专利名称：：用于皮肤增白的含有天女木兰提取物作为活性成分的化妆品组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种含有天女木兰(7Wago/faw'e^/A7)提取物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物，
背景技术：
：人的皮肤或头发中的色素在保护皮肤或头发免受阳光(尤其是紫外线)的有害影响方面起作用。缺乏这种色素的人对阳光非常敏感，从而他们更可能会受到灼伤。此外，即使很年轻，也有很大的可能性患皮肤癌。已知的是，短波长紫外线(290-320nm)和致癌物质在皮肤上形成有害自由基，例如，氧自由基，并且这种氧自由基攻击皮肤细胞而使皮肤老化。黑色素的主要功能是消除这种有害的自由基，从而保护皮肤免受这种有害的自由基所造成的损伤。因此，具有大量黑色素的人群具有能够保护皮肤免受物理或化学有毒物质损伤的有效防御体系。促进黑色素合成的因素除了阳光(紫外线)之外，还包括雌激素和前列腺素。通过使酪氨酸转化为多巴(dopa)，然后通过酪氨酸酶的酶作用转化为多巴醌，然后进行复合氧化和縮合反应而合成黑色素。合成的黑色素转移到皮肤细胞中，然后，通过表皮剥离失去。这种黑色素合成过程是一种自然现象，在正常状态的人皮肤中不会过度合成。然而，当皮肤受到诸如紫外线、环境污染或应激等外部刺激时，黑色素会过度合成。当过度合成的黑色素残留在皮肤中而没有被排放到皮肤外部时，发生色素沉积。在上述外部刺激中，紫外线是刺激黑色素生物合成的最大来源并能够影响与黑色素合成相关的各种进程。也就是说，紫外线通过促进黑素细胞的活性、刺激黑色素生物合成的激素的分泌、黑色素的氧化或酪氨酸酶的活性而作为诱导黑色素过度合成的一个重要因素。这种黑色素合成机制的最大特点在于，黑色素合成机制中仅涉及到一种酶，酪氨酸酶。当酪氨酸酶活性受到抑制以防止黑色素合成时，可以预期到皮肤增白效果。在现有技术中，众所周知的是使用抗坏血酸作为增白物质(日本专利未审公开No.Hei4-9320)。然而，抗坏血酸的问题在于，其活性随时间推移下降，因为其在制剂中的相稳定性很差。为此，使用胶囊或脂质体来稳定抗坏血酸的各种方法最近己经被提出，但可靠的稳定化方法尚未提出。此外，众所周知的是使用氢醌作为另一种增白物质(日本专利未审公开No.Hei6-192062)。氢醌具有优异效果，但是其在化妆品中的用途受到限制，因为它是一种致癌物质。此外，众所周知的是使用曲酸作为另一种增白物质(日本专利未审公开No.Sho56-7710)。曲酸由于抑制酪氨酸酶的优异能力而显示出优异的增白效果，但它在制剂稳定性方面具有问题，最近有消息称它是致癌物质。此外，众所周知的是使用熊果苷作为另一种增白物质(日本专利未审公开No.Hei4-9315)。熊果苷可以从在高山地带生长的熊果提取，或可以通过合成获得。此外，已经证明它具有抑制酪氨酸酶的能力，象曲酸那样。然而，熊果苷的结构中糖与氢醌结合，它的问题在于，当应用在化妆品中时，糖和氢醌被皮肤酶分离，这样氢醌会诱导皮肤刺激。本说明书中参考和引用了各种专利和科学论文。引用的专利和科学论文的全部公开内容并入本文作为参考，使得可以更加明确地解释本发明所属
技术领域：
的一般知识和本发明的内容。
发明内容技术问题本发明人研究了天然植物组分的各种皮肤生理活性，以改善皮肤色素沉积，结果发现，在天然植物提取物中，天女木兰提取物具有抑制酪4氨酸酶活性和黑色素合成的优异效果，不会造成皮肤剌激，并具有非常优异的皮肤增白效果，从而完成了本发明。技术方案因此，本发明的一个目的是提供一种含有天女木兰提取物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。本发明的另一个目的是提供一种化妆方法，包括向人皮肤施用所述含有天女木兰提取物的化妆品组合物。从下面的详细说明和所附的权利要求可以更加清楚本发明的其他目的和优点。有益效果本发明提供一种含有天女木兰提取物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。与之前的增白组分相比，本发明的天女木兰提取物具有抑制酪氨酸酶活性和抑制黑素细胞的黑色素合成的优异效果。此外，本发明的含有天女木兰提取物作为活性成分的化妆品组合物具有非常优异的皮肤增白效果。具体实施例方式本发明提供一种含有天女木兰提取物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。天女木兰，其是本发明的化妆品组合物的活性成分，属于木兰科的一种落叶小乔木，从天女木兰的花获得天女木兰提取物。天女木兰高约7米，其叶子为互生的长椭圆形和玻璃状。其白色的大花在5月和6月向下开放，其果实在9月成熟。它是一种观赏植物，生长在高山的峡谷中，分布在韩国除了咸镜北道(Hamgyeongbuk-do)、日本和中国的各个地区。用于本发明的天女木兰提取物可以从天女木兰树的花、叶、树枝和根获得，优选从树的花或树枝获得，更优选从花获得。本发明的天女木兰提取物可以根据本领域中已知的任何常规方法使用常规溶剂在常规温度和压力条件下制备。作为本发明化妆品组合物的活性成分的天女木兰提取物优选通过用提取溶剂提取而获得，提取溶剂选自水、具有1-4个碳原子的无水或含水低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯和1,3-丁二醇，更优选乙醇、丁醇或甲醇，再更优选乙醇。乙醇优选是70%的乙醇。提取溶剂的量优选是天女木兰干重的l-10倍，更优选5-8倍，最优选6倍。本发明的天女木兰提取物通过包括以下步骤的方法制备(a)将干的天女木兰加到提取溶剂中，提取溶剂选自水、具有l-4个碳原子的无水或含水低级醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯和1,3-丁二醇，并且其量是天女木兰干重的1-10倍；(b)通过在40-100°C下加热3-20小时或在4-40°C下加热1-15天，提取步骤(a)的加入有溶剂的天女木兰；(c)过滤步骤(b)的提取物，通过在5-10。C下放置7-10天老化滤液，然后另外过滤老化的滤液；和(d)在旋转式真空蒸发仪中干燥步骤(c)的滤液。当1,3-丁二醇用作提取溶剂时，在进行提取步骤(b)之后，干重损失被调节到1%(w/w)，因为难于使用旋转式真空蒸发仪干燥滤液。此外，本发明的天女木兰提取物的范围不仅包括通过上述提取方法获得的提取物，而且还包括通过常规纯化工艺获得的提取物。应该理解，本发明的天女木兰提取物的范围还包括通过各种额外的纯化方法获得的馏分，例如，使用具有规定分子量截留的超滤膜的分离，利用各种色谱系统(根据大小、电荷、疏水性或亲合性制造的用于分离)的分离。本发明的天女木兰提取物可以通过额外的工艺以粉末形式制备，如真空蒸馏、冷冻干燥或喷雾干燥。本发明的天女木兰提取物可以通过局部涂布或喷洒在皮肤上而表现出其效果。因此，根据本发明的一个优选实施方案，本发明的组合物可以化妆品组合物的形式制备，包括霜剂、洗剂和皮肤洗剂。6根据本发明的优选实施方案，按皮肤增白化妆品组合物的总重计，本发明的天女木兰提取物的含量为0.00001-30.0wt%，优选0.0001-20.0wt%。如果天女木兰提取物的含量小于0.00001wt%，那么难于显示出其效果，如果含量大于30wt%，有很高的可能性诱导皮肤刺激并且也可能对制剂的稳定性产生很大的不良影响。在本发明的优选实施方案中，制备含有2.0wt。/。的天女木兰提取物的化妆品组合物，并直接施用在皮肤上，结果，观察到其具有优异的皮肤增白效果。此外，除了作为活性成分的天女木兰提取物之外，本发明的皮肤增白化妆品组合物还含有化妆品组合物常规使用的组分(例如，常规的添加剂，如抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、色素和香料)和载体组分。本发明的化妆品组合物可以本领域中已知的任何常规制剂形式制备。例如，它可以配制成溶液、悬浮液、乳液、糊剂、凝胶、霜剂、洗剂、粉剂、皂剂、含有表面活性剂的清洁剂、油、粉底霜、乳液底霜、蜡剂底霜和喷雾剂，但本发明的范围不限于此。更具体地说，它可以皮肤洗剂、润肤乳、营养霜、按摩霜、香精、眼霜、清洁霜、清洁泡沫、清洁水、面膜、喷雾剂或粉剂的形式制备。如果本发明的制剂是糊剂、霜剂或凝胶，其可以含有以下物质作为载体组分动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石粉或氧化锌。如果本发明的制剂是粉剂或喷雾剂，其可以含有以下物质作为载体组分乳糖、滑石粉、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末。特别是，如果其是喷雾剂，它可以额外地含有推进剂，如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚。如果本发明的制剂是溶液或乳液，其可以含有以下物质作为载体组分溶剂、增溶剂或乳化剂，例如，水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油类、甘油脂肪酸酯、聚乙二醇或失水山梨糖醇脂肪酸酯。如果本发明的制剂是悬浮液，其可以含有以下物质作为载体组分液体稀释剂(如水、乙醇或丙二醇)、悬浮剂(如乙氧基化的异硬脂醇、聚7氧乙烯山梨糖醇酯、聚氧乙烯失水山梨糖醇酯)、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂或黄芪胶。如果本发明的制剂是含有表面活性剂的清洁剂，其可以含有以下物质作为载体组分脂肪醇硫酸盐、脂肪醇醚硫酸盐、磺化琥珀酸单酯、羟乙磺酸盐、咪唑鑰衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、垸基酰胺基甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化的甘油脂肪酸酯。在另一方面，本发明提供一种化妆方法，包括向人皮肤施用本发明的含有天女木兰提取物的化妆品组合物。本发明的化妆方法包括所有包括向人皮肤施用本发明的化妆品组合物的化妆方法。§卩，本领域中已知的所有包括向皮肤施用化妆品组合物的方法均包括在本发明的化妆方法内。本发明的化妆品组合物可以单独使用或与其他化妆品组合物组合使用。此外，可以根据任何常规方法使用本发明的具有优异皮肤保护作用的化妆品组合物，并且使用次数可以随使用者的皮肤状况或使用者的嗜好变化。如果本发明的化妆品组合物是皂剂、含有表面活性剂的清洁制剂或不含有表面活性剂的清洁制剂，则可以在施用到皮肤之后抹去、除去或用水洗去。所述皂剂的具体例子包括但不限于液体皂剂、粉末皂剂、固体皂剂和油状皂剂，所述含有表面活性剂的清洁制剂的例子包括但不限于清洁泡沫、清洁水、清洁巾和清洁面膜，所述不含有表面活性剂的清洁制剂的例子包括但不限于清洁霜、清洁水和清洁凝胶。进行本发明的化妆方法，包括向人皮肤施用本发明的含有天女木兰提取物的化妆品组合物，可以获得优异的皮肤增白效果。下面，结合实施例进一步详细说明本发明。然而，应该理解的是，这些实施例仅是说明性的，本发明的范围不限于此。制备例h天女木兰提取物的制备I将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L水中，通过在配有冷却冷凝器的提取器中于70-90°C下加热5小时进行提取。然后，通过300-目过滤布过滤提取物，通过在5-10。C下放置7-10天老化，然后通过WhatmanNo.5滤纸过滤。将滤液在旋转式真空蒸发仪中于65°C下干燥，从而获得干重10.8g。制备例2:天女木兰提取物的制备II将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L水中，在15-35°C下提取5天，通过300-目过滤布过滤，并通过WhatmanNo.5滤纸再次过滤。然后，在旋转式真空蒸发仪中将滤液浓縮至一半。然后，将0.6L100%乙醇加到浓縮物中，通过在5-10。C下放置7-10天老化，然后通过WhatmanNo.5滤纸过滤。将滤液在旋转式真空蒸发仪中于65°C下干燥，从而获得干重12.5g。制备例3:天女木兰提取物的制备III将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L水中，在4-40。C下提取5天，通过300-目过滤布过滤，通过在5-10。C下放置7-10天老化，然后通过WhatmanNo.5滤纸过滤。将滤液在旋转式真空蒸发仪中干燥，从而获得干重10.6g。制备例4-21:天女木兰提取物的制备IV将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L下表l所示的各提取溶剂中，并按与制备例3相同的方式提取。提取结果列于表l。表1制备例提取溶剂最终提取物的干重(单位g)制备例410%乙醇12.9制备例520%乙醇13.3制备例630%乙醇14.2制备例740%乙醇13.5制备例850%乙醇13.6制备例960%乙醇14.7制备例1070%乙醇15.89<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>制备例22:天女木兰提取物的制备V将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L1,3-丁二醇中，提取48小时，通过300-目过滤布过滤，通过在5-10°C下放置7-10天老化，然后通过WhatmanNo.5滤纸过滤。提取物经历干重损失，从而获得最终浓度l%(w/v)。制备例23:天女木兰提取物的制备VI将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L10%乙醇中，通过在配有冷却冷凝器的提取器中加热5小时进行提取。然后，通过300-目过滤布过滤提取物，通过在5-10。C下放置7-10天老化，然后通过WhatmanNo.5滤纸过滤。将提取物在旋转式真空蒸发仪中于65°C下干燥，从而获得干重13.8g。制备例24:天女木兰提取物的制备VII将用纯净水清洗并干燥的200g天女木兰的花加到1.2L下表2所示的各提取溶剂中，并按与制备例23相同的方式提取。提取结果列于表2。表2制备例提取溶剂最终提取物的干重(单位g)制备例2420%乙醇13.8制备例2530%乙醇13.6制备例2640%乙醇14.9制备例2750%乙醇13.6制备例2860%乙醇14.510<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>定3^伤l11子*+乂坦甘"^n6^而夂^"鹏硫、V^'l^灿法ll作田将磷酸钠缓冲液(pH6.8)中的40pl1.5mmo1/1酪氨酸(Sigma,USA)用作底物，将制备例1-32中制得的各种天女木兰提取物在0.05M磷酸钠缓冲液(pH6.8)中稀释，从而制得样品溶液。将240pl的各样品溶液加到40pl酪氨酸中，将20pl酪氨酸酶(1500U/ml，Sigma)加到溶液中。然后，使混合物溶液在37。C下反应15分钟，然后在490nm下测量吸光度。这里，没有加入天女木兰提取物的溶液用作对照组。根据以下公式1计算酪氨酸酶活性的抑制率，计算结果列于下表3中酪氨酸酶活性抑制率(％)={1-比较组的吸光度(O.D.490)/对照组的吸光度(O.D.490"x100表3<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>从上表3的结果可以看到，通过各种提取方法获得的天女木兰提取物样品显示出酪氨酸酶活性抑制作用。这表明本发明的含有天女木兰提取物的组合物显示出抑制酪氨酸酶活性的优异效果。实验例2:天女木兰提取物的黑色素合成抑制作用(黑色素分析)将B-16细胞(小鼠黑素瘤细胞，KoreaCellLineBank)接种到12孔板中，密度为1"04细胞/孔，然后培养1天。用不同浓度的天女木兰提取物处理各孔，并培养3-4天，离心每个孔中的培养基。用500^1INNaOH的二甲亚砜(DMSO)溶液溶解分离的细胞，并在90。C水浴中加热IO分钟。再次离心溶解的细胞，测量上清液在570nm下的吸光度。作为对照组，使用未经天女木兰提取物处理的细胞。根据以下公式2计算黑色素合成的抑制率，计算结果列于下表4中黑色素合成抑制率(％)={1-比较组的吸光度(O.D.490)/对照组的吸光度(O.D.490"x100表4测试物质黑色素合成抑制率(％)测试物质黑色素合成抑制率(％)制备例166.8制备例1763.6制备例265.7制备例1865.2制备例365.3制备例1968.3制备例464.3制备例2067.5制备例566.7制备例2165.3制备例667.3制备例2265.3制备例768.6制备例2366.3制备例866.7制备例2465.5制备例965.3制备例2563.3制备例1066.3制备例2665.2制备例1163.2制备例2764.2制备例1265.3制备例2868.3制备例1363.4制备例2968.5制备例1465,3制备例3068.7制备例1568.5制备例3169.8制备例1663.2制备例3267.312从上表4的结果可以看到，已经证实天女木兰提取物对于抑制黑素瘤细胞的黑色素合成具有优异效果。此外，在每个测试中，没有观察到细胞毒性。下面，详细说明本发明的含有天女木兰提取物作为活性成分的化妆品组合物的制剂例，但本发明的化妆品组合物不限于制剂例。此外，以下制剂例中使用的天女木兰提取物是通过在30%1,3-丁二醇中溶解制备例10的物质至浓度P/。(w/v)而得到的物质。制剂例1:皮肤洗剂在含有天女木兰提取物的化妆品组合物中，皮肤洗剂制剂示于下表5中。表5成分含量(wtW)天女木兰提取物2,0甘油5.0u-丁二醇3.0PEG15001.0尿囊素0.1DL-泛醇0.3EDTA-2Na0.02二苯甲酮-90,04透明质酸钠5.0乙醇10,0Octyldodeses-160.2聚山梨醇酯200.2防腐剂、香料和颜料适量蒸馏水余量总量100制剂例2:收敛洗剂在含有天女木兰提取物的化妆品组合物中，收敛洗剂制剂示于下表6中。表6成分含量(wt。/。)天女木兰提取物2.0甘油2.0131,3-丁二醇2.0<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>中。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>在含有天女木兰提取物的化妆品组合物中，营养霜制剂示于下表8<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>制剂例5:按摩霜在含有天女木兰提取物的化妆品组合物中，按摩霜制剂示于下表9中。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>制剂例6:香精在含有天女木兰提取物的化妆品组合物中，香精制剂示于下表10中。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>防腐剂、香料和颜料适量蒸馏水余量总^！100实验例4:测试含有天女木兰提取物的化妆品组合物的增白效果对19_40年龄的黑皮肤的韩国妇女进行关于本发明的含有天女木兰提取物的化妆品组合物的增白效果的测试。作为测量部位，对受试者胳膊上的3个部位作标记，每个部位的面积为1cm2。两个部位分别施用实施例1的含有天女木兰提取物并根据制剂例4的方法制备的化妆品组合物和比较例1的不含有天女木兰提取物的化妆品组合物，另一个部位用作比较用的对照组。每种化妆品组合物以2周的时间间隔连续施用8周，在8周后，使用MinoltaCR300测量皮肤颜色(L值)。然后，根据公式3计算皮肤颜色的变化(AL)，计算结果列于下表12中。表12实施例1比较例1AL值1.600.50从显示出8周后皮肤颜色变化(AL)的表12可以看到，实施例1的含有天女木兰提取物的化妆品制剂显示出高的增白效果。这表明本发明的含有天女木兰提取物的化妆品组合物具有非常优异的增白效果。权利要求1.一种皮肤增白化妆品组合物，其含有天女木兰提取物作为活性成分。2.如权利要求l所述的皮肤增白化妆品组合物，其中，按所述化妆品组合物的总重计，所述天女木兰提取物的含量为0.00001-30.0wt%。3.如权利要求l所述的皮肤增白化妆品组合物，其中，所述天女木兰提取物通过用选自水、具有l-4个碳原子的无水或含水低级醇、丙酮、乙酸乙酯和乙酸丁酯的提取溶剂提取而获得。4.如权利要求l所述的皮肤增白化妆品组合物，其中，所述化妆品组合物是选自溶液、悬浮液、乳液、糊剂、凝胶、霜剂、洗剂、粉剂、皂剂、含有表面活性剂的清洁剂、油、粉底霜、乳液底霜、蜡剂底霜和喷雾剂的制剂形式。5.—种化妆方法，包括向人皮肤施用权利要求14中任一项所述的化妆品组合物。全文摘要本发明公开一种含有天女木兰提取物作为活性成分的皮肤增白化妆品组合物。天女木兰提取物对于抑制酪氨酸酶活性和黑色素合成具有优异效果，并且含有天女木兰提取物作为活性成分的化妆品组合物具有优异的皮肤增白效果。文档编号A61K8/96GK101686929SQ200780053172公开日2010年3月31日申请日期2007年11月30日优先权日2007年11月30日发明者李康泰,李建国,李承芝,李松二,李正鲁申请人:高丽雅娜化妆品股份有限公司