专利名称：吲唑甲酰胺衍生物在制备用于治疗和预防疟疾的药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明的目的是1H-吲唑-3-甲酰胺衍生物及其在药学上可接受的盐在制备用于治疗和预防疟疾的药物中的用途。
疟疾是一种由按蚊类蚊子传播的寄生虫疾病。这种疾病构成一种重大的公共健康问题，每年有3-5亿人感染这种疾病，有270万人死亡，其中大部分为儿童。尽管在世界上许多地区已根除疟疾，但它仍在经常肆虐非洲、东南亚和南美洲，特别是由于该寄生虫对用作抗虐疾药物的某些分子的耐药性，尤其对长久以来使用最多的氯喹的耐药性。
传播给人的疟疾是多种疟原虫所为，其中恶性疟原虫会引起病人致命型的疟疾。
因此，显然需要找到适合抗虐疾的新分子，特别是抗恶性疟原虫的新分子。
在国际申请PCT/FR03/02862中描述了1H-吲唑-3-甲酰胺衍生物。这份申请披露了这些衍生物对某些与细胞周期蛋白相关的激酶(cdks)的抑制性质，例如cdk1、cdk2和cdk4，以及这些衍生物在治疗癌、自免疫疾病和/或炎性疾病、心血管疾病、神经变性疾病、病毒和真菌感染、肌肉骨骼系统变性疾病、血液学疾病、肾病和因毒素或酒精所引起的肝病中的用途。
本申请人现在发现了这些1H-吲唑-3-甲酰胺衍生物能抑制恶性疟原虫生长，因此在治疗和预防疟疾方面是有用的。
本发明的目的是符合下式(I)的化合物在制备用于治疗和预防虐疾的药物中的用途
式中R1代表氢或卤素原子或-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-NO2、-CN、-CH2NH2或-CH2NHR2基团；或R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6烷氧基、-OH、-NH2、-NHR2和-NR2R3基团的取代基取代的苯基；或R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和杂芳族基团、C1-6烷基、-OH、-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-COOR2、-CONH2、-CONHR2和-CH2XR2基团的取代基取代的杂芳族基团，其中X选自O、NH和S；Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的杂芳族基团；R2和R3，彼此相同或不同，代表任选地被-CONH2基团、被苯基或被杂芳族基团取代的C1-6烷基；或R2和R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团；以及n等于0、1、2或3。
式(I)化合物可以含有一个或多个非对称的碳原子。因此，它们能以对映异构体或非对映异构体形态存在。这些对映异构体、非对映异构体以及它们的混合物，其中包括外消旋混合物都是本发明的一部分。
式(I)化合物还能以互变异构体形态存在。因此，本发明的另一个目的是呈任何互变异构体形态的本发明的化合物。
式(I)化合物可以碱或以它与酸的加成盐形态存在。这样一些加成盐是本发明的一部分。
有利地，使用在药学上可接受的酸制备这些盐，但例如纯化或分离式(I)化合物而有使用的其它酸的盐也是本发明的一部分。
式(I)化合物还能以水合物或溶剂化物存在，即以与一个或多个水分子或与溶剂缔合或化合形式存在。这样一些水合物和溶剂化物也是本发明的一部分。
在本发明的范围内，除非在本文中另外指出，应该理解-Ct-z，其中t和z可以取值1-6，含碳链含有t-z个碳原子，例如C1-6代表含有1-6个碳原子的含碳链，-烷基，直链或支链饱和脂族基团；例如C1-6烷基代表含有1-6个碳原子的直链或支链含碳链，更特另地甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基等；-烷氧基具有直链或支链饱和烷基链的烷氧基(-O-烷基)；-硫烷基具有直链或支链饱和烷基链的-S-烷基；-卤素原子氟、氯、溴或碘；-杂芳族基团含有5-9个碳原子和含有1-4个杂原子(例如氮、氧或硫)的芳族基团。作为杂芳族基团，可以列举吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、1，3，4-噻二唑基、唑基、异唑基、二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基(pirimidinyle)、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基和吡咯并[2，3-c]吡啶基。
在式(I)化合物中，小组化合物是例如R1、R2、R3、Ar和n如前面所定义的化合物，但下述化合物除外-N-苯基-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(2-氯苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(3-氯苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(4-氯苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(2，4-二氯苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(3，4-二氯苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(2-甲基苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(2-甲氧基苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；
-N-(4-甲氧基苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(4-硫甲基苯基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(3-氯-4-硫甲基苯基)-5-氨基-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-苄基-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(2-氯苄基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(4-甲基苄基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(吡啶-2-基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(吡啶-4-基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(2-苯基乙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-(3，4-二甲氧基苯基乙基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-[3-(吡啶-2-基)丙基]-1H-吲唑-3-甲酰胺；-N-[3-(2，6-二甲基苯基)丙基]-5-硝基-1H-吲唑-3-甲酰胺。
在式(I)化合物中，其它小组化合物是例如R1、R2、R3、Ar和n如前面所定义的化合物，其条件是-R1代表氢原子时如果n等于0，而Ar是苯基时，则这个苯基必然如前面定义的那样被取代，但排除甲基、甲氧基、硫甲基和氯原子取代基；如果n等于1，而Ar是苯基时，则这个苯基必然如前面定义的那样被取代，但排除甲基和氯原子取代基；如果n等于1，而Ar是吡啶基时，则这个吡啶基必然如前面定义的那样被取代；如果n等于2，而Ar是苯基时，则这个苯基必然如前面定义的那样被取代，但排除甲氧基取代基；如果n等于3，而Ar是吡啶基时，则这个吡啶基必然如前面定义的那样被取代；-R1代表-NH2基团，n等于0，Ar是苯基时，则Ar的苯基的这个或这些取代基不可能选自硫甲基或氯原子。
-R1代表-NO2基团，n等于3，Ar是苯基时，则Ar的苯基的这个或这些取代基不可能是甲基。
式(I)的其它小组化合物是例如R1、R2、R3、Ar和n如前面所定义的化合物，其条件是-R1代表氢原子时，则Ar代表被一个或两个彼此独立选自溴或碘原子、C2-6烷基、C2-6硫烷基、C2-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基；或Ar代表杂芳族基团，它选自吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、1，3，4-噻二唑基、唑基、异唑基、二唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、吡咯并[2，3-c]吡啶基，所述的杂芳族基团任选地被一个或两个取代基取代；或Ar代表被一个或两个取代基取代的吡啶基；这些取代基选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团；-R1代表卤素原子、-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-NO2、-CN、-CH2NH2或-CH2NHR2基团时；或R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6烷氧基、-OH、-NH2、-NHR2、-NR2R3基团的取代基取代的苯基时；或R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和杂芳族基团、C1-6烷基、-OH、-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-COOR2、-CONH2、-CONHR2和-CH2XR2(其中X选自O、NH和S)基团的取代基取代的杂芳族基团时，则Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自溴或碘原子、C2-6烷基、C2-6硫烷基、C2-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子、C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基。
在式(I)化合物中，另一个小组化合物定义如下-R1代表氢原子时，则Ar代表被一个或两个彼此独立选自溴原子或-CH2OH、苯氧基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-CN、-SO2NH2、-COOH、-COOR2、-CONH2基团的取代基取代的苯基；或Ar代表杂芳族基团，它选自咪唑基、1，3，4-噻二唑基、吡嗪基、吲哚基、吲唑基、喹啉基或异喹啉基，所述的杂芳族基团任选地被一个或两个取代基取代；或Ar代表被一个或两个取代基取代的吡啶基；这些取代基选自卤素原子(更特别地氯)和-COOH基团、C1-6烷基(更特别地甲基)和C1-6烷氧基(更特别地甲氧基)；R2和R3，彼此相同或不同，代表C1-6烷基(更特别地甲基或乙基)；或R2和R3代表苯基；以及N等于0、2或3；-R1代表卤素原子(更特别地溴或碘)或-NH2、-NHCOR2、-NO2、-CN或-CH2NH2基团时；或R1代表苯基时；或RI代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子(更特别地氯或氟)和杂芳族基团(更特别地吡啶基)、C1-6烷基(更特别地甲基)、-OH、-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-COOR2、-CONH2、-CONHR2和-CH2OR2基团的取代基取代的杂芳族基团(更特别地吡唑基、四唑基、噻唑基、唑基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基或吡咯并[2，3-c]吡啶基)；则Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子(更特别地氯或氟)和吗啉基、-CH2-吗啉基、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-CONHNH2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被C1-6烷氧基，优选地甲氧基取代的杂芳族基团(更特别地吡啶基)；R2和R3，彼此相同或不同，代表C1-6烷基(更特别地甲基、乙基或2-甲基丙基)，它任选地被-CONH2基团或被苯基取代；或R2和R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团，更特别地吡啶基或嘧啶基；n等于0或1。
在式(I)化合物中，另一个小组化合物定义如下R1代表杂芳族基团，它任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和杂芳族基团、C1-6烷基、-OH、-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-COOR2、-CONH2、-CONHR2和-CH2XR2(其中X选自O、NH和S)基团的取代基取代；和/或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的杂芳族基团；和/或R2和R3，彼此相同或不同，代表任选地被-CONH2基团、被苯基或被杂芳族基团取代的C1-6烷基；或R2和R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团；和/或n等于0、1、2或3。
在式(I)化合物中，另一个小组化合物定义如下R1代表杂芳族基团，更特别地吡唑基、噻唑基、四唑基、恶唑基、吡啶基、异喹啉基或吡咯并[2，3-c]吡啶基，它任选地被一个或两个彼此独立选自的卤素原子(更特别地氯)和杂芳族基团(更特别地吡啶基)、C1-6烷基(更特别地甲基)、-NH2和-CONHR2基团的取代基取代；和/或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2和-CH2NHR2基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的杂芳族基团(更特别地吡啶基)；和/或R2和R3，彼此相同或不同，代表任选地被-CONH2基团取代的C1-6烷基，更特别地甲基或乙基；或R2和R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团；和/或n等于0或1。
本发明还有一个目的是前面定义的任何一个小组的式(I)化合物在制备用于治疗和预防虐疾的药物中的用途。
还可以列举下述化合物之一(括号中的编号相应于后表中的化合物的编号)在制备用于治疗和预防虐疾的药物中的用途-N-(吡啶-4-基)-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺(第3号)-N-(吡啶-4-基)-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺(第10号)-5-(1H-吡唑-4-基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺(第11号)-5-(6-氯吡啶-3-基)-N-吡啶-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺(第12号)-N-{3-[(乙基氨基)甲基]苯基}-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺(第14号)-N-{3-[(乙基氨基)甲基]苯基}-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺(第21号)。
可以采用在下面流程中描述的方法制备式(I)化合物，这些方法的操作条件对于本技术领域的技术人员而言是很通常的，如在国际申请PCT/FR03/02862中描述的那些操作条件。
在下文中，保护基团PG应该理解是一种化学反应可影响一个官能或位置时能够阻止该官能或位置反应性的基团，该基团在按照本技术领域的技术人员已知的方法分裂后再构成这个官能或位置。特别在《有机合成中的保护基团》(Protective groups in Organic Synthesis)，Green等人，第3版(John Wiley & Sons，Inc.，New York)中给出了保护基团的实例以及保护和去保护方法。
R1代表卤素原子、-NO2或-CN基团时，可以采用在流程1中描述的方法制备式(I)化合物。
这种方法在于例如使用亚硝酸将式(II)吲哚(其中R1是-NO2、-CN或卤素原子)转化成式(III)的吲唑-3-甲醛。然后，在碱性介质中用三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)或均三甲基苯磺酰基(Mts)类的PG基团保护式(III)化合物，得到式(IV)在1位被保护的吲唑-3-醛。例如通过与亚氯酸钠的反应，将化合物(IV)氧化成式(V)吲唑-3-甲酸。通过式(V)化合物与式Ar(CH2)nNH2(VI)胺的偶联反应，其中Ar和n如式(I)中所定义，得到式(VII)在1位被保护的吲唑-3-甲酰胺。使用偶联试剂，例如羰基二咪唑或氯甲酸异丙酯或异丁酯，通过激活式(V)化合物，可以进行这种偶联反应。
或者通过例如氢氧化钠的碱的作用，或者在氟化四丁基铵(TBAF)和乙二胺操作下，或在三氟乙酸存在下，然后与乙二胺一起加热，可以进行式(VII)化合物的去保护。这个去保护步骤能够得到式(I)吲唑-3-甲酰胺。
在R1是氢原子的情况下，通过例如在前面定义的式Ar(CH2)nNH2(VI)胺与商品吲唑-3-甲酸的偶联反应可进行在流程1中描述的制备方法。
例如在氯化锡存在下，还原其中R1是-NO2的式(I)化合物，例如根据流程1得到的式(I)化合物，可得到其中R1代表-NH2基团的式(I)化合物。
根据本技术领域的技术人员已知的技术，通过其中R1是-NH2的相应式(I)化合物官能化得到其中R1代表-NHR2或-NHCOR2的式(I)化合物。
例如在炭载钯的存在下，像根据流程1得到的式(I)化合物，其中R1是-CN，在大气压力下通过氢化反应得到其中R1代表-CH2NH2的式(I)化合物。
根据本技术领域的技术人员已知的技术，通过其中R1是-CH2NH2的式(I)化合物官能化，得到R1代表-CH2NHR2的式(I)化合物。
流程1 R1代表任选取代的苯基或杂芳族基团时，可以按照流程1、2和3描述的方法之一得到式(I)化合物。另外，R1代表唑基时，按照流程4可以得到式(I)化合物，而R1代表噻唑基时，按照流程5可以得到式(I)化合物。
在流程1的情况下，根据本技术领域的技术人员已知的技术，例如通过与5-碘吲哚的Suzuki类型反应，可以得到式(II)化合物，其中R1代表如式(I)中确定的任选取代的苯基或杂芳族基团。
流程2说明了使用5-碘吲哚制备式(VII)化合物的另一种方法。
采用流程1说明的前两个步骤可得到式(IVa)化合物，其中SEM是三甲基甲硅烷基乙氧基甲基。例如在式R1B(OH)2(VIII)硼酸，其中R1代表如式(I)中确定的任选取代的苯基或杂芳族基团，无机碱，像碳酸钠(Na2CO3)和钯(0)的存在下进行的Suzuki反应，能够得到式(IV)化合物，其中PG代表SEM。采用流程1说明的后三个步骤，使用式(IV)化合物得到式(I)化合物，其中R1代表如式(I)中确定的任选取代的苯基或杂芳族基团。
流程2 流程3说明了使用5-碘-或5-溴靛红的制备方法。
流程3 例如在氢氧化钠存在下，通过5-碘-或5-溴靛红的吲哚二酮环开环，然后通过重氮化，例如使用亚硝酸进重氮化行，而最后通过还原和生成吲唑环，例如在氯化锡(SnCl2)存在下进行还原和生成吲唑环，可以得到5-碘-或5-溴吲唑甲酸。然后在碱性介质中，例如使用SEM基团对得到的5-碘-或5-溴吲唑-3-甲酸进行保护，得到式(IX)化合物，其中X代表溴或碘原子。
通过式(IX)化合物与式Ar(CH2)nNH2(VI)胺偶联，其中Ar和n如式(I)中所定义，可以得到式(X)吲唑-3-甲酰胺。使用偶联试剂，例如羰基二咪唑或氯甲酸异丙酯或异丁酯，通过激活式(IX)化合物，可以进行这种偶联反应。
采用两种方法，使用式(X)化合物可以得到式(VII)化合物-或者采用Suzuki反应，该反应是在式R1B(OH)2(VIII)硼酸，其中R1代表如式(I)中确定的任选取代的苯基或杂芳族基团，碱和钯(0)的存在下进行的；-或者通过式(XI)的二氧杂硼烷(dioxaborolane)中间产物，它是通过双(频哪酯(pinacolato)并)二硼烷和1，1′-双(二苯基膦基)-二茂铁二氯-钯(II)与式(X)化合物反应得到的；然后让式(XI)中间产物置于无机碱，例如乙酸钠或钾、钯(0)和式R1-X(XII)化合物下，其中R1代表如式(I)中确定的任选取代的苯基或杂芳族基团，而X是溴或碘原子。
通过式(VII)化合物去保护，例如在流程1的最后步骤中所描述的去保护，可得到式(I)化合物，其中R1代表如式(I)中确定的任选取代的苯基或杂芳族基团。
流程4说明式(VIIa)化合物，即式(VII)化合物的制备方法，其中R1代表唑基而PG代表SEM基团。
例如在一氧化碳和钯配合物，例如四(三苯基膦)-钯存在下，使如前面所定义的并其中X代表碘原子的式(X)化合物进行甲酰化，然后在例如四氢呋喃(THF)的溶剂中，在例如氢化三丁基锡的还原剂的存在下进行甲酰化。在例如甲醇的溶剂中，在甲苯磺酰基甲基异氰酸酯(TosMIC)和例如碳酸钾(K2CO3)的碱存在下，将如此得到的式(XIII)化合物进行加热回流，得到式(VIIa)化合物。
通过在流程1的最后步骤中所描述的去保护，由式(VIIa)化合物可得到式(I)化合物，其中R1代表唑基。
流程4 流程5说明了式(VIIb)的化合物的制备方法，即式(VII)化合物的制备方法，其中R1代表噻唑基而PG代表SEM基团。
在无水THF中，在流程5说明的式(XIV)衍生物、四(三苯基膦)钯存在下，通过加热如前面所定义的并其中X代表碘原子的式(X)化合物，然后通过酸化作用，这样加入噻唑基。在例如丁基锂的强碱存在下，通过氯化锌(ZnCl2)在无水乙醚中的溶液的反应，可以由2-三甲基甲硅烷基(噻唑)制备式(XIV)衍生物。按照流程1的最后步骤将如此得到的式(VIIb)化合物进行去保护，得到其中R1代表噻唑基的式(I)化合物。
流程5 在流程1-5中，这些没有描述制备方式的起始化合物和试剂是可市场获得的，或是在文献中已描述的，或是采用已描述或本技术领域的技术人员已知的方法制备的。
下面的实施例描述了本发明可使用的某些化合物的制备方法。这些实施例不是限制性的，只是说明本发明。
在下面表中给出相应例证性化合物的编号。微分析、IR谱和RMN谱和/或LC/MS/UV(液相色谱与质谱和紫外分析联用)证实了所得到化合物的结构。对于每个给出的LC/MS/UV值，括号内的百分数表示化合物的UV纯度。PF代表所得到化合物的熔点。
化合物1(第1号化合物)N-(吡啶-4-基)-5-吡啶-3-基-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐中间体1.15-碘-1H-吲唑-3-甲酸在氢氧化钠(0.77g，19.2mmol，在12ml H2O中)存在下将5-碘靛红(5g，18.3mmol)加热直到溶解，然后将该反应混合物冷却到0℃。添加预先冷却到0℃的亚硝酸钠溶液(1.26g，18.3mmol，在5.5ml H2O中)。在激烈搅拌下把得到的糊状物分小份添加到预先冷却到0℃的硫酸溶液(3.40g，34.8mmol，在37ml H2O中)中，以便使该温度不超过4℃。保持搅拌15min，然后缓慢加入氯化锡溶液(SnCl2·2H2O，9.91g，43.9mmol，在15ml浓HCl中)，以便使该温度不超过4℃。任其反应几小时。过滤该反应混合物。这种固体用沸腾水洗涤，然后用热乙醇溶解。过滤除去不溶的杂质。得到2g产物。
中间体1.25-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酸钠在氩气与0℃下，往在无水THF(200ml)中的氢化钠(6.16g，在油中55％，140mmol)添加中间体1.1(20g，70mmol)。将其温度升到室温，保持搅拌20分钟。将该反应混合物再冷却到0℃，再缓慢加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(12.25g，73.5mmol)在THF(75ml)中的溶液。该反应在0℃下搅拌几分钟，然后在室温下搅拌3h。添加80ml水。真空蒸去THF，过滤不溶物。该固体用H2O洗涤，再用乙醚/石油醚混合物洗涤，最后用乙醚洗涤。得到的固体用碳酸钾在真空下进行干燥。得到20.71g呈黄色粉末状的产物。
中间体1.3N-(吡啶-4-基)-5-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺在氩气与温度-10℃下，往中间体1.2(5.02g，11.4mmol)在无水THF(50ml)中的溶液，缓慢添加氯甲酸异丙酯在甲苯(1M，12ml)中的溶液，滴加N-甲基吗啉(1.22g，12mmol)。将这个温度保持在-10℃下5min，然后移去冷却浴。该混合物在室温下搅拌25min，然后再冷却，添加4-氨基吡啶(1.13g，12mmol)在THF中的溶液。这种反应混合物再在室温下搅拌一夜，过滤与真空浓缩。粗制产物采用硅胶(500g)柱色谱纯化，按照从CH2Cl2到AcOEt梯度洗脱。得到4.17g产物。
中间体1.4N-(吡啶-4-基)-5-吡啶-3-基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺在氩气下，往中间体1.3(685mg，1.38mmol)在二甲氧基乙烷(DME)(5.5ml)中的溶液添加吡啶-3-硼酸(299mg，1.15当量)，然后添加Na2CO3(734mg/2.7ml H2O，5当量)水溶液。该反应器用氩气脱气多次，然后在氩气下加入四-(三苯基膦)钯(48mg，0.03当量)。该反应混合物在85℃加热一夜。真空蒸去其溶剂，残留物用AcOEt/H2O提取。有机相进行干燥与蒸发。粗制产物采用硅胶(200g)柱色谱纯化。用AcOEt/MeOH(95/5)洗脱在蒸发后得到370mg产物。
N-(吡啶-4-基)-5-吡啶-3-基-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐在氩气下，往中间体1.4(530mg，1.19mmol)在THF(15ml)中的溶液添加氟化四丁基铵(TBAF)在THF(1M，6ml，5当量)、水(0.2ml)和乙二胺(0.20ml，3mmol，2.5当量)中的溶液。反应混合物在60℃加热3天。再补加氟化四丁基铵(1N，3ml)。另再维持加热一夜。该反应混合物用4N HCl(1.2ml)进行酸化，真空浓缩，然后用H2O稀释。沉淀经过滤后，用CH3OH和乙醚洗涤。得到的固体在CH2Cl2/MeOH中进行结晶。得到190mg呈白色粉末状的产物。
PF196℃
LC/MS/UVMH+316(96.8％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)7.53(dd，1H)，7.84(s，2H)，7.99(d，2H)，8.13(d，1H)，8.46(s，1H)，8.50(d，1H)，8.59(d，1H)，8.92(s，1H)，10.86(s，1H)，14.1(s，1H)。
实施例2(第2号化合物)N-(吡啶-4-基)-5-(4-甲基-[3，4′]-二吡啶-5-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐中间体2.13，5-二溴-4-甲基吡啶在氩气下，二异丙胺(3，6ml，1.02当量)在无水THF(145ml)中的溶液保持在-10℃，往该溶液滴加n-丁基锂在己烷(1.6N，16ml)中的溶液。将该反应混合物冷却到-78℃，然后滴加3，5-二溴吡啶(5.92g，25mmol)在THF(200ml)中的溶液，该溶液已冷却到-78℃。反应混合物搅拌30min，然后滴加碘甲烷(2.17ml，1.4当量)。在-78℃保持搅拌2h。添加饱和NH4Cl水溶液(120ml)。在蒸去溶剂后，该反应混合物用AcOEt提取。有机相用盐水洗涤，用MgSO4干燥与蒸发。得到的黄色固体用AcOEt溶解。过滤悬浮液。滤液经蒸发后，残留物采用硅胶柱色谱纯化，用石油醚/AcOEt混合物(97.5/2.5)洗脱。得到1.67g呈白色固体状的产物。
中间体2.25-溴-4-甲基-[3，4′]-联吡啶在氩气下，往中间体2.1(1.3g，5.18mmol)在DME(18ml)中的溶液添加吡啶-4-硼酸频哪酯(910mg，4.45mmol)，Na2CO3水溶液(2.35g/9ml H2O)，以及最后添加四(三苯基膦)钯(153mg)，该混合物在85℃加热2天。蒸去溶剂后，残留物用AcOEt/H2O提取。有机溶液用盐水洗涤、用MgSO4干燥和蒸发后得到的化合物，采用硅胶(200g)柱色谱纯化，用AcOEt/石油醚混合物(1/1)洗脱。得到440mg呈油状的产物。
中间体2.3N-(吡啶-4-基)-5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]-dioxaborolan-2-y1)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酸使用氩气使中间体1.3(3.77g，7.6mmol)、双(频哪酯并)二硼烷(2.12g，8.3mmol)、乙酸钾(2.24g)混合物在二甲基亚砜(DMSO)(50ml)中脱气。在氩气下添加1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁二氯钯(II)(310mg，0.38mmol，0.05当量)。该反应混合物在80℃加热1.5h。用AcOEt/H2O提取能够分离橙色油，这种油可采用硅胶柱色谱纯化，用AcOEt洗脱。得到的黄色油在乙醚中进行结晶。得到2.56g呈白色粉末状的产物。
中间体2.4N-(吡啶-4-基)-5-(4-甲基-[3，4′]-二吡啶-5-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺往中间体2.3(640mg，1.29mmol)和中间体2.2(370mg，1.15当量)在DME(6ml)中的溶液添加Na2CO3(686mg/2.6ml)水溶液。该反应混合物用氩气脱气。在氩气下添加四(三苯基膦)钯(46mg)。该反应混合物在85℃加热一夜。蒸去溶剂。用AcOEt/H2O提取能够分离一种油，它在AcOEt/石油醚混合物中进行结晶。得到530mg白色粉末状的产物。
N-(吡啶-4-基)-5-(4-甲基-[3，4′]-二吡啶-5-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺盐酸盐以类似于实施例1所描述操作方式的方式，在氟化四丁基铵存在下从中间体2.4中除去保护基团SEM。将粗制产物溶于MeOH/Et2O中。得到的化合物采用过滤法分离，用MeOH洗涤。得到265mg呈粉末状的产物。
PF192℃LC/MS/UVMH+407(96.1％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)2.13(s，3H)，7.65(m，3H)，7.90(d，J＝8.5，1H)，8.01(d，J＝7.2，2H)，8.32(s，1H)，8.54(s，1H)，8.55(d，J＝6.2，2H)，8.60(s，1H)，8.79(d，J＝5.7，2H)，10.90(s，1H)，13(s，1H)。
实施例3(第3号化合物)
N-(吡啶-4-基)-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺中间体3.15-碘-1H-吲唑-3-醛在氩气下，往5-碘吲哚(9.722g，40mmol)在水中的悬浮液分份添加1g亚硝酸钠(27.6g，400mmol)，然后滴加6N HCl(59ml)。反应混合物的温度保持低于15℃，然后，这种反应混合物在室温下激烈搅拌一夜。用氩气流除去含氮蒸汽，然后过滤反应混合物。固体用H2O洗涤，接着采用硅胶(600g)柱纯化，按照从CH2Cl2到CH2Cl2/AcOEt混合物(9/1)的洗脱梯度洗脱，这样能够分离1.37g呈褐色固体状的产物。
LC/MS/UVMH+273(88.6％)中间体3.25-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-醛在氩气下，往氢化钠(50％，在油中，0.50g，10.4mmol)在无水DMF(10ml)中的悬浮液添加中间体3.1(2.58g，9.5mmol)，然后滴加三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯(SEMCl，1.60g，9.6mmol)在DMF(5ml)中的溶液。保持在室温下搅拌1h。添加水，再在真空下蒸去DMF。将残留物溶于CH2Cl2中。该有机溶液用盐水洗涤，干燥，再真空蒸发。粗制产物采用硅胶(500g)柱色谱纯化。用CH2Cl2洗脱得到呈褐色粘稠油状的产物。
中间体3.35-异喹啉-4-基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-醛在氩气下，往中间体3.2(1.07g，2.66mmol)在DME(10ml)中的溶液添加异喹啉-4-基硼酸盐酸盐(0.56g，2.66mmol)、Na2CO3水溶液(1.42g，13.4mmol，在5ml H2O中)和四(三苯基膦)钯(0)(0.160g，0.14mmol，0.05当量)。使用调节到85℃的油浴加热该反应混合物达5b，然后进行真空浓缩。将残留物溶于AcOEt中。该有机溶液用盐水洗涤，干燥，再蒸发得到一种粗制产物，它用硅胶(150g)柱进行纯化。按照从CH2Cl2到CH2Cl2/AcOEt(9/1)的梯度洗脱得到0.84g产物。
中间体3.45-异喹啉-4-基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酸使用由冰和盐混合物组成的浴将中间体3.3(0.50g，1.24mmol)在DMF(5ml)中的溶液保持在温度0℃至-5℃，往该溶液加入2-甲基-2-丁烯(5ml)、DMF(5ml)，然后加入亚氯酸钠(1.12g)水溶液(10ml)和磷酸二氢钠(1.37g，呈水合物形式)。反应混合物的温度在0℃保持30min，然后反应混合物在室温下搅拌4.5h，在用6N HCl(5ml)酸化后，搅拌一夜。反应混合物进行蒸发。将残留物溶于AcOEt中。这种溶液用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥与蒸发，得到0.50g呈白色固体状的产物。
中间体3.5N-(吡啶-4-基)-5-异喹啉-4-基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺在氩气下，让中间体3.4(0.50g，1.19mmol)在无水THF(10ml)中的溶液保持在温度-5℃至0℃下，往该溶液添加氯甲酸异丙酯(1M甲苯溶液，1.2ml)和N-甲基吗啉(0.120g，1.2mmol)。让其反应15min，再添加4-氨基吡啶(0.114g，1.2mmol)。该反应混合物在0℃搅拌30min，然后在室温下搅拌一夜。然后让其反应混合物蒸发，再溶于AcOEt中。该有机溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥与蒸发。得到的油用硅胶柱进行纯化。用CH2Cl2/MeOH混合物(9/1)洗脱能够分离250mg呈黄色油状的产物。
N-(吡啶-4-基)-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺在氩气下，中间体3.5(0.250g，0.5mmol)、1，2-二氨基-乙烷(0.150g，2.5mmol)和氟化四丁基铵在THF(1M，5ml)中的溶液在70℃加热一夜。该反应混合物进行真空蒸发。残留物用AcOEt溶解。这种溶液用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，然后干燥和蒸发。得到的固体用乙醚洗涤，再用硅胶(50g)柱纯化。用AcOEt/MeOH混合物(9/1)洗脱得到的化合物。它用乙醚/石油醚混合物溶解，然后过滤。得到182mg呈白色固体状的产物。PF＞250CLC/MS/UVMH+366(99.4％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)7.65(d，J＝8.5，1H)，7.76(t，J＝7.3，1H)，7.81(t，J＝7.4，1H)，7.88(dd，J＝8.4，J＝3.3，2H)，7.92(d，J＝6.1，2H)，8.26(d，J＝8.0，1H)，8.34(s，1H)，8.46(d，J＝5.9，2H)，8.52(s，1H)，9.38(s，1H)，10.85(s，1H)，14.2(s，1H)。
实施例4(第9号化合物)N-(吡啶-4-基)-5-(1，3-噻唑-5-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺中间体4.1N-吡啶-4-基-5-(1，3-噻唑-5-基)-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺在氩气气氛下，将n-丁基锂(8.25ml，1.6N，在己烷中，13.2mmol)在无水乙醚(12ml)中的溶液冷却到-78℃，往该溶液滴加2-三甲基甲硅烷基(噻唑)(1.97ml，12mmol)在无水乙醚(12ml)中的溶液。在-78℃搅拌30min，然后添加使用非常干燥的ZnCl2新制备的ZnCl2(4.91g，36mmol)在无水乙醚(36ml)中的摩尔溶液。移去冷却浴，该混合物在室温下搅拌30min。真空蒸去其溶剂。在氩气下，往残留物添加中间体1.3(5.37g，12mmol)和四(三苯基膦)钯(277mg)在无水THF(50ml)中的混合物，该悬浮液加热回流24h。添加1N HCl将这种反应混合物酸化到pH 2，然后进行真空浓缩。添加1N氢氧化钠以达到pH 10。得到的固体在CH2Cl2存在下进行搅拌，并过滤分离除去锌盐。滤液用水洗涤。有机相用MgSO4干燥，再蒸发。得到的褐色油(5.10g)用二氧化硅快速过滤。在乙醚中结晶后，得到黄色固体(2.40g)。这种固体用硅胶(300g)柱色谱进行纯化。从石油醚/AcOEt(2/3)到石油醚/AcOEt(1/3)洗脱梯度能够分离2种异构体。期望化合物的极性最强。得到1.08g呈白色粉末状的产物。
N-吡啶-4-基-5-(1，3-噻唑-5-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺从中间体4.1(452mg，1mmol)除去保护基团SEM可得到这种化合物。这种粗制产物在MeOH/AcOEt中在微量水存在下进行重结晶。得到22.5g呈黄色固体状的产物。
PF＞250℃LC/MS/UVMH+322(98.5％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)7.77(d，J＝8.8Hz，1H)7.86(d，J＝8.8Hz，1H)7.93(d，J＝6.3Hz，3H)8.35(s，1H)8.41(s，1H)8.47(d，J＝6.3Hz，2H)9.10(s，1H)10.80(s，1H)，14.0(s，1H)。
实施例5(第10号化合物)N-(吡啶-4-基)-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺中间体5.13-硝基吡啶-4-酚往冷却到0℃的发烟硫酸(含有20％SO3的H2SO4，d＝1.9，10.5ml)缓慢添加硝酸溶液(HNO3＞90％，13.3ml)。在0℃往该混合物添加4-吡啶酚硝酸盐(10g，63mmol)，它然后在90℃加热1h30。把反应混合物倒在50g冰上。悬浮液在0℃搅拌30min，再进行过滤。其固体用几ml水洗涤，然后置于空气下干燥。得到6.59g呈白色粉末状的产物。
中间体5.23-溴-5-硝基吡啶-4-酚往中间体5.1(4.04g，28.4mmol)在H2O(40ml)中的悬浮液滴加溴(5.07g，31.7mmol)。该混合物用油浴在温度90℃加热1h。冷却后，过滤混合物。其固体用H2O洗涤，然后在硅胶存在下用干燥器进行干燥。得到4.51g呈白色固体状的产物。
中间体5.33-溴-4-氯-5-硝基吡啶在双颈瓶中，中间体5.2(5.30g，24.0mmol)在60℃与真空(0.5毫巴)下干燥2h。添加PCl5(9.12g，43.8mmol)和POCl3(0.5ml，5.4mmol)。用油浴将该混合物加热到160℃。20min后，这种固体转变成透明的褐色油。冷却后，该混合物固化。在真空下蒸去这些挥发性物质，然后悬浮于CHCl3中的固体在0℃用乙酸钾水溶液(AcOK 25g/35ml H2O)进行处理。分离有机相，然后蒸发。残留物用乙醚/NaHCO3混合物提取。有机相用盐水洗涤，用Na2SO4干燥与蒸发。将残留物溶于CH2Cl2中。过滤除去不溶物，滤液蒸发得到期望的产物。得到4.66g呈褐色油状产物。
中间体5.4(3-溴-5-硝基吡啶-4-基)丙二酸二乙酯在氮气下，往NaH(1.70g，55-60％，在油中，39-46mmol)在无水DMF(30ml)中的悬浮液在10-15min内添加丙二酸二乙酯(7.2ml，47.4mmol)，以便反应混合物的温度不超过50℃。加完后再保持搅拌30min。分小份添加呈固体状的中间体5.3(4.46g，18.62mmol)。保持在室温下搅拌3h30。添加水(50ml)和AcOH(5ml)。该混合物用乙醚提取。有机相用盐水洗涤，用Na2SO4干燥与蒸发。按照从AcOEt/石油醚混合物(1/9)到AcOEt/石油醚混合物(3/7)梯度从硅胶(300g)柱洗脱残留物。得到5.15g呈褐色油状的产物。
中间体5.53-溴-4-甲基-5-硝基吡啶中间体5.4(5.15g，14.2mmol)在18％HCl水溶液(50ml)存在下在100℃加热15h。该混合物用乙醚提取(3×80ml)。含醚溶液用盐水洗涤，用MgSO4干燥，真空蒸发得到期望产物。得到2.43g呈黄色固体状产物。
中间体5.62-(3-溴-5-硝基吡啶-4-基)-N，N-二甲基亚乙基胺在DMF(6ml)中，中间体5.5(1.136g，5.19mmol)和DMF二乙缩醛(1.46ml，8.52mmol)的混合物在85℃加热1h15。真空蒸去DMF得到期望产物。得到1.407g呈紫红色固体状的产物。
中间体5.7
4-溴-1H-吡咯并[2，3-c]吡啶中间体5.6(1.407g，5.13mmol)在乙酸(15ml)中的溶液在铁(325目铁粉，1.85g，33.1mmol)存在下在120℃加热40min。过滤混合物。用AcOH(5ml)洗去铁盐。将滤液稀释在75ml水中，得到红-橙色的透明溶液。往这种溶液添加固体K2CO3进行中和，直到达到pH9。微褐色悬浮液用CHCl3提取。有机溶液用盐水洗涤，用0.45μM膜过滤，用Na2SO4干燥，最后进行真空蒸发。得到801mg呈灰-褐色固体状的产物。
中间体5.8N-(吡啶-4-基)-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺以类似于合成中间体2.4的方式合成这种中间体，让中间体5.7与中间体2.3以2.43mmol规模进行Suzuki反应。粗制产物用硅胶(50g)柱纯化，用AcOEt/MeOH混合物(95/5)洗脱。得到780mg呈白色粉末状的产物。
N-(吡啶-4-基)-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺使用TFA从中间体5.8(780mg，1.61mmol)除去保护基团SEM，接着在乙二胺存在下加热，这样得到这种化合物。粗制产物在MeOH存在下搅拌1h，然后过滤。得到480mg呈白色粉末状的产物。
PF＞250℃LC/MS/UVMH+355(100％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)6.67(s，1H)7.71(s，1H)7.84(s，2H)7.93(d，J＝5.7Hz，2H)8.27(s，1H)8.46(d，J＝6.3Hz，2H)8.55(s，1H)8.77(s，1H)10.79(s，1H)11.80(s，1H)12-14(s，1H)。
实施例6(第15号化合物)5-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-N-吡啶-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺中间体6.13-溴-4-甲基-5-氨基吡啶以与合成中间体5.7类似的方式，以10mmol规模用铁还原3-溴-4-甲基-5-硝基吡啶(中间体5.5)可得到这种化合物。得到1.20g呈乳白色固体状的产物。
中间体6.25-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-N-吡啶-4-基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酰胺以与合成中间体2.4类似的方式，让中间体6.1与中间体2.3以2.48mmol规模进行Suzuki反应，可合成这种中间体。该反应混合物进行蒸发。残留物用AcOEt/H2O溶解。分离不溶物。搅拌1h后进行过滤。得到1.02g呈乳白色粉末状的产物。
5-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-N-吡啶-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺让中间体6.2(980mg，2.06mmol)在THF(30ml)中的溶液与氟化四丁基铵溶液(1M THF溶液，10.3ml)、乙二胺(0.347ml，5.2mmol)和H2O(0.377ml)进行反应。该混合物在60℃加热3天，然后蒸发。残留物在AcOEt/H2O混合物中进行搅拌，然后过滤。如此回收的固体在MeOH存在进行搅拌，然后过滤得到期望产物(270mg)，呈乳白色固体状。滤液进行真空蒸发，再采用硅胶(50g)柱色谱纯化，使用MeOH/CH2Cl2混合物(1/4)洗脱，得到第2批期望产物(1.5g)，呈黄色固体状。
LC/MS/UVMH+345(100％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)1.98(s，3H)5.19(s，2H)7.40(d，J＝8.2Hz，1H)7.67(s，1H)7.74(d，J＝8.8Hz，1H)7.91(d，J＝6.3Hz，2H)7.96(s，1H)8.08(s，1H)8.45(d，J＝6.3Hz，2H)10.76(s，1H)13.67(s，1H)。
实施例7(第11号化合物)5-(1H-吡唑-4-基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺中间体7.14-碘-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑在氩气下，往4-碘吡唑(1.94g，10mmol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液添加二异丙基乙胺(DIEA，1.75ml，10mmol)和三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯(SEMCl，1.83ml，10mmol)。该混合物在室温下搅拌一夜。真空蒸去溶剂。残留物用乙醚/水混合物溶解。干燥与蒸发后的有机相得到无色油，它采用硅胶柱进行纯化，用AcOEt/CH2Cl2混合物(5/95)洗脱。得到3.02g呈无色油状产物。
中间体7.2N-(吡啶-4-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-5-[1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1H-吲唑-3-甲酰胺以与合成中间体2.4类似的方式，让中间体7.1与中间体2.3以2.0mmol规模进行Suzuki反应，这样可合成这种中间体。粗制产物采用硅胶(50g)柱纯化，使用MeOH/CH2Cl2混合物(2/98)洗脱。纯化的化合物在CHCl3/Et2O混合物中进行结晶。得到367mg呈白色粉末状的产物。
5-(1H-吡唑-4-基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺使用TFA从中间体7.2(550mg，0.97mmol)除去保护基团SEM，接着在乙二胺存在下加热，这样可得到这种化合物。过滤反应混合物。其固体在CHCl3/H2O存在下进行搅拌。不溶部分在MeOH存在下搅拌1h，然后过滤得到期望的产物。得到220mg呈白色粉末状的产物。
PF＞250℃LC/MS/UVMH+305(100％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)7.67(d，J＝8.2Hz，1H)7.75(d，J＝6.9Hz，1H)7.94(d，J＝6.3Hz，2H)，7.96(s宽，1H)，8.21(s宽，1H)8.35(s，1H)8.46(d，J＝5.7Hz，2H)10.72(s，1H)13.0(s，1H)。
实施例8(第13号化合物)5-(1，3-唑-5-基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺中间体8.15-甲酰基-N-(吡啶-4-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基-1H-吲唑-3甲酰胺一氧化碳流加到中间体1.3(4.95g，10mmol)在THF(50ml)中的溶液达15min。添加四(三苯基膦)钯(578mg，0.5mmol)，然后加入一氧化碳流10min。该混合物升温到50℃，在2h30min内缓慢添加氢化三丁基锡(3.05ml，11mmol)在THF(20ml)中的溶液。冷却后，添加水(0.5ml)，反应混合物进行蒸发。残留物用硅胶柱纯化，使用MeOH/AcOEt/CH2Cl2(2/29/69)洗脱。得到2.65g呈黄色固体状产物。
中间体8.25-(1，3-唑-5-基)-N-(吡啶-4-基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1-1H-吲唑-3-甲酰胺往中间体8.1(2.65g，6.68mmol)在MeOH(100ml)中的溶液添加K2CO3(1.02g，7.35mmol)和甲苯磺酰基甲基异氰酸酯(TosMIC，1.44g，7.35mmol)。该混合物加热回流2h30，再在冷却后进行真空浓缩。残留物用AcOEt/H2O溶解。干燥与蒸发后，有机相得到一种固体，它用硅胶柱进行纯化，使用MeOH/AcOEt/CH2Cl2(3/28.5/68.5)洗脱。纯化产物在AcOEt中进行重结晶。得到2.345g呈白色固体状的产物。
5-(1，3-唑-5-基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺在室温下，让中间体8.2(360mg，0.82mmol)与TFA(3ml)反应1h。该反应混合物进行真空蒸发。残留物用THF溶解得到一种固体。这种混合物再进行蒸发，然后溶于THF(10ml)中。添加乙二胺(267μl，4mmol)，该混合物在70℃加热一夜。蒸去THF。残留物在MeOH中研磨，过滤，再用乙醚洗涤。它用80ml MeOH/H2O混合物(9/1)溶解。这种混合物加热回流。添加DMF直到完全溶解。冷却后出现橙色固体，它在过滤后在高真空下干燥2天。得到206mg呈橙色粉末状的产物。
LC/MS/UVMH+306(94.3％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)7.74(s，1H)7.77(d，J＝8.8Hz，1H)7.84(d，J＝8.8Hz，1H)7.92(d，J＝5.7Hz，2H)8.45(d，J＝5.0Hz，3H)8.46(s，1H)8.51(s，1H)10.82(s，1H)13.9(s，1H)。
实施例9(第14号化合物)N-{3-[(乙基氨基)甲基]苯基}-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺二盐酸盐中间体9.1N-(3-硝基苄基)乙胺盐酸盐在氩气下，往N-(3-硝基苄基)乙酰胺(3.89g，20mmol)在无水THF(100ml)中的溶液滴加BH3-THF(1M，60ml)溶液。该反应混合物在40℃下搅拌一夜。添加MeOH(40ml)。真空蒸去其溶剂，残留物在THF/4NHCl混合物(80/25)中在60℃加热4h。冷却后，分离固体。添加AcOEt(50ml)，同时保持搅拌。固体经过滤后用AcOEt洗涤，再用乙醚洗涤，然后干燥。得到3.95g呈白色粉末状的产物。
中间体9.2(3-氨基苄基)乙胺在氩气下，在冰醋酸(100ml)中的中间体9.1(3.90g，18mmol)在铁(6.64g，118.8mmol)存在下在110℃搅拌30min。冷却后，过滤除去这些铁盐，再用乙酸(15ml)洗涤。将滤液稀释在水(200ml)中，然后添加固体K2CO3将其滤液调节到pH9，再添加NaOH调节到pH12。得到的悬浮液用CH2Cl2提取。有机溶液经干燥与蒸发得到期望产物。得到2.65g呈黄色油状产物。
中间体9.3(3-氨基苄基)乙基氨基甲酸叔丁酯在氩气下，让中间体9.2(2.60g，17.3mmol)在CH2Cl2(150ml)中的溶液与二碳酸二叔丁酯(3.89g，17.3mmol)进行反应1h30min。蒸去溶剂。得到的油采用硅胶柱纯化，同时进行从AcOEt/CH2Cl2(1/9)混合物到AcOEt/CH2Cl2混合物(1/4)的梯度洗脱。得到1.28g呈无色树胶状的产物。
中间体9.4(3-{[(5-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-基)羰基]氨基}苄基)乙基氨基甲酸叔丁酯在氩气下，往以与中间体1.2类似的方式使用5-溴靛红制备的5-溴-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-甲酸(1.86g，5mmol)在无水THF(45ml)中的溶液，在0℃添加氯甲酸异丙酯在甲苯(1M，5.5ml，5.5mmol)中的溶液，然后添加N-甲基吗啉(600μl，5.5mmol)。该混合物在0℃搅拌20min，再在在室温下搅拌15min。冷却到0℃后，添加中间体9.3(1.38g，5.5mmol)在无水THF(5ml)中的溶液。该反应混合物在室温下搅拌5h，然后进行真空浓缩。残留物用AcOEt/H2O溶解。有机相用10％K2CO3洗涤，干燥，再真空蒸发。得到2.81g呈黄色树胶状的产物。
中间体9.5(3-{[(5-异喹啉-4-基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吲唑-3-基)羰基]氨基}苄基)氨基甲酸叔丁基乙酯往中间体9.4(1.21g，2mmol)在DME(12ml)中的溶液添加异喹啉-4-基硼酸(461mg，2mmol)和Na2CO3水溶液(2M，5ml，10mmol)。反应混合物用氩气脱气，再加入四(三苯基膦)钯(116mg，0.1mmol)。再脱气后，混合物在80℃加热20h。该反应混合物进行真空蒸发，然后溶于AcOEt/H2O中，过滤。AcOEt溶液干燥后进行真空蒸发。残留物用硅胶柱纯化，使用AcOEt/DCM混合物(1/3)洗脱。得到1.08g呈黄色树胶状的产物。
N-{3-[(乙基氨基)甲基]苯基}-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺二盐酸盐在氩气下，把冷却到4℃的TFA(20ml)添加到中间体9.5(1.0g，1.53mmol)中。该混合物在室温下搅拌2h。真空蒸去TFA。残留物用甲苯溶解，该混合物进行真空蒸发。重复这种操作。残留物溶于THF(50ml)中。添加乙二胺(620μl，9.20mmol)，混合物在氩气与70℃下加热一夜。混合物蒸发后，残留物用AcOEt/H2O提取。有机相在干燥与蒸发后得到一种化合物，将它溶解异丙醇/4N HCl(20ml/2ml)混合物中。缓慢分离的固体进行过滤。得到622mg呈黄色固体状的产物。
LC/MS/UVMH+422(100％)NMR1H(500MHz，DMSO-D6)δ(ppm)1.21(t，J＝6.9Hz，3H)2.95(m，2H)4.09(t，J＝6.0Hz，2H)7.30(d，J＝7.6Hz，1H)7.40(t，J＝7.9Hz，1H)7.68(d，J＝10.1Hz，1H)7.81(d，J＝8.2Hz，1H)7.92(d，J＝8.2Hz，1H)7.97(t，J＝7.9Hz，1H)8.07(m，1H)8.12(s，1H)8.12(s，1H)8.41(s，1H)8.53(d，J＝7.6Hz，1H)8.67(s，1H)9.1(s宽，2H)9.78(s，1H)10.55(s，1H)14.2(s，1H)。
下面的表说明本发明可使用的一些化合物的化学结构和物理性能。在这个表中-在“盐”栏，“-”代表呈游离碱形式的化合物，而“HCl”代表呈盐酸盐形式的化合物。括号中的比是酸/碱比；-PF(℃)代表化合物的熔点，以摄氏度表示；-M+H代表化合物质量加1。
表
式(I)化合物构成体外药理学试验的主题，试验表明它们对P.falciparum的抑制活性。
采用两个P.falciparum茵株，它们来源于Colombie(FcB1，一般耐氯喹的菌株)和Cameroun(FeM29，强耐氯喹的菌株)。按照Trager和Jensen的方法(W.Trager，J.Jensen，《科学》(Science)，1976，193，673-675)，在人的红细胞中连续培养这些P.falciparum菌株这些寄生虫保持在人的红细胞(O±)中，在补充25mM Hépes、24mM NaHCO3和2mM L-谷氨酰胺的RPMI 1640介质稀释到2％寄生物血症，并且补加5％所有组的人血清。这些寄生虫在潮湿和5％CO2气氛下在37℃进行培养。
根据Desjardins的放射性微量法(R.E.Desjardins、C.J.Canfield、J.D.Haynes、J.D.Chulay，《Antimicrob.Agents Chemother.》，1979，16，710-718)进行抗虐疾活试验。每个分子分三份进行试验。这些试验是在96孔微板中进行的。P.falciparum菌株在RPMI 1640溶液中进行培养，该溶液补充了5％人的血清，其具有2％血细胞压积和1.5％寄生物血症。对于每个试验，在潮湿和5％CO2气氛下，在37℃以不断降低的式(I)化合物浓度培养这些寄生虫。
按照1mg/ml将待试验化合物第一次稀释在二甲基亚砜中。该范围的相继filles溶液稀释也是在二甲基亚砜中进行的。然后，按照1/50将每个fille稀释物稀释在补充5％人血清的RPMI 1640中，所有稀释都是在37℃下进行的。然后，把这些稀释液添加到在微板的培养寄生虫中。添加待试验化合物后，这些寄生虫在有5％人血清和1％二甲基亚砜的RPMI 1640中进行培养。通过加入氚标记的次黄嘌呤(在开始暴露于待试验化合物后24h添加的)，与没有加入待试验化合物(取作100％)相比，可测量寄生虫增长。借助GraphPad Prism4处理软件(GraphPad软件公司，5755 Oberlin Drive，#110，San Diego，CA 92121，USA)，绘出抑制百分数随剂量对数的变化，可确定Cl50值(抑制50％寄生虫增长时需要的化合物浓度)。
式(I)化合物对所使用P.falciparum茵株的一种或另一种测量的Cl50值，就活性最强的化合物而言，是低于1μM。例如，上表中第3、10、11、12、14和21号化合物对于FcM29菌株的Cl50分别是600、130、800、800、272和406nM。
这些试验结果表明，式(I)化合物与它们在药学上可接受的盐可以用于制备打算治疗和预防疟疾的药物。
为此，与适当赋形剂结合，式(I)化合物及其盐可以是适合于通过口、舌下、注射(例如皮下、肌肉内和静脉内途径)、外部、局部、气管内、鼻内、经皮或直肠途径给药的任何药物剂型。
本发明，按照其另一方面，还涉及治疗和/或预防疟疾的方法，该方法包括给病人有效剂量的式(I)化合物或它们在药学上可接受的盐或水合物或溶剂化物之一。
权利要求
1.符合下式(I)的化合物在制备用于治疗和预防疟疾的药物中的用途 式中R1代表氢或卤素原子或-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-NO2、-CN、-CH2NH2或-CH2NHR2基团；或R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6烷氧基、-OH、-NH2、-NHR2和-NR2R3基团的取代基取代的苯基；或R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和杂芳族基团、C1-6烷基、-OH、-NH2、-NHR2、-NHCOR2、-COOR2、-CONH2、-CONHR2和-CH2XR2基团的取代基取代的杂芳族基团，其中X选自O、NH和S；Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的杂芳族基团；R2和R3，彼此相同或不同，代表任选地被-CONH2基团、被苯基或被杂芳族基团取代的C1-6烷基；或R2和R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团；以及n等于0、1、2或3，所述的式(I)化合物呈碱或与酸的加成盐形态，或呈水合物或溶剂化物形态。
2.根据权利要求1所述的用途，其中式(I)化合物是如下的R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和杂芳族基团、C1-6烷基、-NH2和-CONHR2基团的取代基取代的杂芳族基团；和/或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2和-CH2NHR2基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的杂芳族基团；和/或R2和R3，彼此相同或不同，代表任选地被-CONH2基团取代的C1-6烷基；或R2et R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团；和/或n等于0或1，所述的式(I)化合物呈碱或与酸的加成盐形态，或呈水合物或溶剂化物形态。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其中R1代表吡唑基、噻唑基、四唑基、唑基、吡啶基、异喹啉基或吡咯并[2，3-c]吡啶基。
4.根据权利要求1或2所述的用途，其中R1代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和吡啶基、C1-6烷基、-NH2和-CONHR2基团的取代基取代杂芳族基团。
5.根据上述权利要求中任一项权利要求所述的用途，其中Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2和-CH2NHR2基团的取代基取代的苯基；或Ar代表任选地被一个或两个彼此独立选自卤素原子和C1-6烷基、C1-6硫烷基、C1-6烷氧基、-CH2OH、苯氧基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NHSO2R2、-CN、-SO2R2、-SO2NH2、-SO2NHR2、-COOH、-COOR2、-CONH2、-CONHNH2、-CONHR2、-CH2NHR2和-CH2NR2R3基团的取代基取代的吡啶基。
6.根据上述权利要求中任一项权利要求所述的用途，其中R2和R3，彼此相同或不同，代表任选地被-CONH2基团取代的甲基或乙基；或R2和R3，彼此相同或不同，代表苯基或杂芳族基团。
7.根据上述权利要求中任一项权利要求所述的选自下述的式(I)化合物的用途-N-(吡啶-4-基)-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺，-N-(吡啶-4-基)-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺，-5-(1H-吡唑-4-基)-N-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺，-5-(6-氯吡啶-3-基)-N-吡啶-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺，-N-{3-[(乙基氨基)甲基]苯基}-5-异喹啉-4-基-1H-吲唑-3-甲酰胺，和-N-{3-[(乙基氨基)甲基]苯基}-5-(1H-吡咯并[2，3-c]吡啶-4-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺，它们呈碱或与酸的加成盐形态，或呈水合物或溶剂化物形态。
全文摘要
符合式(I)化合物在制备用于治疗和预防疟疾的药物中的用途，其式中R
文档编号A61K31/4725GK1933834SQ200580008113
公开日2007年3月21日 申请日期2005年3月15日 优先权日2004年3月16日
发明者H·德奥池蒙特, L·弗赖塞, A·兹默曼 申请人:赛诺菲-安万特