专利名称：：流脑白百破联合疫苗的制作方法
技术领域：
：本发明
技术领域：
可涉及流行病学、医学微生物学、免疫学、疫苗学、预防医学，通过免疫接种来预防一种或数种病原菌引起的疾病。本发明涉及一种全新的联合疫苗，一种流脑疫苗与白百破疫苗的联合，可同时预防A、B、C、W135、Y血清型的流行性脑膜炎球菌、白喉、百日咳、破伤风杆菌的感染。本发明联合疫苗还进一步包含乙肝病毒抗原和灭活脊髓灰质炎病毒抗原，可进一步预防乙型肝炎病毒和脊髓灰质炎病毒的感染。联合疫苗可以减少免疫针次、降低免疫成本、增加疫苗的可接受性，从而扩大免疫覆盖率。
背景技术：
：脑膜炎双球菌主要导致人体流行性脑脊髓膜炎的发生，也可引起肺炎等其他呼吸道疾病。病菌存在于病人或带菌者的鼻咽分泌物中，通过呼吸道传染。流脑的流行有明显的季节性和周期性，冬春季发病率高，一般从每年1月份开始发病，三四月份是高峰期。据统计，每年的2到4月，"流脑"的发病率占全年的60%左右，其特点是起病急、病情重、变化多、传播快、流行广，来势凶猛，病死率高，危害性大。人群对流脑球菌普遍易感，在各年龄组人群中均可发生，但更好发于小年龄段儿童，患者主要是15岁以下的少年儿童，特别是6个月至2岁的婴幼儿。近年来，临床上也发现有成年人患此病，而成人的病死率咼o流脑有13个血清群型，其中A、B、C和W135型可引起爆发流行。在非洲和亚洲地区，多年来，流脑都以A型占优势，尤其在西起塞内加尔、东至埃塞俄比亚的非洲撒哈拉地区"流脑带"上，亚洲的蒙古国也于1994一1995年报道过一次大流行。但近来，其他血清型的流行也时有发生，2000—2001年，数百名到沙特阿拉伯的麦加朝圣者感染了W135引起的流脑，2002年，在非洲的布基纳法索，13000名患者感染了W135血清型流脑，造成1500名死亡。仅2002年一年，世界卫生组织报道的流脑病例达到223000例。流脑不仅发生于亚洲和非洲，在北美和欧洲也很常见，尤其是B群，占流脑病例的一半以上。Y群也可以在儿童和少年中引起脑膜炎，但与其他型别相比，它更易在大年龄群中引起肺炎，近年来，Y群血清型引起的疾病在美国逐年抬头。我国也属流脑的高发地区，近30多年的资料表明，A群菌一直是我国流行的优势菌，发病率在非流行年为3—10A0万，小流行年为30—50/10万，大流行年高达100—500/10万以上。从上世纪90年代以来，B群流脑所占比例逐渐在扩大，尤其在发达地区，流行性脑膜炎由A群向B群的菌型变迁越来越明显。2000年，C群流脑在国内也呈现扩大趋势，2004年一2005年，我国共有7起群体性流脑流行，其中5起由C群引起，1起为A群，l起不详。针对流脑的疫苗主要有流脑多糖疫苗、流脑多糖蛋白结合疫苗和流脑外膜蛋白疫苗，针对的血清型包括A、B、C、W135和Y。多糖疫苗由于在2岁以下儿童中免疫原性弱，并不适合在这个年龄群的常规免疫接种。多糖蛋白质结合疫苗将多糖抗原刺激的免疫应答从T细胞非依赖型转化为T细胞依赖型，可以用到更小的年龄群中，国际上已有针对A、C、W135和Y的流脑结合疫苗。B群多糖由于结构与人体神经组织中的一个成份类似，在人体中基本不产生免疫应答，但一种改进的B群多糖蛋白结合疫苗也正在研制中。流脑的外膜蛋白也是一种保护性抗原，B群流脑外膜蛋白疫苗已在南美多个国家注册使用，在挪威的使用也充分证明了疫苗的安全性和保护效果。国外也有多个机构在开展A群以及其他血清群型的外膜蛋白疫苗研制。目前，我国已批准上市的流脑疫苗包括A群流脑多糖疫苗、A+C流脑多糖疫苗、ACW135Y流脑4价多糖疫苗、AC流脑结合疫苗，A群流脑结合疫苗、ACW135Y四价流脑结合疫苗、B群流脑结合疫苗、A群流脑外膜蛋白疫苗、B群流脑外膜蛋白疫苗在积极开发中。白百破是针对白喉、百日咳和破伤风的预防制剂，国内外多年的使用充分证明了它的安全性和保护效果，一直是国家免疫规划中，基础免疫所包含的制品。白百破疫苗成份包括白喉类毒素、百日咳成份、5破伤风类毒素，根据百日咳成份是灭活全细胞亦或是组分而区分为两种白百破疫苗，一种是全细胞白百破疫苗，另一种是无细胞白百破疫苗。在我国，全细胞白百破疫苗和无细胞白百破疫苗都有产品上市。多联多价是疫苗发展的一个方向。随着科学技术的发展，在更安全、有效、质量可控的换代疫苗如雨后春^般出现的同时，越来越多的针对其他传染病的新疫苗也被开发出来。新疫苗的出现扩大了人类预防传染病的种类，但随之而来的是免疫次数的大幅度提升，需要通过疫苗的联合使用而降低免疫的针次。联合疫苗方便了免疫接种，强化了疫苗接种的可接受性，也降低了接种成本，可提高疫苗的接种覆盖率o流脑白百破联合疫苗是一种全新的组合，可同时预防不同型流脑双球菌、白喉棒状杆菌、百日咳博德特氏菌、破伤风梭菌的感染。流脑A、B、C、W135、Y多糖或蛋白疫苗单价或多价与白百破联合，尤其是多糖抗原以偶联于载体蛋白质的形式存在，可使用到广泛的人群上，可方便今后国家将其纳入到扩大的免疫规划中。
发明内容本发明涉及一种全新的联合疫苗，一种以B群脑膜炎球菌外膜蛋白为核心的并包含其它群脑膜炎球菌偶联或非偶联多糖抗原与白百破疫苗的联合，可同时预防A、B、C、W135、Y血清型的流行性脑膜炎球菌、白喉、百日咳、破伤风杆菌的感染，满足上述需要。本发明联合疫苗还进一步包含乙肝病毒抗原和灭活脊髓灰质炎病毒抗原，可进一步预防乙型肝炎病毒和脊髓灰质炎病毒的感染。一方面，一种联合疫苗，其特征在于，所述的联合疫苗包括流脑疫苗和百白破疫苗，其中所述流脑疫苗是以B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物为核心的并包含其它群脑膜炎球菌与一蛋白载体偶联或非偶联的多糖抗原所组成。其中，所述多糖抗原来源于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌中的1种、2种、3种或4种荚膜多糖抗原和B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物；所述B群外膜蛋白复合物是来源于B群脑膜炎球菌不同型菌株的l价、2价或多价外膜蛋白复合物。进一步，所述荚膜多糖以与一载体蛋白偶联形式或非偶联形式存在，所述偶联形式是多6糖与载体蛋白质以化学共价键连接，形成结合状态。该载体蛋白质选自破伤风类毒素(TT)、白喉类毒素(DT)、突变白喉毒素中的交叉反应物质(CRM9，CRM197)、百日咳类毒素(PT)、B群流脑外膜蛋白质复合物(OMP)、流脑64K外膜蛋白、流感嗜血杆菌P1、P2、P4、P5、P6外膜蛋白、黏附素、重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)、白蛋白或匙兰蛋白。另一方面，本发明涉及一种联合疫苗，其中进一步包含乙肝病毒抗原，组成流脑一百白破一乙肝联合疫苗。再一方面，本发明涉及一种联合疫苗，其中还进一步包含脊髓灰质炎病毒抗原，组成流脑一百白破一脊灰联合疫苗。又一方面，本发明涉及一种联合疫苗，其中还进一步包含乙肝病毒抗原、脊髓灰质炎病毒抗原，组成流脑一百白破一乙肝一脊灰联合疫苗。又一方面，本发明涉及联合疫苗，其中将各种成份分别分装于两个独立容器中，于免疫时进行混合再接种；或数个成份制备成独立疫苗，于免疫时进行混合再接种；或在制备时就分装于一个容器中成为多联疫苗。又一方面，本发明的联合疫苗是液体剂型、冻干剂型、胶囊剂型、片剂、丸剂中的任何一种或数种。又一方面，本发明的联合疫苗进一步包含铝盐佐剂和其他佐剂，其中所述铝盐佐剂选自氢氧化铝、硫酸铝或磷酸铝。再一方面，本发明的联合疫苗是通过选自如下的方式进行免疫注射、口服、黏膜喷雾或放置。换言之，本发明重点发现在于第一、发明者发现，将含有A群脑膜炎球菌多糖、C群脑膜炎球菌多糖和B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物的流脑疫苗与百白破疫苗配制成联合疫苗后，可增强百日咳抗原的免疫原性；第二、发明者发现，将含有与一蛋白载体偶联的A群脑膜炎球菌多糖、与一蛋白载体偶联C群脑膜炎球菌多糖和B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物的流脑疫苗与百白破疫苗配制成联合疫苗后，可增强百曰咳抗原的免疫原性；第三、发明者发现，在联合疫苗中增加W135群脑膜炎球菌多糖和Y群脑膜炎球菌多糖后，仍可发现上述第一和第二所述的对百日咳抗原免疫原性的增强效应；第四、发明者发现，将流脑、百白破和乙肝病毒抗原配制成流脑一百白破一乙肝联合疫苗时，除上述增强百日咳抗原的免疫原性外，还可增强乙肝病毒抗原的免疫原性；第五、发明者发现，将流脑、百白破和灭活脊髓灰质炎病毒配制成流脑一百白破一脊灰联合疫苗时，除上述增强百日咳抗原的免疫原性外，还可增强脊灰病毒抗原的免疫原性；第六、发明者发现，将流脑、百白破、乙肝病毒抗原和灭活脊髓灰质炎病毒配制成流脑一百白破一乙肝一脊灰联合疫苗时，除上述增强百日咳抗原免疫原性外，还可增强乙肝病毒抗原和脊灰病毒抗原的免疫原性；第七、发明者发现，将流脑和百白破配制成流脑一百白破联合疫苗，流脑各抗原的免疫原性在联合后没有被降低；第八、发明者发现，将流脑、百白破和乙肝病毒抗原配制成流脑一百白破一乙肝联合疫苗，流脑各抗原的免疫原性在联合后没有被降低；第九、发明者发现，将流脑、百白破和灭活脊髓灰质炎病毒抗原配制成流脑一百白破一脊灰联合疫苗，流脑各抗原的免疫原性在联合后没有被降低；第十、发明者发现，将流脑、百白破、乙肝病毒抗原和灭活脊髓灰质炎病毒抗原配制成流脑一百白破一乙肝一脊灰联合疫苗，流脑各抗原的免疫原性在联合后没有被降低；第十一、发明者发现，将流脑、百白破、乙肝病毒抗原和灭活脊髓灰质炎病毒抗原分别配制成流脑一百白破联合疫苗、流脑一百白破一乙肝联合疫苗、流脑一百白破一脊灰联合疫苗、流脑一百白破一乙肝一脊灰联合疫苗各抗原的免疫原性彼此间没有干扰。需要强调的是，本发明并非是将流脑、百白破、乙肝病毒抗原和8灭活脊髓灰质炎病毒抗原分别简单地混合成流脑一百白破联合疫苗、流脑一百白破一乙肝联合疫苗、流脑一百白破一乙肝一脊灰联合疫苗，而是依据上述十一项独立发现构成了本发明的核心内容。本发明的联合疫苗可以减少免疫针次、降低免疫成本、增加疫苗的可接受性，从而扩大免疫覆盖率。本发明提供来源于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌中的荚膜多糖和来源于B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物与白百破成份所组成的联合疫苗。所述多糖以独立状态或者以偶联状态存在于联合疫苗中。所述多糖可以以A、C、W135、Y群中任意单一成份，或者二个成份的不同组合，或者三个成份的不同组合，或者四个成份的不同组合存在于联合疫苗中。所述B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物是来源于B群脑膜炎球菌不同型菌株的1价、2价、或多价外膜蛋白抗原。所述白百破成份以全细胞白百破成份或者无细胞白百破成份存在于联合疫苗中。本发明提供来源于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌中的荚膜多糖和来源于B群脑膜炎球菌的外膜蛋白复合物和来源于白百破成份所组成的联合疫苗。所述多糖是A、C、W135、Y血清群型中任意单一型别，或者二个型别的不同组合，或者三个型别的不同组合，或者四个型别的不同组合存在于联合疫苗中。所述外膜蛋白复合物是B血清群型中任意单一型别，或者二个型别的不同组合，或者三个型别的不同组合，或者四个型别，或者多个型别的不同组合存在于联合疫苗中。所述白百破成份以全细胞白百破成份或者无细胞白百破成份存在于联合疫苗中。本发明提供来源于A、B、C、W135、Y群脑膜炎球菌中的荚膜多糖或者外膜蛋白和来源于白百破成份所组成的联合疫苗。所述多糖以独立状态或者以偶联状态存在于联合疫苗中。所述多糖或者外膜蛋白是以A、B、C、W135、Y群中任意单一成份为多糖、其余型别为外膜蛋白，或者二个成份为多糖、其余型别为外膜蛋白，或者三个成份为多糖、其余型别为外膜蛋白、或者四个成份为多糖、其余型别为外膜蛋白的不同组合存在于联合疫苗中。所述白百破成份以全细胞白百破成份或者无细胞白百破成份存在于联合疫苗中。本发明所述脑膜炎球菌外膜蛋白包括如下亚型，P1.2、P1.2.5、P1.4、9P1.5、P1.5.2、P1.5c、Pl.5c.10、P1.7.16、P1.7.16b、P1.9、P1.15、P1.9.15、PI.12.13、PI.13、P1.14、Pl.21.16、Pl.22.14。本发明所述多糖偶联的载体蛋白优选破伤风类毒素(TT)、白喉类毒素(DT)、突变白喉毒素中的交叉反应物质(CRM9，CRM197)、百曰咳类毒素(PT)、B群流脑外膜蛋白质复合物(OMP)、流脑64K外膜蛋白、流感嗜血杆菌P1、P2、P4、P5、P6外膜蛋白、黏附素、重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)、白蛋白、匙兰蛋白中的任何一种。本发明联合疫苗中独立存在的荚膜多糖抗原剂量为每个型别1一lOOug，优选5—80ug，更优选10—60yg，最优选30—50yg。偶联多糖抗原剂量为每个型别0.1—50ug，优选0.5—30yg，更优选1一20ug，最优选l一10tig。外膜蛋白抗原剂量为每个型别l一100ug，优选5—80ug，最优选10—50"g。本发明联合疫苗还可包含佐剂成份，包括铝佐剂，如氢氧化铝、磷酸铝、硫酸铝等;水包油或细菌细胞壁成份，如MF59、SAE、RAS等;皂角类佐剂，如QuilA、QS-21。细菌脂多糖或合成类脂A佐剂;细胞因子，如白细胞介素、干扰素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、共刺激分子B7-1、B7-2等;毒素亚单位类佐剂，如霍乱毒素及亚单位、百日咳毒素、大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)等。本发明联合疫苗中，疫苗剂型包括液体剂型、冻干剂型、胶囊剂型、片剂、丸剂中的一种，优选剂型是液体剂型、冻干剂型、胶囊剂型。还可以是联合疫苗中部分成份为一种剂型、部分成份为另外一种剂型，优选方案是部分成份为一种剂型、部分成份为另外一种剂型，联合后使用，更优选方案是偶联或非偶联多糖为冻干剂型、DTP和/或外膜蛋白成份为液体剂型，在使用时，由液体成份溶解冻干成份，联合免疫。本发明联合疫苗接种途径包括肌肉注射、皮下注射、皮内注射、口服，还包括口腔、鼻腔、肛门、阴道黏膜途径。具体实施例方式本发明可通过如下实施例进一步了解，所述实施例选择了几个优选实施方案，仅为了更好展示本发明，而非对
发明内容进行限制。10实施例A群流脑多糖+DTP四联疫苗(疫苗1)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖疫苗和吸附白百破联合疫苗，以吸附白百破联合疫苗稀释A群脑膜炎球菌多糖疫苗后免疫使用。每剂量含30ugA群脑膜炎球菌多糖，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例2A群流脑多糖+DTPa四联疫苗(疫苗2)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖疫苗和吸附无细胞白百破联合疫苗，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释A群脑膜炎球菌多糖疫苗后免疫使用。每剂量含30UgA群脑膜炎球菌多糖，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例3A+C群流脑多糖+DTP五联疫苗(疫苗3)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，按药典要求制备A+C群流脑多糖疫苗，以吸附白百破联合疫苗稀释A+C群流脑多糖疫苗免疫使用。每剂量含50"gA群脑膜炎球菌多糖，含50ygC群脑膜炎球菌多糖，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例4A+C群流脑多糖+DTPa五联疫苗(疫苗4)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，按药典要求制备A+C群流脑多糖疫苗，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释A+C群流脑多糖疫苗免疫使用。每剂量含50ugA群脑膜炎球菌多糖，含50UgC群脑膜炎球菌多糖，无细胞白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例5ACW135Y群流脑多糖+DTP七联疫苗(疫苗5)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，按药典要求制备ACW135Y群流脑多糖疫苗，以吸附白百破联合疫苗稀释ACW135Y群流脑多糖疫苗免疫使用。每剂量含50"gA群脑膜炎球菌多糖，含50txgC群脑膜炎球菌多糖，含50tigW135群脑膜炎球菌多糖，含50ugY群脑膜炎球菌多糖，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例6ACW135Y群流脑多糖+DTPa七联疫苗(疫苗6)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，按药典要求制备ACW135Y群流脑多糖疫苗，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释ACW135Y群流脑多糖疫苗免疫使用。每剂量含50ugA群脑膜炎球菌多糖，含50ngC群脑膜炎球菌多糖，含50ygW135群脑膜炎球菌多糖，含50ygY群脑膜炎球菌多糖，无细胞白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例7A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗(疫苗7)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以吸附白百破联合疫苗稀释A群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例8A群流脑结合疫苗+DTPa四联疫苗(疫苗8)12依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释A群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例9A+C群流脑结合疫苗+DTP五联疫苗(疫苗9)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以吸附白百破联合疫苗稀释A群和C群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例10A+C群流脑结合疫苗+DTPa五联疫苗(疫苗10)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释A群和C群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ygA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10PgC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例11A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗(疫苗11)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、B群、C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，B群流脑荚膜多糖可经化学修饰，以吸附白百破联合疫苗稀释A群、B群和C群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5一10ixgA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugB群脑膜炎球菌多糖13抗原，含5—lOygC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例12A+B+C群流脑结合疫苗+DTPa六联疫苗(疫苗1"依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、B群、C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，B群流脑荚膜多糖可经化学修饰，以吸附白百破联合疫苗稀释A群、B群和C群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例13ACW135Y群流脑结合疫苗+DTP七联疫苗(疫苗13)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、C群、W135群和Y群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以吸附白百破联合疫苗稀释ACW135Y群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10UgA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ngW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例14ACW135Y群流脑结合疫苗+DTPa七联疫苗(疫苗14)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、C群、W135群和Y群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释ACW135Y群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，一含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10iigW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗14原，无细胞白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例15ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTP八联疫苗(疫苗15)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、B群、C群、W135群、Y群流脑结合疫苗(或氨还原法)，B群流脑荚膜多糖可经化学修饰，以吸附白百破联合疫苗稀释A群、B群、C群、W135群和Y群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ligA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例16ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTPa八联疫苗(疫苗16)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、B群、C群、W135群、Y群流脑结合疫苗(或氨还原法)，B群流脑荚膜多糖可经化学修饰，以吸附无细胞白百破联合疫苗稀释A群、B群、C群、W135群和Y群流脑结合疫苗后免疫使用。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ngC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ixgW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例17A群流脑多糖+DTP四联疫苗(疫苗17)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖和白百破各组分，加入或不加佐剂，以乳糖为冻干保护剂，制备冻干剂型。每剂量含30ygA群脑膜炎球菌多糖，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。15实施例18A群流脑多糖+DTPa四联疫苗(疫苗18)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖和白百破各组分，加入或不加佐剂，以乳糖为冻干保护剂，制备冻干剂型。每剂量含30ugA群脑膜炎球菌多糖，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例19A+C群流脑多糖+DTP五联疫苗(疫苗19)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖、C群脑膜炎球菌多糖和白百破各组分，加入或不加佐剂，以乳糖为冻干保护剂，制备冻干剂型。每剂量含50ugA群脑膜炎球菌多糖，含50ugC群脑膜炎球菌多糖，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例20A+C群流脑多糖+DTPa五联疫苗(疫苗20)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖、C群脑膜炎球菌多糖和白百破各组分，加入或不加佐剂，以乳糖为冻干保护剂，制备冻干剂型。每剂量含50wgA群脑膜炎球菌多糖，含50ngC群脑膜炎球菌多糖，无细胞白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例21ACW135Y群流脑多糖+DTP七联疫苗(疫苗21)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖、C群脑膜炎球菌多糖、W135群脑膜炎球菌多糖、Y群脑膜炎球菌多糖和白百破各组分，加入或不加佐剂，以乳糖为冻干保护剂，制备冻干剂型。每剂量含50ugA群脑膜炎球菌多糖，含50"gC群脑膜炎球菌多糖，含50ugW135群脑膜炎球菌多糖，含50ugY群脑膜炎球菌多糖，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例22ACW135Y群流脑多糖+DTPa七联疫苗(疫苗22)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备A群脑膜炎球菌多糖、C群脑膜炎球菌多糖、W135群脑膜炎球菌多糖、Y群脑膜炎球菌多糖和白百破各组分，加入或不加佐剂，以乳糖为冻干保护剂，制备冻干剂型。每剂量含gA群脑膜炎球菌多糖，含50"gC群脑膜炎球菌多糖，含50ugW135群脑膜炎球菌多糖，含50ugY群脑膜炎球菌多糖，无细胞白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例23A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗(疫苗23)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分和A群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例24A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗(疫苗24)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分和A群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例25A群流脑结合疫苗+DTPa四联疫苗(疫苗25)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，17以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分和A群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗。每剂量含5—10ygA群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例26A群流脑结合疫苗+DTPa四联疫苗(疫苗26)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分和A群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为A群流脑结合疫苗+DTP四联疫苗。每剂量含5—10ngA群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例27A+C群流脑结合疫苗+DTP五联疫苗(疫苗27)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物和C群结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物和C群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为A+C群流脑结合疫苗+DTP五联疫苗。每剂量含5一10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10UgC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例28A+C群流脑结合疫苗+DTP五联疫苗(疫苗28)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物和C群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分和A群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为A+C群流脑结合疫苗+DTP五眹疫苗。每剂量含5_10iigA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。18实施例29A+C群流脑结合疫苗+DTPa五联疫苗(疫苗29)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物和C群结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物和C群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为A+C群流脑结合疫苗+DTPa五联疫苗。每剂量含5一10UgA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygC群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例30A+C群流脑结合疫苗+DTPa五联疫苗(疫苗30)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物和C群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分和A群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为A+C群流脑结合疫苗+DTPa五联疫苗。每剂量含5—10iigA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygC群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例31A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗(疫苗31)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物和C群结合物(或氨还原法)，B群荚膜多糖可经过修饰，将白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ngB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。19实施例32A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗(疫苗32)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物和C群结合物(或氨还原法)，B群荚膜多糖可经过修饰，将白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10PgB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例33A+B+C群流脑结合疫苗+DTPa六联疫苗(疫苗33)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备无细胞白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物和C群结合物(或氨还原法)，B群荚膜多糖可经过修饰，将无细胞白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗。每剂量含5—10ygA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10pgB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例34A+B+C群流脑结合疫苗+DTPa六联疫苗(疫苗34)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备无细胞白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物和C群结合物(或氨还原法)，B群荚膜多糖可经过修饰，将无细胞白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为A+B+C群流脑结合疫苗+DTP六联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygC群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例35ACW135Y群流脑结合疫苗+DTP七联疫苗(疫苗35)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为ACW135Y群流脑结合疫苗+DTP七联疫苗。每剂量含5—10"gA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—l(UigY群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例36ACW135Y群流脑结合疫苗+DTP七联疫苗(疫苗36)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为ACW135Y群流脑结合疫苗+DTP七联疫苗。每剂量含5—10ygA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例37ACW135Y群流脑结合疫苗+DTPa七联疫苗(疫苗37)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、21A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为ACW135Y群流脑结合疫苗+DTPa七联疫苗。每剂量含5—10ygA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—lOiigW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10PgY群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例38ACW135Y群流脑结合疫苗+DTPa七联疫苗(疫苗38)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为ACW135Y群流脑结合疫苗+DTPa七联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ligW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例39ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTP八联疫苗(疫苗39)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，B群流脑荚膜多糖可经修饰，将白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTP八联疫苗。每剂量含5—10ygA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。22实施例40ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTP八联疫苗(疫苗40)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTP八联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ligB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ligW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。实施例41ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTPa八联疫苗(疫苗41)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，制备为ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTPa八联疫苗。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5一10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10lxgY群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例42ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTPa八联疫苗(疫苗42)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备白百破各组分，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群流脑结合物、B群流脑结合物、23C群流脑结合物、W135群流脑结合物和Y群流脑结合物(或氨还原法)，将白百破组分、A群流脑结合物、B群流脑结合物、C群流脑结合物、W135群流脑结合物、Y群流脑结合物混合，加入佐剂，以乳糖为冻干保护剂，冻干制备为ABCW135Y群流脑结合疫苗+DTPa八联疫苗。每剂量含5—lOiigA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10jigB群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。实施例43ABC群流脑+DTP六联疫苗(疫苗43)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10PgC群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50"gB群流脑外膜蛋白(OMV)，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，联合疫苗各抗原彼此间无干扰。实施例44ABC群流脑+DTPa六联疫苗(疫苗44)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygC群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50ugB群流脑外膜蛋白(OMV)，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，眹合疫苗各抗原彼此间无干扰。实施例45ABCW135Y群流脑+DTP八联疫苗(疫苗45)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、C群、W135群和Y群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10txgC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ngW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50ugB群流脑外膜蛋白(OMV)，白百破剂量按药典中吸附白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，联合疫苗各抗原彼此间无千扰。实施例46ABCW135Y群流脑+DTPa八联疫苗(疫苗46)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群、C群、W135群和Y群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ygC群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugW135群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugY群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50ugB群流脑外膜蛋白(OMV)，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，联合疫苗各抗原彼此间无干扰。实施例47联合疫苗其他剂型(疫苗47)各型流脑多糖成份、DTP成份冻干后，加入直连淀粉、乳糖等辅料，还可加入说明书所述佐剂，制备成液体、冻干剂型外的其他剂型。25实施例48ABC群流脑+DTPa+乙肝七联疫苗(疫苗48)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗和乙肝病毒疫苗，以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10ugA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ligC群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50ugB群流脑外膜蛋白(OMV)，5—10ug乙肝病毒表面抗原，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，乙肝病毒抗原的免疫原性被增强，联合疫苗各抗原彼此间无干扰。实施例49ABC群流脑+DTPa+灭活脊灰七联疫苗(疫苗49)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗；依据WHO灭活脊髓灰质炎疫苗制造检定规程制备灭活纯化脊灰病毒疫苗；以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10ngA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10txgC群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50ugB群流脑外膜蛋白(omv)，含脊髓灰质炎i、n、m型病毒抗原含1o—2ooiu，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，脊灰病毒抗原的免疫原性被增强，联合疫苗各抗原彼此间无干扰。实施例50ABC群流脑+DTPa+乙肝+灭活脊髓灰质炎八联疫苗(疫苗50)依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百26破联合疫苗和乙肝病毒疫苗；依据WHO灭活脊髓灰质炎疫苗制造检定规程制备灭活纯化脊灰病毒疫苗；以溴化氰活化、ADH衍生法制备A群和C群流脑结合疫苗(或氨还原法)，以超滤法制备B群流脑外膜蛋白复合物(OMV)，辅以佐剂，制备成液体或冻干制剂。也可将上述成份分别制备，使用前混合，共同接种。每剂量含5—10"gA群脑膜炎球菌多糖抗原，含5—10ugC群脑膜炎球菌多糖抗原，含30—50UgB群流脑外膜蛋白(OMV)，5—10ug乙肝病毒表面抗原，含脊髓灰质炎I、II、III型病毒抗原含10—200IU，无细胞白百破剂量按药典中吸附无细胞白百破联合疫苗规定。经动物效力试验表明，百日咳抗原的免疫原性被增强，乙肝抗原的免疫原性被增强，脊灰病毒抗原的免疫原性被增强，联合疫苗各抗原彼此间无干扰。实验例实施例1联合疫苗免疫小鼠后抗体应答状况依据中华人民共和国药典三部(2005年版)制备吸附无细胞白百破联合疫苗和乙肝病毒疫苗；依据WHO灭活脊髓灰质炎疫苗制造检定规程制备灭活纯化脊灰病毒疫苗；依据实施例34、38配制联合疫苗。以人用剂量的1/10免疫14一18克的NIH小鼠，免疫3针，免疫间隔2周，免疫途径为皮下，第3针免疫后1周，采血测定各抗体滴度。测定方法选用间接ELISA，包被抗原选用未加佐剂的各单价疫苗成份。结果表现为各组份免疫原性被增强，测定结果见表1。实施例2联合疫苗各组份免疫原性相互影响采用动物试验评估本发明提供的联合疫苗在联合后各组份的免疫原性相互影响效果，联合疫苗中各疫苗组份的免疫原性检测方法如下流脑疫苗免疫原性检测方法用1/4剂量，按0、14天程序免疫小鼠两针，皮下接种，于28天采血，分离血清，用ELISA法测定小鼠血清抗体滴度。.百白破疫苗免疫原性检测方法依据中华人民共和国药典三部(2005年版)进行。乙型肝炎疫苗免疫原性检测方法依据中华人民共和国药典三部(2005年版)进行。灭活脊髓灰质炎疫苗免疫原性检测方法于大鼠肌肉注射联合疫苗，免后21天采血，分离血清，测定中和效价。结果表明本发明的联合疫苗各组份抗原的免疫原性在联合后没有被降低，即以B群脑膜炎球菌外膜蛋白为核心的并包含其它群脑膜炎球菌偶联或非偶联多糖抗原的流脑疫苗对百日咳抗原、白喉类毒素抗原、破伤风类毒素抗原、乙肝病毒抗原、脊髓灰质炎病毒抗原的免疫原性没有干扰作用。进一步显示，在上述联合后百日咳抗原、乙肝病毒抗原、脊髓灰质炎病毒抗原的免疫原性还被加强，试验结果见表2和表3。28<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>权利要求1、一种联合疫苗，其特征在于，所述的联合疫苗包括流脑疫苗和百白破疫苗，其中所述流脑疫苗是以B群脑膜炎球菌外膜蛋白复合物为核心的并包含其它群脑膜炎球菌与一蛋白载体偶联或非偶联的多糖抗原所组成。2、根据权利要求1所述的联合疫苗，其特征在于，所述多糖抗原来源于选自如下的一种或多种:A、C、W135、Y群脑膜炎球菌中的1种、2种、3种或4种荚膜多糖抗原。3、根据权利要求1所述的联合疫苗，其中所述B群外膜蛋白复合物是来源于B群脑膜炎球菌不同型菌株的1价、2价或多价外膜蛋白复合物。4、根据权利要求2所述的联合疫苗，其中所述荚膜多糖以与一载体蛋白偶联形式或非偶联形式存在。5、根据权利要求4所述的联合疫苗，其中所述偶联形式是多糖与载体蛋白质以化学共价键连接，形成结合状态。6、根据权利要求5所述的联合疫苗，其中所述载体蛋白质选自破伤风类毒素、白喉类毒素、突变白喉毒素中的交叉反应物质、百日咳类毒素、B群流脑外膜蛋白质复合物、流脑64K外膜蛋白、流感嗜血杆菌Pl、P2、P4、P5、P6外膜蛋白、黏附素、重组铜绿假单胞菌外毒素A、白蛋白或匙兰蛋白。7、根据权利要求1所述的联合疫苗，其中所述白百破疫苗是全细胞白百破疫苗或无细胞白百破疫苗。8、根据权利要求1所述的联合疫苗，其中进一步包含乙肝病毒抗原，组成流脑一百白破一乙肝联合疫苗。9、根据权利要求1所述的联合疫苗，其中还进一步包含脊髓灰质炎病毒抗原，组成流脑一百白破一脊灰联合疫苗。10、权利要求1所述的联合疫苗，其中还进一步包含乙肝病毒抗原、脊髓灰质炎病毒抗原，组成流脑—百白破一乙肝一脊灰联合疫苗。11、根据权利要求1、8、9、10任一项所述的联合疫苗，其中将各种成份分别分装于各个独立容器中，于免疫时进行混合再接种；或数个成份制备成独立疫苗，于免疫时进行混合再接种；或在制备时就分装于一个容器中成为多联疫苗。12、根据权利要求1、8、9、10任一项所述的联合疫苗，其中该联合疫苗是液体剂型、冻干剂型、胶囊剂型、片剂、丸剂中的任何一种或数种。13、根据权利要求1、8、9、10任一项所述的联合疫苗，其中该联合疫苗进一步包含铝盐佐剂和其他佐剂。14、根据权利要求13所述的联合疫苗，其中所述铝盐佐剂选自氢氧化铝、硫酸铝或磷酸铝。15、根据权利要求1、8、9、10任一项所述的联合疫苗，其中该联合疫苗是通过选自如下的方式进行免疫注射、口服、黏膜喷雾或放置。全文摘要本发明涉及流脑白百破联合疫苗，具体地，本发明涉及以B群脑膜炎球菌外膜蛋白为核心的并包含其它群脑膜炎球菌偶联或非偶联多糖抗原的流脑疫苗与白百破组成的联合疫苗。本发明联合疫苗还进一步包含乙肝病毒抗原和灭活脊髓灰质炎病毒抗原。本发明的联合疫苗适合在人群中预防流行性脑膜炎球菌和白百破相关病原菌引起的感染，进而还可预防乙肝病毒、脊髓灰质炎病毒引起的感染，并通过多联多价疫苗免疫接种减少免疫针次，降低疫苗接种副反应发生频率。文档编号A61P31/12GK101559223SQ200810087598公开日2009年10月21日申请日期2008年4月18日优先权日2008年4月18日发明者蒋仁生申请人:重庆智仁生物技术有限公司