2-C1-6-烷基、O、S、SO2、NH、NCH3、NC2H5、NCH2CH2OH、或NCOCH3。
式(I)-(V)任何一种化合物中由XP-代表的反荷阴离子可以是有机或无机的反荷阴离子且优选F-、Br-、Cl-、I-、NO3-、SCN-、ClO3-、ClO4-、IO3-、BF4-、HSO4-、H2PO4-、CH3SO4-、N3-、SO42-、HPO42-、PO43-、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、羟乙酸盐、甘油酸盐、谷氨酸盐、β-羟基谷氨酸盐、葡萄糖醛酸盐、葡萄糖酸盐、苹果酸盐和天门冬氨酸盐。优选该反荷阴离子选自含Cl-、Br-、I-、F-、NO3-、HSO4-、CH3CO2-、SO42-、HPO42-或PO43-的组或选自含Cl-、Br-、I-、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、羟乙酸盐、甘油酸盐、谷氨酸盐、β-羟基谷氨酸盐、葡萄糖醛酸盐、葡萄糖酸盐、苹果酸盐、天门冬氨酸盐的组，且更优选含Cl-、Br-、I-的组。
在式(I)-(V)化合物的优选小组中，R1、R2、R3和R4可相同或不同且由R1和R2代表的烷基侧链中的碳原子总数为14-20，优选16-36，且更优选18-30，且特别优选18-24。
在式(I)-(V)化合物的又一优选小组中，R1、R2、R3和R4可相同或不同且由R1和R2代表的烷基侧链中的碳原子总数为16-20，优选18-20。
式(I)-(V)的吩噻嗪化合物可如下合成1)R1和R2＝R3和R4的对称吩噻嗪化合物
a)首先在冰醋酸中，用溴将吩噻嗪溴化，得到3，7-二溴吩噻嗪-5-溴化物，过滤收集所形成的混悬液。
b)在氯仿中，将3，7-二溴吩噻嗪-5-溴化物加入到由R1R2NH(其中，R1和R2是如上面所限定的)代表的胺或N-杂环中。过滤收集所形成的固体并通过闪烁柱色谱法在硅胶60上纯化，其中使用氯仿、氯仿/甲醇(98/2)和氯仿/甲醇(90/10)。该产物可通过用石油醚从氯仿中沉淀而进一步纯化(b.p.60-80℃)。
2)R1和R2≠R3和R4，或R1≠R2和/或R3≠R4的不对称吩噻嗪化合物a)将吩噻嗪溶于氯仿的溶液冷却至低于5℃，并加入碘溶于氯仿的溶液。过滤收集所形成的固体，用氯仿洗涤，直到没有碘，然后保持在室温真空过夜，得到吩噻嗪-5-四碘化物的水合物。
b)将该吩噻嗪-5-四碘化物的水合物溶于甲醇的溶液加入到胺R1R2NH溶于甲醇的溶液(其中R1和R2是如上面所限定的)中。搅拌反应混合物过夜，通过蒸发减少，至冷却。过滤收集所形成的固体，用二乙醚洗涤并干燥。
c)将三乙胺溶于二氯甲烷的溶液，接着是不同的第二种胺R3R4NH(R3和R4是如上面所限定的)溶于二氯甲烷的溶液加入到来源于步骤b)的固体溶于二氯甲烷的溶液中。搅拌该反应混合物过夜，用稀盐酸和水洗涤有机层，分离并干燥(MgSO4)。蒸发掉大部分溶剂，并加入二乙醚使产物沉淀，过滤收集，用二乙醚洗涤并干燥。如果需要，产物的进一步纯化可通过闪烁柱色谱法进行。
包含式(V)化合物以及一种或多种药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂(根据特定的特性各自选择，使药物组合物的配制最佳)的组合物形成本发明的又一特征。本发明的组合物还包括含有式(I)-(V)任意两个或多个化合物的那些及含有式(I)-(V)任意两个或多个化合物以及一种或多种不同的治疗剂或活性剂的那些。该组合物包括脂质体、纳米颗粒、胶态混悬液、微胶粒、微乳、小泡和纳米球。
该组合物还可包含其它组分如常规的送递介质和赋形剂，包括溶剂如醇(例如乙醇、聚乙二醇、丙三醇或正-丁醇)、二甲基亚砜、水、盐水、加溶剂如蓖麻油衍生物，例如乙氧基化蓖麻油，像CremophorEL(商标BASF AG)或Tween(商标ICI Americas Inc.)型或SolutolHS15(Solutol是BASF AG的商标)、等渗剂如脲、甘油、氨基乙醇、丙二醇、pH调节剂、染料、胶凝剂、增稠剂、缓冲剂及其组合。
通常，该组合物是通过将式(I)的化合物与一种或多种药学可接受的载体在适宜温度，通常为15-65℃，适宜pH，通常为pH 3-9且优选在生理学可接受的pH，如pH 6.5-7.5下混合而制备。
在含式(I)-(V)任何一种或多种化合物的组合物中，组合物中的化合物浓度取决于化合物的光敏感能力且优选局部使用时为0.0005-20％，静脉内使用时为100μM-30mM。
本发明还提供干的组合物，其可在使用前重构。这些可通过将本发明的固体组分干燥混合或通过制备液体组合物，通常在温和条件下、真空或低温烘箱中将其蒸发至干而制备。
式(IV)的化合物以及它们的组合物可用作治疗各种病症，包括感染和癌症、治疗皮肤、眼、心血管、妇科和牙病；并预防感染的药剂。优选用作药剂是用作抗癌剂、抗细菌剂、抗真菌剂和抗病毒剂。这些用途可用于人或动物中。
在本发明其中一个实施方案中，式(I)-(V)的任何一种化合物均可用作PDT剂或光诊断剂。
式(I)-(V)各种化合物和它们组合物的用途的例子是作为治疗癌症和癌前病症的PDT光敏药物，包括Barrett′s食管癌、外阴上皮内瘤形成(VIN)和子宫颈上皮内瘤形成(CIN)、膀胱癌、结肠癌、非-黑瘤皮肤癌、光化性角化、黑瘤、脑-垂体癌、脑-神经胶质瘤、胰腺癌、头颈部癌、肺癌，特别是非小细胞癌、间皮瘤、食管癌、胃癌、皮肤的T-细胞淋巴瘤；治疗全身和局部感染，例如皮肤和伤口感染，如烧伤的抗微生物和抗真菌治疗，治疗溃疡，特别是腿部溃疡，尤其是已感染的腿部溃疡、指甲感染；寄生虫感染、胃部感染、疟疾、麻风；细菌和真菌孢子灭活；治疗朊病毒和病毒感染如HIV；耳、鼻和咽喉感染，结核；性传播疾病(STD′s)、疱疹；治疗念珠菌局限性感染，例如毛发、指甲和表皮，如脚癣和念珠菌阴道炎；并用作感染预防剂，如手术伤口灭菌、皮肤移植灭菌、干细胞灭菌、移植物抗宿主疾病；治疗眼科病症如黄斑变性、隐性脉络膜新血管形成(CNV)、由于病理学近视所致CNV、隐性的与年龄有关的黄斑变性(AMD)、糖尿病性斑水肿；血管问题如心血管病、动脉硬化和再狭窄；自身免疫疾病如类风湿性关节炎；皮肤疾病如牛皮癣、痤疮、白癜风和湿疹以及其它皮肤病症如多毛症和日光损害，其它病症如子宫内膜异位和月经过多；治疗牙菌病，如牙龈肿、牙龈病、齿龈炎和斑生物膜的除去、灭活或杀死。
该化合物还可通过它们的光敏性质用于光化学内在化(光敏剂促进药物的吸收和亚细胞定位的用途)和非-治疗性用途如通过它们的荧光性质进行光诊断。后一种方法利用光敏剂在肿瘤中比在周围健康组织中更浓，且在诱导荧光时(使用蓝光)，肿瘤荧光较之周围组织更强的事实。应用范围的例子包括用于口腔疾病和用于膀胱、肺和皮肤疾病的诊断。
式(I)-(V)的化合物和它们的组合物可用作兽用PDT的光敏药物，例如治疗癌症如猫的耳朵的癌症，作为抗真菌、抗细菌和抗病毒治疗，用于动物伤口的灭菌和用于动物眼睛的治疗。
式(I)-(V)任何一种化合物和它们组合物的用途优选治疗人和动物的局限性和/或早期癌症和/或癌前损害；或治疗和/或预防人和动物的伤口或皮肤感染。
式(I)-(V)的化合物特别用作病症的PDT光敏药物，所述病症的治疗需要除去、灭活或杀死多余的组织或细胞，如皮肤和其它器官的癌症、癌前疾病、眼病、血管病、自身免疫病、和增殖性病症。这些物质的特异性且不可预知的优点涉及它们在全身给药(取决于所用的特定光敏剂)后的不同时间，对靶组织的光敏能力，和因此它们直接针对，例如，脉管系统或肿瘤细胞的能力。当全身给药时，它们还具有较低的、使皮肤对环境光线过敏的倾向和较低的使皮肤着色的倾向。
通常，式(I)-(V)任何一种化合物及它们的组合物可通过全身、局部或局限给药，接着施加适宜剂量和波长或波长范围的光而用于治疗上述各种病症和疾病。
全身给药时，该化合物可，例如，静脉内、口服、皮下、肌内送递、直接送递到患病组织和器官、直接送递到肿瘤中、真皮内或经由植入物给药。
局限或局部给药时，该化合物可经由各种方式送递，例如，经由喷雾剂、洗液、混悬液、乳液、凝胶、软膏剂、油膏、条棒、肥皂、液体气溶胶、粉末气溶胶、滴剂或糊剂送递。
本发明的化合物利用光，包括适宜波长，通常为600-800nm波长的光活化，优选波长为630nm-700nm。
光源可以是任何适宜的光源，如激光、激光二极管或非-相干光源。
PDT过程中给予的光剂量可变，但优选1-200J/cm2，更优选20-100J/cm2。
光照射可在最初给药直到给药后48小时的任何时间进行且该时间可根据所治疗的病症、药物送递方法及所用式(I)-(V)的具体化合物而改变。光照射优选在最初给药后直至3小时，更优选最初给药直至1小时，特别是直至10分钟的任何时间进行。
增加光剂量的强度通常可减少照射时间。
优选光照射局限于所治疗的范围/区域，且在治疗肿瘤时，更优选局限于肿瘤本身。
在本发明其中一个实施方案中，优选在需要治疗时，将式(I)-(V)的化合物给予受治疗者且光照射是在最初给药后直到10分钟进行的。
在本发明又一优选实施方案中，在最初给药后1分钟内进行光照射。
更优选在给药时进行光照射。
本发明的化合物与其它吩噻嗪光敏剂相比具有有益之处，即在行使它们破坏细胞的活性时不会针对细胞核，这样一来，细胞经历诱变转化的危险大大降低。
微生物感染式(I)、(II)和(III)的化合物在预防和治疗微生物感染，包括细菌、真菌和病毒感染方面具有许多优点●在灭活广谱微生物，包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、MRSA和真菌感染方面十分有效。
●针对休眠/静止细菌的活性。
●对微生物的高度选择性，从而使对宿主组织的损害达到最小。
●出乎意料的低水平的光漂白。
当式(I)、(II)和(III)的化合物作为可光活化的抗微生物剂用于PDT中，从而预防或治疗微生物感染，包括细菌、真菌和病毒感染、治疗皮肤和其它局部感染、将烧伤和其它损害灭菌、治疗溃疡、在器官，包括皮肤移植过程中使受体组织和供体组织灭菌、治疗牙菌病时，通过将治疗有效量的化合物涂在所治疗的区域上并用光照射该区域，从而活化该化合物而全身、局限或局部(可利用上述任何一种方式)给药。
式(I)的化合物可用于预防任何阶段的感染，包括伤口中存在非-复制生物的伤口污染；伤口中存在复制微生物的伤口定居；和存在复制微生物从而引起对宿主损伤的伤口感染。当＞105个CFU/g组织时，更可能发展成败血症。
体外杀死细菌细胞的浓度为0.1-100μM，优选1-50μM且更优选5-20μM，特别是10μM。
在其中一个实施方案中，微生物感染的预防优选包括给予式(I)化合物的步骤，其中R1、R2、R3和R4可相同或不同且独立选自乙基、正-丙基、正-丁基、正-戊基、异-戊基、2-乙基哌啶子基、2-甲基吡咯烷基和环己基。
在其中一个实施方案中，微生物感染的治疗优选包括给予式(III)化合物的步骤，其中R1、R2、R3和R4可相同或不同且独立选自甲基、乙基、正-丙基、正-丁基、异-丁基、正-戊基、异-戊基、正-己基、环己基、MeO(CH2)2-或HO(CH2)2-，其中R1和R2或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成哌啶子基、2-乙基哌啶子基、2-甲基吡咯烷基或4-吗啉基环，除了其中R1＝R2＝R3＝R4＝甲基、乙基或正己基的化合物和其中R1＝R2＝HO(CH2)2-且R3＝R4＝正-丁基的化合物。
用于预防微生物感染或用作抗病毒剂的优选部分如下3，7-(四-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(四-异-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(四-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-乙氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-戊氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-己氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-((N-乙基-N-环己基)氨基)-7((-N-乙基)-N-环己基)氨基-吩噻嗪-5-；3，7-二(哌啶子基)-吩噻嗪-5-；3-(2-乙基哌啶子基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(2-甲基吡咯烷基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-吗啉代-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-吗啉代-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3-吗啉代-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二甲氧基乙氨基)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；和3，7-(四-苄氨基)-吩噻嗪-5-。这些化合物优选包括卤化物作为反荷阴离子，其优选Cl-、Br-或I-。
用于预防微生物感染或用作抗病毒剂的特别优选的部分如下3，7-(四-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；
3，7-(四-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-戊氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-己氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；和3-((N-乙基-N-环己基)氨基)-7((-N-乙基)-N-环己基)氨基-吩噻嗪-5-。
式(I)和(III)的化合物优选用于抗细菌，更优选该化合物用于抗抗生素耐药菌。
抗癌式(IV)的化合物用于治疗癌症具有许多优点●与亚甲基蓝和亚乙蓝相比，极强的光敏性。
●在UV/蓝光区较低的光吸收，这导致化合物使皮肤光敏感的倾向较低。
●迅速的皮肤清除。
●对肿瘤的高选择性。
●低暗毒性。
●与亚甲基蓝相比较低的DNA损害可能。
●与现有PDT药物相比，非常短的药物-光照射时间间隔。
当本发明的化合物用作哺乳动物细胞和肿瘤的PDT剂时，可使用上述组合物以各种方式给予它们，如全身、局部或局限(利用上述任何一种方式)给药且可单独使用或作为组分或含有其它组分及药物的混合物使用。
用于肿瘤治疗的、静脉内给予人的式(IV)化合物的给药比例为0.01-10μmol(微摩尔)/kg，优选0.1-2.0μmol(微摩尔)/kg。为了在70kg患者中达到2μmol(微摩尔)/kg的剂量，需要注射70ml 2mM溶液、或5ml 27mM浓度(16mg/ml)的溶液或2.8ml 50mM溶液。一般的注射体积为0.1-100ml，优选5-50ml。
在其中一个实施方案中，用于癌症治疗的方法包括给予式(IV)化合物的步骤，其中R1、R2、R3和R4独立选自乙基、正-丙基、正-丁基、异-丁基、正-戊基、异-戊基、正-己基、2-乙基哌啶子基、2-甲基吡咯烷基、环己基、苄基和HO(CH2)2，优选R1、R2、R3和R4独立选自乙基、正-丙基、正-丁基、异-丁基、正-戊基、异-戊基、正-己基、2-乙基哌啶子基、2-甲基吡咯烷基和苄基。
在用作药剂或用作抗癌剂的式(IV)的吩噻嗪化合物中，优选R1、R2、R3和R4各自独立选自乙基、正-丙基、正-丁基、异-丁基、正-戊基、异-戊基、正-己基、2-乙基哌啶子基、2-甲基吡咯烷基、环己基、苄基和HO(CH2)2，更优选其中R1、R2、R3和R4独立选自乙基、正-丙基、正-丁基、异-丁基、正-戊基、异-戊基、正-己基、2-乙基哌啶子基、2-甲基吡咯烷基和苄基。
物品/表面的灭菌/消毒根据本发明又一特征，式(V)化合物可用作光活化的抗微生物剂，包括抗细菌、抗真菌和抗病毒剂，用于表面和流体的一般灭菌，例如，它们可用于将手术植入物和移植片固定模灭菌，特别是将这些物品涂覆或浸渗，将织品如绷带和辅料、IV线和导管灭菌，将水、空气、血液或血液产品和食品及食品包装灭菌，从而防止感染转移，以及用于一般的家庭、医院和办公室清洁。可将该化合物直接涂在表面和流体上或直接与表面和流体接触，然后通过光照射活化该化合物。此外，可将所要灭菌的表面浸入到该化合物的混合物或溶液中，或将所要灭菌的流体与该化合物或含该化合物的溶液或混合物混合。
这些化合物与现有已知的抗微生物光敏剂相比的特殊优点是它们在较低的光照射水平下具有较高的光细胞毒性，且具有较低的经历光漂白的倾向。
本发明还提供一种在式(V)化合物与聚合物之间形成的共轭物或复合物。此处所用术语复合物是指本发明的化合物被包埋在聚合物中或被物理封闭在基质或底物内或吸附到基质或底物上的情况。该聚合物可以是生物聚合物如肽或蛋白。优选的聚合物包括具有酸酐和/或酯基团的那些。可与聚合物形成共轭物或复合物的优选式(V)化合物是其中R1和R2和/或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成哌嗪基的那些。
本发明还提供一种通过式(V)化合物与氯三嗪衍生物之间的反应形成的化合物。氯三嗪衍生物可以是具有与其相连的氯三嗪基团的聚合物。
式(V)的适宜化合物可直接与物品表面，特别是聚合表面连接，或经由在式(V)化合物与聚合物之间形成的共轭物或复合物连接，或经由氯三嗪衍生物连接，永久性地利用共价键连接或可逆地，利用分子间相互作用连接。如此一来，提供一种每当受到光照射即可被灭菌的表面，且特别用于，难以维持相关表面长期无菌的物品，例如，患者的静脉内线和缝合线和导管及静脉内线中。化合物耐光漂白是需要长时间色彩稳定性的这类应用的一个优点。
因此，本发明还提供一种物品，其至少有一个表面与式(V)的化合物连接。
优选该物品是医疗装置如静脉、尿或囊的导管、缝合线、整形或人造植入物、心脏瓣膜、手术用螺钉或针、起博器导线、饲管或呼吸管、血管固定模、眼内晶状体、或小关节替代物。该物品还可用于伤口护理或包装用于医疗用途的材料，例如，用于包装医疗器械的材料。
式(V)的化合物可涂在医院的墙壁、地板和天花板、临床表面如手术台、解剖室、科学实验室的清洁室、可转化成编织、针织或无纺织品如清洁布、抹布、手术衣、被单和枕套、伤口辅料和绷带上或与它们相接触。该化合物可直接涂覆或经由与聚合物连接而使用。
当把化合物涂在墙壁、地板、天花板和工作表面时，它将被用作颜料或油漆的组分，所述颜料或油漆含有该化合物、可交联或不可交联的成膜聚合物，和适宜的溶剂，任选含有干燥剂和其它着色剂。表面涂层可以采用溶液或基于水的分散液的形式。
可选择性地，该物品可用于食品和饮料工业且可以是包装产品，包装纸或贮藏纸盒或加工设备。
该物品可以是冰箱、自动售货机、制冰机、饭店设备或其它处方器具。
本发明还提供式(V)化合物用于将表面或流体灭菌的用途，包括使式(V)化合物与所述表面或流体接触或涂在其上，并利用光活化所述化合物。
可通过任何方式与式(V)化合物接触或涂覆该化合物，例如喷雾剂、液体、溶液、混悬液、泡沫、霜剂、凝胶或乳液。
根据本发明另一特征，提供式(I)-(V)化合物将流体灭菌的用途，其中使该流体与式(I)-(V)任何一种化合物或在式(I)-(V)任何一种化合物与聚合物之间形成的共轭物或复合物接触，同时用光照射该化合物或共轭物或复合物。
该流体可以是液体或气体或蒸汽。该方法可，例如，用于液体的灭菌，例如，医疗用水、或液体，如非肠道用液体，例如盐水或葡萄糖的灭菌，特别是用于生物液体，如血液、血液产品、红细胞、骨髓细胞和干细胞的灭菌。该方法还可用于气体，如空气，特别是用于空调系统的空气，和医疗用氧气的灭菌。该方法特别用于将不能很容易通过过滤方法灭菌的材料灭菌。
该方法优选用于医疗用水或液体，如非肠道液体，如盐水或葡萄糖的灭菌和生物液体，如骨髓细胞和干细胞的灭菌。
式(I)-(V)的任何一种化合物和它们的共轭物或复合物可以，优选使其表面面积达到最大，如精细分散的形式或珠子或板的形式使用，或将它用在可提供较大表面面积的任何支持材料上或与其缔合，如玻璃、玻璃棉、陶瓷、塑料、金属和金属氧化物。该支持材料对光是透明的或可使光穿过它。当使用支持材料时，使其排列成被共轭物或复合物覆盖的表面面积达到最大且可以是珠子、板、表面面积较大的柱或管、泡沫或纤维的形式。
优选以上述波长和光剂量连续照射式(I)-(V)的任何一种化合物或它们的共轭物或复合物。
式(I)-(V)的优选化合物是在该灭菌方法中优选的那些。
在本发明该方法的特定实施方案中，将式(I)-(V)的任何一种化合物或它们的共轭物或复合物单独装在柱子上或与支持材料一起装在柱子上，制成柱子的材料通常对光是透明的，如二氧化硅玻璃或合成纤维。需要灭菌的流体通过柱子的一端，连续照射整个柱子，灭菌的物质从柱子的另一端流出。
本发明的某些新的部分包括3，7-(N，N-四-异-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(N，N-四-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-乙氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-戊氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-己氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-辛氨基)-吩噻嗪-5-；3-((N-乙基-N-环己基)氨基)-7((-N-乙基)-N-环己基)氨基-吩噻嗪-5-；3，7二-(哌啶子基)-吩噻嗪-5-；3-(2-乙基哌啶子基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(2-甲基吡咯烷基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(吗啉代)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(吗啉代)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3-(吗啉代)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二甲氧基乙氨基)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；和3，7-(N，N-四-苄氨基)-吩噻嗪-5-。
这些化合物优选包括卤化物作为反荷阴离子，其优选Cl-、Br-或I-。
本发明的新的部分显示出与PCT/GB02/02778所述化合物相比的意外优点。
例如3，7-(N，N-四-异-丁氨基)-吩噻嗪-5-，与正-丁基类似物相比，当用作抗癌剂时，令人吃惊地引起最小的组织损害且是Ames阴性的；3，7-(N，N-四-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-，与正-戊基类似物相比，在药物-光照射间隔较短的情况下，令人吃惊地有效；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-，与四甲基和四正-丙基衍生物相比，抗菌活性提高；3-(N，N-二-乙氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-，与四乙基和四正-丙基衍生物相比，抗菌活性提高；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-，与四正-丙基衍生物相比，具有更好的抗菌活性和更好的Ames性能且当预期可能会稍差时，令人吃惊地与四正-丁基衍生物的抗菌活性和Ames性能相等；3-(N，N-二-正-戊氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-，与四正-丙基衍生物相比，具有更好的抗菌活性和更好的Ames性能且当预期可能会稍差时，令人吃惊地与四正-戊基衍生物的抗菌活性和Ames性能相等；3-(N，N-二-正-己氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-，与四正-己基和四正-丙基衍生物相比，具有更好的抗菌活性，且作为抗癌剂，具有较之四正-己基衍生物更好的性能，且在四正-丙基衍生物的一半给药比例下，作为抗癌剂，具有相等的性能；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-戊氨基)-吩噻嗪-5-，较之四正-戊基衍生物具有更好的抗白色念珠菌的活性，且当预期稍差时，具有与四正-丁基几乎相等的活性；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-，较之四正-丁基和四正-戊基衍生物具有更好的抗白色念珠菌的活性；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-辛氨基)-吩噻嗪-5-，较之四甲基衍生物具有更好的抗肿瘤活性，当用作抗癌剂时，引起最小的正常组织损害；3-((N-乙基-N-环己基)氨基)-7-((-N-乙基)-N-环己基)氨基-吩噻嗪-5-，较之四乙基衍生物具有更好的抗肿瘤活性，且与四乙基和四正-己基衍生物相比，具有更好的抗菌活性；3-(2-乙基哌啶子基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-，与四正-戊基衍生物相比，在较短的药物-光照射间隔下有效；3-(2-甲基吡咯烷基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-，与四正-戊基衍生物相比，在较短的药物-光照射间隔下有效；和3，7-(N，N-四-苄氨基)-吩噻嗪-5-，较之四甲基衍生物具有更好的抗肿瘤活性。
实施例1)式(I)的对称吩噻嗪溴化物的一般合成，其中R1＝R2＝R3＝R4，或R1和R2，和/或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成N-杂环；P＝1、XP-＝Br-。
a)3，7-二溴化吩噻嗪-5-溴化物的制备向吩噻嗪(2.00g，0.01mol)(注释1)溶于没有氧的冰醋酸(150cm3)的溶液中逐渐并用力搅拌加入溴溶于没有氧的冰醋酸的溶液(100cm3，10％v/v Br2)。反应混合物变黑形成黑色固体。继续搅拌1分钟，然后当混悬液呈现红色时加水(400cm3)。真空过滤该反应混合物，产生黑色固体和棕色滤液。用醚洗涤该固体并真空(40℃，50mmHg)干燥1小时，得到砖红色产物。固体质量＝3.63g，产率＝83％。
b)对称吩噻嗪溴化物的制备在氮气和用力搅拌条件下，向适宜的胺R1R2NH或N-杂环(32.4mmol)溶于氯仿(200cm3)的溶液中逐渐加入3，7-二溴吩噻嗪-5-溴化物(2.0g，4.6mmol)。该反应混合物变成蓝色，并在氮气下搅拌3小时。用HBr(2％aq.，2×50cm3)和水(2×50cm3)连续洗涤该氯仿溶液，然后在MgSO4上干燥。过滤后，通过旋转蒸发除去大部分溶剂，加入过量二乙醚并静置反应混合物。一段时间后，沉淀出大量无色固体。过滤除去该物质。将滤液蒸发至干并通过闪烁柱色谱在硅胶60上纯化剩余的粗产物，其中顺序使用流动相氯仿、氯仿/甲醇(98/2)和最后的氯仿/甲醇(90/10)。
混合相关的蓝色色谱部分并通过旋转蒸发除去溶剂。将深蓝色产物溶于最小体积的二氯甲烷(10cm3)中并通过加入过量石油醚(b.p.60-80℃)而沉淀结晶形式的终产物。过滤收集固体，用醚洗涤并风干。
各产物的纯度通过薄层色谱法加以证实(显示单一的可检测的蓝色斑点)，且结构通过电雾化分光术和UV/可见吸收光谱加以证实。
2)式(I)的不对称吩噻嗪碘化物的一般合成，其中R1R2N≠R3R4N或R1和R2，和/或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成N-杂环，P＝1，XP-＝I-。
a)吩噻嗪-5-四碘化物水合物的制备在1.5小时内，向吩噻嗪(10mmole)溶于在冰浴中冷却至低于5℃的氯仿(100cm3)的搅拌溶液中加入碘(33mmol)溶于氯仿(400cm3)的溶液。搅拌该混合物30分钟，并过滤收集所得沉淀，用氯仿洗涤，直至没有碘，然后保持在真空室温下过夜，得到该产物。
在60分钟内，向吩噻嗪-5-四碘化物水合物(1.4mmol)溶于甲醇(300cm3)的搅拌溶液中滴加适宜的胺R1R2NH(3.6mmol)溶于甲醇(50cm3)的溶液。搅拌该反应混合物过夜。然后通过蒸发减少反应混合物的体积并使热溶液冷却。过滤收集所形成的固体，用二乙醚洗涤并干燥。
c)在60分钟内，向该固体(0.34mmol)溶于二氯甲烷(100cm3)的溶液中加入三乙胺(0.40mmol)溶于二氯甲烷(5cm3)的溶液，接着加入不同的第二种胺R3R4NH(1.4mmol)溶于二氯甲烷(50cm3)的溶液。搅拌该反应混合物过夜。然后用稀盐酸(4×25cm3)、水(2×25cm3)洗涤有机层。然后将有机层干燥(MgSO4)。通过旋转蒸发除去绝大部分溶剂，并加入过量二乙醚使固体沉淀。过滤收集固体，用二乙醚洗涤并干燥。
如果需要，可通过闪烁柱色谱进一步纯化该化合物。
各产物的纯度通过薄层色谱法加以证实(单一的可检测的蓝色斑点)。结构通过电雾化分光术和UV/可见吸收光谱加以证实。
下列具体化合物是通过上述方法制备的 化合物1R1-R4＝正-C3H7四-正-丙基化合物2R1-R4＝正-C4H9四-正-丁基化合物3R1-R4＝正-C5H11四-正-戊基化合物4R1-R4＝正-C6H13四-正-己基检测亚甲基蓝(R1-R4＝正-CH3)化合物5和亚乙蓝(R1-R4＝正-C2H5)化合物1-6用于比较。化合物1-6具有碘化物反荷阴离子。
化合物7、7a、8、8a、8b和14-29是通过类似方法制备的。
化合物93-(N，N-二甲氨基)-7-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-碘化物(20％)该化合物是在分离出3-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-三碘化物后，接着用二甲胺盐酸盐处理获得的。通过加入二乙醚从二氯甲烷中沉淀出紫色光泽的结晶。质谱C20H26N3OS；要求m/z＝340；发现m/z＝340(I-没有被质谱检测出)。
化合物10 3-N-二乙氨基)-7-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-碘化物(15％)该化合物是在分离出3-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-三碘化物后，接着用二乙胺处理获得的。通过加入二乙醚从二氯甲烷中沉淀出紫色光泽的结晶。质谱C22H30N3OS；要求m/z＝368；发现m/z＝368(I-没有被质谱检测出)。
化合物11 3-(N，N-二丁氨基)-7-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-碘化物(19％)该化合物是在分离出3-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-三碘化物，接着用二丁胺处理获得的。通过加入二乙醚从二氯甲烷中沉淀出紫色光泽的结晶。质谱C26H38N3OS；要求m/z＝424；发现m/z＝424(I-没有被质谱检测出)。
化合物12 3-(N，N-二戊氨基)-7-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-碘化物(20％)该化合物是在分离出3-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-三碘化物，接着用二戊胺处理获得的。通过加入二乙醚从二氯甲烷中沉淀出紫色光泽的结晶。质谱C28H42N3OS；要求m/z＝452；发现m/z＝452(I-没有被质谱检测出)。
化合物13 3-(N，N-二己氨基)-7-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-碘化物(22％)该化合物是在分离出3-(N，N-二丙氨基)-吩噻嗪-5-三碘化物，接着用二己胺处理获得的。通过加入二乙醚从二氯甲烷中沉淀出紫色光泽的结晶。质谱C30H46N3OS；要求m/z＝480；发现m/z＝480(I-没有被质谱检测出)。
化合物28 3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二戊氨基)-吩噻嗪-5-碘化物(23％)该化合物是在分离出3-(N，N-二戊氨基)-吩噻嗪-5-三碘化物，接着用二乙醇胺处理获得的。通过加入二乙醚从二氯甲烷中沉淀出紫色光泽的结晶。质谱C26H38N3O2S；要求m/z＝456；发现m/z＝456(I-没有被质谱检测出)。
其它化合物也已合成并在表A中概述。
化合物5和6不是本发明的化合物，包括在内用于比较。
光敏剂的原液是在水和/或DMSO中配制的并在黑暗处贮藏直到需要。根据需要，试验溶液是在缓冲液或溶剂或生物介质中配制的。
吩噻嗪化合物的光谱和物理性质吩噻嗪化合物溶于甲醇中的光谱数据(表1)显示所有化合物均在650-700nm区具有吸收峰，但准确的峰位置明显不同。
表1
上表和本说明书中的Me、Et、Pr、Bu、Pent、Hex、Hept、Oct分别代表甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基和辛基，且n-和i-分别表示正-和异烷基链。
癌症治疗在RIF-1鼠纤维肉瘤细胞的培养物中评价式(I)化合物的PDT效能。将细胞与吩噻嗪培养1小时，然后用PBS洗涤3次并加入新鲜培养基。然后使用激光二极管，用18J/cm2(10mW/cm2)665nm光照射细胞。平行测量暗毒性。MTT测定法用于评价治疗24小时后的细胞活力。亚细胞定位也是在与吩噻嗪化合物培养1小时后，使用荧光显微镜，在RIF-1细胞中测量的。在用光照射之前和之后测量定位。这些化合物的样品数据在表2中表示。
表2实施例吩噻嗪的光毒性、暗毒性和在RIF-1细胞中的亚细胞定位
这些数据表明一些不对称的吩噻嗪衍生物(其中R1＝R2≠R3＝R4)作为光敏剂，在绝对活性和光-暗毒性比方面，具有较之亚甲基蓝更优的性质。此外，与亚甲基蓝不同，这些化合物被排除于细胞核之外。
体内抗-肿瘤效能在患有皮下CaNT肿瘤的CBA/gy小鼠中评价肿瘤破坏。以高达16.7μmol/kg的剂量静脉内给予光敏剂。如果观察到较高水平的发病率或死亡率或溶解度有限，则将剂量降至8.35μmol/kg。在给予光敏剂后的各个时间，使用660±15nm滤器，用源于Paterson灯的60J/cm2、50mW/cm2光表面照射该肿瘤。药物-光照射的间隔从0小时(在实践中，1-2分钟)直到96h。光照射后72小时，从与入射光平行的肿瘤中心切下横截面的切片，捕获它的像并使用像分析软件测量肉眼可见的坏死区域。坏死以总的肿瘤切片面积％表示，对照肿瘤中的肿瘤坏死％通常＜10％。抗肿瘤活性分为无0-10％肿瘤坏死，低11-39％肿瘤坏死，中40-69％肿瘤坏死，高70-100％肿瘤坏死。
各化合物在最佳剂量和药物-光照射间隔下的抗肿瘤活性在表4中表示。
由于小鼠中的皮下肿瘤与内部器官如肾和肝非常接近，因此常常在该模型中，在PDT后观察到这些器官的损害。PDT后，对内部器官的损害的评价在表3中表示。
表3对内部器官的损害的评价系统
下列化合物显示出相对较高的抗肿瘤活性，且没有正常组织损害(平均得分＝0)四己基，二戊基二乙醇胺。下列化合物显示出相对较高的抗肿瘤活性，且具有最小的正常组织损害(平均得分＜1)四异丁基，二己基二丙基，双甲基辛基。
表4除了化合物1、4、5、6外，它们是以1.3J/cm2的剂量照射的，在最佳剂量和药物-光照射间隔下，iv给药后，PDT诱导的CBA/gy小鼠的肿瘤坏死，和以3.2J/cm2的剂量，使用665nm激光照射，并使用10μM光敏剂时，大肠杆菌和白色念珠菌对数期的光灭活
Ames试验结果P＝阳性，N＝阴性，WP＝弱阳性和n.d＝
本化合物较之目前得到的化合物如卟吩姆钠(商标Axcan PharmaPDT Inc)和Foscan(商标，Bioscience Technology InvestmentHoldings Limited)具有许多优点。例如，本发明的化合物是通过相对简单的方法生产的单一异构体游离化合物，而卟吩姆钠是卟啉衍生物的复杂混合物。无论是方便患者方面，还是住院治疗时间及相关费用方面，都希望具有较短的给药-光照射间隔。
卟吩姆钠需要较长的给药-光照射间隔，通常为48小时，因为在较短的药物-光照射间隔下，对肿瘤周围的正常组织造成不可接受的损害。本发明的化合物在较短的药物-光照射间隔下是活性的，且对肿瘤周围的正常组织没有任何损害。例如，二丁基二丙基衍生物在给药后，立即照射时，引起98％肿瘤坏死。
对覆盖在肿瘤上面的皮肤损害的比较(通过痂的形成评价)显示使用本发明所有化合物时，在任何药物-光照射间隔下均没有观察到痂形成，而卟吩姆钠在较短的药物-光照射间隔(0-3小时)下，导致25％痂形成，在48小时的较长药物-光照射间隔下，没有痂形成，但肿瘤坏死仅为50％。
就另一得到的化合物Foscan而言，有4天的延迟，从而在注入到血流中和用激光活化之间，有时间在癌细胞中累积。Foscan的给药导致患者对光十分敏感，敏感周期约为15天。
光-抗微生物活性1)一般方法进行微生物细菌光活化实验的方法a)光敏剂的标准制备在二甲基亚砜(DMSO)中配制5mM的光敏剂原液。在DMSO中进一步稀释该5mM原液至1mM工作浓度。将所有光敏剂在覆盖箔叶的小瓶中室温贮存，直到需要。
b)微生物的标准制备根据情况对下列标准方案进行改变，从而研究各实验参数的变化。琼脂平板的单一细菌菌落用于在1升锥形瓶中无菌接种100ml营养培养基(0.5％酵母提取物1.0％胰蛋白胨w/v)。就白色念珠菌(C.albicans)而言，单一的真菌菌落用于在1升锥形瓶中接种100ml萨布罗氏葡萄糖培养基。将该培养物在振荡培养箱中37℃培养过夜。将培养箱设置为250次振荡/分钟，旋转运为2.5cm的圆。该培养物用于静止期实验。
就细菌的对数期实验而言，过夜培养物用于接种200ml营养培养基(在2升倾斜烧瓶中)，就白色念珠菌而言，接种200ml萨布罗氏葡萄糖培养基，两者在600nm下的光密度均为0.1。该微生物生长至中-对数期，然后采集并再次混悬。
c)用于PDT的微生物的制备离心采集对数期或静止期的细胞并在0.1M磷酸钾缓冲液(pH 7.0)中洗涤两次。洗涤后，将细胞在相同缓冲液中再次混悬至在650nm下的吸光度为0.87。就大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、MRSA和绿脓杆菌而言，该吸光度与3.5×108个CFU/ml或8.5log10CFU/ml等价。就白色念珠菌而言，与1.0×107个CFU/ml或7.0log10CFU/ml相关联。将培养基中的大肠杆菌光灭活时，在该阶段将细菌在营养培养基中再次混悬。
微生物细胞光灭活实验与光敏剂标准培养将25ml制备的细胞混悬液与0.25ml 1mM光敏剂原液在250ml无菌的、覆盖箔叶的锥形瓶中培养(终浓度10μM)。在37℃振荡培养箱中、黑暗条件下，以250rpm培养该混悬液30分钟。
源于白光源的照射与10μM吩噻嗪化合物培养后，用500W卤素灯，以75cm的距离，照射该混悬液60分钟，灯的功率为1.3mW/cm2，在1小时的照射后产生4.68J/cm2。
源于665nm激光的照射与10μM吩噻嗪化合物培养后，将10ml细菌培养物无菌转移到无菌细胞中。其包括具有插入光纤的密封毛细管的密封小瓶。
照射是用Ceram Optec激光二极管(665nm)进行的，其使用具有3cm漫射尖端的光纤，在100mW下照射。在大肠杆菌中比较吩噻嗪化合物系列的实验时，照射样品4分钟。
其与5.3mW/cm2的积分通量率等价，假定照射的柱面积为18.86cm2。照射4分钟后，总积分通量为1.3J/cm2。其它实验使用10分钟照射，且在照射0、1、2、4、8分钟后，除去50μl凝胶样品进行CFU分析。这些照射时间分别与下列积分通量等价0J/cm2；；0.32J/cm2；0.64J/cm2；1.3J/cm2；2.5J/cm2或3.2J/cm2。氧电极迹线显示氧在照射期间没有受到限制。比较四-正-戊基-3，7-二氨基吩噻嗪-5-化合物对不同细菌的作用的实验时，照射使用了激光装置，但10分钟产生3.2J/cm2的光剂量。该光剂量也用于比较化合物17-29的实验。结果在上面表5和下面表6中显示。
细菌和酵母的存活分析除去50分钟照射过和没有照射过的混悬液样品并在0.1M pH7.0磷酸钾缓冲液中稀释。然后，就细菌而言将50μl稀释的混悬液平板接种在营养琼脂(0.5％酵母提取物，1.0％胰蛋白胨，2.0％琼脂w/v)上，或就白色念珠菌而言，平板接种在萨步罗氏葡萄糖琼脂上。37℃培养该平板过夜，得到许多形成30-300个单位的菌落。然后测量细胞灭活。
对照研究，包括在30分钟的培养步骤之前和之后，用没有吩噻嗪化合物的0.25ml DMSO将细菌划线，显示CFU/ml没有变化。用没有吩噻嗪化合物的0.25ml DMSO单独照射该细菌培养物也证实了CFU没有变化。进行营养培养基的照射时，对照试验显示在0.2小时的照射期间，CFU/ml呈log10增加。
吩噻嗪化合物对细菌细胞生长的作用的研究用10ml完全生长的细菌培养物(大肠杆菌)无菌接种覆盖了箔叶的250ml锥形瓶中的200ml营养培养基(0.5％酵母提取物，1.0％胰蛋白胨w/v)。此外，该培养基含有1.0ml终浓度为10μM的1mM吩噻嗪化合物原液，对照组不含吩噻嗪化合物，但含有1.0ml DMSO。在37℃下，在250rpm振荡培养箱中，黑暗条件下培养该混悬液。每隔一小时采集1ml样品，并测量由光散射引起的、基于550nm处表观光密度的浊度。对照研究显示该波长在光敏剂吸收区之外。记录光密度之后，将1.0ml样品在MSE Micro-Centaur离心机(10 000g×5分钟)中旋转，并用分光光度分析法记录上清液的吸光度光谱。
仅就四-正-丁基衍生物而言，进行类似的实验，其中使细菌在没有光敏剂的条件下生长3小时，之后加入吩噻嗪化合物。在光照射和黑暗条件下，以时间为函数监测随后的生长。
光敏剂在大肠杆菌中的摄入将细菌与光敏剂培养后，使用Benchtop Centaur 5离心机(1500g×10分钟)沉淀2ml没有进行光照射的细菌培养物。用0.1M磷酸钾缓冲液(pH 7.0)洗涤该细菌颗粒状物2次，除去细胞外和松散结合的光敏剂。
最后，将该颗粒状物再次混悬并在1ml 0.1M NaOH 2％(w/v)中涡旋，在黑暗中、室温下保持至少24小时。使用Kontron SFM-25分光荧光计采集荧光读数。根据标准曲线的内推法测定细胞样品中的吩噻嗪化合物浓度。
光漂白将0.25ml 1mM光敏剂溶液、0.25ml 10mM色氨酸加入到25ml 60％甲醇、40％磷酸钾缓冲液(pH 7.0)中。也在没有色氨酸存在的条件下进行实验，其中其被0.25ml 60％甲醇、40％磷酸钾缓冲液(pH7.0)替代。
按照上面细胞灭活实验所述，照射(1.3mW/cm2)该混合物60分钟，每隔15分钟采集样品并在500nm-700nm之间的UV-可见分光光度计上记录光谱。光剂量较高时，照射为9mW/cm2，60分钟。
结果吩噻嗪衍生物的抗细菌性质很多抗生素仅对非-生长或静止的细菌不太有效且对于评价吩噻嗪化合物灭活静止期细菌的能力较为重要。在静止期内，细胞具有较厚的肽聚糖细胞壁且在蛋白代谢方面存在差异，因此对光动力作用不太敏感。
细菌的灭活在治疗环境中可能更复杂，这是因为光敏剂可优先结合胞外蛋白，而不是细菌脂多糖膜。这是通过将细菌混悬于含多种因子的营养培养基中而试验的，其可与细菌细胞竞争光敏剂的结合。
激光源的潜在优点是增加光剂量的准确度且缩短照射时间。
很明显，光敏剂在细菌细胞中的摄入对于测定光-活性很重要。
金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性生物，其不同于革兰氏阴性生物在于它具有较厚的肽聚糖外层且没有外部脂多糖。该细菌结构与MRSA(甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌)相同，其对几乎所有通常使用的抗生素耐药。数据表明照射仅1分钟后，几乎99％细菌均被灭活，且在10分钟后，几乎5log细胞被杀死，从而举例说明了四-正-丁基衍生物抗革兰氏阳性生物的非常高的光活性。
测定光敏剂对抗生素耐药性形式，MRSA是否也是活性的十分重要，这是因为具有重要的健康和工业应用。
吩噻嗪衍生物的抗-真菌性质为了试验在光照射条件下，式(I)化合物杀死真菌细胞的能力，将光敏剂与白色念珠菌细胞培养，并如上所述用激光照射该培养物。因此，该光敏剂抗导致许多普遍感染，例如鹅口疮的真菌生物的光活性也是很高的。
细菌细胞对哺乳动物组织的选择性对宿主组织的损害最小，而微生物被破坏对于治疗性目的而言十分重要。这是通过将式(I)化合物的溶液涂在实验小鼠的耳朵上并照射而试验的，条件为总剂量几乎为消灭细菌或真菌所需的20倍。对宿主组织的可能的作用通过测量耳朵厚度的任何增加而评价。这是用于检测皮肤光动力反应的标准模型。
与PHP，一种与卟吩姆钠等价的已知引起延迟皮肤反应的药物的静脉内给药结果进行比较。源于PHP的反应非常强，正如所预期的，源于式(I)化合物的反应很小或没有反应，表明在抗微生物治疗期间，哺乳动物组织没有受到损害。
光漂白光漂白可除去光敏剂的可检测到的颜色，致使它灭活，这是由于它对光和还原或氧化不稳定。这种光漂白可具有优点或缺点，这取决于可能的应用。例如，在线和导管的涂覆中，不希望光漂白。进行了两组实验一组的光剂量较高(9.0mW/cm2)，一组的光剂量较低(1.3mW/cm2)，如上所述，有和没有色氨酸。较低光剂量的吸收光谱，有和没有色氨酸，显示任何吩噻嗪化合物都没有变化，表明它们在该剂量下稳定。在较高光剂量下，相对于亚甲基蓝观察到光谱变化，表示存在光漂白。最大吸光度降低且波长峰在1小时照射时间内迁移。有和没有色氨酸时，这些变化的程度相同。然后，其它吩噻嗪化合物均没有显示出这种降解且在较高光剂量下保持对光漂白稳定。
四-正-戊基-3，7-二氨基吩噻嗪-5-的抗细菌性质在下面表6中概述
表6与10μM光敏剂培养并用665nm激光灯，以3.2J/cm2的积分通量率照射后，细菌和酵母在对数期和静止生长期的光灭活。
上表中的数据表明与10μM光敏剂培养并用665nm激光，以3.2J/cm2的积分通量率照射10分钟后，细菌或酵母的CFU/ml对数降低。
细菌对吩噻嗪介导的PDT的敏感性可取决于该细菌是革兰氏-阳性还是革兰氏阴性。革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌，MRSA)具有约25nm厚的高度交联的肽聚糖细胞壁。革兰氏阴性菌(大肠杆菌，绿脓杆菌)具有更薄的5nm细胞壁和独特的脂多糖外膜。外膜的存在增加了革兰氏阴性菌对许多抗细菌剂的耐药性。
照射之后，四-正-戊基-3，7-二氨基吩噻嗪-5-化合物导致革兰氏阴性菌(大肠杆菌，绿脓杆菌)和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌，MRSA)对数期的CFU/ml减少＞3个对数。
许多抗生素均对处于静止生长期的细菌具有较低的活性。
处于两个生长期的细菌的生理学和形态学有所不同。
静止期的细胞活性较低且对环境应力的耐药性更高，因此，可能对吩噻嗪介导的PDT耐药。上表表示与对数期细胞相比，四-正-戊基-3，7-二氨基吩噻嗪-5-化合物对静止期细胞的有效性仅稍稍降低。
MRSA，一种金黄色酿脓葡萄球菌的抗生物耐药株，是医源感染的主要原因。MRSA和金黄色酿脓葡萄球菌对四-正-戊基-3，7-二氨基吩噻嗪-5-化合物介导的抗微生物PDT同样敏感。使用四-正-戊基-3，7-二氨基吩噻嗪-5-化合物抗对数期的MRSA具有3.80log10CFU/ml的对数减少。
Ames试验在检测GC和AT位点的碱基对置换诱变剂的S.Typhimurium混合株(TA7001、TA7002、TA7003、TA7004、TA7005和TA7006)和检测码组移动诱变剂的TA98株(Gee等人，Proc Natl Acad Sci，91，11606-11610，1994)中进行Ames试验(使用Discovery PartnersInternational的试剂盒)。在含足量组氨酸的培养基中，使用6种浓度的试验剂、溶剂对照和阳性对照(一式三份)，在37℃，250rpm下，培养107种细菌90分钟，共2次细胞分裂。
同时在光照射和黑暗条件下，有和没有使用S9大鼠肝脏提取物(4.5％)代谢活化的条件下进行培养。光源为一组7个Sylvania Grolux30W灯管。使用具有中毒浓度的最高浓度(即，在预筛选中引起细胞数可见减少的浓度)或最大溶解浓度的2-倍稀释的试验剂。在没有S9的情况下，阳性对照是4-硝基喹啉-N-氧化物(500ng/ml)和2-硝基芴(2μg/ml)的混合物。在有S9的情况下，阳性对照是2-氨基蒽(10μg/ml)。培养90分钟后，用没有组氨酸的pH指示剂培养基稀释细菌并转移到384孔平板中，得到一式三份每种浓度48个孔。37℃培养该平板48小时，然后计算阳性孔(其中his+回复突变体降低pH的孔，颜色从紫色变为黄色)。结果以阳性孔/48(平均值±SD)表示。阳性响应被定义为与阴性对照相比，阳性孔数的浓度相关性增加和在一个或多个试验剂浓度下阳性孔数的显著增加，使用不成对的双尾t-试验评价统计学显著性。响应程度通过在最佳试验剂浓度下，计算背景突变率增加的倍数而评价(增加倍数＜10被归为弱阳性响应)。
在混合株中，试验的所有化合物在全部4种条件(±光，±S9)下都是阴性的。在TA98株中，试验的所有化合物在没有S9(光)的情况下都是阴性的。在有S9的情况下，一些化合物在TA98株中表现出阳性响应，表明它们被代谢活化成移框诱变剂(嵌入剂)。TA98株(+S9，-光)的结果在上面表5中表示。
适于包含在聚合物中或与聚合物表面连接或吸附在聚合物表面上的式(I)化合物(a)包含在聚合物内实施例这可通过将0.01g式(V)化合物，如3，7-(N，N-四-异-丁氨基)-吩噻嗪-5-加入到三乙酸纤维素(0.5g)溶于二氯甲烷(10cm3)的澄明溶液中并搅拌至化合物完全溶解而举例说明。将该溶液置于玻璃板上并慢慢干燥，得到澄明的膜。该膜在用光照射后，显示典型的单态氧产生性质，例如，在用40w钨灯丝灯照射后，四苯基环戊二烯酮(一种特有的单态氧检测剂)溶于含膜甲苯的充气红色溶液被迅速漂白。当在没有膜存在的条件下照射相同时间时，相同的溶液没有漂白。
(b)吸附在聚合物上这可通过按照下列反应流程制备的式(Ia)的吩噻嗪化合物举例说明
其中R基团＝正-戊基。
该化合物碱性非常强，可很容易在稀酸中质子化，得到下面的(IIa)，其可被强吸附在聚合表面，例如聚酰胺、聚丙烯酸酯、聚酯、聚碳酸酯、聚氨酯上，并很难被水或溶剂除去。可选择性地，Ia可直接吸附到酸性表面上，直接产生它们相应的阳离子盐。
IIa；R＝正-戊基参考文献Wainwright M，Phoenix DA，Laycock SL，Wareing DRA，WrightPA.(1998).吩噻嗪染料对金黄色葡萄球菌的甲氧西林耐药株的光杀菌活性.FEMS Microbiology Letters 160，177-181Wagner SJ，Skripchenko A，Robinette D，Foley JW，CincottaL(1998).影响一系列吩噻嗪染料对病毒光灭活的因素.Photochemistry and Photobiology 67，343-349.
权利要求
1.一种用作预防微生物感染的抗微生物剂的式(I)的吩噻嗪化合物 其中R1、R2、R3和R4各自独立是任选取代的直链、支链或环状烃基；或R1和R2或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-或7-元环；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
2.一种用作抗病毒剂的式(II)的吩噻嗪化合物，其中式(II)的化合物具有与权利要求1中式(I)化合物相同的结构，但是其中R1、R2、R3和R4各自独立是任选取代的直链、支链或环状烃基；或R1和R2或R3和R4与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-或7-元环；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
3.一种用作治疗微生物感染的抗微生物剂的式(III)的吩噻嗪化合物，其中式(III)的化合物具有与权利要求1中式(I)的化合物相同的结构，但是其中i)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个是C7-12-烷基；或ii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是支链或环状的；或iii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2可以相同或不同且R3和R4可以相同或不同，条件是R1和R2中的至少一个与R3和R4中的至少一个不同；或iv)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2不同，或R3和R4不同；或v)R1、R2、R3和R4各自独立选自C1-12-烷基且R1和R2、或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-、或7-元环。
4.一种用作药剂或用作抗癌剂的式(IV)的吩噻嗪化合物，其中式(IV)的化合物具有与权利要求1中式(I)的化合物相同的结构，但是其中i)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个是C7-12-烷基；或ii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是支链或环状的；或iii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2可以相同或不同且R3和R4可以相同或不同，条件是R1和R2中的至少一个与R3和R4中的至少一个不同，除了其中R1和R2都是HO(CH2)2-且R3和R4都是正-丁基或正-戊基的化合物；或iv)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2不同，或R3和R4不同；或v)R1、R2、R3和R4各自独立选自C1-12-烷基且R1和R2、或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-、或7-元环，除了其中R1和R2与和它们相连的N原子共同形成4-吗啉基环且R3和R4都是正-丁基的化合物；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
5.一种式(V)的吩噻嗪化合物，其中式(V)的化合物具有与权利要求1中式(I)的化合物相同的结构，但是其中i)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，条件是R1、R2、R3和R4中的至少一个是C7-12-烷基；或ii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是支链或环状的；或iii)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2可以相同或不同且R3和R4可以相同或不同，条件是R1和R2中的至少一个与R3和R4中的至少一个不同，除了其中R1和R2都是HO(CH2)2-且R3和R4都是正-丁基或正-戊基的化合物；或iv)R1、R2、R3和R4各自独立选自直链、支链或环状C1-12-烷基，其中R1和R2不同，或R3和R4不同；或v)R1、R2、R3和R4各自独立选自C1-12-烷基且R1和R2、或R3和R4中的至少一个与和它们相连的N原子共同形成任选取代的5-、6-、或7-元环，除了其中R1和R2与和它们相连的N原子共同形成4-吗啉基环且R3和R4都是正-丁基的化合物；XP-是反荷阴离子；且P为1、2或3。
6.一种包含式(V)的化合物以及一种或多种药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂的组合物。
7.式(IV)的化合物作为药剂的用途，其中式(IV)化合物是如权利要求4所限定的。
8.式(I)-(V)的任何一种化合物作为PDT剂或光诊断剂的用途，其中式(I)-(V)的化合物是如权利要求1-5所限定的。
9.式(I)-(V)的任何一种化合物作为兽用PDT光敏药物的用途，其中式(I)-(V)的化合物是如权利要求1-5所限定的。
10.式(I)-(V)的任何一种化合物作为病症PDT光敏药物的用途，其中的治疗需要除去、灭活或杀死多余的组织或细胞。
11.下列化合物用于微生物感染的预防或用作抗病毒剂的用途3，7-(四-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(四-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(四-异-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(四-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-乙氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-戊氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-己氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-((N-乙基-N-环己基)氨基)-7((-N-乙基)-N-环己基)氨基-吩噻嗪-5-；3，7-二(哌啶子基)-吩噻嗪-5-；3-(2-乙基哌啶子基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(2-甲基吡咯烷基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-吗啉代-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-吗啉代-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3-吗啉代-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二甲氧基乙氨基)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；和3，7-(四-苄氨基)-吩噻嗪-5-。
12.式(V)的化合物作为用于表面和流体一般灭菌的光活化抗微生物剂，包括抗细菌、抗真菌和抗病毒剂的用途，其中式(V)的化合物是如权利要求5所限定的。
13.一种在式(V)的化合物与聚合物之间形成的共轭物或复合物，其中式(V)的化合物是如权利要求5所限定的。
14.一种通过式(V)的化合物与氯三嗪衍生物之间的反应形成的化合物，其中式(V)的化合物是如权利要求5所限定的。
15.式(V)的化合物用于将表面或流体灭菌的用途，包括使式(V)的化合物与所述表面或流体接触或将其涂在上面并利用光活化所述化合物，其中式(V)的化合物是如权利要求5所限定的。
16.式(I)-(V)任何一种化合物用于将流体灭菌的用途，其中使该流体与式(I)-(V)任何一种化合物接触或与在式(I)-(V)任何一种化合物与聚合物之间形成的共轭物或复合物接触，同时光照射该化合物或共轭物或复合物，其中式(I)-(V)的化合物是如权利要求1-5所限定的。
17.下列部分3，7-(N，N-四-异-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3，7-(N，N-四-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-乙氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-戊氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-己氨基)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-正-丁氨基)-7-(N，N-二-异-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二-甲氨基)-7-(N，N-二-正-辛氨基)-吩噻嗪-5-；3-((N-乙基-N-环己基)氨基)-7((-N-乙基)-N-环己基)氨基-吩噻嗪-5-；3，7-二-(哌啶子基)-吩噻嗪-5-；3-(2-乙基哌啶子基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(2-甲基吡咯烷基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(吗啉代)-7-(N，N-二-正-丙氨基)-吩噻嗪-5-；3-(吗啉代)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3-(吗啉代)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二乙醇氨基)-7-(N，N-二-正-戊氨基)-吩噻嗪-5-；3-(N，N-二甲氧基乙氨基)-7-(N，N-二-正-丁氨基)-吩噻嗪-5-；和3，7-(N，N-四-苄氨基)-吩噻嗪-5-。
全文摘要
一种用作预防微生物感染的抗微生物剂的式(I)的吩噻嗪鎓化合物，其中R1、R2、R3和R4各自独立是任选取代的直链、支链或环状烃基；或R1和R2或R3和R4与和它们相连的N－原子共同形成任选取代的5－、6－或7－元环；X
文档编号A61K31/5415GK1886388SQ200480034666
公开日2006年12月27日 申请日期2004年11月22日 优先权日2003年11月28日
发明者S·B·布朗, C·C·奥格拉迪, J·格里菲斯, K·J·梅里什, R·G·滕斯托尔, D·J·H·罗伯茨, D·I·维农 申请人:弗托法米卡有限公司