专利名称：：2′-羧基-5′-氟联苯衍生物、其制备及应用的制作方法
技术领域：
：本发明属血管紧张素II领域，特别是涉及一种2'-羧基-5'-氟联苯衍生物、其制备及应用。
背景技术：
：肾素-血管紧张素系统(rennin-angiotensinsystem,RAS)在高血压的发生、发展中起着重要作用。它可使血管平滑肌细胞增殖、心肌细胞肥大，引起血管壁增厚、血管阻力增加和左心室肥厚等改变。RAS的中心环节是血管紧张素II(angiotensinII，AngII),Angll能够识别其特异性AT受体，通过一定的信号途径而发挥作用使血压升高。Angll是一个八肽结构(Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe)，早期的血管紧张素拮抗剂(ARB)，如沙拉新(Saralasin)，其结构与AH相似，所不同的是将All分子中的丙氨酸与酪氨酸的位置进行了变换。但是这类肽类化合物，其口服无效，且代谢不稳定，在临床应用上有很大的限制。1994年瑞典批准上市了第一个非肽类且选择性强的Angll受体拮抗剂氯沙坦(Losartan)，其结构中包含了四氮唑取代的联苯环和取代咪唑基团。该药是第一个可以口服特异性的ATI受体阻断剂，生物利用度33%。化合物Exp7711是氯沙坦在体类的活性代谢。N-NN-NLosartanExp7711目前已上市的ARBs均是以此药物的结构为"蓝本"的非肽类化合物。对于ARBs的研究大部分集中于咪唑环的修饰。而且四氮唑在合成和代谢上存在一定的缺陷，如合成四氮唑需要用到毒性的易爆原料叠氮化钠；四氮唑在体内容易以葡萄糖苷酸的形式被代谢，从而导致药物在体内的存在时间縮短。
发明内容本发明所要解决的技术问题在于提供一种2'-羧基-5'-氟联苯咪唑衍生物、其制备及应用，该化合物的制备中原料来源方便、制备简单、成本低，而且保证了联苯邻位酸性基团的存在，不影响药物的活性，解决了现有技术中的缺陷。本发明的2，-羧基-5，-氟联苯咪唑衍生物是，2-丁基-4-氯-1-{[2'-甲酸-5'-氟-(U'-联苯)4-基]甲基)-lH-咪唑-5-甲酸，其结构如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>该化合物，是一类血管紧张素II受体拮抗剂，熔点168170'C。该化合物易溶于二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲苯等有机溶剂。本发明的原理是利用氟原子强的吸电子作用影响联苯羧酸的酸性，同时含氟有机化合物具有较高的脂溶性和疏水性，能促进化合物在生物体内的吸收与传递速度，使其生理作用发生变化。本发明的2'-羧基-5'-氟联苯咪唑衍生物，是由2'-羧基-5'-氟联苯与取代咪唑基亲核取代生成，通过suzuki偶联合成2'-甲氧羰基-5'-氟-4-甲基联苯，然后用NBS溴代后和咪唑环反应后，水解制备相应的化合物，具体制备步骤包括(1)2'-甲氧羰基-5'-氟-4-甲基联苯的制备摩尔比为0.80.9:1的4-甲基苯硼酸与2-溴-5-氟苯甲酸甲酉旨，在K2C03、催化剂Ph3P、催化剂Pd(OAC)2和混合溶剂下，95105'C加热回流反应1.5~2.5小时，分离有机相，浓縮后柱层析分离，得2'-甲氧羰基-5'-氟-4-甲基联苯；其中，K2C03与4-甲基苯硼酸的摩尔数比是68:1，催化剂Ph3P与4-甲基苯硼酸的摩尔数比是0.60.8:1，催化剂Pd(OAC)2与4-甲基苯硼酸的摩尔数比是0.40.6:1;混合溶剂是1，4-二氧六环与水的混合物，混合体积比是4:1，该混合溶剂与4-甲基苯硼酸的用量比是56ml:lmmol;柱层析分离中的填充剂为硅胶H，洗脱剂为石油醚乙酸乙酯的混合溶剂，混合比例范围为150:1100:1;(2)2'-甲氧羰基-5'-氟-4-溴甲基联苯的制备摩尔比为68:78:1的2，-甲氧羰基-5，-氟-4-甲基联苯、N-溴代丁二酰亚胺(NBS)和偶氮二异丁腈(AIBN)，在环己烷存在下，其中，2，-甲氧羰基-5，-氟-4-甲基联苯与环己烷的用量是lg:2025ml，7585"C加热回流反应2.5~3.5小时后，冷却后抽滤，固体用二氯甲烷洗涤，收集有机相，旋干后柱层析分离，得2'-甲氧羰基-5'-氟-4-溴甲基联苯；柱层析分离中填充剂为硅胶H，洗脱剂为石油醚乙酸乙酯的混合溶剂，混合比例范围为150:1~跳1;(3)2-丁基-4-氯-H[2，-甲酸甲酯基-5，-氟-(l，l，-联苯)-4-基]甲基卜lH-咪唑-5-甲醛的制备氮气保护下，摩尔比为0.70.8:0.60.7:1的2-丁基-4-氯-lH-咪唑-5-甲醛、2，-甲氧羰基-5，-氟-4-溴甲基联苯和碳酸钾，在乙腈存在下，其中，乙腈与2-丁基-4-氯-lH-咪晔-5-甲醛的用量比是25ml:7.58mmo1，4050'C搅拌反应45小时后抽滤，滤渣用乙酸乙酯洗漆，收集滤液，旋干，柱层析分离，得2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸甲酯基-5，-氟-(1，1，-联苯)-4-萄甲基)-lH-咪唑-5-甲醛；柱层析分离中填充剂为硅胶H，洗脱剂为石油醚乙酸乙酯的混合溶剂，混合比例范围为3:11:1。(4)2-丁基-4-氯-1-{[2'-甲酸甲酯-5，-氟-(l,l'-联苯)-4-基]甲基HH-咪唑-5-甲酸的制备0.80.9mmol2-丁基-4-氯-l-([2，-甲酸甲酯基-5，-氟-(1，1，-联苯)-4-基]甲基}-111-咪唑-5-甲醛和1015ml正丁醇，在室温下滴加1015ml的次氯酸钠和磷酸二氢钠的混合水溶液，其中，次氯酸钠和磷酸二氢钠的浓度分别是0.70.8mol/L和0.50.6mol/L，搅拌1215小时，分离有机相，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，重结晶，得白色固体2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸甲酯-5'-氟-(l,l'-联苯)-4-基]甲基HH-咪唑-5-甲酸;(5)2-丁基-4-氯-1-{[2'-甲酸-5'-氟-(1,l'-联苯)-4-基]甲基)-lH-咪唑-5-甲酸的制备摩尔比为1:34的2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸甲酯-5，-氟-(l，1，-联苯)-4-基]甲基)-lH-咪唑-5-甲酸和氢氧化钠，在甲醇水溶液下，607(TC搅拌反应3~5小时，其中，甲醇水溶液是体积比为3:1的甲醇与水的混合液，甲醇水溶液与氢氧化钠的用量比是lml:0.60.7mg，旋干甲醇，水相用乙醚洗涤后加质量浓度为2%4%的稀盐酸，有白色物质析出，抽滤，固体物质干燥后，重结晶，得2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸-5，-氟-(1,l，-联苯M-基]甲基)-lH-咪唑-5-甲酸白色晶体。本发明的2'-羧基-5'-氟联苯咪唑衍生物可用于制备预防或治疗高血压、冠心病、心脑肾血管疾病以及肺动脉高压等疾病的药物。本发明的有益效果1)化合物(I)主要是对联苯环的修饰，相对于而言，羧酸取代的联苯原料易得，制备简单，可以大大降低成本，同时又保证了联苯邻位酸性基团的存在，不影响药物的活性；2)从氯沙坦的构效关系分析，联苯邻位基团的酸性越强其生物活性越强，因此，在联苯环上引入F原子，利用F原子的吸电子效应影响苯甲酸的酸性；3)在自发性高血压大鼠实验中，初步发现该类化合物具有一定的降压效果。图1是2-丁基-4-氯-1-{[2'-甲酸-5'-氟-(1,r-联苯)-4-萄甲基)-lH-咪唑-5-甲酸的^NMR谱图；图2是2-丁基-4-氯-l-U2'-甲酸-5'-氟-(l,l，-联苯)-4-基]甲基HH-咪唑-5-甲酸的质谱图。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例12-丁基4-氯-1-{[2，-甲酸-5，-氟-(1，1，-联苯)-4-基l甲基HH-咪唑-5-甲醇的制备(1)2，-甲氧羰基-5，-氟-4-甲基联苯的制备250ml反应瓶中加入4-甲基苯硼酸G.40g，25mmo1)，2-溴-5-氟苯甲酸甲酯(6.99g，3Ommo1)，过量K2C03(17.3g，0.175mol)，Ph3P(4.8g，O扁mol)和Pd(OAC)2(2.8g，0.013mol)，加入150mL1,4-二氧六环与蒸馏水的混合溶剂(体积比为4:1)。100105。C加热回流2小时，分离有机相，浓縮后硅胶H柱层析分离(洗脱剂是石油醚乙酸乙酯=150:1100:1)，得产物(f)4.62g，产率75.8%。(2)2'-甲氧羰基-5，-氟-4-溴甲基联苯的制备50ml反应瓶中加入2，-甲氧羰基-5，-氟-4-甲基联苯(lg，4.10mmo1)，NBS(0.77g，4.30mmo1)，AIBN(96mg，0.58mmmo1)，环己烷20ml，7585。C加热回流3小时，停止反应，冷却后抽滤，固体用二氯甲垸洗涤，收集有机相，旋干后硅胶H柱层析分离(洗脱剂是石油醚乙酸乙酯=150:1100:1)，得产物()0.85g，产率64.23%。(3)2-丁基-4-氯-l-U2，-甲酸甲酯基-5，-氟-(l,l，-联苯)-4-基l甲基卜lH-咪唑-5-甲醛的制备100ml干燥反应瓶中加入2-丁基-4-氯-lH-咪唑-5-甲醛(1.44g,7.70mmo1)，2，-甲氧羰基-5，-氟-4-溴甲基联苯(2.26g,7mmo1)，碳酸钾(1.45g,10.5mmo1)，乙腈25ml，氮气保护，405(TC搅拌反应45h后，抽滤，滤渣用乙酸乙酯洗涤，收集滤液，旋干，硅胶H柱层析分离(洗脱剂是石油醚乙酸乙酯=3:11:1)，得产物0.93g，收率31.14%。2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸甲酯基-5，-氟-(1，r-联苯)-4-基]甲基卜m-咪唑-5-甲醛，结构式'HNMR(400MHz,CDC13，S):9.94(s,1H,CHO),7.58(dd,1H,J尸9.2Hz,J产2.8Hz，Ph)，7.22~7.32(m,4H，Ph),7.08(d，2H，风4Hz,Ph),5.23(s,2H,PhCH2),3.67(s，3H,PhCOOCH3),2.67(t,2H，J:8.0Hz,CH2CH2CH2CH3),1.71(quint,2H,/=8.0Hz，CH2Q^CH2CH3)，1.37(sext，2H,J:8.0Hz,CH2CH2CH2CH3),0.90(t,3H，J^8.0Hz，CH2CH2CH2CIi2);13CNMR(400MHz，CDC13，S):182.97，169.50,165.32，162.85，152.70，143.07,140.18，136.69,135.71,134.85，134.33,131.63,128.31,127.27,120.87，119.36,54.50,49.22,32.01，31.53,29.86,24.69,15.99,2.3;MS(ESI)m/z:429[M+l]+，461[M+CH3OH]+,483[M+CH3ONa]+。(4)2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸甲酯-5，-氟-(l，1，-联苯)-4-基]甲基)-lH-咪唑-5-甲酸的制备50ml烧瓶中加入2-丁基-4-氯-l-([2，-甲酸甲酯基-5，-氟-(l，l，-联苯)-4-基]甲基HH-咪唑-5-甲醛(0.37g,0.86匪o1)，正丁醇(10ml)，室温下滴加次氯酸钠(0.67g,7.37mmo1)、磷酸二氢钠(0.68g,5.65mmo1)的水溶液10ml，搅拌1214h后，分离有机相，水相用乙酸乙酯萃取，合并有机层，干燥，重结晶，得白色固体0.34g，收率卯％。2-丁基-4-氯-1-{[2，-甲酸甲酯-5'-氟-(l,1，-联苯)-4-基]甲基卜lH-咪唑-5-甲酸，结构式iHNMR(400MHz,CDC13，S):7.57(dd,1H，Jl=8.8Hz,J2=2.8Hz,Ph)，7.22~7.32(m,4H，Ph),7.08(d,2H,J=8.0Hz,Ph)，5.23(s,2H,PhCH2),3.66(s,3H,COOCH2),2.73(t,2H,J=8.0Hz:CH2CH7CH,CHQ,1.65(quint，2H，J=8.0Hz，CH7CH2CH7CHA1.36(sext，2H,J=8.0Hz:CH7CHCH2CHQ,0.86(t,3H，J=8.0Hz,CH2CH2CH2￡H2);，其图谱如下:13CNMR(400MHz，CDC13，S):169.57,165.30，162.83，151.396,142.97，140.23,135.88,134.81,134.42,131.57,128.29,120.95,119.43,54.52,49.56,31.82,29.63，24.63,15.99;MS(ESI)m/z:445[M+l]+。(5)2-丁基-4-氯-1-{2，-甲酸-5，-氟-(1，1，-联苯)-4-基l甲基)-lH-咪唑-5-甲酸的制备50ml反应瓶中加入2-丁基-4-氯-1-[[2'-甲酸甲酯-4'-氟-(1，l'-联苯)-4-基]甲基]-lH-咪唑-5-甲酸(49mg，O.llmmol)，氢氧化钠(13.2mg，0.33mmo1)，甲醇15ml，蒸馏水5ml，6070'C搅拌反应35小时，旋干甲醇，水相用乙醚洗涤后加质量浓度为2%4%的稀盐酸中和，有白色物质析出，抽滤，固体物质干燥后，重结晶，得白色晶体45mg，收率95%。2-丁基-4-氯-1-{[2'-甲酸-5'-氟-(1,r-联苯)-4-基]甲基HH-咪唑-5-甲酸，其结构式为F，其图谱如下iHNMR(400MHz,DMSO，S):7.49(dd,1H，J尸9.2Hz,J^1.6Hz,Ph),7.36~7.45(m，Ph),7.32(d，2H,J二8.0Hz，Ph),7.05(d,2H,J=12.8Hz,Ph),5.30(s,2H,PhCH2),2.63(t，2H，7=7.6Hz，Q^CH2CH2CH3),1.55(quint,2H,/=7.6Hz，CH2CH2CH2CH3)，1.28(sext，2H，7=7.6Hz,CH2CH2CHaCH3)，0.82(t,3H,^7.6Hz，CH2CH2CH2CH2);13CNMR(400MHz，DMSO，S):170.92，165.44,164.99,162.55,151.21,142.10，139.52,137.52,136.93，135.45,131.67,129.37,128.76，125.19，120.62,120.41,118.63，118.40，49.14,31.47,29.25,24.41,16.35;MS(ESI)m/z:431[M+l]+。自发性高血压大鼠(SHR)30只，健康，罕$各半(雌性未孕)，购自上海必凯实验动物有限公司，合格证号沪动合证证字第152号；受试药品降压活性化合物2-正丁基-3-{[2'-羧基-4，-氟(1，1-联苯)-4-基]甲基}1，3-二氮杂螺环(4,4)壬实施例2降压药物活性筛选实验实验动物:-1-烯-4-酮(化合物l)阳性对照药氯沙坦，临床用量为50mg/kg，设人体重为60kg，人用剂量为5/6mg/kg，换算为大鼠剂量5mg/kg，氯沙坦分子量为461，换算成摩尔浓度为1.86mol/L，阳性对照药相当于药效实验中剂量(低、中、高剂量之比为l:2:4)，设定为3.72mol/L。实验方法选用30只自发性高血压大鼠(SHR)模型，分为空白组，阳性对照组，化合物l给药组，用小动物无创伤血压换能器经载波放大之后连至MPA-HBBS型清醒自由活动动物血压记录分析系统(上海，奥尔科特)，四肢皮下插入针形电极，连接到交流放大器用于监测标准二导联心电图。尾袖发测量清醒大鼠尾动脉平均动脉压(MAP)，收縮压(SAP)，舒张压(DAP)，心率(HR)及心电图(ECG)。试验时将化合物1配制成浓度为3.72mol/L的水溶液。阳性对照药氯沙坦片，试验时配制成浓度为3.72mol/L的水溶液。各组动物每天按上述剂量灌胃给药1次，空白组给同体积的生理盐水，连续用药2周。血压测定采用无创测量大鼠血压的尾动脉搏动法，所有大鼠分别于给药前及给药后1个月各测血压l次，每次血压取3次测量的平均值。血浆内皮素(ET)、NO的测定采用2ml，注入含10%的EDTA二钠30和抑肽酶40的试管中，混匀，4°C，3000r/min离心10min，分离血浆，放一20。C的冰箱内保存。测定前使样本置于室温中复融，再次4'C，3000r/min离心5mn，取上清测定，然后按个自试剂说明书严格操作。数据处理所有实验数据均以均数士标准差(S土SD)表示，用药后各组间血压、NO及ET比较用完全随机设计的方差分析，如各组总体均数不等，再用多个样本均数建的多重比较，即q检验进行处理。实验结果血压结果以治疗前血压差值作为变量，各组均值比较有显著差异(PO.01)，再经多样本均数的q检验证明，化合物1组及阳性对照与空白组比较有显著差异(P<0.01)，化合物1组与阳性对照组比较无显著差异(PO.01)，说明化合物1具有明显的降压作用,活性与氯沙坦相当。一氧化氮(NO)结果用药后NO值经方差分析(P<0.05)，说明各组之间比较有显著差异，再经多样本均数q检验证明，化合物l组明显优于其他组(PO.05)内皮素(ET)结果用药后ET值经方差分析(PO.01)，说明各组之间比较有极显著差异，再经多样本均数的q检验证明，化合物l组明显优于其他组(PO.01)。表l.实验后各组血压、一氧化氮(NO)及内皮素(ET)值比较(；±N=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注与空白组比较**P<0.01;与阳性对照组比较#P<0.05，##P<0.0权利要求1.一种2’-羧基-5’-氟联苯咪唑衍生物，其特征在于该衍生物是2-丁基-4-氯-1-{[2’-甲酸-5’-氟-(1，1’-联苯)-4-基]甲基}-1H-咪唑-5-甲酸，其结构如下所示id="icf0001"file="A2008100406000002C1.tif"wi="65"he="47"top="43"left="29"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>该化合物熔点168～170℃。全文摘要本发明涉及一种2′-羧基-5′-氟联苯衍生物、其制备及应用，该衍生物是2-丁基-4-氯-1-{[2′-甲酸-5′-氟-(1，1′-联苯)-4-基]甲基}-1H-咪唑-5-甲酸，其结构为右式(I)；制备是由2′-羧基-5′-氟联苯与取代咪唑基亲核取代生成，通过suzuki偶联合成2′-甲氧羰基-5′-氟-4-甲基联苯，然后用NBS溴代后和咪唑环反应后，水解制备相应的化合物；该化合物可用于制备预防或治疗高血压、冠心病、心脑肾血管疾病以及肺动脉高压等疾病的药物。文档编号A61P9/12GK101318932SQ200810040600公开日2008年12月10日申请日期2008年7月15日优先权日2008年7月15日发明者吕书晴,李铁军,杨晓霞,杨樟卫,王来兴,婷辛,彦邱,陈志龙,陶苏江申请人:东华大学;陈志龙