专利名称：：油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种从油菜蜂花粉中提取黄酮类物质的工艺，特别是一种超声波提取工艺。
背景技术：
：蜂花粉为蜜蜂采集的雄蕊花药的粉状物质，被称为"完全营养食品"，含有丰富的黄酮类、糖类、蛋白质、氨基酸、维生素、酯类等各种营养物质。现代药理实验证实，蜂花粉中的黄酮类成分具有抗动脉硬化、降低胆固醇等多种生理活性作用。黄酮类化合物的提取方法现在一般采用水煮提取、有机溶剂提取和超临界C02流体提取等方法。水煮和超临界C02流体提取的方法存在诸多局限，没有被广泛应用。目前还没有有关采用超声波提取油菜蜂花粉中黄酮类物质的报导。发明的内容本发明的目的是为了提供一种从油菜蜂花粉中提取黄酮类物质的工艺方法。本发明的技术方案是该方的特点是，包括如下步骤①将干燥、粉碎的油菜蜂花粉用10-95%的乙醇溶液在提取温度为25-60°C，超声功率为40-250W，料液比为1:4-1:12，提取时间为15-35min的条件下超声提取，然后回收乙醇、过滤得水溶液；②将所得提取水溶液经过经乙醇处理的弱极性大孔吸附树脂；③先用水洗脱弱极性大孔吸附树脂至流出的溶液为无色或淡棕色，再用50-95%的乙醇洗脱至无黄酮流出(用FeCl3溶液试验检测)并收集洗脱液；④蒸发回收洗脱液中的乙醇得黄酮溶液；⑤浓縮、干燥得粉状黄酮产品。本发明的另一特点是所述步骤①中先将干燥、粉碎的油菜蜂花粉用超临界C02萃取提取油脂后，再超声波提取油菜蜂花粉。本发明的另一特点是所述步骤①中油菜蜂花粉千燥后，.粉碎至20—80目的粉末。本发明的另一特点是所述的弱极性大孔吸附树脂为AB-8型。本发明的另一特点是所述步骤②所述提取液通过弱极性大孔吸附树脂的流速为0.2-2.OBV/h。本发明的另一特点是所述步骤③所述水洗脱及乙醇洗脱的流速为0.5-2.0BV/h。本发明的另一特点是所述步骤①中提取温度为4(TC，超声功率为100W，料液比为1:12，提取时间为25min。本发明具有如下优点和效果1、本发明首次对油菜蜂花粉的黄酮类物质的超声提取制备过程进行了研究，对影响提取得率及黄酮含量的各个参数进行了优化，从而确定了最优条件；从而提高了黄酮类物质得率，并减小了工业消耗、降低了生产成本。2、本发明采用乙醇为溶剂，安全可靠、易于工业化生产。3、本发明是在相对较低的温度下进行的，节省能源，也有利于对热不稳定黄酮物质的提取。4、本发明节省溶剂，操作步骤简化，提高了工作效率，是一种快速、高效、易于放大、绿色安全的方法。5、本发明可广泛应用于各种黄酮类药物及保健食品开发需求。超声提取是在相对较低的温度下进行的，节省能源，也有利于对热不稳定黄酮化合物的提取。并且超声提取由于空化效应、机械效应和热效应等的作用，加强了溶剂的扩散和有效成分的溶解，从而縮短了提取时间。同时超声法节省溶剂，操作步骤简化，提高了工作效率。此外，超声提取过程无化学反应，被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变，生物活性不减。因此，超声提取是一种快速、高效、易于放大、绿色安全的方法。为了确定在超声提取过程中各因素影响的大小，选取了温度、超声功率、料液比和时间4个因素，每个因素3个水平，采用U(34)正交表进行实验。实验结果表明，各因素对提取效果的影响大小为温度〉料液比〉时间〉功率。从正交实验结果可以看出，超声提取的最佳工艺条件是提取温度为40'C，超声功率为100W，料液比为1:12，提取时间为25min。表1为本发明中正交试验因素水平表表2为本发明中正交试验结果及数据分析表i超声提取因素水平表水平A温度('C)B功率(W)c料液比(w/v)D时间(min)120401:415240701:8253601001:1235表2超声提取正交试验结果及数据分析实验号A温度(-C)B功率(W)C料液比(W/V)D时间(min)总黄酮含量(mg/g)1111122.57<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>入FeCl3溶液时会显墨绿色，如果没有则不变色)，收集洗脱液；④蒸发回收洗脱液中的乙醇得黄酮溶液，再减压浓縮至粘稠状，冷冻干燥，粉碎得到粉状黄酮产品。实施例三①将油菜蜂花粉干燥后粉碎，粒度为20-80目，用8倍量的65%的乙醇溶液在4(TC下超声功率为200W的条件下超声提取25min，提取液浓縮回收乙醇得水溶液并过滤，②将过滤液以0.5BV/h的流速经过乙醇处理的弱极性AB-8型大孔吸附树脂塔；③先用水以流速0.5BV/h洗脱至无色或淡棕色后，再用50%乙醇以2.0BV/h的流速洗脱至无黄酮流出时停止洗脱(用FeCl3溶液检测黄酮洗脱情况，如有黄酮化合物存在，加入FeCV溶液时会显墨绿色，如果没有则不变色)，收集洗脱液；④蒸发回收洗脱液中的乙醇得黄酮溶液，再减压浓縮至粘稠状，冷冻干燥，粉碎得到粉状黄酮产品。实施例四①将油菜蜂花粉干燥后粉碎，粒度为20-80目，经超临界C02萃取方法提取油脂后，用10倍量的85。/。的乙醇溶液在3(TC下超声功率为160W的条件下超声提取20min，提取液浓縮回收乙醇得水溶液并过滤，②将过滤液以2.0BV/h的流速经过乙醇处理的弱极性AB-8型大孔吸附树脂塔；③先用水以流速0.5BV/h洗脱至无色或淡棕色后，再用60%乙醇以0.5BV/h的流速洗脱至无黄酮流出时停止洗脱(用FeCV溶液检测黄酮洗脱情况，如有黄酮化合物存在，加入FeCl3溶液时会显墨绿色，如果没有则不变色)，收集洗脱液；④蒸发回收洗脱液中的乙醇得黄酮溶液，再减压浓縮至粘稠状，冷冻干燥，粉碎得到粉状黄酮产品。权利要求1、油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于包括如下步骤①将干燥、粉碎的油菜蜂花粉用10-95％的乙醇溶液在提取温度为25-60℃，超声功率为40-250W，料液比为1∶4-1∶12，提取时间为15-35min的条件下超声提取，然后回收乙醇、过滤得水溶液；②将所得提取水溶液经过经乙醇处理的弱极性大孔吸附树脂；③先用水洗脱弱极性大孔吸附树脂至流出的溶液为无色或淡棕色，再用50-95％的乙醇洗脱至无黄酮流出并收集洗脱液；④蒸发回收洗脱液中的乙醇得黄酮溶液；⑤浓缩、干燥得粉状黄酮产品。2、如权利要求1所述油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于所述步骤①中先将干燥、粉碎的油菜蜂花粉用超临界C02萃取提取油脂后，再超声波提取油菜蜂花粉。3、根据权利要求1或2所述的油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于所述步骤①中油菜蜂花粉干燥后，粉碎至20—80目的粉末。4、如权利要求1或2所述的油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于所述的弱极性大孔吸附树脂为AB-8型。5、如权利要求1或2所述的油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于所述步骤②所述提取液通过弱极性大孔吸附树脂的流速为0.2-2.0BV/h。6、如权利要求1或2所述的油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于所述步骤③所述水洗脱及乙醇洗脱的流速为0.5-2.0BV/h。7、如权利要求1所述油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，其特征在于所述步骤①中提取温度为40°C，超声功率为100W，料液比为1:12，提取时间为25min。全文摘要油菜蜂花粉中黄酮类物质的超声波提取工艺，涉及一种从油菜蜂花粉中提取黄酮类物质的工艺。其点是包括如下步骤①将干燥、粉碎的油菜蜂花粉用10-95％的乙醇溶液在提取温度为25-60℃，超声功率为40-250W，料液比为1∶4-1∶12，提取时间为15-35min的条件下超声提取，然后回收乙醇、过滤得水溶液；②将所得提取水溶液经过经乙醇处理的弱极性大孔吸附树脂；③先用水洗脱弱极性大孔吸附树脂至流出的溶液为无色或淡棕色，再用50-95％的乙醇洗脱至无黄酮流出并收集洗脱液；④蒸发回收洗脱液中的乙醇得黄酮溶液；⑤浓缩、干燥得粉状黄酮产品。文档编号A61P9/10GK101554393SQ20081001796公开日2009年10月14日申请日期2008年4月8日优先权日2008年4月8日发明者刘永军,王小艳,王洪伦,索有瑞申请人:中国科学院西北高原生物研究所