专利名称：：一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法
技术领域：
：本发明属于医药质量检测
技术领域：
，涉及一种中成药的质量检测方法，具体涉及一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法。技术背景现有技术中，原申请号为03114593.0，名称为"一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的及其制备工艺"的专利，公开了一种用于治疗慢性萎缩性胃炎的中药，其是由黄连、白花蛇舌草、沙棘油、元胡、焦山楂、生麦芽、鸡内金、干姜经过粉碎、提挥发油、乙醇提取、浓缩、混合等工序制成的口服固体制剂。该中药具有疗效显著、无毒副作用等特点。该产品具有温中消痞，清热化滞，理气止疼的功效。标准中以盐酸小檗碱为定量指标。关于盐酸小檗碱的含量测定方法，已报道的有高效液相色谱法、薄层扫描法、气相色谱法、毛细管电泳法和电化学法等方法，其中高效液相色谱法具有灵敏、准确、重现性好等特点；故参照有关资料，选择用高效液相色谱法测定该制剂中盐酸小檗碱的含量，作为控制该制剂质量的含量测定方法。
发明内容本发明的目的是为克服
背景技术：
的不足，而提供一种操作简便，能够更有效的控制产品质量的治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法。为了实现上述目的，本发明釆用的技术方案是一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤(1)取治疗慢性萎缩性胃炎的中药-胃舒泰制剂药粉适量，置显微镜下观察，木纤维束鲜黄色，紋孔点状，清晰；(2)取胃舒泰制剂药粉lg,加申醇1015mL，超声处理10-20分钟，温浸20-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.50g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lmL含0.5mg盐酸小檗碱的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2pL，分别点于同一硅胶G板上，以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，正丁醇冰醋酸水的体积百分比为7:i:2，置氨蒸气饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同的黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；(3)取胃舒泰制剂药粉20g，加石油醚80~100mL，加热回流提取2次，每次2030分钟，滤过，合并滤液，转入分液漏斗中，加入浓度为4%的盐酸水溶液30mL，萃取2次，每次15mL,合并石油醚，提取液通过盛有4g无水硫酸钠的漏斗中，脱水，滤液60匸以下低温蒸干，残渣加甲醇lmL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材干姜2g,同法制成对照药材溶液；分别吸取上述二种溶液各8nL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂，石油醚乙酸乙酯的体积百分比为10:4，展开，取出，晾干，喷以浓度为1%的香草醛硫酸试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；(4)取胃舒泰制剂药粉粉末3g，加氨试液57mL，放置10分钟后，加石油醚50mL回流提取2次，每次2040分钟，趁热滤过，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇lmL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材延胡索lg，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每lmL含lmg延胡索乙素的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4fiL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-氨水为展开剂，正己烷乙酸乙酯氨水的体积百分比为6:4:0.2,置以展开剂预饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相向颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的砩后，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；(5)取胃舒泰制剂药粉粉末2g,加乙醇2030mL,加热回流30-40分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每lmL含lmg熊果酸的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4jiL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以曱苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，甲苯乙酸乙酯甲酸的体积百分比为20:4:0.5,展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的紫红色斑点；(6)盐酸小檗碱的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；对照品为盐酸小檗碱；色谱条件与系统适用性为用十八烷基硅烷键合硅胶柱为填充剂；乙睛-0.05mol/L磷酸二氩钾为流动相，乙睛0.05mol/L磷酸二氢钾的体积百分比比为20~30:70-80，A为乙睛，B为0.05mol/L磷酸二氢钾，A+B=100%;DAD检测器，检测波长为345nm，理论板数以盐酸小檗碱峰计应不低于3000;其中对照品溶液的制备精密称取在60°C减压干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lmL含0.01mg盐酸小檗碱的溶液，即得；其中供试品溶液的制备取胃舒泰制剂，研细，精密称取0.05g,置25mL量瓶中，加甲醇-盐酸适量，甲醇盐酸的体积百分比为100:1,超声处理5080分钟，取出，放冷，加曱醇-盐酸至刻度，甲醇盐酸的体积百分比为100:1,摇匀，精密吸取2mL,置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20jiL,注入液相色谱仪，测定，计算，即得。本发明优选的技术方案是一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤(1)取治疗慢性萎缩性胃炎的中药-胃舒泰制剂药粉适量，置显微镜下观察，木纤维束鲜黄色，直径10.3~25.8jim，壁厚2.55.0pm,紋孔点状，清晰；(2)取胃舒泰制剂药粉lg，加甲醇10mL，超声处理20分钟，温浸20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.50g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lmL含O.Smg盐酸小檗碱的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2jiL，分别点于同一以浓度为3%的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，正丁醇冰醋酸水的体积百分比为7:1:2,置氨蒸气饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同的黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；(3)取胃舒泰制剂药粉20g，加3(K60。C石油醚80mL，加热回流提取2次，每次30分钟，滤过，合并滤液，转入分液漏斗中，加入浓度为4。/。的盐酸水溶液30mL，萃取2次，每次15mL,合并石油醚，提取液通过盛有4g无水硫酸钠的漏斗中，脱水，滤液60X:以下低温蒸干，残渣加甲醇lmL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材干姜2g，同法制成对照药材溶液；分别吸取上述二种溶液各8pL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以3060'C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，石油醚乙酸乙酯的体积百分比为10:4，展开，取出，晾干，喷以浓度为1%的香草醛硫酸试液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；(4)取胃舒泰制剂药粉粉末3g，加氨试液7mL,放置10分钟后，加石油醚50mL回流提取2次，每次30分钟，趁热滤过，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇lmL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材延胡索lg,同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每lmL含lmg延胡索乙素的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4nL，分别点于同一用3。/。羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-氨水为展开剂，正己烷乙酸乙酯氨水的体积百分比为6:4:0.2，置以展开剂预饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯下检视，检测波长365nm，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；(5)取胃舒泰制剂药粉粉末2g，加乙醇20mL，加热回流30分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每lmL含lmg熊果酸的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4pL，分别点于同一以3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，甲苯乙酸乙酯甲酸的体积百分比为20:4:0.5，展开，取出，晾干，喷以浓度为10%的硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的紫红色斑点；(6)盐酸小檗碱的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；对照品为盐酸小檗碱；色谱条件与系统适用性为用十八烷基硅烷键合硅胶柱为填充剂；乙睛-0.05mol/L磷酸二氢钾为流动相，乙睛0.05mol/L磷酸二氣钾的体积百分比比为26:74，A为乙睛，B为0.05mol/L磷酸二氢钾，A+B=100%;DAD检测器，检测波长为345nm,理论板数以盐酸小檗碱峰计应不低于3000;其中对照品溶液的制备精密称取在60'C减压干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lmL含0.01mg盐酸小檗碱的溶液，即得；其中供试品溶液的制备取胃舒泰制剂，研细，精密称取0.05g,置25mL量瓶中，加甲醇-盐酸适量，甲醇盐酸的体积百分比为100:1，超声处理60分钟，取出，放冷，加甲醇-盐酸至刻度，甲醇盐酸的体积百分比为100:1，摇匀，精密吸取2mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用徽孔滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20fiL，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。本发明与现有技术相比具有以下优点本发明通过高效液相色谱法，实现了对盐酸小檗碱含量的准确测定，本方法操作简便，准确先进，线性关系、重现性、精密度、稳定性、回收率均较好，能够更有效的控制产品的质量。下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明的保护范围不仅仅限于以下实施例。具体实施方式实施例(一)定性检测1、显微鉴别所用仪器Olympus双目显微镜(日本)；所用试液稀甘油试液，水合氯醛试液，间苯三酚试液，稀盐酸。取胃舒泰制剂药粉(批号030228)适量，水洗，沉降4小时以上，倾去上清液，沉降物备用；木纤维进行木质细胞定性试验，显紫红色。2、取胃舒泰制剂药粉lg,加甲醇10mL，加热回流15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液。同时，制备不含黄连的阴性对照品，即依据申请号为03114593.0的专利处方组成，取不含黄连的其它药材，按照胃舒泰制剂药粉制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。另取黄连对照药材O.Sg，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lmL含0，5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各2jiL，分别点于同一以浓度3。/。羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，正丁醇、冰醋酸和水的体积百分比为7:1:2，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(检测波长365nm)下检视，该展开系统效果更佳。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应位置上，显相同的一个黄色荧光斑点；阴性对照液无千扰。3、取胃舒泰制剂药粉2.0g，加石油醚80mL(3060。C)，加热回流提取2次，每次30分钟，滤过，合并滤液，转入分液漏斗中，加入浓度4%盐酸水溶液30mL,萃取2次，每次15mL，合并石油醚，提取液通过盛有4g无水硫酸钠的漏斗中，脱水，低温蒸干滤液，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液。依据处方组成，取不含干姜、沙棘油的其它药材，照胃舒泰制剂药粉制备工艺和供试品溶液的制备方法制成双阴性对照液。另取干姜对照药材2g，同法制成对照药材溶液。分别吸取上述三种溶液各8pL,分别点于同一以浓度3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯(体积比为10:4)为展开剂，展开，取出，晾千，喷以1%香草醛硫酸试液，在105'C加热至斑点显色清晰。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的特征斑点，阴性没有干扰。4、取胃舒泰制剂药粉粉末3g，加氨试液7mL，放置10分钟后，加石油醚50mL(6(K卯。C)回流提取2次，每次30分钟，趁勢滤过，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液。同法制备阴性对照液。分别吸取上述四种溶液各4jiL，同试验方法(2)进行薄层鉴别，结果日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照液无干扰。5、由于白花蛇舌草、山楂中均含有熊果酸，故试验采有双阴性对照法。取胃舒泰制剂药粉粉末3g,加乙醇20mL，加热回流30分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液。同时，制备不含白花蛇舌草、山楂的阴性对照品，即依据处方组成，取不含白花蛇舌草、山楂的其它药材，按照胃舒泰制剂药粉制备工艺和供试品溶液的制备方法制成双阴性对照液。另取熊果酸对照品，加甲醇制成每lmL含lmg熊果酸的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4fiL，分别点于同一以浓度3。/c羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚-苯-乙酸乙酯-冰醋酸(体积百分比为20:40:14:i)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中显色。结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的黄色斑点，但隐约可见。改用甲苯-乙酸乙酯-甲酸(体积百分比为20:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以浓度10。/。硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显色清晰，效果更佳。结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的紫红色斑点；而阴性对照液无干扰。(二)定量检测研究1、提取时间的考察精密称取胃舒泰制剂药粉细粉(批号030228)约0.05g，6份，分别置25mL量瓶中，加甲醇-盐酸(体积百分比为100:1)至刻度，超声处理不同时间，放冷后加甲醇定容，超滤，取续滤液进样，测定，求得盐酸小檗碱含量，结果见表l。表l超声处理不同时间试验结果超声时间(min)203040506070含量(％。)3.033.443.513.543.783.76以上结果表明，超声处理50分钟以上，测得盐酸小檗碱含量(或峰面积与取样量的比值)不再增加，为了保证提取完全，故确定超声处理时间为60分钟。2、色谱条件的考察2.1流动相的选择乙睛-0.05mol/L磷酸二氢钾(二者体积百分比为26:74)。2.2用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙睛-0.05mol/L磷酸二氢钾(26:74)为流动相，A为乙睛，B为0.05moI/L磷酸二氢钾，A+B=100%;检测波长为345nm。理论板数以盐酸小檗碱峰计应不低于3000。2.3对照品溶液的制备精密称取在60'C减压干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lmL含0.01mg盐酸小檗碱的溶液，即得。2.4供试品溶液的制备取胃舒泰制剂药粉混勾，研细，精密称取约0.05g，置25mL量瓶中，加甲醇-盐酸(体积百分比为100:1)适量，超声处理1小时，取出，放冷，加甲醇-盐酸(体积百分比为100:1)至刻度，摇匀，精密吸取2mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.25pm徽孔滤膜滤过，即得。3、方法学考察3.1阴性对照试验按申请号为03114593.O的专利处方比例，照胃舒泰制剂制备工艺，制备不含黄连的阴性对照样品，再按供试品溶液配制方法制成阴性对照溶液。精密吸取20jiL，注入液相色谱仪。从色谱图中可以看出在盐酸小檗碱峰位置上无色谱峰出现，故阴性对照不干扰盐酸小檗碱测定。3.2线性关系考察精密称取盐酸小檗碱对照品2.11mg，加甲醇制成lmL含0.0211mg的盐酸小檗碱对照品溶液，分别取对照品溶液4、8、12、16、20、24pL,依次测定峰面积，以进样量对峰面积进行线性回归，结果见表2。表2线性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>回归方程Y=3.60xl06X-1.33xl04r=0.9999(n=6)结果表明盐酸小檗碱进样量在0.0844至(K5064ug范围内线性关系良好。3.3精密度试验取上述对照品溶液16uL与供试品溶液20uL，分别重复进样6次，依法测定峰面积。结果表明，精密度良好，见表3表3精密度测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>3.4稳定性试验取同一份供试品溶液，分别于O、1、3、6、10、20小时测定峰面积，结果见表4。表4稳定性试验结果时间(h:01361020峰面积(A)9532879580209623399634348589421062230平均峰面积959709RSD(%)6.71实验表明供试品在6小时以前稳定性良好，10小时和20小时峰面积的变化并无规律性，可能分析结果与室温变化有关。故供试品溶液在IO小时之内稳定性较好。3.5重现性试验取同批样品(批号030228),6份，按正文方法进行测定，结果见表5。表明本法重现性好。表5样品重现性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>3.6回收率试验取已知含量的样品粉末(批号030228)约0.025g，共6份，精密称定，分别置25mL量瓶中，分别精密加入盐酸小檗碱对照品溶液(0.1312mg/mL)7mL、8.5mL。分别按含量测定方法进行测定，按下式计算回收率，结果见表6。表明该方法有良好的回收率,回收率(％)={测得量(mg)-已知含量(mg)}/加入对照品量(mg)xl000/。。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>3.7黄连药材含量测定及限度确定:分别取药材样品粉末6批，约O.lg,精密称定，按正文含量测定项下方法进行测定，结果见表7。表7黄连药材中盐酸小檗碱含量测定结果编号品名盐酸小檗碱含量(％)1雅连(一等品)8.742味连(3年生)7.563雅连8.254雅连7.045川黄连6.055批药材样品含黄连以盐酸小檗碱计在4.66~8.47%之间，为了保证成品质量，结合2000年版中国药典一部黄连项下要求，确定其含量限度不得低于3.6%。3.8样品测定及限度确定取4批样品各2份，照含量测定项下方法测定，结果见表8。表8样品含量测定结果(n=2)序批盐酸小檗碱含量含量均值(mg/含量均值号号(mg/粒)粒)(%)103022812.7112.6312.673.33203030312.9112.6212.763.36303030611.6912.0111.853.1240302278.337.758.042.12根据4批样品实测数据，考虑到药材来源、制剂生产、jfc藏等因素，暂定胃舒泰制剂药粉每粒含黄连以盐酸小檗碱(C20H17NO4*HCI)计，不得少于6，5mg。权利要求1、一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤(1)取治疗慢性萎缩性胃炎的中药-胃舒泰制剂药粉适量，置显微镜下观察，木纤维束鲜黄色，纹孔点状，清晰；(2)取胃舒泰制剂药粉1g，加甲醇10～15mL，超声处理10～20分钟，温浸20～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.50g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg盐酸小檗碱的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G板上，以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，正丁醇∶冰醋酸∶水的体积百分比为7∶1∶2，置氨蒸气饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同的黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；(3)取胃舒泰制剂药粉20g，加石油醚80～100mL，加热回流提取2次，每次20～30分钟，滤过，合并滤液，转入分液漏斗中，加入浓度为4％的盐酸水溶液30mL，萃取2次，每次15mL，合并石油醚，提取液通过盛有4g无水硫酸钠的漏斗中，脱水，滤液60℃以下低温蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材干姜2g，同法制成对照药材溶液；分别吸取上述二种溶液各8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂，石油醚∶乙酸乙酯的体积百分比为10∶4，展开，取出，晾干，喷以浓度为1％的香草醛硫酸试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；(4)取胃舒泰制剂药粉粉末3g，加氨试液5～7mL，放置10分钟后，加石油醚50mL回流提取2次，每次20～40分钟，趁热滤过，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材延胡索1g，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg延胡索乙素的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯-氨水为展开剂，正已烷∶乙酸乙酯∶氨水的体积百分比为6∶4∶0.2，置以展开剂预饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；(5)取胃舒泰制剂药粉粉末2g，加乙醇20～30mL，加热回流30～40分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每1mL含1mg熊果酸的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸的体积百分比为20∶4∶0.5，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的紫红色斑点；(6)盐酸小檗碱的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；对照品为盐酸小檗碱；色谱条件与系统适用性为用十八烷基硅烷键合硅胶柱为填充剂；乙睛-0.05mol/L磷酸二氢钾为流动相，乙睛∶0.05mol/L磷酸二氢钾的体积百分比为20～30∶70～80，A为乙睛，B为0.05mol/L磷酸二氢钾，A+B＝100％；DAD检测器，检测波长为345nm，理论板数以盐酸小檗碱峰计应不低于3000；其中对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.01mg盐酸小檗碱的溶液，即得；其中供试品溶液的制备取胃舒泰制剂，研细，精密称取0.05g，置25mL量瓶中，加甲醇-盐酸适量，甲醇∶盐酸体积比为100∶1，超声处理50～80分钟，取出，放冷，加体积比为100∶1的甲醇-盐酸至刻度，摇匀，精密吸取2mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。2、根据权利要求1所述的一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤(1)取治疗慢性萎缩性胃炎的中药-胃舒泰制剂药粉适量，置显微镜下观察，木纤维束鲜黄色，直径10.3~25.8nm,壁厚2.5~5.0pm,紋孔点状，清晰；(2)取胃舒泰制剂药粉lg,加甲醇10mL，超声处理20分钟，温浸20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材0.50g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lmL含(K5mg盐酸小檗碱的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2jiL，分别点于同一以浓度为3%的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，正丁醇冰醋酸水的体积比为7:i:2，置氨蒸气饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同的黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；(3)取胃舒泰制剂药粉2.0g，加30—0'C石油醚80mL,加热回流提取2次，每次30分钟，滤过，合并滤液，转入分液漏斗中，加入浓度为4。/o的盐酸水溶液30mL，萃取2次，每次15mL，合并石油醚，提取液通过盛有4g无水硫酸钠的漏斗中，脱水，滤液6(TC以下低温蒸干，残渣加甲醇lmL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材干姜2g，同法制成对照药材溶液；分别吸取上述二种溶液各8jiL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以306(TC石油醚-乙酸乙酯为展开剂，石油醚乙酸乙酯的体积百分比为10:4,展开，取出，晾干，喷以浓度为1%的香草醛硫酸试液，在105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；(4)取胃舒泰制剂药粉3g，加氨试液7mL，放置10分钟后，加石油醚50mL回流提取2次，每次30分钟，趁热滤过，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇lmL溶解，作为供试品溶液；另取对照药材延胡索lg，同法制成对照药材溶液；再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每lmL含lmg延胡索乙素的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4pL，分别点于同一用3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-氨水为展开剂，正己烷乙酸乙酯氨水的体积百分比为6:4:0.2,置以展开剂预饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯下检视，检测波长365nm,供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；(5)取胃舒泰制剂药粉2g，加乙醇20mL，加热回流30分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lmL使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸对照品，加乙醇制成每lmL含lmg熊果酸的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4nL，分别点于同一以3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，甲苯乙酸乙酯甲酸的体积百分比为20:4:0.5，展开，取出，晾干，喷以浓度为10%的硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的紫红色斑点；(6)盐酸小檗碱的含量测定分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；对照品为盐酸小檗碱；色谱条件与系统适用性为用十八烷基硅烷键合硅胶柱为填充剂；乙睛-0.05mol/L嫌酸二氢钾为流动相，乙睛0.05mol/L磷酸二象钾的体积百分比比为26:74,A为乙睛，B为0.05mol/L磷酸二氣钾，A+B=100%;DAD检测器，检测波长为345nm，理论板数以盐酸小檗碱峰计应不低于3000;其中对照品溶液的制备精密称取在60'C减压干燥4小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lmL含0.01mg盐酸小檗碱的溶液，即得；其中供试品溶液的制备取胃舒泰制剂，研细，精密称取0.05g，置25mL量瓶中，加体积比为100:1的甲醇-盐酸适量，超声处理60分钟，取出，放冷，加体积百分比为100:1的甲醇-盐酸至刻度，摇匀，精密吸取2mL,置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20jiL，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。全文摘要本发明涉及中药质量检测领域，具体涉及一种治疗慢性萎缩性胃炎的中药的质量检测方法，采用高效液相色谱法测定治疗慢性萎缩性胃炎的中药口服固体制剂中盐酸小檗碱的含量。本方法操作简便，准确先进，具有良好的精密度、重现性、稳定性和回收率，能够更有效的控制产品的质量，可用于治疗慢性萎缩性胃炎的中药口服固体制剂的质量控制。文档编号A61K35/38GK101259260SQ20081001799公开日2008年9月10日申请日期2008年4月17日优先权日2008年4月17日发明者侯建平,王延岭申请人:陕西康惠制药有限公司