专利名称：用于预防或治疗尿失禁和膀胱过度活跃的草药组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于预防或治疗尿失禁和膀胱过度活跃的草药组合物。
背景技术：
膀胱失去控制称为尿失禁。在没有预兆的情况下，膀胱肌肉就收缩或尿道周围的肌肉松弛时，就会发生尿失禁。尽管在所有年龄的人群中都可见尿失禁，但是该病在老年人中更常见。美国国立老龄研究院(U.S.National Institute on the Aging)估计，在65岁以上老年人中至少十分之一患有尿失禁。同样，在澳大利亚乃至全世界，失禁也是常见病症，累及12％的18岁女性，以及50％的70岁以上的女性。症状从轻微漏尿到无法控制的流出。患失禁的女性多过男性。
而年龄本身并不会引起尿失禁，尿失禁的发生是有多种原因的。例如，尿路感染、阴道感染或刺激、便秘和某些药物可引起短暂的膀胱控制问题。有时，失禁持续更长时间。慢性失禁可由诸如以下的原因引起膀胱肌肉无力、膀胱肌肉过度活跃、前列腺增大引起的阻塞、因病导致控制膀胱的神经损伤(例如多发性硬化或帕金森病(Parkinson’s disease))或因关节炎等疾病导致行走疼痛和缓慢。
尿失禁有多种类型，包括例如压迫性尿失禁、欲望性尿失禁(urgeincontinence)、充溢性尿失禁和功能性尿失禁。压迫性尿失禁发生在运动、咳嗽、打喷嚏、大笑、负重或对膀胱施压的其它身体运动时。这是中青年妇女中最常见的一类膀胱控制问题。在某些情况下与分娩有关。它也可在绝经期前后开始。欲望性尿失禁发生在当人们无法在及时赶到厕所之前憋住尿时。健康者可有欲望性尿失禁，但在糖尿病、中风、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)、帕金森病或多发性硬化患者中常见。这有时也是膀胱癌的早期征兆。充溢性尿失禁发生在少量尿液从充盈的膀胱中漏出时。当增大的前列腺阻塞尿道时，男性就会无法排空膀胱。糖尿病和脊髓损伤也可引起这类尿失禁。功能性尿失禁发生在具有正常膀胱控制的许多老年人中。他们仅仅因为关节炎或导致无法快速行动的其它疾病，而无法及时赶到厕所。
目前，尿失禁的医疗方案包括行为干预，例如对膀胱控制进行训练，药物治疗，使用装置(例如导管)和外科手术。目前的药物治疗包含抗胆碱能药(具有抗痉挛效果，例如奥昔布宁(oxybutinin))、平滑肌松弛药(解痉药)、三环抗抑郁药(例如丙米嗪)、α-肾上腺素拮抗剂、α-肾上腺素激动剂(例如苯丙醇胺)、前列腺素合成抑制剂、钙通道阻滞剂和其它药物(Sullivan和Abrams，Eur.Urol.，36增刊189-95(1999)；Andersson，Baillieres Best Pract.Res.Clin.Obstet.Gynaecol.，14(2)291-313(2000)；Owens和Karram，Drug.Saf.，19(2)123-39(1998)；Wada等，Arch.Int.Pharmacodyn Ther.，330(1)76-89(1995))。遗憾的是，大多数药物治疗都具有令人不快的副作用，这影响了患者的顺从性(Sullivan和Abrams，Eur.Urol.，36增刊189-95(1999)；Andersson，Baillieres Best Pract.Res.Clin.Obstet.Gynaecol.，14(2)291-313(2000)；Owens和Karram，Drug Saf.，19(2)123-39(1998)；Wada等，Arch.Int.Pharmacodyn Ther.，330(1)76-89(1995))2-5。
乙酰胆碱是参与膀胱排空的主要兴奋性神经递质。常用于尿失禁的某些处方药例如盐酸奥昔布宁，能抑制乙酰胆碱对平滑肌的蕈毒作用，产生直接的抗痉挛作用。这些药物使逼尿肌松弛。Wada Y.等，Arch.Int.Pharmacodyn.Ther.，330(1)76-89(1995)；Tapp A.J.S.等，Brit.J.Obstetrics Gynecology，97521-6(1990)。这些药物也产生不想要的抗胆碱能效应，例如口干、视力模糊和便秘。Pathak AS，Aboseif SR.Overactive BladderDrug therapy versus nerve stimulation.Nat Clin PractUrol，2(7)310-311，2005；Wein(2001)。也已研究了针对这些疾病的天然疗法(Natural therapies)(Steels等，Aust.Continence J.，7(2)34-37(2001)；Karantanis等，Aust.Continence J.，6(4)6-7(2000)；Arya等，Obstetrics and Gynecology，96(1)85-89(2000)；Bryant等，Aust.Continence J.，6(4)8(2000))。在印度草医学(Ayurveda)中，刺籽鱼木(Crateva nurvala)是一种在控制尿路病变中受到高度关注的药物(Nadkarni，Indian Materia Medica.Bombay Popular Prakashan)。西方传统治疗推荐使用问荆(Equisetum arvense)(British Herbal Pharmacopeia.PublBritish Herbal Medicine Association 1983)。对治疗尿失禁的基于草药的天然疗法进行了独立的临床研究，采用包括刺籽鱼木草药、针灸和膳食干预例如改变饮食摄入等疗法。Deshpande等，Indian J.Med.Res.76(supp)46-53，1982；Karantanis等，Aust.Continence J.，6(4)6-7，2000；Arya等，Obstetrics and Gynecology，96(1)87-89，2000；Bryant等，Aust.Continence J.，6(4)8，2000。
膀胱过度活跃(OAB)是特征为突然需要排尿的一种病症。当这样的需要导致尿液无意漏出时，该病症称为欲望性尿失禁(“OAB湿(OAB wet)”)。因此，欲望性尿失禁属于OAB的通用定义范围内。OAB是由膀胱壁肌肉突然而不随意收缩所致。OAB患者中约有1/3的人也罹患欲望性尿失禁(“OAB湿”)，而约2/3的患者罹患OAB但不伴有欲望性尿失禁(“OAB干(OAB dry)”)。根据国家膀胱过度活跃评价(National Overactive Bladder Evaluation)，OAB累及16.5％的人群，其中16.9％的女性和16.0％的男性受累。Stewart等，World J.Urol.20327-336，(2003)。
OAB和尿失禁一样，主要是用抗胆碱能药(例如奥昔布宁)进行治疗。它们抑制神经递质乙酰胆碱接触膀胱肌肉，因而降低膀胱的收缩频率和强度。遗憾的是，这些药物的不良副作用包括口干、眼干、便秘和头痛。Anderson，Urology，3A32-41(2004)；Cruz，Urology.3A65-73(2004)；Appell等，Mayo Clinical Proc，78696-702.(2003)。
目前尚没有既能特异性针对失禁症状、而又对身体的其它部位不具有副作用的药物。需要鉴定新的含草药组合物，用于预防或治疗尿失禁和膀胱过度活跃。
发明概述本发明提供用于预防或治疗尿失禁的草药组合物。本发明的含草药组合物可以配制在干法给药系统(dry delivery system)、液体给药系统或控释溶媒中。本发明的含草药组合物配制成口服剂量单位，所述剂量单位包括片剂；干粉剂；胶囊剂；和胶囊形片剂(caplet)。在一个实施方案中，本发明提供含草药组合物，它包含刺籽鱼木(C.nurvala)茎/皮制剂，其浓度至少约为3,000mg干重当量(dry weightequivalent)/口服剂量单位；问荆(E.arvense)草药制剂，其浓度至少约为1,500mg干重当量/口服剂量单位；磷，其浓度至少约为24.9mg干重当量/口服剂量单位；镁，其浓度至少约为14.5mg干重当量/口服剂量单位；和钙，其浓度至少约为16.3mg干重当量/口服剂量单位。
刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度至少约为3,000mg干重当量/口服剂量单位。也就是说，原料是3,000mg刺籽鱼木干燥茎/皮。该原料在制造工艺中最终浓缩至10∶1的比例，这相当于300mg刺籽鱼木制剂。因此，300mg刺籽鱼木茎/皮制剂(浓缩)相当于3,000mg干重的刺籽鱼木茎/皮或3,000mg刺籽鱼木干燥茎/皮原料。
问荆草药制剂的浓度至少约为1,500mg干重当量/口服剂量单位。也就是说，原料是1,500mg问荆草药。该原料在制造工艺中最终浓缩至4∶1或5∶1的比例，这相当于375mg或300mg问荆草药制剂。所以，例如，300mg问荆草药制剂(浓缩)相当于1,500mg干重的问荆草药或1,500mg问荆干燥草药原料。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂来源于问荆草药的茎部分，即标准化问荆茎提取物制剂。
在本发明的某些方面，已经知道，问荆草药制剂中各批次间的硅含量和/或黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的差异对本发明组合物的生物活性有负面影响。本发明通过提供具有优化、标准化硅含量和/或黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的问荆草药制剂，解决了这一难题。在一个实施方案中，本发明提供含草药组合物，它包含刺籽鱼木茎/皮制剂和标准化问荆草药制剂，其硅含量占问荆制剂总干重的约3％至约13％，其中含草药组合物配制成口服剂量单位。因此，对于1,500mg干重的问荆草药或1,500mg的问荆干燥草药原料(其生产300mg问荆草药制剂(浓缩))来说，约3％至约13％的硅含量代表约9-39mg硅。
在一个实施方案中，所述含草药组合物中刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度为约1,000mg至约6,000mg干重当量/口服剂量单位。在一个实施方案中，所述含草药组合物中刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度为约1,000mg至约4,000mg干重当量/口服剂量单位。在一个实施方案中，所述含草药组合物中刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度为约2,500mg至约3,500mg干重当量/口服剂量单位。在一个实施方案中，所述含草药组合物中标准化问荆制剂的浓度为约1mg至约3,000mg干重当量/口服剂量单位。在一个实施方案中，所述含草药组合物中标准化问荆制剂的浓度为约500mg至约2,500mg干重当量/口服剂量单位。在一个实施方案中，所述含草药组合物中标准化问荆制剂的浓度为约1,000mg至约2,000mg干重当量/口服剂量单位。在一个实施方案中，所述含草药组合物中标准化问荆制剂的浓度为约1,300mg至约1,600mg干重当量/口服剂量单位。
在另一个实施方案中，所述含草药组合物还包含无水胶态二氧化硅，其中含草药组合物的总硅含量为每口服剂量单位约10mg干重当量至约71mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含无水胶态二氧化硅，其中含草药组合物的总硅含量为每口服剂量单位约15mg干重当量至约45mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含无水胶态二氧化硅，其中含草药组合物的总硅含量为每口服剂量单位约28mg干重当量至约34mg干重当量。
在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂还包含占问荆制剂总干重的约0.01％至约3％的总黄酮类，其中总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂还包含占问荆制剂总干重的约0.1％至约2.5％的总黄酮类(以异槲皮苷来表示)。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂还包含占问荆制剂总干重的约0.5％至约1.5％的总黄酮类，其中总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂还包含占问荆制剂总干重的至少约0.8％的总黄酮类，其中总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。
在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含磷，其中磷浓度为每口服剂量单位约5mg干重当量至约60mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含磷，其中磷浓度为每口服剂量单位约10mg干重当量至约50mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含磷，其中磷浓度为每口服剂量单位约20mg干重当量至约30mg干重当量。
在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含钙，其中钙浓度为每口服剂量单位约1mg干重当量至约30mg干重当量。在一个实施方案中，权利要求1的含草药组合物还包含钙，其中钙浓度为每口服剂量单位约5mg干重当量至约25mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含钙，其中钙浓度为每口服剂量单位约10mg干重当量至约20mg干重当量。
在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含镁，其中镁浓度为每口服剂量单位约1mg干重当量至约30mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含镁，其中镁浓度为每口服剂量单位约5mg干重当量至约25mg干重当量。在一个实施方案中，所述含草药组合物还包含镁，其中镁浓度为每口服剂量单位约10mg干重当量至约20mg干重当量。
在一个实施方案中，本发明提供含草药组合物，它包含刺籽鱼木茎/皮制剂，其浓度至少约为3,000mg干重当量/口服剂量单位；标准化问荆茎提取物制剂，其硅含量占问荆茎提取物制剂总干重的至少约3％，其中标准化问荆茎提取物制剂的浓度至少约为1,500mg干重当量/口服剂量单位；总硅浓度至少约为32.5mg干重当量/口服剂量单位；磷浓度至少约为24.9mg干重当量/口服剂量单位；镁浓度至少约为14.5mg干重当量/口服剂量单位；钙浓度至少约为16.3mg干重当量/口服剂量单位。
在另一个实施方案中，本发明提供含草药组合物，它包含刺籽鱼木茎/皮制剂和标准化问荆草药制剂，其总黄酮类含量占问荆制剂总干重的约0.01％至约3％，其中总黄酮类含量以异槲皮苷来表示，其中含草药组合物配制成口服剂量单位。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂还包含占问荆制剂总干重的约0.1％至约2.5％的总黄酮类(以异槲皮苷来表示)。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂包含占问荆制剂总干重的约0.5％至约1.5％的总黄酮类，其中总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。在一个实施方案中，标准化问荆草药制剂包含占问荆制剂总干重的至少约0.8％的总黄酮类，其中总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。
在一个实施方案中，本发明提供药物组合物，它包含本发明的含草药组合物和药学上可接受的载体。
另一方面，本发明提供预防或治疗患者的泌尿生殖系统疾病的方法，该方法包括给予患者本发明的含草药组合物，其用量足以预防或治疗泌尿生殖系统疾病。在一个实施方案中，泌尿生殖系统疾病是尿失禁、遗尿、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎或尿路感染。
附图简述参考附图及以下
，将会更充分地理解本发明，这些附图仅用于说明性目的图1是柱状图，表示在基于草药的乳膏剂治疗尿失禁的临床评价中，“严重影响”回答的百分率。
图2是柱状图，表示在基于草药的片剂治疗尿失禁的临床评价中，“严重影响”回答的百分率。
图3是柱状图，表示在基于草药的片剂治疗尿失禁的临床评价中，“严重影响”回答的百分率。
图4-图11是柱状图，表示在基于草药的片剂治疗尿失禁和膀胱过度活跃的临床评价中，“影响”回答的百分率。
图12是柱状图，表示经不同基于草药的片剂的3个月治疗后，尿失禁和膀胱过度活跃症状的病人下降率(％)。
发明详述因此可以理解，本发明的某些方面、方式、实施方案、改动和特征在不同水平上详细描述如下，以便理解本发明的实质。一般而言，这样的说明提供了有益的含草药组合物、这些组合物与其它膳食补充组合物的组合、以及制备和使用所述组合物的相关方法。
因此，本发明各方面涉及某些具体的基于草药的组合物在预防或治疗尿失禁相关疾病、损伤或病症中的治疗性或预防性用途。因此，说明这些方面的各具体实施方案如下。
可以理解，本文所述疾病的治疗或预防的不同方式可视为“基本的”，包括总的治疗或预防，也包括小于总的治疗或预防，并且其中达到某些生物或医学相关结果。
定义本文所用的“患者”优选哺乳动物例如人，但也可以是动物，例如驯养动物(例如狗、猫等)、农场动物(例如牛、羊、猪、马等)和实验室动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠等)。
本文所用的组合物的“有效量”是足以达到所需治疗效果和/或预防效果的量，例如，导致预防或减少待治疗疾病的相关症状的量。给予患者的组合物的用量取决于疾病类型和严重程度以及个体特性，例如一般健康状况、年龄、性别、体重和对药物的耐受性。它也取决于疾病的程度、严重程度和类型。技术人员能够根据这些因素和其它因素来确定合适剂量。通常，本发明组合物的有效量足以达到治疗效果或预防效果。
有利的是，将口服组合物配制成剂量单位形式，便于给药和剂量的均一性。本文所用的剂量单位形式是指适于作为统一剂量给予待治疗患者的物理上离散的单位；各单位含有经计算可产生所需疗效的预定量活性组合物以及所需的药用载体。本发明剂量单位形式的规格取决于膳食补充的独特特性和欲达到的具体疗效，以及本领域制备用于治疗个体的所述活性组合物的固有局限性。药物组合物可装入容器、包装或分配器中，并附有给药说明书。通常，口服剂量是每日服用两次至四次，直到症状明显得到改善。本发明的组合物也可与一种或多种其它治疗用组合物一起给予。
刺籽鱼木是中等大小的乔木，高度超过15米；它是以公元前一世纪希腊博物学家和医生cratevas(Krateuas)的名字来命名的。该树广布印度，多分枝，枝头有光滑三出复叶，在3-5月(南部地区更早)盛花期看上去非常壮观。据报道，树皮可用作镇痛药、解热药、镇静药、体质改善药和滋补药。
问荆(植物学异名和通用名称包括例如Horsetail；Shave-grass；Bottle-brush；Paddock-pipes；Dutch Rushes；Pewterwort；Shavegrass；pewterwort；bottlebrush；horsetail rush；paddock-pipes；Dutch rushes；mare′s tail)是欧洲草药，生长在潮湿处，广布世界温带地区，在南斯拉夫有栽培。它是多年生植物，常见于北美和欧亚大陆的潮湿壤土或沙土。整个植物界没有一种草药象问荆那样富含硅。木贼属(Equisetum)可入药。营养茎(sterile stem)在夏季收获并干燥。当果柄干掉后出现枯茎(barren stem)，枯茎可以入药，全茎都可以入药，切取根以上部分。该草药可鲜用或干燥后使用，但是据说鲜用效果最好。由此制备液体提取物。植物的灰分也可以入药。
本申请引用的参考文献都通过引用全部结合到本文中。
本发明的含草药组合物本发明提供用于预防或治疗泌尿生殖系统疾病的方法的含草药组合物，所述疾病例如尿失禁、遗尿(例如尿床)、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎和尿路感染(在下文称为“UTI”)。具体地讲，本发明鉴定出含有刺籽鱼木和问荆的组合物，该组合物可用于预防和治疗泌尿生殖系统疾病。在本发明的一个实施方案中，所述含草药组合物含有刺籽鱼木茎/皮提取物和问荆草药。
在本发明的一个实施方案中，本发明的含草药组合物是包含在干法给药系统中的口服补充剂，例如片剂、干粉剂和膳食替代干粉合剂。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物是包含在液体给药系统中的口服补充剂，例如胶囊剂、胶囊形片剂或饮料。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物是包含在控释溶媒中的口服补充剂，例如片剂、胶囊形片剂和胶囊剂。
在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约6,000mg干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约4,000mg干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约2,500mg至约3,500mg干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物/口服剂量单位。刺籽鱼木茎/皮提取物是用刺籽鱼木草药的茎和皮部分制备的提取物。
在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约6,000mg干重当量刺籽鱼木茎提取物/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约4,000mg干重当量刺籽鱼木茎提取物/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约2,500mg至约3,500mg干重当量刺籽鱼木茎提取物/口服剂量单位。
在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约6,000mg干重当量刺籽鱼木皮提取物/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约4,000mg干重当量刺籽鱼木皮提取物/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约2,500mg至约3,500mg干重当量刺籽鱼木皮提取物/口服剂量单位。
为了制备本发明的含草药组合物，将刺籽鱼木的皮和茎与刺籽鱼木的其它部分分开并干燥。经过干燥的刺籽鱼木的皮和茎用70％乙醇/水萃取。再将液体萃取液浓缩到10∶1的比例。用麦芽糊精作为赋形剂。最终产物，即用于本发明含草药组合物的刺籽鱼木茎/皮提取物，是褐色至深褐色粉末。
在本发明的另一个实施方案中，本发明含草药组合物的问荆草药制剂成分来源于问荆草药的叶片。在本发明的一个实施方案中，本发明含草药组合物的问荆草药制剂成分来源于问荆草药的茎。在本发明的另一个实施方案中，本发明含草药组合物的问荆草药制剂成分来源于问荆草药植物部分的混合物。在本发明的另一个实施方案中，本发明含草药组合物的问荆草药制剂成分来源于该植物地上的所有部分。在一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1mg至约3,000mg干重当量问荆草药制剂/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约500mg至约2,500mg干重当量问荆草药制剂/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,000mg至约2,000mg干重当量问荆草药制剂/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1,300mg至约1,600mg干重当量问荆草药制剂/口服剂量单位。
经过鉴定，硅是问荆草药生物活性的贡献者。问荆草药的非标准化制剂通常含有的硅占制剂总干重的约1.2％至约6.9％。在本发明的一方面，已经知道，问荆草药制剂中各批次间的硅含量差异对本发明组合物的生物活性有负面影响。本发明通过提供具有优化、标准化硅含量的问荆草药制剂，解决了这一难题。因此，在本发明的一个实施方案中，本发明含有草药的制剂中问荆草药制剂的硅含量是经过标准化的。标准化问荆草药制剂的使用是有利的，因为减少了硅的批间差异，因此本发明的组合物得到更一致的预防或治疗效果。在一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有的硅占问荆草药制剂总干重的约3％至约13％。在另一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有的硅占问荆草药制剂总干重的约5％至约10％。在另一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有的硅占问荆草药制剂总干重的至少约6％。
除了硅之外，问荆还含有约5％的皂苷(称为问荆皂苷)和几种黄酮糖苷(亦称黄酮类)，包括异槲皮苷、木犀草苷和问荆苷。异槲皮苷(亦称异槲皮素；槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷；4H-1-苯并吡喃-4-酮，2-(3，4-二羟基-苯基)-3-(β-D-呋喃葡萄糖基氧基)-5，7-二羟基-)。黄酮类例如异槲皮苷，具有重要的药理学特性。许多黄酮类是利尿剂，某些黄酮类是解痉药、抗炎药、抗菌药、甚至是抗肿瘤药。然而，黄酮类作为一类药物来说主要作用于血管系统。黄酮糖苷和皂苷联用，可解释问荆的利尿作用。
在本发明的另一方面，已经知道，问荆草药制剂中总黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的各批次间的差异对本发明组合物的生物活性有负面影响。本发明通过提供具有优化、标准化总黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的问荆草药制剂，解决了这一难题。因此，在本发明的一个实施方案中，本发明含有草药的制剂中问荆草药制剂的总黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)是经过标准化的。标准化问荆草药制剂的使用是有利的，因为减少了总黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的批间差异，因此本发明的组合物得到更一致的预防或治疗效果。在一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有占问荆草药制剂总干重的约0.01％的黄酮类至约3％的黄酮类，其中总黄酮类以异槲皮苷当量计。在另一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有的黄酮类占问荆草药制剂总干重的约0.1％的黄酮类至约2.5％，其中总黄酮类以异槲皮苷当量计。在另一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有占问荆草药制剂总干重的约0.5％的黄酮类至约1.5％的黄酮类，其中总黄酮类以异槲皮苷当量计。在另一个实施方案中，问荆草药制剂经过标准化后，含有的黄酮类占问荆草药制剂总干重的至少约0.8％，其中总黄酮类以异槲皮苷当量计。
在一个实施方案中，使用硅含量满足最低硅要求(例如3％硅)的原料，通过溶剂萃取工艺，使问荆草药制剂的有机硅含量标准化。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的问荆草药制剂来源于问荆草药的茎并且经过硅含量标准化，即问荆茎提取物制剂经过标准化。简而言之，从植株上切取问荆草药的茎部分并干燥。再通过HPLC分析测定它们最低具有2.5％的硅含量，才能接受使之进行萃取工艺。用65％(v/v)乙醇/水的萃取溶剂得到萃取物。萃取物浓缩至约4∶1的比例。再通过HPLC，测定萃取物最低具有3％的硅含量。最终萃取物的干燥浓缩物外观为褐色细粉，具有特征性气味和味道。
在另一个实施方案中，通过溶剂萃取工艺，使问荆草药制剂的有机硅含量标准化。简而言之，从植株上切取问荆草药的茎部分并干燥。对原料草药进行形态学检查(包含显微特征和目视特征)，确保使用正确物种(例如用存档的经鉴定的凭证标本进行物种鉴定)。用热水(水温介于约50℃和约100℃之间)作为溶剂，得到萃取物。萃取物浓缩至约5∶1的比例。再干燥萃取物。通过紫外-可见光分光光度测定法，测试萃取物最低具有3％的硅含量(用二氧化硅作为参考物质)。如果萃取物在所需标准之外，用同样经过上述工艺的干燥萃取物对其进行滴定。最终萃取物的干燥浓缩物外观为黄褐色粉末。
在一个实施方案中，本发明含草药组合物的问荆草药制剂来源于问荆草药的茎并且经过总黄酮类含量标准化，即问荆茎提取物制剂经过标准化。
在另一个实施方案中，通过溶剂萃取工艺，使问荆草药制剂的黄酮类(以异槲皮苷来表示)含量标准化。简而言之，从植株上切取问荆草药的茎部分并干燥。再经TLC鉴定。(用异槲皮苷作为参考物质)。对原料草药进行形态学检查(包含显微特征和目视特征)，确保使用正确物种(例如用存档的经鉴定的凭证标本进行物种鉴定)。用热水(水温介于约50℃和约100℃之间)作为溶剂，得到萃取物。萃取物浓缩至约5∶1的比例。再干燥萃取物。通过紫外-可见光分光光度测定法，测试萃取物最低具有约0.01％的异槲皮苷(用异槲皮苷作为参考物质)。如果萃取物在所需标准之外，用同样经过上述工艺的干燥萃取物对其进行滴定。最终萃取物的干燥浓缩物外观为黄褐色粉末。
在一个实施方案中，用上述方法，使问荆草药制剂的有机硅含量和黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)标准化。
在本发明的一方面，本发明的含草药组合物含有刺籽鱼木茎/皮提取物和问荆草药制剂和胶态无水二氧化硅。额外的硅有助于泌尿生殖组织的维持、加固和稳定性。在一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约10mg干重当量至约71mg干重当量的总硅/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约15mg干重当量至约45mg干重当量的总硅/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约28mg干重当量至约34mg干重当量的总硅/口服剂量单位。
在本发明的另一方面，本发明的含草药组合物含有磷。在一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约5mg干重当量的磷至约60mg干重当量的磷/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约10mg干重当量的磷至约50mg干重当量的磷/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约20mg干重当量的磷至约30mg干重当量的磷/口服剂量单位。
在本发明的另一方面，本发明的含草药组合物含有钙。在一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1mg干重当量的钙至约30mg干重当量的钙/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约5mg干重当量的钙至约25mg干重当量的钙/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约10mg干重当量的钙至约20mg干重当量的钙/口服剂量单位。
在本发明的另一方面，本发明的含草药组合物含有镁。在一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约1mg干重当量的镁至约30mg干重当量的镁/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约5mg干重当量的镁至约25mg干重当量的镁/口服剂量单位。在另一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有约10mg干重当量的镁至约20mg干重当量的镁/口服剂量单位。
在另一个实施方案中，使用乳膏剂形式的本发明含草药组合物。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1mg至约100mg干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约10mg至约60mg干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约40mg至约60mg干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物。
在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1mg至约60mg干重当量问荆草药。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约5mg至约40mg干重当量问荆草药。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约10mg至约30mg干重当量问荆草药。
在本发明的另一个实施方案中，所述含草药组合物含有橙皮油。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1mg至约30mg橙皮油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约5mg至约25mg无水橙皮油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约8mg至约12mg橙皮油。
在本发明的一个实施方案中，所述含草药组合物含有雪松(Juniperus virginiana，Cedarwood)茎精油。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1μg至约1,000μg雪松(J.virginiana)茎精油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约250μg至约750μg雪松茎精油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约400μg至约600μg雪松茎精油。
在本发明的一个实施方案中，所述含草药组合物含有没药油。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1μg至约1,000μg没药油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约250μg至约750μg没药油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约400μg至约600μg没药油。
在本发明的一个实施方案中，所述含草药组合物含有橙花油。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1μg至约1,000μg橙花油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约250μg至约750μg橙花油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约400μg至约600μg橙花油。
在本发明的一个实施方案中，所述含草药组合物含有丝柏(Cupressus sempervirens，Cypress)叶油。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1μg至约1,000μg丝柏叶油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约50μg至约500μg丝柏叶油。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约75μg至约125μg丝柏叶油。
在本发明的另一个实施方案中，所述含草药组合物含有醋酸d-α-生育酚(天然维生素E)。在本发明的一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有醋酸d-α-生育酚。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约0.1mg至约25mg醋酸d-α-生育酚。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1mg至约10mg无水醋酸d-α-生育酚。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约4mg至约6mg醋酸d-α-生育酚。
在本发明的另一个实施方案中，所述含草药组合物含有二偶氮利定脲。在本发明的一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有二偶氮利定脲。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约0.1mg至约10mg二偶氮利定脲。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1mg至约5mg无水二偶氮利定脲。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约3mg至约3.5mg二偶氮利定脲。
在本发明的另一个实施方案中，所述含草药组合物含有羟基苯甲酸酯。在一个实施方案中，本发明的含草药组合物含有羟基苯甲酸酯。在一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约0.1mg至约5mg羟基苯甲酸酯。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约0.5mg至约3mg无水羟基苯甲酸酯。在另一个实施方案中，本发明含草药组合物的每克乳膏剂中含有约1mg至约2mg羟基苯甲酸酯。
在本发明的另一个实施方案中，所述含草药组合物含有刺籽鱼木茎/皮提取物；和问荆叶；橙皮油；雪松茎；没药油；橙花油；丝柏叶；醋酸d-α-生育酚；二偶氮利定脲；和羟基苯甲酸酯。
本发明组合物的药学特性和用途本发明提供用于预防或治疗泌尿生殖系统疾病的方法的含草药组合物，所述疾病例如尿失禁、遗尿(例如尿床)、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎和UTI。据认为，鱼木(Crateva)和木贼(Equisetum)中存在的主要活性成分是皂苷和植物甾醇类。鱼木含有黄酮类、芥子油苷和植物甾醇(羽扇豆醇)，而木贼含有矿物质、硅石、黄酮类(异槲皮素、毛地黄黄酮和山奈黄酮醇)和皂苷(木贼镰菌素)。Nadkarni K.M.等，Indian Materia.Medica.Bombay Popular Prakashan；British HerbalPharmacopeia.PublBritish Herbal Medicine Association 1983；Bone K.Clinical Applications of Ayurvedic and Chinese Herbs.Monographs forthe western herbal practitioner.Phytotherapy Press，Warwick，Qld，Australia 1997；The German Commission E Monographs，1998；D′Agostino M.等，Boll.Soc.Ital.Biol.Sper.，30；60(12)2241-5(1984)；Pengelly A.The constituents of medicinal plantsan introduction to thechemistry and therapeutics of herbal medicine.Sunflower Herbal第2版，Merriwa，NSW，Australia，1996；Lakshmi V.等，Planta Medica，32214-216(1977)。
本发明的含草药组合物可用于预防和治疗尿结石。已经知道鱼木和木贼能以降低患结石可能性的方式改变尿液电解质。VaralakshmiP等，J.Ethnopharmacology，28313-321(1990)；Anand R.等，Indian J.Pharmacology，27265-268(1995)；Grases F.等，Int.Urol.Nephrol.，26(5)507-511(1994)。已经发现，鱼木也抑制小肠Na-K-ATP酶。Varalakshmi P.等，J.Ethnopharmacology，3167-73(1991)。这些效应可能主要是因为羽扇豆醇的存在。大量研究表明，羽扇豆醇具有抗草尿酸和抗钙效果(anti-calcuric effect)，导致结石自发通过增加并减轻症状。Varalakshmi P等，J.Ethnopharmacology，28313-321(1990)；Anand R.等，Indian J.Pharmacology，27265-268(1995)；Malini M.M.等，Jpn.J.Med.Sci.Biol.，48(5-6)211-20(1995)；Lakshmi V.等，PlantaMedica，32214-216(1977)。
假设结石这样通过是因药物对平滑肌的紧张性收缩作用而引起。Varalakshmi P.等，J.Ethnopharmacology，28313-321(1990)；AnandR.等，Indian J.Pharmacology，27265-268(1995)；Deshpande P.J.等，Indian J.Med.Res.，76(增刊)46-53(1982)。木贼也有助于通过类似机制用于尿失禁。已有记载称木贼中发现的山奈黄酮醇、毛地黄黄酮和异槲皮素能抑制黄嘌呤氧化酶，从而抑制尿结石的形成。Nagao A.等，Biosci.Biotechnol.Biochem.，63(10)1787-90(1999)。这些草药的作用能改善膀胱壁的张力。在1982年，Deshpanae等报道，鱼木对神经原性膀胱和前列腺切除术后膀胱张力缺乏有益。Deshpande P.J.等，Indian J.Med.Res.，76(增刊)46-53(1982)。
本发明的含草药组合物可用于预防和治疗失禁和良性前列腺肥大和尿失禁。给予鱼木，对良性前列腺肥大所致低张力性膀胱的男性尿频、尿失禁、排尿疼痛和尿潴留等症状都有明显缓解。DeshpandeP.J.等，Indian J.Med.Res.，76(增刊)46-53(1982)。鱼木的作用是增加膀胱张力和尿液的逼出压力，因此有助于有效排空。Deshpande P.J.等，Indian J.Med.Res.，76(增刊)46-53(1982)。该论文中所分析的膀胱内压测量研究也表明，鱼木使膀胱张力正常并显著减少了残余尿液的体积。因此，本发明的含草药组合物可用于预防和治疗尿失禁。
动物实验也支持了这些结果，在所述动物实验中鱼木显示出在体外增加平滑肌和骨骼肌的张力。Das P.K.等，J.Res.Ind.Med.，949(1974)。动物研究表明，与原先的曲线相比，用鱼木治疗40天导致膀胱高张力曲线。Das P.K.等，J.Res.Ind.Med.，949(1974)。
木贼富含硅酸和硅酸盐。硅石支持结缔组织的再生。Chevallier，A.，The Encyclopedia of Medicinal Plants，(Horn V.和Weil，C.编著)DorlingKindersley Ltd.，London(1996)。因此，本发明提供含草药组合物，用于预防或治疗泌尿生殖系统疾病，例如尿失禁、遗尿(例如尿床)、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎和UTI。
本发明的含草药组合物可用于预防和治疗UTI和膀胱炎。在大鼠研究中，已经知道木贼科的某些物种具有类似于其它药物(例如氢氯噻嗪)的利尿作用，表现出对钠、钾和氯离子的排泄。Perez GutierrezR.M.等，J.Ethnopharmacol.，14(2-3)269-272(1985)；D′Agostino M.等，Boll.Soc.Ital.Biol.Sper.，60(12)2241-5(1984)。新近用大鼠进行的研究也证明了该药对尿石病的有益效果。Grases F.等，Int.Urol.Nephrol.，26(5)507-511(1994)。这些作者提出，这样的结果是因为其成分(即皂苷)的抗菌作用。有趣的是，鱼木还具有抗炎和抗菌特性。NadkarniK.M.等，Indian Materia Medica.Bombay Popular Prakashan；Bone K.Clinical Applications of Ayurvedic and Chinese Herbs.Monographs forthe western herbal practitioner.Phytotherapy Press，Warwick，Qld，Australia 1997；Salvat A.等，Lett.Appl.Microbiology，32(5)293-7(2001)；Xu HX等，Phytother.Res.，15(1)39-43(2001)；Geetha T.等，Gen.Pharmacol.，32(4)495-7(1999)；Geetha T.等，J.Ethnopharmacol.，76(1)77-80(2001)。结合鱼木对平滑肌的张力效应，认为它有助于膀胱排空，因此减少残余尿液，而已知残余尿液对UTI起作用。DeshpandeP.J.等，Indian J.Med.Res.，76(增刊)46-53(1982)。
已知木贼中发现的异槲皮素通过抑制炎性前列腺素而具有抗炎效果，尽管认为鱼木通过不同机制产生抗炎效果。D′Agostino M.等，Boll.Soc.Ital.Biol.Sper.，30，60(12)2241-5(1984)；Geetha T.等，Gen.Pharmacol.，32(4)495-7(1999)。对慢性尿路感染的积极作用很可能抗菌和抗炎两方面共同起作用。
本发明的含草药组合物可用于预防和治疗尿失禁、UTI和遗尿。已有证据表明，使用雪松可治疗尿失禁、遗尿并改善膀胱张力以及膀胱感染、排尿困难和膀胱炎。Tisserand和Balacs，Essential Oil Safety.A Guide for Health Care Professionals.Churchill Livingstone，U.K.，1995；28-29，31，33-34；Price，S.Practical Aromatherapy.Thorsons，Harper Collins Publishers，California，U.S.，1983；157-8，170-171，174，185；Davis，P.Aromatherapy An A-Z.The C.W.Daniel Company，Essex，England，1998；194；Valnet，J.The Practice of Aromatherapy.Saffron Walden，The C.W.Daniel Company，Essex，England，1980；120-121；Price，S.The Aromatherapy Workbook.Thorsons(HarperCollins)，California，USA，1993；67；Caddy，R.，Aromatherapy EssentialOils in Colour.Amberwood Publishering Ltd，East Horsley，Surrey，England，1997；14。已记载的这些可能产生该效应的特性是解痉、利尿、抗菌和收敛。
据记载，丝柏作为解痉药、收敛药、抗菌药、除臭剂、利尿剂和滋补剂，它可促进从肾脏到膀胱区的静脉循环，改善膀胱张力并有助于治疗尿失禁和遗尿。Tisserand和Balacs，Essential Oil Safety.AGuide for Health Care Professionals.Churchill Livingstone，U.K.，1995；28-29，31，33-34；Valnet，J.The Practice of Aromatherapy.SaffronWalden，The C.W.Daniel Company，Essex，England，1980；120-121，Holmes，P.The Energetics of Western Herbs.Artemis Press，Boulder，Colorado，USA，1989；567-569，792；Damian，P&K.AromatherapyScent和Psyche.Healing Arts Press，Rochester，Vermont，Canada，1995；187-188；Price，S.The Aromatherapy Workbook.Thorsons(HarperCollins)，California，USA，1993；67；Chidell，L.Aromatherapy.ADefinitive Guide to Essential Oils.Hodder和Stoughton Ltd，Kent，UK，1992；23-24，80-81；Keller，E.The Compete Home Guide toAromatherapy.H J Kramer，Inc，Tiburon，California，USA，1991；178-179。
近期文献介绍了没药作为收敛药和抗菌药，可对泌尿系统粘膜产生缓和作用并促进组织痊愈。Battaglia，S.The Complete Guide toAromatherapy.The Perfect Potion Pty Ltd，Virginia，Brisbane，Qld，Australia，1995；110-113，116，150-151，158-159，182-183，184-185，187；Lawless，J.The Encyclopaedia of Essential Oils.(1992)ElementBooks for Jacaranda Wiley，Ltd，Australia，1992；76-77，88-89，135-136。据记录，橙皮油和橙花油具有解痉、抗菌和除臭效果。6，10；Sheppard-Hanger.The Aromatherapy Practitioner Manual.AquariusPublishing，Willetton，Western Australia，1995；183；Sellar，W.TheDirectory of Essential Oils.Saffron Walden，The C.W.Daniel Company，Essex，England，1992；50-51，106-107；Keller，E.The Compete HomeGuide to Aromatherapy.H J Kramer，Inc，Tiburon，California，USA，1991；178-179。
本发明的含草药组合物可用于预防和治疗前列腺疾病，例如良性前列腺增生。也推荐精油用于男性生殖健康，说明对男人前列腺的可能效果。Battaglia，S.The Complete Guide to Aromatherapy.ThePerfect Potion Pty Ltd，Virginia，Brisbane，Qld，Australia，1995；110-113，116，150-151，158-159，182-183，184-185，187；Price，S.PracticalAromatherapy.Thorsons，Harper Collins Publishers，California，U.S.，1983；157-8，170-171，174，185；Lawless，J.The Encyclopaedia ofEssential Oils.(1992)Element Books for Jacaranda Wiley，Ltd，Australia，1992；76-77，88-89，135-136；Valnet，J.The Practice of Aromatherapy.Saffron Walden，The C.W.Daniel Company，Essex，England，1980；120-121。
常用于尿失禁的某些处方药例如盐酸奥昔布宁，抑制乙酰胆碱对平滑肌的蕈毒作用，产生直接的抗痉挛作用，也就是说，它们能松弛逼尿肌。Tapp A.J.S.等，Brit.J.Obstetrics and Gynecology；97521-6(1990)。该解痉效果是先前用于尿失禁患者的药物抗胆碱能效果所需要的。虽然没有提供详细说明，但是这些精油的解痉效果也可产生类似于目前处方药的作用。
据记载，与目前更成熟的利尿剂相比，草药利尿剂能增加通过肾脏的血流量，而没有肾单位远端小管的再吸收，并且与电解质(除钾以外)损失有关。Mills和Bone，Principles and Practice of Phytotherapy.Churchill Livingstone，2000；35，220-222。而且，多尿通常不会因使用草药利尿剂而引起。Mills和Bone，Principles and Practice ofPhytotherapy.Churchill Livingstone，2000；35，220-222。这可能是因为这些草药精油极大刺激了通向肾脏的血流量，导致尿量增加或能更有效地产生尿液。该效果当与排泄时的膀胱完全排空结合在一起时，可以通过连续滴漏而使尿体积最小。
药物组合物和制剂本发明的含草药组合物可单独使用或与具有良好给药特性(即适于给予患者)的药学上可接受的组合物、溶媒或辅料配制在一起。这样的组合物通常包含本发明的含草药组合物和药学上可接受的载体。本文所用的“药学上可接受的载体”是指包括与药物给予相配伍的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌组合物、等渗和吸收延迟组合物等。合适的载体描述于最新出版的Remington′sPharmaceutical Sciences，该文献是本领域标准参考书，所述文献通过引用结合到本文中。这类载体或稀释剂的优选实例包括但不限于水、盐水、林格液、葡萄糖溶液和5％人血清白蛋白。这类介质和药用活性物的组合物的使用是本领域众所周知的。除了与活性组合物不相容的任何常规介质或组合物之外，考虑了在组合物中使用常规介质或组合物。补充的活性组合物也可掺入到组合物中。
本发明的药物组合物配制成与其计划给药途径相容。给药途径的实例包括例如口服；经皮(即局部)和经粘膜给药。可以用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠调节pH。
口服组合物通常包含惰性稀释剂或可食用载体。它们可以包裹在明胶胶囊剂、胶囊形片剂中或压制成片剂。为了进行口服治疗性给药，本发明的含草药组合物可掺入赋形剂并采用片剂、糖锭剂或胶囊剂形式。也可采用液体载体制备口服组合物，用作漱口剂，其中液体载体中的组合物可用于口服、漱口和吐出或吞服。药物相容性的粘合组合物和/或辅助材料可作为组合物的组成部分。片剂、丸剂、胶囊剂、糖锭剂等可含有任何以下成分或相似性质的组合物粘合剂，例如微晶纤维素、西黄蓍胶或明胶；赋形剂，例如淀粉或乳糖；崩解组合物，例如海藻酸、羧甲基淀粉钠(Primogel)或玉米淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂，例如胶态二氧化硅；甜味组合物，例如蔗糖或糖精；或矫味组合物，例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味矫味剂。本发明的含草药组合物也可配制成局部用乳膏剂，用于经皮或经粘膜给予。
在一个实施方案中，本发明的含草药组合物与载体一起制备，这样可保护组合物以免从机体内快速消除，例如控释制剂，包括植入物和微胶囊给药体系。可使用生物可降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备方法或所述制剂是本领域技术人员显而易见的。材料是市售的，可得自Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc。
药物组合物可装入容器、包装或分配器中，并附有给药说明书。
参考以下实施例，进一步详细限定本发明，所述实施例不得视为对本发明范围的限制。本领域技术人员显而易见的是，只要不偏离本发明的目的和利益，可以在材料与方法上进行许多修改。
实施例实施例1.含有草药的天然治疗性乳膏剂用于尿失禁的临床试验概述进行研究，以调查含有草药的天然治疗性膀胱控制乳膏剂对缓解尿失禁(在下文称“膀胱控制乳膏剂”或膀胱控制乳膏剂试验制剂)的有效性。所测试的膀胱控制乳膏剂是天然含有草药的乳膏制剂。试验制剂主要含有精油草药活性物，例如甜橙(Citrus sinensis)精油、雪松茎油、没药(Commiphora myrrha)油、酸橙(Citrus aurantium)油(橙花油)和丝柏(Cypress)叶油，并且按照精油给药的原理配制。Battaglia，S.，载于The Complete Guide to Aromatherapy.The Perfect Potion PtyLtd，Virginia，Brisbane，Qld，Australia，pp110-113；116；150-151；158-159；182-183；184-185；187(1995)；Chidell，L.，In Aromatherapy.ADefinitive Guide to Essential Oils.Hodder和Stoughton Ltd，Kent，UK，第23-24页；第80-81页(1992)；Keller，E.，载于The Complete HomeGuide to Aromatherapy，H J Kramer，Inc，Tiburon，California，USA，第178-179页(1991)。
材料与方法研究设计按照TGA的“澳大利亚良好临床研究实践指南(Guidelines forGood Clincal Research Practice(GCRP)in Australia)”进行研究。该研究已获得澳大利亚天然医疗学院伦理委员会(Australian College ofNatural Medicine Ethics Committee)批准。在澳大利亚天然医疗学院天然疗法诊所(Naturopathic Clinic at the Australian College of NaturalMedicine，Brisbane)进行访谈。通过报纸广告招募到13名有尿失禁和/或压迫性尿失禁症状的妇女。3名妇女因个人原因在最初几周内从研究中退出。剩下10名完成了为期3个月的研究。认为经常有尿失禁的妇女符合进入本研究，如果她们满足下列标准的话她们近期(在最近12个月内)没有进行外科手术，尤其是子宫切除术或下垂修补术；她们近期(在最近12个月内)没有分娩；她们在最近1个月内没有用药物治疗失禁症状；她们没有任何严重健康问题，例如糖尿病、心脏病、胰腺疾病、肝病或慢性炎症；她们近期没有进行精神病治疗；和她们没有罹患影响经皮给药的皮肤病。
要求这些妇女保持近期膳食模式，但是在试验期间并不提供任何有关膳食的建议。也记录了参与者的锻炼模式，其中妇女参加某种形式的锻炼至少每周3次被认为是积极的。
要求参与者用5克乳膏剂涂抹身体，每天两次，共3个月。在开始治疗前(第0月)和治疗后每个月(第1、2和3月)，记录平均每天和每夜排尿频率并用尿失禁影响问卷(Incontinence ImpactQuestionnaire，IIQ)和泌尿生殖问题调查表(Urogenital DistressInventory，UDI)的简短版本来评价疗效。IIQ简短版本(6个问题)评价尿失禁对干家务活、身体运动和社交活动等日常活动的影响。UDI中的问题具体涉及尿失禁的身体各方面。所有问题都按0-3分来评价(0＝不受影响，1＝轻微影响，2＝中度影响，3＝严重影响)。两份问卷都是经过标准化的疾病具体问卷，可提供对年长者令人烦恼的尿失禁的有效检查水平。Robinson等，Obstetrics and Gynecology，912，224-8(1998)。这些问卷的结果用配对t-检验进行分析。
试验制剂按照GMP指南，在TGA批准的生产地点制备膀胱控制乳膏剂试验制剂。每克膀胱控制乳膏剂试验制剂含有相当于干的30mg刺籽鱼木茎/皮提取物的提取物；和20mg问荆(Horsetail)叶；以及精油10mg橙皮油；500μg雪松(Cedarwood)茎；500μg没药油；500μg橙花油；100μg丝柏(Cypress)叶；5mg醋酸d-α-生育酚(天然维生素E)；3.3mg二偶氮利定脲；和1.54mg总羟基苯甲酸酯。已知该制剂中使用的精油没有毒性、刺激性或致敏性的。
结果和讨论8名妇女年龄介于60-78岁，其它2名妇女明显更年轻，分别为27岁和42岁。体重指数(BMI)范围为24.4-31.9，平均为28.5。这些妇女在研究期间体重无变化。
所有妇女都生过至少一个孩子，全组平均有2.0个孩子。所有妇女都经历过至少10年的压力性或欲望性尿失禁症状。3名妇女做过外科手术，或者是插入吊带或者是下垂修复。参与者在本研究之前或期间都没有采用骨盆底锻炼。
开始治疗前，所有妇女都报告说她们有严重漏尿问题。漏尿的原因通常是尿急感、身体运动的结果或只是连续漏尿。在研究期间，该治疗对体症的有效性的每月结果见表1和图1。
表1.泌尿生殖问题调查表
研究结果表明，对尿急和活动相关的漏尿反应有明显正面变化。在治疗的头一个月就观察到这些效果，并在3个月内持续改善。在持续漏尿和难以排空膀胱方面也有改善，尽管这仅仅是在完整的3个月治疗后变得更明显。
然而，值得注意的是，在3个月内对尿频没有明显改变。妇女们都没有下腹或下体疼痛或不适(在研究全程都回答为“不受影响”)，也没有遭受频繁的尿路感染(而尿路感染在失禁患者中很常见)。非活性组(n＝5)与活性组(n＝5)相比，对IIQ和UDI中的问题没有显著性差异。
大多数妇女报告称失禁对她们的生活方式和社交活动有负面影响(在第0月的回答是“中度影响”或“严重影响”)。将开始的回答与第3个月的回答进行比较，表明在干家务活、身体运动和感觉受挫方面有明显的正面改变(参见表2)。
表2.尿失禁影响问卷
在3个月内，有关失禁影响社交活动和情感健康方面的生活质量问题上大体有所改善，但并不显著。在研究期间失禁对娱乐活动或离家外出旅行30分钟的影响没有明显改变。
先前的研究证明失禁对生活质量有负面影响。Peake等，MedAnthropol.Q，13(3)267-85(1999)；Association for Continence Advice，Aust.Continence J.；6(2)15-23(2000)；Robinson等，Obstetrics andGynecology，912，224-8(1998)。本研究表明，在用膀胱控制乳膏剂试验制剂治疗3个月后，在漏尿控制(因尿急和身体运动)和膀胱排空方面有明显改善。该影响不依赖于饮食和锻炼模式。还值得注意的是，当缺乏具体骨盆锻炼时会发生这样的正面反应。
这些结果表明，体症上的改善与改善的自信和日常功能的能力有关。精油与膀胱控制乳膏剂试验制剂的制剂显示出针对泌尿系统并促进对排尿的更好控制。膀胱控制乳膏剂试验制剂可能作用于骨盆底、括约肌或膀胱壁自身的肌肉。对膀胱控制乳膏剂试验制剂的收敛精油的吸收可以是最小的，但能促进对粘膜的抗分泌效应或“张力(toning)”效应。Mills和Bone，In Principles and Practice ofPhytotherapy.Churchill Livingstone，35，第220-222页(2000)。综合看来，膀胱控制乳膏剂试验制剂的收敛和利尿作用可产生“正常”或“常态”尿流，改善对排尿的控制，而且不产生多尿。
表1中一个值得注意的结果就是“因感觉或尿急而漏尿”有明显下降。这种对欲望性尿失禁(“OAB湿”)的明显正面改变，表明制剂一般可用于治疗膀胱过度活跃(OAB)。“OAB湿”和“OAB干”是由膀胱壁肌肉突然不随意收缩所致，产生突然的尿意或尿急的感觉。
实施例2.含有草药的天然治疗性片剂用于尿失禁的临床试验概述进行研究，以调查含有草药的天然治疗性膀胱控制制剂对缓解尿失禁(在下文称“膀胱控制制剂”或膀胱控制试验制剂)的有效性。Steels，E.，Seipel，T.和Rao，A.，Australian Continence Journal(2002)。膀胱控制试验制剂是配制成片剂的天然含有草药的制剂。每片含有相当于干刺籽鱼木茎/皮提取物(3,000mg)的提取物3g，问荆(Horsetail)草药(1,500mg)1.5g和磷酸镁70mg，磷酸氢钙70mg，相当于钙16.3mg，镁14.5mg，磷24.9mg。含有麦芽糊精。
材料与方法研究设计通过报纸广告招募到8名经常有欲望性尿失禁和/或压迫性尿失禁症状的妇女。所有妇女都满足下列标准(a)在最近12个月内没有进行过外科手术，特别是子宫切除术或下垂修补术，(b)没有任何严重健康问题，例如糖尿病、心脏病、胰腺疾病、肝病或慢性炎症，(c)近期没有进行精神病治疗，和(d)在开始研究前的最后1个月内没有用药物治疗失禁症状。
在研究前，参与者都没有进行具体的骨盆锻炼，以改善肌肉张力，尽管都知道这一点。
治疗方案的组成为两片，每日两次(相当于每天12g鱼木和6g木贼)，共12周。在开始治疗前(第0月)和治疗后每个月(第1、2和3月)，记录平均每天和每夜排尿频率并用尿失禁影响问卷(IIQ)和泌尿生殖问题调查表(UDI)的简短版本来评价疗效。IIQ简短版本(6个问题)评价尿失禁对干家务活、身体运动和社交活动等日常活动的影响。UDI中的问题具体涉及尿失禁的身体各方面。所有问题都按0-3分来评价(0＝不受影响，1＝轻微影响，2＝中度影响，3＝严重影响)。两份问卷都是经过标准化的疾病具体问卷，用于检查年长者令人烦恼的尿失禁。Robinson，D.等，Obstetrics and Gynecology，912，224-8(1998)。
研究组由8名妇女组成。7个参与者的年龄介于54-65岁，1个参与者为20岁。该研究组的平均年龄为50岁。6个参与者生过至少2个孩子，而2个参与者没有孩子。这些问卷的结果用配对t-检验进行分析。
试验制剂按照GMP指南，在TGA批准的生产地点制备膀胱控制试验制剂片剂。每片含有草药(刺籽鱼木茎/皮提取物和问荆叶)以及矿物质(磷酸镁和磷酸钙)。按照TGA的“澳大利亚良好临床研究实践指南(GCRP)”进行研究。该研究经澳大利亚天然医疗学院伦理委员会批准。在澳大利亚天然医疗学院天然疗法诊所(Brisbane)进行访谈。
结果和讨论膀胱控制试验制剂对体症的有效性概述于表3和图2。在治疗前，80％参与者报告称她们有活动相关的漏尿问题。经3个月治疗后，降低至40％(图2)。也观察到如下类似结果因尿急引起的漏尿(60％至35％)、尿频的减少(70％至48％)、难以排空膀胱(50％至25％)。治疗之前，50％参与者有过疼痛或不适，但是经过2个月治疗后没有报告这样的症状。治疗后，在回答称少量漏尿的妇女人数中有25％的减少(75％至50％)。
数据分析(配对t-检验)表明，在治疗1个月后，在尿频感方面有明显正面变化(p＝0.040)，并且该变化在研究过程中逐渐持续(第2个月，p＝0.24；第3个月，p＝0.013)。经过3个月的治疗后，在以下方面有明显正面变化尿急性漏尿感(p＝0.024)，因活动所致的漏尿(p＝0.031)和难以排空膀胱(p＝0.052)。而且在开始治疗的头一个月就观察到正面效应。
在研究期间少量漏尿方面的回答有正面趋势，但是并不明显。在治疗2个月后，对下腹或下体疼痛或不适方面也观察到明显的正面回答(p＝0.025)。
表3.泌尿生殖问题调查表
对尿失禁影响问卷的回答见表6和图3。结果表明，参与者感觉尿失禁对其生活质量有明显的负面影响，这是根据对IIQ的7个参数进行评价有50-70％的“受影响评分”(图3)。除了身体运动问题之外(在0-3月间几乎没有变化)，对其它所有参数都有明显下降(至10-25％的范围)。
数据分析(配对t-检验)表明，在3个月治疗后，尿失禁对生活方式和社交活动的影响有所改善，在社交活动(p＝0.04)、娱乐活动(p＝0.017)、情感健康(p＝0.025)和离家外出旅行＞30分钟(p＝0.052)、感觉受挫(p＝0.007)方面都有正面改变。在干家务活和身体运动方面没有变化(表4)。
表4.尿失禁影响问卷
该项研究结果表明，用膀胱控制试验制剂进行3个月治疗，明显(p＞0.05)改善了漏尿控制(因尿急和身体运动所致)、膀胱排空和疼痛或不适。这些结果得到较早研究报告的支持，这些研究表明，用鱼木进行治疗能缓解男性尿失禁、疼痛和尿液潴留。Deshpande P.J.等，Indian J.Med.Res.，76(增刊)46-53(1982)。
乙酰胆碱是参与膀胱排空的主要兴奋性神经递质。常用于尿失禁的某些处方药例如盐酸奥昔布宁，能抑制乙酰胆碱对平滑肌的蕈毒作用，产生直接的抗痉挛作用。这些药物使逼尿肌松弛。Wada Y.等，Arch.Int.Pharmacodyn.Ther.，330(1)76-89(1995)；Tapp A.J.S.等，Brit.J.Obstetrics Gynecology，97521-6(1990)。这些药物也产生不想要的抗胆碱能效应，例如口干、视力模糊和便秘。Pathak AS，Aboseif SR.Overactive BladderDrug therapy versus nerve stimulation.Nat Clin PractUrol，2(7)310-311，2005。目前尚没有既能特异性针对失禁症状、而又对身体的其它部位不具有副作用的药物。这些草药发挥作用的机理尚不清楚，尽管令人感兴趣地注意到在治疗中没有报告副作用，正如抗胆碱能药一样。
实施例3.具有标准化硅含量的含有草药的天然治疗性片剂(制剂2)用于预防和治疗尿失禁和膀胱过度活跃(OAB)的临床试验概述进行研究，以调查供口服给药用的含有草药的天然治疗性膀胱控制制剂(即膀胱控制试验制剂)对缓解尿失禁和膀胱过度活跃的有效性。基本上按照以上实施例2和以下的进一步详述，设计并进行这些研究。膀胱控制试验制剂是配制成片剂的天然含有草药的制剂。
经过鉴定，硅是问荆草药生物活性的贡献者。问荆草药的非标准化制剂通常含有的硅占制剂总干重的约1.2％至约6.9％。在本发明的一方面，已经知道，问荆草药制剂中各批次间的硅含量的差异对本发明组合物的生物活性有负面影响。本发明通过提供具有优化、标准化硅含量的问荆草药制剂，解决了这一难题。因此，在本发明的一个实施方案中，本发明含有草药的制剂中问荆草药制剂的硅含量是经过标准化的。标准化问荆草药制剂的使用是有利的，因为减少了硅的批间差异，因此本发明的组合物得到更一致的预防或治疗效果。
材料与方法试验制剂按照GMP指南，在TGA批准的生产地点制备膀胱控制试验制剂片剂。每片含有草药(刺籽鱼木茎/皮提取物和问荆茎提取物)和矿物质(磷酸镁和磷酸钙和硅)。例如，每片含有以下干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物(3,000mg)，问荆(Horsetail)茎提取物制剂(具有经过标准化的硅含量，占问荆茎提取物制剂(1,500mg)总干重的3％)，胶态无水二氧化硅(50.3mg)，磷酸镁70mg，磷酸氢钙70mg，相当于钙16.3mg，镁14.5mg，磷24.9mg。每片含有41.6mg总硅干重当量。每片含有一些麦芽糊精。
研究设计通过报纸广告招募经常有膀胱过度活跃、欲望性尿失禁和/或压迫性尿失禁症状的人类受试者(男性和女性)。所有人类受试者都满足下列标准(a)在最近12个月内没有进行过外科手术，特别是子宫切除术或下垂修补术，(b)没有任何严重健康问题，例如糖尿病、心脏病、胰腺疾病或肝病，(c)在开始研究前的最后1个月内没有用药物治疗失禁症状。
在研究前，参与者都没有进行具体的骨盆锻炼，以改善肌肉张力。
治疗方案的组成为人类受试者吞服两片膀胱控制试验制剂，每日两次，共12周。在开始治疗前(第0月)和治疗后每个月(第1、2和3月)，记录平均每天和每夜排尿频率并用尿失禁影响问卷和泌尿生殖问题调查表的简短版本来评价疗效。具体涉及尿失禁的身体各方面的UDI问题详见下表5。
表5.泌尿生殖问题调查表
IIQ简短版本(6个问题)评价了尿失禁对干家务活、身体运动和社交活动等日常活动的影响，概述于下表6。
表6.尿失禁影响问卷
所有问题都按0-3分来评价(0＝不受影响，1＝轻微影响，2＝中度影响，3＝严重影响)。两份问卷都是经过标准化的疾病具体问卷，用于检查年长者令人烦恼的尿失禁。Robinson，D.等，Obstetrics andGynecology，912，224-8(1998)。在第0、1、2和3月的白天和夜晚也分析了平均排尿频率，其结果也用配对t-检验进行比较。
用配对t-检验分析了这些问卷的结果。在受试者接受膀胱控制试验制剂前后，对其尿失禁的身体各方面或身体运动或社交活动的所测得的某一个参数进行比较，正面改善按照统计学上的显著差异来定义，即p值＜0.05。在受试者接受膀胱控制试验制剂前后，对涉及尿失禁的身体各方面或身体运动或社交活动的任何参数上的正面改善，证明膀胱控制试验制剂可用于预防或治疗人类受试者的泌尿生殖系统疾病，例如尿失禁；膀胱过度活跃；遗尿；良性前列腺增生；尿结石；膀胱炎；和尿路感染。
结果和讨论统计有3男6女共9名参与者完成研究，平均年龄52岁(范围在41-72岁)。
白天的排尿频率结果表明，在3个月治疗期间，白天的排尿频率稳步减少。参与者需要排空膀胱的次数从每天14次(治疗前)减少到每天10次(1个月后)，每天8.3次(2个月后)和每天6.6次(3个月后)。这表明第0月和随后各月之间有明显减少(第2个月，p＝0.02；第3个月，p＝0.01)。
夜尿频率结果显示，该治疗有效减少了参与者在夜晚排空膀胱的次数。在唤醒方面逐渐减少，从开始的每晚2.7次，减少到2.0次，1.4次和1.0次(分别在第1、2和3个月)。t-检验结果表明，在第0月和第2个月(p＝0.047)和第3个月(p＝0.024)之间频率明显减少。
本研究的大多数参与者报告称夜尿是主要症状，也是参与本研究的原因之一。在生活质量方面的总体改善(讨论如下)显然与以下事实直接相关他们有更长时间的不间断睡眠(从各个方面都能看到)。
泌尿生殖问题调查表大多数参与者所经历的症状(图4)是尿频(约89％)，因尿急所致的漏尿影响78％的参与者，少量漏尿为67％。其它症状包括因活动所致漏尿(56％)，难以排空膀胱(44％)和疼痛或不适(33％)。结果见图5，(作为平均问题回答)，表明所有项目的症状在治疗1个月后都减少，并且在下2个月仍然持续减少。
用配对t-检验分析问卷结果。在2个月治疗后尿频方面发生明显的正面变化，并且在3个月治疗后持续明显变化(分别为p＝0.009，0.011)。在2个月后发生其它明显减少并在3个月治疗后持续明显变化的症状是因尿急而漏尿(分别为p＝0.028，0.016)，难以排空膀胱(分别为p＝0.035，0.081)，和少量漏尿(分别为p＝0.022，0.043)。
尿失禁影响问卷受到尿失禁和OAB最大影响的活动(图6)是身体运动和离家外出旅行超过30分钟(约89％)。78％参与者在干家务活、社交活动、情感健康和感觉受挫方面受影响，而67％参与者在娱乐活动方面受影响。
结果见图7，(作为平均问题回答)，清楚表明生活质量(通过日常活动和社交活动以及情感健康和感觉受挫等方面的难度来评价)受到尿失禁症状的负面影响。平均起来，参与者在4周治疗内其活动较少受到影响(并且最自信)，并且在研究的剩余时间内都报告称有持续改善。
用配对t-检验分析了这些问卷的结果。在尿失禁对生活方式和社交活动的影响方面有所改善，表示为在研究完成时对所有问题的回答都有正面改变。对所有问题的显著改善发生在第2个月(参见表7)。对有关情感健康和感觉受挫方面的问题的明显正面效果表明，治疗改善了生活质量。
在第3月的访谈中也询问了参与者治疗是否改善他们的生活质量。总体上，67％报告在QOL上有改善。这些结果清楚表明参与者在QOL上的明显改善，这些参与者的尿失禁和OAB症状(包括尿频、夜尿、尿急和膀胱不适)的严重程度得到缓解或减少。
表7.配对t-检验(p值)的泌尿问题调查表和尿失禁影响问卷结果泌尿问题调查表
尿失禁影响问卷
结论该研究结果表明，制剂2制剂(采用硅含量标准化的问荆)对男女都适合并能有效治疗。它能有效减少尿失禁和OAB症状，包括尿频、夜尿、尿急和膀胱不适。经4周治疗后症状就开始缓解，而且症状的严重程度也下降，尤其是在治疗8-12周时。治疗与主要副反应无关。
制剂2(采用硅含量标准化的问荆)显示出与原片剂制剂类似的结果，但是结果通常发生的更快，在经过1个月治疗后症状的严重程度(问题的评分)下降得更稳定。而且，与用制剂1进行3个月的治疗相比，在经3个月的制剂2治疗后，更少参与者仍有泌尿问题症状。
该研究表明，制剂2(含有硅含量标准化的问荆)比没有用标准化硅的类似制剂更有效。
实施例4.具有标准化硅含量和黄酮类含量的含有草药的天然治疗性片剂(制剂3)用于预防和治疗尿失禁和膀胱过度活跃(OAB)的临床试验概述进行研究，以调查供口服给药用的含有草药的天然治疗性膀胱控制制剂(即膀胱控制试验制剂)对缓解尿失禁和OAB的有效性。基本上按照以上实施例2和实施例3以及以下的进一步详述，设计并进行这些研究。膀胱控制试验制剂是配制成片剂的天然含有草药的制剂。
经过鉴定，硅是问荆草药生物活性的贡献者。除了硅之外，问荆还含有约5％的皂苷(称为问荆皂苷)和几种黄酮糖苷(亦称黄酮类)，包括异槲皮苷、木犀草苷和问荆苷。异槲皮苷(亦称异槲皮素；槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷；4H-1-苯并吡喃-4-酮，2-(3，4-二羟基-苯基)-3-(β-D-呋喃葡萄糖基氧基)-5，7-二羟基-)。黄酮类例如异槲皮苷，具有重要的药理学特性。在本发明的某些方面，已经知道，问荆草药制剂中各批次间的硅含量和/或黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的差异对本发明组合物的生物活性有负面影响。本发明通过提供具有优化、标准化硅含量和黄酮类含量(以异槲皮苷来表示)的问荆草药制剂，解决了这一难题。本研究评价了改进的制剂对预防和治疗尿失禁和OAB症状的功效。
材料与方法试验制剂按照GMP指南，在TGA批准的生产地点制备膀胱控制试验制剂片剂。每片含有草药(刺籽鱼木茎/皮提取物和问荆茎提取物)以及矿物质(磷酸镁和磷酸钙和硅)。例如，每片含有以下干重当量刺籽鱼木茎/皮提取物(3,000mg)，问荆(Horsetail)茎提取物制剂(其具有占问荆茎提取物制剂(1,500mg)总干重的3％的标准化硅含量和0.8％的标准化黄酮类含量(以异槲皮苷来表示))，胶态无水二氧化硅(50.3mg)，磷酸镁70mg，磷酸氢钙70mg，相当于钙16.3mg，镁14.5mg，磷24.9mg。每片含有60.8mg总硅干重当量。每片含有一些麦芽糊精。
研究设计通过报纸广告招募经常有欲望性尿失禁和/或压迫性尿失禁症状的人类受试者。所有人类受试者都满足下列标准(a)在最近12个月内没有进行过外科手术，特别是子宫切除术或下垂修补术，(b)没有任何严重健康问题，例如糖尿病、心脏病、胰腺疾病或肝病，(c)在开始研究前的最后1个月内没有用药物治疗失禁症状。
在研究前，参与者都没有进行具体的骨盆锻炼，以改善肌肉张力。
治疗方案的组成为让人类受试者吞服两片膀胱控制试验制剂，每日两次，共12周。在开始治疗前(第0月)和治疗后每个月(第1、2和3月)，记录平均每天和每夜排尿频率并用尿失禁影响问卷(IIQ)和泌尿生殖问题调查表(UDI)的简短版本来评价疗效。具体涉及尿失禁的身体各方面的UDI问题详见下表8。
表8.泌尿生殖问题调查表
IIQ简短版本(6个问题)评价了尿失禁对干家务活、身体运动和社交活动等日常活动的影响，概述于下表9。
表9.尿失禁影响问卷
所有问题都按0-3分来评价(0＝不受影响，1＝轻微影响，2＝中度影响，3＝严重影响)。两份问卷都是经过标准化的疾病具体问卷，用于检查年长者令人烦恼的尿失禁。Robinson，D.等，Obstetrics andGynecology，912，224-8(1998)。也分析了在第0、1、2和3月的白天和夜晚的平均排尿频率，其结果也用配对t-检验进行比较。
用配对t-检验分析了这些问卷的结果。在受试者接受膀胱控制试验制剂前后，对其尿失禁的身体各方面或身体运动或社交活动的所测得的某一个参数进行比较，正面改善按照统计学上的显著差异来定义，即p值≤0.05。在受试者接受膀胱控制试验制剂前后，对涉及尿失禁的身体各方面或身体运动或社交活动的任何参数上的正面改善，证明膀胱控制试验制剂可用于预防或治疗人类受试者的泌尿生殖系统疾病，例如尿失禁、膀胱过度活跃、遗尿、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎和尿路感染。
结果和讨论统计有10名参与者(2男8女)完成研究，平均年龄65.9岁(范围在49-71岁)。
白天的排尿频率结果表明，在3个月治疗期间，白天的平均排尿频率明显减少(p＜0.05)。参与者需要排空膀胱的次数从每天11.5次(治疗前)减少到8.5次(1个月后)，6.6次(2个月后)和6.0次(3个月后)。这些结果表明第1月(p＝0.017)和随后各月之间有明显减少(在第2个月和第3个月p＝0.02)。
夜尿频率结果显示，该治疗有效减少了参与者在夜晚排空膀胱的次数。在唤醒方面逐渐减少，从开始的每晚2.5次，减少到1.5次，0.5次和0.5次(分别为第1、2和3月)。在2个月和3个月治疗之间有显著性差异(p＜0.05)。在经过2个月治疗后，许多参与者能够整晚睡眠。在第1月结果是显著的(p＝0.063)，并且在整个研究中持续保持显著性(第2个月，p＝0.007；第3个月，p＝0.03)。
泌尿生殖问题调查表大多数参与者所经历的症状(图8)是尿频(约78％)，尿急(78％)，少量漏尿(67％)和排空膀胱(67％)。其它较少报告的症状是因活动所致漏尿影响44％的参与者，仅有33％报告腹部疼痛。结果见图9，(作为平均问题评分)，表明所有症状在治疗1个月后都减少，并且在下2个月仍然持续减少。
用配对t-检验分析问卷结果。在2个月治疗后以下症状发生明显的正面变化并且在3个月治疗后持续明显变化感觉较少受尿急所致漏尿的影响(分别为p＝0.011，0.017)，少量漏尿(分别为p＝0.011，0.015)，和难以排空膀胱(分别为p＝0.024，0.045)。尿频方面的明显正面变化发生在3个月后(p＝0.009)。
尿失禁影响问卷受到尿失禁和OAB最大影响的活动(图10)是娱乐活动和感觉受挫(80％)，70％参与者在身体运动和离家外出旅行超过30分钟、干家务活和社交活动方面受影响，而60％的参与者在情感健康方面受影响。
结果见图11，作为平均问题回答，清楚表明生活质量(通过日常活动和社交活动以及情感健康和感觉受挫等方面的难度来评价)受到尿失禁症状的负面影响。除了干家务活外(其在第2个月问题评分下降)，参与者在1个月治疗内其大部分活动较少受到影响，并且在研究的剩余时间内都有持续改善。
用配对t-检验分析这些问卷的结果(表10)。在尿失禁对生活方式和社交活动的影响方面有所改善，表明在研究完成时对所有问题(除了干家务活外)的回答都有正面改变。在头一个月治疗后，就报告在离家外出旅行超过30分钟方面的明显改善，在第2个月和第3个月进一步观察到正面结果(分别为p＝0.037，0.010和0.015)。在2个月和3个月的治疗后，在情感健康方面的自信(分别为p＝0.081和0.029)和感觉受挫(分别为p＝0.001和0.001)、娱乐活性(分别为p＝0.015和0.004)和身体运动(分别为p＝0.022和0.012)方面有明显改善，这表明治疗改善了生活质量。
在第3月的访谈中也询问了参与者治疗是否改善他们的生活质量。总体上，70％报告在QOL上有改善。这些结果清楚表明参与者在QOL上的明显改善，这些参与者的尿失禁和OAB症状(包括尿频、夜尿、尿急和膀胱不适)的严重程度得到缓解或减少。
表10.配对t-检验(p值)的泌尿问题调查表和尿失禁影响问卷结果泌尿问题调查表
尿失禁影响问卷
结论该研究结果表明，制剂3制剂(采用标准化硅和黄酮类含量的问荆)能有效减少尿失禁和OAB的所有症状，包括尿频、夜尿、尿急和膀胱不适。经4周治疗后症状就开始缓解，而且症状的严重程度也下降，尤其是在治疗4-8周时。制剂3对男女都适合并能有效治疗，而且与主要副反应无关。
因此，证明了该研究中使用制剂3要比制剂1和制剂2都更好。证明制剂3对减少尿失禁和OAB的所有症状更有效，而且在更短时间就有结果。该研究证明，制剂3(含有标准化硅和黄酮类含量的问荆)比制剂1和制剂2更有效。
实施例5.不同片剂制剂(制剂1、2和3)用于预防和治疗尿失禁和膀胱过度活跃(OAB)的有效性比较概述该研究的目的在于，通过分析每次研究所得的尿失禁影响问卷(IIQ)和泌尿生殖问题调查表(UDI)的结果，比较本发明的3种片剂制剂(制剂1、制剂2和制剂3)在治疗尿失禁和OAB症状中的功效。制剂1是非标准化制剂，该制剂在实施例2的临床研究中进行了评价；制剂2采用标准化硅的问荆提取物，在实施例3的临床研究中进行了评价；而制剂3采用标准化硅和黄酮含量的问荆提取物，在实施例4的临床研究中进行了评价。
研究设计为了直接比较3种不同片剂制剂的有效性，比较了两种问卷调查表中问题评分的减少率(％)。使用该分析方法，比较每次不同研究中的第0月(基线)值。排尿频率和夜尿仅在制剂2和制剂3中直接评价。
结果和讨论泌尿问题调查表(UDI)的结果表明，与制剂1相比，制剂2(硅含量标准化)更有效，尤其在尿频、因尿急而漏尿、少量漏尿(滴尿)和难以排空膀胱方面。
制剂3(标准化硅和黄酮类含量)在减少泌尿问题(UDI)上看来最有效，表现为在症状严重程度上的更高减少率(％)，所述泌尿问题尤其是尿频、因感觉或尿急所致漏尿、因活动、咳嗽、打喷嚏所致漏尿、少量漏尿(滴尿)和难以排空膀胱(表11)。所有制剂在减少腹痛方面看来至少具有75％的有效性。然而，因为不到40％的参与者在第0月有该症状，所以认为该结果没有显著性。
表11.在第3月制剂1、2和3的UDI问题评分的减少率(％)
尿失禁影响问卷(IIQ)的比较也表明制剂3对所有QOL问题的回答(表现为症状的减少)比制剂1和2更好。
也评价了每个月具有症状的人数(％)。与先前的制剂相比，制剂3表明有效性增加，因为在3个月后具有各症状的参与者更少(图12)。
排尿频率和夜尿仅在制剂2和制剂3中评价。对这些结果进行比较，表明这两种制剂都能有效减少白天的排尿频率(达约50％)，效果在最初8周治疗后可观察到。然而，在2个月后可观察到，与制剂2相比，制剂3在减少夜尿方面更好，能减少96％的症状，而且在频率上总体有更大的减少(96％，相对于第3个月的63％)(表12)。
表12.排尿频率的下降(％)
结论该研究结果表明，所有制剂都是安全的，与主要副反应无关，所有制剂都能有效减少尿失禁和OAB的所有症状，包括尿频、夜尿、尿急和膀胱不适。所有制剂都能缓解症状，更快更明显地降低症状的严重程度，但制剂2和制剂3更明显。与制剂2相比，制剂3在减少夜尿方面最有效。
总之，所有制剂都能有效治疗尿失禁和OAB症状。标准化硅的问荆(制剂2)改善了原制剂的有效性，而且由于问荆中硅和黄酮类都标准化(制剂3)，进一步优化了制剂。
实施例6.用于尿失禁和膀胱过度活跃试验的制剂中硅的测定概述估计治疗性制剂中硅含量有批间差异，因为许多赋形剂都含有二氧化硅，二氧化硅被认为是不能吸收的形式。
据认为，用于尿失禁和膀胱过度活跃试验的制剂中硅含量的批间差异可导致每片中硅水平低于治疗活性硅的水平。
实施例2中用于临床研究的制剂1产生缓解尿失禁症状的治疗有效性。因为该制剂采用非标准化问荆提取物，所以该制剂中硅含量的批间差异可能导致不稳定的效果。
发明了制剂2(用于实施例3的临床研究)和制剂3(用于实施例4的临床研究)，以解决潜在的批间差异和随之而来的效果不稳定的问题。它们包含硅含量经过标准化的问荆提取物和添加的稳定数量的胶态无水二氧化硅。对所有3种制剂测定硅含量，以确定制剂1的可能的批间差异范围，并证实当使用含有标准化硅含量的问荆的制剂时，能保持硅的治疗性水平。
测定硅含量的不同测定方法都可使用，可能产生不同结果。因此，对每个样品都采用同一测定方法。采用目前英国药典(BritishPharmacopeia，BP)中列出的ICPMS测定方法。该方法完全破坏组合物中的所有其它分子，只留下硅，然后针对SiO2(二氧化硅)对照进行硅测定。该方法测定所有硅，并不区分硅的生物利用形式和非吸收形式。
结果制剂1含有非标准化问荆提取物。在测定时，该批次的制剂1的硅含量为34.0mg/片(每片约为1,000mg)。测定后一批次的制剂1的硅含量，为14.5mg/片(每片也约为1,000mg)。批间差异约60％，并且注意到当使用未经过标准化的硅的问荆提取物时，硅含量就会有显著批间差异。这样的硅含量批间差异范围，以及低于早期研究的有效量的硅含量，都有可能降低治疗效果。
观察到后一批次的制剂1含有14.5mg硅/片。与含有34.0mg硅/片的制剂1的原生产批次相比，后一批次得到更差而不稳定的结果(数据未显示)。
制剂2和制剂3都采用标准化硅的问荆提取物和稳定数量的胶态无水二氧化硅。在测定时，制剂2和制剂3中每片的硅含量分别为41.6mg和60.8mg/片(每片也约为1,000mg)。这样的水平超过在实施例2中临床研究表现出治疗有效性的34.0mg硅/片。这两种制剂的批间硅含量差异仅为30％，制剂1的批间差异有50％的减少。用同一制剂(或者制剂2或者制剂3)批间差异最小，甚至用标准化硅的问荆制剂时。
表13.用ICPMS BP方法进行硅测定的结果
应当注意的是，表13所述的总硅量(％)包含来源于标准化问荆提取物制剂的生物可利用的硅以及来自赋形剂的硅，后者主要是生物不可利用的。制剂2的片剂成分概述于表14。根据本发明，采用含至少约3％硅的标准化问荆提取物制剂，可得到稳定性良好的结果。在一个优选的实施方案中，制剂包含具有至少约3％至约13％硅的标准化问荆提取物制剂。在另一个优选的实施方案中，制剂包含具有至少约5％至约10％硅的标准化问荆提取物制剂。在再一个优选的实施方案中，制剂包含具有至少约6％硅的标准化问荆提取物制剂。
表14.制剂2片剂的组合物
结论如果试验制剂中硅含量的批间差异最小的话，可以达到稳定的预防或治疗效果。非标准化含硅制剂(即制剂1)的不同批次的测定结果显示批间差异为60％。这样的批间差异将会导致不稳定并降低预防和治疗效果。
制剂2和制剂3采用含有标准化硅含量的问荆提取物和稳定量的胶态无水二氧化硅，所以得到各制剂每片的稳定硅含量。这两种制剂的批间硅含量差异仅为30％，制剂1的批间差异有50％的减少。用同一制剂(或者制剂2或者制剂3)批间差异最小。
通过采用稳定的优化量的标准化硅含量的问荆，可以使每片中本发明生物可利用的硅含量标准化。这避免了与生物可利用的硅含量的批间差异有关的负面问题。
具有优化、标准化硅含量的问荆的本发明制剂2和制剂3，使制剂的硅含量的批间差异的问题最小化。随之产生更稳定的预防或治疗结果，正如临床研究3、4和5所述。
等同实施方案尽管采用具体的实施方案描述了本发明，但是人们知道，可以进行进一步修改。此外，本申请涵盖了对本发明的任何变化、使用或修改，包括本发明所属领域已知或常用实践范围内的对本说明书的这样的偏离，全都落入所附权利要求书的范围之内。
权利要求
1.一种含草药组合物，它包含刺籽鱼木(Crateva nurvala)茎/皮制剂和标准化问荆(Equisetum arvense)茎提取物制剂，所述问荆茎提取物制剂的硅含量占问荆茎提取物制剂总干重的约3％至约13％，其中所述含草药组合物配制成口服剂量单位。
2.权利要求1的含草药组合物，其中所述刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度为约1,000mg至约6,000mg干重当量/口服剂量单位。
3.权利要求1的含草药组合物，其中所述刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度为约1,000mg至约4,000mg干重当量/口服剂量单位。
4.权利要求1的含草药组合物，其中所述刺籽鱼木茎/皮制剂的浓度为约2,500mg至约3,500mg干重当量/口服剂量单位。
5.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的浓度为约1mg至约3,000mg干重当量/口服剂量单位。
6.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的浓度为约500mg至约2,500mg干重当量/口服剂量单位。
7.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的浓度为约1,000mg至约2,000mg干重当量/口服剂量单位。
8.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的浓度为约1,300mg至约1,600mg干重当量/口服剂量单位。
9.权利要求1的含草药组合物，它还包含无水胶态二氧化硅，其中所述含草药组合物的总硅含量为每口服剂量单位约10mg干重当量至约71mg干重当量。
10.权利要求1的含草药组合物，它还包含无水胶态二氧化硅，其中所述含草药组合物的总硅含量为每口服剂量单位约15mg干重当量至约45mg干重当量。
11.权利要求1的含草药组合物，它还包含无水胶态二氧化硅，其中所述含草药组合物的总硅含量为每口服剂量单位约28mg干重当量至约34mg干重当量。
12.权利要求1的含草药组合物，它还包含磷，其中磷的浓度为每口服剂量单位约5mg干重当量至约60mg干重当量。
13.权利要求1的含草药组合物，它还包含磷，其中磷的浓度为每口服剂量单位约10mg干重当量至约50mg干重当量。
14.权利要求1的含草药组合物，它还包含磷，其中磷的浓度为每口服剂量单位约20mg干重当量至约30mg干重当量。
15.权利要求1的含草药组合物，它还包含钙，其中钙的浓度为每口服剂量单位约1mg干重当量至约30mg干重当量。
16.权利要求1的含草药组合物，它还包含钙，其中钙的浓度为每口服剂量单位约5mg干重当量至约25mg干重当量。
17.权利要求1的含草药组合物，它还包含钙，其中钙的浓度为每口服剂量单位约10mg干重当量至约20mg干重当量。
18.权利要求1的含草药组合物，它还包含镁，其中镁的浓度为每口服剂量单位约1mg干重当量至约30mg干重当量。
19.权利要求1的含草药组合物，它还包含镁，其中镁的浓度为每口服剂量单位约5mg干重当量至约25mg干重当量。
20.权利要求1的含草药组合物，它还包含镁，其中镁的浓度为每口服剂量单位约10mg干重当量至约20mg干重当量。
21.权利要求1的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在干法给药系统中。
22.权利要求1的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在液体给药系统中。
23.权利要求1的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在控释溶媒中。
24.权利要求1的含草药组合物，其中所述口服剂量单位选自片剂、干粉剂、胶囊剂和胶囊形片剂。
25.一种含草药组合物，它包含(a)刺籽鱼木茎/皮制剂，其浓度至少约为3,000mg干重当量/口服剂量单位；(b)标准化问荆茎提取物制剂，其硅含量占问荆茎提取物制剂总干重的至少约3％，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的浓度至少约为1,500mg干重当量/口服剂量单位；(c)总硅浓度至少约为32.5mg干重当量/口服剂量单位；(d)磷浓度至少约为24.9mg干重当量/口服剂量单位；(e)镁浓度至少约为14.5mg干重当量/口服剂量单位；(f)钙浓度至少约为16.3mg干重当量/口服剂量单位；其中所述含草药组合物配制成口服剂量单位。
26.权利要求25的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在干法给药系统中。
27.权利要求25的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在液体给药系统中。
28.权利要求25的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在控释溶媒中。
29.权利要求25的含草药组合物，其中所述口服剂量单位选自片剂、干粉剂、胶囊剂和胶囊形片剂。
30.一种药物组合物，它包含权利要求1的含草药组合物和药学上可接受的载体。
31.一种药物组合物，它包含权利要求25的含草药组合物和药学上可接受的载体。
32.一种预防患者的泌尿生殖系统疾病的方法，该方法包括给予需要预防泌尿生殖系统疾病的患者权利要求1或权利要求25的组合物，其用量足以预防泌尿生殖系统疾病。
33.权利要求32的方法，其中所述泌尿生殖系统疾病选自尿失禁、遗尿、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎和尿路感染。
34.一种治疗患者的泌尿生殖系统疾病的方法，该方法包括给予需要治疗泌尿生殖系统疾病的患者权利要求1或权利要求25的组合物，其用量足以治疗泌尿生殖系统疾病。
35.权利要求34的方法，其中所述泌尿生殖系统疾病选自尿失禁、遗尿、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎和尿路感染。
36.一种含草药组合物，它包含(a)刺籽鱼木茎/皮制剂，其浓度至少约为3,000mg干重当量/口服剂量单位；(b)问荆草药制剂，其浓度至少约为1,500mg干重当量/口服剂量单位；(c)磷浓度至少约为24.9mg干重当量/口服剂量单位；(d)镁浓度至少约为14.5mg干重当量/口服剂量单位；(e)钙浓度至少约为16.3mg干重当量/口服剂量单位；其中所述含草药组合物配制成口服剂量单位。
37.权利要求36的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在干法给药系统中。
38.权利要求36的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在液体给药系统中。
39.权利要求36的含草药组合物，其中所述含草药组合物配制在控释溶媒中。
40.权利要求36的含草药组合物，其中所述口服剂量单位选自片剂、干粉剂、胶囊剂和胶囊形片剂。
41.权利要求1的含草药组合物，它还包含标准化问荆茎提取物制剂，所述制剂的总黄酮类含量占问荆茎提取物制剂总干重的约0.01％至约3％，其中所述总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。
42.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的总黄酮类含量占问荆茎提取物制剂总干重的约0.1％至约2.5％，其中所述总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。
43.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的总黄酮类含量占问荆茎提取物制剂总干重的约0.5％至约1.5％，其中所述总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。
44.权利要求1的含草药组合物，其中所述标准化问荆茎提取物制剂的总黄酮类含量占问荆茎提取物制剂总干重的至少约0.8％，其中所述总黄酮类含量以异槲皮苷来表示。
45.权利要求32的方法，其中所述泌尿生殖系统疾病是膀胱过度活跃。
46.权利要求34的方法，其中所述泌尿生殖系统疾病是膀胱过度活跃。
全文摘要
本发明涉及用于预防或治疗诸如以下的泌尿生殖系统疾病的草药组合物尿失禁、遗尿(例如尿床)、良性前列腺增生、尿结石、膀胱炎、尿路感染和膀胱过度活跃。具体地讲，本发明提供含有刺籽鱼木(C.nurvala)和问荆(E.arvense)的组合物及其使用方法。
文档编号A61K36/10GK101039688SQ200580035216
公开日2007年9月19日 申请日期2005年8月18日 优先权日2004年8月18日
发明者T·A·塞佩尔 申请人:生物健康解决方案股份有限公司