专利名称：一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物及抗肿瘤应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物及抗肿瘤应用，其属于精细化工领域。
技术背景癌症严重地威胁着人类的健康与生命安全，开发高效、低毒的抗肿瘤药物是医学化学领 域里十分活跃的研究方向。萘酰亚胺类化合物是一类有很好抗癌活性的化合物，其中氨萘非 特[amonafide (N-( P — 二甲基胺基乙基)_ 3—胺基_ 1 ， 8 —萘酰亚胺)]和米托萘胺 [mitonafide (N-(e—二甲基胺基乙基)一3_硝基_1， 8 —萘酰亚胺)]己经进入二期临床试 验 (Brana M. F. ， Santos A. ， Roldan C. M. , et al. Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther., 1981， 16, 207)。这类化合物能够嵌插入DNA的碱基对之间，抑制DNA和RNA的合成，并能够 抑制拓扑异构酶n ，从而达到抑制肿瘤的目的。但是，在临床应用中发现米托萘胺(mitonafide)具有严重的中枢神经毒性；氨萘非特 (amonafide)在体内N-乙酰基转移酶作用下形成N-乙酰氨萘非特(amonafide)，和其他多 数药物不同，氨萘非特(amonafide)在快代谢型的人体中容易造成更大的毒副作用，而这种 因为个人遗传差异造成的毒副作用不可预知。因此，开发新的具有抗肿瘤活性，并且能够减 少上述副作用的萘酰亚胺化合物是非常必要的。 发明内容本发明的目的是制备新的、结构多样的萘酰亚胺化合物，使其具有治疗肿瘤用途，并且 这些化合物与已有的萘酰亚胺抗癌先导化合物氨萘非特(amonafide)相比具有更好的疗效和 更少的毒副作用。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是、 一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物具有 以下的结构通式(1):<formula>formula see original document page 3</formula>(l)a、 (1)式中K为C, C6的烷基或由(2)式所示的取代基团 <formula>formula see original document page 3</formula>(2)式(2)中n = 1 6， R4、 Rs选自H、 C, C6烷基中的一种或吡咯环； b、 (1)式中，当R^H时，R:,选自以下取代基团或当R:pH时，R2也选自以下取代基团:<formula>formula see original document page 4</formula>
含d C6烷基、 {6烷基、卤素、-NHRe其中R6为d Ce的直链或支链烷基， Me<formula>formula see original document page 4</formula>卤素、氨基、硝基的取代苯基，噻吩，吡咯，苯并呋喃，吡啶以及含有C, 氨基、硝基取代的这些杂环。一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物的抗肿瘤应用方法是所述化合物对体外抑制肿 瘤细胞生长活性采用四氮唑盐还原法对HeLa人宫颈癌细胞株、P388D1小鼠淋巴样瘤细胞株 进行试验，方法是按不同肿瘤生长速度，将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞接种于96孔 微量培养板内，培养24小时后加入药液10uL/孔，对每个细胞株每个浓度均设三个复孔，另 设无细胞凋零孔，在药物有颜色时要作相应药物浓度无细胞凋零孔，肿瘤细胞在37°C、 5%C02 条件下培养24小时后，力n MTT (Sigma)液5mg/mL用生理盐水配置20uL/孔，继续培养4 小时后，加入三联液(10%SDS_5%异丁醇-0.01 mol/LHCl) 50nL/孔，于二氧化碳培养箱中 过夜，然后用酶标仪测OD570值；按下列公式计算被测药物对肿瘤细胞的生长抑制率 肿瘤抑制率=(对照组OD值-治疗组OD值)/对照组0D值X100呢。 合成路线R2含取代基团，同时Ri为H，目标化合物的合成路线1 2 4a: R = NH(CH2)2N(CH3)24e: R = HN O4a-4m4i: R4b: R = NH(CH2)3N(CH3)24f: R = HN S4j: R4c:R= NH(CH2)3CH4g: R = HN4k: R :—CH34d: R =、S、NH24h: R = HnT^N-41: R :4m: R =〈-N02反应试剂和条件a. Br2，浓硝酸，70 °C，室温过夜；b. N, N-二甲基乙二胺，乙醇，回 流，2小时；c. CuI/脯胺酸，各种胺，碳酸铯，二甲基砜(DMS0)， 110°C， 8-12小时；d.四三苯基磷钯[Pd(PPh3)4]各种硼酸，碳酸钾，甲苯，回流，28小时。5-位取代的萘酰亚胺化合物以工业品萘酐为原料，通过溴化、氨化和乌尔曼(Ullmami)或 苏驻奇(Suzuki)偶联反应制得。由于羰基的强吸电子效应，使得5-位电荷堆积，用传统的 合成方法难以发生亲核取代反应，利用CuI/氨基酸催化的改进乌尔曼(Ullmann)反应和苏驻 奇(Suzuki)偶联反应，合成多种5-位取代的萘酰亚胺化合物。Rz为H，同时R3含有取代基团，目标化合物的合成路线7a: R = NH(CH2)2N(CH3)2 7b: R = NH(CH2)3N(CH3)2 7c: R = NH(CH2)3CH3 7f: R = HN S7d: R =S'7g: R = HN7e: R = HlsT^07h: R = HnT^N-反应试剂和条件a. N，N-一甲基乙二胺，乙醇，冋流，2小时；b.各种胺，碳酸钾，乙二醇单甲醚， 加热回流，8-12小时.6-位取代的萘酰亚胺化合物以4-溴-1， 8-萘酐为原料，通过氨化、亲核取代反应(包括 上述的乌尔曼偶联以及苏驻奇偶联反应)得到目标产物。 在实验室通过MTT测试方法确定上述化合物对多种不同组织来源的肿瘤细胞如人宫颈癌、小 鼠淋巴样瘤等肿瘤细胞的正常生长具有抑制作用，其中某些化合物的细胞毒性在同样实验 条件下强于先导化合物氨萘非特(amonafide)。 本发明的有益效果所述的化合物与氨萘非特(amonafide)相比，有些化合物例如4a， 4b， 4h，7a，7b，7h显示出更强的细胞毒性。并且所述的化合物呈现结构多样性，其中不具有酰化 位点的化合物可以完全避免类似氨萘非特(amonafide)的毒副作用；而具有酰化位点的化合 物可以通过个性化给药避免毒副作用。
具体实施方式
实施例13-溴-l， 8-萘酐(2)的制备液溴(8. 2g， 51.3隱o1)在25 "C时滴加到1， 8-萘酐(10g, 50. 5 mmol)和70%硝酸(200 mL)的混合溶液中。混合物在70 。C下搅拌2小时后，冷却、过滤、水洗、干燥得到固体目标化合物。实施例25-溴_[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(3)的制备3-溴-l， 8-萘酐(2) (277 mg， 1腿ol)和N，N-二甲基乙二胺 (1.2誦ol)的混合物 在乙醇(20 mL)中加热回流2小时后，除去溶剂，得到目标产物。收率92%，浅棕色固体，mp 77.2-78.6 "C; 'H丽R (400 MHz CDC1J (ppm) 8.65 (s， 1H) 8. 59 (dd， 1H， /= 1. 0 and 7. 2 Hz) 8. 35 (s' 1H) 8. 11 (dd, 1H, /= 0. 7 and 8. 3 Hz) 7. 77 (t, 1H，7.8 Hz) 4.34 (t， 2H， /= 6.9 Hz) 2.70 (t， 2H, / = 6.9 Hz) 2.39 (s, 6H)实施例35-(二甲胺基-乙胺)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3(2氢)-二酮(4a) 的制备化合物3 (174mg， 0.5mmo1)， Cul (9. 6 mg， 0. 05 mmol)、脯胺酸(11.5mg， 0. 1 mmol)、 Cs2C03 (247 . 5 mg, 0. 6画l)和N， N-二甲基乙二胺(0. 75讓ol)的混合物，在DMSO (2 mL) 中，在11(KC及氮气保护下，搅拌反应8小时。粗产物以二氯甲烷甲醇为展开剂，柱层析 得到纯品目标化合物。收率52%,橙色固体，mp 97.2-98.6 。C; 'H丽R (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.265 (dd， 1H, /= 0.8 and 7.2 Hz) 8.02 (s， 1H) 7.93 (d， 1H， /= 7. 6 Hz) 7.58 (t， 1H， /= 7.2 Hz) 7.11 (s， 1H) 4.94 (t, 1H， /=4.4Hz) 4.32 (t， 2H, /=7. 2Hz) 3.32—3.28 (m， 2H) 2.67—2.64 (m， 4H) 2.37(s， 6H) 2.30 (s, 6H) ; l3C NMR (100 MHz CDC1:》^ (ppm) 164.6， 164.4， 147.1， 133.8, 131.6' 127.1， 126.6, 123.3, 122.4， 122.0， 121.9, 110.0, 57.4, 57. 0, 45. 7, 45. 1, 41. 0， 38. 1; IR (KBr cm—') 3377， 2955' 1684 1654; HRMS (ESI) m/z (M+H) + calcd for C2。H27N402 3 5 5 . 2 1 34, found 355.2169。实施例45- (二甲胺基-丙胺)_2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-1， 3 (2氢)-二酮(4b) 的制备合成方法同实施例3，反应时间8小时。收率50%,橙色固体，mp115. 8-116. 3°C; 'H丽R (400 MHz CDC13) ^ (ppm) 8.25 (d, 1H, /= 0.8 and 7.2 Hz) 7.97 (s, 1H, 4—H) 7.92(d， 1H， / = 8. 4 Hz) 7.57 (t, 1H， /= 7.2 Hz) 7.08 (s, 1H) 5.53 (s， 1H) 4.34—4.30 (m, 2H) 3.36 (s， 2H) 2.67—2.64 (m, 2H) 2. 52-2. 49 (m， 2H) 2. 37 (s, 6H) 2. 31 (s， 6H) 1. 90-1. 87 (m' 2H) ; 13C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.7, 164.5， 147.2' 133.9, 131.6, 127.0, 126.4， 123.2, 122.4, 122.2, 121.9, 109.3, 58.6， 57.0， 45.7, 43,5, 38.1， 25.9; IR (KBr cnf') 3370， 1691， 1654; HRMS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C21H29N402 369.2291， found 369.2294。实施例55-丁胺-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-1， 3 (2氢)-二酮(4c)的制备 合成方法同实施例3，反应时间9小时。收率34%，橙色固体，mpl26-127。C; 'H匿(400 MHz CDC1:,) (卯m) 8.25 (d, 1H， / =7.2 Hz) 7.95—7.91 (m, 2H) 7.58 (t, 1H, / = 7. 2 Hz) 7.07 (s， 1H) 4.33 (t, 2H, / = 6. 8 Hz) 4. 19 (s, 1H) 3. 29-3. 24 (m， 2H) 2. 68 (t, 2H, /= 7. 2 Hz) 2. 39 (s， 6H) 1. 74-1. 67 (m, 2H) 1.55-1.45 (m， 2H) 1.01 (t， 3H, /= 7.6 Hz); l:iC NMR (100 MHz CDC13) 5 (卯m) 164.6， 164.4, 146.9， 133.8， 131.7, 127.1, 126.6, 123.2, 122.3， 122.0， 121.8, 109.6， 56.9， 45.6, 43.6， 38.0， 31.3， 20.3, 13.9; IR (KBr cm—') 3237' 2948， 1704, 1648; H脂S (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H26N302 3 40 . 2 0 2 5， found 340.2037。实施例65-[(噻吩-2-甲基)-胺基]_2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(4d)的制备合成方法同实施例3，反应时间12小时。收率31%,橙色固体，mp 144. 7-146. 1 °C; NMR (400 MHz CDC13)《(ppm) 8.29 (d, 1H， /=7.2Hz) 8.04 (s， 1H) 7.94 (d, 1H， ，/=8. 0Hz) 7.60 (t， 1H, /= 8. 0 Hz) 7.22-7.18 (m, 1H) 7.18 (s' 1H) 7.09 (s， 1H) 7.02—7.00 (m， 1H) 4.70 (s' 3H) 4.38 (t， 2H, /=6.8 Hz) 2. 84 (t， 2H， /= 6. 0 Hz) 2. 50 (s， 6H) ; "C丽R (400 MHz CDC1..0 J (ppm) 164. 6, 164. 3， 146.0， 141.5, 133.6， 132.1， 127.2, 127.1, 126.8, 125.5， 125.0' 124.9, 123.3, 122.4, 122.3， 121.9， 110.7， 56.5， 45.1， 43.2, 37.3, 29.7; IR (KBr cm—') 3377， 2918, 1695， 1651; H脂S (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C21H22NAS 380.1433, found 380.1451。实施例75-吗啉-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(4e)的制备 合成方法同实施例3，反应时间10小时。收率30%,橙色固体，mp 147. 8-149. 6 °C; 'H NMR (400 MHz CDC13)《(卯m) 8.38-8.35 (m, 2H) 8.02 (d, 1H, /=8. 0 Hz) 7.65 (t， 1H， ，/=8.0Hz) 7.43 (s' 1H) 4.37 (t， 2H, /= 6.8 Hz) 3.94 (t， 4H， /= 4. 8 Hz) 3.38 (t， 4H， ./= 4.8 Hz) 2.78 (t, 2H， /= 6.8 Hz) 2.46 (s, 6H);13CNMR (100 MHz CDC 1》^ (ppm) 164.4， 149.8， 134.0' 133.2， 132.6, 131.3, 128.2， 127.3, 126.9, 123.3, 123.1， 122.8， 122.3' 115.1, 66.7, 56.7, 49.0， 45.3, 37.6; IR (KBr cm—') 3414, 2955, 1691, 1651， 1261; HRMS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H24N303 354.1818， found 354. 1829。实施例85-硫吗啉_2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(4f)的制备合成方法同实施例3，反应时间11小时。收率27%,橙色固体，mp167. 5-168. 8。C; 'H NMR (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.35 (d， 1H, /=7.6Hz) 8.31 (s, 1H) 8.00 (d, 1H, ./=8.4Hz) 7.64 (t, 1H， /=7.6Hz) 7.40 (s， 1H) 4.37 (t， 2H, /= 6.8 Hz) 3.78 (t, 4H，5.2 Hz) 2.81 (t， 4H, / = 5. 2 Hz) 2.73 (t， 2H, /=6.8Hz) 2.43 (s' 6H) ; 't NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.4， 149.3， 133.4，132.3, 128.0, 127.3, 126.9， 123.8， 123.6, 122.8， 122.2, 115.9， 57.0, 51.6, 45.7, 38.2, 26. 5; IR (KBr cm—') 2948， 1691， 1654;服MS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H24N302S 370. 2349， found 370.2358。实施例95-哌啶-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-1， 3 (2氢)-二酮(4g )的制备 合成方法同实施例3，反应时间11小时。收率25%,橙色固体，mp 130. 3-131. 6。C; 'H丽R (400 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 8. 38(s, 1H) 8.32(d, 1H, /=7.2 Hz) 7.98 (d， 1H， ./=8.0Hz) 7.61 (t， 1H， /=8.0 Hz) 7.41 (s, 1H) 4.34 (t， 2H， /= 7.6 Hz) 3.39 (t， 4H， /= 5.6 Hz) 2.68 (t， 2H， /= 7. 2 Hz) 2.38 (s, 6H) 1.79-1.76 (m， 4H) 1.70-1.67 (m, 2H) ; 1:iC NMR (100 MHz CDCl..,) 5 (ppm) 164.6，150.4, 133.5' 132.3, 131.3， 127.6， 127.0， 123.8, 123.1, 122.6' 122.3' 115.1, 56.9, 50.1， 45.6， 38.0' 25.5， 24.2; IR (KBr cm—') 2926， 1695' 1654; 冊MS (ESI) m/z (M+H) + calcd for C21H26N302 3 5 2 . 20 2 5， found 352. 2030。实施例105-(4，-甲基-哌嗪)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-l， 3(2氢)-二酮(4h) 的制备合成方法同实施例3，反应时间12小时。收率22%,橙色固体，mp 121. 2-122. 8 °C; 'H NMR (400 MHz CDC13) ^ (ppm) 8.38 (s, 1H) 8.35 (d, IH， ，/=6.8Hz) 8.01 (d， 1H， /=8.0 Hz) 7.64 (t' 1H， /=8.0 Hz) 7.43 (s， 1H) 4.34 (t， 2H' 6.8 Hz) 3.44 (t， 4H， /= 4. 8 Hz) 2.68-2.64 (m， 6H) 2.40 (s， 3H) 2.37 (s, 6H);"C剛R (400 MHz CDC13) 5 (卯m) 164.5， 149.7， 133.3, 132.4, 127.9， 127.2, 123.2， 122.3, 115.1, 57.0' 54.8, 48.8, 46.1， 45.7, 38.1; IR (KBr cm—') 3414， 1688' 1647; H脂S (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2'H27N402 3 67 . 2 1 34, found 367.2142。实施例115-噻吩-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(4i )的制备化合物3 (174 mg， 0. 5國o1)，噻吩硼酸(96 mg， 0. 75mmol)， Pd(PPh3)4 (25mg， 0.02 腿ol)和K2C03 (103 . 5 mg， 0.75誦ol)的混合物，在甲苯(3 mL)中，氮气保护下加热回流 28小时。粗产物利用二氯甲垸和甲醇为洗脱剂，通过柱层析分离纯化制得纯目标产物。收率55%，草绿色固体，mp 110.5-112, 2°C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) ^ (ppm) 8.87 (s， 1H) 8.55 (dd， 1H， / = 0. 8 and 7. 2 Hz) 8.36 (s, 1H) 8.21 (d， 1H， /=7.6Hz) 7.76 (t，1H, / = 7. 6 Hz) 7. 58 (dd' 1H， / = 0. 8 and '/ = 3.6 Hz)' 7. 43 (dd, 1H' / = 0. 8 and / =4.8 Hz) 7.20—7.18 (m, 1H) 4.40 (t， 2H， /= 6.8 Hz) 2.78 (t， 2H, / = 6. 8 Hz) 2.45 (s， 6H); 13C画R (100 MHz CDC13)《(卯m) 164.1, 142.3, 140.6' 136.9， 133.9， 133.4， 132.2, 130.9' 129.4, 129.3， 128.6, 127.6， 127.3， 126.4， 124.9， 123.2， 122.6, 56.8， 45.5， 37.8; IR (KBr cm—') 3348, 3103， 2370， 1691, 1654; HRMS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。Hl9N202S 351.1123, found 351.1144。实施例125-苯基-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(4j)的制备 合成方法同实施例11。收率48%，白色固体，mp 126.4-128.2 。C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,)《(卯m) 8.87 (s， 1H) 8.58 (dd， 1H， /= 1.0 and 7.2Hz) 8.38 (s' 1H) 8.25 (dd， 1H， /= 0.7 and 8.2 Hz) 7.78—7.76 (m, 2H) 7.75 (s， 1H) 7.55—7.52 (m, 2H， ) 7.47—7.44 (m, 1H) 4.38 (t， 2H， / =7. 0 Hz) 2. 73 (t， 2H' /= 7. 0 Hz) 2. 41 (s, 6H) ; ':'C NMR (100 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 164. 2， 140.1， 139.3' 134.1， 132.2， 131.3， 131.0， 130.8, 129.2, 128.4, 127.5, 127.4， 127.3， 123.2， 122.6, 57.0， 45.6, 38.0; IR (KBr cm—') 3444, 2948， 1688， 1654; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C22H2。N202 3 44. 152 5， found 344. 1526。实施例135-(4'-甲基-苯基)_2-[2-(二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-l， 3(2氢)-二酮(4k) 的制备合成方法同实施例11。收率51%，白色固体，mp 219. 8-220. 9°C; 'H NMR (400 MHz CDC1》5 (卯m) 8.87 (s， 1H) 8. 57(dd, 1H， ，/= 0. 8 and 7.2 Hz) 8.37 (s， 1H) 8.25 (d' 1H， /= 8. 0 Hz) 7.79 (t， 1H, 7.2 Hz) 7.68 (d' 2H, / = 8. 0 Hz) 7.35 (d, 2H' / = 8. 4 Hz) 4.41 (t， 2H， / = 6. 8 Hz) 2.79 (t， 2H, 6.8 Hz) 2.45 (s, 9H) ; '3C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.3, 140.0' 138.4, 136.3, 134.1, 132.2, 130.9, 130.8， 130.0' 129.9， 127.2, 123.0， 122.5, 56.8， 45.4， 37.8， 21.2; IR (KBr cm-') 3370， 2940， 1694， 1663; HRMS (ESI) m/z (M+H) + calcd for 。2風359. 1735， found 359. 1736。实施例145-(3' ，4， -2 -苯基)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-1， 3(2氢)-二酮(41) 的制备合成方法同实施例11。收率43%，白色固体，mp 115.1-116.3 °C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) 5 (ppm) 8.78 (s， 1H) 8.62(d, 1H, /= 7.2 Hz) 8.32 (s, 1H) 8.26 (d， 1H， /= 8.0 Hz) 7.80 (t, 1H' / = 7.6 Hz) 7.61-7.56 (m， 1H) 7.553—7.49 (m, 1H) 7.37—7.30 (m' 1H) 4.37(t， 2H, /=6.8Hz) 2.69 (t' 2H' /=6. 8Hz) 2.37 (s, 6H) ; "CNMR (1—00 MHz -CDC13) 5 (卯m) 164.0， 151.9， 149.4， 137.9, 136.4, 136.3, 134.0, 132.1， 131.3, 131.1, 130.0， 127.6, 127.5， 123.5,122.7, 118.2， 118.0, 116.5， 116.4， 57.0， 45.8， 38.3; l9F陋R 5 —) -136.4, -138.1; IR (KBr cm1) 2940， 1703， 1654, 1142; HRMS (ESI) m/z (M+H) + calcd for C22H19F2N202 381.1415， found 381. 1396。实滩例155- (3' _硝基-苯基)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-l， 3(2氢)-二酮(4m ) 的制备合成方法同实施例11。收率40%，淡黄色固体，mp 188. 2-183. 6。C;'H NMR (400 MHz CDC1:,)《(卯m) 8.87 (s， 1H) 8.64-8.63 (m, 2H) 8.45 (s， 1H) 8.33-8.30 (m, 2H) 8.11 (d， 1H， /=8.0Hz) 7.83 (t， 1H' /= 8. 0 Hz) 7.74 (t， 1H， / = 8. 0 Hz) 4.39 (t， 2H, / = 6. 8 Hz) 2.74 (t, 2H， /=6. 8Hz) 2. 41(s, 6H) ; 13C NMR (100 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 165.2' 149.0， 141.0， 137.4, 134.2， 133.3， 132.1， 131.7, 130.3， 130.0， 127.8， 123.7, 123.1, 122.7, 122.2, 56.9， 49.9， 45.6, 38.1， 29.7, 22.7; IR (KBr cm—') 3333, 2933' 1695， 1658, 1385; HRMS (ESI) m/z (腕)+ calcd for C22H20N:,04 390. 1430， found 390. 1434。实施例166- 溴-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(6)的制备4-溴-l， 8-萘酐(277 mg， 1 mmol)和N， N-二甲基乙二胺(1.2 mmol)在乙醇(20 mL) 中加热回流2小时后，除去溶剂，得到目标产物。实施例176-(二甲胺基-乙胺)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3(2氢)-二酮(7a) 的制备化合物(6) (174 mg， 0. 5鹏o1)， N' N-二甲基乙二胺(2 mmol)和K2C0:, (69 mg' 0.5 國ol)的混合物，在乙二醇单甲醚(15 mL)中加热回流12小时后，经提纯得到目标产物。收率75%，黄色固体，mp 118-118.6 。C ; 'H NMR (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.58 (d， 1H， /=7.2Hz) 8.46 (d, 1H, /= 8.0 Hz) 8.14 (d' 1H， /=8.4Hz) 7.62 (t， 1H， /=8.0 Hz) 6.66 (d, 1H, /=8.8Hz) 6.3 (br， 1H) 4.32 (t， 2H， /=7. 2Hz) 3.40—3.36 (m, 2H) 2.73 (t, 2H， /= 6.0 Hz) 2.65 (t， 2H， ./= 7.2 Hz) 2.37 (s， 6H) 2.34 (s, 6H) ; l3C丽R (400 MHz CDCL) 5 (ppm) 164.8， 164.2, 149.7, 134.6, 131.1, 129.9, 126.4, 124.6, 123.0, 120.4， 110.0, 104.4， 57.1, 45.7， 45.0, 40.1， 37.9; IR (KBr cm—') 3274, 2955， 1677, 1640; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H27N402 355.2134， found 355.2118。10实施例186-(二甲胺基-丙胺)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3(2氢)-二酮(7b) 的制备:合成方法同实施例17。收率72%，黄色固体，mp 117-117.8 。C; 'H薩(400 MHz CDCl:i) 5 (ppm) 8.58-8.55 (m， 2H) 8.43 (d， 1H, /= 8.0 Ilz) 8.00 (d， 1H， / = 8. 0 Hz) 7.57 (t， 1H, /= 7.6 Hz) 6.58 (d, 1H， /= 8. 0 Hz) 4.32 (t, 2H, 7. 2 Hz) 3.48 (s, 211) 2.67—2.63 (m, 4H) 2.42 (s， 6H) 2.37 (s, 6H) 1,97 (t, 2H， /= 5. 6 Hz) : l3C丽R (100 MHz CDC 13) 5 (ppm) 164.9, 164.2， 150.9， 134.9， 131.0, 130.0, 126.7, 124.4， 122.9, 120.7, 109.1， 103.4, 59.6, 57.1， 44.8, 37.8, 24.2; IR (KBr cm—') 3422， 2948， 1680, 1639; HRMS (EI) m/z (M+H) + calcd for C21H29t^02 369.2291， found 369.2281。实施例196-丁胺-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-1， 3 (2氢)-二酮(7c)的制备 合成方法同实施例17。收率60%，黄色固体，mp 105-106.7 °C ; 'H丽R (400 MHz CDC13) (ppm) 8.55 (d, 1H, /= 7. 6 Hz) 8,43 (d, 1H, /二 8. 0 Hz) 8.07 (d， 1H， /= 8.0 Hz) 7.59 (t, 1H, /= 8.0 Hz) 6.69 (d， 1H， 8.0 Hz) 5.32 (br， 1H) 4.33 (t， 2H， ，/= 7.2 Hz) 3.43-3.38 (m， 2H) 2.69 (t， 2H, ,/=7.2 Hz) 2.39 (s, 6H) 1.84—1.76 (m, 2H) 1.59—1.49 (m， 2H) 1.032 (t, 3H, /= 7. 6 Hz) ; ':!C NMR (100 MHz CDC 13) (卯m) 164.7， 164.1， 149.5, 134.5， 131.1， 129.8, 125.8, 124.6, 123.1， 120.1, 110.1, 104.3， 57.1, 45.7, 43.4, 37.8, 31.0, 20.3， 13.8; IR (KBr cm—') 3291, 2952， 1683, 1637; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C20H26NA 340.2025， found 340. 2023。实施例206-[(噻吩-2-甲基]-胺基]-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-1， 3 (2氢)-二酮(7d)的制备:合成方法同实施例17。收率54%，黄色固体，mp 162.4-164 。C ; 'H NMR (400 MHz CDC1:〕《(ppm) 8.56 (d， 2H, /= 7.2 Hz) 8.44 (d, 1H, /= 8. 0 Hz) 8.09 (d, 1H, / = 8.0 Hz) 7.61 (t， 1H， / = 7. 6 Hz) 7.31 (dd, 1H， /= 0.8 and 4.8 Hz) 7.14 (s， 1H) 7.05—7.03 (m, 1H) 6.80 (d， 1H， /= 7.6 Hz) 5.69 (t, 111, /= 4. 8 Hz) 4.79 (d, 2H, /= 4.8 Hz) 4.35 (t, 2H， / = 7. 2 Hz) 2. 73 (t, 2H, /= 6. 8 Hz) 2. 42 (s， 6H) ; '3C NMR (100 MHz CDCL) (ppm) 164. 6, 164. 0， 148.6, 140.0, 134.3， 131.2， 129.7， 127.3， 126.3, 126.0， 125.6， 125.0， 123.1， 120.4, 111.2, 105.0, 57.0, 45.6, 43.0， 37.6; IR (KBr era—') 3311, 2348， 1677， 1647; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2,H22N202S 380.1433, found 380.1422。实施例216-吗啉-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(7。的制备 合成方法同实施例17。收率70%，黄色固体，mpl33. 3-134. 8°C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) 5 (ppm) 8.59 (d， 1H， /= 7.2 Hz) 8.54 (d, 1H， / = 8. 0 Hz) 8.42 (d' 1H, / = 7. 6 Hz) 7.71 (t， 1H， / = 8. 0 Hz) 7.23 (d， 1H, /= 8.0 Hz) 4.33 (t, 2H, /= 7. 2 Hz) 4.02 (t, 4H' /= 4.4 Hz) 3.27 (t. 4H' 4. 4 Hz) 2.68 (t， 2H, / = 6. 8 Hz) 2.38 (s' 6H) ; ':t陋R (100 MHz CDC13) J (卯m) 164.5， 164.0, 155.6， 132.6， 131.2, 130.1， 130.0, 126.2, 125.8, 123.3, 117.2, 115.0， 67.0， 57.0， 53.4, 45.7, 37.9; IR (KBr cm—1) 2977， 1699， 1651; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H24N:i03 354. 1818， found 354.1824。实施例226-硫吗啉-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(7f)的制备 合成方法同实施例17。收率73%，黄色固体，mp 118.3-119.5 °C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 8.59 (d, 1H， /=7.6 Hz) 8.52 (d, 1H' /=8.0Hz) 8.37 (d， 1H， ，/= 8.0 Hz) 7.71 (t, 1H, ,/= 7.6 Hz) 7.24 (d, 1H, ,/= 8.0 Hz) 4.33 (t, 2H, /= 7. 2 Hz) 3.51 (t, 4H, / = 4.0 Hz) 2.97 (t， 4H， /= 4.4 Hz) 2.68 (t, 2H, /= 6.8 Hz) 2.38 (s, 6H) ; 't NMR (100 MHz CDC13) ^ (ppm) 164.5, 164.0， 156.8' 132.5， 131.2， 130.0, 129.9, 126.6' 125.9, 123.3, 117.2， 116.0， 56.9， 55.6， 45.6' 37.8， 28.2; IR (KBr cm—" 3311， 2963, 1677， 1647; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H2iN:,02S 370.1589, found 370.1579。实施例236-哌啶-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氢-苯并[de]异喹啉-l， 3 (2氢)-二酮(;7g)的制备 合成方法同实施例17。收率78%，黄色固体，mp 128-129.3 。C; 'H醒(400 MHz CDCU (卯m) 8.57 d, 1H， 7. 2 Hz) 8.49 (d, 1H, /= 8. 0 Hz) 8.39 (d, 1H, /= 8. 0 Hz) 7.67 (t, 1H， /= 8. 0 Hz) 7.17 (d, 1H, /= 8.0 Hz) 4.32 (t， 2H, ./= 7.2 Hz) 3.23(s, 4H) 2.66 (t, 2H, / = 7.2Hz) 2.37(s, 6H) 1.90—1.86 (m， 4H) 1.74-1.72 (m' 2H) ; 13C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.6， 164.1， 157.4, 132.7, 131.1, 130.6， 126.3, 125.3, 123.1， 115.9, 114.7, 56.9, 54.5, 45.6, 37.8, 26,2， 24.3; IR (KBr cm-1) 3370, 2933, 1691， 1654; HRMS (EI) m/z (M+Hr calcd for C21H26N302 3 52 . 20 2 5, found 352.2034。实施例246-(4'-甲基-哌嗪)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氢-苯并[de]异喹啉-1， 3(2氢)-二酮(7h) 的制备合成方法同实施例17。收率72%，黄色固体，rap 162.4-163.7 °C ; 'H丽R (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.58 (dd, 1H, /= 0. 8 and 7. 2 Hz) 8. 51 (d， 1H, /= 8. 0 Hz) 8. 41 (d, 1H, /= 0. 8 and 8. 0 Hz) 7. 69 (t, 1H, /= 7.6 Hz) 7.22 (d, 1H, / = 8. 0 Hz) 4.36 (t， 2H， ./= 7.2 Hz) 3.32 (t， 4H， /= 4.4 Hz) 2.76—2.72 (m, 6H) 2.45 (s, 3H) 2.43 (s, 6H) ; '3C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.5, 164.0, 156.0， 132.7' 131.2, 130.3, 130.0， 126.2, 125.6, 123.2, 116.6, 115.0, 56.8' 55.1, 52.9, 46.1， 45.5， 37.6; IR (KBr cm—0 3392, 2985, 1692, 1652; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C21H27N402 3 67 . 20 89, found 367.2090。实施例25体外抑制肿瘤细胞生长活性测定用四氮唑盐(microculture tetrozolium, MTT)还原法对P388D1小鼠淋巴样瘤细胞和 HeLa人宫颈癌细胞进行抑制试验。四氮唑盐(MTT)还原法的具体操作是按不同肿瘤生长速率，将一定数量处于对数生长 期的肿瘤细胞接种于96孔微量培养板内，培养24 h后加入药液10u 1/孔，对每个细胞株， 每个浓度均为三个复孔。另设无细胞调零孔、如果药物有颜色要做相应药物浓度无细胞调零 孔。肿瘤细胞在37 °C、 5% )2条件下培养24 h后，加MTT(Sigma)液5 mg/ml用生理盐水配 制20 ul/孔；继续培养4h后，加入三联液(10%SDS-5%异丁醇-0. 01 mol/LHCl) 50 u 1/ 孔，于C0z培养箱中过夜。然后用酶标仪测0D570值。按下列公式计算被测物对癌细胞生长的抑制率肿瘤抑制率=(对照组0D值-治疗组0D值)/对照组0D值X100%。 筛选方法四氮唑盐(microculture tetrozolium, MTT)还原法 细胞株P388D1小鼠淋巴样瘤细胞，HeLa人宫颈癌细胞 作用时间24 h对化合物的体外生测结果如下 化合物对P388D1和HeLa生长的抑制率％化合物 细胞毒性(ICW， uM)HeLaP388D14a0. 620.834b0. 70.234c9. 43. 244d9. 43. 544e9. 40. 534f36. 342. 344g1.930. 434h21. 62. 644i3. 10.684j5. 70.684k45.82.19415. 30.984m4. 70.380. 690.537b0. 620.237c4. 53.997d6. 11.817e6. 10.637f5. 65.127g0. 60.617h8. 556.32Amonafide60.68以上化合物具有较强的抗肿瘤活性。
权利要求
1、一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物，其特征在于该化合物具有以下的结构通式(1) id="icf0001" file="A2008100124980002C1.tif" wi="37" he="32" top= "45" left = "61" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>a、(1)式中R1为C1～C6的烷基或由(2)式所示的取代基团 id="icf0002" file="A2008100124980002C2.tif" wi="36" he="11" top= "77" left = "141" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>式(2)中n＝1～6，R4、R5选自H、C1～C6烷基中的一种或吡咯环；b、(1)式中，当R2＝H时，R3选自以下取代基团或当R3＝H时，R2也选自以下取代基团-NHR6其中R6为C1～C6的直链或支链烷基， id="icf0003" file="A2008100124980002C3.tif" wi="75" he="11" top= "112" left = "109" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/> id="icf0004" file="A2008100124980002C4.tif" wi="137" he="17" top= "128" left = "20" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>含C1～C6烷基、卤素、氨基、硝基的取代苯基，噻吩，吡咯，苯并呋喃，吡啶以及含有C1～C6烷基、卤素、氨基、硝基取代的这些杂环。
2、按照权利要求1所述的一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物的抗肿瘤应用方法，其特征在于所述化合物对体外抑制肿瘤细胞生长活性采用四氮唑盐还原法对HeLa人宫颈癌 细胞株、P388D1小鼠淋巴样瘤细胞株进行试验，方法是按不同肿瘤生长速度，将一定数量处 于对数生长期的肿瘤细胞接种于96孔微量培养板内，培养24小时后加入药液10u L/孔，对 每个细胞株每个浓度均设三个复孔，另设无细胞凋零孔，在药物有颜色时要作相应药物浓度 无细胞凋零？L，肿瘤细胞在37DC、 5%C02条件下培养24小时后，加MTT (Sigma)液5mg/mL用 生理盐水配置20u L/孔，继续培养4小时后，加入三联液(10% SDS-5%异丁醇-O. 01 mol/LHCl) 50uL/孔，于二氧化碳培养箱中过夜，然后用酶标仪测0D570值； 按下列公式计算被测药物对肿瘤细胞的生长抑制率 肿瘤抑制率=(对照组0D值-治疗组0D值)/对照组0D值X 100%。
全文摘要
一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物及抗肿瘤应用，其属于精细化工领域。这种化合物的特征是在萘酰亚胺5-位或6-位分别通过亲核取代反应引入各种脂肪氨基、杂环氨基、芳基、杂芳基得到的类似先导化合物氨萘非特(amonafide)结构的小分子化合物。这些化合物对HeLa(人宫颈癌细胞)P388D1(鼠淋巴样瘤细胞)在体外试验显示出明显的抑制活性，其中一些化合物在同样测试条件下的细胞毒性要强于氨萘非特(amonafide)。并且这些化合物结构呈现多样性，其中没有乙酰化位点的化合物，可以避免出现类似氨萘非特(amonafide)的副作用；另一部分有乙酰化位点的化合物，可以通过个性化给药避免副作用的发生。说明该类化合物具有治疗肿瘤相关疾病的医学应用前景。
文档编号A61K31/473GK101323591SQ200810012498
公开日2008年12月17日 申请日期2008年7月23日 优先权日2008年7月23日
发明者崔京南, 徐玉芳, 义 肖, 解丽娟, 钱旭红 申请人:大连理工大学