专利名称：：兴奋性氨基酸前药的制作方法兴奋性氨基酸前药本申请是国际申请日为2003年6月6日，国际申请号为PCT/US03/15405,发明名称为"兴奋性氨基酸前药"，国家申请号为03813511.6的进入中国国家阶段的国际专利申请的分案申请。本发明提供合成的兴奋性氨基酸前药(式I化合物)及其制备方法。本发明进一步涉及其使用方法，及包括式I化合物的、用于治疗神经障碍和精神疾病的药物组合物。
背景技术：
：神经系统或精神疾病，例如焦虑症的治疗与代谢型的兴奋性氨基酸受体的选择性激活有关。例如，1997年11月18日出版的美国专利No.5，688，826C826专利)公开了(+)-4-氨基-2-磺酰双环[3.1.0己烷-4，6画二羧酸作为活性mGluR2受体激动剂。此外，1999年9月28日出版的美国专利No.5，958，960C960专利)公开了(+)-2-氨基-4-氟双环3.1.0己烷-2，6-二羧酸作为活性mGluR2受体激动剂.本发明提供mGluR2受体激动剂化合物的前药形式，其可提高各母体药物的体内药效，并产生更高的母体药物口腔接触。本发明的化合物代表了保持以前公开的mGluR2受体激动剂的安全性和疗效，并增强口服生物利用度的最佳进展。系列号为PCT/US01/45866和PCT/US02/00488的PCT申请公开了合成的兴奋性氨基酸前药及其制备方法。发明概述本发明提供式I的化合物或其可药用的盐.200810096216.7说明书第2/133页其中，A为H画(QV;Q每次出现时独立选自氨酰基；P为1-10的整数；X为O、S、SO、S02或CR3r4;r3为氟、X，OR5、S03H、四唑-5-基、CN、P03R62、羟基或N02，且W为氢；或rs和r"各自代表氟；或113和114一起代表=0、=NOR7或cr8r^或113或114中的一个代表氨基而另一个代表羧基；或W代表]\3、(CH2)mCOOR5a、(CH2)mP03R6a2、NHCONHR5b或NHS02R5c，且R4代表氢；或R3和R4—起代表-CHCOOR5b、=CHP03R6a2或=CHCN;X，代表键、CH2或CO;m为1-3的整数；R5、R5a、R5b、R5e、R7、118和119独立为氬原子；任选取代的(1-6C)烷基；任选取代的(2-6C)烯基；任选取代的(2-6C)炔基；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；非芳碳环基团；非芳杂环基团；与一个或两个单环芳基或杂芳基稠合的非芳单环碳环基团；或与一个或两个单环芳基或杂芳基稠合的非芳单环杂环基团；W和R"独立代表氢或(1-6C)烷基；R"为氢或氟；和Ru为氢、氟或羟基；本发明还提供了式I化合物，其中取代基如上面定义，但化合物不是其中X为CR"R4，其中113为氟，且R"为氢，p为l，且Q为L-丙氨酰基的化合物；或其可药用的盐。本发明还提供了式I化合物，其中A为H-(QV;Q每次出现时独7立选自氨酰基；P为l-3的整数；X为O、S、SO、SCh或CR3R4;R3为氟或羟基，且W为氢；或W和议4一起代表=0;R"为氢或氟；且R"为氢、氟或羟基；或其可药用的盐.本发明还提供了式I化合物，其中A为H-(Q)p.;Q为L-丙氨酰基；p为l;X为CR3R4;R3为氟且R4为氢；R"为氢；且R"为氢；或其可药用的盐。值得一提的是，式I化合物含有至少四个不对称碳原子。本发明包括式I化合物的所有立体异构形式，包括各单独的对映异构体及其混合物，例如4826专利中公开的化合物的前药形式，如lSR,4RS，5RS,6RS-4-氨基-(2-磺酰基双环[3.1.0己烷)-4，6-二羧酸。本发明又一方面提供了药物制剂，其包括结合可药用的栽体、稀释剂或赋型剂的式I化合物或其可药用的盐。本发明又一方面提供了一种影响患者体内cAMP连接的代谢型谷氨酸受体的方法，其包括将药物有效量的式I化合物给药于需要受调制的兴奋性氨基酸神经传递的患者。本发明还提供了一种式I化合物的用途，用于制造影响患者体内cAMP耦联的代谢型谷氨酸受体的药物。本发明又一方面提供了给予有效量的式n化合物的方法，包括将药物有效量的式i化合物给药于需要受调制的兴奋性氨基酸神经传递的患者.本发明还提供了一种式i化合物的用途，用于制造给予有效量的式n化合物的药物。本发明又一方面提供了一种治疗患者神经障碍的方法，包括将药物有效量的式i化合物给药于需要该治疗的患者。本发明还提供了一种式i化合物的用途，用于制造治疗患者神经障碍的药物。本发明又一方面提供了一种治疗患者精神疾病的方法，包括将药物有效量的式i化合物给药于需要该治疗的患者。本发明还提供了一种式i化合物的用途，用于制造治疗患者精神疾病的药物.式i化合物可按照类似于化学领域已知的制备结构类似的杂环化合物的方法制备，或按照本文描述的新方法制备。这种方法及用于制备上述式i化合物的有用中间体在下面步骤中进行说明，其中，除非另有说明，否则一般基团的含义为此处的定义.本发明提供了一种制备式i化合物的方法，包括用相应的式in的氨酰基酰化式(ii)的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(III)其中PgN为氮保护基团，A如上述定义；然后，对于上述任意一个步骤，如果使用保护基团对官能团进行保护，则除去保护基团；然后，对于上述任意一个步骤如果需要式I化合物的可药用的盐，则使碱形式的这种式I化合物与提供可药用的平衡离子的酸进行反应；或对于含有酸部分的式I化合物，使酸形式的这种化合物与提供可药用的阳离子的碱反应；或对于式I的两性离子化合物，中和酸加合盐形式或碱加合盐形式的式I化合物；或采用任何其它传统方法。本发明还提供了式I化合物，其中X为CH2，R^为氟，其它变量如上述定义。发明详述已发现本发明化合物为代谢型谷氨酸受体选择性激动剂化合物的有用的前药，并因此用于治疗中枢神经障碍，如神经障碍，例如神经退化病，并作为抗精神病药、抗焦虑药、药物戒除、抗抑郁药、抗惊厥药、止痛药和止吐药。值得一提的是，式I化合物含有至少四个不对称碳原子，三个位于环丙烷环上，一个为氨基酸基团的oc-碳原子。因此，本发明的化合物可存在于光学纯形式、外消旋形式或非对映异构体混合物中，或从中分离出来。氨基酸部分优选具有天然氨基酸构型，即，相对于D-甘油醛的L-构型。本发明包括式I化合物的可药用的盐。这些盐可与分子的酸性或碱性部分结合存在，且可作为酸加合盐，伯、仲、叔或季铵盐，碱金属或碱土金属盐存在.通常，酸加合盐可通过酸与式I化合物的反应来制备。另外，酸加合盐还可这样制备使倒数第二步的化合物(被保护的中间体)与适当当量的酸反应生成相应的盐形式，该盐然后再反应制备式I化合物或其它盐。碱金属和碱土金属盐通常由希望的金属的氢氧化物与式I化合物反应制备。一些特定盐的晶型带来特定的制剂优点。非晶体的无定形化合物可具有吸湿性。有时更希望获得晶型的药物化合物，因为其显示出有利的固态性质。通常用于形成这种盐的酸包括无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硝酸、疏酸或磷酸，或有机酸，如有机羧酸，例如羟基乙酸、马来酸、羟基马来酸、反丁烯二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、水杨酸、邻乙酰氧基苯甲酸，或有机磺酸，2-羟基乙磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸或乙磺酸。除了可药用的盐，本发明还包括其它盐。其可作为纯化化合物的中间体，或作为制备其它可药用的酸加合盐的中间体，或用于鉴别、表征或纯化。本发明中，式I化合物包括其溶剂化物。尤其，式I化合物包括其水合物。而且，本发明还预见了国际申请PCT/JP99/03984、PCT/JP99/00324和PCT/JP01/05550中公开的氟化合物的前药。分别参见国际公开专利WO/0012464、WO/9938839和WO/0200605。例如，本发明预见了1S，2R，5S，6S國2-氨基-6-氟-4-氧代双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸；lS，2R，4S，5S，6S-2-氨基-6-氟-4-羟基双环[3丄0己烷-2,6-二羧酸；lS，2R，3R,5S,6S-2-氨基-3-氟双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸；和lS,2R，3S，5S，6S-2-氨基-6-氟-3-羟基双环3.1.0己烷-2，6-二羧酸。各种生理机能已显示出受过量或不当的兴奋性氨基酸传递的刺激影响。相信本发明的式I化合物具有治疗哺乳动物与这种症状相关的各种神经障碍的能力，包括急性神经障碍，如心脏旁路手术和移植后的脑缺陷、中风、大脑局部缺血、脊髓创伤、头部创伤、产期缺氧、心动停止和低血糖神经损伤。相信式I化合物具有治疗各种慢性神经200810096216.7说明书第6/133页障碍的能力，如阿尔茨海默氏病、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩性侧索硬化、艾滋病诱发的痴呆、眼创伤和视网膜病、认知疾病及先天性和药物诱发的帕金森氏病.本发明还提供了治疗这些疾病的方法，包括向需要该治疗的患者给予有效量的式I化合物或其可药用的盐.本发明的式I化合物治疗患者的其它各种与谷氨酸机能障碍有关的神经障碍，包括肌肉痉挛、惊厥、偏头痛、尿失禁、疼痛、经前烦躁(PDD)、精神病(如精神分裂症)、药物耐受、病理性退瘾、停止和成瘾(例如，尼古丁、鸦片剂、可卡因、苯二氮萆和酒精)、焦虑和相关疾病、呕吐、脑水肺、慢性疼痛和迟发性运动障碍。式I化合物还可用作抗抑郁药和止痛药。因此，本发明还提供了治疗这些疾病的方法，包括向需要该治疗的患者给药有效量的式I化合物或其可药用的盐.下面的定义用于阐明此处所用的各种术语的意义和范围。此处所用的常用术语具有其通常的意义.术语"影响"指式n化合物作为兴奋性氨基酸受体的激动剂。术语"兴奋性氨基酸受体"指代谢型谷氨酸受体，一种经GTP-结合蛋白质与细胞效应器偶合的受体.术语"cAMP耦联的代谢型谷氨酸受体"指经偶合抑制腺普酸环化酶活性的代谢型受体。术语"神经障碍"指急性和慢性神经变性病症，包括心脏旁路手术和移植后的脑缺陷、脑缺血(例如，心动停止引起的中风)、脊髓创伤、头部创伤、阿尔茨海默氏病、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩性侧索硬化、艾滋病诱发的痴呆、产期缺氧、低血糖神经损伤、眼创伤和视网膜病、认知疾病及先天性和药物诱发的帕金森氏病。该术语还包括其它由谷氨酸机能障碍引起的神经系统病症，包括肌肉痉挛、偏头痛、尿失禁、药物耐受、病理性退瘾、停止和成瘾(即，鸦片剂、苯二氮萆、尼古丁、可卡因、或酒精)、戒烟、呕吐、脑水肺、慢性疼痛、睡眠障碍、惊厥、图雷特综合征(Tourette，ssyndrome)、注意力缺陷障碍和迟发性运动障碍。术语"精神疾病"指急性和慢性精神病症，包括精神分裂症、焦虑和相关疾病(如，恐慌和与压力有关的心血管疾病)、抑郁、双相性精神障碍、精神紊乱、强迫性神经失调、广泛性焦虑症、急性压力性疾病和恐慌疾病.此处使用的术语"有效量"指化合物的量或剂量，基于患者单次ii或多次的给药剂量，其对患者的诊断或治疗提供需要的效果。作为本领域熟练技术人员，主治医师通过使用已知方法并观察类似情况下的结果很容易确定其有效量。在确定给药化合物的有效量和剂量中，主治医师要考虑很多因素，包括但不限于哺乳动物种类；其身材大小、年龄和总的健康状况；涉及的具体疾病；疾病的涉及程度或严重程度个体患者的反应；给药的特定化合物；给药方式；给药制剂的生物利用度特性；选择的药剂服用法；伴随的药疗法的使用；及其它相关情况。例如，通常每日剂量中可含有约5mg-约300mg活性成分。可通过各种途径进行化合物的给药，包括口服、直肠、经皮、皮下、静脉内、肌内、口或鼻内途径。另外，化合物可通过连续输液进行给药。此处使用的术语"患者"指哺乳动物，如小鼠、豚鼠、大鼠、狗或人.应该理解优选的患者是人。此处使用的术语"进行治疗"(或"治疗")包括其通常认可的含义，其包括阻止、防治、遏止和緩解、停止或逆转所患病症的进行。这样，本发明的方法包括治疗性给药和预防性给药.此处使用的一般化学术语具有其通常的含义.例如，术语"(1-6C)烷基"意指直链或支链基团。(l-6C)烷基基团的示例值包括(l-4C)烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基和异丁基.术语"(2-6C)烯基"包括(2-4C)烯基，如烯丙基，术语"(2-6C)炔基"包括(2-4C)炔基，如丙炔基o术语"任选取代的(1-6C)烷基基团"、"任选取代的(2-6C)烯基基团"和"任选取代的(2-6C)炔基基团"中所用的术语"任选取代的"，在此处表示可存在一个或多个取代基，优选l-3个，所述取代基选自这样的原子和基团其存在于式I化合物中时，不妨碍式I化合物调节代谢型谷氨酸受体的功能。存在于任选取代的(1-6C)烷基基团、任选取代的(2-6C)烯基基团和任选取代的(2-6C)炔基基团中的原子和基团的例子为，任选取代的芳基基团、任选取代的杂芳基基团、非芳碳环基团、非芳杂环基团、与一个或两个单环芳基或杂芳基稠合的非芳单环碳环基团和与一个或两个单环芳基或杂芳基稠合的非芳单环杂环基团.术语"杂芳基"包括含有l-4个选自氧、硫和氮的杂原子的芳香族5-6元环，和含有l-4个选自氧、硫和氮的杂原子的5-6元环与苯环或含有1-4个选自氧、硫和氮的杂原子的5-6元环稠合组成的芳香族双环基团。杂芳基的例子为呋喃基、噻吩基、噶唑基、异噹唑基、噻唑基、异噻唑基、咪唑基、嘧啶基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噹唑基、苯并噻唑基和吲哚基.术语"芳香族基团"包括苯基和多环芳香族碳环，如萘基。术语"任选取代的杂芳基团"和"任选取代的芳香基团"中所用的术语"任选取代的"，在此处表示可存在一个或多个取代基，所述取代基选自这样的原子和基团其存在于式I化合物中时，不妨碍式I化合物调节代谢型谷氨酸受体的功能。存在于任选取代的杂芳基团或任选取代的芳香基团中的原子和基团的例子为，氨基、羟基、硝基、卣代、(l-6C)烷基、(l-6C)烷氧基、(l-6C)烷疏基、羧基、(l-6C)烷氧羰基、氨基甲酰基、(l-6C)烷酰基氨基、(l-6C)烷基磺酰基、(l-6C)烷基磺酰氨基、任选取代的苯基、苯氧基、苯硫基、苯磺酰基、苯磺酰基氨基、甲苯磺酰氨基、(l-6C)氟烷基和(1-6C)氟烷氧基，具体例子为氨基、羟基、氟、氯代、溴代、碘代、甲基、甲氧基、甲硫基、羧基、乙酰氨基、甲磺酰基、硝基、乙酰基、苯氧基、苯硫基、苯磺酰基、甲磺酰氨基和三氟甲基。任选取代的芳香基团的示例为l-萘基、2-萘基、苯基、2-联苯基、3-联苯基、4-联苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、2，4-二氟苯基、3，4-二氟苯基、五氟苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2，4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3，5-二氯苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3-二甲氧基苯基、2,5-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3,5-二甲氧基苯基、2-三氟甲基苯基、3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、2-氟-3-三氟甲基苯基、3-三氟甲基-4-氟苯基、3-三氟甲基-5-氟苯基、2-氟-5-三氟甲基苯基、2-苯氧基苯基、3-苯氧基苯基、3-羧基苯基和4-羧基苯基.术语"非芳碳环基团"包括单环基团，例如(3-10C)环烷基、如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，和稠合多环基团，例如1-金刚烷基或2-金刚烷基，l-十氢萘基(decalyl)，2-十氢萘基，4a-十氢萘基，双环[3，3，0辛-l-基、-2-基或-3-基，双环[4，3，0]壬画1画基、國2画基、画3画基或-7-基，双环[5，3，0]癸画1画基、-2國基、-3画基、-4誦基、-8-基或-9-基和双环[3,3,1壬-l-基、-2-基、-3-基或-9-基。术语"非芳杂环基团"包括含一或两个杂原子的芳香族4-7元环，该杂原子选自氧、硫和氮，例如氮杂环丁烷-l-基或-2-基，吡咯烷-l-基、國2國基或画3画基，派咬画1國基、-2-基、國3腸基或誦4画基，六氢氮杂誦l國基、画2國基、-3-基或-4-基，氧杂环丁烷-2-基或-3-基，四氢呋喃-2-基或-3-基，四氢p比喃國2國基、誦3隱基或画4画基，hexahydrooxepin画2画基、-3誦基或國4画基，硫丁环-2-基或-3-基，四氢噻吩-2-基或-3-基，四氢噻喃-2-基、-3-基或-4-基，六氢硫杂萆(hexahydrothiepin)画2國基、-3-基或-4國基，旅漆國l-基或画2画基，吗啉-l-基、-2-基或-3-基，硫代吗啉-l-基、-2-基或-3-基，四氢嘧啶-l-基、-2-基、-4-基或-5-基，咪唑啉-l-基、-2-基或-4-基，咪唑烷-l-基、-2-基或-4-基，嗜、唑啉-2-基、-3-基、-4-基或-5-基，嗜、唑烷-2-基、-3-基、-4-基或-5-基，噻唑啉-2-基、-3-基、-4-基或-5-基，或噻唑烷-2-基、-3-基、-4-基或-5-基。术语"与一个或两个单环芳基或杂芳基稠合的非芳单环碳环基团"包括与苯环或含有1-4个选自氧、硫和氮的杂原子的芳香族5-6元环稠合的(3-10C)环烷基，例如茚满基、1，2,34-四氢化萘-1-基或-2-基，5，6，7，8-四氢喹啉-5-基、-6-基、-7-基或-8-基，5，6，7，8-四氢异喹啉-5-基、-6-基、画7陽基或-8-基，4，5,6，7-四氢苯并噻吩-4-基、-5-基、-6-基或-7-基，二苯并[2,3，6，7]环庚-l-基或-4-基，二苯并2，3，6，7]环庚-4-烯-l-基或-4-基，或9國贫基。术语"与一个或两个单环芳基或杂芳基稠合的非芳单环杂环基团"包括含有一或两个选自氧、硫和氮的杂原子的4-7元环，其与苯环或含有l-4个选自氧、硫和氮杂原子的芳香族5-6元环稠合，例如2，3-二氢苯并吡喃-2-基、-3-基或-4-基，氧杂蒽-9-基，1，2，3，4-四氢喹啉-1-基、國2誦基、-3-基或-4國基，9，10-二氢吖啶國9-基或-10國基，2，3画二氢苯并噻喃國2-基、-3-基或-4-基，或二苯并噻喃-4-基。此处使用的，由"PgN"表示的术语"氮保护基团"指意图保护或阻塞氮基团在合成步骤中进行不希望的反应的那些基团。适当的所用氮保护基团的选择要取决于随后被保护的反应的条件，其对本领域普通净支术人员来说是公知的。T.W.Greene和P.G.M.Wuts，ProtectiveGroupsInOrganicSynthesis,第3版(JohnWiley&Sons,纽约(1999))中公开了常用的氮保护基团。优选的氮保护基团为叔丁氧羰基。此处使用的，由"Pge"表示的术语"羧基保护基团"指化合物的其它官能团进行反应时，常用于阻塞或保护羧酸基团的一种羧酸酯衍生物.具体例子包括，例如甲基、乙基、叔丁基、卡基、甲氧基甲基、三甲基甲硅烷基等。这种基团的其它例子可在T.W.Greene和P.G.M.Wuts,ProtectingGroupsinOrganicSynthesis,第3版(JohnWiley&Sons,纽约(1999))中找到。优选的羧基保护基团为甲基和乙基。使用传统的不影响分子其它部分的方法使该酯分解。术语"羟基保护基团"表示有机化学领域熟练技术人员理解的、Greene和P.G.M.Wut.在第2章中描述的基团。代表性的羟基保护基团包括，例如，醚基团、取代的乙醚基团、异丙瞇基团、苯和取代苯醚基团、苄基和取代苄基醚基团、烷基甲硅烷基醚基团、酯保护基团等。所用羟基保护基团的种类要求并不严格，只要衍生的羟基基团在随后的中间体分子其它位置的反应中稳定，且可在适当时候被选择除去而对包括任何其它羟基保护基团的剩余分子不产生干扰。术语"氨酰基"指由氨基酸衍生而来的氨酰基，该氨基酸选自此处定义的天然或非天然氨基酸组成的基团。天然氨基酸根据侧链上的取代基可为中性、正性或负性。"中性氨基酸"指含有不带电的侧链取代基的氨基酸。示范性中性氨基酸包括丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸和谷氨酰胺和天门冬酰胺。"正氨基酸"指生理pH下侧链取代基为正电性的氨基酸。示范性正氨基酸包括赖氨酸、精氨酸和组氨酸。"负氨基酸"指生理pH下侧链取代基为净负电性的氨基酸。示范性负氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸.优选的氨基酸为ot-氨基酸.最优选的氨基酸为a-碳原子上为L-立体化学的cx-氨基酸。示范性天然oc-氨基酸为翔氨酸和异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、天门冬酰胺、谷氨酰胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、天冬氨酸和谷氨酸。"非天然氨基酸"指无核酸密码子的氨基酸.非天然氨基酸的例子包括，例如，上述天然a-氨基酸的D-异构体；Aib(氨基丁酸)、P200810096216.7说明书第11/133页Aib(3-氨基异丁酸)、Nva(正翔氨酸)、P-Ala、Aad(2-氨基己二酸)、PAad(3-氨基己二酸)、Abu(2-氨基丁酸)、Gaba(Y-氨基丁酸)、Acp(6-氨基己酸)、Dbu(2，4-二氨基丁酸)、a-氨基庚二酸、TMSA(三甲基甲硅烷基-Ala)、alle(别-异亮氨酸)、Nle(正亮氨酸)、叔-Leu、Cit(瓜氨酸)，Orn、Dpm(2，2，-二氨基庚二酸)、Dpr(2,3-二氨基丙酸)、oc-或PNal、Cha(环己基-Ala)、羟基脯氨酸、Sar(肌氨酸)、O-甲基酪氨酸、苯基甘氨酸等；环氨基酸；1W烷基化氨基酸，其中N^烷基化氨基酸为Na-(I-IOC)烷基氨基酸，例如MeGly(N、甲基甘氨酸)、EtGly(N。-乙基甘氨酸)和EtAsn(N、乙基天门冬酰胺)，和a-碳上含有两个侧链取代基的氨基酸。示范性非天然ct-氨基酸包括D-丙氨酸、D-亮氨酸和苯基甘氨酸。此处使用的天然和非天然氨基酸及其残基的命名遵循IUPAC-IUB的生物化学命名联合委员会(JCBN)建议的命名惯例，正如其在欧洲生物化学杂志(EuropeanJournalofBiochemistry),138,9-37(1984)，"NomenclatureandSymbolismforAminoAcidandPeptides(Recommendations，1983)"中所阐述的.如本说明书及所附权利要求书中使用的氨基酸及其残基的命名和缩写与上述习惯命名有所不同，则将对不同的命名和缩写进行澄清。虽然所有式I化合物都是有用的活性mGluR2受体激动剂，但优选某些化合物.下面段落定义了优选种类。A)Q为甘氨酰基、丙氨酰基、缬氨酰基、亮氨酰基、异亮氨酰基、脯氨酰基、苯丙氨酰基、酪氨酰基、色氨酰基、甲硫氨酰基、赖氨酰基或丝氨酰基。B)Q为丙氨酰基，C)Q为甲疏氨酰基。D)P为1。E)P为2。F)x为so2.G)X为CR3R4。H)ie为氟，且w为氢。I)113为羟基，且W为氢。J)R3和R4—起代表-0。K)R"为氢.16L)R"为氟。M)R"为氢。N)化合物为游离碱。O)化合物为盐.P)化合物为盐酸盐。Q)化合物为曱磺酸盐。R)化合物为乙磺酸盐(esylate)。S)化合物为甲苯磺酸盐。前面段落可结合起来定义另外优选的化合物种类。式I化合物对于治疗哺乳动物疾病有用，优选的哺乳动物为人。本发明的化合物可使用多种方法制备，下列方案中说明了其中一些方法。制备式I化合物所需的各步骤的特定顺序取决于合成的特定化合物、起始化合物和取代部分的相对不稳定性.为了清楚起见，下列方案中的一些取代基可能已被除去，且该取代基并不意图以任何方式限制对方案的教导.正如本领于普通技术人员所理解的，取代基R15和R"代表适当的侧链，以形成希望的氨酰基。如果不能商购获得，则可由选自有机和杂环化学标准技术的方法制备下列方案中的必要起始原料，该技术与已知的、结构相似化合物的合成类似，该方法在制备和实施例中有所描述，且还包括新方法。方案1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>如上面方案1中所示，式I化合物在体内经酶或水解过程进行转化。尤其，式I化合物的晶体形式可根据下面方案2中概述的途径制备。方案2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>(I)二酯保护的式(iii)的肽酰化合物在适当溶剂，如THF或THF/水溶剂中，与适当的碱，如氢氧化锂或氢氧化钠作用得到二酸保护的式(iv)的肽酰化合物。式(iv)化合物可在适当溶剂中用适当的酸进行脱保护。这种条件可产生式I盐所示的相应二酸肽酰化合物的酸盐，其可为无定形固体，或直接为结晶固体，其中X"代表对应的阴离子。对于无定形固体，其随后可由适当溶剂中结晶出来。通过例如乙酸钠试剂引入阳离子物质从而可形成羧酸盐。最后，用适当的碱处理结晶盐化合物可得到两性化合物。例如，二酸保护的式(iv)的肽酰化合物在适当溶剂中用氯化氢气体处理可得到脱保护的无定形固体盐酸盐.然后无定形盐酸盐化合物可从丙酮和水中结晶出来生成结晶盐酸盐化合物。对于直接形成的结晶200810096216.7说明书第14/133页固体，反应混合物经过滤可得到结晶盐，用氢氧化钠处理结晶盐酸盐可得到两性化合物。本领域普通技术人员应理解的是，式I化合物可经一个步骤制备而不分离所示中间体。方案3NH(COCHRlfcNH)p.'PgN使用适当的偶合试剂用式m化合物酰化式(ii)的二酯，以得到式(m)的二酯保护的肽酰化合物.另外，使用式m化合物的酰氯也能获得这种转换。适当的肽偶合试剂包括双环己基碳二亚胺(DCC)、l-(3-二曱基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)、氯甲酸异丁酯、氯膦酰二苯酯、2-氯-4,6-二甲氧基-l，3，5-三嗪(CDMT)、双(2-氧代-3-哺唑烷基)膦酰氯和苯并三唑-l-基氧化三(二甲氨基)铸六19方案4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>上面的方案4中，用适当的羧基保护试剂，如催化盐酸或亚疏酰氯和甲醇或乙醇处理式n的二酸化合物，得到了相应的式(ii)的二酯.另外，可先用氮-保护试剂，如BOC20处理式n化合物，以得到氮-保护的式(i)化合物。接下来可在碱，如碳酸钾存在下，用羧基保护试剂，如，碘曱烷处理式(i)化合物，然后再用氮脱保护试剂，如盐酸或三氟乙酸处理式(i)化合物，以获得式(ii)化合物。此外，本领域普通技术人员应认识到，取决于x，还可能需要适当的保护试剂。例如，如果X代表CR3114，RS代表羟基，且W代表氢，那么本领域普通技术人员应理解的是，进行上述任何一个方案之前都需要适当的羟基保护基团。式n化合物在本领域已知。例如，可在美国专利5，688，826C826专利)和5，958，960C960专利)中找到这些化合物的制备。针对式n化合物的合成途径，已经对之前公开的方法进行了各种改进。该改进包括硫和醇氧化，以及下面描迷的各种中间体的光学拆分。第一种改进涉及'826专利第8栏，22-34行和第7栏中所述的转化，200810096216.7说明书第16/133页从第33栏(式V)开始，涉及'826专利的式VD化合物HHIOH的氧化以形成'826专利的式V化合物。已发现，现有技术中已知的许多氧化方法中，优选的是三氧化硫-吡咬络合物或三氟乙酸酐与DMSO的结合。其次，对于拆分4826专利的式m化合物，其中，112代表羧基基团，参考第8栏，3-7行，和第6栏第1行开始，已发现优选(R)-ot-甲基千基胺和奎宁。特别优选(R)-oc-甲基千基胺，再次，已发现，参考'826专利第8栏，39-53行，'826专利中X为硫的式ffl硫化物进行氧化形成'826专利中X为磺酰基的式m化合物时，优选碱性水溶液体系和过氧化氢与催化剂结合使用。下面实施例进一步说明了本发明的化合物及其合成方法。该实施例并不意图在任何方面限制本发明的范围，也不应这样理解。所有试验都是在干燥氮气或氩气的正压下进行。除非另有说明，所有溶剂和试剂都商购获得并以所购形式使用。干燥的四氢呋喃(THF)可在使用前由钠或二苯甲酮羰游基钠中蒸馏获得。在500MHz的BrukerAvance21nbay國500上、200MHz的BrukerAvanceIbay國200上或500MHz的VarianInova/Varian300/Varian400上获得质子核磁共振^HNMR)谱图。在AgilentMSD/B仪上使用乙腈/醋酸铵水溶液作为流动相进行电喷雾质谱分析(ESI)。在VGZAB-2SE仪上进行自由原子轰击质谱分析(FABMS)。使用VG70SE或VarianMAT731仪进行场解吸附质语分析(FDMS)。用Perkin-Elmer241旋光仪测定旋光度。通常使用文章中指出的线性梯度溶剂在WatersPr印500LC上进行色谱分离。通常使用薄层色谱(TLC)监测反应进行是否完全。使用E.MerckKieselgel60F254板，5cmxl0cm，0.25mm厚，进行薄层色谱分析。使用UV和化学检测法(将板浸在钼酸铈铵溶液[500mL10%硫酸水溶液中的75g钼酸铵和4g硫酸铈(IV)]中，然后在加热板上加热)检测斑点。按照Still等，Still,Kahn和Mitra在J.Org.Chem.43，2923(1978)中描述的方法进行快速色谱法.在控制装置公司440元素分析仪(ControlEquipmentCorporation440ElementalAnalyzer)上确定碳、氲和氮的元素分析，或由UniversidadComplutenseAnalyticalCenter(FacultaddeFarmacia，马德里，西班牙)进行测定。在Gallenkamp热空气浴熔点仪或Btichi熔点仪的开口玻璃毛细管中测定熔点，且测得的熔点是未校正的。实施例中使用的缩写、符号和术语具有下列含义。Ac-乙酰基Anal,元素分析ATR-衰减全内反射Bn或Bzl-千基Bu-丁基BOC-叔丁氧羰基calcd-计算的020=氧化氘DCC-双环己基碳二亚胺DCM-l,2-二氯曱烷DIBAL-H-二异丁基氢化铝DMAP-4-二甲基氨基吡啶DMF-二甲基甲酰胺200810096216.7说明书第18/133页DMSO-二甲基亚砜DSC-差示扫描量热法DEC-N-乙基-N，N，-二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐ES-电喷雾质谱Et-乙基EtOH-乙醇FAB-快速原子轰击(质谱分析)FDMS-场解吸附质诿FTIR-傅立叶转换红外光谱HOAM-羟基-7-氮杂苯并三唑HOBt-l-羟基苯并三唑HPLC-高效液相色镨HRMS-高分辨率质谱i-PrOH-异丙醇IR-红外光谱L崎MeOH-曱醇MPLC-中压液相色谱MP-熔点MTBE-叔丁基甲基醚NBS-N-溴代丁二酰亚胺NMI^核磁共振PC-TLC-制备性离心薄层色谱Ph-苯基p.o.-口服给药i-Pr-异丙基Rochelle，sSalt-酒石酸钟钠rt-室'温SM-起始原料TBS-叔丁基二甲基甲硅烷基TEA-三乙胺23Temp.:温度TFA-三氟乙酸THF-四氢呋喃TLC-薄层色谱t-BOC-叔丁氧基羰基一般方法A胺与N-BOCML)-氨基酸之间的EDC偶合将起始物氨基二烷基酯(l.O当量)(方案3，式ii化合物)悬浮在氮气氛下、干燥的二氯甲烷中。顺序加入相应的N-Boc-(L)-氨基酸(1.5-2.0当量)、EDC(1.5-2.0当量)、HOBt(1.5-2.0当量)和二甲基氨基吡啶(DMAP，0.1-0.2当量)。若非另有说明，则室温下搅拌反应混合物直至用TLC判断反应完全。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并依次用饱和NaHC03水溶液和/或NaHS04水溶液及盐水洗涤。硫酸钠干燥和真空蒸发后，使用适当洗脱液(通常为乙酸乙酯/己烷)用硅胶色谱精制粗品残余物(式m化合物)。一般方法B胺与N-BOCML)-氨基酸异丁酸酐之间的酸酐偶合在-20t:，氮气氛下，向相应的N-Boc-(L)-氨基酸(1.5当量)在干燥的二氯甲烷(10mL)中形成的溶液中加入N-甲基吗啉(NMM，1.5当量，lmLCH2Cl2中)，之后以一定速度滴加氯甲酸异丁酯(IBCF，1.5当量，5mLCH2Cl2中)，以使内部反应温度不超过-15t:。在-20t:下将所得反应混合物搅拌30分钟，之后以一定速度加入-20"C的、(1S，2S，4S，5R，6R)-2-(2，-氨基-丙酰胺基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯盐酸盐(l.O当量)在二氯甲烷(10mL)中形成的溶液，以使内部反应温度不超过-15t:。滴加结束后，移去冷水浴并在室温下搅拌反应混合物直至TLC判断反应完全。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并依次用饱和NaHC03水溶液、NaHS04水溶液及盐水洗涤。硫酸镁干燥和真空蒸发后，使用适当洗脱液(通常为己烷/乙酸乙酯)用硅胶色谱精制粗品残余物。一般方法C顺序除去N-Boc和酯保护基团室温下，在THF/2.5NLiOH(10-20当量)的1:1混合物中搅拌相应的N-Boc二酯肽衍生物(式iii化合物，方案2)(1.0当量)达4小时。用水稀释反应物，并用乙酸乙酯洗涤.弃去有机层。用lNHCl(将NaCI加入水相中以按需要提高可萃取性)将水相调节至pH为2，并用乙酸乙酯完全萃取出N-boc二羧酸产物(式iv化合物)。合并所有有机物，盐水洗涤，MgS04干燥，并真空浓缩至干燥，以获得希望的泡沫状固体的羧酸酯产物。溶解在乙酸乙酯中并冷却至0"C。用无水HC1气体吹扫反应混合物直到HC1饱和。0"C下搅拌所得反应混合物达4小时。氮气氛下过滤，将完全脱保护的肽衍生物(式I化合物)以盐酸盐分离出来，或将反应混合物浓缩至干燥，随后再用乙酸乙酯或Et20研磨并浓缩成白色粉末。任选地，为了除去残余溶剂和过量HC1，在水中重组产物、冻结，随后冷冻干燥可获得希望的盐酸盐产物。flR,4S,5S,6S)-4-氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3,1,01己烷-4,6-二羧酸二乙酯室温下，用20分钟将亚硫酰氯(15.5mL，212.6mmol)滴加至(1R,4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己垸-4，6-二羧酸(10g，42.5mmol，美国专利号5，688，826)在100mL2B乙醇中形成的浆液中，随后用40mL乙醇漂洗。将浆液加热至回流并搅拌过夜。以500MHz4HNMR(CD30D)分析浓缩的等分试样，结果显示起始原料和中间体单酯被完全消耗掉。将所得溶液冷却至室温，然后浓缩至胶状剩余物。向已进一步浓缩为固体的凝胶中加入EtOAc(50mL),然后用另一份94mLEtOAc稀释。将15%碳酸钠水溶液(70mL)緩慢加入混合物中，并用手旋转以逐渐溶解，所得最终pH为7.95.萃取各层之前对所得碳酸钠沉淀进行过滤。用EtOAc(2xl00mL)反萃取水层。用盐水(lxi00mL)洗涤合并的有机萃取物、干燥(MgS04)、过滤并真空浓缩，制备例1从而获得淡黄色油状物，其固化得到为灰白色固体的标题化合物(11.71g，95°/收率)'将EtOAc(800jiL)中的标题化合物(200mg)混合物加热至，此时发生溶解。56TC下搅拌15分钟后，将庚烷(lmL)滴加至溶液中。关掉加热。将溶液冷却至52X:，此时发生沉淀作用。在冷却和用庚烷(600jiL)进一步溶解的过程中形成了浆液。过滤前，在室温下搅拌所得浆液l小时，用庚烷(2x500jiL)洗涤，并在451C下干燥过夜，从而得到145mg(73"/o回收率)标题化合物，为白色固体。mp80-83"C。陽。flR,4S,5S,6S)-4-f2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙醜氨基)-2,2-二氧代-2入-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸室温下，向(lR，4S，5S，6S)-4-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸二乙酯(181.4g，392mmol理论值，制备例2)在292mLTHF内形成的溶液中加入4卯mL(980mmol)2N氢氧化钠。室温下剧烈搅拌该两相混合物1.25小时，此时反应均相进行。用4卯mL乙酸乙酯稀释混合物并分离各层。用490mL乙酸乙酯稀释水层，并用浓盐酸将混合物pH降至1.5。分离各层并用制备例327245mL乙酸乙酯反萃取水层。干燥合并起来的有机层(Na2S04)、过滤并浓缩，从而得到167.9g(105。/o)为白色泡沫状物的标题化合物。该物质未经表征就用于实施例1和2中。(1R,4S,5S,6S)-4-氨基-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯将亚硫酰氯(6.2mL，85.0mmol)滴加至快速搅拌的(lR,4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸(10.0，42.5mmol，美国专利5，688，826)在MeOH(170mL，5X:)中形成的悬浮液中。加完后将反应混合物緩慢升温至室温，之后在回流温度下保温48小时。减压除去挥发物，并使剩余物在饱和NaHC03溶液(200mL)和乙酸乙酯(400mL)之间进行分配。分离各层，并用乙酸乙酯(2x400mL)萃取水层。用K2C03干燥合并起来的有机层并减压浓缩，从而以72%的收率得到8.10g(30.8mmol)标题化合物。[ct23D="84。(c=0.5，MeOH)'C9H13N06S的分析计算值:C，41.06;H，4.98;N，5.32,实测值C，40.94;H，4.93;N，5.30。MS(ES)m/z264.0[M+H]+。flR,4S,5S,6S)-4"2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-苯基-丙酰氨基)-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯制备例4制备例5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-(L)-苯丙氨酸和(1R，4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二曱酯(制备例4)进行制备。使反应混合物回流过夜。用PC-TLC，4mmSi02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)精制。获得0.85g(88%，1.67mmol)白色泡沫状物。[a23D=~35.2o(c=0.45，CHCl3)。AHNMR(300MHz，CDCl3)51.43(9H,s)，2.38國2.40(lH，m)，2.86(lH，d，J=15.0Hz)，2.91(lH，dd,J=4.4，7.3Hz)，3.04(2H，d，J=7.3Hz)，3.35誦3.39(lH，m)，3.77(3H，s)，3.84(3H，s)，4.11(lH，d，J=14.3)，4.30(lH，app.q，J=7.3)，4.96(lH，bd，J=6.6Hz)，6.96(1H,bs)，7.22醫7.36(5H,m)。C23H30N2O9S0.1H2O的分析计算值:C，53.92;H，5.94;N，5.47'实测值C，53.62;H，5.90;N，5.28,MS(ES)m/z509.16[M-H-;411.2[M國Boc+。制备例6(111,48,58,68)-4-(2，8-叔丁氧基羰基氨基-3，8-甲基-戊酰氨基)-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环〖3.1.01己烷-4,6-二羧酸二曱酯按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-(L)-异亮氨酸和(1R,4S，5S,6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4,6-二羧酸二甲酯(制备例4)进行制备。使反应混合物回流过夜。用PC-TLC，4mmSi02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)精制。获得0.75g(83%，1.57mmol)白色泡沫状物。[a23D="32.65。(c=0.49，CHC13)。力NMR(300MHz，CDCl3)50.91(3H，t,J=7.3Hz)，0.93(3H，d，J=6.6Hz)，1.10誦1.18(lH,m)，1.46(9H，s)，1.42國1.52(lH，m)，1.81國1.86(lH，bm)，200810096216.7说明书第25/133页2.51(lH，t，J=4.0Hz)，2.95(lH，d，J=15.0Hz)，3.06(lH，dd，J=4.4,7.3Hz)，3.43(3H,dd，J=3.7，7.0Hz)，3.78(3H，s)，3.85(3H,s)，3.82-3.90(lH，m)，4.20(lH，d，J=14.7Hz)，4.94(lH，d，J=8.4Hz)，7.15(1H，bs)。C20H32N2O9S的分析计算值C，50.41;H，6.77;N，5.88。实测值C，50.32;H，6.92;N，5.76,MS(ES)m/z475.1[M醫H陽。(1R,4S,5S,6S)-4"2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-甲基-丁酰氨基)-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-(L)-缬氨酸和(1R，4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二甲酯(制备例4)进行制备。使反应混合物回流过夜。用PC-TLC，4mmSi02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100°/0乙酸乙酯)精制。获得0.41g(47%，0.89mmol)白色泡沫状物。[a23D=~35.36o(c=0.51，CHC13)。ifi[NMR(300MHz，CDCl3)50.93(3H,t，J=7.0Hz)，0.96(3H,d，J=6.6Hz)，1.46(9H，s)，2.06画2.13(lH，m)，2.50(lH，t，J=4.0Hz)，2.94(lH,d，J=15.0Hz)，3.04(lH，dd，J=4.4,7.3Hz)，3.43(lH，dd，J=3.3，6.6)，3.78(3H，s)，3.80-3.86(lH，m)，3.86(3H，s),4.24(lH，d，J=15.0Hz)，4.94(lH,d,J=8.1Hz)，7.15(1H，bs)。C19H30N2O9S的分析计算值:C,49.34;H，6.54;N，6.06。实测值C，49.33;H，6.44;N，6.05'MS(ES)m/z461.2[M-H-。制备例8flR,4S,5S,6S)-4-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲基-戊酰氨基)-2,2-二制备例7氧代-2A6-硫杂-双环[3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-(L)-亮氨酸一水合物和(lR，4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4,6-二羧酸二甲酯(制备例4)进行制备。使反应混合物回流过夜。用PC-TLC,4mmSi02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)纯化。获得0.85g(94%，1.78mmol)白色泡沫状物。cx23D="46.15。(c=1.04，CHC13)。NMR(300MHz，CDCl3)50.92(3H,d，J=6.2Hz)，0.95(3H，d，J=6.6Hz)，1.47(9H，s)，1.42國1.47(lH，m)，1.63-1.67(lH，m)，2.46(lH，t，J=3.7Hz)，2.87(lH，d，J=15.0Hz)，3.04(lH，dd，J=4.4，7.3Hz)，3.41(lH，dd,J=3.7，7.0)，3.78(3H，s)，3.86(3H，s)，4.00國4.05(lH，m)，4.20(lH，d，J=15.0Hz)，4.75(lH，d，J=6.6Hz)，7.43(1H，bs)。C20H32N2O9S的分析计算值:C，50.41;H，6.77;N，5.88。实测值C，50.30;H，6.82;N，5.75。MS(ES)m/z475.2[M誦H]-,制备例9aR,4S,5S,6SV4-(2，S,6-双-叔丁氧基羰基氨基-己酰氨基)-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-Lys(BOC)-OH和(lR,4S,5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二曱酯(制备例4)进行制备。使反应混合物回流过夜。用PC-TLC，4mmSi02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)纯化。获得1.04g(93°/0，1.76mmol)白色泡沫状物。[cc23D=~32.0o(c=0.5，CHC13)'iHNMR(300MHz，CDCl3)51.44(9H，s)，1.46(9H，s)，1.39-1.53(3H，m)，1.56-1.65(lH，m)，1.77醫1.84(2H，m)，2.50(lH，t，J=4.4Hz)，2.98-3.20(4H，m)，3.42(lH，dd,J=3.7，7.0Hz)，3.76(3H,s)，3.86(3H,s)，4.01(lH，dd，J=7.7，13.2Hz)，4.09醫4.19(lH，m)，4.71(lH，t，J=7.3Hz)，5.13(1H，bs)，7.59(1H，bs)。C25H41N3OuS的分析计算值:C，50.75;H，6.98;N,7.10。实测值C，50.36;H，6.99;N，6.87。MS(ES)m/z590.2[M-H]-'制备例10aR,4S,5S,6S)-4-2，S-叔丁氧基羰基氨基-4V三苯甲基-氨基曱酰基)-丁酰氨基卜2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-(L)-谷氨酰胺(Trt)-OH和(lR，4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二甲酯(制备例4)进行制备。使反应混合物回流过夜.用PC-TLC，4mmSi02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)精制。获得0.53g(480/0，0.72mmol)白色泡沫状物。[a23D=~8.0。(c=0.50，MeOH)'力醒R(300MHz，CDCl3)51.42(9H，s)，1.83-1.88(lH，m)，2.03-2.18(lH，m)，2.16(lH，t，J=4.0Hz)，2.57國2.64(lH,m)，2.60(lH,d,J=15.0Hz)，2.64-2.80(lH，m)，2.88(lH，dd,J=4.4，7.3Hz)，3.26(lH，dd，J=4.0，7.0Hz)，3.47(3H，s)，3.76-3.90(lH,m)，3.81(3H，s)，4.05(lH，d，J=15.0Hz),5.47(1H，bs)，7.02(1H，bs)，7.20-7.35(15H，m)，8.68(1H,bs),C38H43N301()S的分析计算值C，62.20;H，5.91;N，5.73。实测值C，61.83;H，6.09;N，5.57'MS(ES)m/z731.9[M-H]-。C3sH"N30K)SM+Na+的HRMS计算值，756.2567。实测值，756.2585。制备例11aR,4S,5S,6S)-4-『a，-叔丁氧基羰基-吡咯烷-2，S-羰基)-氨基l-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯按照一般方法A，使用可商购获得的Boc-(L)-脯氨酸(0.61g，2.9mmol)和(lR,4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸二曱酯(0.5经，1.9mmo1，制备例4)进行制备。用PC-TLC(乙酸乙酯/己烷)纯化，获得0.87g(99.2。/o)标题化合物。[ct23D^61.2(c=0.49，CHC13)。NMR(300MHz，CDCl3)51.51(9H，s)，1.75-1.98(3H，m),2.35國2.5(2H，m)，2.84(lH，d，J=14.7Hz)，2.9画3.03(lH，m),3.25國3.4(lH，m)，200810096216.7说明书第29/133页3.3國4.1(2H，m)，3.76(3H，s)，3.86(3H，s)，4.14誦4.31(2H，m)，8.66(1H，s)。MS(ES)m/z459.2[M國I-。制备例12(1R,4S,5S,6S)-4"2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲基硫基-丁酰氨基)-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二曱酯按照一般方法A，使用可商购获得的Boc-(L)-蛋氨酸(0.71g，2.9mmol)和(lR，4S，5S，6S)-4-氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二曱酯(0.5g，1.9mmo1，制备例4)进行制备。用PC-TLC(乙酸乙酯/己烷)纯化，获得0.85g(卯.5。/。)标题化合物。oc]23D"20.4(c=0.49，CHC13)'*HNMR(300MHz，CDCl3)51.46(9H，s)，1.69(1H，s)，1.8画2.05(2H，m)，1.9國2.0(lH，m)，1.95-2.3(3H，bs)，2.0-2.2(lH，m)，2.4-2.8(2H，m)，2.48(lH，t，J=4.0Hz),2.58(1H，bs)，2.92(lH，d，J=14.7Hz)，3.01(lH，dd，J=4.4，7.0Hz)，3.42(lH，dd，J=3.7，7.3Hz)，3.78(3H，s)，3.87(3H，s)，4.22画4.24(2H，m)，5.06(lH，d,J=7.7Hz)，7.27(1H，s)。MS(ES)m/z493.1[M國l-。制备例13(1仏48,58,68)-4-『2，8-叔丁氧基羰基氨基-3，-(1-叔丁氣基羰基-18-吲哚-3-基)-丙酰氨基1-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二曱酯34按照一般方法A，使用可商购获得的Boc-(L)-色氨酸(Boc)(l.lg，2.8mmol)和(lR，4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸二甲酯(0.5g，1.9mmol，制备例4)进行制备。用PC-TLC(乙酸乙酯/己烷)纯化，获得0.7g(56.7o/。)标题化合物。4NMR(300MHz，CDCl3)51.44(9H,s)，1.67(9H，s)，2.37(1H，bs)，2.86(lH,d,J=15.0Hz)，2.88(lH，t，J=4.4Hz),3.15(2H,d，J=6.6Hz)，3.39(lH，dd，J=3.7，7.0Hz)，3.73(3H，s)，3.83(3H，s)，4.18(lH，d，J=14.7Hz)，4.37國4.44(lH，m)，5.01(lH，bd，J=8.1Hz)，7.11(1H，bs)，7.25-7.59(4H，m)，8.14(lH，bd，J=8.4Hz)。[a]23D=~19.6(c=0.51，CHC13)。C3oH函OnS-1.0<:4仏02的分析计算值:C，55.35;H，6.42;N，5.70。实测值C，54.98;H，6.09;N，6.07。C3。H39N30nNa^的HRMS计算值，672.2203'实测值，672.2180。制备例14GR,4S,5S,6S)-4-〖2，S-叔丁氣基羰基氨基-3，-"-叔丁氣基羰氣基-苯基)-丙酰氨基l-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二曱酯按照一般方法A，使用可商购获得的28-叔丁氧基羰基氨基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>叔丁氧基羰氧基-苯基)-丙酸(l.lg，2.9mmol)和(lR,4S,5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸二曱酯(0.5g,1.9mmol，制备例4)进行制备。用PC-TLC(乙酸乙酯/己烷)纯化，获得0.94g(79.0"/o)标题化合物。[oc23D=+4(c=1.00，CH3OH)。力NMR(300MHz，CDCl3)51.44(9H,s)，1.56(9H，s)，2.44(lH,t，J=4.0Hz)，2.88(lH，d，J=14.7Hz),2.98(lH，dd，J=4.4，7.3Hz)，3.04(2H，d，J=7.3Hz)，3.38(lH,dd，J=4.0，7.3Hz)，3.77(3H，s)，3.83(3H,s),4.11(lH，d，J=14.3Hz)，4.22-4.29(lH,appq，J=7.3Hz)，4.92(lH，bd，J=7.7Hz)，7.07(1H，bs)，7.1誦7.26(4H，m)。C28H38N2012SNa的HRMS计算值，649.2043.实测值，649.2001。制备例15flR,4S,5S,6S)-4-f3，-乙酰氣基-2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基)氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸二甲酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>按照一般方法A，不使用DMAP，使用3-乙酰氧基-2S-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(0.25g，1.0mmol,制备例44)和(lR，4S,5S，6S)-4-氨基-2，2誦二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二甲酯(0.2g,0.8mmol，制备例4)进行制备'用PC-TLC(乙酸乙酯/己烷)纯化，获得0.19g(48.2%)标题化合物。+。制备例18flR,2S,4R,5R,6R〗-2-〖2，S4叔丁氣基羰基氨基)丙酰基l氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>室温下，向(1R，2S，4R，5R，6R)-2-[2，S-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基-4-氟双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(88.16g，191mmol,制备例17)在238mLTHF中形成的溶液中加入238mL(477mmol)2N氢氧化钠。室温下将该两相混合物剧烈搅拌2.5小时，此时反应均相进行。用238mL叔丁基甲基醚稀释混合物，之后进行混合，并分离各层。用238mL水进一步稀释水层，并过滤除去颗粒物质。用浓盐酸(42.9mL，515mmol)处理溶液30分钟，任选随后加入标题化合物作为晶种，并搅拌1小时。过滤所得浆液，用水(2xl00mL)洗涤，45"C下真空干燥40小时，从而得到72.2g标题化合物，其为白色固体.将一部分固体(69.5g)与4卯mL丙酮一起搅拌l小时制得雾状溶液；过滤并用丙酮(2x100mL)洗涤。将该滤出液真空浓缩为白色泡沫状物，并在45"C真空下进一步干燥16小时，从而得到61.8g(86%，校准有12%wt/wt丙酮)标题化合物，该物质未经表征就用于实施例14-18中。制备例19GS,2S,4S,5R,6R)-4-乙酰氧基-2-(叔丁氧基羰基)氨基双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯H3CH2C02C',COjCH,CH3HNHBoc氮气氛下，向(lS，2S，4S，5R，6R)-2-(叔丁氧基羰基)氨基-4-羟基双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(1.50g，4.20mmo1，美国专利5958960)、吡啶(0.365mL，4.62mmol)和DMAP(0.513g，4.20mmol)在二氯甲烷(40mL)中形成的溶液中加入乙酸酐(0.514mL，5.0mmol)。室温下搅拌16小时，用二氯甲烷稀释，并倾入10。/。的柠檬酸水溶液(50mL).用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤有机层。用MgS04干燥、过滤，并真空浓缩，制得标题化合物，其为白色固体(1.295g,75%)。LCMS:m/z400[M+H+和m/z300[M+H-C02Bu+@RT1.39分钟。制备例20GS,2S,4S,5R,6R)-4-乙酰氧基-2-氨基双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯200810096216.7说明书第35/133页将(lS，2S，4S，5R，6R)-4-乙酰氧基-2-(叔丁氧基羰基)氨基双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(1.25g，3.13mmol，制备例19)溶解于95°/。TFA与二氯甲烷(60mL)形成的溶液中，并在室温氮气氛下搅拌5分钟。之后真空除去TFA/二氯甲烷。将粗产物溶解在NaHC03(l.00g)与二氯甲烷(50mL)形成的悬浮液中，并搅拌30分钟。过滤该悬浮液，用二氯甲烷(3x25mL)洗涤，并真空浓缩，获得916mg(98。/。)产物，其为黄色油状物。LCMS:m/z400[M+H+@RT0.92分钟。制备例21nS,2S,4S,5R,6R)-4-乙酰氧基-2-『2，S-f叔丁氧基)羰基氨基丙酰基l氨基双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯氮气氛下，向(lS，2S,4S,5R，6R)-4-乙酰氧基-2-氨基双环[3.1.0己烷國2，6-二羧酸二乙酯(0.80g,1.94mmol,制备例20)和Boc画L-Ala(0.477g，2.52mmol)在无水二氯甲烷(50mL)中形成的悬浮液中顺序加入EDC(0.519g，2.72mmol)、HOBt(0.314g，2.32mmol)、催化量的DMAP(0.024g，0.19mmol)和三乙胺(1.08mL，7.76mmol)。室温下搅拌约15分钟后，最初的白色悬浮物完全溶解。将反应物搅拌16小时，用二氯甲烷稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)、1.0NHC1水溶液(3x20mL)和饱和盐水溶液(40mL)洗涤，用MgS04干燥有机层并过滤和真空干燥。用乙酸乙酯和己烷的(4:1)混合物作为洗脱液，由柱色谱纯化所得的粗酰胺，得到638mg(75y。)产物，其为白色固体。40200810096216.7说明书第36/133页NMR(CD3OD)*:55.05(1H，d，5.7Hz)，4.09(2H,q，7.3Hz)，4.02(2H，q,7.3Hz)，4.01國3.94(lH，m),2.65國2.59(2H,m)，2.38(1H,d，14Hz)，2.10國2.03(3H,m)，1.91(3H,s)，1.78(1H，dd，5.9Hz，16Hz)，1.59(1H，brs)，1.34(9H，s)，L16(6H，2xt，7.3Hz);*N.B.NMR=2未观察到的可交换质子。LCMS:m/z471[M+H+和m/z371[M+H誦COBu+@RT1.30分钟，Rf0.50(80%乙酸乙酯庚烷)制备例22flS,2S,4S,5R,6R)-2-氨基-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯将(lS，2S,4S，5R，6R)-2-叔丁氧基羰基氨基-4-羟基双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(5.0g,14.0mmol，US5958960)在乙酸乙酯中形成的溶液冷却至Ot;。向溶液中鼓入无水HCl(g)直至饱和并搅拌0.5小时.将反应升温至室温并搅拌1小时.浓缩反应混合物并使其在乙酸乙酯和1120之间进行分配。用NaHC03(aq)处理水层，并用乙酸乙酯萃取。用K2C03干燥有机物并进行浓缩，获得2.2g(59.7。/o)白色固体。[oc]23D=~30.8(c=0.52，CH3OH)'力NMR(300MHz，CDCl3)51.26(3H，t,J=7.33Hz)，1.36(3H，t，7.33Hz)，1.60(lH,dd，J=5.87，15.40Hz)，1.64(lH，t，J=2.93Hz)，2.27(2H，bs)，2.15國2.29(3H，m)，3.93(1H，bs)，4.13(2H，q，J=6.97Hz)，4，27-4.36(3H，m)。d2HwNOs的分析计算值C，56.02;H，7.44;N，5.44。实测值C，55.75;H，7.36;N，5.40。MS(ES)m/z258.1[M+H+。制备例23aS,2S,4S,5R,6R)-2-(2，-叔丁氧基羰基氨基-乙酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯41<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>按照一般方法A，使用Boc-甘氨酸(458mg，2.62mmol，Aldrich)和(lS，2S，4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(450mg，1.75mmol，制备例22)进行制备。在35g二氧化硅上纯化，用洗脱梯度为50/50-20/80的己烷/乙酸乙酯洗脱。收率560mg(77°/0)。力匪R(400MHz，CDCl3)51.28(3H，t，J=7.3Hz)，1.29(3H，t，J=7.3Hz)，1.48(9H，s),1.57(2H，m)，2.21(1H，m)，2.41(lH，dd，J=2.9，5.8Hz)，2.81(lH，d,J=15.6Hz)，3.76(lH，d,J=5.8Hz)，4.10謹4.18(3H，m)，4.26(2H，q，J=7.3Hz)，4.33(lH,m)，5.10(1H，bs)，6.86(1H,bs)。<:19&。]\208的分析计算值C，55.06;H，7.30;N，6.76。实测值C,55.24;H，7.50;N,6.76。MS(ES)m/z415.2[M+H+，437.2[M+Na+。制备例24US,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-甲基丁酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>按照一般方法A，使用Boc-L-翔氨酸(569mg，2.62mmol,Sigma)和(lS,2S，4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环3丄0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(450mg，1.75mmol，制备例22)进行制备。在35g二氧化硅上纯化粗产物；用洗脱梯度为70/30-20/80的己烷/乙酸乙酯洗脱，收率694mg(87y。)白色泡沫状物。200810096216.7说明书第38/133页NMR(400MHz，CDCl3)50.95(3H，d，J=6.8Hz)，1.00(3H,d，J=6.8Hz)，1.29(6H，t，J=7.3Hz)，1.45(9H，s)，1.52画1.60(2H，m)，2.08(1H，m)，2.20(1H，m),2.42(1H，m)，2.81(lH，d,J=15.6Hz)，3.86(lH，dd，J=6.3，8.8Hz)，4.14(2H，q，J=7.3Hz)，4.21漏4.32(4H，m)，5.00(lH,d，J=8.3Hz)，6.63(1H，s)。<^221136]\208的分析计算值C，57.88;H，7.95;N，6.14,实测值C，57.87;H，8.03;N，6.12。MS(ES)m/z457.2[M+H+，479.2[M+Na]+。制备例25flS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲基戊酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯按照一般方法A，使用Boc-L-亮氨酸(606mg，2.62mmol，Chemlog)和(lS，2S，4S，5R,6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(450mg，1.75mmol，制备例22)进行制备。在35g二氧化珪上纯化粗产物；用洗脱梯度为70/30-20/80的己烷/乙酸乙酯洗脱'收率689mg(84"/。)白色泡沫状物。NMR(400MHz,CDCl3)50.96(6H，m)，1.28(3H，t，J=7.3Hz)，1.29(3H，t,J=7.3Hz)，1.46(9H，s)，1.45國1.73(5H，m)，2.20(1H，m)，2.42(1H,m)，2.80(lH，d，J=16.1Hz)，4.07画4.35(7H，m)，4.81(1H，bd)，6.86(1H，bs)'C23H38N208.0.1H20的分析计算值:C，58.48;H，8.15;N，5.93.实测值C，58.22;H，7.94;N，5.92。MS(ES)m/z471.2[M+H]+，493.2[M+Na+.制备例2643(lS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-叔丁氧基羰基氨基-3'S-曱基戊酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯按照一般方法A，使用Boc-L-异亮氨酸(606mg，2.62mmol，Aldrich)和(lS，2S，4S，5R,6R)-2-氨基-4-羟基-双环3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(450mg,1.75mmol，制备例22)进行制备。在35g二氧化硅上纯化粗产物，用洗脱梯度为70/30-20/80的己烷/乙酸乙酯洗脱。收率731mg(89%)。力NMR(400MHz,CDCl3)50.92(3H，t，J-7.3Hz)，0.97(3H，d，J=6.8Hz)，1.17(1H，m)，1.29(6H，t，J=6.8Hz)，1.46(9H，s)，1.53(1H，dd，J=5.8，15.6Hz)，1.58(1H，t,J=2.4Hz)，1.74(1H，m)，1.83(1H，m)，2.20(1H，m)，2.43(1H，m)，2.80(1H，d，J=15.6Hz),3.88(1H，dd，J=7.3,8.8Hz)，4.12-4.32(6H，m)，4.98(1H，d，J-7.3Hz)，6.60(1H，s)。C23H38N2080.2H2O的分析计算值C，58.25;H，8.16;N，5.91。实测值C，58.17;H，8.11;N，5.91。MS(ES)m/z471.2[M+H+，493.2[M+Na]+。制备例27aS,2S,4S,5R,6R)-2-2，-a-叔丁氣基羰基氨基-乙酰氨基)-乙酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>按照一般方法A，使用Boc國Gly画Gly(474mg，2.04mmol)和(lS，2S，4S，5R,6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯盐酸盐(400mg，1.36mmol，制备例22中未用碱处理)进行制备，但有下列例外。未使用DMAP。加入l当量三乙胺。在35g二氧化硅上纯化粗产物，用乙酸乙酯洗脱。收率517mg(81%)。[ot23D="18.18(c=0.55，MeOH)。iH匪R(300MHz，CDC13)51.26(3H，t,J=6.8Hz)，1.27(1H，t，J=7.3Hz)，1.28(3H，t，J=6.8Hz)，1.46(9H，s),1.59(1H，t，J=3.4Hz)，1.62(1H，dd，J=6.3，16.1Hz)，2.21(1H，dd，J=2.9，5.8Hz)，2.46(1H，dd，J=2.4，5.8Hz)，2.73(1H，d,J=15.6Hz)，3.78-3.91(3H，m)，4.01-4.15(3H，m)，4.24(2H，q，J=6.8Hz)，4.32(1H，d，J=5.8Hz)，5.28(1H，b)，6.87(1H，bt，J=4.9Hz)，7.39(1H，bs).<:211134]^309的HRMS(质语)计算值，472.2295,实测值，472.2303。HPLC:16.755分钟。柱对称C18，3.5um,4.6x150mm.入=230nM。流速lmL/分钟。梯度10%-50°/oACN/含0.1%TFA的水，时间25分钟。制备例28flS,2S,4S,5R,6R)-2-『2，"2S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰氨基)-乙酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯200810096216.7说明书第41/133页H3C按照一般方法A，使用Boc國Ala-Gly(502mg，2.04mmol)和(lS，2S,4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯盐酸盐(400mg，1.36mmol，制备例22中未用碱处理)进行制备，但有以下例外。未使用DMAP。加入l当量三乙胺。在35g二氧化珪上纯化粗产物，用乙酸乙酯洗脱。收率500mg(76o/o),[a23D"31.37(c=0.55，MeOH)。力NMR(300MHz,CDC13)M.27(3H，t，J=6.8Hz)，1.28(3H，t，J=6.8Hz)，1.42(3H，d，J-6.8Hz)，1.45(9H，s)，1.58(1H，t，J=3.4Hz)，L64(1H，dd，J=5.8，15.6Hz)，2.23(1H，dd，J=3.4，5.8Hz)，2.50(1H，dd，J-2.9,6.3Hz)，2.69(1H，d，J=15.6Hz)，二重峰的ABq(2H，vA=3.87,vB=3.98，JAB=17.1Hz，Jd=6.3Hz)，3.92(1H，m)，4.07-4.16(3H，m)，4.24(2H，q，J=7.3Hz)，4.32(1H，b)，5.08(1H，b)，6.84(1H，bt，J=4.88Hz)，7.14(1H，bs)。〔221136]^309的HRMS计算值，486.2452。实测值，486.2451.制备例29flS,2S,4S,5R,6R)-2"2，-叔丁氧基羰基氨基-3，-苯基-丙酰氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯H,CH,CO,C按照一般方法A，使用Boc-L-苯丙氨酸(772mg，2.91mmol)和46200810096216.7说明书第42/133页(lS，2S，4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸二乙酯(480mg，1.94mmo1，制备例22)进行制备。浓缩粗反应混合物、溶解于二氯甲烷、用乙酸乙酯/DCM(l:l)快速通过一段短的硅胶填料，并真空浓缩得到黄色油状物。用硅胶色谱进一步纯化，用30%乙酸乙酯/己烷至80%乙酸乙酯/己烷洗脱，得到852mg(87。/o)标题化合物。[ot23D"23.66(c=0.93,MeOH),JHNMR(400MHz,CD30D)51.22-1.30(6H，m)，1.35(9H，s)，1.59(1H，t，J=2.9Hz)，1.70(1H，dd，J=5.5，15.4Hz)，2.06(1H，m)，2.40(1H，d，J=15.4Hz)，2.63(1H，dd，J=2.9，5.9Hz),2.76(1H，dd，J=9.2，13.9Hz)，4.08-4.33(6H，m)，7.20-7.29(5H,m)。MS实测值505.0[M+H+'<:2(^3(^208的HRMS计算值，505.2550,实测值，505.2559'制备例30US,2S,4S,5R,6R)-2-『2，-叔丁氧基羰基氨基-4，一三苯甲基-氨基甲酰基)-丁酰氨基l-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯除不使用DMAP外，按照一般方法A，用Boc-L-谷氨酰胺(三苯甲基)國OH(1.40g，2.86mmol)和(lS，2S，4S，5R，6R)画2-氨基-4-羟基國双环[3丄0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(4卯mg，l.卯mmol，制备例22)进行制备。浓缩粗反应混合物、溶解于二氯曱烷、用乙酸乙酯快速通过一段短的硅胶填料，并真空浓缩得到黄色油状物'用硅胶色谱进一步纯化，用30%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯/己烷洗脱，得到1.3g(94。/o)标题化合物。[oc]23D=^21.28(c=0.94，MeOH),4NMR(400MHz,CD3OD)51.18画1.26(6H，m)，L44(9H，s)，471.62誦1.74(3H，m)，1.91國2.00(1H，m)，2.05(1H，m)，2.38-2.48(3H，m)，2.54(1H，m)，4.00-4.27(6H，m)，7.18-7.30(15H，m)。MS实测值728.2[M+H+。C"H49N309的HRMS计算值，728.3547。实测值，728.3533。制备例31GS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S,6，-双叔丁氧基羰基氨基-己酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯除不将DMAP加入反应混合物外，按照一般方法A，用Boc-L-赖氨酸(Boc)-OH(910mg，2.63mmol)和(lS，2S，4S，5R，6R)-2-氨基-4-鞋基-双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(450mg，1.75mmo1,制备例22)进行制备。浓缩粗反应混合物、溶解于二氯甲烷、用乙酸乙酯快速通过一段短的硅胶填料，并真空浓缩得到黄色油状物。用硅胶色谱进一步纯化，用乙酸乙酯/己烷(l:l)洗脱，得到800mg(78。/。)标题化合物。[oc23D"30.19(c=0.53，MeOH)'NMR(400MHz，CD3OD)51.21-1.24(6H，m)，1.26-1.77(27H,m)，2.07(1H，m)，2.42(1H，d，J=15.8Hz)，2.59(1H，dd,J=2.6，5.5Hz),3.03(1H，t，J=6.2Hz)，3.99(1H，m)，4.07-4.28(5H，m)。MS实测值586.1[M+司+,C2sH47N30w的HRMS计算值，586.3340,实测值，586.3348。制备例32GS,2S,4S,5R,6R)-2-『2，-叔丁氧基羰基氨基-3，"三苯甲基-氨基甲酰基)丙酰基氨基1-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯200810096216.7说明书第44/133页除不将DMAP加入反应混合物外，按照一般方法A，用Boc-L-天门冬酰胺(三苯甲基)國OH(l,35g，2.84mmol)和(lS，2S,4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸二乙酯(476mg，1.85mmo1，制备例22)进行制备。浓缩粗反应混合物、溶解于二氯甲烷、用乙酸乙酯快速通过一段短的硅胶填料，并真空浓缩得到黄色油状物。用硅胶色谱进一步纯化，用20%乙酸乙酯/己烷-50%乙酸乙酯/己烷洗脱，得到1.07g(81Q/。)标题化合物。a]23D=^25.45(c=0.55，MeOH)。iHNMR(400MHz,CD3OD)51.19國1.26(6H，m),1.45(9H，s)，1.61-1.69(2H，m),2.05(1H，m)，2.44(1H，d，J=15.4Hz)，2.51-2.72(3H，m)，4.02-4.21(4H，m)，4.25(1H，d，J=5.5Hz)，4.36(1H，dd，J=4.8，8.8Hz)，7.18國7,30(15H，m)'MS实测值714.1[M+H+'CtoH47N309的HRMS计算值，714.3391,实测值，714.3380。制备例33(lS,2S,4S,5R,6R)-2-『2，-叔丁氣基羰基氨基-3，-fl，-叔丁氧基羰基-lH-吲哚-3，-基V丙酰基氨基卜4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯49按照一般方法A，使用Boc-L-色氨酸(Boc)-OH(1.18g，2.91mmol)和(lS，2S，4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(520mg，1.90mmo1，制备例22)进行制备。浓缩粗反应混合物、溶解于二氯甲烷、用乙酸乙酯快速通过一段短的硅胶填料，并真空浓缩得到黄色油状物。用硅胶色谱进一步纯化，用乙酸乙酯/己烷DCM(l:l)洗脱，得到1.2g(92。/。)标题化合物。[a]23D=~12.5(c=0.96，MeOH)。*HNMR(400MHz,CD3OD)51.18-1.27(6H，m)，1.34(9H，s)，1.62(1H，t,J=2.9Hz)，1.67(9H，s)，1.74(IH，dd，J=5.9，15.2Hz)，2.07(1H，m)，2.46(m，d,J=15.7Hz)，2.60(1H，d，J=2.9，5.9Hz)，2.89(1H，dd，J=9.3，15.0Hz)，3.16(1H，dd，J=4.9，15.2Hz),4.04-4.12(2H，m)，4.18-4.24(2H，m)，4.27(1H，d,J=5.4Hz),4.43(1H，dd，J=5.4，9.3Hz)，7.26(2H，m)，7.52(1H，s)，7.64(1H，d，J=7.3Hz)，8.10(1H，d，J=8.3Hz)。MS实测值644.8M+H+，666.8[M+Na+。C33H"N30u)的HRMS计算值，666.3002'实测值，666.2988.制备例34flS,2S,4S,5R,6R)-2-a，-叔丁氣基羰基-吡咯烷-2，S-羰基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯H3CH2C02C"-<^'C02CH2CH:按照一般方法A，使用Boc-L-脯氨酸和(lS，2S,4S，5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例22)进行制备。在ISCO体系的110g二氧化硅上纯化粗物质，用梯度为80%的乙酸乙酯/己烷-100%的乙酸乙酯洗脱，得到699mg(84。/o)标题化合物。[oc23D」52.53(c=0.99，MeOH)'iHNMR(400MHz,CD3OD)51.26(6H，m)，1.44(9H，s)，1.62(1H，m)，1.73(1H，dd,J=5.4，15.3Hz)，1.84(1H，m),1.97(1H，m)，2.07(4H，m)，2.41(1H，d，J=15.3Hz)，2.50(1H，m)，2.59(1H，m),4.12(2H，m),4.20(1H，q，J=7.4Hz),4.27(1H，d，J=5.4Hz).MS实测值454.9[M+H+，476.8M+Na+。C22H34N208Na的HRMS计算值，477.2213。实测值，477.2210。制备例35f1S,2S,4S,5R,6R)-2-『2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-(4-叔丁氣基羰氧基-苯基)-丙酰基氨基l-4-羟基-双环〖3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯按照一般方法A，使用2S-叔丁氧基羰基氨基-3-(4-叔丁氧基羰氧基陽苯基)國丙酸和(lS，2S，4S，5R，6R)-2-氨基國4-羟基國双环[3.1.0己烷-2，6國二羧酸二乙酯(制备例22)制备标题化合物。在Isco体系的110g二氧化硅上纯化粗物质，用梯度为60%的乙酸乙酯/己烷-卯％的乙酸乙酯/己烷洗脱，得到1.09g(91。/c)标题化合物。[cx]23D"12(c=1.0,MeOH)'iHNMR(400MHz，CD3OD)51.25(6H，m)，1.37(9H，s)，1.52(9H,s)，1.68(1H，dd，J=5.4，15.3Hz)，2.06(1H，m)，2.38(1H，d，J=15.3Hz)，2.64(1H，m)，2.79(1H，dd，J=8.4，13.9Hz),3.05(1H，dd，J=5.4，13.9Hz),4.20(6H，m)，7.04(2H，d，J=8.4Hz)，7.26(2H，d，J=8.4Hz)。MS实测值621.8[M+H+，643.8[M+Na+,C31H44N2OuNa的HRMS计算值，643.2843'实测值，643.2845。制备例36GS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-曱基硫基-丁酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯按照一般方法A,使用(Boc画L國蛋氨酸)和(lS，2S，4S，5R，6R)-2-氨基國4画羟基-双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸二乙酯(制备例22)制备标题化合物。在Isco体系的110g二氧化硅上纯化粗物质，用梯度为80%的乙酸乙酯/己烷-100%的乙酸乙酯洗脱，得到1.0g(92。/。)标题化合物。[a]23D"30(c=1.0，MeOH)。NMR(400MHz，CD3OD)&1.26(6H，m)，1.43(9H，s)，1.84(6H，m)，2.06(1H,m)，2.2(1H,m)，2.48(1H，m)，2.61(1H，m)，3.37(1H，m)，2.49(1H，m)，4.2(6H，m)。MS实测值488.8M+H]+，510.8[M+Na+。C22H36N208SNa的HRMS计算值，511.2090'实测值，511.2071。制备例37(18,28,48,5仏610-242，8-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯按照一般方法A，使用可商购获得的N-BOC-(L)-丙氨酸和(lS，2S，4S,5R，6R)-2-氨基-4-羟基-双环[3丄0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例22)进行制备。将反应混合物回流过夜。用制备HPLC，lx500g的Si02柱，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)纯化。获得3.0g(900/。，7.00mmol)白色泡沫状物。[a23D=^32.31o(c=0.37，CHC13),力NMR(300MHz，CDCl3)51.28(6H，t，J=7.3Hz),1.34(3H，d，J=7.3Hz)，1.46(9H，s),1.51-1.58(2H，m)，L64(1H，s)，2.19(1H，dd，J=3.3,6.2Hz)，2.40(1H，dd，J=2.9，6.2Hz)，2.80(1H，d，J=15.8Hz)，4.10-4.36(6H，m)，4.92(1H，bs)，6.94(1H,bs),C20H32N2O80.1H2O的分析计算值C，55.83;H，7.54;N，6.51'实测值C，55.57;H，7.64;N，6.44。MS(ES)m/z429.2[M+H+，329.1[M-Boc]+。制备例38aS,2S,4S.5R,6RV2-(2，S-氨基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>0n下，用无水HC1气体吹扫(lS，2S，4S，5R，6R)-2-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(2.95g，6.88mmo1，制备例37)在乙酸乙酯(30mL)中形成的溶液，直至该溶液被HC1饱和。O"C下搅拌所得反应混合物，直到TLC判断反应完全。用N2吹扫反应混合物30分钟以除去过量HC1气体.真空下将所得悬浮液浓缩至干燥，得到2.47g(98%，6.78mmol)希望的氨基盐酸盐.无需进一步纯化。23D=~46.2(c=0.52，CHC13)。iH匪R(300MHz,CDCl3)51'27(3H，t，J=7.0Hz)，1.28(3H,t，J=7.0Hz),1.36(3H，d，J=7.0Hz)，1.37(3H，d，J=7.0Hz)，1.44(9H，s)，1.58-1.65(2H，m)，2.19(1H，dd，J=3.0，5.9Hz)，2.46(1H，dd，J=2.6，5.9Hz)，2.70(1H，d，J=15.4Hz)，4.09-4.33(7H，m)，4.48(1H，appp，J=7.0Hz)，5.05(1H，bd，J=6.6Hz),6.79(1H，bd，J=7.7Hz),7.26(1H，s)'C23H3sN309的HRMS计算值，500.2608'实测值，500.2598。制备例40flS,2S,4S,5R,6R)-2-〖2，S"2-叔丁氧基羰基氨基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基l-4-羟基-双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯除不使用DMAP夕卜，按照一般方法A，使用Boc-甘氨酸(0.29g，1.6mmo1)和(1S，2S，4S，5R,6R)-2-(2，S-氨基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环己烷画2，6-二羧酸二乙酯盐酸盐(0.2g，0.55mmo1，制备例38)进行制备。用PC-TLC,4mm的8102转子，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)纯化。获得0.54g(620/0，l.OOmmol)白色泡沫状物。[a23D」61.2。(c=0.49，MeOH)'*HNMR(300MHz，CDCl3)50.93(3H,d，J=6.2Hz)，0.94(3H，d，J=6.2Hz),1.25(3H，t，J=7.3Hz)，1.27(3H，t,J=7.3Hz)，1.36(3H，d，J=7.0Hz)，1.43(9H，s)，1.53(1H，d，J=9.5Hz)，1.55-1.69(5H,m)，2.18(1H，dd，J=2.9，5.9Hz)，2.44(1H，dd，J=2.9，6.2Hz)，2.70(IH，d，J=15.8Hz)，4.06(lH.bs)，4.13(4H,q，J=7.3Hz)，4.18-4.28(2H，m)，4.31(1H，d，J=5.9Hz)，4.41-4.45(1H，m)，4.85(1H，bs)，6.57(1H，d，J=7.3Hz)，6.97(1H，bs)。C26H43N309.0.1H2O的分析计算值C，57.46;H，8.01;N，7.73。实测值C，57.18;H，8.00;N，7.64。C26H"N309[M+Na+的HRMS计算值，564.2897。计算值，564.2922,制备例42(1S,2S,4S,5R,6R)-2-『2，-(2S-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-丙酰基氨基1-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯按照一般方法B，使用可商购获得的N-BOC-(L)-缬氨酸和(18，28，48，511，611)-2-(2，8-氨基-丙跣基氨基)-4-羟基-双环[3.1.01己烷-2，6-二羧酸二乙酯盐酸盐(0.2g，0.55mmol，制备例38)进行制备。用PC-TLC，4mm的Si02转子，(10%乙酸乙酯/己烷-67%乙酸乙酯)纯化。获得0.36g(43%，0.68mmol)白色泡沫状物。[ct23D="65.5。(c=0.58，MeOH)。NMR(300MHz，CDC13)&0.91(3H，d，J=7.0Hz)，0.97(3H，d，J=6.6Hz)，1.27(3H，t，J=7.3Hz)，1.28(3H，t，J=7.0Hz)，1.37(3H，d，J=17.3Hz),1.44(9H，s)，1.54-1.61(3H，m)，2.12-2.20(2H，m)，2.42(1H,dd，J=2.6，5.9Hz)，2.70(1H，d，J=15.4Hz)，3.90(1H,t,J=6.6Hz)，4.13(2H，q，J=7.0Hz),4.20-4.29(2H，m)，4.31(1H，d，J=5.9Hz),4.40-4.48(1H，m)，4.93(1H，bs)，6.41(1H，d，J=7.3Hz),6.91(1H，bs)。C25H41N309.0.2CH2Cl2的分析计算值C，55.58;H,7.66;N,7.72。实测值C,55.76;H，7.27;N,7.49。MS(ES)m/z528.3[M+H+.制备例43(lS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-乙酰氨基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>0TO下，搅拌(lS，2S，4S，5R，6R)-2-(2，S-氨基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯盐酸盐(0.30g，0.82mmo1，制备例38)在CH2Cl2(30mL)中形成的溶液，同时按顺序先加入三乙胺(0.16g,1.6mmo1)，然后是乙酰氯(0.10g，1.18mmo1),将反应混合物搅拌过夜并让其升温，用乙酸乙酯(700mL)稀释反应混合物，并用NaHS04水溶液和盐水洗涤。以硫酸镁干燥有机层。用PC-TLC，4mm的SK)2转子纯化，(10%乙酸乙酯/己烷-100%乙酸乙酯)，得到0.2化(79%，0.65mmol)白色泡沫状物。\207的分析计算值C，55.13;H，7.08;N，7.56.计算值C，55.05;H，7.12;N，7.29。CnH26N207[M+Na+的HRMS计算值，393.1638。实测值，393.1644。制备例443-乙酰氧基-2S一叔丁氧基羰基氨基)丙酸将N-甲基吗啉(2.8g，27.2mmol)和重碳酸二叔丁酯(5.8g，25.2mmo1)加入0-乙酰基-L-丝氨酸(3.7g，25.2mmol)在1:1二氧六环:水中形成的溶液中。搅拌反应24小时，然后使其在乙酸乙酯和水之间进行分配.用乙酸乙酯萃取水溶液并弃去有机物。用NaHS04水溶液将pH调节至0-1。乙酸乙酯萃取、Na2S04干燥、过滤并真空浓缩。经闪蒸色谱纯化得产物2.6g(41.7%)。所得物质未经表征即用于制备例15中。制备例45flS,5R、-3-f叔丁氧基羰基氨基)-3-(叔丁氧基羰基)-6-氧杂双环3.1.01己烷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>30分钟内将THF(385mL)中的甲基丙二酸叔丁酯(129g，0.75mmo1)溶液加入THF(900mL)中的LiH(14.9g，1.875mol)与N，N-二甲基亚丙烯脲(DMPU，155g，1.2mol)形成的浆液中，并保持温度为0-5"C。将反应混合物加热至65"C，并在5.5小时内加入THF(100mL)中的顺-l，4-二氯腸2國丁烯(95%，100g,0.8mol,1.08当量)溶液，保持温度为63-67*C。651C下将反应混合物搅拌4小时.反应混合物经水/MTBE处理得l-(甲氧基羰基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯.力匪R(300MHz,CDC13)55.57(s，2H，CH-CH)，3.71(s，3H，CH3)，2.95(s，4H，2CH2)，1.42(s，9H，C(CH3)3)。IR(膜)1734(C-0),1646,1268，1149cm1。将含有l-(曱氧基羰基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯的反应溶液冷却至10-15"C，并在30分钟内将其加入到1NNaOH(l,3L，1.3mol)的冷却溶液(10-15t:)中。25t:下搅拌反应溶液24小时并用GC试验监测.水解反应完全后，将MTBE(645mL)加入到反应混合物中并将溶液搅拌5分钟。静置各层并分离。丢弃有机层。加入1.5MNaHS04溶液(1470mL)以使水层酸化(pH2-3)。加入MTBE(1.3L)并分离各层。用MTBE(385mL)萃取水层，并用5。/。LiCl溶液洗涤合并在一起的有机层。真空浓缩有机层并用庚烷(780mL)稀释。将溶液浓缩至约500mL，室温下搅拌所得浆液1小时。过滤固体、用庚烷(250mL)洗涤并在35lC下真空干燥，得到103.29g(6iy。的收率)l-(羧酸)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯，其为白色固体。mp=119t:。1HNMR(300MHz,CDC13)55.61(s,2H,CH=CH),3.00(s，4H，2CH2),1.46(s,9H，C(CH3)3)。IR:3800-3000(br，COOH)，1741(C02R)，1705(CO2H)，1283)，1149cm1,氮气氛下，在带有机械搅拌器的1L烧瓶中，将l-(羧酸)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯(50g，236mmol)溶于850mL70:30的甲苯:MTBE中，将亚硫酰氯(33.6g，283mmol，1.2当量)加入到被搅拌的反应混合物中，保持温度为23"C。将反应溶液冷却至0-5t:并在30分钟内滴加三乙胺(32.2g，318mmo1，1.35当量)。将反应混合物升温至23C并搅拌1小时。将反应混合物快速滴加至去离子水(625mL)中，保持温度为20-25"C。分离各层并用500mL1M的NaHC03溶液洗涤有机层。浓缩有机层分离l-(氯羰基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯，其为淡黄色液体。NMR(300MHz,CDC13)55.61(s，2H，CH=CH),3.04(appq，J=15.1Hz，4H，2CH2),1.49(s，9H，C(CH3)3)。IR(膜)1796(COCl)，1743(C02R)，1274,1233，1158cm1'将去离子水(700mL)中的四丁基铵硫酸氢盐(0.81g，2.4mmol)溶液加入叠氮化钠(20.16g，310mmol)中。45分钟内，将MTBE/甲苯中的含有1-(氯羰基)-1-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯的溶液加入叠氮溶液中.23"C下搅拌反应混合物3小时，直至反应溶液的GC分析已确定l-(氯羰基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯被消耗掉。分离各层并用1MNaHCO3(540mL)和去离子水(540mL，然后270mL)洗涤有机层。用NaS04干燥有机层并过滤。真空浓缩获得l-(酰基叠氮)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯，其为油状物.NMR(300MHz,CDC13)55.58(s，2H，CH=CH)，2.96(appt，J=2.3Hz,4H，2CH2)，1.46(s，9H，C(CH3)3)。200810096216.7说明书第56/133页IR(膜)2137(CON3)，1720(CO2R)，1246(s，1185，1136cm1),95t:下，l小时内，将l-(酰基叠氮)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯加入到110mL甲苯中。在此条件下放出的氮气以滴加的速度控制。在加入过程中从反应中蒸馏出MTBE。951C下搅拌反应1小时，并使其冷却过夜至23t:。真空浓缩溶剂得到l-(异氰酸酯基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯，其为油状物。&NMR(300MHz,CDC13)55.67(s，2H，CH=CH)，3.01(d，J=15.6Hz，2H),2.61(d，J=15.6Hz,2H)，1.50(s，9H，C(CH3)3)。IR(膜)2258(-NCO)，1732(-C02R)，1157cm1。氮气氛下将叔丁醇(35g，471mmol)加入叔丁醇钾(lM，THF中，471mL，471mmo1)。将反应溶液冷却至0-5"C，60分钟内加入含有l-(异氰酸酯基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯的甲苯溶液，保持温度为0-10*C。使反应升温至23t:，搅拌2小时，用GC测定异氰酸酯起始物质的消失。15"C下，将反应混合物加入去离子水(1.2L)和MTBE(1.2L)的混合物中.搅拌溶液20分钟并分离各层.经蒸馏浓缩将有机层变为约250mL。加入庚烷(500mL)，并将溶液总体积浓缩至250mL。将所得浆状溶液冷却至0t:，搅拌2小时，过滤。用冷庚烷(2x100mL)洗涤滤饼并真空干燥，获得34.54g(52%，由l-(羧酸)-l-(叔丁氧基羰基)环戊國3國烯计算收率)l-(叔丁氧基羰基氨基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯，其为白色固体。m.p.87國89"C。力NMR(500MHz，CDC13)55.63(s，2H，CH=CH)，5.1(bs/H，NH)，2.99(d，J=17.2Hz，2H),2.57(d，J=16.0Hz,2H)，1.46(s,9H)，1.44(s,9H)。13CNMR(CDC13)5173.3，154.9，127.7，81.1，64.5，44.8，28.3，27.8'IR(KBr):3451，2981，2932，1712，1489，1369，1154cm1。MS(FIA)m/e(%相对强度)284.2(M+十1，56)，228.2(73)，172.1(97)，128.0(100)。将100mL乙酸乙酯中的l-(叔丁氧基羰基氨基)-l-(叔丁氧基羰基)环戊-3-烯(20.00g，71mmol)溶液加入四丁基铵硫酸氢盐(4.08，lOmmol，0.17当量)、单过氧化邻苯二曱酸镁水合物(MMPA，52.4g，4.76%活性氧=2.1当量)和去离子水(lOOmL)的混合物中.用机械搅拌器搅拌反应6119小时。30分钟内，将去离子水(100L)中的亚疏酸钠溶液加入反应混合物中。用100mL乙酸乙酯稀释混合物并分离各层。用去离子H2O(100mL)、2NNaOH(2x100mL)和去离子H20(2x100mL)洗涤有机层。在75-卯"C的大气压下蒸馏有机层，直至体积达40mL。将溶液冷却至75TC并加入庚烷(120mL)。将溶液冷却至65TC并任选以希望的产物为晶种。使所得浆液冷却至室温，然后在冰浴中冷却1小时.过滤产物，用80mL冷的4:1的庚烷:EtOAc洗涤，之后在40TC下真空干燥，得15.45g(73。/。收率)目标产物，为白色固体。化合物可进一步从2:1的异丙醇:水中重结晶纯化。m.p.130-1331CJHNMR(500MHz，CDCl3)55.0(bs，lH)，3.58(s，2H)，2.41(d，J=15.3Hz，2H)，2.20(d，J=15.2Hz，2H)，1.43(s，9H)，1.40(s，9H)。13CNMR(CDC13)5171.3，154.3，81.2，79.5，62.8,57.0，38.6，28.3，27.7。IR(KBr):3453，2982，2932，1726，1708，1489，1369，1293，1156，840cm1。MS(FIA)m/e(%相对强度)300.3(M++1，65)，244.4(68)，188.2(100)144.1(99)。制备例46flS,3R)-l,3-二f甲基苄基氨基)丙烷二盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>氮气氛下，将(R)-ot-甲基苄基胺(98。/。ee，121g，lmol)加热至100"C。用70分钟滴加二溴丙烷(25.4mL，50.5g，250mmol)。将混合物另外加热3小时，之后冷却至80"C。用10分钟滴加浓(50。/。)NaOH溶液。加水(30mL)溶解固体，30分钟内将混合物冷却至室温。加入MTBE(100mL)。加入100mL水溶解沉淀物，并分离各层。用50mL盐水洗涤有机层、干燥(Na2S04)并真空浓缩，得到126.0g淡黄色油状物，70t:下(顶部温度)，使用12-英寸的柱子真空蒸馏该油状物，以除去过200810096216.7说明书第58/133页量的(R)-ot-甲基千基胺.在带有搅拌器的2L烧瓶内，将釜底剩余物(68g粗二胺)溶于1L异丙醇中。用10分钟滴加浓HC1(12M，45mL，540mmo1)。另外加入100mL异丙醇，以保证浓浆液完全混合。将混合物搅拌90分钟并过滤。用异丙醇洗涤滤饼，40t:下真空干燥，获得64.32g(72。/o收率，基于二溴丙烷)标题化合物，为白色固体，1HNMR(500MHz，DMSO-d6)59.93(bs，2H)，9.47(bs，2H)，7.56(d，J=7.0Hz，4H)，7.37(m，6H)，4.27(m，2H)，2.84(m，2H)2.48(m，2H)，2.1(m，2H)，1.56(d，J=6.7Hz，6H)'制备例47(lSVl-(叔丁氧基羰基氨基)-:U叔丁氧基羰基)-环戊-4-烯-3-嗣边搅拌边将(lR，3R)-l，3-二(甲基苄基氨基)丙烷二盐酸盐(24.65g,69.3mmo1，制备例46)溶于150mL水中。向溶液中加入35mL(175mmol)5NNaOH溶液，随后再加入150mLMTBE。搅拌15分钟后分离各层，并用100mLMTBE萃取水层。用100mL盐水洗涤合并的有机层，用Na2S04干燥并真空浓缩，得到18.06g(92n/n收率)lR，3R-二(甲基千基氨基)丙烷，为无色油状物。在带有顶部搅拌器的500mL四口烧瓶中，在N2气流下，将20.59g(73.5mmol)的lR，3R-l，3-二(甲基千基氨基)丙烷分别溶解在30mL干燥的MTBE和THF中.将溶液冷却至-45"C并在17分钟内滴加59mL(147mmol)正丁基锂溶液(2.5M，己烷中)。-45匸下搅拌淡黄色溶液2小时。用28分钟时间将(lS,3S，5R)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-3-(叔丁氧基羰基)-6-氧杂双环[3.1.0]己烷(10.00g,33.4mmol)在55mL干燥的THF中的溶液滴加进去，保持温度低于-40lC'用额外的5mLTHF漂洗滴加的漏斗。-45匸下搅拌反应混合物18小时，之后通过滴加4N的硫酸水溶液(75mL)淬灭反应。加完酸后移去冷水浴。分离各层，并用50mLMTBE萃取水层。分别用50mL水和50mL盐水洗涤混合的有机63层，用Na2S04干燥，并真空浓缩，得到9.78g粗578242,为白色固体。将该固体溶解在33mL热MTBE中，并分批加入庚烷(66mL)。使搅拌的溶液冷却至室温，之后在or下搅拌混合物1小时。过滤该固体，用2x10mL冷的2:1的庚烷:MTBE洗涤，并在351C下真空干燥4小时，得到8.52g(85o/o收率)(lS，3R)-l-(叔丁氧基羰基氨基)-l-(叔丁氧基羰基)-3-羟基环戊-4-烯，为白色固体。m.p.111誦112t:。手性HPLC分析99.7%ee。[aD=+114(c1，MeOH)'1HNMR(500MHz，CDCb)56.1(bs，1H)，5.9(bs，1H)，5.55(d,J=5.0Hz，1H)，4.8(m，1H)，4.44(d，J=10.5Hz，1H)，2.87(dd，J=14.5，7.5Hz，1H)，2.00(d，J=14.5Hz，1H)，1.45(s，9H)，1.42(s,9H)'IR(KBr):3413，2983，1703，1491，1370，1309，1255，1155，1055cm1,]\18^1入)111/6(%相对强度)300.3(]\1++1，15)，226.2(29)，170.1(100)，126.1(89),108.3(20)。将2，2,6，6，-四甲基-1曙哝啶氧基(自由基)(TEMPO)(0.84，5.3mmo1)和KBr(0.63g，5.3mmo1，2mL水中)加入(lS，3R)-l-(叔丁氧基羰基氨基)-l-(叔丁氧基羰基)-3-羟基环戊-4-烯(20g，66.8mmo1)在MTBE(200mL)中形成的溶液里，将反应混合物冷却至0"C，滴加含有NaHCO;j(8.4g)的NaOCl(3.14%，240g，100mmol)溶液，保持温度4氐于5"C。0"C下搅拌反应1小时并加热至室温。分离各层，用MTBE(2x200mL)萃取水层。用含有2.21gKI的200mLINHC1溶液洗涤合并的有机层，之后用10%Na2SO3溶液(200mL)洗涤，用水(2x200mL)洗涤有机层，并真空浓缩至干燥。50*€下，将粗产物溶解在MTBE(60mL)中，并加入庚烷(200mL)结晶1小时。2小时内将混合物冷却至0TC，然后过滤。用100mL冷的庚烷:MTBE(65:35)洗涤滤饼并真空干燥，得16.99g(89。/o收率)标题化合物，为白色固体。m.p.116國18"C。[ocD=+123(c1，MeOH)。iHNMR(500MHz,CDCl3)57.4(bs，1H)，6.32(d，J=5.5Hz,lH)，5.6(bs，1H)，2.87(d，J=18.2Hz，lH)，2.9(d，J=18.2Hz,1H)，1.43(s，18H)。1JCNMR(CDC13)5206.1，170.2，160.8，154.9，136.1，84.5，66.1，46.6，28.9,28.4。IR(KBr):3419，2983，1722，1487，1730，1300，1259，1151，1012cm_1。MS(FIA)m/e(。/o相对强度)254.2(M++1,11)，242.3(18)，228.2(13)，186.1(76)，143.2(11)，242.3(100)'制备例48溴化W2-叔丁氧基-2-氧代乙基)四氢噻吩<formula>formulaseeoriginaldocumentpage65</formula>在22L烧瓶中，用30-60分钟时间，将溴代乙酸叔丁酯(2.44L，16.52摩尔，1当量)加入四氢噻吩(2.19L，24.8摩尔，1.5当量)在丙酮(11.38L)中形成的溶液里，期间用水浴保持温度为15-25"C。搅拌反应22小时，用tHNMR分析试样，以确定反应完全。过滤沉淀物，用丙酮(2L)洗涤，并在28-33X:下真空干燥3天，得4.328Kg(92.5o/。收率)标题化合物。1HNMR(500MHz,DMSOd-6)54.40(s，1H)，3.51(m，2H)，3.48(m，2H)，2.23(m,2H)，2.13(M，2H)，1.42(s，9H)。制备例49(18,28,5议,610-2"叔丁氧基羰基氨基)-4-氧代-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二叔丁酯氮气氛下，用10分钟时间将KOtBu(42mL，42mmol，THF中的1M溶液，2.5当量)加入到01C下、乙腈(30mL)中的溴化l-(2-叔丁氧基画2-氧代乙基)四氢瘗吩(11.9g，42mmo1，2.5当量，制备例48)溶液中，保持温度低于5TC。搅拌该乳状液，冷却1.5小时。滴加三氟乙醇(6.9g，200810096216.7说明书第61/133页69mmol，4.1当量)。5分钟内，加入(lS)-l-(叔丁氧基羰基氨基)-l-(叔丁氧基羰基)-环戊-4-烯-3-酮(5g，16.8mmol，制备例47)和三氟乙醇(13.3g，132mmo1，7.9当量)在乙腈(20mL)中的溶液，保持温度为3-5X:。0-51C下搅拌溶液4.5小时。向冷却的反应混合物中加入MTBE(155mL)和H2O(80mL)。分离各层，用H2O(50mL)洗涤有机层，之后用20%盐水(50mL)洗涤。经常压蒸馏将有机层浓缩至约30mL。加入庚烷(100mL)并浓缩溶液。按需要另外再加入庚烷直至馏出物的蒸汽温度达到93TC。加入THF(65mL)，得目标产物溶液。制备例50flS,2S,5R,6R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氣代-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二叔丁酯将1.7L饱和K2C03水溶液加入到0"C的、2.2LCH2C12中的溴化l-(2-叔丁氧基-2-氧代乙基)四氢噻吩(757g，2.67mol，制备例48)溶液中，保持温度低于IO"C。将该两相混合物搅拌1.5小时后，分批加入223mL50"/。的NaOH溶液，保持温度低于51C。搅拌混合物3小时并过滤。用CH2Cl2漂洗该盐。分离各层，并用600mLCH2Cl2萃取水层。用固体K2C03干燥合并的有机层并真空浓缩，得533.3g(98y。收率)(2-叔丁氧基-2-氧代乙基)四氢噻吩，为浅黄色油状物。在冰箱储存时，该油状物结晶为白色固体。mp48國50X:。iH匪R(500MHz，CDCl3)53.12(m，2H)，3.OO(m，2H)，2.85(s,1H)，2.41(m，2H)，1.84(m，2H)，1.38(s，9H)。将474mL(6.5mo1，10当量)三氟乙醇加入0X:下的、650mLCH2Cl2中的(lS)-l-(叔丁氧基羰基氨基)-l-(叔丁氧基羰基)-环戊-4-烯-3-酮(194g，653mmol)溶液中。用40分钟时间滴加325mL<:112(:12中的(2-叔丁氧基-2-氧代乙基)四氢噻吩(396g，1.96mol)溶液，保持温度低于10"C。l小时后移去冰浴。加入去离子水(680mL)并分离各层。用400mLCH2Ch萃取水层。用500mL盐水洗涤合并的有机层，用Na2S04干燥，并真空浓缩，得587g淡黄色油状固体。将固体溶解在400mLCH2Cl2中，用5:1:1的己烷甲基叔丁基醚:CH2Cl2为洗脱液，经1.6Kg的硅胶充填柱洗脱，得总体积为13.2L的洗脱液。浓缩该洗脱液，得398.7g白色固体。将固体溶解在3L回流的70:30的己烷:MTBE中'将溶液冷66却至室温过夜，然后在冰浴上冷却1小时。过滤固体，用冷溶剂(约700mL)漂洗，35"C下真空干燥，得173g(64y。收率)(lS,2S，5R，6R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氧代-双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸二叔丁酯，为白色固体。mpl44画46X:。[ot]D=+30.5(cl，CHC13),iHNMR(500MHz,CDC13)55.36(d,1H)，2.88(m，1H)，2.64(dd，J=5.2，3.2Hz，1H)，2.37(d，J=2.7Hz，lH)，2.23(bs，1H)，1.45(s，9H)，1.43(s，18H),"CNMR(125MHz,CDC13)5206.2，171.2，168.5，155.3，83.4，82.7，80.7，61.2，43.2，36.0，34.328.4，28.2，28.0，25.3,IR(CHC13):2982，1744，1719，1485,1394，1309cm國1。MS(ES+)m/e(。/o相对强度)412.2(M+十l，79)，356.2(50),300.1(97),276.1(68),244.1(100)。(:211133]\07(411.29)的分析计算值:C，61.30;H，8.08;N，3.40。实测值C，61.32;H，8.04;N，3.51。制备例51flS,2S,4S,5R,6R)-2-f叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二叔丁酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage67</formula>氮气氛下，将制备例49的溶液冷却至or;，并滴加三仲丁基硼氢化锂(L-SelectrideTM，1M，THF中，21mL，21mmo1)。O"C下搅拌反应混合物45分钟。滴加2M的碳酸钠溶液(31mL)，保持温度低于8t:。加入在20mL水中形成的30。/oH202溶液(7.15g，63mmo1)，保持温度低于15"C。搅拌10分钟后，加入MTBE(210mL)和去离子水(100mL)。分离各层，并用饱和Na2S03溶液(40mL)和1MNaHS04溶液(40mL)洗涤有机层。在常压下将有机层体积蒸馏浓缩至约卯mL。继续蒸馏并加入庚烷以保持体积恒定。馏出物蒸汽温度达到93TC时，将溶液冷却至200810096216.7说明书第63/133页70匸并加入7mLTHF。将溶液冷却至OTC并搅拌1小时。过滤固体，用冷庚烷(10mL)洗涤，501C下真空干燥，得到4.68g(67%收率)(18，28，48，511，611)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二叔丁酯，为白色固体。m.p.187-88"C。tHNMR(CDCl3，500MHz)55.31(bs，1H)，4.38(d，JAB=10.5Hz，1H)，4.30(dd，J=11.0，6.0Hz，1H)，2.68(d，J=15.3Hz，1H)，2.17(m，1H)，2.07(m，1H)，1.58(m，J=15.2Hz，1H)，1.45(s，9H)，1.44(s，9H)，1.43(s，9H)'"CNMR(75MHz，CDC1"5175.2,170.5，155，83.2，81.3，80.1，73.7，66.9，43.1，36.0，34.4，29.3，28.3，28.1，27.4，22.1,IR(CHC13):3445，2982，1714，1485，1361cm1。MS(ES+)m/e(Q/o相对强度)414.2(M++1,58)，358.1(75)，302.1(78)，246.0(100)。D=+20.6(cl，CHC13)'iHNMR(CDCl3,500MHz)55.45(dd，JH.F=56，JH_H=4.8Hz，1H)，5.28(bs，lH)，3.00(m，1H)，2.23(bs，1H)，2.11(m，1H)，2.08(m，1H)，1.46(s，9H)，1.45(s,9H)，1.43(s，9H)，1.37(m，1H)'13CNMR(CDC13,75MHz)5177.7，170.5，155.0，94.4，92.0，82.2，81.5，80.2，64.7，37.7，33.2，29.7，29.3，28.3，28.1，27.8，20.4'MS(ES+)m/e(o/o相对强度)416.2(M+l，66)，360.1(67)，304.1(100)，248.0(60)。IR(CHC13):3444，2981，1715，1485，1369cm隱1,不带冷却的条件下，用10分钟将SOCl2(21.29g,13.05mL，0.179摩尔，5当量)滴加至(lR，:2S^R，5R，6R)^-(叔丁氧基羰基氨基)-^氟-双环3.1.0己烷-2，6-二羧酸二叔丁酯(14.87g,0.036摩尔)在EtOH(abs，149mL)中形成的溶液中，以制备緩慢回流的溶液。将溶液回流过夜.真空下从反应中除去溶剂。将剩余物溶解在EtOAc(150mL)中，并在5-10分钟内，边搅拌边滴加10%的Na2C03(75mL)溶液。分离各层并用EtOAc(50mL)萃取水层。用盐水(lx50mL)洗涤合并的有机萃取物，用Na2S04干燥，过滤并将产物，(lR，2S，4R，5R，6R)-2-氨基-4-氟-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯真空浓缩为稠密液体，其静置成为固体(11.02g)。-22t:的氮气氛下，将N-甲基吗啉(22.44mL，204mmol)加至N-Boc-L-丙氨酸(38.62g，204mmol)在396mL二氯甲烷中形成的溶液中，之后用15分钟滴加氯甲酸异丁酯(26.48mL,204mmo1)，从而使反应温度不超过-18TC。-20"€下搅拌所得稀浆液30分钟，然后用40分钟向其中加入(lR,2S，4R，5R,6R)-2-氨基-4-氟-双环[3丄0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(49.46g，191mmol)在247mL二氯甲烷中形成的溶液，从而使反应温200810096216.7说明书第65/133页度不超过-16*0。从冷水浴中移去该反应并在室温下搅拌70分钟，加入408mL1N盐酸，搅拌5分钟，并分离各层。用饱和碳酸氢钠溶液(lx408mL)洗涤有机层、干燥(Na2S04)、过滤并将产物，(lR，2S，4R，5R，6R)-2-(2，S-2，-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基)氨基-4-氟-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯真空浓缩为白色泡沫状物(88.16g)。室温下，将46.7mL(93.4mmol)2N氢氧化钠加至粗(lR，2S,4R，5R，6R)-2-(2，S-2，-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基)氨基-4-氟-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(17.5g，37.3mmo1理论值)在46.6mL四氢呋喃中形成的溶液中。室温下剧烈搅拌该两相混合物直至混合均匀，然后再搅拌1小时(总计3小时)。用46mL叔丁基甲基醚稀释混合物，之后再混合10分钟，然后分离各层.在分液漏斗中加入93mL水，再加入8.4mL(101mmo1)浓HC1。任选向该酸性溶液中加入(lR,2S,4R，5R，6R)-2-(2，S-2，-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基)氨基-4-氟-双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸晶种，之后再加入上述的水层。先緩慢加入水层，这样就形成适度稠密的浆液。此时再提高添加速率(总添加时间为40分钟)。用水(16mL)漂洗滴液漏斗。搅拌所得浆液2小时、过滤、用水(2x32mL)洗涤，并在45"C下真空干燥至恒重，得到13.9g(99。/。)标题化合物，为白色固体。制备例53(lR,4S,5S,6S)-4-氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸二乙酯室温下，用20分钟时间将亚硫酰氯(15.5mL，212.6mmol)滴加至(1R，4S，5S，6S)-4-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4,6-二羧酸(10g，42.5mmo1，美国专利5，688，826)在100mL2B乙醇中形成的溶液中，之后用40mL乙醇漂洗。将浆液加热至回流并搅拌过夜。将所得溶液冷却至室温并浓缩为胶状剩余物。向剩余物中加入乙酸乙酯(50mL)，随后用另外的94mL乙酸乙酯稀释。边用手旋转边向混合物70中緩慢加入15"/o的碳酸钠水溶液(70mL)以使其逐渐溶解，所得最终pH为7.95。过滤并分离各层。用乙酸乙酯(2xl00mL)萃取水层。用盐水(lxlOOmL)洗涤合并的有机萃取物、干燥(MgS04)、过滤并真空浓缩，得到淡黄色油状物的标题化合物，其固化为近于纯白色的固体(11.71g，95%收率)。m.p.80-83"C。25D-25.2(c1.03，H20)。200810096216.7说明书第68/133页500MHzNMR(D20)54.07-4.01(迈，2H)，3.45-3.43(m，lH)，3.11(d，lH，J=15.0Hz)，2.85(m，1H)，2.71(s，3H)，2.47-2.35(m，3H)，1.96-1.90(m，4H)，1.78-1.72(m，1H)，1.28(s，9H)。"C匪R(125MHz，CD3OD)5174.45，173.58，172.80，157.46，81.71，61.41，55.04，53.24，42.29，31.71,30.85，29.41，27.79，23.65，14.41。FTIR(ATR)3287.62(s)，1698.00(s)，1528.91(s),1327.36(s)，1283.74(s)，1245.90(s)，1174.81(s)，1109.06(s)，1053.05(s)，874.27(s)，808.95(s)cm陽1,制备例56aR,4S,5S,6S)國4國。，S國4，國甲硫基-2，隱(叔丁氣基羰基)氨基丁酰基)氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸室温下，将397mL(795mmo1)2N氢氧化钠加至(1R,4S，5S，6S)國4-(2，S-4，-甲硫基-2，-(叔丁氧基羰基)氨基丁酰基)氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂画双环3.1.0己烷-4，6國二羧酸二乙酯(166.15g，318mmo1，制备例54)在480mL四氲吹喃中形成的溶液中。室温下将混合物剧烈搅拌2分钟，此时反应变为均相进行，形成澄清的淡黄色/绿色溶液。室温下再搅拌2小时。用480mL叔丁基甲基醚稀释溶液，然后分离各层.将水层滴加至浓盐酸(71.5mL，858mmol)在水(960mL)中形成的溶液中。加入乙酸乙酯(500mL),之后加入剩余的水层，得到乳状液，再用乙酸乙酯(460mL)进一步稀释。将乳状液搅拌40分钟，过滤并水(2x250mL)洗。分离滤出液的各层并用乙酸乙酯(500mL)反萃取水层'用盐水(75mL)洗涤混合的有机层、干燥(MgS04)、过滤并真空浓缩，得到125.26g(84%校准收率)标题化合物，为白色泡沫状物.制备例572-溴-2-氟-2-f3-氣代环戊基)乙酸乙酯73<formula>formulaseeoriginaldocumentpage74</formula>國20"C下，将8.45mL(50.4mmol)三乙基氯硅烷加至无水乙腈(100mL)中的2.99g活化Zn(45.8mmo1)悬浮液中，并搅拌5分钟。加入8.0mL(57.3mmol)2，2-二溴-2-氟乙酸乙酯，并在-20"C下搅拌混合物90分钟。加入1.86mL(22.9mmol)2-环戊烯-l-酮，并将反应混合物搅拌过夜，4吏温度緩慢升至室温。加入HCllN(125mL)和EtOAc(100mL)。用饱和NaHCO3(2xl50mL)、水(2xl50mL)和盐水(2xl50mL)洗涤有机层，用无水MgS04干燥，过滤并减压浓缩.以EtOAc/己烷(l:8)为洗脱液，用柱色谱纯化剩余物，得到标题化合物(5.36￡,88%总收率)，为无色油状物，是非对映异构体混合物.iH匪R(300MHz，CDC13):1.34-1.41(m，6H),1.91國1.95(m，1H)，2.04-2.68(m，llH)，3.12-3,31(m，2H)，4.33-4.43(m，4H)'Zn的活化将10mL浓HC1加至100gZn粉在水(900mL)中形成的悬浮液中。室温下将混合物搅拌20分钟。倾出水，并用水(3x250mL)、丙酮(3x250mL)和乙醚(2xl00mL)洗涤剩余物。35t;下，将剩余物减压干燥过夜。制备例58URS,5RS,6RS)-6-氟-2-氧代双环r3.1.01己烷-6-羧酸乙酯0TC下，将13.0mL(75.0mmol)乙基二异丙基胺加至DMF(8mL)中的2.0g(7.5mmol)2-溴-2-氟-2-(3-氧代环戊基)乙酸乙酯(制备例57)溶液中，并在室温下将混合物搅拌过夜。加入HC11N(20mL)、水(15mL)和EtOAc(75mL)溶液。萃取有机层，用饱和NaHCO3(2xl00mL)、水(2xl00mL)和盐水(2xl00mL)洗涤，用无水MgS04干燥，过滤并减压浓缩，以EtOAc/己烷(l:4)为洗脱液，用柱色谱纯化剩余物，得到反:顺为5:1的标题化合物混合物(1.17g，84%收率)，为无色油状物。iHNMR(300MHz,CDC13):1.33(t，3H，J=7.1Hz)，2.19-2.34(m，3H)，2.41-2.49(m，1H)，2.59(d，1H，J=6.6Hz)，2.71-2.76(m，1H)，4.29(q,2H,J=7.1Hz)。制备例59(11^,28仏51^,61^8)-2-螺-5，-乙内酰脲-6-氟-双环3.1.01己烷-6-羧酸在冰浴下，将(lRS，5RS，6RS)-6-氟-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯(O.lg，0.54mmo1，制备例58)与1NNaOH(0.55mL，0.55mmol)的混合物在乙醇(lmL)中搅拌10分钟。向混合物中滴加INHC1直至pH为1，并使其在EtOAc和盐水之间进行分配。用EtOAc萃取水相两次，并用MgS04干燥合并的有机层，然后减压浓缩。60t:下，将剩余物、(NH4)2CO3(0.31g，3.2mmol)和KCN(0.11g，1.62mmol)混合物在EtOH和水(l:l)(2mL)中搅拌过夜'在冰浴中冷却，用1NKHS04处理使混合物酸化。减压除去溶剂，并将剩余物溶解在MeOH中，过滤并真空浓缩。粗产品可不经进一步纯化就使用。制备例60f1R,2S,5R,6R)-2-f2，R-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-6-氟-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯和(lS,2R,5S,6S)-2"2，R-叔丁氣基羰基氨基画丙酰基氨基)國6-氟画双环3.1.01己烷國2,6-二羧酸二乙酯HN、异构体A异构体B将1.59g(5.0mmol)Ba(OH)2加至0.32g(1.5mmo1)(1R*，2S*，5R*，6R*)-2-螺-5，-乙内酰脲-6-氟-双环[3.1.0己烷-6-羧酸(制备例59)与水(10mL)形成的溶液中，并在105t:下将混合物搅拌过夜。ox:下，用inhci将溶液酸化至pH为l，然后减压浓缩。用绝对无水EtOH溶解剩余物并减压浓缩若干次直至固体完全干燥。OlC下，将0.37mL(5.0mmol)SOa2加至溶解在无水EtOH中的剩余物中，然后回流搅拌5小时。用饱和NaHC03碱化溶液，并加入EtOAc(25mL)。分离有机层，用更多EtOAc(2x25mL)萃取水层。用无水MgS04干燥混合的有机层，过滤并减压浓缩。将剩余物溶解在DCM-DMF(4:1)、0.73g(1.9mmol)HATU、0.26g(1.9mmol)HoAt、0.35g(1.8mmol)L画Ala的20mL混合物中。加入2.7mL(15.3mmol)二异丙基乙基胺并在Ar气氛下将混合物搅拌过夜。加入DCM(15mL)，分离并用饱和NaHC03(2x25mL)、水(2x25mL)和盐水(2x25mL)洗涤。用无水MgS04干燥有机层、过滤并减压浓缩。以EtOAc/己烷(l:2)为洗脱液，用柱色谱纯化剩余物，得到标题化合物(0,33g，51%总收率)，其为l:l的非对映体混合物，为无色油状物o用手性HPLC,按照下列分析方法分离非对映体混合物ChiralpakAD10m,4.6x250mm;洗脱液己烷中的10。/oIPA;流速1.0mL/分钟；UV:215nm。异构体A保留时间=5.9分钟。异构体B保留时间-9.2分钟。异构体A:(1R，2S,5R，6R,2，R)-2-(2，-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)_6-氟-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯AHNMR(300MHz,CDC13):1.18(t，3H，J=7.1Hz)，1.23(t，1H，J=7.1Hz)，1.36(s，9H)，1.56画1.68(m，lH)，2.03-2.11(m，2H)，2.21誦2.31(m，1H)，2.37國2.45(m，1H),2.61-2.63(m，lH)，4.09-4.16(m，5H)，5.10(bd，1H，J=6.6Hz)，7.11(bs，lH),13C-NMR(75MHz,CDC13):13.9，14.0，17.7，24.9(d，J=1.0Hz),28.1，31.5(d，J=10.9Hz)，34.9(d，J-9.4Hz)，36.4(d，J-8.8Hz)，49.1，61.5，61.8，67.4，77.2，81.5(d,J=242.6Hz)，155.4，168.6(d，J=25.1Hz)，171.8和172.7ppm。异构体B:(1S，2R，5S，6S，2，R)-2-(2，-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-6-氟-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯iHNMR(300MHz，CDC13):1.13(t，3H，J=7.1Hz)，1.18(t，1H，J=7。lHz)，1.31(s，9H)，1.51画1.60(m，1H)，1.98誦2.07(m，2H)，2.15画2.22(m，lH)，2.26-2.39(m,1H),2.55國2.60(m，1H)，4.07-4.12(m，5H)，5.20(sd，1H)，7.22(bs，lH)。13C-NMR(75MHz，CDC13):13.7，13.8，18.0，24.7,28.0，31.4(d，J=10.9Hz),34.5(d，J=8.9Hz)，36.3(d，J=9.4Hz),49.1，61.4，61.7，67.3，77.2，81.4(d，J=242.6Hz)，155.2，168.5(d，J=25.1Hz)，171.7和172.8ppm。制备例61(1R,2S,5R,6R)-2-氨基-6-氟-双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸将30mg(0.07mmol)制备例60中的异构体A置于6NHCl(2mL)中回流过夜。减压除去溶剂，用乙醚洗涤，溶于MeOH(lmL)中，并加入环氧丙烷(propileneoxide)(2mL)。室温下搅拌过夜。倾去溶剂，用乙醚洗涤剩余物，并用Ar气流干燥，得到标题化合物(12mg，85%)，为白色固体。(1.24mmoles，基于未校效能的重氮乙酸乙酯为0.0472mol%，基于纯的重氮乙酸乙酯的摩尔数为0.052mol%，JohnsonMathey:1ot.No.059255001)。将悬浮液加热至46匸，并在46TC下搅拌IO分钟，从而溶解为绿色溶液。经正排量泵，向该溶液中加入300g重氮乙酸乙酯(90%纯，2.63摩尔，2.37摩尔纯品，1.00当量，Aldrich:批号(LotNo.)17603PI)溶于1600mL噻吩中所形成的溶液。加入速率应使总加入时间为8小时；加入速度慢抑制马来酸乙酯和富马酸乙酯的形成。没有重氮乙酸乙酯剩余时(约30分钟)，将深琥珀色反应物(3，985g)冷却至23*C。将反应混合物分为几部分，较多的部分(3，240g/3，985g-81.3。/o)直接浓缩为油状物。1.5托、23X:下，使粗产物通过转膜蒸馏装置，使产物脱气并除去剩余的噻吩。然后在120t:和1.3托下蒸馏产物。目标产物(淡黄色)收集为两批馏分，155.0g和32.2g。经HPLC分冲斤确定两批各自的效能为78%和76%。对上述馏出物进4亍结晶将其溶解在甲醇(2mL/g馏出物)并冷却至-lO"C，此时若未观察到晶体生长可任选向溶液中加入晶种。一旦晶体开始生长，就将混合物进一步冷却至-45t:并搅拌2-3小时，过滤并用冷(-45匸)甲醇(1xlmL/g馏出物)洗涤。24"C下真空干燥该物质，得到标题化合物，为白色-近白色固体，回收率80-85%，效能>98%.制备例64"S,6SV4-羟基-2-硫杂双环『3.1.01己烷-6-羧酸乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>在15-20分钟内，向0n、氮气氛下、(6S)-4國硫杂双环[3丄0己-2國烯-6-羧酸乙酯(22.2g，131mmol)在136mL四氢吹喃中形成的溶液中加入硼烷-THF络合物(98mL，98mmo1)。O"C下搅拌30分钟后，使反应升温至15TC并搅拌直至HPLC判断反应完全(1.5-2小时)。将反应冷却至0X:，并用10-15分钟时间将其转移至lllmL已预冷却(0t:)的1NpH为7的緩冲溶液中，保持温度为ox:。分五次向混合物中加入过硼酸钠一水合物(15.6g，157mmol)固体，以使温度保持在低于20"C。使溶液升温至室温并搅拌l小时，随后加入222mL水。搅拌2小时后，加入溶解在24mL水中的硫代硫酸钠五水合物(9.7g)淬灭过氧化物，之后搅拌10分钟。用乙酸乙酯(2x222mL)萃取混合物。用饱和碳酸氢钠水溶液(lx222mL)洗涤混合的有机萃取物，之后用盐水(lx222mL)洗涤，并真空浓缩至干燥.将粗产品溶解在1，2-二氯乙烷(lmL/lg粗油)中，并上硅胶柱(4g硅胶/lg成浆和装填在15°/0乙酸乙酯-庚烷中的粗油).用15%乙酸乙酯-庚烷洗脱柱子，直至产物在TLC上可见，此时将溶剂变为50%乙酸乙酯-庚烷.将所有含目标产物的部分混合起来，并真空浓缩为油状物。总收率为55-65%,制备例65f6S)-4-氧代-2-硫杂双环『3.1.01己烷-6-羧酸乙酯在30分钟内，向-70"C下、二甲亚砜(33.4mL，471mmol)在194mL二氯曱烷中形成的溶液中緩慢加入三氟乙酸酐(33.2mL，235mmol)在73mL二氯甲烷中形成的溶液(温度保持在低于-66X:)。搅拌20分钟后，用60分钟时间向其中加入(4S，6S)-4-羟基-2-硫杂双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯(34.1g，181mmol)在194mL二氯甲烷中形成的溶液，以使温度保持在低于-60"C。搅拌1小时后，用三乙胺(75.7mL，543mmol)将反应物处理35分钟，以使温度保持在低于-50TC。再搅拌反应l小时，此时移去冷水浴并加入400mL2N的盐酸。升温至01C后，分离各层，并用2N盐酸(lx300mL)、1N碳酸氢钠水溶液(lx670mL)和水(1x300mL)洗涤有机层，之后用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩为红色油状物，其静置产生固化.让粗产物上硅胶填充柱(2g/lg填充了二氯曱烷的起始醇)，并用二氯甲烷(200-300mL)洗脱。收集所有含产物的部分并浓缩，得到目标产物，为橙色/棕色固体。通常校正收率为85-卯％。制备例66f6S,11S)-8,10-二氧代-2-硫杂螺『双环『3.1.01己烷-4,5，-咪喳烷l-6-羧逸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>将碳酸铵(2.46g，25.6mmol)和氰化钾(0.817mg，12.5mmol)混合在19.9mL甲醇中，搅拌30分钟。用19.9mL甲醇中的(6S)-4-氧代-2-硫杂双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯(2.39g，12.8mmol)溶液处理混合物，将反应加热至30TC，并搅拌23小时。蒸发出挥发物，将剩余物溶解在2.75N氢氧化钠(13.1mL)中，搅拌1小时。用13.1mL水稀释后，用浓盐酸将pH降至3.1，并任选以(6S，llR)-8，10-二氧代-2-硫杂螺[双环[3.1.0]己烷-4，5，-咪唑烷卜6-羧酸为晶种，将pH降至l.O，将悬浮液冷却至O"C,并搅拌1.25小时。收集褐色固体，用冷水(2.3mL和0.8mL)洗涤，并在40X:下真空干燥过夜，得到2.00g(55。/o校正纯度)(6S，llR)-8，10-二氧代-2-硫杂螺[双环[3.1.0己烷-4，5，-咪唑烷]-6-羧酸，用50mL乙酸乙酯稀释滤出液并用18mL氯化钠处理。搅拌15分钟后，分离各层，进一步用乙酸乙酯(2x50mL)洗涤水层。用硫酸钠干燥混合的有机层，过滤，真空浓缩为浆液(约5mL)，向其中加入叔丁基甲基醚(25mL)，之后搅拌过夜。收集固体，用叔丁基甲基醚洗涤，并在40TC下真空干燥2小时，得到0.64g(10。/。校正纯度)标题化合物，其为非对映乙内酰脲的1:1混合物。将第二批乙内酰脲与第一批乙内酰脲混合起来，进行下面的步骤。向外消旋酒石酸(15g，65.7mmol，非对映乙内先脲的比例约6:1)在300mL乙醇和75mL水中形成的溶液中加入(R)-苯基甘氨醇(9.0g，65.7mmol)中。将混合物加热至约80*C以促进溶解。将该深色溶液緩慢冷却，40-45"C可观察到沉淀。将该浆液进一步冷却至O"C并保持1-1.5小时。收集固体，用4:1的乙醇:水(lx60mL，预冷却至0^C)洗涤(同时搅拌)，651C下真空干燥12-24小时.通常拆分的盐的产率为37-45%，且观察到〉98。/ode和〉98。/。ee。将拆分的盐溶于6体积(mL/g)水中，之后用1.1当量的浓HC1处理。将浆液冷却至0"C并搅拌1小时，之后过滤，用l体积的冷水漂洗，并在601C下真空干燥.通常标题化合物产率>90%，且o/ode和％ee>99%。制备例67(6S,llS)-2,2,8,10-四氣代-2-硫杂螺双环『3.1.01己烷-4,5，-咪唑烷l國6画羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage81</formula>向6.8mL水、0.7mL50。/o氢氧化钠水溶液和186mg(0.74mmol)鴒酸中加入(68，118)-8，10-二氧代-2-硫杂螺[双环[3.1.0]己烷-4，5，-咪唑烷]-6-羧酸(3.4g，14.9mmo1)。将所得溶液加热至50"C，并在66分钟内，用35。/o过氧化氢(7.7mL，74.5mmol)緩慢处理。之后在47-48"C下搅拌反应5小时，随后冷却至0"C，用一薄层硅藻土过滤，并用冷水(lx2mL)漂洗。将滤出液加热至501C，用浓盐酸处理使pH4.5。使浆液冷却至室温并搅拌过夜。冷却至0X:后，过滤浆液，用冷水(2x2mL)洗涤，55"C下真空干燥至恒重，得3.19g(82o/。)标题化合物，为白色固体[ot]25D-48.6(c1.19，1NNaOH)'mp275"C(灰色)，295X:(棕色)。500MHziHNMR(DMSO-d6)&13.15(brs，1H)，10.99(s，1H)，8.13(s，1H)，3.85(d，lH，J-15.0Hz)，3.74(dd，1H，J-7.0,4.0Hz)，3.03(d，1H，J=15.5Hz)，2.80(dd，1H，7.0，4.0Hz)，2.39(t，lH，J-4.0Hz),"C匪R(125MHz,DMSO-d6)5174.39，169.87，156.35，62.67，52.59，44.16，31.69,21.92;FTIR(KBr)3317(s)，3250(s)，3211(s)，3086(w)，1791(s)，1742(s)，1713(s)，1327(s)，1192(s)，1140(s)cm1。C8H8N206S的分析计算值:C，36.93;H，3.10;N,10.77。实测值C,36.76;H，3.07;N，10.60'制备例68(1R,4S,5S,6S)-4-氨基-f2-磺酰基双环[3.1.0]己烷)－4,6-二羧酸向不锈钢Pair反应器中加入(6S，llS)-2，2,8，10-四氧代-2-硫杂螺[双环[3.1.0]己烷-4,5，-咪唑烷]-6-羧酸(2.50g，9.60mmol)和2N氢氧化钠(24.0mL，48.0mmo1)。混合物加热至95"C并搅拌21小时后，再将混合物冷却至室温并用活性碳(1.25g)处理。用硅藻土过滤混合物，并将馏出液浓缩为17g，再用H20稀释得重量24g。用浓HCl将pH降至6.5，并将混合物加热至62t:。用浓HCl将pH降至2.5后，发生结晶作用.先使悬浮液冷却至30"C，再将pH调节至1.7，再将温度降至5t:。悬浮液在此温度下保持18小时后，收集固体并用冷H20(2x2.9mL)洗涤。45"C下真空干燥该白色固体，得到标题化合物(1.81g，80°/)。使标题化合物在10体积水中成浆并在3-4小时内加热至85TC，冷却至室温，搅拌2-3小时，过滤，并用水(lxl体积)洗涤。回收率>95%。制备例69(6S)-2-氧代双环[3.1.0]己烷-6-羧酸乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage83</formula>室温下，用15分钟时间向溴化(乙氧基羰基甲基)二甲基锍(134g，585mmol)在486mL乙腈中形成的悬浮液中滴加87.4mL(585mmol)l，8國二氮杂双环[5.4.0十一碳-7-烯。搅拌l小时后，用40g(487mmol)2-环戊烯-l-酮处理黄色混合物10分钟。将混合物搅拌过夜，再加入480mL叔丁基乙基醚，随后用IN盐酸(Ix240mL)洗涤，水层用甲基叔丁基醚(lx240ml)洗。用盐水(lx400mL)洗涤合并的有机萃取物、干燥(MgS04)、过滤，并真空浓缩，得到粗(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯，为橙色固体(84.8g)。可通过蒸馏(~138匸，10mmHg)、随后使固化的馏出物在庚烷中成浆、过滤、干燥来纯化粗物质。制备例70(±)(6S)-2-氧化双环[3.1.0]己烷-6-羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage83</formula>室温下，向粗(6S)-2-氧代双环[3.1.01己烷-6-羧酸乙酯(30.2g，180mmol，未校正)在30mL乙醇中形成的溶液中加入89mL(178mmol)2N氢氧化钠。搅拌80分钟后，用叔丁基甲基醚(lx90mL)洗涤反应混合物，并用浓盐酸(18mL)处理水层使pH-1.0。用15g氯化钠处理混合物，之后用乙酸乙酯(3x卯mL)洗涤。干燥混合的有机萃取物(Na2S04)，过滤，真空浓缩，得到23.8g(94。/。，未校正)标题化合物，为近白色固体。制备例71f±)f6S)-2-氧代双环〖3.1.01己烷-6-羧酸N-苄基-a-甲基苄基胺盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage84</formula>向回流温度下、粗(±)(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸(11.9g，84.9mmo1，假设100%效能)在119mL6:l乙酸乙酯乙醇中形成的溶液中加入18g(85.1mmol)(S)-N-节基ot-甲基卡基胺。溶解后，将混合物冷却至52"C并任选随后在此温度下加入晶种。冷却至室温，且再搅拌13.5h后，收集晶体并用6:1的乙酸乙酯乙醇(2x48mL)洗涤。真空干燥，得到10.8g(36%，77。/ode)拆分的盐，其为固体.通过衍生的甲基酯的手性GC分析来确定盐的de，其制备如下将150迈g拆分的盐溶于5mL二氯甲烷中，用1N硫酸(2xlmL)洗涤。干燥有机层，过滤，用2mL甲醇稀释，并用己烷中的lmL2M三甲基甲硅烷基重氮曱烷处理.室温下搅拌15分钟后，真空浓缩混合物，得到适于手性GC分析的甲基酯。GC条件30mx0.25mmx0.25jiP-DEX325柱，140"C烘箱温度，氦栽气@111117分钟，250"C下FID检测，lpL份1:100，试样(lmg/mL于二氯甲烷中。制备例72(6SV2-氧代双环〖3.1.01己烷-6-羧酸乙酯向46.3g(132mmol)(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸N-节基-oc-甲基苄基胺盐在200mL乙酸乙酯中形成的溶液中加入198mL(198mmol)2N氢氧化钠。混合良好后，分离各层，并用乙酸乙酯(1x200mL)洗涤水层。用18mL(211mmol)浓盐酸和100g氯化钠处理水层。搅拌混合物30分钟，之后用乙酸乙酯(2x200mL)洗涤。干燥合并的有机物(MgSO"，过滤，真空浓缩，得到lSJg("。/。)拆分的酸[(+)(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸I，为白色固体。接下来，将1Og(71mmol)上述的粗拆分酸产物溶解在42mL乙醇中，并滴加4mL(71mmol)浓硫酸进行处理。将混合物加热至45X3并搅拌75分钟。冷却至室温后，加入45mL水，并一起加入20mL乙酸乙酯和12g碳酸氢钠。搅拌几分钟后，用乙酸乙酯(2x50mL)洗涤混合物。干燥合并的有机物(MgS04)，过滤，真空浓缩，得11g(92。/。)粗(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯，为白色固体。由6:l/庚烷:叔丁基甲基醚(3.5mL/g底物)中结晶得标题化合物，产率约80%，且通过手性GC分析>980/氛制备例73f6S)-6"乙氣基羰基)双环『3.1.01己-2-烯-2-基乙酸酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage85</formula>使用Dean-Stark装置，将异丙烯基乙酸酯(2.26L)中的(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷國6-羧酸乙酯(380.1g，2.26mol)和硫酸(18M，6.3mL，0.11mol)混合物加热回流2.5小时，此时GC分析显示，标题化合物与(6S)-2-氧代双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯为9:1的混合物。蒸馏1小时除去950mL溶剂后，GC显示产物/起始物质比为17:1。加入另外的异丙烯基乙酸酯(900mL)和浓H2S04(3.15mL)，在回流温度下再搅拌混合物15小时，此时GC显示27:l产物/起始物质。蒸馏除去另外的1.35L溶剂后，将混合物冷却至室温，然后用MTBE(2L)、H2O(250mL)和饱和NaHCO3水溶液(800ml)稀释。分离各层，用盐水(400mL)洗涤有机层。用MTBE(400mL)萃取合并的水层，干燥合并的有机层(Na2S04)，过滤并浓缩至暗红/棕色油状物(540g)。将粗油分为两等分并用快速SK)2层(每批713g)过滤，用10:1/庚烷乙酸乙酯洗脱。将来自两个充填柱的含产物部分结合起来并进行浓缩，得到目标混合物，为黄色油状物(460g，97%;用NMR对溶剂进行校正后为90%),用乙酸乙酯/己烷(l:5)洗脱的硅胶柱色谱制得标题化合物的分析纯试样，为无色油状物.[oc25D+185(c1.48，CHC13)。500MHz4NMR(CDC13)55.19-5.18(m，lH)，4.12(q,lH，J=7.0Hz)，4.11(q，1H，J=7.0Hz)，2.74-2.69(m，lH)，2.48-2.43(m,2H)，2.22-2.19(m，1H)，2.16(s，3H)，1.39(dd，1H，J=2.5，2.5Hz)，1.25(t，3H，J=7.0Hz)。"C匪R(125MHz，CDC13)5173.37，169.01，152.26，111.56，61.28，32.47，32.40，29.72，24.97，21.67，14.95。FTIR(CHCl3)3026(m)，2985(m)，1724(s)，1272(s)，1187(s)cm1。CuH18N04[M+NH4]+的ESHRMS计算值228.1236，实测值228.1252。制备例74(3S,lR,6RV7-氣杂-5-氣代三环『4.1.0.(X2,4:H庚烷-3-羧酸乙酯将2.02L1，4-二氧六环中的(6S)-6-(乙氧基羰基)双环[3.1.0己-2-烯-2國基乙酸酯(212.2g，l.Olmol)和2,3-二氯-5,6-二氰基-l，4-苯醌(252.0g，l.llmol)混合物加热至回流，并搅拌17小时，此时GC分析显示完全转化为(6S)-4-氧代双环[3.1.0]己-2-烯-6-羧酸乙酯。将混合物冷却至室温并用THF(564mL)稀释。混合物冷却至8"C后，用30分钟时间加入1，8-二氮杂双环[5.4.0十一碳-7-烯(377mL，2.52mol)，以使反应温度保持在低于10"C。然后将混合物冷却至51C，并在50分钟内加入叔丁基过氧化氲(70wt0/。，水中，210mL，1.51mol)，保持反应温度低于9"C。将混合物再搅拌50分钟后，过滤反应物并用MTBE(2x800mL)洗涤棕色滤饼。向滤出液中加入1.20L1NHC1，混合良好后，分离各层'依次用饱和NaHCO3(1.20L)水溶液、饱和Na2S2O3(1.20L)水溶液和盐水(600mL)洗涤有机层。溶液经干燥(Na2S04)后，浓缩为橙色泥状沉积物，并用200mL庚烷稀释。蒸发出挥发物，制得橙色固体，用350mL庚烷研磨，过滤，用另外的庚烷(2xl75mL)洗涤滤饼。室温下将被收集的固体真空干燥17小时，制得138.7g(75o/。)标题化合物，为棕黄色固体。由MTBE中结晶制得标题化合物的分析纯试样，为白色固体。[oc]25D+2.3(c1.20，CHC13)，+8.4。(c1.28，丙酮)；mp129-130"C。500MHzNMR(CDC13)54.16(q，2H，J=7.0Hz)，3.99(t，1H，J=2.5Hz),3.24-3.23(m，1H)，2.96画2.94(m，1H)，2.21-2.19，(m，1H)，2.08(t，lH，J=3.0Hz)，1.26(t，3H，J-7.0Hz),13CNMR(125MHz，CDCl3)5201.19,168.84，62.42，57.04，51.25，31.16，30.54，29.60，14.79,FTIR(KBr)3087(w)，3059(w)，3051(w)，3007(w)，2993(w)，2963(w)，1753(s)，1719(s)，1273(s)，1191(s)，1009(m)，848(m)cm1。C9l^。04的分析计算值C,59.34;H，5.53。实测值C,59.32;H，5.43。制备例75f6S)-4-氧代双环『3.1.01己-2-烯-6-羧酸乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>虽然标题化合物通常原位用于制备(3S，lR，6R)-7-氧杂-5-氧代三环[4.1.0.0<2，4>庚烷-3-羧酸乙酯，但也可获得标题化合物的分析纯试样过滤含有此化合物的反应混合物，并蒸发滤出液以得到棕色固体。将该固体重新悬浮在乙酸乙酯中，过滤悬浮液并浓缩滤出液。剩余物经硅胶和乙酸乙酯/己烷(l:5-l:2)色谱法制得标题化合物，其由热乙酸乙酯中重结晶出来，再按前面的条件经色诿处理，得到标题化合物，为白色固体。己烷-6-羧酸乙酯(68.2g，由于乙醇杂质，经校正为60.0g,(U26mo1)溶液中加入(R)-甲基千基胺(46,3mL，0.359mol)和NaCN(20.8g，0.424mol)，保持温度介于20-25"C之间。然后用10分钟时间加入浓HCl(35.3mL，0.424mol),期间保持上述反应温度。将暗棕色混合物搅拌1小时，之后任选以标题化合物为晶种引发结晶作用。将悬浮液搅拌1小时，之后加入H20(664mL)。将悬浮液再搅拌1.75小时，收集标题化合物，其为褐色固体，用H20(332mL)洗涤。使空气从过滤器上的湿滤饼中通过25分钟，然后将该物质直接用于腈水解(湿滤饼重145g)。虽然真空干燥过程中的温度高于251C，则标题化合物迅速分解，但可在室温下真空干燥少量试样而不产生分解。[a]25D+81.6(c1.18，CHC13),mp70-72"C。500MHz力匪R(CDC13)57.39(d，2H，J=7.0Hz)，7.26-7.16(m，3H)，4.31(d，lH，J=5.0Hz)，4.22(q，lH，J=6.5Hz)，3.93-3.85(m，2H)，2.33(d，1H，J=15.0Hz)，2.01(brt，1H,J=4.5Hz)，1.64(dd,1H，J=15.0,5.0Hz)，1.55-1.54(m，1H)，1.40-1.39(m，4H),1.17(t，3H,J=7.0Hz)。"CNMR(125MHz，CDC13)5170.54，144.85，128.61，127.45，127.38，121.88,72.17，61.02,60.66，56.57，45.82，36.70，34.45，25.83，21.75，14.22。FTIR(KBr)3568(m)，3489(m)，3285(m)，2923(m)，2228(w)，1712(s)，1298(m),1197(m)cm1,C18H23N203[M+H+的FABHRMS计算值315.1709，实测值315.1704。制备例782-"lRVl-苯基乙基、氨基l(2S,4S,6RV4-羟基双环〖3.1.01己烷-2,6-二羧酸向DMSO(220mL)中的2-[((lR)-l-苯基乙基)氨基](2S，4S，6R)-2國氰基-4-羟基双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯湿滤饼(0.32611111101理论值)溶液中緩慢加入30%H2O2(44.5mL，0.426mol)，保持温度低于27"C。将温度降至19"C，首先用15分钟时间小心緩慢地加入5NNaOH(52.3mL，0.262mol)，保持温度为22-27lC。需要使用适当容积的冰浴处理反应热。在上述温度范围内搅拌该棕色、均相混合物20分钟后，HPLC显示起始物质已被消耗掉，生成了酰胺中间体。将反应混合物再搅拌1.5小时后，加入Na2S03(13.7g，0.109mol)，并搅拌混合物15分钟，此时用淀粉-碘化物试纸测试其对过氧化物为阴性.加入3NNaOH(291mL，0.873mol)后，将混合物加热至85TC并搅拌18小时。将均相的棕色混合物冷却至30X:，加入浓HCl使pH降至3.6，保持温度为30-35*C。PH为3.6时结晶开始，之后再搅拌悬浮液15分钟，然后将pH降至2.5。将混合物再搅拌10分钟后，冷却至21C并搅拌2小时，之后收集灰色固体并用冷H2O(400mL)和EtOH(300mL)洗涤。45"C下将收集到的固体真空干燥17小时，得到42.9g(43%，由制备例18的起始物质计算得)标题化合物。为了进一步加工反应中制得的标题化合物，按下列方式由母液中进行回收。蒸发母液中的乙醇部分，将剩余物与母液中的水'溶液部分结合。减压蒸除H20(485mL)，用70mL5NNaOH和5mL50%NaOH将母液pH调节至12.9。用n-BuOH(3x800mL)洗涤溶液，用浓HCl将pH调节至2.5，并浓缩溶液。用EtOH(100mL)稀释剩余物并蒸发出(2x)挥发物，用EtOH(150mL)稀释剩余物，并用EtOH(75mL)洗涤含另外的标题化合物和盐的褐色固体，50t:下真空干燥至重量为102g。两批标题化合物都用在随后的酯化反应中.[oc]25D+4.5(c1.41，1NNaOH)。mp220"C(由近白色变为灰色)，280X:(棕色)。500MHzJHNMR(D20，KOD)57.39(d，2H，J=7.0Hz)，7.19-7.04(m,5H)，3.92(d,1H，J=5.0Hz)，3.67(q，lH，J=7.0Hz)，1.76(d，lH，J=15.0Hz)，1.54-1.52(m，1H)，1.37(dd，lH，J=l5.0,5.0Hz)，1.15(d，3H，J=6.5Hz)，1.12(dd，1H，J=6.0，3.0Hz)，0.92(t，lH，J-3.3Hz)。"CNMR(125MHz，D20，KOD)5185.82，182.96，148.01，131.31,129.97，129.78，74.99，73.84,58.78,46.91，38.05，35.02，27.34，27.15,FTIR(KBr)3366(m)，3072(s)，2886(s),1696(m)，1611(m)，1560(m)，1455(m)，1377(m)，1278(m)，1202(m)，1188(m)cm陽1。d6HwN05的分析计算值:C，62.94;H，6.27;N，4.59。实测值C,62.70;H，6.21;N，4.67。制备例792-K(lR)-l-苯基乙基)氨基K2S,4S,6R)-2-氨基甲酰基-4-羟基双环3.1.01己烷-6-羧酸乙酯虽然标题化合物通常原位用于制备2-[((lR)-l-苯基乙基)氨基(2S，4S，6R)-4-羟基双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸，但也可对化合物进行分离，只是由于腈水解过程中伴随有酯的水解，因此会带来一些产率损失。分离中，只要2-[((lR)-l-苯基乙基)氨基(2S，4S,6R)-2-氰基-4-羟基双环3.1.0]己烷-6-羧酸乙酯被消耗，就使腈水解的反应混合物在CH2Cl2和1120之间进行分配。有机层被干燥(MgS04)和浓缩后，剩余物经硅胶柱色谱，用EtOAc/己烷(2:l)-EtOAc洗脱纯化，得到标题化合物，为白色泡沫状物."d+61.3(c1.20，CHC13)。500MHz*HNMR(CDC13)57.32画7.20(m，5H)，7.19(brd，lH，J=4.0Hz)，5.49(brd，1H，J=4.0Hz),4.88(d，1H，J=11.5Hz)，4.24(dd，lH，J=11.5，6.0Hz)，4.06-4.00(m，2H)，3.77(q，1H，J=7.0Hz)，2.21(d,lH，J=15.0Hz)，2.18國2.15(m，2H)，1.71(brs，1H)，1.54(dd，1H，J=14.5,6.0Hz),1.38，(d，3H,J=6.5Hz)，1.32(t，1H，J=3.3Hz)，1.24(t，3H,J=7.0Hz)。13CNMR(125MHz,CDC13)5180.42，171.47，146.05,128.97，127.43,126.48，73.16，70.76，61.08，56.00，42.82，35.97，35.67，26.13，21.53,14.34。FTIR(CHC13)3441(m)，3345(m)，2975(w)，1725(s),1665(s)，1288，1186(m)cm1。(:18824]\204的分析计算值C，65.04;H，7.28;N，8.43.实测值C，65.41;H，7.58;N，8.32,制备例802-『"lR)-l-苯基乙基)氨基lf2S,4S,6R)-2"乙氧基羰基V4-羟基双环3.1.01己烷-6-羧酸乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage92</formula>室温下，经滴液漏斗向48mL乙醇中的2-[((lR)-l-苯基乙基)氨基(2S，4S,6R))-4-羟基双环[3.1.0]己烷-6-羧酸(4g，13mmol)悬浮液中加入乙酰氯(11.2mL，157mmo1)，以使反应保持在温和的回流状态。回流下将所得溶液再搅拌16小时，冷却至室温后，真空浓缩为固体剩余物。用100mL水中的碳酸氢钠(6.6g)溶液緩慢处理固体，之后用乙酸乙酯(2xl00mL)洗涤。合并的有机物经干燥(MgS04)，过滤和真空浓缩，得到4.7g(99%)标题化合物，其为固体。经硅胶柱色谱，用CH2Cl2/MeOH(95:5)洗脱，之后再由Et20中结晶出来，得到标题化合物的分析纯试样，为白色固体。25D+52.5(c1.30，CHC13),mp73-74X:。500MHz4NMR(CDCb)57.29-7.14(m,5H)，4.25(dq，1H,11.0，7.0Hz)，4.18(dd，1H，J-9.5,5.5Hz)，4.10(dq，lH，J=11.0，7.0Hz)，3.92(dq，lH，J-ll.O，7.0Hz)3.82(dq,lH，J=11.0Hz，7.0Hz)，3.67(q,lH，J=7.0Hz)，2.73(d，lH，J=9.5Hz)，2.15-2.12(m，2H)，2.01-1.99(m，lH)，1.89(dd，1H，J=6.0，3.0Hz)，1.61(dd，1H,J=15.0，6.0Hz),1.36(t，1H，J=3.5Hz)，1.33-1.30(m，6H)，1.18(t，3H，J=7.0Hz)。13CNMR(125MHz，CDC13)05178.11，171.59，146.32，128.41，127.07，126.85，73.33，70.15，62.07,60.75，56.66，44.72,36.78，33.61，26.24，20.07，14.37，14.23。FTIR(KBr)3492(s),3303(m)，3055(w)，2981(w)，2896(w)，1722(s)，1705(s)，1289(m)，1251(m)，U77(m)cm1。C2oH27NOs的分析计算值C，66.46;H，7.52;N，3.88。实测值C，66.42;H，7.44;N，3.92。制备例812-『aiR)-l-苯基乙基)氨基l(2S,4R,6R)-2-(乙氧基羰基V4-氟双环3.1.01己烷-6-羧酸乙酯-20"C下，用15分钟时间，向CH2Cl2(690mL)中的2-[((lR)-l-苯基乙基)氨基(2S，4S，6R))-2-(乙氧基羰基)-4-羟基双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯(59.0g，0.163mol)溶液中加入Deoxo國Fluor⑧(45.1mL，0.245mol)，保持温度为-15-20X:。在此温度下搅拌混合物20分钟，0TC下再搅拌15分钟，之后緩慢加入15%的Na2CO3水溶液(650mL)，期间保持温度低于IO"C。分离各层，并用CH2Cl2(150mL)反萃取水层。混合的有机层经干燥(Na2S04)和浓缩成为棕色油状物(73g)。在硅胶层上用EtOAc/庚烷(1:6)洗脱纯化，得到标题化合物，为黄色油状物(49.7g，84%),25D+36.2(c1.30，CHC13)。500MHztHNMR(CDCl3)57.29-7.14(m，5H)，5.22(ddt，lH，J=8.0，4.5Hz，JHF=56.0Hz)，4.16(dq，1H，J=11.0，7.0Hz)，4.05(dq，1H，11.0，7.0Hz)，3.96(dq，lH，10.5，7.0Hz)，3.85(dq，10.5，7.0Hz)，3.66(q，1H，6.5Hz),2.45(dd,1H，J=14.0，8.0Hz)，2.16-2.12(m，1H)，1.95(t，lH，J=3.5Hz)，1.81(dt，1H，J=3.5Hz，JHF=3.5Hz)，1.51(ddd，1H，J=14.0，8.0Hz，JHF=22.0Hz)，1.32(d，3H，J=6.5Hz)，1.27(t，3H，J=7.0Hz)，1.21(t，3H,J=7.0Hz)。13CNMR(125MHz，CDCl3)5175.29,171.66，146.21,128.45，127.03，126.90，92.65(d，JCF=182Hz)，68.68(d，JCF=4.9Hz)，61.70，60.92，56.13，38.60(d，JCF=23.0Hz)，33.07(d，JCF=7.6Hz)，32.23(d，Jc产22.0Hz)，26.26，20.22(d，JCF=3.9Hz)，14.41，14.24'FTIR(CHCl3)3028(w)，2983(w)，1724(s)，1705(s)，1293(m)，1242(m)，ll卯(m)，1037(m)，1013(m)cm1。C2。H26FN04的分析计算值C，66.10;H，7.21;N，3.85。实测值C，66.02;H，7.00;N，3.95。制备例821R,2S,4R,5R,6R-2-氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage94</formula>将2-[((lR)-l-苯基乙基)氨基(2S,4S，6R))-2-(乙氧基羰基)-4-氟双环[3.1.0己烷-6-羧酸乙酯(68.4g，0.188mol)、浓HCl(15.7mL，0.188mol)和1(T/。Pd/C(干燥的，13.7g)在EtOH(400mL)中的混合物在氢气氛(50psi)下放置18小时。过滤出催化剂，蒸馏出馏出物，得到标题化合物，为近白色泡沫状物(59.2g，106%,由于EtOH杂质经校正为97%)。由EtOH/MTBE中结晶出来，得到标题化合物的分析纯试样，为白色固体。25D+55.6(c1.17，CHC13)。mp86-88"C。500MHz1HNMR(CDCl3)59.20(brs，2H)，5.50(ddt，1H，J=8.0，4.5Hz,JHF=56.0Hz),4.31(q，lH，J=7.0Hz)，4.20-4.07(m，3H)，2.88(t，1H，J=3.0Hz)，2.71(dd，lH，J=14.5，8.0Hz)，2.48-2.43(m，2H)，2.16(ddd，lH，J=14.5，7.5Hz，JHF=22.0Hz)，1.34(t，3H,J=7.0Hz)，1.25(t，3H,J=7.0Hz)13CNMR(125MHz，CDCl3)5171.12，169.41，91.94(d，JCF=189Hz)，63.85，63.66(d，JCF=3.8Hz)，61.73，34.55(d，JCF=26.4Hz)，31.58(d，JCF=7.8Hz)，30.80(d，JCF=24.1Hz)，20.22，14.31，14.21。FTIR(KBr)3353(m)，3173(w)，2745(m)，1729(s)，1547(m)，1294(m)，1269(m)，1195(m)，1011(m)cm1,C12H18FN04:C,48.74;H，6.48;N，4.74。实测值C，48.80;H，6.41;N,4.76,制备例831R,2S,4R,5R,6R-2-氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage95</formula>将3NNaOH(251mL，0.753mol)溶液緩慢加至1R，2S，4R，5R，6R誦2-氨基-4-氟双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸盐酸盐(59.2g粗物质，0.188mol理论值)中，保持温度低于261C。混合物搅拌10分钟后成为均相。室温下搅拌混合物1.25小时，之后用浓HC1将pH緩慢降至pH2.8，期间保持温度为20-26*C。PH为2.8下，混合物开始结晶，在此pH下搅拌悬浮液10分钟，之后用浓HCl将pH降至2.1。再搅拌15分钟后，加入i-PrOH(67mL)并将悬浮液冷却至0"C，搅拌2小时。收集固体，用37mL冷H20/i-PrOH(4:l)洗涤。40*C下将收集的固体真空干燥18小时，得到标题化合物，为白色固体(33.1g，87%,由制备例23的起始物质计算得)。制备例841R,2S,4R,5R,6R-2-氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸再浆液搅拌下，用1小时，将H20(165mL)中的1R，2S，4R，5R，6R-2-氨基國4-氟双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸(33.0g，0.162mmol)悬浮液升温至89C并加入i-PrOH(41mL)。然后回流(83"C)搅拌5分钟，再冷却至室温并搅拌4小时。收集产物，用i-PrOH/H20(l:4，40mL)和i-PrOH(25mL)洗涤，40"C下真空干燥18小时，得到标题化合物，为白色固体(30.6g，93%)'制备例851R,2S,4R,5R,6R-2-氨基-4-氟双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage96</formula>室温下，用20分钟，向202mL绝对无水乙醇中的lR，2S,4R，5R，6R-2-氨基-4-氟双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸(14.45g，71.12mL)浆液中滴加亚硫酰氯(26mL，356mol)。将浆液加热至回流并搅拌3小时，之后冷却至室温过夜.将所得溶液真空浓缩为剩余物，经136mL乙酸乙酯稀释，边用手旋转边用306mL10yo碳酸钠水溶液处理15分钟，使最终pH为O。分离各层，用乙酸乙酯(lxl36mL)洗涤水层。合并的有机萃取物经盐水(lx136mL)洗涤，干燥(MgS04)，过滤，真空浓缩，得到17.07g(93"/。)标题化合物，为白色固体。FDMS:M++1=260。C12H18FN040.1H20:C，55.21;H，7.03;N，5.37,实测值C，55.10;H，6.96;N，5.22。m.p.=64-66*C。25D=+20(c=0.96，甲醇)，[oc]25D=+15(c=1.21，DMSO),制备例86lR,2S,4R,5R,6R-2-2，S-2，"叔丁氧基羰基氨基、丙酰基l氨基-4-氟双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸二乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage97</formula>15分钟，向-22t:、氮气氛下、396mL二氯甲烷中的N-Boc-L-丙氨酸(38.62g，204mmol)溶液中滴加N-甲基吗啉(22.44mL，204mmo1)，之后滴加氯甲酸异丁酯(26.48mL，204mmo1)，以使反应温度不超过-18TC。-20X:下搅拌混合稀浆液30分钟，此时用40分钟加入lR，2S，4R，5R，6R-2-氨基-4-氟双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(49.46g，191mmol)在247mL二氯甲烷中形成的溶液，以使反应温度不超过-16"C,滴加结束后，从冷水浴中移出反应物，在室温下搅拌70分钟，，此时反应温度达到15"C，颜色变为淡橙色。用408mL1N盐酸处理反应物，之后搅拌5分钟，并分离各层。用饱和碳酸氢钠水溶液(lx408mL)洗涤有机层，干燥(硫酸钠)，过滤，真空浓缩为白色泡沫状物(88.16g)。FDMS:M++1=260。C12H18FN040.1H20:C，55.21;H，7.03;N，5.37。实测值C，55.10;H，6.96;N，5.22,m.p.=64-66*C。25D=+20(c=0.96,MeOH)，[oc]25D=+15(c=1.21，DMSO),制备例87lR,2S,4R,5R,6R-2-2，S-2V叔丁氧基羰基氨基)丙酰基l氨基-4-氟双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage97</formula>室温下，向238mL四氢呋喃中的lR，2S，4R，5R，6R-2-[2，S-2，-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基氨基-4-氟双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(88.16g，191mmol)溶液中加入238mL(477mmol)2N氢氧化钠。室温下剧烈搅拌该两相混合物2.5小时，此时反应均相进行。用238mL叔丁基甲基醚稀释混合物，之后进行混合，再分离各层。用238mL水进一步稀释水层，过滤除去颗粒状物质。用浓HCl(42.9mL，515mmol)处理溶液30分钟，任选随后以标题化合物为晶种，并搅拌1小时。过滤所得浆液，用水(2xl00mL)洗涤，451C下真空干燥40小时，得到72.2g标题化合物，为白色固体。将部分固体(69.5g)与4卯mL丙酮一起搅拌l小时，制得雾浊溶液，经过滤，丙酮(2xl00mL)洗涤。将滤出液真空浓缩为白色泡沫状物，45"C下进一步真空干燥16小时，得到61.8g(校正了12w%wt/wt的丙酮)标题化合物。实施例1(1R,4S,5S,6S)-4"2，S-氨基丙酰基)氨基-2,2-二氧代-2A6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐用20分钟，向(lR，4S，5S，6S)-4-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4,6-二羧酸(110.0g，271mmo1，制备例3)在563mL乙酸乙酯中形成的悬浮液中加入乙酸乙酯中的氯化氢溶液(3.7M，514mL)。将悬浮液搅拌2.5小时后，过滤并用乙酸乙酯(lx200mL，lxll5mL)洗涤滤饼。46"C下真空干燥18小时后，收集标题化合物，为白色固体(85.77g，92%)。力NMR(300MHz，曱醇44)54.12(brd，1H，J=14.6Hz)，3.94(q,1H，J=7.1Hz),3.52(ddd，1H，J=7.0，3.9，0.9Hz)，3.16(d，1H，J=14.6Hz),3.02(dd，1H，J=7.0，4.4Hz)，2.49(t，1H，J=4.1Hz)，1.52(d，3H，J=7.1Hz)。实施例2(lR,4S,5S,6S)-4"2，S誦2，國氨基丙酰基)氨基画2,2誦二氣代-2入6-硫杂誦双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸甲苯磺酸盐将甲苯(3mL)中的(lR，4S，5S，6S)-4-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸(300mg，0.738mmo1，制备例3)和甲苯磺酸一水合物(140mg,0.738mmol)悬浮液加热至75"C，并搅拌45分钟，之后冷却至室温，再搅拌16小时。过滤悬浮液，用甲苯(2ximL)洗涤。45TC下真空干燥1小时后，收集307mg(87"/))标题化合物，为白色固体，mp(DSC)233"C。iHNMR(500MHz，CD3OD)57.70(d，2H，J=8.5Hz)，7.24(d,2H，J=8.0Hz)，4.11(d，1H，J=15Hz)，3.94(q，1H，J=7.0Hz)，3.53(dd，1H，J=7.0，4.0Hz)，3.13(dd，1H，J=14，1.0Hz),3.02(dd，1H，J=7.0，4.5Hz)，2.48(t，1H，J=4.5Hz)，2.37(s，3H)，1.52(d，3H，J=7.5Hz)。13CNMR(125MHz,CD3OD)5170.70，170.32，169.80，142.04，140.78，128.79,125.79,60.20，54.73，48.77,42.44,30.84，22.22,20.20，16.09。实施例3(lR,4S,5S,6SV4-f2，S-氨基-3，-羟基-丙酰基V氨基-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage100</formula>按照一般方法C，使用(lR，4S，5S，6S)-4-(3，-乙酰氧基-2，S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基)-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二曱酯(380mg，0.77mmo1，制备例15)进行制备。[oc23D=~19.32(c=0.52，甲醇)。1HNMR(400MHz，CD3OD)&2.48(1H，t，J=4.0Hz)，3'04(1H，dd，J=4.4，7.3Hz)，3.17(1H，d，J=14.7Hz)，3.51(1H，dd，J-4.4,7.0Hz),3.77(1H，dd，J=7.0,10.6Hz),3.94-4.12(3H，m)'C10H14N2O8SHC1H20:C，31.88;H，4.55;N,7.44;Cl，9.41。实测值C，31.53;H，4.40;N，7.32;Cl，9.24,C10H15N2O8S的HRMS计算值，323.0549。实测值，323.0533.实施例4UR,4S,5S,6SV4-『(吡咯烷-2，S-羰基)-氨基l-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage100</formula>按照一般方法C，使用(lR，4S，5S，6S)-4-[(l，-叔丁氧基羰基-吡咯烷基-2，S-羰基)-氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.0]己烷-4,6-二羧酸二甲酯(0.8g，1.7mmo1，制备例ll)进行制备，得到0.42g(67.0。/o)标题化合物。23D=~32(c-1.00，甲醇)。丄HNMR(300MHz，CD3OD)51.98-2.12(3H,m)，2.40-2.50(1H，m)，2.52(1H，t，J=4.4Hz)，2.99(1H，dd，J=4.4，7.0Hz),3.2(1H，d，J=14.7Hz)，3.29-3.42(3H，m)，3.54(1H，m)，4.13(1H，d，J=15.8Hz),4.30(1H，dd，J=6.2，9.2Hz)。C12H17N207S的HRMS计算值，333.0756。实测值，333.0740。(lR,4S,5S,6S)-4"2，S-氨基-4，曱硫基-丁酰基氨基)-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐按照一般方法C，使用(1议，48，58,68)-4-(2，8-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲硫基-丁酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸二甲酯(0.77g，1.6mmo1，制备例12)进行制备，得到0.41g(54.9。/o)标题化合物。\20782的HRMS计算值，367.0634。实测值，367.0634。flR,4S,5S,6S、-4-『2，S-氨基-3，-flH-吲哚-3-基)丙酰基氨基l-2,2-二氧代-2入6-疏杂-双环〖3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐实施例5实施例6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage102</formula>按照一般方法C，使用(lR，4S，5S，6S)-4-2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-(l-叔丁氧基羰基-lH-吲哚-3-基)-丙酰基氨基]-2，2-二氧代-2入6-硫杂國双环[3.1.0]己烷國4，6画二羧酸二曱酯(0.54g，0.83mmo1，制备例13)进行制备，得到0.28g(73.6。/o)标题化合物。[oc23D=+7.8(c=1.02，CH3OH)。tHNMR(300MHz，CD3OD)52.47-2.53(1H，m)，3.05-3.18(3H，m)，3.44-3.57(2H，m)，4.13-4.23(2H，m),7.07-7.41(3H，m)，7.71-7.78(2H，m)，8.22(1H，appd，J=7.7Hz).C18H19N307SHC1的分析计算值C，47.22;H，4.40;N,9.18。实测值C,46.51;H，3.96;N，8.54,MS(ES)m/z420.1[M陽l]-。实施例7GR,4S,5S,6SV4-2，S-氨基-3，"4-羟基-苯基V丙酰基氨基l-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage102</formula>按照一般方法C，使用(lR，4S,5S，6S)-4-[2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-(4-叔丁氧基羰基-苯基)-丙酰基氨基]-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4,6-二羧酸二甲酯(0,33g，0.53mmo1，制备例14)进行制备，得到0.13g(56.4"/o)标题化合物。[oc"D=-6(c=1.00，H20)。iHNMR(300MHz，CD3OD)52.47(1H，t，J=4.0Hz)，2.87(1H，dd，J=9.2，14.7Hz)，3.05-3.12(2H，m),3.23(1H，dd，J=5.1，14.7Hz)，3.55(1H，dd，J=4.0，7.0Hz)，4.00(IH，dd，J=4.8，9.2Hz)，4.13(IH，d，J=14.7Hz)，6.80(2H,d,J=8.4Hz)，7.13(2H，d，8.8Hz)。C16H19N208S的HRMS分析计算值，399.0862'实测值，399.0844。(1R,4S,5S,6S)-4-f2，S-氨基-3，-苯基-丙酰基氨基V2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐按照一般方法C，使用(111，48，58，68)-4-(2，8-叔丁氧基羰基氨基-3，-苯基-丙酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环3丄0]己烷-4，6-二羧酸二甲酯(制备例5)进行制备。得到0.55g(850/0，1.31mmol)白色固体。[a23D=+4.17(c=0.48，MeOH),tHNMR(300MHz，CD3OD)52.45(1H，t,J=4.0Hz)，2.98(1H，dd，J=9.2，14.7Hz)，3.06(1H，dd，J=4.4，7.0Hz)，3.10(1H,d，J=14.6Hz)，3.33(1H，dd，J=4.8，13.6Hz),3.52(1H，dd,J=3.3，7.3Hz)，4.08(1H，dd，J=5.1，8.8Hz)，4.10(1H，d，J=15.4Hz)，7.31-7.42(5H，m)。13CNMR(300MHz，D20w/l,4-二氧六环)5172.55，171.94，170.01，134.31，130.39，130.27，130.01,129.00，61.38，54.76，54.37，43.07，37.36，31.57,23.18。C16H1SN207S.1.5HC1的分析计算值C，43.97;H，4.50;N，6.41'实测值C，43.59:H，4.17:N，6.46。MS(ES)m/z实测值383.1[M+H+。实施例8C16H19N207S[M+H+的HRMS计算值383.0913。实测值383.0923。实施例9(1R,4S,5S,6S)-4"2，S-氨基-3，S-甲基-戊酰基氨基)-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage104</formula>按照一般方法C，使用(1R，4S，5S，6S)-4-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，S-曱基-戊酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4,6-二羧酸二甲酯(制备例6)进行制备。得到0.43g(80。/。，1.12mmol)白色固体。《23d=+4.08(c=0.49，MeOH).NMR(300MHz，CD3OD)50.98(3H，t，J=7.3Hz)，1.07(3H，d，J=7.0Hz)，1.15-1.24(1H，m)，1.53-1.62(1H，m)，1.95-2.04(1H，m)，2.44(1H，t，J=4.0Hz)，3.06(1H，dd，J=4.4，7.0Hz)，3.14(1H，d，J=15.0Hz)，3.52(1H，dd，J=3.7，7.0Hz)，3.73(1H,d，J=5.1Hz),4.10(1H，d,J=14.7Hz)。C13H2。N207S■HCI.0.5H2O的分析计算值:C，39.64;H，5.63;N，7.11。实测值C,39.38;H，5.39;N，7.04。MS(ES)m/z实测值349.1[M+H+。C13H21N207S[M十H]+的HRMS(ES)计算值，349.1069。实测值，349.1086。实施例10UR,4S,5S,6SV4-f2，S-氨基-3，-曱基-丁酰基氨基V2,2-二氣代-2入6-疏杂_双环『3丄01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐按照一般方法C，使用(lR，4S，5S,6S)-4-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-甲基-丁酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二甲酯(制备例7)进行制备。得到0.18g(88%，0.49mmol)HCl盐白色固体。[a23D=+7.84(c=0.51，MeOH)。NMR(300MHz,CD3OD)51.04(3H,d，J=6.6Hz)，1.09(3H，d，J=7.0Hz)，2.22-2.29(1H，m)，2.44(1H，t，J=4.0Hz)，3.05(1H,dd，J=4.4，7.0Hz),3.10(1H，d，J=14.7Hz)，3.52(1H，dd，J=4.0，7.3Hz),3.67(1H，d，J=5.5Hz)，4.10(IH，d，J=14.7Hz)。C12H18N207SHC10.4H2O:C，38.12;H，5.20;N，7.41,实测值C，37.78;H，4.90;N，7.15'MS(ES)m/z实测值335.1[M+H]+。.实施例11GR,4S,5S,6S)-4-(2，S-氨基-4，-甲基-戊酰基氨基)-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐按照一般方法C，使用(111，48，58，68)-4-(2，8-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲基-戊酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸二甲酯(制备例8)进行制备。得到0.50g(76%，1.30mmol)HCl盐白色固体.+。实施例12flR,4S,5S,6SV4-f2，S,6，-二氨基-己酰基氨基)-2,2-二氣代-2A6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸二盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage106</formula>按照一般方法C，使用(lR，4S，5S，6S)-4-(2，S，6，-双叔丁氧基羰基氨基-己酰基氨基)-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二甲酯(制备例9)进行制备。得到0.56g(860/0，1.28mmol)白色固体，其为二盐酸盐。+,实施例13(1R,4S,5S,6S)-4"2，S-氨基-4，-氨基甲酰基-丁酰基氨基V2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage107</formula>室温下，将2.5NLiOH和THF(总体积6mL)l:l混合物中的(1R，4S，5S，6S)-4-[2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-(三苯甲基-氨基甲酰基)-丁酰基氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸二甲酯(0.48g,0.65mmo1，制备例10)搅拌4小时。用1NHC1将混合物调节至pH=2，并用乙酸乙酯萃取产物。合并所有有机物，用盐水洗涤，MgS04干燥，浓缩，得到0.46g(lR，4S，5S，6S)-4-[2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-(三苯甲基-氨基甲酰基)-丁酰基氨基]-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸，其为白色泡沫状物.将该二酸溶解在DCM中，室温下边搅拌边将苯甲醚(0.28g，2.6mmol)及随后的TFA(3.70g，32.5mmol)依次加入。室温下搅拌所得反应混合物2小时，并真空浓缩。在EtzO中研磨所得黄色油状物，直至形成自由流动的白色沉淀物。氮气保护下真空过滤收集TFA。将产物溶解在lmLHCl中并冷冻干燥，得到希望的HC1产物，得到0.16g(62。/0，0.40mmol)白色固体。[ot23D=+8.0(c=1.0，H20)。iHNMR(300MHz，CD3OD)52.00-2.08(2H，m)，2.37-2.41(3H，m)，2.93(1H，dd，J=4.4，7.3Hz)，3.04(1H，d，J=14.7Hz)，3.45(1H，dd，J=3.7，7.0Hz)，3.86(1H，app.t，J=5.9Hz)，4.05(1H，d，J=14.7Hz)。C12H17N308SHC12.0H2O计算值:C，33.07;H，5.09;N，9.64，实测值C，33.37;H，4.69;N，9.39,MS(ES)m/z实测值363.9[M+H]+。C12H18N308S[M+H]+的HRMS(ES)计算值364.0815，实测值364.0825。实施例14flR,2S,4R,5R,6R)-2"2，S-氨基-丙酰基)氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐50X:下，将(lR，2S，4R，5R，6R)-2-(2，S-2，-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基)氨基-4-氟双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸(校正丙酮后53.0g，142mmol)在447mL丙酮中形成的浆液搅拌35分钟。过滤雾浊溶液得澄清溶液，之后用lOOmL丙酮漂洗.用5分钟，将22.1mL(265mmol)浓盐酸滴加至澄清、近白色滤出液中'将混合物保温至45-50t;，并搅拌卯分钟，任选以(lR，2S，4R，5R,6R)-2-(2，S-氨基丙酰基)氨基-4-氟双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸盐酸盐作为混合物的晶种，之后停止加热并逐渐冷却至室温。2小时后，温度达到251C，用90分钟将丙酮(942mL)加至浆液中。再搅拌浆液16小时，之后过滤，用丙酮(2x200mL)洗涤，45t:下真空干燥9小时，室温下再干燥64小时，得到40.2g(91o/o)标题化合物，为白色固体。重结晶501C下边加热边在0.5mL水和2.12mL丙酮中溶解1.06g，之后用另外的5.3mL丙酮稀释，并任选加入晶种。向模糊的云雾状混合物中加入另外的4.2mL丙酮，任选之后再加入晶种，关掉加热，并在1小时内逐渐冷却至室温.30分钟内，用另外的9.5mL丙酮进一步稀释所得浆液，之后搅拌15小时.过滤后，用丙酮(2x5mL)洗涤，45t:下真空干燥10小时，室温下再干燥60小时，得到0.905g(85"/o回收率)标题化合物，为白色固体.mp(DSC)183X:。己烷-2,6-二羧酸乙磺酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage110</formula>50。C下，将(lR，2S，4R，5R，6R)-2-[2，S-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基l氨基-4-氟双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸(0.2g，0.534mmo1，制备例18)在1.8mL丙酮中形成的浆液搅拌5分钟。过滤雾浊溶液得澄清溶液，之后用丙酮(lx0.4mL)漂洗。用O.lmL水稀释澄清的滤出液，放置在50TC的加热浴中，用0.124mL(1.07mmol)乙磺酸滴加处理(观察到气体放出)。卯分钟后制得白色浆液。共搅拌2小时后，用5分钟加入另外的1.8mL丙酮。停止加热并在1小时内使浆液逐渐冷却至室温，之后再搅拌2小时。过滤，用丙酮(2xlmL)洗涤，45t:下真空干燥4小时，室温下再干燥60小时，得到0.173g(84n/o)标题化合物，为白色固体。mp(DSC)210iC(分解)。力醒R(500MHz,CD3OD)55.58-5.42(m，1H)，3.92(q，1H,J=7.OHz)，2.96(dd，1H，J=14，8.0Hz)，2.80(q，2H,7.3Hz)，2.42-2.37(m，1H)，2.35-2.30(m，1H)，2.09(t，1H，J=3.0Hz)，1.52(d，3H，J=7.5Hz)，1.51-1.40(m，lH)，1.30(t，3H，J=7.5Hz)。实施例17flR,2S,4R,5R,6R)-242，S-氨基-丙酰基)氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2，6-二羧酸苯磺酸盐50X:下，将(lR，2S，4R，5R，6R)-2-[2，S-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基-氨基-4-氟双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸(0.402g，1.07mmo1，制备例18)在3.6mL丙酮中形成的浆液搅拌10分钟。用一小勺硅藻土处理雾浊溶液，并过滤得澄清溶液，之后用丙酮(2x0.4mL)漂洗。将澄清的滤出液放置在50t:加热浴中，用226mg(卯y。，1.29mmol)苯磺酸溶于0.113mL水中形成的溶液处理，之后用0.4mL丙酮漂洗(观察到气体放出)。温和回流搅拌4小时后，停止加热并用8mL丙酮处理反应物IO分钟，之后任选加入晶种。经l小时形成浆液，用3.2mL丙酮稀释，之后在室温下再搅拌15.5小时。过滤，用丙酮(2xl0mL)洗涤，45t:下真空干燥24小时，得到313mg(62%，校正了10wt。/o丙酮)标题化合物，为白色固体。mp(DSC)132t;。tHNMR(500MHz，CD3OD)57.86-7.80(m，2H)，7.46-7.37(m，3H)，5.58-5.42(m，1H)，3.92(q，1H，J=7.0Hz)，2.96(dd，1H，J=14,8.0Hz)，2.42-2.37(m，1H)，2.35-2.30(m，2H)，2.09(t，1H，J=3.0Hz)，1.52(d，3H，J=7.5Hz)，1.51-1.40(m，1H)。实施例18flR,2S,4R,5R,6RV2"2，S-氨基-丙酰基、氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸甲苯磺酸盐50"C下，将(1R，2S，4R,5R，6R)-2-[2，S-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基-氨基-4-氟双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸(1.04g校正值，2.78mmo1,制备例18)在9.36mL丙酮中形成的浆液搅拌15分钟。用一'J、勺硅藻土处理雾浊溶液，并过滤得澄清溶液，之后用丙酮(lx2.08mL,之后1x1.04mL)漂洗。将澄清的滤出液放置在50"C加热浴中，用634mg(3.33mmol)对甲苯磺酸单水合物溶于0.317mL水中形成的溶液处理，之后用0.317mL丙酮漂洗(观察到气体放出)。温和回流搅拌4小时后，由加热浴上移去反应物，用10.4mL丙酮处理反应物10分钟。任选向澄清、无色溶液中加入晶种，经30分钟观察到沉淀物形成，此时经20分钟时间加入另外的10.4mL丙酮。再搅拌浆液4小时，之后过滤，用丙酮(2xl0mL)洗涤，45TC下真空干燥14小时，得到995mg(78%，校正了3wt"/。丙酮)标题化合物，为白色固体。mp(DSC)155TC。力NMR(500MHz,CD3OD)57.70(d，2H，J=7.5Hz)，7.34(d，2H，J=8.5Hz)，5.58-5.42(m，1H)，3.92(q,lH，J=7.0Hz)，2.96(dd，lH，J=14，8.0Hz)，2.42-2.30(m，2H)，2.24(s，3H)，2.09(t，1H，J=3.0Hz),1.52(d，3H,J=7.5Hz)，1.51－1.40(m，1H)。实施例19(1R,2S,4R,5R,6R)-2-(2S-氨基-丙酰基)氨基-4-氟双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula>50"C下，向lmL水中的(lR，2S，4R，5R，6R)-2-(2，S-氨基-丙酰基)氨基一4-氟双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸甲磺酸盐(0.5g，1.35mmo1，实施例15)溶液中加入5mL3A乙醇，几分钟之后加入0.27mL(1.35mmol)5N氢氧化钠水溶液。停止加热，用2.5mL乙醇稀释该澄清无色的溶液，任选加入晶种，再用7.5mL乙醇进一步稀释30分钟。搅拌所得浆液，经lh冷却至室温，之后在室温下再搅拌2小时。收集固体，用乙醇(lx10mL)洗涤，之后在45"C下真空干燥18.5小时，得到0.301g(78o/o收率，校正了1.6wty。甲磺酸钠和3wty。乙醇)标题化合物，为白色固体。iHNMR(500MHz，D20)55.45-5.30(m，lH),3.88(q，lH，J=7.0Hz)，2.58(dd，1H，J=14，8.0Hz)，2.33-2.30(m，1H)，2.27-2.26(m，1H)，1.92(t，lH，J=3.0Hz)，1.36(d，3H，J=7.1Hz),1.41-1.32(m，1H)。13CNMR(125MHz,D20)5177.46，176.92，170.42，94.56和93.19(C-F裂分)，65.36，49.01，36.75和36.57(C國F裂分)，33.61和33.55(C國F裂分)，30.54和30.36(C-F裂分)，20.27，16.67。实施例20(111,28,411,5仏610-2"2，8-氨基-丙酰基、氨基-4-氟双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二钠盐60"C下，向420pL甲醇中的(lR，2S，4R,5R，6R)-2-(2，S-氨基-丙酰基)氨基-4-氟双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸甲磺酸盐(70mg，0.19mmo1，实施<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula>例15)溶液中加入乙酸钠(46.5mg，0.57mmol)在470pL甲醇中形成的温热溶液，并用230;iL甲醇漂洗。停止加热。边搅拌边用280pL甲醇稀释该雾浊溶液，任选之后加入晶种以助于结晶。经1小时将所得浆液緩慢冷却至室温，并在室温下搅拌2小时。过滤分离产物，用甲醇(2x280pL)洗涤，45X:下真空干燥15小时，得到52.5mg(85。/。收率，校正了2.3wt。/o甲磺酸钠和0.2wt。/o曱醇)标题化合物，为白色固体。iHNMR(500MHz，D20)55.44画5.29(m，1H)，3.89(q，1H，J=7.0Hz)，2.65(s，3H)，2.56(dd，1H，J=14，8.0Hz)，2.16-2.13(m，1H)，2.10-2.09(m，1H)，1.74(t，lH，J=3.1Hz)，1.38(d，3H，J=7.1Hz)，1.36-1.28(m，1H)。13CNMR(125MHz,D20)5180.00，178.72，170.13,95.40和93.99(C画F裂分)，65.97,49.06，37.25和37.07(C-F裂分)，33.01和32.94(C國F裂分)，29.64和29.46(C-F裂分)，22.48，16.68。实施例21(1S,2S,4S,5R,6R)-2-f2，S-氨基丙酰基)氨基-4-羟基-双环3.1.0己烷-2,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage114</formula>向THF(30mL)和水(30mL)中的(lS，2S，4S，5R,6R)-4-乙酰氧基-2-[2，S-(叔丁氧基)羰基氨基丙酰基]-氨基双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(0.600g，1.28mmo1，制备例21)溶液中加入氢氧化锂单水合物(0.535g，12.8mmo1)。室温下搅拌3小时后，用水稀释反应物，用乙酸乙酯(2x25mL)洗涤。用1NHCl将水层酸化至pHl，用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。合并的有机萃取物经浓缩后，溶解在乙酸乙酯(60mL)中的INHC1中，之后在室温的氮气氛下搅拌16小时.真空除去溶剂，得到400mg(99。/。)产物，为白色固体。LCMS:m/z273[M+H+@RT0.20分钟。丄HNMR(CD3OD)*:4.13(1H，d,5.9Hz)，3.80(1H，q,6.7Hz)，2.41-2.31(2H，m)，1.93(1H，dd，6.0Hz，2.7Hz)，1.62(1H，dd，5.9Hz，15.5Hz)，1.44(1H，t，3.0Hz)，1.38(3H，d，6.8Hz);*N.B.NMR未观察到的可交换质子数为6。实施例22flS,2S,4S,5R,6R)-2"2，-氨基-乙酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C，使用(lS，2S,4S，5R，6R)-2-(2，-叔丁氧基羰基氨基-乙酰氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(300mg，0.84mmo1，制备例23)进行制备。收率156mg(63%)。[a23D=-36(c=0.5，MeOH)'iHNMR(400MHz，CD3OD)51.56(1H，t，J=2.9Hz)，1.74(1H，dd，J=5.8，15.4Hz)，2.12(1H,m),2.48(1H,d，J=15.4Hz)，2.61(1H，m)，3.62(2H，s)，4.32(1H，d，J=5.49Hz)。C10H14N206.1.3HC1H20:C，37.11;H,5.39;N，8.66。实测值C，37.36;H，4.99;N，8.30。MS(ES)m/z258.8[M+H+。实施例23(1S,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-氨基-3，-甲基-丁酰基氨基)-4-羟基双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage115</formula>CH3除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C，使用(lS，2S，4S,5R，6R)-2-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-甲基-丁酰基氨基)-4-羟基-双环3.1.0己烷-2,6-二羧酸二乙酯(480mg，1.19mmo1，制备例24)进行制备。收率307mg(76%)。[a]23D=+8.33(c=0.48，MeOH),1HNMR(400MHz，CD3OD)51.07(3H，d，J=6.8Hz)，1.11(3H，d，J=7.3Hz)，1'55(1H，t，J=2.9Hz)，1.76(1H，dd，J=5.8,15.6Hz),2.14(1H，dd，J=3.4，5.8Hz),2.24(1H,m)，2.50(IH，d，J=15.6Hz)，2.64(IH，dd，J=2.9，5.8Hz)，3.66(IH，d，J=5.4Hz)，4.32(1H，d，J-5.8Hz)。C13H2。N206HC11.11120分析计算值:C,43.79;H，6.56;N，7.86。实测值C，43.77;H，6.20;N，7.47'<:131121]\206的HRMS计算值，301.1400。实测值，301.1400。实施例24(18,28,48,511.610-2-(2，8-氨基-4，-甲基-戊酰基氨基)-4-羟基-双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C，使用(18，28，48，511，611)-2-(2，8-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲基-戊酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2,6-二羧酸二乙酯(460mg，l.llmmol，制备例25)进行制备。收率371mg(95%)。[a23D=+4(c=0.5，MeOH)。iHNMR(400MHz，CD3OD)51.01(3H，d，J=5.8Hz)，1.03(3H，d，J=6.3Hz)，1.54(1H，t，J=2.9Hz)，1.63-1.82(4H，m),2.14(1H，dd，J-2.9,5.8Hz)，2.49(lH,d，J=15.6Hz),2.62(1H，dd，J=2.9，5.8Hz),3.83-3.86(m，m)，4.32(1H，d，J=5.8Hz)。C14H22N206HC11.4H20计算值C，44.72;H，6.92;N，7.45。实测值C，44.52;H，6.57;N，7.13'CmH23N206的HRMS计算值，315.1556。实测值，315.1569。实施例25flS,2S,4S,5R,6RV2-(2，S-氨基-3，S-甲基-戊酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C，使用(18，28，48，511，611)-2-(2，8-叔丁氧基羰基氨基-3，8-甲基-戊酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(410mg，0.99mmo1，制备例26)进行制备。收率330mg(95%)。[a23D=+8(c=0.5，MeOH)。iHNMR(400MHz，CD3OD)50.99(3H，t，J=7.3Hz)，1.08(3H，t，J=7.3Hz)，1.17-1.27(1H，m)，1.53(1H，t，J=2.9Hz)，1.59-1.65(IH，m)，1.76(1H，dd，J=5.8,15.6Hz),1.96-2.00(1H，m)，2.14(IH，dd，J=2.9，5.8Hz)，2.46(IH，d,J=15.6Hz)，2.66(1H，dd，J=2.9，5.8Hz)，3.70(1H，d，J=5.4Hz)，4.31(1H,d，J=5.8Hz)。C14H22N206■1.1HC1.1.2H20计算值C，44.71;H，6.83;N，7.45。实测值C，44.38;H，6.51;N，7.08,C"H23N206的HRMS计算值，315.1556,实测值，315.1566'实施例26(18,28,48,511,610-2-2，"2-氨基-乙酰基氨基)-乙酰基氨基1-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage118</formula>用过量的二氧六环中的4MHC1处理(lS，2S，4S，5R，6R)-2-[2，-(2-叔丁氧基羰基氨基-乙酰基氨基)-乙酰基氨基]-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(360mg，0.77mmo1，制备例27),并搅拌40分钟，真空浓缩，加入乙酸乙酯并浓缩。用THF(3M)和1NLiOH(3.0当量)处理该固体。搅拌1小时，之后加入1NHCl直至pH-3。真空浓缩反应物。经DOWEX50WX8-100离子交换树脂纯化。收率188mg(78%)。[oc23d=+3.92(c=0.51，H20)。NMR(300MHz,D20)51.43(1H，t，J=2.9Hz)，1.53(1H,dd，J=5.9，15.4Hz)，1.98(IH，m)，2.23-2.31(2H，m)，3.70(2H，s)，3.82(2H，appd，J=UHz)，4.16(IH，d，J=5.9Hz)。d2HwN307的HRMS计算值，316.1145。实测值，316.1123,实施例27aS,2S,4S,5R,6R、-2-『2V2S-氨基-丙酰基氨基)-乙酰基氨基1-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage119</formula>按照实施例26中概述的一般方法，使用(18,28,48，511,611)-2-2，-(28-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-乙跣基氨基卜4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(41011^，0.84mmo1，制备例28)。收率200mg(72%),[a]23D=+23.53(c=0.51，H20),1HNMR(300MHz，D20)51.36(3H，d，J=7.0Hz)，1.37(1H，t，J=3.3Hz),1.49(IH，dd，J=5.9，15.4Hz),1.91(1H，dd，J=2.9,5.9Hz)，2.15(1H，dd，J=2.9,5.9Hz)，2.27(1H，d，J=15.4Hz)，3.79(2H，s)，3.95(IH，q，J=7.0Hz)，4'13(1H，d，J=5.5Hz)。<:13&9]\307的HRMS计算值，330.1301'实测值，330.12卯。实施例28GS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-氨基-3，-苯基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage119</formula>按照一般方法C，使用(lS，2S，4S，5R，6R)-2-(2，-叔丁氧基羰基氨基-3，-苯基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(400mg,0.89mmo1，制备例29)进行制备。收率290mg(85%)。[a23D=+3.64(c=0.55，MeOH),iHNMR(400MHz，CD3OD)51.45(1H，t，J-3.3Hz)，1.60(1H，dd，J=5.5，15.4Hz)，2.03(1H，dd，J=2.6，5.9Hz),2.37(1H,d，J=15.4Hz)，2.55(1H，dd，J=2.9，5.9Hz)，2.90(IH，dd，J=8.4，14.3Hz)，3.22(IH，dd，J=5.1，14.7Hz)，3.97(IH，dd，J=5.5，8.8Hz)，4.21(IH，d，J=5.5Hz)，7.19-7.31(5H，m)。CnH2!N206的HRMS计算值，349.1400。实测值，349.1388。C17H21N206HC1H20的分析计算值C，50.69;H，5.76;N，6.95;Cl，8.80。实测值C，50.66;H，5.65;N,6.85;Cl，8.20。MS实测值349.0[M+H+。实施例29GS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-氨基-4，-氨基甲酰基-丁酰基氨基)-4-羟基-双环3.1.01己烷-2，6-二羧酸盐酸盐制备标题化合物将(lS,2S,4S,5R,6R)-2-[2，-叔丁氧基羰基氨基-4，-(三苯甲基-氨基曱酰基)-丁酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(1.18mmo1，制备例30)溶解于THF(10mL)中，并用2.5NLiOH(12mL)处理该溶液。搅拌溶液3小时，之后用2.5NHC1调节至pH=2。用乙酸乙酯萃取产物四次，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到白色粉末。将二酸产物(0.74mmol)溶解在1，2-二氯乙烷(3.7mL)中，并用苯曱醚(0.3mL)和三氟乙酸(3.72mL)处理。23"C下搅拌反应物2.5小时，之后真空浓缩，得到棕色油状物。将该棕色油状物溶解在水中，用二氯甲烷萃取五次，真空浓缩水层，用1NHCl(0.74mL)处理，并冻干。用另一份lNHCl(2mL)处理并再次冻干，得到446mg(定量)标题化合物。+，351.9[M+Na]+。(:131119]\307的HRMS计算值，330.1301。实测值，330.1295。实施例30(1S,2S,4S,5R,6R)-2"2，S,6，-二氨基-己酰基氨基)-4-羟基-双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸二盐酸盐按照一般方法C，使用(lS，2S，4S，5R，6R)-2-(2，S，6，-双-叔丁氧基羰基氨基-己酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0]己烷-2,6-二羧酸二乙酯(制备例31)进行制备。iHNMR(400MHz，CD3OD)51.47-1.59(3H，m)，1.66-1.78(2H，m)，1.84(1H，dd，J=5.4,15.2Hz)，1.91(2H，m)，2.16(1H，dd，J=3.4，5.7Hz)，2.45(1H，d，J-15.7Hz)，2.66(1H,dd，J=2.9，5.9Hz)，2.97(2H，t，J=7.3Hz)，3.92(1H，t，J=6.4Hz)，4.33(1H，d，J=5.4Hz)。MS实测值330.0[M+H+。实施例31GS,2S,4S,5R,6R)-2"2，S-氨基-3，-氨基甲酰基-丙酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸制备标题化合物将(1S，2S，4S，5R，6R)-2-[2，-叔丁氧基羰基氨基-3，-(三苯甲基-氨基甲酰基)-丙酰基氨基]-4-羟基-双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(1.07mmo1,制备例32)溶解于THF(12mL)中，并用2.5NLiOH(12mL)处理该溶液。搅拌溶液3小时，并用2.5NHC1调节至pH=2。用乙酸乙酯萃取产物四次，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到白色粉末。将二酸产物(1.22mmol)溶解在1，2-二氯乙烷(6mL)中，并用苯甲醚(lmL)和三氟乙酸(6mL)处理'23X:下搅拌反应物10小时，之后真空浓缩，得到棕色油状物。用乙醚稀释该棕色油状物，产物结晶出来，为白色固体。过滤，并用大量乙醚洗涤。将固体溶解在最少量水中，用0.5NHCl(5mL)处理，并冻干3次，得到386mg(90。/"标题化合物。+'C12H16N307Na的HRMS计算值，338.0964。实测值，338.0953。实施例32GS,2S.4S,5R,6R)-2-『2，S-氨基-3VlH-丐l哚-3-基V丙酰基氨基l-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸制备标题化合物将2-[2，-叔丁氧基羰基氨基-3，-(l，-叔丁氧基羰基-1&吲哚-3，-基)-丙酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(0.93mmo1，制备例33)溶解于THF(llmL)中，并用2.5NLiOH(llmL)处理该溶液。搅拌溶液3小时，之后用2.5NHCl调节至pH-2，用乙酸乙酯萃取产物四次，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到白色粉末。将二酸产物(0.78mmol)溶解在二氧六环(20mL)中的4MHC1中，并在23T下搅拌反应物3小时.浓缩反应混合物，用二氯甲烷稀释，再真空浓缩.将粗产物溶解在甲醇中，涂布于径向色谱(硅胶)板，旋转干燥，用MeOH(10%)/NH4OH(l%)/CHCl3-MeOH(60。/o)/NH4OH(2。/o)/CHCl3洗脱。将产物溶解在水中并冻干两次，得到139mg(46。/。)标题化合物。[oc]23D=+19.23(c=0.52，MeOH)。iHNMR(400MHz，CD3OD)51.43(1H，t，J-2.9Hz)，1.57(1H，dd，J=5.9，15.2Hz),2.05(1H，dd，J=3.4，6.4Hz),2.41(1H，d，J=14.7Hz)，2.46(1H，dd,J=2.4，5.9Hz)，3.15(1H，dd，J=5.4，14.7Hz),3.49(1H，dd，J=5.4，14.7Hz)，4.05(1H，dd，J=5.4，9.3Hz),4.17(IH，d，J=5.4Hz)，7.09(2H，m)，7.27(1H,s)，7.37(1H，d，J=8.3Hz)，7.75(IH，d,J=7.8Hz)。MS实测值388.0[M+H]+，409.9[M+Na+'<:191121]\306的HRMS计算值，388.1508'实测值，388.1502。实施例33(1S,2S,4S,5R,6R)-4-羟基-2-『。比咯烷基-2，S-羰基V氨基l-双环f3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C，使用(lS，2S，4S，5R,6R)-2-(l，-叔丁氧基羰基-吡咯烷基-2，S-羰基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例34)进行制备。[oc]23D=-40(c=0.5,MeOH)。，HNMR(400MHz，CD3OD)51.59(1H，t，J=3Hz)，1.78(1H,dd，J=5.9，15.3Hz),2.06(4H，m)，2.42(1H，m)，2.59(2H，m)，3.35(m，3H)，4.27(1H，m)，4.32(1H，d，J=5.9Hz)。<:1:^19]\206的HRMS计算值，299.1243。实测值，299.1242。C13H18N206.HC1.H20计算值:C，44.26;H，6.00;N，7.94,实测值C，44.13;H，5.78;N，7.62。实施例34flS,2S,4S,5R,6RV2-〖2，S-氨基-3，"4-羟基-苯基V丙酰基氨基l-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸盐酸盐除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C,使用(lS，2S，4S，5R，6R)-2-[2，S-叔丁氧基羰基氨基-3，-(4-叔丁氧基羰氧基-苯基)-丙酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例3S)进行制备。收率l"mg(50%)。[a23D=+8(c=0.5，MeOH)。iHNMR(400MHz,CD3OD)51.48(1H，t,J=3Hz)，1.62(IH，dd，J=5.9，15.3Hz)，2.03(1H,m)，2.38(1H，d，J-15.3Hz)，2.55(IH，m)，2.8(IH，dd,J=8.9，14.4Hz)，3.12(IH，dd,J=5.4，14.4Hz)，3.卯(1H，q，J=5.4Hz)，4.21(IH，d，J=5.9Hz)，6.7(2H，d，J=8.4Hz)，7.05(2H，d，J=8.4Hz)。(:171121]\207的HRMS计算值，365.1349。实测值，365.1374.C17H20N2O7-1.1HC11.1H20:C，48.12;H，5.54;N，6.60。实测值C,47.89;H，5.37;N，6.50。实施例35flS,2S,4S,5R,6R)-2-(2，S-氨基-4，-甲硫基-丁酰基氨基)-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸二铵盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage125</formula>除用二氧六环中的4MHC1除去叔丁氧基羰基保护基团以外，按照一般方法C，使用(lS，2S，4S，5R，6R)-2-(2，S-叔丁氧基羰基氨基-4，-甲硫基醒丁酰基氨基)-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例36)进行制备。用MeOH将最终产物点在2mm色谱板上，用50/49.5/0.5CHCl3/MeOH/NH4OH洗脱。洗脱过程中将NH4OH量增至1%，得到两性离子化合物。收率136mg(37%)。[a]23D=+28(c=1.0，MeOH)。力NMR(400MHz,CD3OD)51.63(1H，dd，J=6.0，15.6Hz)，2.03(2H，m)，2.12(3H,s)，2.18(1H，m)，2.35(1H,m)，2.49(1H,d，J=15.6Hz)，2.65(2H，t，J=8.4Hz)，3.84(1H，t，J=6.0Hz)，4.19(1H,d，J=6.0Hz)。C13H21N206S的HRMS计算值，333.1120,实测值，333.1105。实施例36(18,28,48,5仏610-2-『2，8-(28-氨基-丙酰基氨基V丙酰基氨基l-4-羟基國双环『3丄01己烷國2，6國二羧酸将lml二氧六环中的4NHC1中的(lS，2S，4S，5R，6R)-2-[2，S-(2S-叔丁氧基羰基氨基-丙酰基氨基)-丙酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二乙酯(0.045g，O.lmmol，制备例39)搅拌40分钟，之后真空浓缩反应物。将THF(5mL)和0.5NLiOH(0.35mmol)中的粗物质搅拌1小时。用0.5NHC1调节至pH=2，并浓缩反应物。使用阳离子交换色谱法(Dowex50X8-100;用10%吡啶/820洗脱)纯化粗产物，得到19mg(53%)标题化合物。iH匪R(300MHz,D20)51.23(3H，d，J=7.3Hz)，1.36(3H，d，J=7.3Hz)，1.40-145(1H，m)，1.50(1H，dd，J=5.5，15.4Hz)，1.90-1.96(1H，m)，2.20(1H，dd，J=2.6，5.9Hz)，2.29(1H，d,J=15.4Hz)，3.卯(1H，q，J=7.3Hz)，4.15-4.22(2H，m)。MS(ES)m/z342.1[M-l]-。€141122]^307的HRMS计算值，344.1458。实测值，344.1457。实施例37(18,28.48,511,610-2-2，8-(2-氨基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基1-4-羟基-双环3丄01己烷-2,6-二羧酸将THF(5mL)和INLiOH(l.Ommol)中的(lS,2S，4S，5R，6R)-2-[2，S-(2-叔丁氧基羰基氨基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(0.12g，0.25mmo1，制备例40)搅拌1小时。用1NHCl将混合物调节至pH-2并浓缩。在O"C的含饱和HCl(g)乙酸乙酯溶液中搅拌粗品。用N2吹扫除去过量HCl(g)并浓缩反应物。使用阳离子交换色谱法(Dowex⑧50X8-100;用10%吡啶/H20洗脱)纯化粗产物，得到0.06g(72.9。/。)标题化合物。[a23D=-42.11(c=0.57，H20)。NMR(300MHz,D20)51.21(3H，d，J-7.3Hz)，1.39(1H，m)，1.50(1H,dd，J=5.7，15.8Hz),1.91(1H，m)，2.15(1H，dd，J=2.6，5.9Hz)，2.28(1H，d，J=15.0Hz),3.65(2H，s)，4.14(1H，appd，J=5.9Hz)，4.20(IH，appq，J=7.3Hz)。CuH2oN307的HRMS计算值，300.1301'实测值，330.1299,实施例38f18,28,48,511,610-2-『2，8^28-氨基-4-甲基-戊酰基氨基)-丙酰基氨基l-4-羟基-双环3.1.01己烷-2,6-二羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage127</formula>按照一般方法C，使用(lS，2S，4S，5R，6R)-2-[2，-(2S-叔丁氧基羰基氨基_4-甲基-戊酰基氨基)-丙酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例41)进行制备。得到0.21g(570/0，0.50mmol)白色固体。[oc23D=-3.64(c=0.55，MeOH)。iHNMR(300MHz，CD3OD)50.89(3H，d，J=4.4Hz),0.91(3H,d，J=4.0Hz)，1.29(3H，d，J=7.0Hz)，1.52(1H，t，J-3.3Hz)，1.55-1.67(4H，m)，1.97(1H，dd，J=2.9，5.9Hz),2.38(1H，dd,J=2.9，5.9Hz)，2.45(1H，d，J=15.4Hz)，3.75-3.80(1H，m)，4.18g(1H，d,J=5.9Hz)，4.33(IH，app.q，J=7.0Hz)，C17H27N3071.0HC1.1.6H20的分析计算值:C，45.30;H，6.98;N，9.32;CI，7.87。实测值C，44.95;H，6.54;N，9.12;Cl，7.53,C17H28N307[M+H+的HRMS(ES)计算值，386.1927。实测值，386.1911'实施例39(18,28,48,5仏610-2-『2，8"2-氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-丙酰基氨基l-4-羟基-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸按照一般方法C，使用(lS，2S，4S,5R，6R)-2-[2，-(2S-叔丁氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰基氨基)-丙酰基氨基-4-羟基-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸二乙酯(制备例42)进行制备。得到0.15g(880/0，0.37mmol)白色固体。oc23D=-15.690(c=0.51，MeOH),tHNMR(400MHz，CD3OD)50.92(3H，d，J=7.0Hz)，0.95(3H，d，J=7.0Hz)，1.28(3H，d，J=7.0Hz)，1.52(1H，t，J=2.9Hz)，1.60(1H，dd，J=5.9，15.4Hz)，1.98(1H，dd，J=3.3，5.9Hz)，2.03-2.15(1H，m)，2.39(1H，dd，J=2.9，6.2Hz),2.45(1H，d，J=15.4Hz)，3.56(IH，d,J=5.5Hz)，4.18(1H，d，J=5.9Hz)，4.33(1H,app.q,J=7.0Hz),8'82(1H，s)'C16H25N307l.OHCl1.5H20的分析计算值:C，44.19;H，6.72;N，9.66;Cl，8.15'实测值C，44.32;H，6.48;N，9.14;Cl，7.66。C16H26N307[M+H+的HRMS(ES)计算值，372.1771,实测值，372.1758'实施例40f1R,2S,4S,5R,6R)-2-f2，S-2，-氨基丙酰基)氨基-4-氟-双环『3.1.01己烷-2,6-二羧酸曱磺酸盐一水合物H，CNH，.MeSO，H温和回流下，向295mL丙酮中的(lR，2S，4S,5R,6R)-2-(2，S-2，-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基)氨基-4-氟-双环[3.1.0己烷-2，6-二羧酸(32.8g，87.5mmo1，制备例52)雾浊溶液中滴加16mL水，之后滴加11.4mL(175mmol)甲磺酸，得到澄清、淡黄色溶液，其5分钟后成为浆液。搅拌130分钟，移去热源，经30分钟加入另外的295mL丙酮。将浆液冷却至室温，然后再搅拌2小时。过滤浆液，用丙酮(2x82mL)洗涤，45TC下真空干燥16小时，得到31.5g(93o/。)标题化合物，为白色固体。该物质可进一步重结晶。将30.5g上述粗产物与152.5mL丙酮和35mL水混合。加热至551C，加水(3.66mL)促进完全溶解。用61mL丙酮稀释溶液，并任选加入晶种.移去热源，使混合物逐渐冷却直至开始形成良好的晶核。经70分钟向浆液中加入396mL丙酮，然后室温下再搅拌3小时。过滤，用丙酮(3x91mL)洗涤，45TC下真空干燥几小时(通常过夜)，得到27.7g(91。/o回收率)标题化合物，为白色固体。mp(DSC)200"C。[oc]25D+34。(cl.0，CH3OH)。400MHz力NMR(DMSO-d6)512.76(brs，2H)，9.18(s1H)，8.07(brs，3H),5.50-5.36(m，1H)，3.87(d，1H，J=6.8Hz)，2.82(dd，1H，J=14，8.0Hz)，2.38(s，3H)，2.25(m，2H)，1.96(t，1H,J=3.0Hz)，1.39(m，1H)，1.37(d，3H，J=6.8Hz)。100MHz13CNMR(DMSO-d6)5173.1，172.3，169.7，92.8(d,C-F裂分)，63.2(d，C-F裂分)，48.0，39.7，36.4(d，C國F裂分)，32.5(d，C國F裂分)，29.3(d，C國F裂分)，19.3(d，C-F裂分)，16.9。FTIR(KBr)3461(w)，3379(w)，3269(m)，2653(s)，2591(s)，2529(s)，1724(s)，1691(s)，1353(m)，1287(s),1271(s)，1256(s)，1212(s)，1147(s)，1052(s)，1024(s)，787(m)cm1。<:12112^]\2098计算值C，37.11;H，5.45;N，7.21'实测值C，37.12;H，5.45;N，7.16。实施例41GR,4S,5S,6S)-4"2，S-4，-甲硫基-2，-氨基丁酰基)氨基-2,2-二氧代-2入6-硫杂-双环『3.1.01己烷-4,6-二羧酸一水合物将(111，48，58，68)-4-(2，8-4，-曱硫基-2，-(叔丁氧基羰基)氨基丁酰基)氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0]己烷-4，6-二羧酸单钠盐(110.04g，225.3mmo1，制备例55)在丙酮(110mL)和水(550mL)中的浆液加热至55t:。向搅拌的浆液中滴加浓盐酸(56mL，675.8mmo1)，以使其逐渐溶解。滴加结束后，在551C下搅拌2小时.移去热源，使溶液冷却至室温。过滤溶液，用20mL水漂洗。向溶液中緩慢加入2N氢氧化钠(165mL，330mmol),使pH升至1.71，此时出现沉淀。搅拌10分钟；形成稀浆液，pH降至0.98。向所得浆液中加入更多2N氢氧化钠(62mL，124mmo1),使pH升至3.06，之后搅拌3小时，得最终pH3.24。过滤浆液，用水(2xl65mL)洗涤，451C下干燥15小时，得到73.27g(85%f量收率)标题化合物，为白色固体.mp(DSC)203"C。己烷-4，6-二羧酸(118.09g校正值，253mmo1，制备例56)和对甲苯磺酸一水合物(54g，278mmol)混合物加热至75"C，得到浓浆液。回流下搅拌浆液165分钟。移去热源，使浆液冷却至室温，之后搅拌过夜。过滤浆液，用甲苯(3x240mL)洗涤，45"C下真空干燥22小时，得到134.92g(98y。收率)标题化合物。mp(DSC)255X:。25d+8.3(cl.2,CH3OH)。500MHz力NMR(CD30D)57.71(d，2H，J=8.0Hz)，7.24(d，2H，J=8.0Hz)，4.14(d，1H，J-15Hz)，4.00(t，1H，J=6.0Hz)，3.54(dd，1H,J=4.0，7.0Hz)，3.13(d,1H，J=15Hz)，3.01(dd，1H，J=4.0，7.0Hz)，2.60(t，2H，J=8.0Hz)，2.49(t，1H,J=4.0Hz),2.37(s，3H)，2.19-2.12(m，5H)。"CNMR(125MHz，CD3OD)5170.49，169.69，168.99，142.18，140.67，182.73，125.79，60.26，54.76，52.21,42.44，30.90，30.77，27.20，22.33，20.17，13.96。FTIR(ATR)3091.19(w)，1730.91(s)，1668.22(s)，1563.97(s)，1518.49(s)，1312.69(m)，1247.46(s)，1212.05(s)，1156.33(s),1123.09(s)，1035.95(s)，1011.36(s),892.41(s)，814.02(s)，683.69(s)cm國1,实施例43GR,4S,5S,6S)-4-f2，S-4，-甲硫基-2，-氨基丁酰基)氨基-2,2-二氣代-2入6-硫杂-双环3.1.01己烷-4,6-二羧酸甲磺酸盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage132</formula>将13mL丙腈中的(lR，4S，5S，6S)-4-(2，S-4，-甲疏基-2，-(叔丁氧基羰基)氨基丁酰基)氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4,6-二羧酸(1.08g，2.31mmo1，制备例56)浆液加热至85*C。向浆液中加入水(540pL),然后滴加甲磺酸(225iLiL，3.47mmo1)。搅拌浆液90分钟。移去热源并加入丙腈(30mL)。将浆液冷却至室温并搅拌90分钟。过滤，用丙腈(3x2.7mL)洗涤，45"C下干燥过夜，得到1.04g(97。/。)标题化合物。mp(DSC)244"C。己烷-2,6-二羧酸二乙酯(0.47g，l.lmmol，制备例37)进4亍制备，得到0.23g(67.7"/o)标题化合物。[a]23D=-4.1(c=0.49，MeOH)。力NMR(CD30D)&1.51(3H，d，J=7.0Hz)，1.56(1H，t，J-2.9Hz)，1.77(1H，dd，J=5.8，15.8Hz)，2.1-2.13(1H，m)，2.52(1H，d，J-16.1Hz)，2.57(1H，dd，J=2.9，5.9Hz)，3.88(1H，dd,J=7.0，14.3Hz),4.32(1H，d，J=5.5Hz)。CuH17N206l.lHCl-0.9H2O分析计算值C，40.12;H，5.80;N,8.53。实测值C，39.85;H，5.41;N，8.36。CuH16N206Na的HRMS计算值，295.0906。实测值，295.0883。本发明的前药化合物可对应于相应的母体化合物，通过各种细胞吸收试验进行评价.这些试验可提供比较数据，从而使本领域普通技术人员能够鉴别易于被细胞吸收从而带来更优越的暴露性质的化合物。下面描述了两个这种试样，包括Gly-Sar吸收试验和Caco-2试验。Gly-Sar吸收试验人们已认识到，一些口服给药的拟肽类药物通过肠内的肽运输系统进行吸收。Yang等，Pharm.Res.l6(9)(1999),尤其，人们对肠内狀运输体hPepTl对肽基吸收的抑制方式及其细胞内的相应识别水平进行了研究。Meredith等，Eur.J.Biochem.，267，3723-3728(2000).而且，作为鉴别改进的口服药物吸收的有效策略，人们已着手表征hPepTl运输体内的氨基酸的肠内吸收机理.Han等，Polym.Prepr.(Am.Chem.Soc.，Div.Polym.Chem)40(l):259-260(1999);Sawada等，J.Pharmacol.Exp.Ther.，291(2):705-709(1999)。美国专利No.5，849，525中描述了可用于测定本发明化合物与hPepTl运输体亲合水平的方法。例如，过量表达hPepTl运输体的稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞可用于测试本发明化合物，CHO细胞用于监测Gly-Sar的吸收，当本发明的前药化合物存在时，对细胞的吸收大于不存在本发明的前药化合物时的吸收，据此可证明其激动剂活性；若对本发明的前药化合物的吸收小于不存在本发明前药化合物时的吸收，则可证明其抑制活性。本发明化合物的ECso值通常小于5mM。Caco國2试验另一个测定本发明化合物细胞吸收的特别方法是研究人的肠内细胞系Caco-2的肽运输栽体。将人的腺癌细胞(Memorialsloan-KetteringCancerCenter,Rye，NY，和/或ATCCP，Rockville，MD)在含10%胎牛血清和1%最少量必需介质的非必需氨基酸溶液的Dulbecco的改进依格尔(ModifiedEagle)介质中传代，不加丙酮酸钠或抗菌素。这些细胞不含支原体，并于传代数为28~40代之间使用.对于流出物测定，5-10xl(^个细胞在13-18天时间内在涂敷了胶原蛋白的多孔亚中生长出来，介质每2-3天更换一次。37X:下，使用测试化合物，按照群盘(cluster-tray)(参见Gazzola等，入肌1.810(:116111.115，368-74(1981))技术测定药物吸收。流出物緩冲液为不含碳酸氢盐、含有用KOH滴定至pH为6.0的25mMMes的Earle，s平衡盐，并用胆碱盐酸盐代替氯化钠。用胆碱盐酸盐将流出物緩冲液的摩尔渗透压浓度调节至300±5mosmol/kg。将[3H菊糖作为洗涤过程中附着于细胞上的胞外液的标记，以测定确定吸收速率的起始时间。试验化合物和二肽的新鲜溶液要每天制备.在实验最后，将细胞溶解在水中，使用LC/MS/MS可检测到细胞溶解产物内的试验化合物。用Smith等，Anal.Biochem.150，76-85(1985)中描述的方法测定蛋白质.经40分钟测定吸收。在衰减时间过程的线性区域内计算初始吸收速率，使用线性回归估算上述起始时间.基于不存在二肽情况下测定的对比吸收速率计算百分抑制率。例如此Caco-2试验，参见Dantzig&Bergin，Biochim.Biophys.Acta1027，211-17(1990)。由大鼠血浆浓度测定的体内暴露情况为了研究式n化合物的体内暴露情况，之后研究式i化合物与式n化合物的口服剂量对比，进行了测定各式n化合物在大鼠内的血浆浓度的研究.成年Fischer344雄性大鼠(190-270克)由HarlanSprague誦Dawley，Cumberland,IN，USA获得，并在实验室养殖3天使其适应。第4天，将试验化合物溶解在緩冲水(lmg/mb试验化合物/20mM磷酸二氢钾，pH-2)中，并以单次5mg/kg的剂量口服给药。在0.5和1小时，或在1和3小时处，经眼眶瘘管或心脏刺穿(最后的时间点)收集血液试样。血浆样品在分析之前，先于-20t:和苯甲磺酰氟(一种蛋白酶抑制剂)存在下储存.用固相提取法(SAX栽体，甲醇/水/稀醋酸)预处理血浆样品和内标化合物。如下表1A和1B所示，用LC/MS/MS确定每次试验的各式D化合物的血浆浓度(ng/ml)，并作为0.5和1小时或，l和3小时试样时间点的总浓度给出.表1A体内暴露试验<table>tableseeoriginaldocumentpage136</column></row><table>实施例12251ng/ml(按照10mg/kgp.o.)实施例1的非前药形式1521ng/ml(按照5mg/kgp.o.)3981ng/ml(按照10mg/kgp.o.)表1B体内暴露试验化合物大鼠暴露(ng/ml(lR，2S，4R，5R，6R)画2-(2，S画氨基丙酰基)氨基-4-氟双环3.1.0]己烷-2，6-二羧酸盐酸盐实施例145271ng/ml(按照5mg/kgp.o.)实施例14的非前药形式1162ng/ml(按照5mg/kgp.o.)1342ng/ml(按照10mg/kgp.o.)如上表1A和1B所示，对大鼠口服用药时，本发明化合物的血浆浓度与母体化合物的是可比的。这说明本发明的化合物在体内转变为母体化合物，式n化合物。本发明的化合物优选在给药前先制剂。因此，本发明另一方面为包括式i化合物或其可药用的盐、可药用的栽体、稀释剂或赋型剂的药物制剂。可根据本领域普通技术人员公知的方法制备该药物制剂.制备本发明的组合物时，通常将活性组分与载体混和，或用载体稀释或用载体封闭，且可置于胶嚢、小袋、纸张或其它容体形式内。当栽体用作稀释剂时，其可为固体、半固体或液体物质，其为活性组分的载体、赋型剂或介质。组合物可为片剂、丸剂、粉末、锭剂、小袋、药包、酏剂、悬浮液、乳液、溶液、糖浆、气溶胶、含有例如至多10%重的活性化合物的软骨、软的和硬的明胶胶嚢、栓剂、无菌注射液和无菌包装粉末，适合的载体、赋型剂和稀释剂的一些例子包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、树胶、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄芪胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯和丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油。制剂还可另外包括润滑剂、润湿剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂、增甜剂或调味剂。本发明的组合物可制成制剂，这样按照本领域公知的方法向患者给药后，带来活性组分的快速、持久或延迟释放。组合物优选按计量单位形式制剂，每剂量含有约5mg-约500mg活性组分，优选约25mg-约300mg活性组分。此处使用的术语"活性组分"指包括在式I化合物范围内的化合物。术语"单位剂量形式"指适于作为人体和其它哺乳动物的单一剂量的生理离散单元，每单元含有预定量的活性物质(其已计算出来可产生希望的治疗效果)和适当的药物载体、稀释剂或赋型剂.权利要求1.式I的化合物或其可药用的盐，其中，A为H-(Q)p-；Q每次出现时独立选自衍生自氨基酸的氨酰基，所述氨基酸选自天然氨基酸和非天然氨基酸，其选自天然α氨基酸的D-异构体；Aib(氨基丁酸)、βAib(3-氨基异丁酸)、Nva(正缬氨酸)、β-Ala、Aad(2-氨基己二酸)、βAad(3-氨基己二酸)、Abu(2-氨基丁酸)、Gaba(γ-氨基丁酸)、Acp(6-氨基己酸)、Dbu(2，4-二氨基丁酸)、α-氨基庚二酸、TMSA(三甲基甲硅烷基-Ala)、alle(别-异亮氨酸)、Nle(正亮氨酸)、叔-Leu、Cit(瓜氨酸)，Orn、Dpm(2，2’-二氨基庚二酸)、Dpr(2,3-二氨基丙酸)、α-或-Nal、Cha(环己基-Ala)、羟基脯氨酸、Sar(肌氨酸)、O-甲基酪氨酸、苯基甘氨酸；环氨基酸；Nα-烷基化氨基酸，其中Nα-烷基化氨基酸为Nα-(1-10C)烷基氨基酸，例如MeGly(Nα-甲基甘氨酸)、EtGly(Nα-乙基甘氨酸)和EtAsn(Nα-乙基天门冬酰胺)，和α-碳上带有两个侧链取代基的氨基酸；P为1-10的整数；X为SO2；R10为氢或氟；和R11为氢、氟或羟基。2.根据权利要求1的化合物，其中p为1-3的整数.3.根据权利要求1的化合物，其中p为1。4.根据权利要求1-3任一项的化合物，其中Q为衍生自天然氨基酸的氨酰基。5.式I的的化合物或其可药用的盐，(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中A为H-(QV;Q为甘氨酰基、丙氨酰基、翔氨跣基、亮氨酰基、异亮氨酰基、脯氨酰基、苯丙氨醜基、酪氨酰基、色氨酰基、甲硫氨酰基、赖氨酰基或丝氨酰基；p为1-10的整数；X为S02;R"为氢或氟；且R"为氢、氟或羟基。6.根据权利要求5的化合物，其中p为1-3的整数。7.根据权利要求5的化合物，其中p为1.8.根据权利要求l-7中任一项的化合物，其中Q为甲硫氨酰基.9.根据权利要求l-8中任一项的化合物，其中R^为氢。10.根据权利要求l-9中任一项的化合物，其中RU为氢。11.根据权利要求1或5的可药用的盐，其为用酸制得的酸加合盐，该酸提供可药用的阴离子；用碱制得的碱加合盐，该碱为含有酸部分的化合物提供可药用的阴离子；或含有相反带电基团的两性离子化合物.12.根据权利要求1或5的化合物，其中A为H國(QV;Q为L-丙氨酰基；p为1;X为S02;R"为氢；且Rn为氢；或其盐酸盐、甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐或单钠盐。13.根据权利要求12的化合物，其为(lR，4S，5S，6S)-4-(2，S-氨基丙酰基)氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸盐酸盐或(1R，4S，5S，6S)-4-(2，S-2，-氨基丙酰基)氨基-2，2-二氧代-2入6-硫杂-双环[3.1.0己烷-4，6-二羧酸甲苯磺酸盐。14.一种制备如权利要求1-13中任一项所要求保护的式I化合物或其可药用的盐的方法，包括酰化式(ii)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>用相应的式m的氨酰基进行酰化PgN-A-(HI)其中PgW为氮保护基团；然后，对于上述任意一个步骤，当使用保护基团对官能团进行保护时，除去保护基团；然后，对于上述任意一个步骤当需要式I化合物的可药用的盐时，使碱形式的这种式I化合物与提供可药用的平衡离子的酸进行反应；或对于含有酸部分的式I化合物，使酸形式的这种化合物与提供可药用的阳离子的碱反应；或对于式l的两性离子化合物，中和酸加合盐形式或碱加合盐形式的式I化合物；或采用任何其它传统方法。15.用于治疗的权利要求1-13中任一项所述的化合物。16.权利要求1-13中任一项所述的化合物用于制备给药有效量的式(n)化合物的药物中的用途，其中，X、Rm和RU如权利要求l中的定义。17.用于治疗患者的神经障碍的权利要求1-13中任一项所述的化合物。18.权利要求17的化合物，其中所述神经障碍为心脏旁路手术和移植后的脑缺陷；脑缺血；脊髓创伤；头部创伤；阿尔茨海默氏病；亨廷顿舞蹈病；肌萎缩性侧索硬化；艾滋病诱发的痴呆；产期缺氧；低血糖神经损伤；眼创伤和视网膜病；认知疾病；先天性和药物诱发的帕金森氏病；肌肉痉挛；偏头痛；尿失禁；药物耐受、病理性退瘾、停止和成瘾；戒烟；呕吐；脑水肿；慢性疼痛；睡眠障碍；惊厥；图雷特综合征；注意力缺陷障碍或迟发性运动障碍。19.权利要求18的化合物，其中所述神经系统疾病为药物耐受、病理性退瘾、停止和成瘾；或戒烟。20.用于治疗患者的精神疾病的权利要求1-13中任一项所述的化合物。21.权利要求20的化合物，其中所述精神疾病为精神分裂症、焦虑和相关疾病、抑郁、双相性精神障碍、精神病和强迫性神经失调。22.权利要求21的化合物，其中所述精神疾病为焦虑和相关疾病.23.权利要求21的化合物，其中所述精神疾病为精神分裂症。24.—种药物制剂，包括与可药用的载体、稀释剂或赋型剂结合的权利要求1—13中任一项所述的化合物。全文摘要本发明涉及合成的兴奋性氨基酸前药及其制备方法。本发明进一步涉及其使用方法，及包括治疗神经系统疾病和精神疾病的化合物的药物组合物。文档编号A61K38/05GK101362793SQ20081009621公开日2009年2月11日申请日期2003年6月6日优先权日2002年6月11日发明者C·佩德雷加-特塞罗,E·D·莫赫,I·科拉多卡农,J·A·蒙恩,J·G·布兰科-厄格拉蒂申请人:伊莱利利公司