专利名称：：检测皮肤上念珠菌的方法才全测皮肤上念珠菌的方法
背景技术：
："尿布渗"(也称为尿布皮炎或失禁性皮炎)是一种刺激和炎症的常见形式，所述刺激和炎症作用于婴儿和失禁的成人中通常由尿布覆盖的皮肤区域(例如，直肠和生殖区域)。当皮肤长时间与尿或粪便接触时会形成尿布渗，与尿或粪便长时间接触增大了皮肤的pH值并促进角质层的分解。虽然尿布渗通常会在短时间内消除，但是一旦角质层损伤，皮肤还是会变得容易感染更严重的继发感染。与尿布渗有关的更成问题的继发感染之一是"酵母菌感染"，其通常是由白色念珠菌(C"m/z必a/^ca^)引起的。例如，在引起尿布瘆的条件下，白色念珠菌的正常单细胞类酵母菌形式可以转变成侵袭性的多细胞丝状体。念珠菌(OmAJa)感染可产生痛苦的肿胀并且变得难以消除。在严重地免疫损害患者中，白色念珠菌感染甚至会传遍身体并引起全身感染。人们相信念珠菌感染的一些症状可以用早期治疗来减少或消除。然而，目前没有方便的系统用于快速通知皮肤上继发性念珠菌感染的护理人员或使用者。因而，目前需要用于快速和筒单地检测皮肤上存在念珠菌感染的技术。发明概述根据本发明的一个实施方案，公开了一种用于检测宿主皮肤上念珠菌的方法。所述方法包括用在念珠菌存在下产生视觉上可观察到的光谱响应的着色剂接触皮力夫样品；；险测所述光谱响应；和将所一全测的光谱响应与皮肤样品中念珠菌的存在相关联。一根据本发明的另一个实施方案，公开了一种用于检测与尿布渗有关的继发感染的系统。所述系统包括施加了着色剂的固相载体。所述着色剂在白色念珠菌存在下产生第一光谱响应，在金黄色葡萄球菌(Sfop/^/ococ'ci^)存在下产生第二光i普响应,和在大肠杆菌(E^c/ze〃c/n"co/O存在下产生第三光语响应。第一光谱响应在—见觉上不同于第二和第三光谱响应。根据本发明的又一个实施方案，公开了一种用于检测与尿布渗有关的继发感染的擦拭巾。所述擦拭巾包括在白色念珠菌存在下产生第一光谱响应的着色剂，在金黄色葡萄球菌存在下产生第二光谱响应的着色剂，和在大肠杆菌存在下产生第三光谱响应的着色剂。第一光谱响应在视觉上不同于第二和第三光谱响应。本发明的其它特征和方面在下文被更详细地论述。附图简述对于本领域普通技术人员而言，本发明的完整和充分的公开内容(包括其最佳方式)在说明书的其余部分中被更详细地阐述，其中引用以下附图图1是本发明的一个示范性的擦拭巾在与皮肤样品接触之前的透视图(图1A)和该擦拭巾在与感染白色念珠菌的样品接触之后的透视图(图1B);和图2是本发明的另一个示范性的擦拭巾在与皮肤样品接触之前的透视图(图2A);该擦拭巾在与感染白色念珠菌的样品接触之后的透视图(图2B);和该擦拭巾在与感染金黄色葡萄球菌或大肠杆菌的样品接触之后的透视图(图2C)。在本说明书和附图中重复使用的引用特征用来表示本发明中相同或类似的特征或要素。代表性实施方案的详细描述定义如在此使用，术语"念珠菌"是指真菌界的一个属，其包括例如以下的种白色念珠菌、都柏林念珠菌、光滑念珠菌(OmAJ"g/Wrato)、吉利蒙氏念珠菌(C""gw〃&rwo"&7)、乳酒念珠菌(C""AJ"fe^r)、克鲁斯氏念珠菌(Ca"J油)、葡萄牙念珠菌(Q"t/油/wWa"她)、近平)'骨念珠菌(Ca"t/z'(ia/aro/7w7os^)、《水带念珠菌(C<2"<iz.t/(3/^o/z'ca/&)和产肌念珠菌(C"mfe/"她7&)。如在此使用，术语"皮肤样品"泛指宿主(例如，任何动物，优选人)的皮肤和/或直接和/或间接地从皮肤得到的生物材料，如来自排出物、组织等。可任选地在试^险之前对所述试样进^于预处理，如过滤、沉淀、稀释、蒸馏、混合、浓缩、干扰组分的灭活、加入试剂、溶解等。如在此使用，术语"非织造织物，，泛指具有单根纤维或线丝交织结构的织物，而不是以可鉴别的方式的结构，如针织物。合适的非织造织物的例子包括，但不限于熔喷法织物、纺粘织物、粗梳理织物、气流法织物等。所述非织造织物的基重可以变化，如从大约5g/m2(gsm)至120gsm,在一些实施方案中从大约10gsm至大约70gsm,和在一些实施方案中乂人大约15gsm至大约35gsm。如在此使用，术语"熔喷织物"泛指由以下方法形成的非织造织物熔化的热塑性材料经过大量细小的，通常为圆形的毛细管模具挤出，熔化的纤维汇入高速气体(例如，空气)流使熔化的热塑性材料纤维变细，以减少它们的直径，可以达到微纤维直径。之后，所述熔喷纤维由高速气流携带并沉积在凝聚表面上以形成随机分散的熔喷纤维织物。此类方法被公开于例如Butin等人的美国专利号3,849,241中，出于所有目的，将其全部内容在此引入作为参考。一般而言，熔喷纤维可以是基本上连续的或间断的微纤维，通常直径小于10微米，并且在凝聚表面上沉积时常常发粘。如在此使用，术语"纺粘织物"泛指包含小直径的基本上为连续纤维的织物。所述纤维是通过以下方法形成的从大量细小的，通常为圆形的喷丝头毛细管挤出熔化的热塑性材料，然后通过例如拉伸和/或其它公知的纺粘技巧快速缩小所述挤出纤维的直径。所述纺粘织物的制造在例如Appel等人的美国专利号.4,340,563、Dorschner等人的美国专利号3,692,618、Matsuki等人的美国专利号3,802,817、Kinney的美国专利号3,338,992、Kinney的美国专利号3,341,394、Hartman的美国专利号3,502,763、Levy的美国专利号3,502,538、Dobo等人的美国专利号3,542,615和Pike等人的美国专利号5,382,400中有描述和说明，出于所有目的，将它们的全部内容在此引入作为参考。在凝聚表面上沉积时纺粘纤维通常不发粘。纺粘纤维往往可具有小于大约40微米的直径，而且其直径常常在大约5至大约20微米之间。如在此使用，术语"粗梳织物，，是指由人造纤维制成的织物，将人造纤维送入梳或梳理设备，在机器方向中分离或分裂以及排列所述人造纤维以形成通常地机器方向定向的纤维性非织造织物。此类纤维通常在货物中得到并放入开启工具/混合器或拣选器中，在梳理设备之前分开所述纤维。一旦形成，然后可通过一种或多种已知的方法粘结成织物。如在此使用，术语"气流法织物"是指由通常大约3至大约19毫米(mm)长的纤维束制成的织物。将所述纤维在供气设备中分离、输送，然后沉积在形成表面上(通常有抽真空设备的协助)。一旦形成，然后通过一种或多种已知的方法粘结成所述织物。详细描述现在将详细地参照本发明的各种实施方案，本发明的一个或多个实施例在下文中被阐述。提供各实施例作为本发明的说明，不作为本发明的限制。事实上，对于本领域技术人员显而易见的是在不脱离本发明范围或精神的情况下可以对本发明作出各种不同的修饰和改变。例如，说明或描述一个实施方案的一部分的特征可用于另一个实施方案以得到更进一步的实施方案。因此，意在将本发明包括这样的^f奮饰和变化归入所附的权利要求及其等同物的范围之内。一般而言，本发明涉及用于快速检测宿主(如有尿布渗的婴儿)皮肤上念珠菌的方法和系统。所述方法包括用在念珠菌存在下显示某一光谱响应(例如，颜色变化)的着色剂接触皮肤样品。例如，所述着色剂可以从第一种颜色变为第二种颜色，从无色变为有色，或从有色变为无色。所述着色剂通常能够区分念珠菌(例如，白色念珠菌)和其它通常与尿布渗有关的微生物，如金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。因此，在将皮肤样品放入与着色剂接触时，可以筒单地观察颜色的变化来确定所述感染是否由念珠菌引起。如果颜色发生一定程度的变化(例如，从黄色变为鲜红色)，则可确定试验样品包含念珠菌。同样地，如果颜色发生较少程度的变化(例如，从黄色变为淡橙黄色)或根本没变，则可确定皮肤样品包含其它微生物(例如，金黄色葡萄球菌或大肠杆菌)、不存在感染或所述感染只不过是由于其它原因引起的。无论如何，它将使是否需要治疗念珠菌变得容易明显。一类特别适合在念珠菌存在下发生可检测的颜色变化的着色剂是pH值敏感的着色剂。即pH值敏感的着色剂可以检测微生物生长培养基的pH值变化。因为酸性/碱性变化对于不同微生物可有所不同，可以选择pH值敏感的着色剂来调整所需的pH值转变。例如认为某些念珠菌属品种(例如，白色念珠菌)产生代谢产物或其它副产物会将生长培养基的pH值变为大约6.6。因此，在或接近这一水平的发生pH值变化的pH值敏感的着色剂可用于本发明。例如，酚红(即，酚石黄酞)特别合适，因为它在大约6.6至8.0的pH值范围显示从黄色到红色的转变。然而，其它酞类着色剂也可以用于本发明以显示念珠菌的存在。例如，可以采用盼红的衍生物，如那些被氯、溴、曱基、羧酸钠、羧酸、鞋基和胺官能团取代的酚红衍生物。示例性的取代的酚红化合物包括，例如氯朌红、间曱酚紫(间-曱酚磺酞)、甲酚红(邻-曱酚磺酞)、儿茶酚紫(儿茶酚磺酞)、氯酚红(3',3"-二氯盼磺酞)、二甲苯盼蓝(对-二甲苯酚石黄酞的钠盐)、二甲酚橙、媒介蓝3(C丄43820)、3,4,5,6-四溴酚石黄酞、溴代二曱苯酚蓝、溴酚蓝(3',3",5'，5"-四溴酚石黄酞)、溴氯酚蓝(二溴-5',5"-二氯盼磺酞)、溴曱酚紫(5',5"-二溴-邻-曱酚磺酞)、溴甲朌绿(3',3",5',5"-四溴-邻-甲酚磺酞)等。更多其它合适的酞类着色剂是本领域所公知的，并且可以包括溴百里酚蓝、百里盼蓝、溴甲酚紫、百里酚酞和酚酞(通用指示剂的常见组分)。例如，氯酚红在大约4.8至6.4的pH值范围显示从黄色到红色的转变；溴百里酚蓝在大约6.0至7.6的pH值范围显示从黄色到蓝色的转变；百里酚酞在大约9.4至10.6的pH值范围显示从无色到蓝色的转变；酚酞在大约8.2至10.0的pH值范围显示从无色到粉红色的转变；百里酚蓝在大约1.2至2.8的pH值范围显示从红色到黄色的第一次转变和在8.0至9.6的pH值范围显示从黄色到pH的第二次转变；溴酚蓝在大约3.0至4.6的pH值范围显示从黄色到紫色的转变；溴曱酚绿在大约3.8至5.4的pH值范围显示从黄色到蓝色的转变；以及溴甲酚紫在大约5.2至6.8的pH值范围显示从黄色到紫色的转变。羟基蒽醌组成另一类适合用于本发明的pH值敏感的着色剂。羟基蒽醌具有以下一般结构oo通式中显示的数字l-8表示稠环结构上的位置，在这些位置上可以存在官能团的取代。对于羟基蒽醌，至少一个官能团是或包含羟基(-OH)基团的官能团。其它可以在所述稠环结构上取代的官能团的例子包括卣素基团(例如，氯或溴基团)、磺酰基团(例如，磺酸盐)、烷基、节基、氨基(例如，伯胺、仲胺、叔胺或季铵)、羧基、氰基、含磷基团等。一些合适的羟基蒽醌可以用于本发明，媒介红ll(茜素)、媒介红3(茜素红S)、萏素黄R、萏素氨羧络合剂、媒介黑13(茜素蓝黑B)、媒介紫5(茜紫3R)、萏素黄GG、天然红4(胭脂红酸)、氨基-4-羟基蒽醌、大黄素、核固红、天然红16(红紫素)、醌茜素等。例如、胭脂红酸在大约3.0至5.5的pH值范围显示从橙黄色到红色的第一次转变以及在大约5.5至7.0的pH值范围显示从红色到紫色的第二次转变。相反，茜素黄R在大约10.1至12.0的pH值范围显示从黄色到橙红色的转变。又一类可以采用的合适的pH值敏感的着色剂是具有以下一般结构的芳香族偶氮化合物X-R4-N=N-R2-Y其中，Rj是芳香族基团；R2选自脂肪族和芳香族基团；和X和Y独立地选自氢、卣离子、-N02、-NH2、芳基、烷基、烷氧基、石黄酸盐基、-S03H、-OH、-COH、-COOH、卣化物等。偶氮衍生物也是合适的，如氧化偶氮化合物(X-RrN=NO-R2-Y)或氢化偶氮化合物(X-RrNH-NH-R2-Y)。此类偶氮化合物(或其衍生物)的具体例子包括甲基紫、曱基黄、甲基橙、甲基红和甲基绿。例如，曱基紫在大约0至1.6的pH值范围发生从黄色到蓝-紫色的转变，甲基黄在大约2.9至4.0的pH值范围发生从红色到黄色的转变，曱基橙在大约3.1至4.4的pH值范围发生从红色红色黄色的转变，和甲基红在大约4.2至6.3的pH值范围发生从红色到黄色的转变。芳甲烷(例如，二芳基曱烷和三芳基曱烷)组成又一类适合用于本发明的pH值敏感的着色剂。例如，三芳基曱烷隐色碱具有以下一般结构9<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中R、R，和R"独立地选自取代和未取代的芳基基团，如苯基、萘基、蒽基等。所述芳基基团可以被如氨基、羟基、羰基、羧基、磺酸基、烷基的官能团和/或其它已知的官能团取代。此类三芳基甲烷隐色碱的例子包括隐色孔雀绿、副品红碱、结晶紫内酯、结晶紫隐色体、结晶紫、Cl碱性紫l、Cl碱性紫2、Cl碱性蓝、Cl维多利亚蓝、N-苯曱酰基隐色体-亚甲基等。同样合适的二芳基甲烷隐色碱可以包括4,4'-双(二甲基氨基)二苯基曱醇(也称为"Michler的醇")、Michler的醇隐色苯并三唑、Michler的醇隐色吗啉、Michler的醇隐色苯石黄酰胺等。在酸性条件下，隐色孔雀绿甲醇形式的一个或多个自由氨基可以被质子化以形成孔雀绿(也称作苯胺绿、碱性绿4、金刚绿B或维多利亚绿B),其具有以下结构孔雀绿通常在0.2至1.8的pH值范围显示从黄色到蓝绿色的转变。当pH值高于大约1.8,孔雀绿转变成深绿色。可以采用的其它合适的pH值敏感的着色剂包括刚果红、石蕊(石蕊精)、亚甲基蓝、中性红、酸性品红、靛类胭脂红、亮绿、苦味酸、酸性间胺黄、间曱酚紫、喹哪啶红、苯胺黄OO、2,6-二硝基酚、焰红染料B、2,4-二硝基酚、4-二曱基氨基偶氮苯、2,5-二硝基酚、l-萘基红、氯酚红、苏木紫、4-硝基酚、硝。秦黄、3-硝基酚、碱性蓝、￡-蓝、尼罗蓝A、通用指示剂等。例如，刚果红在大约3.0至5.2的pH值范围发生从蓝色到红色的转变，石蕊在大约4.5至8.3的pH值范围发生从红色到蓝色的转变，中性红在大约11.4至13.0的pH值范围发生从红色到黄色的转变。除了pH值，其它机理也可以完全或部分对诱导着色剂颜色变化起作用。例如，念珠菌可以在生长培养基中产生低分子量的络合铁的化合物，这被称为"铁载体"。因此络合金属的着色剂可用于在铁载体存在下发生颜色变化的本发明的一些实施方案。一类特别合适的络合金属的着色剂是芳香族偶氮化合物，如羊毛铬黑T、羊毛铬蓝SE、羊毛铬蓝黑B、羊毛铬花青R、二曱酚橙、铬天青S、胭脂红酸等。更多其它合适的络合金属的着色剂可以包括茜素氨羧络合剂、萏素S、偶氮胂III、金精三羧酸、2,2'-双吡啶、溴邻苯三酚红、莴素蓝黑(羊毛铬蓝黑R)、钙红、变色酸、二钠盐、铜腙、5-(4-二甲基氨基-亚千基)绕丹宁、丁二酮肟、1，5-二苯卡巴肼、双硫腙、荧光素氨羧络合剂、苏木紫、8-羟基喹啉、2-巯基苯并噻唑、甲基百里酚蓝、红紫酸铵、l-亚硝基-2-萘盼、2-亚硝基-l-萘酚、亚硝基R盐、1,10-菲咯啉、苯基荧光酮、酞紫、1-(2-吡啶基偶氮)-萘酚、4-(2-吡啶基偶氮)间苯二酚、焦性没食子朌红、偶氮磺III、5-磺基水杨酸、4-(2-瘗唑基偶氮)间苯二酚、钍试剂、百里酚thalexon、钬试剂、Tolurnr-3,4-二硫醇、锌试剂等。应该注意到上述引用的一种或多种pH值敏感的着色剂还可以被归类称为络合金属的着色剂。虽然上述引用的着色剂是基于它们颜色变化的机理(例如，pH值敏感的、络合金属的等)分类的，但是应理解本发明不限于任何特定的颜色变化才几理。例如，即使采用pH值敏感的着色剂，其它机理实际上也可以完全或部分对诱导着色剂的颜色变化起作用。例如，在所述着色剂和微生物之间的氧化还原反应可以促进颜色变化。如上所述，着色剂可被应用于本发明中来区分念珠菌以及其它通常与尿布渗有关的微生物(如大肠杆菌和金黄色葡萄球菌)的存在。然而，所述方法决不限于念珠菌的检测。事实上，能够检测其它微生物(如细菌)存在的其它着色剂也可以被应用于本发明。可在本发明中检测的几个相关的细菌组包括，例如革兰氏阴性杆菌(例如，肠道细菌)；革兰氏阴性弯曲杆菌(例如，弧菌、螺旋杆菌、弯曲杆菌等)；革兰氏阴性球菌(例如，奈瑟氏菌)；革兰氏阳性杆菌(例如，芽胞杆菌、梭状芽孢杆等)；革兰氏阳性球菌(例如，葡萄球菌、链球菌等)；专性胞内寄生物(例如，立克次体和衣原体)；耐酸杆菌(例如，分枝杆菌、诺卡氏菌等)；螺旋体(例如，密螺旋体、疏螺旋体等)；和支原体(即，没有细胞壁的微小细菌)。特别相关的细菌包括大肠杆菌(革兰氏阴性杆菌)、克雷伯氏肺炎杆菌(革兰氏阴性杆菌)、链球菌(革兰氏阳性球菌)、沙门氏霍乱杆菌(革兰氏阴性杆菌)、金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性球菌)和铜绿假单胞菌(革兰氏阴性杆菌)。用于检测细菌的着色剂能独立地区分细菌，或筒单地提供广谱细菌存在所表现出的颜色变化。例如，认为溶剂化显色着色剂在广谱细菌存在下显示出可检测的颜色变化。虽然溶剂化显色着色剂也可以在念珠菌属微生物存在下发生颜色变化，但是通常认为发生的颜色变化程度较小。适用于本发明的各种合适的溶剂化显色着色剂被描述于MacDonald等人的美国专利申请公布号2006/0134728,出于所有目的将其全部内容在此引入作'为参考。例如，部花青着色剂(例如，单-、二-和三-部花青)是可应用于本发明的一类溶剂化显色着色剂的一个例子。部花青着色剂(如部花青540)属于Griffiths在"ColourandConstitutionofOrganicMolecules"AcademicPress,London(1976)中论述的供体-简单受体着色剂分类。更具体地说，部花青着色剂具有通过偶数个次曱基碳的共轭链分开的碱性核和酸性核。此类着色剂具有作为电子受体部分的羰基。所述电子受体结合给电子基团，如羟基或氨基。所述部花青着色剂可以是环状或非环状的(例如，环状部花青着色剂的乙烯基类似物酰胺)。其它可用于本发明的合适的溶剂化显色着色剂包括具有永久两性离子形式的溶剂化显色着色剂。也就是说，这些着色剂具有包含在邻近兀-电子系统内的正式的正负电荷。与上述引用的部花青着色剂相反，中性共振结构不能从此类永久的两性离子着色剂中抽出。这一类别的示例性的着色剂包括N-酚盐甜菜碱着色剂，如那些具有以下一般结构的着色剂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>其中RrRs独立地选自氬、硝基(例如，氮)、囟素或直链、支链或环状CVC20基团(例如，烷基、苯基、芳基、吡咬基等)，其可以是饱和;或多个卣素、硝基、、氰i、羟基、烷ii、、i基Z苯基、芳基、他咬基或烷基氨基基团所取代。例如，所述N-酚盐甜菜碱着色剂可以是具有以下一般结构的4-(2,4,6-三苯基吡啶镥-1-基)-2,6-二苯基酚盐(雷查德染料)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>染料表现出强烈的阴性溶剂化显色现象并由此可以在细菌存在下进行从蓝色到无色的明显的颜色变化。也就是说，雷查德染料显示吸光度向较短波长的移动并由此在溶剂洗脱液强度(极性)增加时具有可见的颜色变化。不管采用的类型，通常将着色剂施加到固相载体用于随后的与皮肤样品的接触。所述固相载体的性质可根据预定的用途而变化，并可以包括以下材料，如薄膜、纸、非织造织物、针织物、纺织品、泡沫材料、玻璃等。令人期望地是所述固相载体是设计成用于皮肤的擦拭巾，如婴儿擦拭巾、成人擦拭巾、手部擦拭巾、面部擦拭巾、化妆用擦拭巾、家用擦拭巾、工业用擦拭巾、个人清洁擦拭巾、棉球、棉花头的药签等。述着色剂可以在皮肤样品中提供有关微生物存在的信息。例如，所述着色剂可以在婴儿擦拭巾上存在以向护理人员提供婴儿皮肤上是否存在微生物的快速显示。所述擦拭巾可以由任何本领域公知的各种材料制成。例如，所述擦拭巾可以包括非织造织物，其包含充分湿态强度和供所需应用使用的吸收性的吸收性物质。例如，所述非织造织物可以包括由各种制浆方法形成的吸收性纤维，如牛皮纸浆、亚硫酸盐纸浆、热机械纸浆等。所述纸浆纤维可以包括软木材纤维，其基于长度-权重平均值具有大于1毫米和特别是从大约2至5毫米的平均纤维长度。此类软木材纤维可以包括，但不限于北方软木材、南方软木材、红杉、红刺柏、铁杉、松树(例如，南方松树)、云杉(例如，黑云杉)及其组合等。适于本发明的示例性的商业上可得到的纸浆纤维包括可从Kimberly-Clark公司以商标名"Longlac-19"获得的纸浆纤维。还可以使用硬木纤维，如桉树、楓木、桦木、山杨等。在某些情况中，特别希望桉树纤维来增加织物的柔软性。桉树纤维还可以提高亮度、增加不透明度和改变织物的孔隙结构以增加它的抗损坏能力。而且，如果需要，可以使用从再循环物质中获得的次级纤维，如从例如报纸、回收纸板和办公室废品来源的纤维纸浆。此外，其它吸收性纤维可以用于本发明，如马尼拉麻、萨拜草、马利筋花、菠萝叶、纤维素酯、纤维素醚、硝酸纤维素、乙酸纤维素、丁酸乙酸纤维素、乙基纤维素、再生纤维素(例如，粘胶或人造丝)等。合成的热塑性纤维也可以应用于所述非织造织物，如由以下物质制得的热塑性纤维聚烯烃，例如聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯等；聚四氟乙烯；聚酯，例如聚对苯二曱酸乙二醇酯等；聚乙酸乙烯酯；聚氯乙烯-醋酸乙燁酯；聚乙烯醇缩丁醛；丙烯酸树脂，例如聚丙烯酸酯、聚丙烯酸曱酯、聚甲基丙烯酸曱酯等；聚酰胺，例如尼龙；聚氯乙烯；聚偏氯乙烯；聚苯乙烯；聚乙烯醇；聚氨酯；聚乳酸；其共聚物；等等。因为许多合成的热塑性纤维具有固有的疏水性(即，不可润湿性)，通过在织物形成之前、形成期间和/或形成之后用表面活性剂溶液处理，可以任选地使这样的纤维更具亲水性(即，可润湿性)。也可以采用其它已知的用于增加可润湿性的方法，如描述于Sayovitz等人的美国专利号5,057,361,出于所有目的将其全部内容在此引入作为参考。如果需要，所述非织造织物可以是包含合成热塑性聚合物纤维和吸收性纤维的复合材料，如聚丙烯和纸浆纤维。依据无纺复合材料所需要的特征，此类纤维的相对比率可在宽范围内变化。例如，所述无纺复合材料可包含大约1Wt。/。至大约60Wt。/。的合成聚合纤维，在一些实施方案中包含5wt。/。至大约50wt%,和在一些实施方案中包含大约10wt。/。至大约40wt。/。的合成聚合纤维。所述无纺复合材料同样可包含大约40wt。/。至大约99wt。/。的吸收性纤维，在一些实施方案中包含50wt"/。至大约95wt%,和在一些实施方案中包含大约60wt。/。至大约90wt。/。的吸收性纤维。无纺复合材料可使用各种已知的技术形成。例如，所述无纺复合材料可以是包含混合物或热塑性纤维的稳定基质和第二种非热塑性材料的"共同形成材料，，。举例来说，共同形成材料可通过以下方法制成将至少一个熔喷模头靠近斜槽排列，当形成织物时，经过斜槽将其它材料加入到所述织物中。这样的其它材料可包括，但不限于纤维性的有机材料，如木质或非木质纸浆，如棉花、人造丝、回收纸、纸浆绒毛以及超吸收颗粒，无机和/或有机的吸收性材料，处理的聚合人造纤维等等。这种共同形成材料的一些例子公开于Anderson等人的美国专利号4,100,324;Everhart等人的美国专利号5,284,703;和Georger等人的美国专利号5,350,624;出于所有目的将它们的全部内容在此引入作为参考。或者，所述无纺复合材料可通过用高压喷射水流来用液压巻入纤维和/或细丝而形成。液压巻入无纺复合材料的人造长度纤维和连续长丝被公开于例如Evans的美国专利号3,494,821和Bouolton的美国专利号入无纺复合材料的连续细丝非织造织物和纸浆纤维公开于例如Everhart等人的美国专利号5,284，703和Anderson等人的美国专利号6,315,864,出于所有目的将它们的全部内容在此引入作为参考。不考虑形成擦拭巾所使用的材料或方法，所述擦拭巾的基重通常为每平方米大约20至大约200克(gsm),和在一些实施方案中其基重在大约35至大约100gsm之间。较低基重的产品可特别适用作轻型的擦拭，而较高基重的产品最好适用作工业用擦拭。所述擦拭巾可以具有各种形状，包括但不限于通常的圓形、椭圆形、正方形、矩形或不规则形状。每个单独的擦拭巾可以按折叠结构排列并将一个加叠在另一个的上面以得到一叠湿的擦拭巾。这种折叠结构是本领域技术人员公知的并包括C-折叠、Z-折叠、四等分折叠结构等。例如，所述擦拭巾可具有大约2.0至大约80.0厘米的展开长度，在一些实施方案中有从大约10.0至大约25.0厘米的展开长度。所述擦拭巾可同样具有大约2.0至大约80.0厘米的展开宽度，在一些实施方案中有从大约10.0至大约25.0厘米的展开宽度。一叠折叠擦拭巾可以被放入容器(如塑料桶)内部，以得到用于最终卖给消费者的擦拭巾包装。或者，所述擦拭巾可以包括连续剥去的材料，其在各擦拭巾之间贯穿并可以被排列成叠或绕成用于分配的巻。用于输送擦拭巾的各种合适的分配器、容器和系统-陂描述于Buczwinski等人的美国专利号5,785,179;Zander的美国专利号5,964,351;Zander的美国专利号6,030,331;Haynes等人的美国专利号6,158,614;Huang等人的美国专利号6,269,969;Huang等人的美国专利号6,269,970;和Newman等人的美国专利号6,273,359,出于所有目的将它们的全部内容在此fI入作为参考。在本发明的某些实施方案中，所述擦拭巾是"湿的擦拭巾"，因为它包含用于清洁、消毒、卫生处理等的溶液。所述特定的湿擦拭溶液不是关键的并且一皮更详细地描述于Krzysik等人的美国专利号6,440,437;Amundson等人的美国专利号6,028,018;Cole的美国专利号5,888,524;Wm等人的美国专利号5,667,635;和Kopacz等人的美国专利号湿擦拭溶液的量可以取决于所利用的^拭巾材料的类型:^于储存所述擦拭巾的容器类型、清洁制剂的性质和所期望的擦拭巾的最终用途。通常，基于所述擦拭巾的干燥重量，每个擦拭巾包含大约150至大约600wt%,令人期望地从大约300至大约500wt。/o的湿擦拭溶液。典型地，本发明的着色剂被施加于擦拭巾或其它以组合物(包含活动载体)形式的固相载体。所述载体可以是液体、气体、凝胶等，并可以选择以达到所期望的着色剂性能(颜色变化的时间、不同区域之间的对比度和敏感度)。例如，在一些实施方案中，所述载体可以是含水溶剂如水以及非水溶剂如二醇(例如，丙二醇、丁二醇、三甘醇、己二醇、聚乙二醇、乙氧基二甘醇和一缩二丙二醇)；醇类(例如，曱醇、乙醇、正丙醇和异丙醇)；甘油三酯；乙酸乙酯；丙酮；甘油三乙酸酯；乙腈；四氢呋喃；二甲苯；曱醛类(例如，二甲基甲酰胺"DMF");等等。用于向固相载体施加着色剂组合物的合适技术包括印刷、浸渍、喷涂、熔化挤压、涂层(例如，溶剂涂层、粉末涂层、用刷子涂层等)等等。施加时，可干燥着色剂组合物以除去载体并留下用于与微生物相互作用的着色剂残余物。还可以与着色剂组合物分开或一起〗吏用其它添加剂。例如，在一个实施方案中，使用环糊精来增强着色剂的敏感度和对比度。虽然不希望受理论的限制，但是本发明人相信这些添加剂可能抑制着色剂结晶，从而提供更鲜艳的颜色以及提高的检测灵敏度。也就是说，单一的着色剂分子对微生物具有更高的敏感度，因为每个着色剂分子能够自由地与微生物膜相互作用。相反，着色剂的小晶体必须先溶解，然后再穿透所述的膜。合适的环糊精的例子可包括，但不限于羟丙基-P-环糊精、羟乙基-卩-环糊精、？环糊精、羟丙基-Y-环糊精和羟乙基-y-环糊精，它们可从CerestarInternationalofHammond,Indiana购买到。表面活性剂也可以帮助提高由着色剂提供的敏感度和对比度。特别期望的表面活性剂是非离子型表面活性剂，如乙氧基化烷基朌、乙氧基化和丙氧基化的脂肪醇、环氧乙烷-环氧丙烷嵌段共聚物、(C8-ds)脂肪酸的羟乙基化酯、环氧乙烷与长链胺或酰胺的缩合产物、环氧乙烷与醇的缩合产物、炔二醇以及其混合物。合适的非离子型表面活性剂的各种具体例子包括，但不限于曱基gluceth-10、PEG-20曱基葡萄糖二硬脂酸酯、PEG-20甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、Cn-15pareth-20、ceteth-8、ceteth-12、dodoxynol-12、laureth-15、PEG-20蕙麻子油、吐温20、steareth-20、聚氧乙烯-10鲸蜡烷醚、聚氧乙烯-10^J旨酰醚、聚氧乙烯-20鲸蜡烷醚、聚氧乙烯-10油醚、聚氧乙烯-20油醚、乙氧基化的壬基酚、乙氧基化的辛基酚、乙氧基化的十二烷基酚，或乙氧基化的(C6-C22)脂肪醇，包括3-20个环氧乙烷部分，聚氧乙烯-20异鲸蜡烷醚、聚氧乙烯-23月桂酸甘油酯、聚氧-亚乙基-20硬脂酸甘油酯、PPG-10甲基葡萄糖醚、PPG-20曱基葡萄糖醚、聚氧乙烯-20脱水山梨醇单酯、聚氧乙烯-80蓖麻子油、聚氧乙烯-15十三烷醚、聚氧-亚乙基-6十三烷醚、laureth-2、laureth-3、laureth-4、PEG-3蓖麻子油、PEG600二油酸酯、PEG400二油酸酯以及其混合物。商业上可以得到的非离子型表面活性剂可包括可从AirProductsandChemicalsofAllentown，Pennsylvania获得的SURFYNOL⑧系列的炔二醇表面活性剂以及可从FischerScientificof17Pittsburgh,Pennsylvania获得的TWEEN⑧系列的聚氧乙烯表面活性剂。还可以使用粘合剂来帮助着色剂固定在擦拭巾或其它固相载体上。例如，水溶性的有机聚合物，如多糖及其衍生物可以被用作粘合剂。多糖是包含重复的碳水化合物单元的聚合物，其可以是阳离子的、阴离子的、非离子的和/或两性的。在一个具体实施方案中，所述多糖是非离子的、阳离子的、阴离子的和/或两性的纤维素醚。合适的非离子的纤维素醚可以包括，但不限于烷基纤维素醚，如曱基纤维素和乙基纤维素；羟烷基纤维素醚，如羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基羟丁基纤维素、羟乙基羟丙基纤维素、羟乙基羟丁基纤维素和羟乙基羟丙基羟丁基纤维素；烷基羟烷基纤维素醚，如甲基羟乙基纤维素、甲基羟丙基纤维素、乙基鞋乙基纤维素、乙基羟丙基纤维素、曱基乙基羟乙基纤维素和甲基乙基羟丙基纤维素；等等。所述着色剂组合物可以:故施加到全部或仅仅一部分4察拭巾或其它固相载体上。用于向固相载体施加着色剂组合物的合适技术包括印刷、浸渍、喷涂、熔化挤压、涂层(例如，溶剂涂层、粉末涂层、用刷子涂层等)、喷涂等。例如，在一个实施方案中，所述着色剂组合物被印刷在载体(例如，擦拭巾)上，例如以标签的形式将某一信息传达给使用者。各种印刷技术可用于向所述载体施加着色剂组合物，如凹板印刷、胶版印刷、丝网印刷、激光印刷、热色带印刷、活塞印刷等。在一个具体实施方案中，使用喷墨印刷技术将所述着色剂组合物施加到载体上。喷墨印刷是一种无接触的印刷技术，包括施加压力使墨水经过微小的喷嘴(或一系列的喷嘴)以形成指向载体的液滴。通常利用两种技术，即"DOD"(按需要滴下)或"连续的"喷墨印刷。在连续系统中，墨水在压力下以连续的液流经过至少一个孔口或喷嘴发出。液流;陂增压致动器扰乱以使液流在距离孔口的固定距离破碎成液滴。相反，DOD系统使用增压致动器在每个孔口将墨水破碎成液滴。各系统中的增压致动器可以是压电晶体、声学仪器、热力学仪器等。喷墨系统类型的选择可根据将要从印刷头印刷的材料类型而变化。例如，传导性材料往往需要连续的系统，因为液滴有静电偏4牛。因此，当样品通道由绝缘材料形成时，更合乎DOD印刷技术的需要。所述着色剂组合物可以按印刷墨的形式使用各种任何已知的组分和/或方法来形成。例如，所述印刷墨可以包含作为载体的水，并且特别是去离子水。各种辅助载体也可以包含在墨水中，如内酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N-甲基乙酰胺、N-曱基吗啉-N-氧化物、N,N-二甲基乙酰胺、N-曱基甲酰胺、丙二醇-单甲醚、环丁砜、三丙二醇-单甲醚、丙二醇和三乙醇胺(TEA)。还可以利用湿润剂，如乙二醇；二乙二醇；甘油；聚乙二醇200、300、400和600;1,3-丙二醇；丙二醇单甲醚，如DowanolPM(GalladeChemicalInc.,SantaAna,CA);多元醇；或其组合。还可以包含其它添加剂以提高墨水的性能，如包含螯合剂以螯合那些可以随时间推移而参与化学反应的金属离子，包含抗腐蚀剂以帮助保护印刷机或墨水输送系统的金属部件，和包含表面活性剂以调整墨水的表面张力。用于墨水的各种其它组分(如着色稳定剂、光引发剂、粘合剂、表面活性剂、电解质盐、pH值调节剂等)可以按Nohr等人的美国专利号5,681,380和6,542,379中的描述使用，出于所有目的将它们的完全内容在此引入作为参考。如果期望，所述组合物还可以被施加在长条上，然后粘附或以其它方式附着在固相载体上。例如，所述长条可包含通常用于生产标签的表面材料，如纸、聚酯、聚乙烯、聚丙烯、聚丁烯、聚酰胺等。粘合剂(如压敏粘合剂、热活化粘合剂、热熔性粘合剂等)可以被应用在表面材料的一个或多个表面上以帮助其粘附到固相载体的表面上。压敏粘合剂的合适例子包括，例如丙烯酸基粘合剂和弹性粘合剂。在一个实施方案中，所述压敏粘合剂基于丙烯酸酯(例如，丙烯酸2-乙基己基酯)与极性共聚单体(例如，丙烯酸)的共聚物。所述粘合剂可具有大约0.1至大约2毫英寸(2.5至50微米)范围的厚度。还可以使用释放衬垫，其在使用之前接触粘合剂。所述释放衬垫可以包含任何本领域技术人员所知的各种材料，如硅氧烷、铜版纸或薄膜基底。用于本发明的着色剂的准确用量可根据各种因素来变化，这些因素包括着色剂的敏感性、其它添加剂的存在、所期望的检测程度(例如，目视)、可疑的微生物浓度，等等。在一些情况中，所期望的是只检测致病浓度的念珠菌的存在。例如，念珠菌浓度为每毫升生长培养基中大约1乂103菌落形成单位("CFU")以上，在一些实施方案中为大约1x105CFU/ml以上，在一些实施方案中为大约1x106CFU/ml以上，和在一些实施方案中为大约1x107CFU/ml以上可以i人为是致病的。应该理解这些浓度可以与生长培养基中培养的液体样品或非液体样品(例如，皮肤或从皮肤获得的样品)相互关联。无论如何，所述着色剂可以以足够在所需浓度的念珠菌存在下进行可检测的颜色变化的量使用。例如，所述着色剂可以按每毫升载体大约0.1至大约100毫克的浓度应用，在一些实施方案中按每毫升载体大约0.5至大约60毫克的浓度应用，和在一些实施方案中以每毫升载体大约1至大约40毫克的浓度应用。同样地，所述着色剂可以占固相载体干燥重量的大约0.001wt。/。至大约20wt%,在一些实施方案中占0.01wt。/o至大约10wt%,和在一些实施方案中占大约0.1wt。/o至大约5wt%。着色剂的变色程度可以通过视觉或使用仪器来确定。在一个实施方案中，颜色强度用光学读数器测定。所述光学读数器的实际构造和结构通常可以是变化的，这是本领域技术人员能容易理解的。通常，所述光学读数器包括能够发出电磁辐射的照明源和能够寄存信号(例如，传递或反射的光线)的检测器。所述照明源可以是本领域中已知的任何装置，其能够提供电磁辐射，如提供在可见区域或靠近可见区域的光(例如，红外线或紫外线)。例如，可用于本发明的合适的照明源包括，但不限于发光二极管(LED)、闪光灯、冷阴极荧光灯、电致发光灯等。照明可以是多路和/或对准的。在一些情况中，照明可以是月永冲的以减少任何背景干扰。此外，照明可以是连续的或可以结合连续波(CW)和脉冲照明，其中多路照明光线是多路复用的(例如，脉冲束与CW束多路复用)，允许由CW源感应的信号和由脉沖源感应的信号之间的信号区别能力。例如，在一些实施方案中，将LED(例如，砷化镓铝红色二才及管、磷化镓绿色二极管、磷砷化镓绿色二极管或氮化镓铟紫/蓝/紫外线(UV)二极管)用作所述脉冲照明源。适用于本发明的合适的UVLED激发二极管的商业上可以得到的例子是ModelNSHU550E(NichiaCorporation),其在10毫安(3.5-3.9伏特)的正向电流下发出750至1000微瓦的光强度，成为在10度的半最大值具有完整宽度的光束，峰值波长为370-375纳米和光谱半宽度为12纳米。在一些情况中，所述照明源可以向着色剂提供漫射照明。例如，可以简单地采用一排多点光源(例如，LED)来提供相对散开的照明。另一种特别需要的能够以相对廉价的方式提供漫射照明的照明源是电致发光(EL)装置。EL装置通常为利用夹在电极之间的发光材料(例如，磷颗粒)的电容器结构，其中至少一个电极是透明的以便让光散出来。材料发光。、、、'I"所述检测器通常可以是本领域已知的能够检测信号的任何装置。例如，所述检测器可以是被装配用于空间分辨的电子成像检测器。此类电子成像检测器的一些例子包括高速的电荷耦合器(CCD)、电荷注入器(CID)、互补金属氧化物半导体(CMOS)装置等。例如，此类图像检测器通常是电子光敏元件的二维阵列，虽然例如包括检测器像素或光敏元件单线的用于扫描图像的线性成像检测器(例如，线性CCD检测器)但也可以被使用。每个阵列包括一组已知的可以被称为"地址，，的独特位置。图像检测器中的每个地址被覆盖区域(例如，区域的形状通常为方框或矩形)的检测器占用。这一区域泛指"像素"或像素区域。例如，检测器像素可以是CCD、CID或CMOS检测器，或任何其它的检测或测定光线的装置或探测器。检测器像素的大小可以在很大程度上变化，并且在一些情况中可以具有低到0.2微米的直径或长度。在其它实施方案中，所述检测器可以是缺乏空间分辨能力的光敏元件。例如，这些光敏元件的例子可以包括光电倍增器、光电二极管，如雪崩光电二极管或硅光电二极管等。硅光电二极管往往是有利的，因为它们便宜、灵敏、能够高速运转(短上升时间/高带宽)，以及容易整合到大多数其它半导体技术和整体电路中。而且，硅光电二极管体积小，能够将它们容易地结合到各种类型的检测系统中。如果使用硅光电二极管，则发出信号的波长范围可以在它们的灵敏度范围内，为400至1100纳米。光学读数器通常可以采用任何已知的检测技术，包括例如发光(例如，荧光、磷光等)、吸光度(例如，荧光或非荧光)、衍射等。在本发明的一个具体实施方案中，所述光学读数器测定与吸光度有关的颜色强度。在一个实施方案中，使用来自DynexTechnologiesofChantilly,Virginia(Model#MRX)的微板读数器测定吸光度读数。在另一个实施方案中，使用被称为"C正LAB"的常规试验测定吸光度读数，称为"CIELAB"的常规试-睑论述于F.Cost的PocketGuidetoDigitalPrinting,DelmarPublishers,Albany,NY.ISBN0-8273誦7592-l，第144和145页。这种方法定义三个变量L*、&*和b*，基于色彩感觉的对立理论，这三个变量对应于感觉出的颜色的三个特征。所述三个变量具有以下含义L*=亮度(或发光度)，从0至100,其中0=黑暗和100=明亮；a*=红色/绿色轴，范围大约从-100至100;正值是微红色而负值是浅绿色；和b*=黄色/蓝色轴，范围大约从-100至100;正值是浅黄色而负值是浅蓝色。因为C正LAB色隙在一见觉上有些一致，所以可以计算表示由人感觉出来的两种颜色之间差别的单一数值。该差值-故称为AE并通过取两种颜色之间的三个差值(AL*、Aa》和Ab"的平方和的平方根来计算。在CIELAB色隙中，每个AE单位大约等于两种颜色之间的"仅得到注意的，，差异。因此CIELAB是一种不错的用于与目的设备无关的色规范系统的测量方法，其可以用作出于颜色管理和表示颜色变化目的的参考色隙。使用该试验，颜色强度(L*、a^口b*)可以使用例如来自日本大阪MinoltaCo.Ltd.(Model#CM2600d)的手持分光光度计来测定。这种仪器利用符合CIE号15、ISO7724/1、ASTME1164和JISZ8722-1982(漫射照明/8-等级观察系统)的D/8几何结构。通过样品表面以8个等级到正常表面的某一角度反射的D65光线由测定样品的光学系统接收。另一种合适的光学读数器是反射分光光度计，其描述于Kaylor等人的美国专利申请公布号2003/0119202,出于所有目的将其全部内容在此引入作为参考。同样地，透射方式的^r测系统也可以用于本发明。根据本发明，以上描述的筛分4支术可以用各种方式实施。例如，可以利用固相载体(例如，擦拭巾)，所述固相载体包括提供许多不同检测区域的检测区域(例如，线、点、条紋等)，以便使用者能更好地确定试-睑样品内念珠菌或其它樣支生物的存在。每个区域可以包括相同的着色剂，或可以包括用于与不同类型微生物反应的不同着色剂。参照图1，显示本发明的一个实施方案，其中固相载体80呈应用4企测区域82的擦拭巾的形式。例如，所述检测区域82可以包含在白色念珠菌存在下进行颜色变化的着色剂(例如，酚红)。当感染白色念珠菌的皮肤样品(例如，皮肤)接触擦拭巾80时，检测区域82经历颜色变化(图1B)。然而，当只感染另一种微生物(例如，金黄色葡萄球菌)的皮肤样品接触擦拭巾80时，检测区域82将基本上保持不变。虽然不是必需的，但是也可以采用不同着色剂的阵列来提高对念珠22菌与其它微生物的区分能力。该阵列对念珠菌提供不同的光谱响应(例如，颜色的形式)或"指紋"。例如，所述阵列在白色念珠菌或其它念珠菌属品种存在下提供某种光谱响应，但在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌或其它通常与尿布渗有关的细菌存在下提供完全不同的光谱响应。因此由所述阵列提供的光谱响应的检测虑及提高的念珠菌和其它微生物的区别。在使用时，所述阵列可以在预定形式中间隔地包含许多分散的区域(称为"地址，，)。所述地址中包含在特定微生物存在下能够显示颜色变化的着色剂。对本发明而言阵列中着色剂的选择不是关键的，只要所述阵列产生不同的光"^普响应。可以用各种方式配置单个阵列地址以达到这一目的。在一个具体实施方案中，单个阵列地址可以包含在念珠菌和不同的微生物(例如，金黄色葡萄球菌或大肠杆菌)存在下各自显示不同光谱响应的着色剂。例如，第一个阵列地址可以包含酞类着色剂(例如，酚红)和第二个阵列地址可以包含N-纷盐甜菜碱着色剂(例如，雷查德染料)。当然，单个阵列地址之间的光谱区别不总是需要通过使用不同的着色剂来达到。例如，相同的着色剂可以用于单个阵列地址，但—以不同的浓度使用以便产生不同的光谱响应。某些地址同样也可以以相同的浓度包含相同的着色剂，只要所述阵列作为整体能产生不同的光谱响应。除了单个阵列地址的组合以外，也可以有选择地控制所述阵列的各种其它方面以提高其提供不同光谱响应的能力。影响所述阵列产生不同光谱响应的能力的一个因素是所用阵列地址的数目。也就是说，更多数目的单个阵列地址可以提高对不同微生物的光语响应变化的程度。然而，过多的地址也可以导致在—见觉上区分光谱反应困难。因此，在本发明的大多数实施方案中，所述阵列包含2至50个阵列地址，在一些实施方案中包含3至大约40个阵列地址，和在一些实施方案中包含4至20个阵列地址。所述阵列中所用的地址数目将最终取决于，至少在某种程度上取决于所选择的着色剂的性质。也就是说，如果所选择的着色剂在微生物存在下具有相似的颜色变化，则可能需要大量的地址来提供所需的光谱响应。可以影响所述阵列提供不同光谱响应的能力的另一方面是单个阵列地址的形式(例如，大小、间隙、排列等)。所述单个阵列地址可以具有在不过度增加固相载体大小的情况下达到目视观察效果的大小。所述地址的大小例如可以从大约0.01至大约100毫米，在一些实施方案中可以从大约0.1至大约50毫米，和在一些实施方案中可以/人大约l至大约20毫米。地址的形状也可以提高光谱响应的目视观察。例如，所述地址可以呈条紋、带状、点状或任何其它几何形状。所述地址还可以按某一距离间隔以提供更为可见的光i普响应。在两个或多个单个阵列地址之间的间隙例如可以从大约0.01至大约100毫米，在一些实施方案中可以从大约0.1至大约50毫米，和在一些实施方案中可以,人大约1至大约20毫米。所述阵列的总体形式可以采取任何实际需要的外形。参照图2A，显示本发明的一个实施方案，其中固相载体180呈擦拭巾的形式，其采用包含许多:t也址183的阵列181,每个地址包含着色剂。例如，一组第一种地址183a可以包含在白色念珠菌存在下进行颜色变化的着色剂(例如，盼红)并且一组第二种地址183b可以包含在金黄色葡萄球菌或大肠杆菌存在下进行颜色变化的着色剂(例如，雷查德染料)。当感染白色念珠菌的皮肤样品(例如，皮肤)接触擦拭巾180时，第一组的地址183a经历颜色变化，而第二组的地址183b基本上保持不变或只进行微弱的颜色变化(图2B)。当感染金黄色葡萄球菌或大肠杆菌的皮肤样品接触擦拭巾180时，第二组的地址183b发生颜色变化，而第一组的地址183a基本上保持不变或只发生微弱的颜色变化(图2C)。无论如何，着色剂的光谱响应可以提供有关念珠菌或其它微生物存在的信息。如果需要，试验着色剂(或着色剂阵列)的响应可以与以下方式形成的对照着色剂(或着色剂阵列)对比，所述方式相对于微生物应答与试验着色剂相同或相似。所述对比可以在视觉上或借助于仪器进行。相应于在某一浓度下的不同类型的微生物，同样可以采用多种对照着色剂。对比时，可以通过选择具有与试验着色剂的响应相同或基本相似的光谱响应的对照着色剂识另'J微生物，然后将选择的对照与特定的微生物或微生物种类相关联。作为本发明的结果，现已发现通过使用发生可检测的颜色变化的着色剂可以容易地检测念珠菌或其它微生物的存在。所述颜色变化是迅速的并且可以在相对短的时期内斥全测。例如，所述变4匕可以存在大约20分钟以内，在一些实施方案中存在大约10分钟以内，在一些实施方案中存在大约5分钟以内，在一些实施方案中存在大约3分钟以内，和在一些实24施方案中存在大约10秒至大约2分钟。以这种方式，着色剂可以提供"实际时间，，的存在或没有念珠菌或其它微生物的显示。这种"实际时间"显示可以通知使用者或护理人员向所感染区域施加治疗组合物(例如，抗真菌剂)和/或寻求医学专家的建议。相反，没有颜色变化可以提供给使用者或护理人员所述区域没有感染和足够干净的保证。参考以下实施例可以更好地理解本发明。实施例采用的材料除非另有说明，所有试剂和溶剂均从Sigma-AldrichChemicalCompanyInc.ofSt.Louis,Missouri获得并在没有进一步纯化的情况下使用。用于研究的微生物如下1.革兰氏阴性(存活的)-大肠杆菌(ATCC#8739)「￡.co/"-钩绿夜卓/g霧(ATCC#9027)awwgz"o犯」-克雷白氏肺炎斥干菌(ATCC#4352)p"ewmom"e」-奇异变形杆菌(ATCC#7002)(P.脂ra&7w)2.革兰氏阳性(存活的)-金黄色葡萄球菌(ATCC#6538)fS.-嗜酸乳杆菌(ATCC#11975)(X.a"t/o/7/n7z^」-表皮葡萄球菌(ATCC#12228)(印z&nrnfifa」-枯草杆菌(ATCC#19659)fBjw&,7w」-(ATCC#29212)fE./aecafe」3.酵母菌(存活的)表1:示例性的着色剂和它们的相应结构<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>着色剂结构隐色二曱苯苯胺FFCH3CH3^/N^>"jA^v^OH4,5-二羟基-1,3-苯二磺酸二钠盐一水合物HO)——\0/11FO-H20o二s二o2〇Na5-氰基-2-[3-(5-氰基-l,3-二乙基-1,3-二氩-2//-苯并咪唑-2-亚基)-1-丙烯基]-1-乙基_3-(4-磺酸丁基)-1//-苯并咪唑镥氢氧化物内盐-(CH3H3C,々CH3酸性绿25Oii、么丫oi、J}NaO-S^^^、CH;j红菲咯啉二磺酸二钠盐三水合物i。+z:气》z^_^\—/胭脂红酸HO、f^f7。乂OHOCH3OOH〇29<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>5,10,15,20-四(五氟苯基)口卜啉氯化铁(m)r^nn々r:^^"^""f、n{ffr实施例1测定各种着色剂在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌微生物存在下进行颜色变化的能力。测试的着色剂为雷查德染料、1-二十二烷基_4-(4-羟基苯乙烯基)溴化吡啶徵、3-乙基-2-(2-羟基-l-丙烯基)-氯化苯并噻唑锱、4-[(l-甲基-4(lH)-亚吡啶基)亚乙基]-2,5-环己二烯-l-S同水合物、N,N-二甲基靛苯胺、1,2,5,8-四羟基蒽醌、部花青540、艳丽华@蓝SE(羊毛铬蓝B)、酚红、尼罗蓝A、l-(4-羟基苯基)-2,4,6-三苯基吡啶鎩氢氧化物内盐水合物、亚曱胺-H单钠盐水合物、靛类胭脂红、亚甲基紫、艳丽华⑧蓝黑B、比布里希猩红-酸性品红溶液、亚甲基蓝、尼罗红、台盼蓝、番红O、结晶紫、甲基橙和铬天青S。除非另有说明，将所述着色剂溶于二曱基曱酰胺(DMF)。然后将着色剂溶液用移液管转移到15-厘米滤纸(可从VWR国际目录编号28306-153获得)上并让其干燥。将滤纸切成四等份以测试四个样品，即金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌和无菌水。将100毫升107CFU/mL的金黄色葡萄球菌用移液管转移到一个四分之一的滤纸上，将100毫升107CFU/mL的大肠杆菌用移液管转移到第二个四分之一的滤纸上，将100毫升106CFU/mL的白色念珠菌用移液管转移到第三个四分之一的滤纸，和将无菌水用移液管转移到最后一个四分之一的滤纸上。对各测试样品7见察并记录着色剂的颜色变化。在颜色变化之后立即记录颜色以防止样品干燥时颜色褪色(或强度损失)。表2呈现来自实验的观察。表2.对着色剂颜色变化的观察(第l组)着色剂初始颜色颜色变化/金黄色葡萄球菌颜色变化/大肠杆菌颜色变化/白色念珠菌颜色变化/无菌水雷查德染泮十蓝色无色无色无色没有变化1-二十二烷基-4-(4-羟基苯乙烯基)吡。定镜溴化物黄色非常淡的橙色淡橙色淡橙色非常淡的橙色3-乙基-2-(2-轻基-1-丙烯基)-苯并噻唑镜氯化物白/乳白色没有变化没有变化没有变化没有变化4-[(1-曱基-4(lH)-亚吡啶基)亚乙基]-2,5-环己二烯-l-酮水合物鲜黄色没有变化没有变化没有变化没有变化N,N-二曱基靛苯胺灰色淡粉色非常淡的粉色非常淡的粉色没有变化1,2,5，8-四羟基蒽醌桃色黄色淡紫色紫色没有变化部花青540粉红色浅紫色略带黄色的粉色较深的略带黄色的粉色微红的粉色33<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>*在水中溶解**在DMF和水中〉容解除了隐色结晶紫、隐色孔雀绿和隐色二曱苯苯胺FF之外，几乎立刻观察到颜色变化(1至2分钟)。实施例3测定各种着色剂在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌微生物存在下发生颜色变化的能力。所测试的着色剂是茜素氨羧络合剂、茜素红S、红紫素、茜素、大黄素、氨基-4-羟基蒽醌、核固红、氯酚红、雷马素亮蓝R、普施胺蓝HB、酚酞、四苯基卟p分、四-邻J黄酸和水合茚三酮。除非另有说明，将所述着色剂溶于二曱基曱酰胺(DMF)。按照实施例1中的描述制备VWR滤纸和着色剂。表4呈现来自卖验的观察。表4.着色剂颜色变化的观察(第3组)<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>几乎立刻观察到颜色变化(1至2分钟)实施例4证明利用实施例1-3的着色剂能够快速地检测各种格兰氏阳性和革二i^J'/J'I王^又3^T"。K14亍，JT"式升.匕有,CiH5"亍-^3分监B、^g丞监、西素氨羧络合剂、地衣红、四甲基-对苯二胺(TMPD)、尼罗红、羊毛铬蓝黑B、酚红、茜素红S、胭脂红酸、Fe(III)C3、天青石蓝、Kovac，s试剂、铬天青S、通用指示剂3-10、甲基橙、部花青540和氯化铁m卟啉。所测试的格兰氏阳性微生物是金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、表皮葡萄球菌、枯草杆菌和粪肠球菌，而所测试的革兰氏阴性微生物是大肠杆菌、铜绿假单胞菌、克雷白氏肺炎杆菌和奇异变形杆菌。以类似于实施例1的方式制备着色剂样品。除非另有说明，将所述着色剂溶于二曱基曱酰胺(DMF)。将每种着色剂溶液用移液管转移到两片分开的VWR滤纸上并让其干燥。将带有干燥着色剂的一片滤纸样品切成大致相等的五片以测试上述五种格兰氏阳性微生物。将另一片滤纸样品切成四等份以测试上述四种革兰氏阴性微生物。100微升107CFU/mL的各微生物样品用移液管转移到它们各自的滤纸样品部分上。表5呈现来自对革兰氏阳性微生物的观察，而表6呈现来自对革兰氏阴性微生物的观察。表5.革兰氏阳性微生物的颜色变化观察着色剂4刀i会l贞色颜色变化/枯草杆菌颜色变化/金黄色葡萄球菌颜色变化/表皮葡萄球菌颜色变化/粪肠球菌颜色变化/嗜酸乳杆菌羊毛铬蓝B深粉色紫粉色非常淡的紫粉色深粉色粉红色深粉红色四哇硝'基蓝黄白色没有变化没有变化没有变化没有变化没有变化茜素氨羧络合剂黄色棕红色浅棕红色浅棕红色浅棕红色棕黄色地衣红混浊的紫色浅紫色混浊的浅紫色混浊的深紫色混浊的深紫色混浊的深紫色四曱基-对苯二胺(TMPD)*明亮的淡紫色无色无色没有测试没有测试无色39<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>*在水中溶解除了甲基橙、尼罗红、四曱基-对苯二胺(TMPD)和部花青540之外，同样立刻观察到颜色变化(l至2分钟)。实施例5滤纸(可从VWRInternational获得)用铬天青、茜素氨羧络合剂、羊毛铬蓝B和酚红溶液(均在DMF中溶解)处理。将样品悬干以蒸发掉溶剂。使用胰酶解酪蛋白大豆肉汤培养基(TSB)以及在一些情况下使用无菌水以十倍稀释度稀释白色念珠菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的溶液。对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌浓度范围从1()SCFU/mL(储备液)降至101CFU/mL，对于白色念珠菌浓度范围从107CFU/mL(储备液)降至101CFU/mL。TSB和水用作对照溶液。将100jiL各溶液的等分试样施加在样品上。将颜色变化概括在表7-11中。表7:对白色念珠菌在TSB介质中的稀释物的响应染料#刀Jf会；f贞色106CFU/ml105CFU/ml104CFU/ml103CFU/ml102CFU/ml101CFU/mlTBS对照酚红鲜黄色橙色较深的橙色较深的橙色较深的橙色较深的橙色较深的橙色深橙色羊毛铬蓝B明亮的粉色蓝紫色较深的蓝紫色较深的蓝紫色较深的蓝紫色较深的蓝紫色较深的蓝紫色深蓝紫色茜素氨羧络合剂鲜黄色椋紫色较深的椋紫色较深的椋紫色较深的棕紫色较深的棕紫色较深的棕紫色深标紫色铬天青玫瑰色黄绿色较深的黄绿色较深的黄绿色较深的黄绿色较深的黄绿色较深的黄绿色黄绿色42表8:对金黄色葡萄球菌在TSB介质中的稀释物的响应<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>表10:对大肠杆菌在TSB介质中的稀释物的响应<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>因此，对微生物观察到的颜色变化不同于单独的介质的颜色变化，尽管对于稀释溶液的差别有些更难以捉摸。在不打算受理论限制的情况下，认为对于稀释溶液的更细微的差异是部分由于没有给予微生物适应介质的时间(实验是在稀释后不久进行的)。相反，包含微生物的储备液已经在介质中24小时了。实施例6根据以下配方制备包含酚红和羊毛铬蓝黑B的喷墨制剂:组分Wt.%乙二醇6.0甘油3.0PEG2006.01,3-丙二醇3.0Surfynol465非离子表面活性剂0.1着色剂+水81.9将所述制剂使用标准方法填入柱体。使用DisplayMakerXII/62系列的彩色跨度印刷机，用所述墨水印刷HUGGIESSupreme香味婴儿擦拭巾(基重为每平方米75克)。将印刷过的材料暴露于l(^CFU/mL的白色念珠菌，酚红产生从黄色到鲜橙色的颜色变化，而羊毛铬蓝黑B产生从紫色到深蓝色的颜色变化。暴露于l(^CFU/mL大肠杆菌时，喷墨印刷过的材料没有产生值得注意的颜色变化。实施例7制备在水中包含大约lwt。/。酚红的制剂。使用塑料滴管将所述制剂施加在HUGGIESSupreme⑧香味婴儿擦拭巾上。然后将擦拭巾暴露于各种量的白色念珠菌(107至103CFU/mL)中。对于各测试浓度可观察到从黄色到橙色的颜色变化。实施例8制备在水中包含大约lwty。氯酚红的制剂。使用塑料滴管将所述制剂施加在HUGGIESSupreme⑧香味婴儿擦拭巾上。然后将擦拭巾暴露于各种量的白色念珠菌(107至103CFU/mL)中。对于各测试浓度可观察到从黄色到亮粉色的颜色变化。虽然已经根据本发明的具体实施方案详细描述了本发明，但是应理解本领域技术人员在对上述内容理解后可以容易地设想这些实施方案的变更、改变和等同物。因此，本发明的范围应由所附的权利要求及其任何同等物来确定。权利要求1.一种用于检测与尿布疹有关的继发感染的系统，所述系统包括施加了着色剂的固相载体，所述着色剂在白色念珠菌存在下产生第一光谱响应，在金黄色葡萄球菌存在下产生第二光谱响应，和在大肠杆菌存在下产生第三光谱响应，其中第一光谱响应在视觉上与第二和第三光谱响应不同。2.权利要求l的系统，其中所述着色剂是pH值敏感的着色剂、络合金属的着色剂或其组合。3.权利要求2的系统，其中所述pH值敏感的着色剂在大约6.6的pH值下发生颜色变化。4.权利要求2的系统，其中所述pH值敏感的着色剂是酚红。5.上述任何一项权利要求的系统，其中第一光谱响应是以每毫升皮肤样品大约1x103或以上的菌落形成单位，并优选每毫升大约lxl06或以上的菌落形成单位的白色念珠菌浓度产生的。6.上述任何一项权利要求的系统，其中所述固相载体限定其中包含着色剂的^r测区域。7.上述任何一项权利要求的系统，其中所述固相载体具有包含许多以预定才莫式间隔开来的许多单个的地址，至少这些地址中的一个包含着色剂。8.上述任何一项权利要求的系统，其中第二光谱响应是基本上与在与金黄色葡萄球菌接触之前的着色剂颜色相同的颜色。9.上述任何一项权利要求的系统，其中第三光语响应是基本上与在与大肠杆菌接触之前的着色剂颜色相同的颜色。10.上述任何一项权利要求的系统，其中所述固相载体是擦拭巾。11.权利要求10的擦拭巾，其中所述擦拭巾包含非织造织物。12.权利要求ll的擦拭巾，其中所述非织造织物包括吸收性纤维、合成的热塑性纤维或其组合。13.权利要求10-12中任何一项的擦拭巾，其中所述擦拭巾包含湿的擦拭溶液。14.一种用于检测宿主皮肤上念珠菌的方法，所述方法包括用在念珠菌存在下产生视觉上可观察到的光谱响应的着色剂接触皮肤样品；冲全测所述光语响应；和将所检测的光谱响应与皮肤样品中念珠菌的存在相关联。15.权利要求14的方法，其中所述着色剂是pH值敏感的着色剂、络合金属的着色剂或其组合。16.权利要求15的方法，其中所述pH值敏感的着色剂在大约6.6的pH值下发生颜色变化。17.权利要求15的方法，其中所述pH值敏感的着色剂是酚红。18.权利要求14-17中^f壬何一项的方法，其中将所述光谱响应与念珠菌的存在相关联，所述念珠菌的存在浓度为每毫升大约1x103或以上的菌落形成单位并优选每毫升大约1x106或以上的菌落形成单位。19.权利要求14-18中任何一项的方法，其中将所述着色剂施加在固相载体上。20.—又利要求14-19中任何一项的方法，其中将所述^r测的光谱响应与对照着色剂对比。21.^又利要求14-20中任何一项的方法，其中所述光谱响应是在類L觉上检测的。22.4又利要求14-21中任何一项的方法，其中所述光谱响应在着色剂与皮肤样品接触后大约30分钟内产生，并优选在着色剂与皮肤样品接触后大约5分钟或更短的时间内产生。23.权利要求14-22中任何一项的方法，其中所述皮肤样品是在或接近通常被尿布覆盖的区域的宿主皮肤。24.权利要求23的方法，其中所述宿主是患有尿布渗的婴儿。全文摘要本发明提供用于快速检测宿主(如有尿布疹的婴儿)皮肤上念珠菌的方法和系统。所述方法包括用在念珠菌存在下显示某一光谱响应(例如，颜色变化)的着色剂接触皮肤样品。例如，所述着色剂可以是酚红或艳丽华蓝黑B。所述着色剂通常能够区分念珠菌(例如，白色念珠菌)和其它通常与尿布疹有关的微生物，如金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。因此，在将皮肤样品放入与着色剂接触时，可以简单地观察颜色的变化来确定所述感染是否由念珠菌引起。如果颜色发生一定程度的变化(例如，从黄色变为鲜红色)，则可确定试验样品包含念珠菌。同样地，如果颜色发生较少程度的变化(例如，从黄色变为淡橙黄色)或根本没变，则可确定皮肤样本包含其它微生物(例如，金黄色葡萄球菌或大肠杆菌)、不存在感染或所述感染只不过是由于其它原因引起的。无论如何，它将使是否需要治疗念珠菌变得容易明显。文档编号A61L15/16GK101534874SQ200780031765公开日2009年9月16日申请日期2007年7月18日优先权日2006年8月31日发明者A·M·龙,J·G·麦唐纳,J·利,S·M·马丁申请人:金伯利-克拉克环球有限公司