修饰的促进血细胞生成的分子的制作方法

专利名称：：修饰的促进血细胞生成的分子的制作方法修饰的促进血细胞生成的分子本发明涉及作为红细胞生成素受体的结合分子的肽类、其制备方法、包含这些肽的药物和它们在选择的适应症中的用途(优选用于治疗各种类型的贫血症和中风)。激素红细胞生成素(EPO)是由165个氨基酸组成并具有四个糖基化位点的糖蛋白。四个复杂的糖侧链占约35KD的整个分子量的40%。EP0在肾中形成，并从那里迁移到刺激红血球产生的脾和骨髄中。在慢性肾病中，EP0产生的减少导致红细胞减少型贫血症。使用通过基因工程制备的重组EP0，可有效地治疗贫血症。EPO可改善透析患者的生活质量。使用重组EP0不仅可改善肾贫血症，而且可改善早产新生儿中的贫血症、炎症和肿痛相关的贫血症。利用EP0，在肺瘤患者中可以更成功地进行高剂量的化学疗法。类似地，如果在放射疗法的范围内进行给药，EPO可促进癌症患者的康复。在使用EP0的治疗中，问题在于所需的剂量方案是以频繁的或连续的静脉内或皮下应用为基础，因为蛋白在体内被较快地分解。因此，重组EPO衍生分子的发展趋向于选择性修饰该糖蛋白，例如，通过额外的糖基化或聚乙二醇化，以便增加稳定性并因此增加生物学半衰期。与使用重组EP0治疗有关的另一个重要问题是在治疗期间患者对重组BP0产生抗体的危险。这是由于重组EP0与内源性EP0不完全相同。一旦诱导抗体生成，它可导致产生抗体，所述抗体还损害内源性EP0的活性。这常常增加治疗所需的重組EP0的剂量。特别是如果该抗体损害内源性EPO的活性，这种作用可被解释为治疗诱导的自身免疫性疾病。在经历肾移植的透析患者在EP0治疗数月或数年的情况下，这是特別不期望的。然后抗体可损害由移植物产生的内源性EP0的活性，并因此损害移植物器官的红细胞生成活性。目前，为了增加生物学半衰期而在重组EPO中引入的修饰将是否恶化或改善这个难题，还是未解决的问题。通常，人们预计大量的修饰和更长的半衰期将恶化这个难题的性质。一个可替代的策略是由与红细胞生成素不共有序列同源性或结构关系的氨基酸制备合成肽。据显示，显著小于红细胞生成素的与EP0序列不相关的肽可起激动剂的作用(Wrighton等人，1996)。相同的作者报道，可将这类肽截短成具有10个氨基酸长度的仍然有活性的最小肽。模拟EP0活性的合成肽是国际公开W096/40749的主题。它公开了明显共有序列的10至40个氨基酸的模拟肽，该共有序列优选在通常被称为IO和17位的位置上包含两个脯氨酸，其中之一被认为是必需的。WO01/38342公开了这些脯氨酸.可能与萘基丙氨酸结合。因此迄今为止，EPO受体的所有基于小肽的激动剂都具有一个结构，该结构包含至少一个脯氨酸，经常是在所定义位置上的两个脯氨酸残基，参照它们在非常有活性的红细胞生成素模拟肽EMP1中的位置，其通常被编号为10和17位(国际公开WO96/40749;Wrighton等人，1996，Johnson等人，1997和1998):GGTYSC跳PLTWVCKPQGG这些脯氨酸对肽的有效性来说被认为是不可缺少的。对于17位上的脯氨酸，已经通过与受体的相互作用证实了这一点，而10位上的脯氨酸被认为是分子的正确折叠所必需的(同样参见Wrighton等人，1996，1997)。由脯氨酸的特殊立体化学性质支持的正确折叠，通常是生物学活性的必要前提。通常，脯氨酸是形成结构的氨基酸，其经常参与(例如在这种情况下)发夹结构和P转角的形成。由于尤其是这种性质，其是分解含脯氨酸的肽/蛋白的脯氨酸后特异性内肽酶的常见攻击点。通过所述的"单击"脯氨酸后切割，许多内源性肽激素(血管紧张肽I和血管紧张肽II、硬骨鱼紧张肽、促甲状腺素释放素(thyreoliberin)、其它的释放素，等等)被灭活。因此，通过这些常见的和有活性的酶的活性，缩短了含脯氨酸的EPO模拟肽的半衰期。可化学制备这类短肽，并且不需要重组生产，重组生产在控制和产生具有规定质量和同一性的产品方面更困难得多。该小尺寸的肽的化学生产在生产成本方面是有竟争力的。而且，化学生产允许分子变异，例如糖基化、PEG化或任何其它规定修饰的规定引入，它们可具有增加生物学半衰期的已知效力。但是，迄今为止一直没有批准使用现有的EPO模拟肽的任何疗法。此外，需要增强EP0模拟肽的EP0模拟功效，以便为治疗提供足够有效的分子。在现有技术中描述的EP0模拟肽可以视作识别红细胞生成素受体的结合位点的单体结合域。但是，正如Wrighton等人(Wrighton1997)所指出的，为了同型二聚化EPO受体和诱导信号转导，通常需要2个这样的结合域。因而，2个这样的EP0模拟肽的组合和因此在一个二聚体分子中的EPO受体结合域会显著增强活性。这会产生下述结果，即具有一个单个结合域的肽表现出相同的定性的活性曲线，而结合在一起的2个结合域表现出低得多的ED50(50%效应剂量，活性的一种度量)。二聚化可以使单体EPO模拟肽的效力提高最高达1000-倍。二聚化甚至可以将有些无活性的单体肽转化成激动剂。携带2个结合域的肽被描述为二价的或二聚的肽。已知几种二聚化单体的技术。例如通过共价结合接头，可以使单体二聚化。接头是在本发明的多肽单元之间创建共价键的连接分子。多肽单元可以通过接头以改善与EP0受体的结合的方式组合(Johnson等人I997;Wrighton等人1997)。此外提及单体生物素化的肽通过与Wrighton等人(Wrighton,1997)所述的蛋白栽体分子的非共价相互作用而多聚化。也可以使用生物素/抗生蛋白链菌素系统，即生物素化肽的C-末端，随后用抗生蛋白链菌素温育生物素化的肽。或者，已知通过形成二酮哌唤结构来实现二聚化。技术人员已知此方法，详细描述在例如Cavelier等人(Peptides:ThewaveoftheFuture;MichalLebl和RichardA.Houghten(编)；AmericanPeptideSociety,2001)。从现有技术得知的得到肽二聚体的另一种可选方案是，使用双功能的活化的二羧酸衍生物作为以后的接头部分的反应前体，其与N-末端氨基反应，从而形成最终的二聚体肽(Johnson等人，1997)。单体也可以通过与接头共价结合来二聚化。优选地，所述接头包含NH-R-NH，其中R是被官能团取代的低级亚烷基，所述官能团例如能结合另一个分子部分的羧基或氨基。接头可能含有赖氨酸残基或赖氨酸酰胺。PEG也可以用作接头。所述接头可以是含有2个羧酸的分子，且任选地在一个或多个原子处被官能团取代，所述官能团例如能结合一个或多个PEG分子的胺。在W02004/101606中，也给出了用连接部分来寡聚化和二聚化肽的可能步骤的详细描述。认识到EPO模拟肽的替代性二聚化策略。此外，应当指出，EPO和EPO模拟肽(单体或二聚体)不仅对于人治疗目的是令人感兴趣的。除了人用途以外，在动物保健市场上非常需要EPO替代物。在这方面，为了防止滥用，希望提供在人和动物中表现出区分活性模式P0模拟肽。但是，这是一项挑战性的任务，因为不同的动物EP0受体(例如小鼠，大鼠，猪和狗)的序列与人EP0受体非常类似。当比对不同物种的EP0受体时，可以看出不同物种的差别仅在于几个氨基酸。这暗示着高结构同源性。此外，仅小百分比的这些氨基酸残基与结合EPO模拟肽有关。这增加了对人和动物EP0受体表现出不同活性水平的EP0模拟肽的开发难度本发明的一个目的是，提供表现出天然EP0的至少基本部分的生物学活性的可替代性合成肽，并因此提供用于有效治疗策略的可替代性方法。本发明的另一个目的是，提供具有提高的功效的EP0模拟肽。本发明的另一个目的是，通过替代性二聚化策略提供EP0模拟肽的二聚体。此外，本发明的一个目的是，提供在人和动物中表现出不同活性模式的EP0模拟肽。下面将详述这些目的的解决方案。根据本发明的第一个实施方案，提供了一种肽，尤其是能结合EP0受体的肽，其包含下述的共有氨基酸序列XsXiXgXgXioXiiUi3X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸；X，是R，H，L，W，Y或S;Xs是M，F，I，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；l是G或G的保守交换；1。是脯氨酸的非保守交换；或X,和Xi。被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;X13W，l-nal，2-nal，A或F;Xm是D，E，I，L或V;Xu是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A。该实施方案也包含选自下述的肽上述肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置X!。处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X9和X,。被单个氨基酸置换。所述肽共有序列可以视作EPO受体的单体结合域。作为EPO模拟肽，它们能结合EPO受体。肽的长度优选地是10至40或50或60个氨基酸。在优选的实施方案中，肽共有序列的长度是至少10，15，18，20或25个氨基酸。当然，共有序列可以分别嵌入更长的序列中。通过二聚化上述共有序列的2个单体肽单元，也可以创建更长的长度(参见下文)。非常令人惊奇的是，尽管根据Wrighton和Johnson的已知EPO模拟肽的1个或(根据有些实施方案)甚至2个脯氨酸被替换为其它天然的或非天然的氨基酸，根据本发明的肽确实表现出EPO模拟活性。实际上，根据本发明的肽具有与已知的含有脯氨酸的肽相当或甚至更好的活性。但是，值得注意的是，置换脯氨酸残基的氨基酸不代表脯氨酸的保守交换，而是代表非保守交换。脯氨酸的这种非保守交换的合适实例是在位置io的带正电荷的或带负电荷的氨基酸。优选地，带正电荷的氨基酸(例如碱性氨基酸，例如蛋白原性的氨基酸K，R和H且尤其是)可以用于置换。用于置换位置10脯氨酸的非保守氨基酸也可以是非蛋白原性的天然的或非天然的氨基酸，优选地是具有带正电荷侧链的氨基酸。也包含所述氨基酸的各个类似物。^是特;有活性的。这样的伸长的氨基酸的合i实例是高精i酸。:据一个实施方案，所述肽在位置IO携带除了天然氨基酸精氨酸之外的带正电荷的氨基酸。根据该实施方案，脯氨酸10被选自下迷的带正电荷的氨基酸置换蛋白原性的氨基酸K或H，和带正电荷的非蛋白原性的天然的和非天然的带正电荷的氨基酸例如高精氨酸。根据第一个实施方案的共有序列，A和X15描述具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸。这些氨基酸因而能形成桥单元。根据一个实施方案，选择在位置X6和Xu的氨基酸，使得它们能通过在彼此之间形成共价键而在肽内形成分子内桥。分子内桥的形成可以导致肽的环化。合适的桥单元的实例是二硫桥和二硒桥。表现出它们的侧链的这种键形成功能性的氨基酸的合适实例是例如半胱氨酸和半胱氨酸衍生物例如高半胱氨酸或硒代半胱氨酸以及疏代赖氨酸。诸如2个硒代半胱氨酸残基之间的二硒桥的形成甚至具有胜过半胱氨酸桥的优点。这是因为硒桥在还原环境中更稳定。因而甚至在困难条件下会保留肽的构象。但是，显然的是，氨基酸在位置X6和X^也是合适的，描绘具有能在具有带正电荷侧链的氨基酸(例如蛋白原性的氨基酸K，H，R或鸟氨酸，DAP或DAB)和具有带负电荷侧链的氨基酸(例如蛋白原性的氨基酸D或E)之间形成不同共价键(例如酰胺键)的功能性的侧链。其它实例是酰胺和硫醚桥。在申请人的早期申请PCT/EP2005/012075(WO2006/050959)中公开了归入本发明的第一个实施方案的共有序列的肽，该申请在本申请的优先权日之后公开。在有些国家，根据各自的专利法，PCT/EP2005/012075的公开内容可能构成现有技术。仅在可适用且可能置疑专利性的国家，上述共有序列为了法律原.;列。这可以应用于下述共有序列或肽序列*一种肽，尤其是能结合BPO受体的肽，其包含下述氨基酸序列X6X7X8X9X1。X11XuX13X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X6是C，A，B，oc-氨基-y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc);X7是R，H，L，W，Y或S;Xs是M，F，I，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X9是G或G的保守交换；Xu是脯氨酸的非保守交换；或X,和Xn被单个氨基酸置换；Xn选自任意氛基酸；Xu是T或A;X13W，l-nal，2-nal，A或F;Xn是D，E，I，L或V;Xu是C，A，K，ct-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc)条件是，l或X^是C或hoc;*一种肽，其特征在于下述氨基酸序列X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氨基酸用标准的字母缩写来指示，且X6是C;X7是R，H，L或W;Xs是M，F或I;Xs是G或G的保守交换；X!。是脯氨酸的非保守交换；Xu独立地选自任意氨基酸；Xu是T;X"是W;Xn是D，E，I，L或V;X"是C;或其中x,和t。被单个氨基酸置换*一种肽，其特征在于下述氨基酸序列X6X7X8X9X1。X11X12X13X14X15其中每个氨基酸用标准的字母缩写来指示，且X7是R，H，L或W;X8是M，F，I，或hsm(高丝氨酸曱基醚);L是G或G的保守交换；X,。是脯氨酸的非保守交换；X独立地选自任意氨基酸；Xu是T;X13是W;X"是D，E，I，L或V，l-nal(l-萘基丙氨酸)或2-nal(2-萘基丙氨酸)；X"是C;*满足第一个实施方案的上述共有序列的在PCT/EP2005/012075中>^开的肽(参见图21)。当PCT/EP2005/012075的更早的公布后的公开内容不会导致专利性问题时，上面列出的共有序列和肽序列不需要从第一个实施方案的宽共有序列中放弃，因而包含在上面定义的共有序列中。此外，这些肽通常支持EPO模拟共有序列的精确性，因为它们表现出有效性。根据本发明的第二个实施方案，提供了一种肽，它也表现出良好的EP0模拟性质。该肽包含至少IO个氨基酸，能结合EP0受体，且具有激动剂活性、因而具有EPO模拟活性。所述肽包含下述核心氨基酸序列X9X10U12X13其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X9是G或G的保守交换；Xi。是脯氨酸的非保守交换或X,和t。被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；X^是不带电荷的极性氨基酸或A;Xu是萘基丙氨酸。该实施方案也包含选自下述的肽上述肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置Xn处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X9和X,。被单个氨基酸置换，且在位置X^处具有萘基丙氨酸。这第二个实施方案的肽与第一个实施方案共有下述独特特征，即X!。是脯氨酸的非保守交换，或l和X,。被单个氨基酸置换。但是，根据本发明的第二个实施方案的EP0模拟肽的另一个特征是在位置13处的萘基丙氨酸(例如l-Nal或2-Nal)。在位置13处的萘基丙氨酸和在位置10处的脯氨酸的非保守氨基酸交换的组合会产生具有提高的结合性质的EP0模拟肽。EPO模拟肽以二聚体形式结合EPO受体。我们假设，在位置13的掺入Nal会导致肽单体之间更强的疏水相互作用。这会潜在地增强单体肽链的二聚化，可能稳定化肽二聚体的构象。与脯氨酸的非保守氨基酸相组合，创建了具有提高的EP0模拟性质的EP0模拟分子，可能是由于参与受体结合的氨基酸的有利放置。在申请人的早期申请PCT/EP2005/012075中也公开了描述在位置13处的萘基丙氨酸的序列。在有些国家，根据专利法，该公开内容可能构成现有技术。在可适用且可能置疑专利性的国家，第二个实施方案的第一个可选方案的共有序列为了法律原因可以不包含满足在PCT/EP2005/012075中公开的共有序列的序列。这可以应用于下述共有序列和选自在PCT/EP2005/012075中公开的下述組的肽序列*一种肽，尤其是能结合EPO受体的肽，其包含下述氨基酸序列XeXyXgXgXi0X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X6是C，A，E，ot-氨基-v-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc);X7是R，H，L，W或Y或R，H，L，W，Y或S;Xs是M，F，I，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X9是G或G的保守交换；X,。是脯氨酸的非保守交换；或X,和Xw被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是T或A;X"是l-nal，2-nal;Xn是D，E，I，L《VjXu是C，A，K，a-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc)条件是，l或Xu是C或hoc;*下述组的肽GGTYSCHFGKITUVCKKQGGGGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRGGGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRGC-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRGAc-C-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-lna卜VCKKQRG-AmGGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRGGGTYSC鹏KLT-lnal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRGCGGTYSCHFGKLT-lna卜VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-lna卜VCKKQRGGGTYSCHMGKLTXVCKKQGGGGTYTCHFGKLTXVCKKLGGGGLYSCHFGKITXVCKKQGGGGLYSCHFGKLTXVCQKQGGGGTYSCHFGKLTXVCKKQRGGGTYTCHFGKLTUVCKKQGGGGTYSCHFGKLTUVCKKLGGGGTYSCHFGKITXVCKKQGGGGLYSCHFGKLTUVCKKLGGGGLYACHFGKLTUVCKKQGGGGTYTCHFGKITUVCKKQGGGGLYSCHFGKLTXVCKKQGGGGLYACHFGKLTULCKKQGGGGTYTCHFGKITXVCKKQGGGGLYSCHFGKLTXVCKKQRGGGTYTCHFGKLTXVCKKQGGGGLYSCHFGKITUVCKKQGGGGLYSCHFGKLTXVCRKQGGGGTYACHFGKLTXVCKKLGGGGLYACHFGKLTXVCRKQGGGGTYACHFGKLTXVCKKQGGGGLYSCHMGKLTXVCRKQGGGGLYSCHFGKLTUVCKKQRGGGLYSCHMGKLTXVCKKQGGGGTYTC薩KLTXVCKKQGGGGLYSCHFGKLTXVCRKQRGGGTYSCHFGKLTXVCKKQGGGGTYTCHFGKLTXVCKKQRGGGTYTCHFGKLTXVCKKQRGGGTYACHFGKLT跳KKQGGGGLYACHFGKLTUVCRKQGGGGLYACHFGKLTXICKKQGGGGLYSCHFGKITXECKKQGG页GGLYACHFGKLTXVCKKQGGGGTYSCHFGKLTXVCQKQGGGGLYSC隱KLTXDCKKQGGGGLYSCHFGKLTXVCKKLGGGGLYSCHFGKLTUVCQKQGGGGLYSCHFGKLTUVCRKQRGGGmCHFGKLTUVCKLGGGGTYSC薩KLTUVCKKQGGGGLYAC薩KITXVCQKLRGGGTYSCHFGKLTXVCKKQRGGGLYSCHFGKLT跳RKQGGGGTYSCHFGKLTXVCKKLGGGGLYSCHFGKITUICKKQGGGGTYTCHFGKLTXVCQKQGGGGLYAC腦KITXVCQKLGGGGTYSCHFGKLTUVCKKQRGGGLYSCHFGKLTUVCRKLGGGGLYSCHFGKLTXVCRKLGGGGLYSC訓KITUVCRKQGGGGLYSCHMGKLTUECKKQGGGGTYSCHFGKLTUVCKKQGGGGLYSCHFGKLTUVCKKQGGGGLYSCHFGKITXVCRKQGGGGTYTCHFGKLTUVCQKQGGGGTYSCHFGKLTUVCQKQGGGGTYTCHFGKLTUVCKKQRG其中X是l-萘基丙氨酸，且U是2-萘基丙氨酸。当PCT/EP2005/012075的公布后的公开内容不会导致专利性问题时，上面列出的共有序列和肽序列不需要从第二个实施方案的第一个可选方案的宽共有序列中放弃，因而包含在上面定义的宽共有序列中。在从属权利要求中提供了本发明的第一个和第二个实施方案的其它有益方面。由于本发明的第一个和第二个实施方案共有下述相同特征，即存在在位置10处的脯氨酸的非保守交换，或X,和L。被单个氨基酸置换，它们实际上彼此紧密相连。在从属权利要求中定义了、也在下面描述了第一个和第二个实施方案的扩展的共有序列，其中为在上述核心序列周围的位置定义了合适的氨基酸。应当注意，在本申请中使用的编号(XJJ6…等)仅用于筒化本发明的肽和现有技术已知的EP0模拟肽之间的对比(关于基于EMP1肽的编号，请参考例如Johnson等人，1997和1998)。但是，该编号不涉及肽的总长度，因此也不暗示所有位置总是必须被占据。例如位置Xi不是必须被占据。例如，从l开始的肽也是有EP0模拟活性的，只要提供10个氨基酸的最小长度。结果，在本申请中使用的氨基酸位置的编号将仅仅简化肽的表征和与现有技术的对比。本发明的第一个和第二个实施方案的共有序列也可以包含下述额外的氨基酸位置X14X15X16X17X18X19其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X"选自D，E，I，L或V;Xis是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A;X"独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S，Har或T;Xn选自任意氨基酸，优选A，G，P，Y或带正电荷的或带负电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，在带正电荷的氨基酸的情况下，优选K，R，H,鸟氨酸或高精氨酸；X^独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;Xw独立地选自任意氨基酸，优选带正电荷的或带负电荷的氨基酸，在带正电荷的氨基酸的情况下，例如K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸或小柔性氨基酸例如甘氨酸或P-丙氨酸。根据进一步的改进，所述肽共有序列包含下述额外的氨基酸位置其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或cx-氨基-Y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y，H，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸。根据本发明的第一个和第二个实施方案的进一步的改进，所述肽在位置X1Q、Xn和/或X19处具有带电荷的氨基酸，如果这些氨基酸位置在肽中存在(取决于肽共有序列的长度)。在位置X1Q、Xn和/或X19处的氨基酸是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生的氨基酸。应当注意，衍生的氨基酸在本申请的上下文中被视作非天然氨基酸的一个特殊实施方案。术语非天然氨基酸实际上是总称。衍生的氨基酸在表述上分开地提及，因为它们构成本发明的一个特殊实施方案，正如将在下面详细描述的。在XmXu和/或X19处的氨基酸是带负电荷的氨基酸的情况下，所述带负电荷的氨基酸优选地选自參天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;參非天然的带负电荷的氨基酸，，最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。非天然的带负电荷的侧链可以描述伸长的侧链。这样的氨基酸的实例是a-氨基已二酸(Aad)，2-氨基庚二酸(2-氨基庚二酸)或a-氨基辛二酸(Asu)。一个原因可能是，伸长的带负电荷的人工氨基酸能与EP0受体的带正电荷的氨基酸更好地接触，从而提高结合能力。已经发现，在位置13处也携带萘基丙氨酸的各个肽表现出非常良好的结合性质。如指出的，通过将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸，也可能提供带负电荷的氨基酸。由此也可能伸长侧链，从而潜在地增强结合性质。根据该新颖策略，用合适的试剂衍生化赖氨酸(或同源的更短的氨基酸，如Dap，Dab或鸟氨酸)，提供带负电荷的基团。合适的试剂是例如二酸例如二羧酸或二磺酸。戊二酸，已二酸，琥珀酸，庚二酸和辛二酸可以作为实例提及。根据另一个方面，根据本发明的肽在位置X^、Xn和/或Xw处携带带正电荷的氨基酸。所述带正电荷的氨基酸选自參天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸或鸟氨酸；*非天然的带正电荷的氨基酸，*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。已经表明，当在肽的位置t。和/或Xn处存在具有与赖氨酸相比伸长的侧链的氨基酸时，可以创建非常有效的EP0模拟肽。该氨基酸可以是非蛋白原性的。根据一个实施方案，通过将延伸单元掺入待伸长的氨基酸(它不一定是赖氨酸)的侧链，伸长带正电荷的氨基酸。也可以将更短的氨基酸用作原料，然后通过适当的常规化学反应来伸长。通常，延伸单元是脂族(例如CH2单元)或芳族(例如苯基或萘基单元)基团。适当的伸长的氨基酸的实例是例如高精氨酸，氨基苯丙氨酸和氨基萘基丙氨酸。根据本发明的第一个和第二个实施方案的另一个实施方案，Xs是D-氨基酸，优选D-苯丙氨酸。在第一个和第二个实施方案的共有序列也包含在位置X5处的氨基酸的情况下，Xs可以选自任意氨基酸，但是，它优选是A，H，K,L，M，S，T或I。在肽中存在X4的情况下，它可以选自任意氨基酸，但是，它优选是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基。所述吸电子取代基优选地选自氨基，硝基和卣素。实例是4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。在共有序列中存在X3的情况下，X3独立地选自任意氨基酸，优选D，E，L，N，S，T或V。此外，特别在单体单元(结合域)形成二聚体的情况下，优选地在单体的N-末端区域(例如位置Xi和XJ和单体的C-末端区域(例如X19和X2。)中的氨基酸描述小柔性氨基酸例如甘氨酸或P-丙氨酸，以便提供柔性构象。根据本发明的第三个实施方案，提供了不同结构的肽，它也表现出良好的EP0模拟性质。该肽也包含至少10个氨基酸，能结合EP0受体，且具有激动剂活性。至少一个下述核心共有氨基酸序列描述了该EP0模拟肽的特征X9X10XuX"X13;或X9X10X11X12X13X14X15X15X17X18X19这些共有序列的每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸。根据本发明第二个方面的基本特征，位置X1D、Xn或Xw中的至少一个具有带负电荷的氨基酸。也包含选自下述的肽上述肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EP0模拟活性，且在位置X;。、Xn或Xw中的至少一个具有带负电荷的氨基酸。非常令人惊奇的是，在这些位置中的带负电荷的氨基酸描述了这些优良的EP0模拟性质。其它氨基酸位置(如果在共有序列中存在)定义如下X,是G或G的保守交换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；Xu是W,l-nal,2-nal，A或F;X"是D，E，I，L或V;X15是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸，X"独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S，Har或T;Xu独立地选自任意氨基酸，优选L或Q。在位置X1Q、Xu和/或X19(如果存在)中的至少一个位置处携带带负电荷的氨基酸的根据本发明第三个实施方案的肽，是描述在人和动物系统中有差别的EPO模拟性质的肽的合适候选物。如上面指出的，不同物种的EPO受体的蛋白序列在物种之间仅存在少数差异，因而EPO受体被分级为"以可忽略的物种差异高度保守的"。但是，令人惊奇地发现，在至少一个所述位置处具有带负电荷的氨基酸的EPO模拟肽可能能区分人和动物EPO-受体的肽结合位点。对动物受体具有更高的结合能力的肽优选地用于兽医用途。在位置X1Q、Xn和/或X19中的至少一个位置处携带带负电荷的氨基酸的肽可以在共有序列中包含下述额外的氨基酸XsXX8其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ct-氨基-Y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y,H，高丝氨酸曱基醚或正异亮氨酸。此外，下述氨基酸也可以描述扩展的共有序列X9X1。X11X12X13X14X15X16X17X13X19其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X9是G或G的保守交换；在Xi。不是带负电荷的氨基酸的情况下，Xi。是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换，或X,和t。被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X3是W，l-nal，2-nal，A或F;Xm是D，E，I,L或V;X,5是具有能形成共价键的侧链官能度的氛基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸；Xw独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S，Har或T;在X不是带负电荷的氨基酸的情况下，Xn选自任意氨基酸，优选A,G，P，Y或带正电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，优选K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸；Xu独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;在Xn不是带负电荷的氨基酸的情况下，Xw独立地选自任意氨基酸，优选带正电荷的氨基酸例如K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸或小柔性氨基酸例如甘氨酸或P-丙氨酸；条件是，Xi。、Xn或Xn中的至少一个是带负电荷的氨基酸。当然，本发明的该实施方案也包含选自下述的肽上述肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置X10、Xn或X^中的至少一个处具有带负电荷的氨基酸。优选地，选择在位置l和Xu处具有允许形成共价鍵并从而在肽内创建连接桥的侧链官能度的氨基酸，使得它们能彼此形成共价鍵(请参考上面本发明第一个实施方案的描述)。合适的氨基酸因而是携带用于形成二硫鍵的SH-基团的氨基酸(例如半胱氨酸和半胱氨酸衍生物例如高半胱氨酸)或硫代赖氨酸，从而仅提及少数合适候选物。形成硒桥的氨基酸例如硒代半胱氨酸也是合适的。但是，如上所述，能形成诸如酰胺键或疏醚键的共价键的其它氨基酸也是合适的。因此，在位置X6和X"处的优选氨基酸的选择包含C，K，E，ct-氨基-Y-溴代丁酸，高半胱氨酸(hoc)，和半胱氨酸衍生物例如硒代半胱氨酸，硫代赖氨酸。这适用于本发明的所有实施方案。存在于根据本发明的第三个实施方案的肽中的带负电荷的氨基酸可以选自*天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;*非天然的带负电荷的氨基酸，*最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。非天然的带负电荷的侧链可以描述伸长的侧链。伸长的侧链可能能更有效地接触EP0受体的带正电荷的氨基酸，从而增加结合能力。这样的氨基酸的实例是ot-氨基已二酸(Aad)，2-氨基庚二酸(2-氨基庚二酸)或oc-氨基辛二酸(Asu)。如指出的，通过将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸，也可能提供带负电荷的氨基酸。由此也可能伸长侧链。这可以提高对EP0受体的结合性质。根据该新颖策略，用合适的试剂衍生化带正电荷的氨基酸例如赖氨酸(或同源的更短的氨基酸，如Dap，Dab或鸟氨酸)，提供带负电荷的基团。合适的试剂是例如二酸例如二羧酸或二磺酸。戊二酸，已二酸，琥珀酸，庚二酸和辛二酸可以作为实例提及。下面提供了用戊二酸伸长且带上负电荷的赖氨酸的一个合适的实例对于提高本发明的EP0模拟肽的结合性质非常有利的这种延伸策略也可以用于提高不同分子的特征。因而它是一种完全独立的技术构思。因而，也提供了修饰的氨基酸，其中用合适的化学基团衍生化带正电荷的氨基酸，以便为带正电荷的氨基酸提供带负电荷的基团。从而将最初带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸。如果化学修饰延伸修饰的另一个可选方案是赖氨酸与已二酸的化合:也会导致侧链的伸长(这经常提高结合能力)，这是特别有利的。上面描述了修饰的合适试剂。如上所述，根据本发明的第二方面，仅仅必需的是，氨基酸位置X,。、Xn和/或Xn中的一个被带负电荷的氨基酸占据，尽管2个或所有位置也可以具有各自的氨基酸。但是，在这些位置中的一个或多个未被带负电荷的氨基酸占据的情况下，优选地带正电荷的氨基酸存在于X10、L和/或X^中的其它位置。该带正电荷的氨基酸优选地选自*天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸和鸟氨酸；非天然的带正电荷的氨基酸，例如高精氨酸或二氨基丁酸；*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。已经表明，当在位置X,。和/或Xn处存在带正电荷的氨基酸(它具有比赖氨酸伸长的侧链)时，可以创建非常有效的EP0模拟肽。根据一个实施方案，通过将延伸单元掺入氨基酸(它不一定是赖氨酸)的侧链，伸长带正电荷的氨基酸。也可以将更短的氨基酸用作原料，然后通过适当的常规化学反应来伸长。通常，延伸单元是脂族(例如CH2单元)或芳族(例如苯基或萘基单元)基团。适当氨基酸的实例是例如高精氨酸，氨基苯丙氨酸和氨基萘基丙氨酸。由于其更大的多样性，非蛋白原性的氨基酸是优选的。与在至少一个其它氨基酸位置X^X17和/或x19处的带负电荷的氨基酸相组合的该实施方案会产生有效的EPO模拟肽，它们是在人和动物模型中具有差异活性模式的合适候选物。对于用于兽医用途的EP0模拟肽，优选地带负电荷的氨基酸位于位置19。实验表明，具有各个特征的肽经常具有对动物EPO受体的更好的结合能力。对于兽医用途，特别优选地，在位置19的带负电荷的氨基酸选自E，D或Aad。有益的是将该特征与在位置13的萘基丙氨酸(优选Nal-l)相组合。此外，优选地带正电荷的氨基酸是在位置17，优选K或Har。也优选地，带正电荷的氨基酸是在位置10，优选赖氨酸。在图7c中显示了该实施方案的EPO模拟肽的特别优选的实例。更具体地，用于兽医用途的EP0模拟肽序列包含选自下述的氨基酸序列Ac-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCK-Har-QDG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCK-Har-Q-Aad-G-AmGGGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQ-Aad-G-Am本发明的该第三实施方案也可以与下述特征相组合，其中Xs是D-氨基酸，优选D-苯丙氨酸。该实施方案的扩展的共有序列包含下述额外的氨基酸X4可以是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基。如上面结合第二个实施方案已经描述的，所述吸电子取代基优选地选自氨基，硝基和卣素。合适实例是4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。Xs可以选自任意氨基酸，但是，它优选是A，H，K，L，M，S，T或I。X3也可以存在，且可以独立地选自任意氨基酸，优选D,E，L，N，S，T或V。此外，特别在单体单元形成二聚体的情况下，优选地在单体起始(例如位置L和X2)和单体结尾(例如L和XJ处的氨基酸描述小柔性氨基酸例如甘氨酸或P-丙氨酸，以便提供柔性构象。如结合本发明的第二个实施方案已经描述的，在位置Xu提供萘基丙氨酸(nal-l或nal-2)是有利的。Nal在位置13的掺入导致如上所述的肽单体之间更强的疏水相互作用，从而潜在地增强单体肽链的二聚化，并可能稳定化肽二聚体的构象，从而提高EP0模拟活性。2个实施方案(第二个和第三个)的组合是非常有利的。在图7a中提供了包含萘基丙氨酸的合适肽序列的实例。根据本发明的第四个实施方案，提供了长度为至少IO个氨基酸的肽，其能结合EPO受体，且具有激动剂活性，其包含下述核心氨基酸序列XgXgXi0X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中Xs是D-氨基酸；X,是G或G的保守交换；A。是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换；或X,和Xw被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X"是D，E，I，L或V;X^是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ot-氨基-Y-溴代丁酸。也包含选自下述的肽根据第四个实施方案的肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置8具有D-氨基酸。本发明的第四个实施方案的突出特征是，在位置Xs存在D-氨基酸。D-苯丙氨酸是优选的。该实施方案似乎是区分动物和人EPO-受体的良好候选物。在位置8的oc-C-原子的反转，导致苯基的不同几何学位置，它可以更好地适合动物受体，尤其犬EP0R。本发明的该第四个方面也可以与随后所述的其它有利实施方案相组合。根据本发明的第四个实施方案的肽也可以用下述扩展的核心氨基酸序列来描述X6X7X8X9X10X11X12X13X"X15其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ct-氨基-Y-溴代丁酸；页X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是D-M，D-F，D-I，D-Y，D-H，D-高丝氨酸甲基醚或D-正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；L是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换；或X,和Xt。被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；Xn是D，E，I，L或V;X^是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸。本发明的第四个实施方案的另一个实施方案可以用下述氨基酸序列来描述X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X15X17X13X19其中X6-X15具有上面结合本发明的第四个实施方案所述的含义，且其中Xu独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R,S，Har或T;X!7独立地选自任意氨基酸，例如A，G，P，Y或带电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，在带正电荷的氨基酸的情况下，优选K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸；Xis独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;X19独立地选自任意氨基酸。也与本发明的第四个实施方案相结合，优选地带电荷的氨基酸是在位置Xn、Xn和/或X^。实验表明，用带电荷的氨基酸会实现非常好的EPO模拟活性程度。但是，如果与其它位置的正确氨基酸相组合，在这些位置的不带电荷的、但是极性的氨基酸(例如丝氨酸，苏氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺)通常也会提供良好结果。在位置Xn、Xn和/或X^处的带电荷的氨基酸是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生的氨基酸。根据一个方面，X1Q、Xn和/或Xw是带负电荷的氨基酸。所迷带负电荷的氨基酸优选地选自争天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;*非天然的带负电荷的氨基酸，參最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。非天然的带负电荷的侧链可以描述伸长的侧链，这样的氨基酸的实例是ct-氨基已二酸(Aad)，2-氨基庚二酸(2-氨基庚二酸)或oc-氨基辛二酸(参见上面)。如指出的，通过将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸，也可能提供带负电荷的氨基酸。由此也可能伸长侧链，从而潜在地增强结合性质。根据该新颖策略(细节参见上面)，用合适的试剂衍生化赖氨酸(或同源的更短的氨基酸，如Dap，Dab或鸟氨酸)，提供带负电荷的基团。合适的试剂是例如二酸例如二羧酸或二磺酸。戊二酸，已二酸，琥珀酸，庚二酸和辛二酸可以作为实例提及。根据另一个方面，所述肽携带在位置X,。、Xn和/或Xw处的带正电荷的氨基酸。所述带正电荷的氨基酸选自*天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸或鸟氨酸；*非天然的带正电荷的氨基酸，*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。已经表明，当在肽的位置t。和/或Xu处存在具有与赖氨酸相比伸长的侧链的氨基酸时，可以创建非常有效的EP0模拟肽。根据一个实施方案，通过将延伸单元掺入氨基酸(它不一定是赖氨酸)的侧链，伸长带正电荷的氨基酸。也可以将更短的氨基酸用作原料，然后通过适当的常规化学反应来伸长(参见上面)。通常，延伸单元是脂族(例如CH2单元)或芳族(例如苯基或萘基单元)基团。适当的氨基酸的实例是例如高精氨酸，氨基苯丙氨酸和氨基萘基丙氨酸。由于它们的更大的多样性，非蛋白原性的氨基酸是优选的。一个替代途径是，用带正电荷的基团衍生化氨基酸，所述带正电荷的基团不仅允许电荷反转(成正电荷)，而且会提供延伸分子的容易途径。根据该实施方案的进一步发展，所述肽用下述扩展的核心氨基酸序列来定义X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18X19其中Xe至Xw具有上面结合本发明的第四个方面所述的含义，且其中X4-是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；X5-选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。所述吸电子取代基优选地选自氨基，硝基和卣素。l也可以选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。X3也可以存在，且可以独立地选自任意氨基酸，优选D，E，L，N，S，T或V。此外，在单体单元形成二聚体的情况下，优选地在单体起始(例如位置Xi和X2)和单体结尾(例如Xw和X2。)的氨基酸位置描述小柔性氨基酸例如甘氨酸或p-丙氨酸，以便提供构象柔性。如结合本发明的第二个实施方案已经描述的，有利地提供在位置X,3的萘基丙氨酸。Nal在位置13的掺入导致如上所述的肽单体之间更强的疏水相互作用，从而潜在地增强单体肽链的二聚化，并可能稳定化肽二聚体的构象，从而提高EPO模拟活性。根据本发明的第五个实施方案，提供了一种肽，它也是具有物种区分活性的EPO模拟肽的良好候选物。该肽包含至少IO个氨基酸，能结合EP0受体，且具有激动剂活性。该EPO模拟肽包含下述核心氨基酸序列X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氛基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中L-是F、或F或Y衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；Xs-选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y，H，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；X:。是脯氨酸的非保守交换或X,和Xn被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X"是D，E，I，L或V;Xu是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或a-氨基-y-溴代丁酸。也包含选自下述的肽上述肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置X,具有选自F、或F或Y衍生物的氨基酸，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基。所述吸电子取代基可以选自氨基，硝基和卣素。X,优选地选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。在从属权利要求中描述了本发明的该第五个实施方案与其它实施方案的其它有利的组合。关于各个特征的细节，也参见上面的描述，结合各个实施方案详细解释了所述特征。X,突变和D-苯丙氨酸突变的组合是特别合适的。根据本发明的另一个实施方案，提供了几种替代性的肽，用于提供改良的EPO模拟肽。根据本发明的该第六个实施方案，提供了长度为至少10个氨基酸的肽，其能结合EPO受体，且具有激动剂活性。该第六个实施方案的可选方案(a)包含至少一个下述的核心氨基酸序列X9X1。X11X12X13;X9X1。X11X12X13X14X15X16乂i7或X9X1oXi1X12Xl3X14X15X^X17X18乂1其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X,是G或G的保守交换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X,3是W，萘基丙氨酸，A或F;Xm是D，E，I，L或V;x^是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或a或oc-氨基-y-溴代丁酸；其中位置X^、X16、Xn或X19中的至少一个具有带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。也包含选自下述的肽上述肽共有序列的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置Xi。、X16、Xn或Xw中至少一个处具有氨基酸，该氨基酸描述带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。本发明的该第六个实施方案描述了一个替代策略，该替代策略通过在位置X,。、X16、Xn和/或X19中至少一个处延伸EPO模拟肽的带正电荷侧链，也开辟了潜在地区分人和动物受体的选择。该实施方案提供了区分肽的合适候选物，因为在鼠和犬EP0受体中存在更少的带负电荷的对接点，更短的带正电荷的侧链(例如赖氨酸)更难达到这些对接点。因而，具有更长侧链的带正电荷残基的掺入，具有增加肽对EP0受体的亲和力的高潜力。在申请人的早期申请PCT/EP2005/012075中已经公开了在位置X^和/或Xn处具有高精氨酸的序列。根据有些国家的专利法，该公开内容可能构成现有技术。在可适用且可能置疑上述共有序列的专利性的国家，本发明第六个实施方案的第一个可选方案的共有序列为了法律原因可以不包含在PCT/EP2005/012075中公开的序列。这可以应用于选自下述的共有序列*一种肽，尤其是能结合EPO受体的肽，其包含下述氨基酸序列XsXyXgXsXi0X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X6是C，A，E，oc-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc);X,是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；X:。是HarXn选自任意氨基酸；Xu是T或A;X"是W，l-nal,2-nal，A或F;X4是D，E，I，L或V;X^是C，A，K，a-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc)条件是，X6或Xu是C或hoc或*一种肽，其包含下述氨基酸序列X3X4X5X6X7X3X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18其中X6至Xu具有上述含义，且其中X3独立地选自任意氨基酸，优选D，E，L，N，S,T或V;Xs独立地选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。Xw独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S或T;Xn是高精氨酸；x18独立地选自任意氨基酸。或GGTYSCSFGKLTWVCK-Har-QGGGGTYSCHFG-Har-LTWVCK-Har-QGG这些序列已经描迷在申请人的早期PCT申请PCT/EP2005/012075中。在PCT/EP2005/012075的公布后的公开内容不会导致专利性问题的国家，上面列出的共有序列和肽序列不需要从第六个实施方案的第一个可选方案的宽共有序列中放弃。根据本发明的第六个实施方案的进一步发展，所述肽包含下述扩展的核心氨基酸序列XsXyXsXgX!0X11X12X13X14X15X1eX!7X19其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ot-氨基-y-溴代丁酸；X7是R，H，L,W或Y或S;X8是M，F，I，Y，H，高丝氨酸曱基醚或正异亮氨酸；X9是G或G的保守交换；在Xi。不是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸(其具有与赖氨酸相比伸长的侧链)的情况下，X:。是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换，或X9和Xn被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；Xu是W，l-nal,2-nal，A或F;Xw是D，E，I，L或V;x15是具有能形成共价鍵的侧链官能度的氨基酸或a或oc-氨基-y-溴代丁酸；'在x^不是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸(其具有与赖氨酸相比伸长的侧链)的情况下，Xw独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S或T;在Xn不是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸(其具有与赖氨酸相比伸长的侧链)的情况下，Xu选自任意氨基酸，优选A，G，P，Y或带正电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，优选K，R，H或鸟氨酸；Xu独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;在Xw不是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸(其具有与赖氨酸相比伸长的侧链)的情况下，Xw独立地选自任意氨基酸，优选带电荷的氨基酸例如带正电荷的氨基酸例如K，R，H或鸟氨酸或带负电荷的氨基酸例如D，E或Aad;条件是，XmX16、Xn或X19中的至少一个是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。根据另一个实施方案，Xi。、X16、Xn或X19中的至少一个是带正电荷的氨基酸，且其中所述带正电荷的氨基酸优选地选自參天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸和鸟氨酸；非天然的带正电荷的氨基酸，參最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团；条件是，Xlfl、X16、&7或X19中的至少一个是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。如上所述，通过侧链的延伸单元，可以延伸带正电荷的氨基酸，其中所述延伸单元脂族或芳族基团。所述延伸可以通过例如CH2单元来提供，其中CH2单元的数目优选地是1至6。或者，所述延伸也可以用芳族基团例如苯基或萘基单元来实现。带正电荷的非蛋白原性的与赖氨酸相比伸长的氨基酸优选地是非天然氨基酸。非天然氨基酸会提供更多选择，从而减小发现完全匹配的伸长的氨基酸的可能性。合适的非天然的伸长的氨基酸的实例是例如高精氨酸，氨基苯丙氨酸和氨基萘基丙氨酸。在位置Xn处的伸长的带正电荷侧链似乎与鼠/犬EP0受体更好地相互作用。尤其证实了高精氨酸(它是人工伸长的同源精氨酸)是合适的。该氨基酸胜过赖氨酸，且能与鼠/犬EP0受体中更远的带负电荷的氨基酸相互作用(动物EPO受体中的Glu60和Glu62)。在位置X!。处的伸长的带正电荷侧链具有与上述在位置Xn处的突变类似的作用。也在该情况下，通过延伸可以达到更远的带负电荷的氨基酸(鼠/犬EPO受体中的Glu34)。希望组合在位置X,。和Xn的突变/特征。在这2个位置均携带伸长的带正电荷的氨基酸(例如高精氨酸)的肽的几何学，指示着与EPO受体的强相互作用。所述的氨基酸优选是非蛋白原性的。来自每个高精氨酸残基的多个氢键，强化了提供的静电相互作用的强度。根据本发明的第六个实施方案，X1Q、X16、Xn和/或Xn中的至少一个具有非蛋白原性的伸长的带正电荷的氨基酸。Xi。、X^Xn和/或X19中的其它位置也可以具有带电荷的氨基酸，它是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生化的氨基酸。根据一个可选方案，Xi。、Xn和/或Xi,中的至少一个是带负电荷的氨基酸。在X!。、X!7和/或Xu是带负电荷的氨基酸的情况下，所述带负电荷的氨基酸优选地选自參天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;*非天然的带负电荷的氨基酸，*最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。非天然的带负电荷的侧链可以具有伸长的侧链。这样的氨基酸的实例是oc-氨基已二酸(Aad)，2-氨基庚二酸(2-氨基庚二酸)或oc-氨基辛二酸。如指出的，通过将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸，也可能提供带负电荷的氨基酸。由此也可能伸长侧链，从而增强结合性质。根据该新颖策略，用合适的试剂衍生化赖氨酸(或同源的更短的氨基酸，如Dap，Dab或鸟氨酸)，提供带负电荷的基团。合适的试剂是例如二酸例如二羧酸或二磺酸。戊二酸，已二酸，琥珀酸，庚二酸和辛二酸可以作为实例提及。也请参考我们在上面对该实施方案的详细讨论。在位置X1Q、X16、Xn和/或Xw中的至少一个具有伸长的带正电荷的非蛋白原性的氨基酸的条件下，该肽也可以在位置X1Q、X16、Xn和/或Xw处携带"正常的，，带正电荷的氨基酸。所述带正电荷的氨基酸选自參天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸或鸟氨酸；非天然的带正电荷的氛基酸，*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。本发明的第六个实施方案的进一步发展提供了在X8的D-氨基酸，优选D-苯丙氨酸。根据第六个实施方案的进一步发展，所述肽包含下述扩展的核心氨基酸序列X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X15X17X18X19其中X6至Xw具有上述含义，且其中X,-是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；Xs-选自任意氨基酸，优选A，H，K,L，M，S，T或I。如上所述，所述吸电子取代基可以选自氨基，硝基和卣素。实例是4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。X3也可以存在，且可以独立地选自任意氨基酸，优选D，E，L，N，S，T或V。此外，在单体单元通过连续的肽接头形成二聚体的情况下，优选地在单体的N-末端区域(例如位置Xi和X2)和单体的C-末端区域(例如X"和X2。)的氨基酸描述小柔性氨基酸例如甘氨酸或p-丙氨酸，以便提供柔性构象。为了提高EP0模拟活性和/或为了实现人和动物EP0-R的区分，除了总体的EP0模拟肽以外，本申请描述了不同的方式和策略。所述的本发明的不同策略和方面可以彼此组合，以便获得具有需要的性质的"定制的"EP0模拟肽。因而重要的是认为，所述策略可以理解为设计单元，它们可以独立地彼此组合，以便获得具有需要的性质的EP0模拟肽。例如，第二个实施方案的特征(在位置Xu处的萘基丙氨酸)可以与第三个实施方案的特征(Xi。、Xn和X^中的至少一个是带负电荷的)相组合。根据上述实施方案1-6的肽的长度优选地是10至40或50或60个氨基酸。在优选的实施方案中，肽共有序列的长度是至少10，15，18，20或25个氨基酸。当然，所述共有序列可以分别嵌入更长的序列中。所述肽共有序列可以视作形成EPO受体的结合域。如上面和下面所述的，也可能将单体肽单元(结合域)组合成肽二聚体或甚至多聚体。在肽接头用于制备二聚体或多聚体的情况下，由于二聚化和/或多聚化，也会制备更长的肽。作为EPO模拟肽，它们能结合EPO受体。根据本发明的EPO模拟肽序列可以具有N-末端和/或C-末端乙酰化和酰胺化。有些氨基酸也可以被砩酸化。根据本发明的肽，除了L-氨基酸或立体异构D-氨基酸之外，还可包含非天然/非常规的氨基酸，例如a，oc-二置换的氨基酸、N-烷基氨基酸或乳酸，例如l-萘丙氨酸、2-萘丙氨酸、高丝氨酸-曱基醚、P-丙氨酸、3-吡啶丙氨酸、4-羟脯氨酸、O-磷酸丝氨酸、N-甲基甘氨酸(肌氨酸)、高精氨酸、N-乙酰丝氨酸、N-乙酰甘氨酸、N-甲酰甲硫氨酸、3-甲基组氨酸、5-羟基赖氨酸、正-赖氨酸、5-氨基乙酰丙酸或氨基戊酸。特别优选使用N-甲基甘氨酸(MeG)和N-乙酰甘氨酸(AcG)，特别是在末端位置。同样在本发明范围内的是，作为所定义肽的逆肽(retropeptide)、反向肽(inversopeptide)和逆/反向肽的肽，以及全部由D-氨基酸组成的那些肽。本发明还涉及肽的衍生物，如甲硫氨酸的氧化产物、或脱酰胺基的谷氨酰胺、精氨酸以及c末端酰胺。根据本发明的实施方案的一个发展，所述肽确实具有置换氨基酸残基X9和X!。的单个氨基酸。在这个实施方案中，同样两个残基都可以'根据进二步发i，第一个^第六个实:方^中所述的肽在1和/或x15包含作为具有成桥官能度的氨基酸c，半胱氨酸衍生物例如硒代半胱氨酸，E，K或hoc，和/或X,作为R，H或Y或S,和/或Xs作为F或M，和/或X9作为G或A，优选G，和/或X!。作为K或Har，和/或Xu作为V，L，I，M，E，A，T或正异亮氨酸，和/或Xu作为T，和/或X13作为W或萘基丙氨酸，和/或X"作为D或V，和/或Xn作为P，Y或A或碱性的天然的或非天然的氨基酸。但是，也优选地，如上所述，X17是K或具有带正电荷侧链的非天然氨基酸例如高精氨酸。根据本发明的片段、衍生物和变体多肽基本上保留了与根据本文所述单个实施方案的肽相同的生物学功能或活性。为了将它们适当地与现有技术区分开，片段、衍生物和变体具有与各个实施方案相同的特征-关于实施方案1，它们在位置X!。处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X,和Xi。被单个氨基酸置换；-关于实施方案2，它们在位置X^处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X,和L。被单个氨基酸置换，且具有在位置X13处的萘基丙氨酸；-关于实施方案3，位置L。、Xn或Xw中的至少一个是带负电荷的氨基酸；-关于实施方案4，它们在位置X8处携带D-氨基酸；-关于实施方案5，它们在位置Xi。处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X9和Xi。被单个氨基酸置换，且在位置^处具有F、或F或Y衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；-关于实施方案6，位置Xu、X16、Xn或Xw中的至少一个具有带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。"片段"小于全长肽(或多肽，本文使用的术语肽不包含任何大小限制)，它基本上保留了类似的功能活性。"衍生物"包括已经被化学修饰以提供额外的结构和/或功能的肽。衍生物可以通过天然过程或通过化学修饰技术来修饰，这二者是本领域众所周知的。修饰可以发生在多肽的任意位置，包括肽主链、氨基酸侧链和氨基或羧基末端。其它化学修饰包括例如乙酰化，酰化，酰胺化，不同化学部分的共价结合，交联，环化，二疏键或其它桥形成，羟基化，甲基化，氧化，PEG化，硒化。根据本发明的肽的"变体"包括相对于在共有序列中定义的氨基酸具有一个或多个氨基酸序列交换的多肽。当然，它们也可以含有除了天然氨基酸以外的氨基酸。例如，在根据本发明的多肽的氨基酸序列中，可以进行一个或多个保守性氨基酸置换，以便获得如上所述的本发明不同实施方案的功能变体。所述置换发生在例如具有非极性侧链的氨基酸、具有极性侧链的天然的或非天然的不带电D-或L-氨基酸、具有芳族侧链的氨基酸、天然的或非天然的带正电荷的D-或L-氨基酸、天然的或非天然的带负电荷的D-或L-氨基酸以及相似大小和分子量的任何氨基酸中，其中原始氨基酸的分子量不应与原始氨基酸的分子量偏差超过大约+/-25%，并保持对激素红细胞生成素受体的结合能力，具有激动效应。优选地，置换不超过l、2或3个氨基酸。优选在10和17位上未引入脯氨酸的序列变体。本文中所述的肽序列可被用作适宜的单体肽单元，其构成EP0受体的结合结构域。它们可以以其单体形式被使用，因为它们结合EP0受体。如本文中所述的，它们优选被用作二聚体，因为已显示通过单体结合单元的二聚化增强了诱导EP0受体二聚化的能力并因此增强了生物学活性。因此，显然许多不同的肽都在本发明的范围之内。但是，已经发现序列Ac-VLPLYRCRMGRETWECMRAAGVTK-NH2具有一定的缺点，并因此根据本发明不是优选的。在所述单个肽序列的起点(N未端)和终点(C未端)，可除去和/或加入至多五个氨基酸。不言而喻，只要保存了肽功能，大小并不相关。此外，请注意，可能太短以致作为单体不能表现其活性的单独肽序列通常在二聚化后起激动剂的作用。因此，优选以它们的二聚体形式使用这类肽。因此，本发明的精神也包括各自截短和或延长的实施方案。在本发明中，大写字母形式的单字母代码的缩写是标准多肽命名法的那些缩写，其通过添加非天然氨基酸而被扩展。<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>pL-脯氨酸G甘氨酸Ava，5-Ava5-氦基戊酸Als，5-Als5-氨基乙酰丙酸MeGN-甲基甘氨酸AcGN-乙酰甘氨酸Hsm高丝氨酸曱基醚Har高精氨酸lnall-萘丙氨酸2nal2-萘丙氨酸fiAlaP-丙氨酸hoc/hcy高半胱氨酸Ac乙酰化的Am酰胺化的Dap二氨基丙酸Dab二氨基丁酸Aada-氨基已二酸Asucc-氨基辛二酸Adi已二酸，Glr戊二酸Sec硒代半胱氨酸如上所述，本发明还包括通过单个氨基酸的保守交换而进行的所述肽和所定义的肽共有序列的修饰。这类交换改变结合分子的结构和功能，但在大多数情况下只是轻微地改变。在保守交换中，一个氨基酸被具有相似性质的一组中的另一个氨基酸置换。相应组的实例是-具有非极性侧链的氨基酸A、G、V、L、I、P、F、W、M-具有极性侧链的不带电荷的氨基酸S、T、G、C、Y、N、Q-具有芳族侧链的氨基酸F、Y、W-带正电荷的氨基酸K、R、H-带负电荷的氨基酸D、E-相似大小或分子量的氨基酸，其中置换氨基酸的分子量与原始氨基酸的分子量偏差最大为+/-25%(或+/-20%、+/-15%、+/-10%)。不言而喻，在具有带正电荷的侧链的组的情况下，该组还包括具有各自侧链特性的非蛋白原性的、天然的或非天然的氨基酸，例如高精氨酸。如果不能明确将置换脯氨酸10的分子例如非天然氛基酸分配到以它们的侧链性质为特征的上述组中，通常应将其看成是根据本发明的脯氨酸的非保守性置换。关于对这些稀有氨基酸分类，根据分子量的分类辅助可能是有帮助的。更具体地说，Wrighton等人(美国专利5，773，569，以及相关专利)使用噬菌体展示技术进行了详细考查，其氨基酸可被置换，同时保持活性。他们还研究和公开了关于可能截短型，即给定EPO模拟肽的最小长度的数据。但是，靠近中心甘氨酸残基的脯氨酸似乎是获得活性肽的唯一可能性。优选地，所述肽在N末端被修饰成AcG，和在C末端修饰成MeG。如上所述，优选地所述肽包含2个EP0模拟共有序列，且因而包含2个单体结合单元，从而形成二聚体(或在氨基酸接头用于二聚化的情况下，连续的二价肽)。为了形成二聚体，可以从所有上述实施方案选择单体EPO模拟肽单元。根据本发明的单体结合单元也可以与本领域已知的EPO模拟肽的单体结合单元相组合。根据本发明的EPO模拟肽单体或二聚体还可包含至少一个间隔子部分。优选所述的间隔子将单体或二聚体的接头连接至水溶性聚合物部分或保护基上，其例如可以是PEG。PEG优选的分子量为至少3KD，优选在20和60KD之间。间隔子可以是末端具有-NH-键或COOH-基团的C1-12部分，并任选在一个或多个可利用的碳原子上被低级烷基取代基取代。在WO2004/100997中公开了特别优选的间隔子。所有文件-WO2004/100997和WO2004/101606-通过参考引用并入本文。在W02004/101600中公开了PEG修饰的肽，其同样通过参考引用并入本文。2条肽链之间的共价接头的设计存在几种可能的选择，以便得到二聚体或多聚体。所述肽可以通过氨基酸侧链或通过主链延伸来连接。随后描述了4种不同的主要的共价连接2个EP0模拟肽部分的二聚化策略作为合适策略的实例。1.从C-末端至C-末端的末端二聚化NCNC借助于在每个肽的c-末端的二酮哌溱结构，可以实现二聚化。通过活化c-末端氨基酸、优选甘氨酸，可以得到二酮哌漆接头。下图显示了合适的实例实例a:i-1GGTYSCHFGKLTWVCKKQGGG-GGGTYSCHFGKLTWVCKKQGGG-G」GGTYSCHFGKLTWVCKKQGGGI0GGTYSCHFGKLTWVCKKQGGG二O实例b:GGTYSCHFGKLTWVCKKQGG-G+GGTYSCHFGKLTWVCKKQGG-GI1GGTYSCHFGKLTWVCKKQGG0、乂GGTYSCHFGKLTWVCKKQGG实例c:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>应当注意，根据本发明的第二个实施方案，在位置13处应当存在萘基丙氨酸，而不是色氨酸。上述序列仅仅用于描述二聚化原理/概念，但是，对于本申请所述的其它肽也适用。2.从N-末端至N-末端的末端二聚化<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>下述实例代表二聚肽，其中所述单体肽之一的N-末端共价结合到另一个肽的N-末端，由此间隔子单元优选含有二羧酸构件块。实例a:含有己二酰(C6)单元作为接头/间隔子的二聚体的实例GGGTYSCHFGKLTWVCKKQGGCO-(CH2)4_COGGGTYSCHFGKLTWVCKKQGG通过分子建模定制该二聚体结构中的连接桥，以避免生物活性构象的扭曲变形。实例b:含有辛二酰(C8)单元作为接头/间隔子的特制二聚体的实例GGGTYSCHFGECLTWVCKKQGGCO-(CH2>6-COGGGTYSCHE"GKLTWVCKKQGG3.通过侧链二聚化此外，通过假定形成二聚体的单体肽的侧链之间形成的共价键，可以发生二聚化。NCNC、)(7存在几个选择根据一个实施方案，EPO模拟肽-EPOR复合物中在位置Xw处的氨基酸(例如Gln)的侧链彼此邻近。这些Glnl8侧链可以被替换为共价桥。下式显示了通过位置18的氨基酸的侧链连接的肽二聚体的实例GGTYSCHFGKLTWVCKKXGGIOc^/(CH2)kHN,/(CH2)nHNO^^CH2)nGGTYSCHFGKLTWVCKKXGGi-1GGTYSCHFGKIiTWVCKKXGGIS/(CH2、fCH2)nGGTYSCHFGKIjTWVCKKXGG在设计适当的接头时，必须考虑正确的距离和几何学。当优化具有下式的肽的几何学时，结构与天然肽二聚体相比^f皮收缩和变形GGTYSCHFGKIjTWVCKKXGGI。/(CH2):GGTYSCHFGKIiTWVCKKXGG与以前的结果不同，通过位置18的硫代赖氨酸的二聚化不会实质性地扭曲二聚体。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>根据一个不同的策略，使肽单体彼此相连从而形成二聚体的共价桥，是在第一个单体肽单元的C-末端氨基酸和第二个肽单体的N-末端氨基酸的侧链之间形成。因此，优选地，根据该二聚化策略，要二聚化的EPO模拟肽在N-或C-末端携带具有成桥官能度的氨基酸，从而在第一个肽的最后一个氨基酸和第二个肽的第一个氨基酸之间形成共价键。产生二聚体的键优选是共价的。各个桥的合适实例是例如二硫桥和二硒桥。但是，例如在带正电荷和带负电荷的氨基酸之间的酰胺键或诸如硫醚键的其它共价连接键也适合用作连接部分(参见上面关于实施方案1)。结合本发明的第一个实施方案，描绘了适合用于形成各个连接桥的优选氨基酸。它们是例如半胱氨酸，半胱氨酸衍生物例如高半胱氨酸或硒代半胱氨酸或硫代赖氨酸。它们形成二硫桥，或在含硒氨基酸的情况下，形成二硒桥，下面给出了分别创建的二聚体的合适实例<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage65</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>_..............i根据进一步发展，肽二聚体(和由此位于二聚体的起始或结尾的相应单体肽单元)在N-或C-末端包含一个额外氨基酸，其允许诸如HES的载体的偶联。结果，引入的氨基酸携带各个偶联官能度例如SH-基团。这样的氨基酸的一个普通实例是半胱氨酸。但是，具有允许形成基酸)也是合适的。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>在肽单体上方的线条代表分子内共价桥；在此情况下是二硫桥。根据进一步发展，在C和/或N末端参与形成共价桥(其将单体单元连接成二聚体)的氨基酸，描述了带电荷的基团例如C0(T或冊3+基团。该特征导致分子间桥的结构的有利的稳定化Ac-C(tBu)-(3(3TYSCSF(3KIiT-Nal-VCK-Har-QG-Cys-C00(-),一',...."'S(+)H3W-Cys-OTYSCSFGKLT-Nal-VCK-Har-QG(3-Am4.连续的二价肽NCNCl_/\_/这种策略的核心概念避免在二聚化或多聚化前的单独反应中合成单体肽单元，但可在一个步骤中合成作为单个连续肽的最终的二价或多价肽，如在一个单固相反应中。因此不再需要单独的二聚化或多聚化步骤。这个方面提供了很大的优点，即对最终的肽单元中的各个序列位点的全面和独立控制。由于对各个序列位置的独立控制，该方法容许在一个连续肽单元中容易地包含至少两个不同的受体特异结合结构域。根据该实施方案，在结合结构域(即"接头区")之间的最终肽序列仅仅由氨基酸组成，因此产生一个单一的、连续的二价-或多价EPO模拟肽。在本发明的优选实施方案中，所述肽接头由符合高度构象柔性要求的天然或非天然的氨基酸组成。在这方面，有利的是使用已知其在扭转方面高度柔性的甘氨酸残基作为连接氨基酸。但是，也可使用其它的氨基酸(例如丙氨酸或P-丙氨酸、或其混合物)来创建肽接头。所用氨基酸的数量和选择取决于各自的空间情况。本发明的这个实施方案容许通过分子建模定制设计适宜的接头，以避免生物活性构象的扭曲。特别优选由3至5个氨基酸组成的接头。值得注意的是在最终的二价或多价肽的功能域(或单体单元)之间的接头可以是肽的独特部分，或是完全或部分地由属于单体功能域一部分的氨基酸组成。例如，在肽单体的开始(例如位置Xi和Xj和肽单体的结尾(例如位置Xw和Xj处的小柔性氨基酸是优选的，以便形成柔性接头，在连续的二价肽的情况下，这些位置的优选氨基酸是例如甘氨酸或P-丙氨酸残基。实例参见Seq.11至14。因此，术语"接头"更应在功能上进行定义而不是在结构上进行定义，因为氨基酸可形成接头单元以及单体亚单元的一部分。如上所述，由于在合成二价/多价肽的期间，最终肽之中的各个序列位置是受控制的并因此可被精确确定，有可能定做或定制包含接头的肽或其特异区域或结构域。这具有特殊的优点，因为它可避免由于不利的分子内相互作用而扭曲最终二价肽的生物活性构象。在合成前，通过分子建模可评价扭曲的风险。这特别适用于设计在单体结构域之间的接头。具有用于二聚化的肽接头的连续二价/多价肽，显示出比相应单体肽高得多的活性，并因而证实了从其它二聚体肽已知的观测结果，即功效的增加与二价肽概念有关。连续的二价/多价肽可以通过例如乙酰化或酰胺化来修饰，或者可在C末端或N末端位置延长。用于上述单体肽(单体)的现有技术修饰，包括连接可溶性部分(例如PEG、淀粉或葡聚糖)，也可应用于根据本发明的多价肽或二价肽。所有可能的修饰也都可用来修饰接头。尤其是，将可溶性聚合物部分连接于接头例如PEG、淀粉或葡聚糖可能是有利的。根据本发明的最终多价或二价肽的合成，有利地还可包括在每个结合结构域中两次连续的和独立的形成二硫键或其它分子内的键。从而还可使肽环化。在本文中所^t艮道的肽单体基础上，可有利地形成根据本发明的二价结构。肽的反应性侧链可用作例如用于另外修饰的连接带。此外，二聚肽任选包含在第一个和第二个和/或第三个和第四个氨基酸之间的分子内桥，所述氨基酸具有成桥侧链官能度(X6和L)，例如半胱氨酸。所述肽可以通过如乙酰化或酰胺化进行修饰，或者在C末端或N末端位置延长。使用一个或多个氨基酸在两个末端(N或C)中的一个末端进行延伸反应，如制备聚合物的连接位点，经常产生可最好被制成连续肽的异二聚体二价肽单元。为了将载体偶联至蛋白和肽上，几种反应性氨基酸是本领域已知的。一种优选的偶联氦基酸是半胱氨酸，其可以偶联至N或C末端。但是，偶联方向可以产生显著差异，因而应当为每个肽小心地选择。这将在下述实施例的基础上予以证实使用下述2种二聚体AGEM400C6C412344100001Ac-3TYSCH'FGf《LT:l—，S;[，VC^K"2R彈gGTYSCHJr(3^lT兮HSfa;i，.VCKKQ]RG-Cys(tBu)—NH2AGEM40C6C412344100001Ac—Cys(tBu)—瞎G.TY9CHFGKLT;'i"^4蓬'rV^iKKQRGGGTYgPWC(^IVJl^"Na1—VCKK.QRf—NH21-Nal:1-萘基丙氨酸Cys(tBu):S4丁基4果护的L—半胱氨酸41聚体AGEM400C6C4和AGEM40C6C4具有相同的核心序列。AGEM40C6C4的氨基酸1-40与AGEM40C6C4的氨基酸2-41相同。唯一差别是tBu-保护的半胱氨酸的位置。该氨基酸不参与受体药物相互作用，但是会起将基团连接到最终的缀合物中的聚合栽体上的作用。在AGEM400C6C4的情况下，tBu-保护的半胱氨酸连接于C末端，在AGEM40C6C4的情况下，连接于N末端。连接的线条代表半胱氨酸桥。AGEM400C6C4有2个胜过AGEM40C6C4的优点。第一个优点是，它易于合成。AGEM400C6C4可以以比AGEM40C6C4更高的总产率分离。在合成AGEM40C6C4的线性序列的情况下，观察到副产物C1Z-22聚体(C1Z-RGGGTYSCHFGKLT-1-Nal-VCKKQRG-NH2，C1Z:2-氯千氧基羰基)。在用反相高压液相色镨(RP-HPLC)纯化该线性序列期间，它表现出与AGEM40C6C4的线性前体类似的色谱行为，因此难以与它分离，导致目标产物的总产率的损失。在AGEM400C6C4的情况下，没有发现类似化合物。AGEM400C6C4胜过AGEM40C6C4的第2个优点是，用聚合栽体可以更容易地实现去保护的肽的最终缀合物的分析。分析肽缀合物的一个策略是，通过内切蛋白酶的切割，选择性地降解缀合物。理想的是，在酶水解过程中，从聚合载体释放出全肽。通过标准的分析技术，如具有UV或MS检测的HPLC等，可以鉴别和定量这些肽片段。在AGEM400C6C4的情况下，可以用胰蛋白酶实现切割，所述胰蛋白酶是一种已知会高选择性地切割位于带电荷的氨基酸精氨酸和赖氨酸的C末端的肽键的内切蛋白酶(F.Lottspeich，H.Zorbas(Hrsg.)，"Bioanalytik，，,SpectrumAkademischerVerlag，Heidelberg,Berlin,1998)。应用于AGEM400C6C4的缀合物，这会释放覆盖了结合到载体分子上的原始肽的41个氨基酸中的38个的片段。在AGEM40C6C4的情况下，胰蛋白酶消化会释放出41个氨基酸中的仅21个的片段AGEM400C6C4的级合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage70</formula>AGEM40C6C4的缀合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage70</formula>释放出且通过随访分析可以检测出的片段被标记为灰色.由于活性药物成分的分析是一个关键问题，在开发过程中，AGEM400C6C4具有明显胜过AGEM40C6C4的优点。因而，在带正电荷的氨基酸位于各个位置的情况下，非常优选地掺入在C-末端的连接氨基酸(这里的半胱氨酸)，因为可能产生几乎完整的肽片段，其原因是，切割位点是由于在聚合物之前很远的在单体的位置x19的精氨酸。本发明的化合物可有利地用于制备人和/或兽用的药物组合物。它们因而适用于人和兽医治疗。作为EPO模拟物，它们显出与红细胞生成素基本上相同的定性活性模式。因此，它们通常适于与红细胞生成素适合的相同的适应症。红细胞生成素是细胞因子超家族中的成员。除了在引言中所述的刺激效应之外，还发现红细胞生成素可刺激干细胞。因此，本文中所述的EPO模拟物适合于由干细胞相关作用所引起的所有适应症。非限制性实例是预防和/或治疗与神经系统相关的疾病。实例是神经损伤、疾病或紊乱，例如帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、亨廷顿舞蹈病、多发性硬化、肌萎缩性侧索硬化、戈谢病、泰-萨克斯病、神经病、周围神经损伤、脑肿瘤、脑损伤、脊髄损伤或中风损伤。根据本发明的EPO模拟肽还适合于遭受心脏衰竭或处于遭受心脏衰竭危险中的患者的预防和/或治愈性治疗。实例是心肌梗塞、冠状动脉病、心肌炎、化学疗法治疗、酒精中毒、心肌病、高血压、瓣膜心脏病包括二尖瓣关闭不全或主动脉瓣狭窄和甲状腺紊乱、慢性和/或急性冠脉综合征。此外，EPO模拟物可用于刺激内皮前体细胞的生理动员、增殖和分化，用于刺激血管发生，用于治疗与内皮前体细胞的功能障碍相关的疾病，并用于生产治疗所述疾病的药物组合物和包含所述肽和其它适合于刺激内皮前体细胞的药剂的药物组合物。所迷疾病的实例是高胆固醇血症、糖尿病、内皮介导的慢性炎性疾病、内皮增生包括网状内皮增生、动脉粥样硬化症、冠心病、心肌缺血、心绞痛、年龄相关的心血管疾病、雷诺病、妊娠诱导的张力亢进、慢性或急性肾衰竭、心力衰竭、创伤愈合以及继发性疾病。此外，根据本发明的肽是用于输送药剂穿过血脑屏障的合适载体，并可用于相应的目的和/或生产能通过血脑屏障的相应的治疗缀合剂。本文中所述的肽特别适合于治疗以红细胞生成素缺乏或红细胞数目低或有缺陷为特征的障碍，并特别适合于治疗任何类型的贫血症或中风。该肽还适合于提高和/或维持哺乳动物中的血细胞比容。所述的药物组合物可任选包含药学上可接受的栽体，以便采取用于预定给药过程的组合物。例如在W02004/101611和W02004/100997中描述了合适的输送方法和载体以及添加剂。如上所述，与相应的单体肽相比，单体肽二聚化成二聚体或甚至多聚体通常提高EPO模拟物激动剂的活性。但是，期望进一步提高活性。例如，关于细胞机理活化，甚至二聚体EPO模拟肽的作用不如EPO强。现有技术中建立了几种方法以便提高肽的活性，例如通过变异氨基酸序列以便鉴定更有效的候选物。但是，迄今为止仍然期望进一步提高肽的活性，特别是EPO模拟肽的活性，以便改进生物学活性。本发明的另一个实施方案提供该问题的解决方法。其中提供了结合靶分子的化合物，并且该化合物包含i)至少两个肽单元，其中每个肽单元包含至少两个具有靶结合能力的结构域；ii)至少一个聚合载体单元；其中所述的肽单元结合所述的聚合载体单元。令人意外地是，已经发现根据本发明的两个或更多二价肽或多价肽在聚合物支持体上的组合，正在大大地增加二价(或甚至多价体)肽对其结合受体的效力，这不仅仅是加和的，而且是超过加和的。因此，观测到协同效应。将用于本发明目的的术语"二价"定义为包含两个具有结合把能力的结构域的肽，其中所述的乾特别是EPO受体。它与术语"二聚"交换使用。因此，"多价，，或"多聚"EPO模拟肽具有若干个相应的EP0受体结合结构域。不言而喻，术语"肽"和"肽单元"不包含与大小有关的任何限制，并包含寡肽和多肽以及蛋白。包含两个或更多个连接于聚合栽体单元的二价或多价肽单元的化合物，在该实施方案的上下文中被称为"超价物(supravalent)"。这些超价分子非常不同于现有技术中已知的二聚体或多聚体分子。现有技术仅仅组合成单体EPO模拟肽，以便产生二聚体。相反，通过将已经(起码)二价的肽单元连接至聚合栽体单元从而产生超价分子(附图给出了实例)，来生成超价物分子。因此，大大地提高肽的总体活性和效力，并因此减少EC50剂量。迄今为止，还没有完全了解与现有技术中已知的分子相比超价分子具有大效力的原因。可能是由于现有技术中已知的二聚体分子每个二聚体分别仅仅提供一个把受体结合单元。因此，在二聚体化合物的结合时，仅仅生成一个受体复合物，从而仅仅诱导一个信号转导过程。例如，通过PEG连接两个单体EPO模拟肽来形成肽二聚体，从而促进为信号转导所需的受体单体的二聚化(Johnson等人，1997)。与此相反；根据本发明的超价化合物包含一些已是二价或多聚的相应的受体结合单元。这可使得每个化合物分子在细胞表面上生成多个受体复合物，从而诱导多个信号转导并因此超加和性地加强肽单元的活性。超价化合物的结合可引起受体复合物在细胞表面上的成簇群集。这个实施方案中所用的EPO模拟肽单元可以是同质或异质的，这意谓着使用相同的或不同的肽单元。这同样适用于也可以是同质或异质的肽单元的结合结构域(如上所述的单体肽)。结合于载体单元的二价或多价肽单元结合相同的受体靶。但是，当然它们仍然能够在其氨基酸序列上有差异。二价或多价肽单元的单体结合结构域可以是线状的或环状的。例如，通过形成分子内半胱氨酸桥(参见上文)，可产生环状分子。聚合载体单元包含至少一个天然的或合成的分支的、线状的或树枝状的聚合物。聚合栽体单元优选可溶于水和体液，并优选是药学上可接受的聚合物。水溶性聚合物部分包括但不限于，如聚亚烷基二醇及其衍生物，包括PEG、PEG均聚物、mPEG、聚丙二醇均聚物、乙二醇和丙二醇的共聚物，其中所述的均聚物和共聚物是未被取代的，或在一端被下列所取代酰基；甘油聚合物或聚唾液酸；纤维素和纤维素衍生物，包括甲纤维素和羧甲基纤维素；淀粉(如幾烷基淀粉(HAS))，特别是羟乙基淀粉(HES)和糊精，及其衍生物；葡聚糖和葡聚糖衍生物，包括硫酸葡聚糖，交联糊精和羧甲基糊精；壳聚糖(一种线性多糖)肝素及肝素片段；聚乙烯醇和聚乙烯基乙基醚；聚乙烯吡咯烷酮；oc，p-聚[(2-羟乙基)-DL-天冬酰胺；和聚氧乙基化的多元醇。栽体单元的实例是同质双功能聚合物，例如聚乙二醇(二-马来酰亚胺，二-羧基，二-氨基等)。由于适合与本发明结合的不同聚合物的不同性质，偶联到至少2个二聚的EP0模拟肽(其包含根据本发明的单体共有序列)上的聚合栽体单元可以具有宽范围的分子量。因此没有大小限制。但是，优选分子量为至少3KD，优选至少IOKD和约20至500KD，更优选约30至150或约60或80KD。载体单元的大小取决于所选择的聚合物，并因此可发生变化。例如，特别当使用淀粉(例如羟乙基淀粉)时，分子量可相当地高。然后平均分子量可位于约100至4，OOOKD或甚至更高。但是，优选地，HES分子的分子量是约50至500kD，或100至300kD和优选约200kD。优选选择载体单元的大小，使得各个肽单元最适于结合它们各自的受体分子。为了有利于这一点，本发明的一个实施方案使用包含分支单元的载体单元。根据该实施方案，将聚合物(例如PEG)连接于分支单元，因此得到允许掺入许多肽单元的大载体分子。合适分支单元的实例是甘油或聚甘油。根据Haag(2000，在本文中被引入作为参考)的教导，例如还可使用树枝状分支单元。HES载体也可以以分支形式使用。例如如果它从支链淀粉获取至高比例。优选地，通过使单体结合单元与肽单元化合(头连接头、头连接尾或尾连接尾)而产生肽单元后，所述聚合物载体单元与所述肽单元连接。通过共价的或非共价的(如配位)键，将聚合载体单元连接/偶联到肽单元。但是，优选使用共价键。例如可通过肽单元的下列反应性氨基酸进行连接如赖氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸或N末端氨基以及C末端羧酸。在肽不携带各个氨基酸的情况下，可以将这样的氨基酸引入氨基酸序列。应当选择偶联，使得与靶物的结合不受阻碍或至少尽可能少地受到阻碍。依赖于肽单元的构象，反应性氨基酸是在肽序列的开头、结尾或内部。如果聚合栽体单元不具有合适偶联基团，可使用一些偶联物/接头，以便适当地修饰聚合物，使它能与肽单元上的至少一个反应性基团起反应，形成超价化合物。例如如下是可用于修饰聚合物的适宜化学基团与蛋白的氨基起反应的酰化基，例如酸酐基、N-酰咪唑基、叠氮化物基、N-羧基酐基、双乙烯酮基、二烷基焦碳酸酯基、亚氨酸酯基以及碳二亚胺活化的羧基。已知所有上述基团都与蛋白/肽上的氨基起反应，形成共价键，包括酰基键或相似的鍵；与肽单元氨基上的巯基(氢硫基)、硫代曱基、咪唑并基或氨基起反应的烷基化基团，例如囟-羧基、马来酰亚胺基、活化的乙烯基、乙撑亚胺基、芳卤基、2-羟基5-硝基-节基溴基团；以及连同还原剂一起与肽的氨基反应的脂族醛基和酮基；与肽的羧基起反应的酯和酰胺形成基，例如重氮羧酸酯基，以及碳二亚胺基和胺基一起；与蛋白上的巯基起反应的二硫化物形成基，例如5，5'-二硫代双(2-硝基苯曱酸酯)基，邻吡啶基二硫化物和烷基硫醇基(在氧化剂例如碘的存在下，其与蛋白的巯基起反应)；与肽的胍部分起反应的二羰基，例如环己二酮基，和其它1，2-二酮基；与肽上的酚基起反应的重氮基；与肽上的氨基起反应的反应基，其来自溴化氰与多糖的反应。因此，总的来说，通过(任选的)首先化学修饰聚合栽体来生成其上具有至少一个化学基团的聚合载体(其中所述的化学基团能够与肽单元上可利用的或被引入的化学基团起反应)，然后(任选的)将修饰的聚合物与肽单元一起反应，来形成可利用修饰聚合物的化学基团(如果必要)的共价结合的复合物，从而制备根据本发明的化合物。如果通过肽的游离SH基(如半胱氨酸基团的游离SH基)发生偶联，优选使用聚合物中的马来酰亚胺基。为了生成所限定的分子，优选使用将肽单元连接于聚合载体单元的靼向方法。在期望的连接位点不存在合适的氨基酸时，可将合适的氨基酸掺入二聚的EP0模拟肽单元。对于位点特异的聚合物连接，优选独特反应基，如在肽单元末端的特异氨基酸，以便避免会导致产生反应o主要使用本领域技术人员已知的反应，进行肽单元偶联到聚合栽体单元例如PEG或HES上。例如，已有许多本领域技术人员可利用的PEG和HES连接方法(参见例如给出其它参考文献的WO2004/100997，Roberts等人，2002;US4,064,118;EP1398322;EP1398327;EP1398328;WO2004/024761;它们全部通过参考引用并入本文)。重要的是应当理解本文中所述的"超价性(supravalency)"的概念不同于已知的PEG化或HES化的概念。在现有技术中，例如仅仅使用PEG化，通过使一个或多个PEG单元结合到肽上，以便生产肽二聚体或以便改进药物动力学参数。但是如上所述，将两个或更多个至少二价的肽单元连接到例如作为聚合载体单元的PEG或HES上，也可大大提高效力(因此减少了EC50剂量)。因此，本发明的该概念不仅如现有技术中已知的PEG化或HES化那样，对药物动力学参数有影响，而且对药效学参数具有强烈影响。但是，例如作为聚合载体单元的PEG或HES的掺入，当然也具有与药物动力学有关的已知的优点。通常进行PEG化来改善肽的生物药物性质。在PEG缀合后，蛋白分子的最相关的变化是尺寸扩大、蛋白表面和糖基化功能屏蔽、电荷改变以及表位遮蔽。具体地说，通过被动式增强渗透和滞留机理，尺寸扩大使得肾超滤变慢，并促进蓄积到渗透性组织中。蛋白遮蔽降低属于重要的清除途径的蛋白水解和免疫系统识别。通过蛋白和聚合物性质以及通过采用的PEG化策略，严格测定PEG化对蛋白的物理化学及生物学性质的特异性作用。但是，使用PEG或其它的非生物降解的聚合物可能导致新的问题。在体内应用期间，药物作用的丧失引发在临床环境中的剂量间隔。修改常规的剂量和剂量间隔，使得在剂量间隔期间不会失去作用。由于连接于非生物可降解的大聚合物单元(如PEG部分)的肽的降解比机体可能消除支持分子更快，因此可产生载体单元蓄积的风险。所述的蓄积风险总是发生，因为药物的效应-半衰期短于药物本身或其组分/代谢物之一的消除半衰期。因此，应避免栽体分子的蓄积，尤其在长期治疗中，因为肽通常用非常大的PEG部分(~20-40KD)进行PEG化，其因此显示緩慢的肾消除。肽部分本身经历了酶促降解，甚至部分裂解足以使肽失活。为了寻找该潜在问题的解决方法，本发明的一个实施方案教导了使用由至少两个亚单元组成的聚合栽体单元。通过生物可降解的共价接头结构来连接聚合亚基。根据该实施方案，由通过生物可降解的接头连接的多个小亚单元或中等大小的亚单元(例如每个亚单元具有5至10KD的分子量)，产生大栽体分子的分子量(例如40KD)。把模块亚单元的分子量加起来，从而生成载体分子的期望分子量。但是，可在体内裂解生物可降解的接头结构，从而释放更小的栽体亚单元(如5至10KD)。与具有总分子量(如40KD)的聚合物分子相比，小载体亚单元显示更好的肾脏清除。在图16中提供了一个解释性实例。根据已知的在体液中的降解性和降解时间尺度，选择接头结构。例如，易碎的结构包含可裂解的基团如羧酸衍生物，如可被水解的酰胺/肽键或酯(参见如Roberts,2002，被本文引入以作为参考)。使用PEG主链中各种酯键，还可合成PEG琥珀酰亚胺酯，来调控在生理性pH中的降解速率(Zhao，1997，被本文引入以作为参考)。在温和还原环境下可裂解苯甲基尿烷二疏化物等易碎结构，例如在细胞的内体区室中(Zalipsky，1999)，因此这些结构也是适宜的。用于选择合适接头的其它标准，是快(通常是酶催化的)降解或慢(通常是非酶催化裂解)降解的选择。在体液中这两种机理的组合也是可行的。显然这种高度有利的概念并不限于所述的或本文中所涉及的特殊肽单元，而且可应用于其中出现了相同蓄积问题的其它连接于大聚合物单元(例如PEG分子)的药物分子。根据一个实施方案，羟烷基淀粉和优选HES可用作聚合载体单元。HES具有几个重要的优点。首先，HES是生物可降解的。而且，通过羟乙基的比例可调控并因此影响HES的生物可降解性。0.4-0.8的摩尔置换度(平均40-80%的葡萄糖单元含有羟乙基)充分适合于本发明目的。由于生物可降解性，通常不会出现与PEG相关的上述的蓄积问题。而且，HES已经长期用于医疗中，如以血浆容量扩张剂的形式。因此它的无害性得到承认。此外，通过气相色镨法可检测HES水解产物的衍生物。在肽单元仍然稳定的条件下可水解HES-肽缀合物。这可允许量化和监测降解产物，并可允许评价和标准化活性肽。根据另一个实施方案，使用第一种类型的聚合栽体单元，并与肽单元一起装填。优选该第一载体是容易生物降解的，例如是HES。但是，并不是第一栽体的所有连接点都被肽单元占据，例如仅仅约20至50%。根据所用聚合物的大小，几百个肽单元可被偶联到栽体分子上。但是，通常使用更少的肽单元，例如2至50或2至20。2至15，2至10，2至8和3至6个肽是EPO模拟肽优选的。第一载体的其余(或至少有些)剩余连接点被不同的栽体占据，如具有比第一栽体的分子量更低的分子量的小PEG单元。这个实施方案的优点在于，由于第一栽体而产生了超价组分，但是由于优选由3至5或10KD的PEG单元而组成的第二载体的存在，第一载体是非常耐久的。但是，整个实体都是非常易降解的，因为第一栽体(如HES)和肽单元是可生物降解的，第二载体(如PEG)小到足以容易从身体中清除。组成肽单元的结合结构域的单体可识别同源二聚体红细胞生成素受体。同源二聚体受体的后一性质使EPO受体不同于许多其它细胞因子受体。包含至少上述两个EPO模拟单体结合结构域的肽单元可结合EPO受体，并优选能够分别二聚化多聚化它们的把和/或稳定它，因此从而产生了信号转导诱导复合物。本发明还包括相应的将肽单元连接到各自载体单元上的化合物生产方法。本发明进一步包括相应的将肽单元连接到各自聚合栽体单元上的化合物生产方法。本发明的化合物可有利地用于制备人和/或兽用的药物组合物。它们特别适合于治疗以红细胞生成素缺乏或红细胞数目低或有缺陷为特征的障碍，并特别适合于治疗任何类型的贫血症或中风。它们还可用于上述的所有适应征。所述的药物组合物可任选包含药学上可接受的载体，以便采取用于预定给药过程的组合物，例如在W02004/100997和W02004/101611中(被本文引入以作为参考)描述了合适的递送方法和栽体以及添加剂。实施例超价分子的概念应通过实施例进行解释。图l显示根据本发明的简单超价分子的实例。通过具有马来酰亚胺基的双功能PEG部分，将两个连续的二价肽进行N末端连接。选择半胱氨酸作为PEG栽体单元的反应连接位点。但是，超价分子可包含超过两个的连续二价或多价肽单元。图2显示的实例是以具有作为分支单元的中心甘油单元的栽体单元为基础，并包括三个连续的二价肽。将半胱氨酸再次用于连接。图3显示使用HES作为聚合载体单元的实例。修饰HES,使得它具有与肽单元的SH基起反应的马来酰亚胺基。根据该实例，将所有的连接位点结合于肽单元(在这里是4个)。但是，小的PEG单元(如3至10KD)也可占据一些连接位点。如上解释的，超价概念还可以扩展到多价的树枝状聚合物，其中树枝状的和/或聚合载体单元连接于大量连续的二价肽。例如，树枝状分支单元可以聚甘油为基础(请参见Haag2000,通过参考引用并入本文)。在图4中显示的实例是基于具有树枝状分支单元的载体单元的超价分子，其中所述的分支单元含有六个连续的二价肽。超价分子的其它实例包含具有淀粉或葡聚糖的栽体单元，其中使用如高碘酸来氧化载体单元，以包含大量醛官能团。在第二步骤中，许多二价肽连接于载体单元，并一起形式最终分子。请注意可将甚至几百个(如50至1000个、优选150至800个、更优选250至700个)肽单元偶联至载体分子，如HES。但是，小得多的肽单元也可以结合HES分子，如附图所示，尤其在偶联EP0模拟肽时。待偶联的肽单元的平均数可以选自约2至1000，2至500，2至100，2至50，优选2至20，最优选2至10，这取决于肽和待结合的受体。图5证实了简单的生物可降解的超价分子的概念。通过两个双功能的PEG部分，将两个连续的二价肽进行N末端连接，其中所述的PEG部分通过具有中间裂解位点的生物可降解的接头进行连接。接头允许大PEG单元在亚单元中被裂解，从而促进肾脏清除。与超价效应有关的优点是非常令人惊奇的和意外的。最初担心与大分子缀合可能降低效力。该预期是基于结合速率的假设缺点，这是由于较大分子的降低的扩散速率。另一个预期是，在与栽体结合的几种肽API中，不是所有的都能结合受体，可能是由于同时结合的空间问题，或因为受体的数目(这可以通过延伸大分子载体来达到)有限和可能低于肽API的数目。因而，没有预见到对本发明的超价概念观察到的肽API(活性药物成分)效价的增加。另一方面，由于大分子栽体能导入的显著的药物代谢动力学变化，由于整个肽/载体复合物更长的半衰期，体内效力可能提高。该现象也具有下述效应，即难以在体内测定超价效应，因为它是药效学实体，必须分开测定。体外测定因而不仅是足够的，而且可能是清楚地证实超价效应的唯一有用途径。通过对比肽API(缀合到载体上的相对于未缀合)的摩尔量，可以证实本发明所述的超价效应。在如欧洲药典推荐用于测定体外EP0样活性的标准TF-1细胞测定中进行实验(也参见下文)。基本上，在有多种不同浓度的EPO或EPO-模拟物质存在下，培养TF-1细胞(它们的增殖依赖于EPO-样活性的存在)。使用比色法MTT-测定和光度计测量，定量所得到的细胞数。基于这些数据，可以确定每种给定物质的标准化的剂量-反应关系。在该测定中，使用EPO和肽AGEM40(见下文)，后者是具有EPO-模拟活性的连续二价肽。使用AGEM40作为未缀合的肽和作为缀合到大分子载体(在该情况下是平均分子量130kD的羟乙基淀粉)上的肽。该缀合物的构件块大小约是40kD,这意味着平均的HES-分子携带约2-5个、优选2"个肽部分。也可以使用HES200/0.5。修饰130kDHES后，缀合约4个肽。当使用分子量为200kD的HES时，总计约5个肽单元缀合到HES上。在图6中所示的对比是基于肽浓度的摩尔对比，无论肽是否缀合。与预期相反，效力在增加(EC50在降低，剂量反应曲线位于未缀合的肽的左边)，从而证实了与大分子栽体的寡价缀合的积极药效学影响。因而，独立于预期的药物代谢动力学改进，根据本发明的缀合构思清楚地提高了总活性药物成分的效价。这是一个新的机理，可以确定地用于针对EPO-受体的肽，但是潜在地也适用于其它膜结合的药理学靶物，尤其是其它细胞因子受体，例如血小板生成素、G-CSF、白介素及其它的受体。I.单体的肽合成手工合成通过使用Discover微波系统(CEM)和使用PL-Rink-Amide-Resin(置换率0.4mmol/g)或者通过预装填0.4mmo1量的Wang-Resins，进行合成。通过添加30ml哌啶/DMF(l:3)，并用100W照射3x30秒，完成芴曱氧羰基(Fmoc-group)的去除。通过添加5倍过量的氨基酸(在DMF中)，PyBOP/HOBT/DIPEA作为偶联添加剂，并用50W照射5x30秒，完成氨基酸的偶联。在所有照射周期之间，借助于冰浴来手工冷却溶液。在脱保护和偶联后，用30mlDMF将树脂洗涂6次。在最后的氨基酸脱保护后，通过用1.268ml加帽溶液(100mlDMSO中，4.73ml乙酸肝和8.73mlDIEA)温育5分钟，将一些肽乙酰化。在裂解之前，将树脂用30mlDMF洗涤6次，并用30mlDCM洗涤6次。通过用5ml的TFA/TIS/EDT/H20(94/l/2.5/2.5)在惰性气体中处理120分钟，完成粗肽的裂解。将该溶液过滤到"ml冷乙醚中。沉淀物溶解于乙腈/水(1/1),并通过RP-HPLC(Kromasil100C1810"，250x4.6mm)纯化肽。白动合成通过4吏用Odyssey微波系统(CEM)和使用PL-Rink-Amide-Resin(置换率0.4mmol/g)或者通过预装填0.25mmol量的Wang-Resins,进行合成。通过添加10ml哌啶/DMF(l:3)，并用IOOW照射10x10秒，完成芴甲氧羰基的除去。通过添加5倍过量的氨基酸(在DMF中)，PyBOP/HOBT/DIPEA作为偶联添加剂，并用50W照射5x30秒，完成氨基酸的偶联。在所有照射周期之间，通过将氮气吹泡通过反应混合液，冷却溶液。在脱保护和偶联后，将树脂用10mlDMF洗涤6次。在最后的氨基酸脱保护后，通过用0.793ml加帽溶液(100mlDMSO中，4.73ml乙酸酐和8.73mlDIEA)温育5分钟，将一些肽乙酰化。在裂解之前，用10mlDMF将树脂洗涤6次，并用10mlDCM洗涤6次。通过用5ml的TFA/TIS/EDT/H20(94/1/2.5/2.5)在惰性气体中处理120分钟，完成粗肽的裂解。将该溶液过滤到40ml冷乙醚中，并将沉淀物溶解于乙腈/水(1/1)，并通过RP-HPLC(Kromasil100C1810jam，250x4.6迈m)纯化肽。纯化使用Nebula-LCMS系统(Gilson)，纯化所有肽。将所有肽的粗料溶解于乙腈/水(1/1)，并通过RP-HPLC(Kromasil100C18lOpm,250x4.6mm)纯化肽。流速是20ml/min，并且LCMS分流比是1/1000。II.分子内二硫桥的形成用Kj(FeCN6)的环化溶液1:将10mg肽溶于0.1%的TFA/乙腈，并用水稀释直至达到0.5mg/ml的浓度。加入固态碳酸氢铵，直至达到约pH8。溶液2:在第二个小管中，用10ml水稀释10ml的0.1°/。TFA/乙腈。加入固态碳酸氢铵，直至达到pH8，并加入1滴0.1M的K3[(FeCN6)〗溶液。将溶液1和溶液2经3小时逐滴地加入乙腈/水(l/l;pH-8)的混合液中。在室温下过夜温育混合液，并浓缩混合物和通过LCMS纯化。用CLEAR-OXTM-树脂的环化将固态碳酸氢铵加入100ml乙腈/水(l/l;0.1%TFA)中，直至达到pH8。通过氩气吹泡30分钟，来除去该溶液的气体。立刻加入100mg的CLEAR-OXtm-材脂。IO分钟后，加入10mg固态的肽。温育2小时后，过滤溶液、浓缩以及通过LCMS纯化。环肽的纯化使用Nebula-LCMS系统(Gilson),纯化所有肽。将所有肽的粗原料溶解于乙腈/水(l/l)或DMS0中，并通过RP-HPLC(Kromasil100C18或C8lOpm,250x4.6mm)纯化肽。流速是20ml/min，并且LCMS分流比是1/1000。其它非常适用于形成分子内二硫桥的技术公开在PCT/EP2006/012526,其通过参考并入本文。111.使用单体进行体外测定使用TF-1细胞，通过BrdU掺入进行增殖测定将处于对数生长期的TF-1细胞(~2x1051x106细胞/1111;RPMI培养基；20%胎牛血清；补充了青霉素、链霉素、L-谷氨酰胺；0.5ng/ml白细胞介素3)进行洗涤(以1500rpm离心5分钟，并以500,000细胞/ml的浓度重悬浮于无IL3的RPMI完全培养基中)，并在测定开始之前不使用IL-3进行预培养24小时。第二天，将细胞接种在24孔或96孔平板中，其中所述的平板通常每个待测试剂使用至少6个浓度和每个浓度4个孔，含至少10，000细胞。实验包含对照，其中包括作为阳性对照试剂的重组EPO和作为阴性对照试剂的无添加细胞因子的孔。将肽和EPO对照在培养基中预稀释至期望的浓度，并加入细胞中，在标准培养条件(37"C、5%二氧化碳的气相、水饱和的环境)下开始3天的培养期。在这3天的培养期中，浓度一直指的是培养孔中试剂的终浓度。在该培养期的结束时，加入FdU直至终浓度8ng/ml培养基，并继续培养6小时。然后，加入BrdU(溴脱氧尿香)和dCd(2-脱氧胞苷)直至它们的终浓度(在培养基中，BrdU的终浓度为10ng/ml，dCd的终浓度为8ng/ml)，并继续另外培养2小时。在该温育和培养期的结束时，在含1.5°/。BSA的磷酸盐緩冲盐水中洗涤细胞一次，并以最低液体量进行重悬浮。从该悬浮液中，将细胞逐滴地加入-201C的70%乙醇中。或将细胞在冰上培养10分钟并然后直接进行分析，或在分析之前将其保存于4x:。在分析之前，通过离心沉淀细胞，弃去上清液，并将细胞重悬浮在最小量的剩余液体中。然后悬浮细胞，并将其在0.5ml的2MHC1/0.5%tritonX-100中温育IO分钟。然后，再次沉淀它们，并重悬浮在最小量的剩余液体中，其中在立即重沉淀细胞之前，用0.5ml的0.1NNa2B407(pH8.5)稀释细胞。最后，将细胞重悬浮在40p1磷酸盐緩冲盐水(1.5%BSA)中，并分装入两个各含20jj1细胞悬浮液的反应管中。将2jLi1抗-BrdU-FITC(DAKO，克隆Bu20a)加入一个管中，并将2ja1对照mlgGl-FITC(Sigma)加入第二管中，室温下开始30分钟的温育期。然后，加入0.4ml磷酸盐緩冲盐水和10pg/ml碘化丙锭(终浓度)。在流式细胞仪中的分析，涉及4C细胞或具有高倍数性的细胞的部分，和涉及BrdU-阳性细胞的部分，因此测定在细胞周期的相关阶段的细胞的部分。使用TF-1细胞，通过MTT进行增殖测定将处于对数生长期的TF-1细胞(~2xl05lxl(T细胞/ml;RPMI培养基；20%胎牛血清；补充了青霹素、链霉素、L-谷氨酰胺；Q.5ng/ml白细胞介素3)进行洗涤(以1500rpm离心5分钟，并以500，000细胞/ml的浓度重悬浮于无IL3的RPMI完全培养基中)，并在分析开始之前不使用IL-3进行预培养24小时。第二天，将细胞接种在24孔或96孔平板中，其中所迷的平板每个待测试剂通常使用至少6个浓度和每个浓度4个孔，含至少10，000细胞/孔。每个实验包括对照，其中包含作为阳性对照试剂的重组EPO和作为阴性对照试剂的无添加细胞因子的培养孔。将肽和EPO对照在培养基中预稀释至期望的浓度，并加入细胞中，在标准培养条件(37X:、5%二氧化碳的气相、水饱和的环境)下开始3天的培养期。在4天的培养期中，浓度一直指的是培养孔中试剂的终浓度。在第4天，在分析开始之前，在多个孔中制备已知数目TF-1细胞的稀释系列(在100nl培养基中0/2500/5000/10000/20000/50000的细胞/孔)。这些孔以与测试孔相同的方式进行处理，随后提供校正曲线，由此可测定细胞数。在设定这些参照孔后，将来自MTT增殖试剂盒(Promega，CellTUer96含水非放射性细胞增殖测定)的MTS和PMS在37n的水浴中解冻，并将100julPMS溶液加入21111MTS溶液。将20ja1该混合液加入分析板的各个孔中，并在37t:下温育3-4小时。在酶联免疫检测仪中进行测量E492之前，将25p1的10%的十二烷基磺酸钠水溶液加入各个孔中。IV.二价EPO模拟肽单元的合成通过使用Liberty微波系统(CEM)和使用Rink-Amide-Resin(置换率0.19mmol/g)，以0.25mmol量进行合成。通过用10ml哌咬/DMF(1:3)、并用50W照射10x10秒，进行双重处理，完成芴甲氧羰基的除去。通过用4倍过量的氨基酸(在DMF中)PyBOP/HOBT/DIPEA作为偶联添加剂，并用50W照射5x30秒，进行双重处理，完成氨基酸的偶联。在所有照射周期之间，通过将氮气吹泡通过反应混合液，冷却溶液。在脱保护和偶联后，用10mlDMF将树脂洗涤6次。在加倍偶联周期后，通过用10倍过量的N-(2-氯节基氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺(在DMF中的0.^溶液)处理并用50W照射3x30秒，来封闭所有未反应的氨基。在最后的氨基酸脱保护后，通过用0.793ml加帽溶液(100mlDMS0中，4.73ml乙酸酐和8.73mlDIEA)温育5分钟，将肽进行乙酰化。在裂解之前，将树脂用10mlDMF洗涂6次，并用10ml固洗涤6次。通过用5ml的TFA/TIS/EDT/H20(94/1/2.5/2.5)在惰性气体中处理120分钟，完成粗肽的裂解。将该溶液过滤到40ml冷乙醚中，并将沉淀物溶解于乙腈/水(1/1)，并通过RP-HPLC(Kromasil100C1810pm,250x4.6mm)纯化肽。环化反应将30mg线性肽溶于60ml溶液A中。将该溶液和60mlDMS0逐滴地加入601111溶液A(加入总时间3小时)中。48小时后，蒸发除去溶剂，并将残余物溶于30mlDMSO/水(1/1)。加入30ml乙酸和17mg碘(溶于DMS0/水(1/1))，并在室温下将溶液混合90分钟。然后加入20mg抗坏血酸，并蒸发除去溶剂。将粗的混合液溶于乙腈/水(2/1)，并通过RP-HPLC(Kromasil100C1810pm，250x4.6mm)纯化肽。溶液A:含0.1°/。TFA的乙腈/水(1/1)。通过加入碳酸氢铵，调节pH至8.0。纯化方案环肽的纯化，Kromasil100C18lO^im,250x4.6mm，梯度为50分钟内5%至35%乙腈(0.1°/。TFA)。V.用于测定EPO活性的体外增殖测定对处于对数生长期的TF1细胞(在具有20。/。胎牛血清(FCS)和0.5ng/mlIL-3的RPMI培养基中生长的~2xl05-lx106细胞/ml)进行计数，并对进行分析所需数量的细胞进行离心(5分钟，1500rpm)，然后以300000细胞/ml的浓度重悬浮于具有5。/。FCS无IL-3的RPMI中。将细胞在没有IL-3的这种(饥饿)培养基中预培养48小时。在开始分析之前，再次统计细胞数量。在开始分析之前，立即制备肽和EPO的储液。将肽称重，并溶于具有5%FCS的RPMI直至浓度为lmM、467jiM或200jiM的。EPO储液是10nM或20nM。将这些储液的292n1吸移至96孔培养平板的一个孔中，每种待测的物质釆用一块板。吸取200ju1具有5%FCS的RPMI到各个平板的十七个其它孔中。吸取92|u1储液到含200p1培养基的孔中。混合内含物，并将来自该孔的92jla1转入下一个孔中，等等。这种方式制备每种物质的稀释系列(18个稀释浓度)，使得各个连续孔中的浓度是其前一孔中的浓度的1/10。将来自各个孔的3x50jul转入三个空孔中。以此方式一式四份地测量每种浓度的物质，舍去各个平板的最上行孔和最下行孔。离心预处理的(饥饿的)细胞(5分钟，1500rpm)，并以200，000细胞/ml的浓度重悬浮于具有5%FCS的RPMI中。将50p1细胞悬浮液(含10，000细胞)加入各孔中。注意的是由于加入细胞，孔中物质的终浓度是起始稀释浓度的一半。将平板在37X:、5°/。0)2下温育72小时。开始评价之前，制备孔中已知量的TF-1细胞的稀释范围一式四份吸取0/2500/5000/10000/20000/50000细胞/孔(在100"1的RPMI+5%FCS中)。为了测量每孔的活细胞的数目，将现成可用的MTT试剂(Promega，CellTiter96AqueousOneSolutionCellProliferationAssay)在37C水浴中解冻。每孔加入20jul的MTT试剂，并将平板在37T、5%0)2中另外温育1-2小时。加入25jal的1(^SDS溶液，并在酶联免疫读数仪(Genios，Tecan)中测量平板。在电子数据表(Excel)中加工处理数据，并在Graphpad软件中制图。VI.扩展的肽测定在扩展试验中，对几个肽序列测试了它们的EP0模拟活性。在LIPS-Vario合成仪系统上，合成作为肽酰胺的肽。在专门的MTP合成平板中进行合成，规模是每种肽2jumo1。合成使用作为活化剂试剂的HOBT，遵循标准的Fmoc方案。偶联步骤分4次偶联进行。每个偶联步骤耗时25分钟，并且每个步骤的过量氨基酸是2.8。用含90%TFA、5%TIPS、2.5°/。H20以及2.5%DDT的裂解液进行肽的裂解和脱保护。将含有连接于树脂的成品肽的合成平板保存在96深孔板的顶部。每孔加入50ja1裂解液并进行裂解10分钟，重复该过程三次。用200"1裂解液通过重力流入深孔平板中，来洗脱裂解肽。在深孔平板中，对侧链官能团进行另外2.5小时的脱保护。然后，用冰冷的乙醚/己烷来沉淀肽，并进行离心。肽溶于中性水溶液中，并在4r下过夜温育环化物。冷冻干燥肽。图7显示了对有些合成的和测试的肽单体的概述。在体外增殖测定中，测试了肽的EPO模拟活性。如下列步骤V所示实施该测定。在每个测定日，制备用于平行测量38条待测肽和、1个参照实例和EP0的体外活性的40块微量滴定板。EPO储液是20nM。VII.肽HES-缀合物的合成在图8中显示了反应原理示意图。将二聚肽偶联到载体上的替代策略Z/^开在W02006/136450，其通过参考并入本文。所述方法的目的是生产淀粉的衍生物(根据该实施例是HES)，其中所述的HES可在温和的水性反应条件下与硫醇基选择性反应。通过马来酰亚胺基来实现这种选择性。首先用氨基对HES进行官能化，然后将其转变成相应的马来酰亚胺衍生物。各反应批次通过超滤膜除去低分子反应物。产物、中间产物以及离析物全部是多分散性的。氨基-HES(AHES)的合成通过渗滤及随后冻干获得羟乙基淀粉(即HES130/0.4或HES200/0.5)。平均摩尔重量分别是约130KDa和200kD，摩尔置换度分别是0.4和0.5。根据在JacobPiehler的论文"ModifizierungvonOberf13chenfiirdiethermodynamischeundkinetischeCharakterisierungbiomolekularerErkennungmitoptischenTransducern"1997(通过参考引用并入本文)中所述的用于氨基葡聚糖的合成法，进行合成。通过使用如Floor等人(1989)所述的高碘酸钠，将二酚(diolic)羟基部分地、选择性氧化成醛基，来活化HES。在氨的存在下，通过使用氰基硼氢化钠(Na[B(CN)iy)的还原性氨化，将醛基转变成氨基(Yalpani和Brooks,1995)。糾凝财矛通过高碘酸钠水溶液对糖中1，2-二醇的温和氧化，导入醛基。通过使用不同摩尔浓度的氧化剂，可以控制可利用的锚基的数目和因此载体上肽药物的数量。为了优化方案，使用试剂Purpald监视氧化，所述试剂Purpald只与醛形成紫色加合物。反应时间可以缩短至8-18h。使用的高碘酸盐的量代表着葡萄糖构件块数目的20%(应用180g/mol的葡萄糖构件块质量，DS=0.4)。通过超滤技术和冷冻干燥进行后处理。使用不同分子量截止值的PES膜，通过超滤技术进行每种聚合产物的纯化，随后冷冻干燥。从优化的HES衍生物中，仅仅使用大于100kD的摩尔质量范围。醛分析定性/半定量可利用醛基的Purpald反应^戚^^遽^f还^^麽必在下面的步骤中，通过用氛基硼氢化钠在微酸性pH值的氯化铵饱和溶液中的还原性胺化，将导入的醛基转化成胺。为了优化方案，原料的醛基用Purpald试剂追踪，形成的胺用TNBS追踪。这些实验已经证实，起始阶段后亚胺中间体的形成处于平衡，加入的还原剂偏好亚胺胜过醛。也可以发现，通过几次加入还原剂，总反应时间24小时，进行最佳反应。通过产物的沉淀和渗滤或超滤，进行后处理。胺分析定性茚三酮反应(Kaiser-试验)半定量使用2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)，与氨基葡聚糖相比。达到的取代度约2.8%。这产生携带一个氨基的一个构件块约6400g/mol的摩尔质量。马来酰亚胺基丙酰-氨基-幾乙基淀粉("MalPA-HES，，)的合成导入氨基后，用co-马来酰亚胺烷基(或芳基)酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯导入锚基马来酰亚胺。合成用3-马来酰亚胺基丙酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(MalPA-0Su)，将马来酰亚胺基最终导入HES。当在微酸性緩沖液中使用过量(5-IO倍)时，转化是定量的(50mM磷酸盐緩冲液，pH7，20%DMF，过夜)。超滤和冻干的产品保藏在-i8x:。分析使用茚三酮和TNBS来验证氨基的反应。通过谷胱甘肽(GSH)的反应，和用Ellmans试剂6，6'-二硝基-3，3'-二硫代二苯甲酸(DTNB)以及通过700MHz」H-NMR-光谦检测过量的硫醇基，来证明所引入的马来酰亚胺基数目。达到的取代度大约是2%，相当于每个马来酰亚胺构件块8500g/mol(180g/mol葡萄糖构件块质量，MS-O.4)。图9显示了马来酰亚胺修饰的HES的屮-NMR光镨(D20，700MHz)。马来酰亚胺质子(6.8ppm)与异头C-H(4.8-5.6ppm)的比例，给出约6，900g/mol的构件块大小(相比较GSH/DTNB试验给出7，300g/mol)。通过用GSH饱和以及与DTNB反应，可以测量马来酰亚胺基的数量和因此构件块大小。形成的黄色是显著的，且可以容易地定量。这些值会给出5，000至100，000g/mol的可靠的构件块大小，这分别取决于使用的原料、氧化步骤中高碘酸盐的量。通过产物的卞-NMR光傳，已经验证了该方法。在NMR中，从所有异头C-H信号和马来酰亚胺环质子的比例，可以定量马来酰亚胺基的含量。下述范围是优选的:_高碘酸盐的量(第l步)(当量)构件块大小马来酰亚胺(g/迈o1)_0.01-0.03>55，0000.02-0.04约35，000-50，0000.04-0.1约15，000-35，0000.1-0.3_约6,000-7,000_表1:通过高碘酸盐氧化，在HES主链中锚基的可达到的实际构件块大小的实例肽-羟乙基淀粉-缀合物(Pep-AHES)合成使用含半胱氨酸的肽，该肽具有游离的N末端(肽-IA)或生物素化N-末端(肽-IB)。整夜过量转化4:1肽-IA/B混合物(约6当量，MalPA-HES在磷酸盐緩冲液，50mM，pH6.5/DMF80:20中)；通过超滤和冻干进行后处理。分析在280nm测定UV吸光度，并用GSH/DTNB测定马来酰亚胺基的剩余含量。肽产率几乎是定量的。几乎检测不到游离的马来酰亚胺基。对于肽药物的缀合，通过导入游离巯基(例如通过在N-末端导入半胱氨酸残基)，使用肽结构域Ac-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQRG-Am(BB68)来创建肽单元，如在Ac-C(tBu)-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQRG-Am(AGEM40)中。在微酸性緩冲液中缀合10-50%过量的去保护的肽l-2h。已经优化条件，一方面确保HES主链、马来酰亚胺基和二硫桥是稳定的，另一方面为了观察到定量转化。通过使用不同的马来酰亚胺官能化的HES化合物，可以合成多种超价的EPO-模拟肽，其已经在体外表现出超价效应。下面给出了一些实例表2:具有不同肽含量的AGEM40的超价EPO-模拟肽缀合物HES上的超价EPO-模构件块大小拟肽马来酰亚胺基理论舦含量实验肽含量(g/mo1)(%)(%)AGEM40-HESA27,3003937AGEM40-HESA316，0002322AGEM40-HESA444，0001010在2个步骤中，实现了超价的EPO-模拟肽缀合物的容易的化学分析。首先，在温和水解HES主链后，通过HPLC定量肽含量，其次，在用硫酸完全水解后，通过苯酚的比色试验，测量多糖的量。图10显示了超价EP0-模拟肽缀合物AGEM40-AHESA2的TFA/水水解的HPLC色镨图(ShimadzuHPLC)。一段时间后，所有含肽的物质的紫外吸光度恒定在最大值，通过与游离肽对比，可以计算出37%的肽含量(理论值39%)。VIII.其它体外实验已经在上面描述了下述的许多实验。但是，下面的细节对所述实验和结果进行了总结。主要讨论了人细胞培养和骨髄测定。一方面，快速的基于细胞系的测定用于检查在优化的早期阶段中优化的肽序列的效力。这些细胞培养测定，仍然象新肽或新批次的快速效力测试一样有效。细胞系TF-1(人细胞)使用的2个端点是增殖(在这里通常测定为在限定时间点的活细胞的数目)，和分化(作为在TF-1细胞中显著的血红蛋白生产)。另外，原代细胞(人骨髄干细胞)用于CFU-测定，它们非常接近体内情形。在使用EPO模拟肽作为肽单元的情况下，它们以更体内样方式给出红细胞生成活性的答案。但是，对它们的操作更复杂，每个测定需要比细胞培养测定更多的时间。使用人TF-1细胞的测定TF-1是仅仅响应于某些细胞因子(例如IL3或EP0)而增殖的人红白血病细胞系。另外，TF-1细胞可以响应于EPO而向红细胞系统表型分化。从DSMZ(Braunschweig,Germany)得到TF-1细胞。可以在DSMZ网站dsmz.de得到产品说明书。TF-1是欧洲药典推荐的EP0-活性评估用细胞系。我们的用于维持培养的内部培养方案培养基RPMI+P/S+AmphoB+L-Glut.+20%FCS+h-IL-31.-500mlRPMI+5mlP/S+5mlAmphoB2.-200mlRPMI+PS/AmphoB+2.5mlL-谷氨酰胺+50mlFCS=完全培养基(l个月，4"C)3.-45ml完全培养基+22.5ulh-IL-3(1周，4X:)培养维持在200，000-1，000，000细胞/ml,3天，2x105/ml*2天，3x107ml*1天，5x107mlTF-1增殖测定的i殳计在TF-1增殖测定中，在多孔平板中，接种TF-1细胞，在不同浓度的EPO或EPO模拟肽中培养几天。为了得到最佳结果，在开始测定前，应在没有任何细胞因子(饥饿)的情况下，培养TF-1细胞2天。开始测定后3天，通过测定存活细胞的数目，间接测量细胞增殖。加入称作MTS的四唑盐试剂，它被还原成有颜色的曱牖。该反应依赖于NADH和NADPH。换而言之，依赖于线粒体活性。分光光度法测量甲牖的量。使用一系列已知细胞数用于校正，可以确定在每种条件下存在的活细胞的绝对数量。在图11中也解释了设计原理。通过下述方法，可以测定某些试剂在该试验中的活性1.评估该试剂是否在特定浓度会造成活细胞数目的增加，和2.在何种浓度，该试剂会发挥半数最大效应(EC50的测定)。TF-1增殖测定的结果作为总的评述，必须提到，所有EP0-模拟肽(EMP1和上述修饰的肽)以它们的单体形式在该测定中表现为部分激动剂，即最大响应比用EPO观察到的响应弱。然而，该测定可以用于测定标准化的图中的右/左移，从而确定优化的结果。这尤其是已知在二聚化后激动剂活性会显著增加。第一个图描述了没有标准化的绝对响应中的该效应。所有其它图显示了标准化的图，这允许从曲线确定EC50值。在测定中使用了2种参照物质1)i￥W，公开的具有已知EPO-模拟性质的肽序列(Johnson等，1997).2)在药房购买的重逸入ir^應^^;^^7V入作为0rthoBiotech产品阿法依伯汀(德国商品名ErypoR)用黑线绘制这些物质的图，f/V的线是连续的，iM^的线是虚线。在接下去的图中显示了脯氨酸-修饰的EP0模拟肽，作为有颜色的连续线。这些修饰的肽描绘了下述序列1)朋WAc-GGTYSCHFGKLTWVCKKQGG显示出与EMP1相同范围的功效和效价；2)朋MAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQRG-Am甚至比EMP1和BB49更有效；3)淑扁，Ac-C(tBu)-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQRG-Am是二价连续肽，它基于描述改进的特征的BB68序列而设计；4)J(丑，/^-A0^，它是先进的、高效的和强有力的肽(AGEM40)，根据本发明的超价原理HES化。这些序列用作特别的实例，以便解释超价原理的益处。图12描述了与EPO相比单体EPO模拟肽的结果。图12包括的实际吸光度数据图证实了在该测定中一般肽和EPO之间的绝对差异。图13给出了从拟合的标准化图计算出的EC50值。图14显示了BB68比BB49改善的作用。使用优化的BB68作为创建根据本发明的肽单元的构件块，会使作用改善2个额外的数量级。这在图14和图15中显示的对应的表中证实。然后，以优化的密度，将二聚体肽单元偶联到大分子载体HES上。得到的API在摩尔对比上至少与EPO等效，且在质量对比上非常接近于EPO(见下面的图16和图17)。图16和前面的图和表清楚地证实了超价概念的极大效力。鉴于可以用细胞培养测定达到的精确度，所获得的API在体外至少与EPO等效。因而优于不釆用超价概念的任何已知的EPO-模拟肽API。骨髓测定骨髓含有具有自我更新和发育成所有类型血细胞的潜力的造血干细胞。另外，骨髄含有能发育成一种或几种血细胞系的定向祖细胞。在这些祖细胞中，几种会发育成红细胞(红系祖细胞)。通过将骨髓细胞平板接种在基于甲基纤维素的半固体培养基中，可以证实祖细胞。在有适当细胞因子混合液存在下，祖细胞会增殖和分化，产生特定谱系细胞的集落。髄系祖细胞会发育成粒细胞集落(源自CFU-G)，单核细胞集落(源自CFU-M)，或混合的粒细胞-单核细胞集落(源自CFU-GM)。红系祖细胞会发育成红细胞的集落。根据红细胞集落的大小，祖细胞称作BFU-E(产生200个细胞或更多细胞的集落)或CFU-E(产生小于200个细胞的集落)。在定向的较早阶段祖细胞可以发育成混合的粒细胞-红细胞-单核细胞-巨核细胞集落。这些早期的祖细胞称作CFU-GE丽。如果也存在某些不同的细胞因子，EP0会刺激从BFU-E或CFU-E发育红细胞集落。如果没有EPO，红细胞集落不能发育。因此，在曱基纤维素中从同源批次骨髄细胞长出红细胞集落，是EPO活性的衡量。由于上述过程与体内骨髄中发生的过程非常类似(如果不完全相同的话)，它们是EPO-样活性的优异预测。骨髓测定的设计从冷冻管融化人骨髄细胞(商业上从Cryosystems得到，经过血清学检查)，并以固定的细胞密度平板接种在具有给定细胞因子(但是没有EPO)背景的甲基纤维素培养基中。加入不同浓度的EPO或EP0-模拟肽。在37匸温育培养物12-14天。然后，通过显微镜检查，计数髄系和红系集落的数目。骨髓测定的终点1.前提没有EPO的培养物应当仅仅产生髓系(白色)而非红系(红色)集落。含有EP0的培养物应当产生红细胞集落的浓度依赖性的增加，和红细胞集落大小的浓度依赖性的增加。2.如果会造成红细胞集落的浓度依赖性的增加和红细胞集落大小的浓度依赖性的增加，则该肽显示出EP0-模拟活性。但是，肽不应当干扰所得到的髓系集落的数目。骨髓测定的结果上述脯氨酸修饰的EPO模拟肽不会刺激髄系集落的形成，但是表现出对红色集落形成的显著活性。定性地，以培养平板的照片显示在图18中，集落的计数记录在图19中。IX.抗体交叉反应性测定如本申请的引言中所述，病人有时会产生抗rhuEP0的抗体。这导致如引言中所述的严重后果。为了进一步研究根据本发明的肽性质，分析该肽实际上是否与抗EP0抗体交叉反应。使用含抗EPO抗体的兔血清和人血清来用于测试。用EP0或下列EP0模拟肽来预处理这些血清Ac-C-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-Am(实验肽1)Ac-GGTYSCHFGKLT-lnal-VCKKQRG-Am(实验肽2)Ac-乙酰化的N末端Am-酰胺化的C末端lnal-l-萘丙氨酸在分析中使用不同浓度的红细胞生成素和EP0模拟肽。为了吸附存在于血清中的抗EPO抗体而用测试物质预处理血清后，用放射性标记的红细胞生成素处理血清。预吸附步骤后血清中剩余的抗体通过红细胞生成素来结合并再次免疫沉淀。Tacey等人(2003)描述了用于这种测试的方案，通过参考引用并入本文。在图20中公开了使用EPO或根据本发明的EPO模拟肽，以含抗EPO抗体的血清进行的预吸附的结果。用EPO模拟肽预处理血清时，后来在与放射性标记的红细胞生成素接触时，测试血清为阳性。因此，虽然进行了预处理，但还是在血清中检测出抗EPO抗体。这意味着在预处理期间，EPO模拟肽不能结合抗EPO抗体。在缺少结合活性时，不能从具有EPO模拟肽的血清中消除抗EPO抗体，因此血清中留有抗EPO抗体。因此，抗EPO抗体不能识别和因此结合EPO模拟肽。重组人EPO(rhuEPO)用作为对照。当用红细胞生成素预处理血清时，在随后掺入放射性标记的红细胞生成素的测定中几乎检测不出抗体，因为抗体已被结合并通过用红细胞生成素预处理而被除去。图20中显示的数值表示在IP中所用的总计数的Wcpm。当。/icpm值大于0.9时，判定血清是阳性。10(Wcpm表示所用的所有计数的量(放射性示踪剂)，在此是放射性标记的EPO。该测定表明根据本发明的EPO模拟肽有利地显示对抗EPO抗体无交叉反应性。因此，本文所述的EPO模拟肽即使在产生抗rhuEPO抗体患者中也应具有治疗效果。此外，预计抗EPO模拟肽的抗体应不会结合红细胞生成素。因此，根据本发明的EPO模拟肽优选特征还在于它们显示与抗EP0抗体没有明显的交叉反应。X.在灵长类动物中的功效也在动物试验中证实了根据本发明的EP0模拟肽的功效，其中7只非首次接受试验的猴(成束猴(macacafascicularis))用于试验。实验肽是AGEM400HES(参见上面)，它作为冻干粉末使用，溶于林格液中。测试了0，Olmg/kg至50mg/kg的剂量(静脉内给药)。动物试验表明，EPO模拟肽表现出良好的EPO模拟功效(甚至在低剂量时)，且具有持久的作用。另外，没有观察到毒性征象。参考文献WrightonNC，BalasubramanianP,BarboneFP,KashyapAK,FarrellFX,JolliffeL,BarrettRW,DowerWJ(1997)Increasedpotencyofanerythropoietinpeptidemimeticthroughcovalentdimerization.NatureBiotechnology15:1261-1265WrightonNC,FarrellFX,ChangR，KashyapAK,BarboneFP，MulcahyLS，JohnsonDL，BarrettRW，JolliffeLK，DowerWJ(1996)SmallPeptidesasPotentMimeticsoftheProteinHormoneErythropoietin.Science273:458-463Johnson,D.L.,F.X.Farrell,etal.(1997)."Amino-terminaldimerizationofanerythropoietinmimeticpeptideresultsinincreasederythropoieticactivity."ChemistryandBiology4:939-950.Johnson,D.，F.X.Farrell,etal.(1998)."Identificationofa13AminoAcidPeptideMimeticofErythropoietinandDescripUonofAminoAcidsCriticalfortheMimeticActivityofEMP1".Biochemistry37，3699-3710.HaagR，SunderA,Stumb6JF,J.Am.Chem.Soc.(2000),122，2954.Roberts,M.J.，M.D.Bentley,etal.(2002)."ChemistryforpeptideandproteinPEGylation."AdvancedDrugDeliveryReview54(4):459-476.RichardTacey,AnthonyGreway，JaniceSmiel1，DavidPower,ArnoKromminga，MohamedDaha，NicoleCasadevallandMarianKelley:Thedetectionofanti-erythropoietinantibodiesinhumanserumandplasma-PartI.Validationoftheprotocolforaradioimmunoprecipitationassay;JImmunolMethods.2003Dec;283(1-2):317-29.ZalipskyS，Qazen，S，WalkerIIJA，MullahN，QuinnYP,(1999)"Newdetachablepoly(ethyleneglycol)conjugates:Cysteine-cleavablelipopoly迈ersregeneratingnaturalphospholipid,diacylphosphatidylethanoUmine,Bioconjug.Chem.10:703-707.Zhao,X.etal(1997)，"NovelDegradablePoly(ethyleneglycol)estersfordrugdelivery."In"Poly(ethyleneglycol)chemistryandbiologicalapplications;HarrisJM，Zalipsky,S.Eds.;ACSSymposiumSeries680;AmericanChemicalSociety:WashingtonDC,1997;458—472.权利要求1.选自下述的能结合EPO受体的肽●包含下述的共有氨基酸序列的肽X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或α-氨基-γ-溴代丁酸；X7是R，H，L，W，Y或S；X8是M，F，I，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X9是G或G的保守交换；X10是脯氨酸的非保守交换；或X9和X10被单个氨基酸置换；X11选自任意氨基酸；X12是不带电荷的极性氨基酸或A；X13是W，1-nal，2-nal，A或F；X14是D，E，I，L或V；X15是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或α-氨基-γ-溴代丁酸，和●上述共有序列定义的肽的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置X10处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X9和X10被单个氨基酸置换。2.根据权利要求1的肽，其中选择在位置l和X15的氨基酸，桥。3.根据权利要求2的肽，其中所述桥是二硫桥或二硒桥。4.根据权利要求1-3中任一项的肽，其中在1和/或乂15的氨基酸选自半胱氨酸，半胱氨酸衍生物例如高半胱氨酸和硒代半胱氨酸，硫代赖氨酸，K或E。5.根据权利要求1-4中任一项的肽，其中Xu是萘基丙氨酸。6.长度为至少IO个氨基酸的肽，它能结合EPO受体，且具有激动剂活性，它选自下述2个可选方案(a)包含下述核心氨基酸序列的肽X9X10XuX12X13其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X9是G或G的保守交换；X!。是脯氨酸的非保守交换或X,和X,。被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;Xu是萘基丙氛酸；(b)肽，尤其是能结合EPO受体的肽，其包含下述氨基酸序列XgXvXgXgXi0XuXi2X13X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X6是C，A，E，oc-氨基-y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc);X是R，H，L，W或Y或R，H，L，W，Y或S;Xs是M，F，I，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；Xn是脯氨酸的非保守交换；或X,和X^被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；Xu是T或A;Xu是l-nal，2-nalXm是D，E，I，L或V;Xn是C，A，K，ct-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc)条件是，X6或X^是C或hoc;(c)上述共有序列定义的肽的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EP0模拟活性，且在位置Xi。处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X,和X,。被单个氨基酸置换，且在位置L处具有萘基丙氨酸。7.根据权利要求6的肽，其包含下述核心氨基酸序列X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或a或oc-氨基-y-溴代丁酸；X,是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y，H，高丝氨酸曱基醚或正异亮氨酸；Xs是G或G的保守交换；X^是脯氨酸的非保守交换或X,和X,。被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；Xu是萘基丙氨酸；X"是D，E，I，L或V;Xu是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或cx-氨基-y-溴代丁酸。8.根据权利要求1-7中任一项的肽，其特征在于，它在位置X10处具有带电荷的氨基酸。9.根据权利要求1-8中任一项的肽，其包含下述额外的氨基酸位置XisXi7XisXi9其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且X^独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q,R，S，Har或T;Xn独立地选自任意氨基酸，优选A，G，P，R，K，Y，Har;Xu独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;Xw独立地选自任意氨基酸。10.根据权利要求9的肽，其特征在于，Xn是带电荷的氨基酸。11.根据权利要求9或10的肽，其特征在于，X^是带电荷的氨基酸。12.根据权利要求8-11之一的肽，其中在位置Xi。、Xn和/或X19处的带电荷的氨基酸是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生的氨基酸。13.根据前迷权利要求任一项的肽，其特征在于，L。、Xn和/或Xw是带负电荷的氨基酸。14.根据权利要求13的肽，其特征在于，所述带负电荷的氨基酸选自*天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;*非天然的带负电荷的氨基酸，其优选具有伸长的侧链，例如Aad，2-氨基庚二酸，Asu;*最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。15.根据权利要求14的肽，其特征在于，用于将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸的基团选自二酸，例如二羧酸或二磺酸。16.根据权利要求12的肽，其特征在于，所述带正电荷的氨基酸选自天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸或鸟氨酸；非天然的带正电荷的氨基酸，其在位置t。和/或Xn优选具有伸长的侧链，例如在例如高精氨酸中；最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。17.根据权利要求l-16之一的肽，其中Xs是D-氨基酸，优选D-苯丙氨酸。18.根据权利要求1-17之一的肽，其包含下述氨基酸序列X4X5X6X7X8X9X1。X11X12X13X14X15X16X17X18X19其中Xe至Xw具有上迷含义，且其中X4-是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基，其中所述吸电子取代基优选地选自氨基，硝基和卣素，且其中1优选地选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸；Xs-选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。19.长度为至少IO个氨基酸的肽，它能结合EPO受体，且具有激动剂活性，它选自*包含至少一个下述的核心氨基酸序列的肽X9X10X11X12X13;X9X10X11X12X13X14X15X15X17或X9X10X11X12X13X14X15Xi6X17Xl8X19其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中在Xi。、X17或Xw中的至少一个位置是带负电荷的氨基酸，且其中X9是G或G的保守交换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；Xu是W，l-nal，2-nal，A或F;Xm是D，E，I，L或V;Xu是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ot-氨基-y-溴代丁酸；Xu独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S，Har或T;Xu独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;*上述共有序列定义的肽的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且其中在t。、L或Xw中的至少一个位置是带负电荷的氨基酸。20.根据权利要求19的肽，其包含下述扩展的共有序列XeX'XsXgXi0X11X12X13X14X15X15X17X13X19其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ot-氨基-y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y，H，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；在乙不是带负电荷的氨基酸的情况下，Xi。是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换，或X,和X,。被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氛酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X"是W，l-nal，2-nal，A或F;X"是D，E，I，L或V;X15是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或a-氨基-y-溴代丁酸；Xw独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S，Har或T;在Xn不是带负电荷的氨基酸的情况下，Xn选自任意氨基酸，优选A，G，P，Y或带正电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，优选K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸；X^独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;在X"不是带负电荷的氨基酸的情况下，X^独立地选自任意氨基酸，优选带正电荷的氨基酸，例如K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸；条件是，X1Q、Xn或X19中的至少一个是带负电荷的氨基酸，优选X19。21.根据权利要求19或20的肽，其特征在于，所述带负电荷的氨基酸选自*天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;非天然的带负电荷的氨基酸，其优选具有伸长的侧链，例如Aad2-氨基庚二酸，Asu，最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。22.根据权利要求19-21之一的肽，其特征在于，在带正电荷的氨基酸存在于X！。、Xn和/或Xw中的至少一个位置的情况下，它选自參天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸和鸟氨酸；非天然的带正电荷的氨基酸，其在位置t。和/或L优选具有伸长的侧链，例如在例如高精氨酸中；*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。23.根据权利要求19-22之一的肽，其包含下迷氨基酸序列X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15Xi6X17Xl8X19其中X6至Xn具有上述含义，且其中X4二是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；Xs-选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。24.根据权利要求23的肽，其中所述吸电子取代基选自氨基，硝基和卣素，且其中X4优选地选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。25.根据权利要求19-24中的至少一项的肽，其特征在于，乂13是萘基丙氨酸。26.根据权利要求19-25中的至少一项的肽，它选自Ac-GGTYSCHFGKLT-Na1-VCKKQDG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQEG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQ-Aad-G-AmAc-GGTYSCHFGELT-Nal-VCKKQRG-AmAc-GGTYSCHFGDLT-Nal-VCKKQRG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKEQRG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCKDQRG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCK-K(Glr)-QRG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCK-K(Adi)-QRG-AmAc-GATTSCHFGKLT-Nal-VCKKQ-Aad-G-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCK-Har-QDG-AmAc-GGTYSCHFGKLT-Nal-VCK-Har-Q-Aad-G-AmGGGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQEG-AmGGGTYSCHFGKLT-Nal-VCKKQ-Aad-G-Am。27.长度为至少IO个氨基酸的肽，它能结合EPO受体，且具有激动剂活性，它选自特征在于下述核心氨基酸序列的肽XgXgXi0X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中Xs是D-氨基酸；l是G或G的保守交换；Xw是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换；或X,和Xu被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；X^是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X"是D，E，I，L或V;X^是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-y-溴代丁酸，和*上述共有序列定义的肽的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置Xs具有D-氨基酸。28.根据权利要求27的肽，其包含下述核心氨基酸序列X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氛基酸或A或(x-氨基-Y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是D-M，D-F，D-I，D-Y，D-H，D-高丝氨酸甲基醚或D-正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；Xw是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换；或X,和Xi。被单个氨基酸置换；X选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X"是D，E，I，L或V;X15是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或cx-氨基-Y-溴代丁酸。29.根据权利要求27或28的肽，其特征在于，Xs是D-苯丙氨酸。30.根据权利要求27-29的肽，其特征在于，它在位置Xu处具有带电荷的氨基酸。31.根据权利要求27-30的肽，其包含下述氨基酸序列XsX'XsXgXioXi1X12X13X14X15X15X17X18X19其中X6-Xu具有上述含义，且其中X"独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S,Har或T;Xi7独立地选自任意氨基酸，优选A，G，P，Y或带正电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，优选K，R，H，鸟氨酸或高精氨酸；U虫立地选自任意氨基酸，优选L或Q;X19独立地选自任意氨基酸。32.根据权利要求31的肽，其特征在于，Xu是带电荷的氨基酸。33.根据权利要求31或32的肽，其特征在于，Xn是带电荷的氨基酸。34.根据权利要求30-33之一的肽，其中在位置Xm、Xn和/或Xw处的带电荷的氨基酸是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生的氨基酸。35.根据前述权利要求之一的肽，其特征在于，X1D、L和/或Xw是带负电荷的氨基酸，36.根据权利要求35的肽，其特征在于，所述带负电荷的氨基酸选自參天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;非天然的带负电荷的氨基酸，其优选具有伸长的侧链，例如在Aad，2-氨基庚二酸，Asu中；最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。37.根据权利要求36的肽，其特征在于，用于将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸的基团选自二酸，例如二羧酸或二磺酸。38.根据权利要求34的肽，其特征在于，所述带正电荷的氨基酸选自參天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸和鸟氨酸；*非天然的带正电荷的氨基酸，其在位置X,。和/或Xn优选具有伸长的侧链，例如在例如高精氨酸中；*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。39.根据权利要求27-38之一的肽，其包含下述氨基酸序列X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15X16X17X18X19其中X6至Xw具有上述含义，且其中X4-是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；乂5=选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。40.根据权利要求39的肽，其中所述吸电子取代基选自氨基，硝基和卤素。41.根据权利要求39的肽，其中l选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3,5-二溴-酪氡酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。42.长度为至少IO个氨基酸的肽，它能结合EPO受体，且具有激动剂活性，它选自*特征在于下述核心氨基酸序列的肽X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X,-是F、或F或Y衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；Xs-选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y，H，高丝氨酸曱基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；X^是脯氨酸的非保守交换或X,和X^被单个氨基酸置换；Xn选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；Xh是D，E，I，L或V;Xu是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ot-氨基-y-溴代丁酸；*上述共有序列定义的肽的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，且在位置X!。处具有构成脯氨酸的非保守交换的氨基酸，或其中X,和Xi。被单个氨基酸置换，且在位置X,具有F、或F或Y衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基。43.根据权利要求42的肽，其中所述吸电子取代基选自氨基，硝基和卣素。44.根据权利要求42的肽，其中X,选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-碘-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氛酸，3，5-二碘-酪氨酸。45.根据权利要求42至44中的至少一项的肽，其特征在于，它在位置X^处具有带电荷的氨基酸。46.根据权利要求42的肽，其包含下述氨基酸序列X6X7X8X9X10X11X12Xl3X14X15X16XnXlsXl9其中X6至Xi5具有上述含义，且其中Xw独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S，Har或T;Xn独立地选自任意氨基酸，优选A，G，P或Y;X^独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;X19独立地选自任意氨基酸。47.根据权利要求43的肽，其特征在于，Xn是带电荷的氨基酸。48.根据权利要求46或47的肽，其特征在于，X^是带电荷的氨基酸。49.根据权利要求45-48之一的肽，其中在位置Xlfl、L和/或X19处的带电荷的氨基酸是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生的氨基酸。50.根据前述权利要求45-49之一的肽，其特征在于，Xie、L和/或Xi9是带负电荷的氨基酸。51.根据权利要求50的肽，其特征在于，所述带负电荷的氨基酸选自*天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;*非天然的带负电荷的氨基酸，其优选具有伸长的侧链，例如在Aad，2-氨基庚二酸，Asu中；參最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。52.根据权利要求51的肽，其特征在于，用于将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸的基团选自二酸，例如二羧酸或二磺酸。53.根据权利要求49的肽，其特征在于，所述带正电荷的氨基酸选自眷天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸和鸟氨酸；*非天然的带正电荷的氨基酸，其在位置Xt。和/或Xu优选具有伸长的侧链，例如在例如高精氨酸中；*最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团。54.根据权利要求42至53之一的肽，其中Xs是D-氨基酸，优选D-苯丙氨酸。55.长度为至少IO个氨基酸的肽，它能结合EPO受体，且具有激动剂活性，它选自下组的肽(a)包含下述核心氨基酸序列的肽X9X10XuXuX13;XgXioXi1X12X13X14X15U17或XgXi。Xi1X12X13X14X15X15X17X18X19其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X9是G或G的保守交换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；L是W，萘基丙氨酸，A或F;X"是D,B，I，L或V;L是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-y-溴代丁酸，以及上迷共有序列定义的肽的功能等同片段、衍生物和变体，其具有EPO模拟活性，其中X1Q、X16、L或X19中的至少一个位置具有带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氛酸相比伸长的侧链；(b)肽，尤其是能结合EPO受体的肽，其包含下述氨基酸序列X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15其中每个氨基酸选自天然或非天然氨基酸，且Xs是C，A，E,oc-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc);X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，高丝氨酸曱基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；X!。是HarXu选自任意氨基酸；Xu是T或A;Xu是W，l-nal，2-nal，A或F;X"是D，E，I，L或V;X^是C，A，K，cx-氨基-Y-溴代丁酸或高半胱氨酸(hoc)条件是，X6或Xu是C或hoc;(c)包含下述氨基酸序列的肽X3X4X5X5X7X8X9X10X11X12X13X14X15X15X17X18其中X6至Xu具有上述变体(b)的含义，且其中X3独立地选自任意氨基酸，优选D，E,L，N，S，T或V;Xs独立地选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。X"独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q，R，S或T;Xn是高精氨酸；X18独立地选自任意氨基酸。56.根据权利要求55的肽，其包含下述核心氨基酸序列X6X7X8X9X1。X11X12X13X14X15X16X17X18X19其中每个氨基酸选自天然的或非天然的氨基酸，且其中X6是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或oc-氨基-Y-溴代丁酸；X7是R，H，L，W或Y或S;Xs是M，F，I，Y，H，高丝氨酸甲基醚或正异亮氨酸；X,是G或G的保守交换；在X1Q不是带正电荷的非蛋白原性的具有与赖氨酸相比伸长的侧链的氨基酸的情况下，X,。是脯氨酸，脯氨酸的保守交换或脯氨酸的非保守交换，或X9和^。被单个氨基酸置换；Xu选自任意氨基酸；Xu是不带电荷的极性氨基酸或A;优选苏氨酸，丝氨酸，天冬酰胺或谷氨酰胺；X"是W，l-nal，2-nal，A或F;X"是D，E，I，L或V;X"是具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸或A或ot-氨基-y-溴代丁酸；在X16不是带正电荷的非蛋白原性的具有与赖氨酸相比伸长的侧链的氨基酸的情况下，X"独立地选自任意氨基酸，优选G，K，L，Q,R，S或T;在X17不是带正电荷的非蛋白原性的具有与赖氨酸相比伸长的侧链的氨基酸的情况下，Xn选自任意氨基酸，优选A，G，P，Y或带正电荷的天然的、非天然的或衍生的氨基酸，优选K，R，H或鸟氨酸；Xi8独立地选自任意氨基酸，优选L或Q;在X19不是带正电荷的非蛋白原性的具有与赖氨酸相比伸长的侧链的氨基酸的情况下，Xw独立地选自任意氨基酸，优选带正电荷的氨基酸，例如K，R，H或鸟氨酸；条件是，X,。、X16、Xn或X19中的至少一个是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。57.根据权利要求56的肽，其中X1D、X16、Xn或L中的至少一个是带正电荷的氨基酸，且其中所述带正电荷的氨基酸优选地选自*天然带正电荷的氨基酸，例如赖氨酸，精氨酸，组氨酸和鸟氨*非天然的带正电荷的氨基酸，其优选具有与赖氨酸相比伸长的參最初带负电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带正电荷的基团；条件是，X1D、X16、Xn或X19中的至少一个是带正电荷的非蛋白原性的氨基酸，其具有与赖氨酸相比伸长的侧链。58.根据权利要求57的肽，其中由侧链的延伸单元提供带正电荷的氨基酸的延伸，其中所述延伸单元是脂族或芳族基团。59.根据权利要求58的肽，其中由CH2单元提供所述延伸，其中CH2单元的数目优选地是1至6。60.根据权利要求55-59中的至少一项的肽，其中所述带正电荷的非蛋白原性的与赖氨酸相比伸长的氨基酸是非天然氨基酸。61.根据权利要求的肽60，其中所述非天然氨基酸选自高精氨酸，氨基苯丙氨酸和氨基萘基丙氨酸。62.根据权利要求56的肽，其特征在于，X:。或Xn是带电荷的氨基酸。63.根据权利要求56的肽，其特征在于，Xu是带电荷的氨基酸。64.根据权利要求55-63之一的肽，其中在位置Xu、X,7和/或X^处的带电荷的氨基酸是带正电荷的或带负电荷的，且选自天然氨基酸，非天然氨基酸，和衍生的氨基酸。65.根据权利要求64的肽，其特征在于，X1D、Xn和/或19是带负电荷的氨基酸。66.根据权利要求65的肽，其特征在于，所述带负电荷的氨基酸选自參天然的带负电荷的氨基酸，尤其是D或E;*非天然的带负电荷的氨基酸，其优选具有伸长的侧链，例如Aad:2-氨基庚二酸，Asu;參最初带正电荷的氨基酸，但是它们被合适的化学基团衍生以给它们提供带负电荷的基团。67.根据权利要求66的肽，其特征在于，用于将带正电荷的氨基酸转化成带负电荷的氨基酸的基团选自二酸，例如二羧酸或二磺酸。68.根据权利要求55-67之一的肽，其中Xs是D-氨基酸，优选D-苯丙氨酸。69.根据权利要求55-68之一的肽，其包含下述氨基酸序列X4X5X6X7X8X9X10X11XuX13X14X15Xi6Xi7Xi8X19其中X6至L具有上述含义，且其中X4-是F、Y、或F或Y的衍生物，其中所述F或Y的衍生物携带至少一个吸电子取代基；乂5=选自任意氨基酸，优选A，H，K，L，M，S，T或I。70.根据权利要求69的肽，其中所述吸电子取代基选自氨基，硝基和卣素。71.根据权利要求70的肽，其中l选自4-氨基-苯丙氨酸，3-氨基-酪氨酸，3-硪-酪氨酸，3-硝基-酪氨酸，3，5-二溴-酪氨酸，3，5-二硝基-酪氨酸，3，5-二碘-酪氨酸。72.—种EPO模拟肽，其包含至少2个单体EP0模拟肽共有序列，其中至少一个单体肽共有序列是根据权利要求1-71中的至少一项的肽。73.根据权利要求72的肽，它是二聚体，且包含至少一个根据权利要求1-71中的至少一项的单体肽共有序列。74.与靶分子结合的化合物，其包含(i)至少两个肽单元，其中每个肽单元包含至少两个具有把结合能力的结构域；(ii)至少一个聚合栽体单元；其中所述的肽单元连接到所述的聚合载体单元，且其中至少一个肽单元的至少一个结构域是根据权利要求1-71中的至少一项的肽。75.根据权利要求74的化合物，其中至少一个肽单元包含根据权利要求73的肽二聚体。76.根据权利要求74或75的化合物，其中所述的栽体单元是或包含至少一种天然的或合成的分支的、树枝状的、或线性的聚合物，且优选地选自聚甘油，聚唾液酸，葡聚糖，淀粉或聚乙二醇，或其它生物惰性的水溶性聚合物。77.根据前述权利要求74-76中的至少一项的化合物，其中所述的聚合栽体单元包含分支单元。78.根据权利要求77的化合物，其中所述的分支单元包含甘油或聚甘油。79.根据前述权利要求74-78中的至少一项的化合物，其中所述的载体分子的分子量是至少5kD，优选20至200或4000kD,在使用诸如聚乙二醇等较小栽体的情况下，是20-80kD。80.根据前述权利要求74-79中的至少一项的化合物，其中所述的载体单元由至少2个聚合亚基组成，其中所述的聚合亚基通过至少一个生物可降解的共价接头结构相连接。81.根据前述权利要求中的至少一项的化合物，其包含第一生物可降解的载体单元，其中肽单元和第二聚合载体单元连接到所迷的第一聚合载体单元上。82.根据权利要求81的化合物，其中所述的第二载体单元具有比所述第一载体单元低的分子量，且其中优选是HES的所述第一栽体单元的约20-50%连接位点被优选是分子量约3-10kD的PEG的所述第二载体单元占据。83.根据前述权利要求中的至少一项的化合物，其中使用经修饰的聚合载体单元，84.根据权利要求83的化合物，其中所述肽单元通过共价键连接到所述的聚合载体单元上，且连接通过所述肽单元的反应性氨基酸、N-末端氨基和/或C-末端羧酸发生，其中所述的反应性氨基酸优选地选自赖氨酸，半胱氨酸，组氨酸，精氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，丝氨酸，苏氨酸和酪氨酸，且其中在所述的聚合载体单元不具有适当的反应性偶联基团的情况下，使用偶联单元来修饰聚合载体单元，其中所述的偶联单元优选地选自与所述肽单元的氨基起反应的酰化基团；与所述肽单元上的硫氢基(巯基)、甲硫基、咪唑并或氨基起反应的烷基化基团，最优选马来酰亚胺基；与蛋白的羧基起反应的酯和酰胺形成基团；与所述肽单元上的巯基起反应的二硫化物形成基团，例如5，5'-联硫基双(2-硝基苯甲酸酯)基团，邻吡啶基二硫化物和烷基硫醇基团；与所述肽单元的胍部分起反应的二羰基，例如环己二酮基，和其它l，2-二酮基；与所述肽上的酚基起反应的重氮基；与所述肽单元上的氨基起反应的反应基团，其来自溴化氰与所述聚合载体单元的反应。85.根据权利要求84的化合物，其中所述的反应性氨基酸是半胱氨酸，且其中所述的偶联基团是马来酰亚胺。86.编码根据权利要求1-73中任一项的肽的核酸。87.—种肽，其特征在于，它是根据权利要求1-73中的至少一项的肽的反向肽和/或逆/反向肽，或完全由D-氨基酸组成的相应肽。88.二聚化单体肽单元以形成EPO模拟肽二聚体的方法，其中所述二聚体通过在单体肽单元之间形成共价鍵来创建，其中所述键在第一个单体肽单元的C-末端氨基酸和第二个单体肽单元的N-末端氨基酸之间形成。89.根据权利要求88的方法，其中使用单体肽单元，其在C-或N-末端携带具有能形成共价键的侧链官能度的氨基酸，其中在第一个单体肽单元的C-末端氨基酸的侧链和第二个单体肽单元的N-末端氨基酸的侧链之间形成共价键。90.根据权利要求88或89的方法，其中将2个单体肽单元连接成二聚体的共价键是二硫桥或二硒桥。91.根据权利要求88-90之一的方法，其中在2个单体EP0模拟肽单元之间形成分子间键的氨基酸选自半胱氨酸，半胱氨酸衍生物例如高半胱氨酸和硒代半胱氛酸，硫代赖氨酸，K或E。92.EPO模拟肽二聚体，其包含权利要求1-73中的任一项定义的EP0模拟肽序列。93.通过根据权利要求88-91的方法生产的EPO模拟肽二聚体，其优选包含权利要求1-73中的任一项定义的肽序列。全文摘要本发明涉及具有特定性质的经修饰的EPO模拟肽。文档编号A61K38/00GK101443351SQ200780015575公开日2009年5月27日申请日期2007年3月9日优先权日2006年3月9日发明者H-G·弗兰克,U·哈伯尔申请人:阿普拉根有限公司