专利名称：：用于抑制家禽球虫感染的组合物以及用其抑制球虫感染的方法用于抑制家禽球虫感染的组合物以及用其抑制球虫感染的方法
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本发明涉及一种用于抑伟嫁禽球虫感染的组糊和一种用于抑制家禽球虫感染的方法。球虫病是一种原生动物寄生性疾病，它是由球虫目原生动物弓l起的传染性疾病。球虫4嫁禽如鸡、力鸟、鸭、鹌鹑以鹏鸭和家鸭的杂种感染，然后引起不同症状，如消化道出血、生长抑制和濒临死亡。近年来在很多情形家禽被集中或大规模饲养。因此，球虫感染的传播给家禽饲养者造成了极大的经济损失。已经作为抗球虫药开发和使用的药物包括磺胺类药物、硝基呋喃类药物、喹啉类药物、抗硫胺类药物、苯甲酰胺类、萘醌衍生物(参见，如JP-A2004-51510)、聚醚抗生素等等。然而，它们价格昂贵，并且安全剂飄艮窄。因此，使用大量所述抗球虫药，如在饲料或其他中混合大量所述抗球虫药存在一定困难。另外，长期使用药物会导致耐药菌株出现，从而使药物的效力陶氐。虽然人们已经对抗原生动物如球虫的疫苗有所研究，但目前仍没有成功。另外，疫苗比较昂贵，而且据说疫苗具有斷氏家禽生长率的副作用。为了治疗或预防球虫病，人们已经发现了一种含有萜的饲料组合物(参见JP-A746963)。然而，仍然需要开发更加有效的抗球虫药。本发明的目的之一是提供一种抑制家禽球虫感染的组合物，将其向家禽给药，例如在小鸡达到性成熟成为成体鸡之前给药(特别的，在小鸡孵化后尽早给药)，从而产生极好的效果，本发明的另一目的是用所述组合抑制家禽球虫感染的方法。在这种情况下，本发明的发明人深入研究后发现{，葡糖酸或其盐或其衍生物会对家禽的球虫感染产生抑制作用。从而完成了本发明。本发明提供-1.一种抑制家禽球虫感染的组合物，含有葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分(以下在某些瞎形将其称为本发明的感染抑制组合物)；2.根据上述第1条所述的抑制家禽球虫感染的组合物，其中葡糖酸或其盐或其衍生物选自葡糖勝内、葡糖,、葡糖酸-5~内酯和葡糖酸个内酯；3.根据上述第1条所述的抑制家禽球虫感染的组合物，其中葡糖酸或其盐或其衍生物是葡糖酸钠；4.一种抑制家禽球虫感染的饲料组合物，其含有根据±^第1条所述的抑制家禽球虫感染的组合物(以下在某些情形将其称为本发明的饲料组合物)；5.—种抑制家禽球虫感染的方法，其包含向家禽施用有效量根据，第1条所述的抑制家禽球虫感染的组合物的步骤(以下在某些情形将其称为本发明的感染抑制方法)；6.根据il^第5条所述的抑制家禽球虫感染的方法，其中家禽是孵化后O一5周的小鸡；7.—种抑制家禽球虫感染的方法，其包含向家禽施用有效量根据，第4条所述的抑制家禽球虫感染的饲料组合物的步骤；8.根据战第7条所述的抑制家禽球虫感染的方法，其中家禽是孵化后O一5周的小鸡；禾口9.葡糖酸或其盐或其衍生物在制|3制家禽球虫感染的组激中的用途。本发明感染抑制组合物的特征在于其含有葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分。根据本发明，通过向家禽施用含有葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分的感染抑制组合物可有效抑制家禽球虫感染。实施例的详细描述以下将详细说明本发明。本文中"家禽'指所有作为驯养动物饲养的禽类，包括鸡、鹌鹁、鸭、野鸭和家鸭的杂种、火鸡、珍珠鸡、鸵鸟等等。本发明的感染抑制组合物包含葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分。本文中"葡糖酸或其盐或其衍生物"指葡糖酸或与葡糖酸具有相同药效的葡糖酸的盐或衍生物。葡糖酸的盐或衍生物的具体例子包括葡糖勝内、葡糖酸钙、葡糖酸舒内酯(如内酯化合物)等等。雌的葡糖酸肝内酯包括葡糖酸-s-内酯和葡糖酸-，内酯。上述葡糖酸及其盐和衍生物中,^ffl葡糖勝内。本文中"相同药效"指与作为抑制家禽球虫感染组合物活性成分的葡糖M具有相同的抑制球虫感染活性。以下将说明本发明的感染抑制组合物。本发明的感染抑制组合物可以是葡糖酸或其盐或其衍生物。本发明的感染抑制组合物通常含有葡糖酸或其盐或其衍生物以及赋形剂，如固臓体、液体载体等等，可将其舰常规方法制备成片剂、粉末、颗粒、麟、水溶性制剂、溶液、水一分散性粉末、混悬液等等使用(如ManufacturingPhamiacy中记载的方法，由AkinobuOtsuka等编辑，1995，由NankodoCo，Ltd出版)。固体载体赋形剂的例子包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、玉米淀粉、明胶、酪蛋白、淀粉、阿拉伯胶、纤维素衍生物、海藻酸等等。液体载体赋形剂的例子包括水、甘油、植物油、脂肪酸、脂肪酸酯、山梨醇等等。本发明的感染抑制组合物可进一步含有有机矿物质，如多肽锌、多肽铁等等；无机矿物质，如碳勝辛、碳酸锰、硫酸铁、碳酸镁等等；维生素，如维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、泛酸、烟酸等等；苜蓿粉、压片玉米等等。另外，本发明的感染抑制组合物可含有用于改善味道的香料等。进一步，本发明的感染抑制组合物如有必要可含有常规的添加齐咖抗麟、抗真鹏、驱虫药、抗氧抓色素、调味剂、掩味剂或酶。为粉末、颗粒r溶液或片剂。本发明感染抑制组合^^制剂优选含有按重量约0.01至95%的葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分。这样配制的本发明的感染抑制组合物可直接使用，也可用zK稀释后j吏用等等。另外，本发明的感染抑制组合物可与常规的添加剂如抗菌药、抗真菌药、驱虫药、抗氧剂、色素、调味剂、掩味剂或酶混合或同时或不同时使用。本发明的感染抑制组合物也可制备成。本发明感染抑制组合物的}ilil将活性成分和其他成分混合后用水溶性多糖胶凝化制备。本发明的感染抑制组合物也可以制成在^ffi前胶凝化的制剂。本发明感染抑制组合物的可胶凝化制剂通过将活性成分与预定量的水溶性多糖粉末混合制备。用于胶凝作用的水溶性多糖包括琼脂、角观、羧甲基纤维素、淀粉、甘露聚糖、明胶、海藻勝内、阿拉伯胶、槐豆胶、黄原胶、壳聚糖、飾胶、果胶、海藻酸丙基乙二醇酯、阿拉伯半乳聚糖、印度树胶、罗望子胶、支链淀粉、吗啉脂肪鹏、凝胶多糖、黄蓍胶等等。在这些多糖中，由于謝介和易于得到，更加tt^琼脂、淀粉、甘露聚糖和明胶。向家禽施用本发明的感染抑制组合物的方法没有特别的限制。本发明的感染抑制组合物可通过常规的方法向家用，如将其喷洒在饲料上或将其与饲料混合c本发明感染抑制组合物的剂量是能够产生家禽球虫感染抑制作用的有效量，也就是说，在其它条件相同的情况下与未向家禽施用本发明的感染抑制组合物的情形相比，能够产生增强的家禽球虫感染抑制作用的本发明感染抑制组合物的量。本发明感染抑制组合物的剂量可根据家禽的种类和大小适当调整。一般而言，本发明感染抑制组，的总齐懂范围雌活性成分为0.005至2g，更雌0.005至lg,进一步,0.1至lg。本发明感染抑库i跑合物通常制虫4顿，或可用7jC稀释后以稀释的制剂使用(如施用糊水稀释物)。当本发明感染抑制组合物以7K稀释制剂^吏用时，稀释制剂中的活性成分浓度通常为约10至500,00ppm，^m约35至3,500ppm。例如，本发明感染抑制组合物以活性成分约0.01至500g的量溶于1L水中，然后按一剂施用。本发明感染抑制组合物,以活性成分约0.035至35g的量溶于1L水中，然后施用。当向家禽施用如上所述的稀释制剂时，该制剂可il311:畑7K添加设备或其他来施用。稀释制剂的剂量可根据家禽的大小、生长情况、饲养密度，施用方法等等适当调整，通常为每10,000个体约300至2,000L。当本发明感染抑制组合物为凝胶时，可通过使家禽自由摄食凝胶来施用。孵化场^x鸟饲养;^汤或在将家禽由孵化场运至鸡i^农场的过程中可使用该施用方法。当本发明感染抑制组合物为可胶凝化制剂时，该制剂可以在孵化场或农场〈顿前用水胶凝化，得到凝胶状固体后向家禽施用(即，家禽自由摄食或直接向谷物施用)。至于施用本发明感染抑制组合物的时间和周期，对于下蛋的或烤焙的种类而言，本发明的感染抑制组合物在饲养小鸡的过程中连续施用，雌在鸡仔的阶段(家禽在孵化后的0至5周)施用。更优选的是，本发明感染抑制组^tl在家禽孵化后的0至21天连续施用。然后，将说明根据本发明的饲料组合物。本发明的饲料组合物含有本发明感染抑制组合物。通常，本发明的饲料组合物通过向饲料、饮用水、生理电解质溶液等等中加入本发明的感染抑制组合物来制备。本发明的饲料组合物tti^含有按重量约0.005至1.0%的本发明感染抑制组合物。用于本发明的饲料组合物的饲料、饮用水和生理电解质溶液没有特别的限制，只要它们是通常4顿的。饲料的例子包括将选自以下的一种或多种成分适当混合而成的饲料玉米、大米、小麦、高粱、豆饼、糠、脱脂糊、鱼粉、脱脂奶粉、干乳清、脂肪或油、苜蓿粉、白鲑粉、大豆油、粉状精制牛油、小麦粉、菜籽油、骨^t司料(羽粉)、动物脂肪或油、磷^^丐、玉米面筋粉、蜂蜡、玉米胚芽粉、碳酸钙、磷酸三钙、氯化钠、氯^M碱、维生素(维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素D、维生素E、泛酸钙、烟,安、叶酸等)、氨基酸(赖氨酸、蛋氨酸等)、少量无机盐(硫酸镁、硫酸铁、硫酸铜、硫勝辛、碘化钾、硫酸钴等)、益生菌等组成。本发明的饲料组合物还可以进一步含贿机矿物戯B多肽锌、多肽铁等等；无机矿物质，如碳酸锌、碳^f孟、硫醱失、碳膨美等等；维生素，如维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、泛酸、烟酸等等；苜蓿粉、压片玉米等等。另外，本发明的饲料组，可含有用于改善味道的香料等。向家禽施用本发明饲料组合物的方法没有特别柳艮制。本发明的饲料组合物可M常规的方法向家禽施用，如将其喷洒在饲料上劍每其与饲料混合。本发明饲料组合物的剂量是肖滩产生家禽球虫感染抑制作用的有效量，也就是说，在其它条件相同的情况下与未向家禽施用本发明的饲料组合物的情形相比，能够产生增强的家禽球虫感染抑制作用的本发明饲料抑制组合物的量。至于施用本发明饲料组合物的时间和周期，对于下蛋的，焙的种类而言，本发明的饲料组合物在饲养小鸡的过程中驗施用，雌鹏仔的阶段(家禽在孵化后的0至5周)施用。更优选的是，本发明饲料组合物g禽孵化后的O至21天连续施用。当本发明的饲料组合物是通过将含有活性成分葡糖酸钠的本发明感染抑制组合物与饲料混^喊时，本发明饲料组合物可含有按SS约0.0005至5%、优选按重量约0.05至2%、更优选按重量约0.1至1%的葡糖酸钠。当本发明的饲料组合物是通过将含有活性成分葡糖M的本发明感染抑制组^l加入t畑水或生理电解溶液制备时，本发明饲料组合物可含有按M约0.035至3.5%、按重量约0.035至1.4%、更，按重量约0.07至0.7%的葡糖勝内。然后，将说明本发明感染抑制方法。本发明的感染抑制方法包括向家禽施用有效量本发明感染抑制组合物或本发明饲料组合物的步骤。在该方法中，本发明的饲料组合物可通过常规方法给予动物。有效量根据如制剂种类、动物类型、摄食时间等因素而变化，可在如前所述的本发明感染抑制组合物或饲料组合物的剂量范围内适当地增加或减少。特别是，例如，本发明感染抑制组合物用水稀释至适于向家禽施用的浓度。得到的稀释物可向家禽施用。稀释率取决于常规的^^7R稀释物的施用方法，例如优选约5至10倍的稀释物。特别是，例如，本发明感染抑制组合物用水稀释至预定的浓度。向稀释物中加A7K溶性多糖、搅拌混合得到均匀溶液，可将其置于常温或于船,存(如冰箱等)从而得至臓胶状固体。如果所i顿的胶凝齐赃高温溶解、在低温凝固(如琼脂、明胶等)，该胶凝剂事先加入制备本发明感染抑制组，的介质中。该介质由高压蒸汽灭菌，然后冷却。如果需要，益生菌或疫苗的种菌在胶凝化前立即接种至介质中，于37'C培养，然后置于常温或于低,存(如冰箱等)从而得到凝胶状固体。所得的)M^状固体可向家禽施用。该状固体的凝胶亏贩适于在约200至2,000g/cm2。当j顿琼脂时，》赚3贩根据琼脂的种类而变化，对应于浓度约0.5至3.0%。用于在水溶性介质种胶凝化本发明感染抑制组合物的水溶性多糖包括琼脂、角，、羧甲基纤维素、淀粉、甘露聚糖、明胶、海藻,、阿拉伯胶、槐豆胶、黄原胶、壳聚糖、瓜尔胶、果胶、海藻酸丙基乙二醇酯、阿拉伯半乳聚糖、印度树胶、罗望子胶、支链淀粉、吗啉脂肪鹏、？赚多糖、黄蓍胶等等。在这些多糖中，由于廉价和易于得到更加，琼脂、淀粉、甘露聚糖和明胶。例如，当;嫩状固体是施用纟煞勺o至7天、饮7K量和賴均较小的家禽时，由于家禽具有啄食ity:固体物的遗传习性(习惯)，它们易于在短时间内摄取必需数量的本发明感染抑制组合物。如有必要，难于向幼離用的益生菌、疫苗、药物、营养物质等等可与本发明的感染抑制组合做昆合，用水溶性多糖胶凝化,然后提供给家禽，让它们自由摄取凝胶，由此可以和本发明的感染抑制组合物一起有效地施用给家禽。在小鸡阶段供应水和营养物质对于以后的生产能力极其重要。因此，当施用营养物质时，其例子包括维生素、矿物质等，以及碳7K化合物如糖类，例如輔如葡萄糖、甘露糖、果糖等，和其低聚物，二糖如蔗糖等等，蛋白质如脱脂牛奶等，以及脂质。当然，本发明包括^ffl葡糖酸或其盐或其衍生物制备抑制家禽球虫感染的组合物的用途(即，本发明的用途)。实施例以下将参照制备实施例和试验实施例对发明进行更详细的说明，但是本发明不受这些实施例的限制。在实施例中，词语"份"是指重量份。制剂实施例l:粉末将25份葡糖酸钠和25份乳糖用W^混合均匀。然后，将该混合物充分搅拌、混合得到粉末。制剂实施例2:颗粒25伤，糖M和25份乳糖搅拌、混合均匀。向混，中加A3S量7K，并进一步搅拌。混^I用制粒机制粒，然后通风千燥得至鹏粒。制剂实施例3:溶液将25伤嘴糖,溶于50份水后，混^t/搅拌均匀得到溶液。以下试验实施例表明本发明的感染抑制组合物和饲料组合物对球虫感染具有极佳的抑制效果。试验实施例在隔离实验室中用柔嫩艾美球虫进行感染测试向120只购得的小鸡(烤焙型；公鸡；一天大小)舰让他们摄食i微部分的试验饲料给予葡糖酸钠(参见表l),试验小鸡数量和饲料中的葡糖,内加入量如表2所示。当小鸡达到14天龄时，M31口腔强饲法纟饰只小鸡接种lxl()5柔嫩艾美球虫。当小鸡达到21天龄时，将它们宰杀。取出形鸟的盲肠，对盲肠的损伤进行评分。另外，取盲肠中的排泄物，然后在显微镜下计数盲肠排泄物中的球虫卵囊数量。以下将描述测定盲肠损伤评分的标准和计数卵囊数量的方法。损伤评分和球虫卵囊数量如表2所示。(盲肠损伤评分)被宰杀小鸡的盲肠损伤评分通过常规方法测定("Methodoftestingcoccidiuminchicken'TCiyoshiTsunocHToshioIshii，TheJq)anesesocietyonpoultryDiseases(1971))。测定标准如下所述。测定中，当盲肠的一面比另一面损伤更严重时，记录更严重一面的症状。另外，更主要考虑盲肠的萎^f號。"0":(—)盲肠完全正常。"1":(+)盲肠的形状正常。盲肠的内容物轻微流动，为浅黄色。盲肠粘膜部分轻微月中胀，发白。'T，(++)盲肠微接近正常。盲肠粘膜完全肿胀。盲肠内容物没有出血。盲肠粘液为浅黄变色的。粘膜上有少量白色斑点坏死损伤和出血点。"3"(+++)盲肠萎縮变形明显。没有正常的内容物，在许多情况下盲肠的内容物充满凝结血块或灰白色干酪状变性物质。盲肠壁显著变厚，IK脆，在某些情况下有斑点的出血点留在盲肠壁上。损伤到达盲肠最低部，但没有到达直肠。"4"(++++)盲肠萎縮变形显著。盲肠通常皿为香肠状，稍微长于或等于或短于M的长度。在某些瞎况中损伤达到约l/3至l/4飾。即使损伤没有达到直肠，显著萎缩的盲肠被评分为"4"。其他瞎况与评分为"3"的情况相同。(计数卵囊数的步骤)测量排泄物的重量后，用浮游生物计数板计数OPG(1g排泄物中的卵囊数)，从而计算卵囊数。具体步骤如下i)排泄物搅拌均匀后，将2g排泄物方M烧杯。向其中加入38ml0.5%吐温20溶液制备成20倍稀释的排泄物溶液。ii)将该溶液用搅拌器搅拌30辦中。10iii)充分搅拌后立即用微量加液器将O.lml排泄物溶液滴在、，生物计数板上。大的废物和沙粒用，或带柄的针除去。w)将盖玻片(24mmx36mm)长边的一端浸入排泄物溶液。调整盖玻片的角度，使排泄物溶液在整面展开，从而使卵囊在盖玻片下尽可能均匀的分布。v)将盖玻片轻轻放置，用显微镜观察(放大倍数为100倍)，计数卵囊数。vi)当一行的卵囊数超哟1000时，为了均匀的计算盖玻片下的卵囊数，每7fiH十数10行，OPG由下列方程计算OPGKN/10)xDx(36/0.5)x(1/0.1)其中N为10行的总卵囊数，D为20(最终的稀释率)。vii)当卵囊密度较低时(1行中的卵囊数等于或小于1)，计数^中盖玻片下的卵囊数，OPG由下列方程计算OPG=Nx20x(l/0.1)=N><200其中N为旨IW中的总卵囊数。(表l)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*1:混合维生素是维生素A、维生素D3、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸、生物素、叶酸和维生素B12的混合物。(表2)i<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>损伤评分和卵囊数平均数士SD中途死亡的实施例数据被排除。如表2所示，葡糖M0，/。加A^且和葡糖,0.5%加入组的损伤评州氏于对照组的损伤评分。另外，各个葡糖酸钠加入组的球虫卵囊数也低于对照组的卵囊数。3!3lDunnett测试，M^糖,加入组和对照组之间存在统计学显著差异(p<0.05)。由此可以确定葡糖,是有效的家禽球虫感染抑制剂。工业实用性根据本发明，可提供一种抑制家禽球虫感染组合物，其向家禽施用，例如在小鸡达到性成熟成为成体鸡之前给药(特别的，在小鸡孵化后^给药)，从而产生极好的效果，本发明还提供一种用所^ia合抑制家^^虫感染的方法。权利要求1.一种抑制家禽球虫感染的组合物，含有葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分。2.根据权利要求1所述的抑制家禽球虫感染的组合物，其中葡糖酸或其盐或其衍生物选自葡糖,、葡糖,、葡糖酸各内酯和葡糖酸个内酯。3.根据权禾腰求1所述的抑制家禽球虫感染的组合物，其中葡糖酸或其盐或其衍生物是葡糖勝内。4.一种抑制家禽球虫感染的词料组合物，其含有权利要求1所述的抑制家禽球虫感染的组合物。5.—种抑制家禽球虫感染的方法，其包含向家禽施用有效量根据I51利要求1所述的抑制家禽球虫感染的组，的步骤。6.根据权利要求5所述的抑制家禽球虫感染的方法，其中家禽是孵化后0一5周的小鸡。7，一种抑制家禽球虫感染的方法，其包含向家禽施用有效量根据;^利要求4所述的抑制家禽球虫感,料组合物的步骤。8.根据权利要求7所述的抑制家禽球虫感染的方法，其中家禽是孵化后0一5周的小鸡。9.葡糖酸或其盐或其衍生物在制备抑制家禽球虫感染的组合物中的用途。全文摘要本发明涉及用于抑制家禽球虫感染的组合物以及用其抑制球虫感染的方法。提供一种抑制家禽球虫感染的组合物，其含有葡糖酸或其盐或其衍生物作为活性成分，一种抑制家禽球虫感染的饲料组合物，其含有抑制家禽球虫感染的组合物，一种抑制家禽球虫感染的方法，其包含向家禽施用有效量抑制家禽球虫感染的组合物或抑制家禽球虫感染饲料组合物的步骤，和葡糖酸或其盐或其衍生物在制备抑制家禽球虫感染的组合物中的用途。文档编号A61P33/00GK101305993SQ200810128709公开日2008年11月19日申请日期2008年5月15日优先权日2007年5月16日发明者加藤芳隆,塔乃上毅申请人:住友化学株式会社