专利名称：一种胸腺肽α1与胸腺五肽的组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种胸腺肽α1和胸腺五肽的组合物及其制备方法，该复方制剂可用于治疗慢性乙型肝炎、各种免疫功能受损的疾病以及肿瘤的辅助治疗。
背景技术：
乙型肝炎是世界上最为常见的传染性肝病。它是由乙型肝炎病毒(HBV)引起，而病毒可通过血液、无防护性性交、共用针头等途径传播，也可由受到传染的母亲在分娩时传染给新生婴儿。因乙型肝炎患者并不知道自己已被病毒感染，所以往往会把病毒传给与自己有紧密接触的人，从而引至广泛传播，目前全球约有4亿慢性乙型肝炎病毒感染者，卫生部2008年公布的调查结果显示我国仍有乙肝表面抗原携带者约9300万人，乙肝表面抗原携带率占全国人口的7.18％。临床已经证实，慢性肝炎如未治疗，其中将有10％-30％可发展为肝硬化，5％-10％可演变为肝癌。乙型肝炎病毒携带者可以终身带毒，其中单纯表面抗原阳性者发展成肝癌的几率是正常人的10倍，表面抗原和E抗原双阳性患肝癌的几率是正常人的40倍，而正常人肝癌的发生率仅为十万分之三十九。全世界每年约有100万人死于乙型肝炎病毒感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。乙型肝炎病毒感染是严重的公共卫生问题，给国家和个人都带来沉重的负担，仅我国每年用于肝炎和肝病的直接医疗费用就高达1000多亿元，而且对患者的生活和工作造成了全方位负面影响；因此，全社会都渴望有更为有效的疗法或药物解决乙型肝炎病毒感染，以促进社会稳定，减轻社会和个人的经济负担。免疫学研究表明T细胞的反应活性受损是引起慢性乙型肝炎感染的主要原因，由于胸腺素或胸腺生成素能促进T细胞免疫功能的恢复，而且还有直接抗病毒作用，所以目前胸腺五肽或胸腺肽α1均作为免疫类调节剂广泛用于治疗慢性乙型肝炎。
癌症(恶性肿瘤)是一组可影响身体任何部位的多种疾病的通称。癌症的特征之一是快速产生异常细胞，这些细胞超越其通常边界生长并可侵袭身体的毗邻部位和扩散到其它器官。如今因老领化、环境条件恶化及不良习惯(如使用烟草及饮酒过度)等致使癌症发病率不断上升，并已成为全球主要的死亡原因2007年，癌症死亡人数达790万(约占所有死亡人数的13％)，其中以肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌和乳癌为主。癌症的多数患者在确诊时通常已发展至晚期并有转移以致无法手术切除，只能通过放疗或化疗药物治疗，有效率低。患者也常伴有免疫功能低下等症状，而全身化疗进一步抑制了已降低的免疫功能，故而可能影响其疗效。在化疗中加用胸腺五肽或胸腺肽α1治疗癌症，其有效率较单一化疗有所提高，并且对造血系统的毒性也显著降低，胸腺五肽或胸腺肽α1对癌症患者的免疫功能有很好的调节作用，进而提高了治疗效果及生活质量。
胸腺是免疫系统中重要的中枢免疫器官，负责T细胞的分化发育和成熟。胸腺上皮细胞分泌多种肽类激素胸腺素α家族、胸腺素β家族、胸腺生成素等。1977年，被称为“胸腺之父”的Allen Goldstein博士从胸腺肽第V组分中提取出其中最具免疫活性的成分胸腺肽α1(Tα1)，Tα1是一种生物反应调节剂(BRM)，通过刺激外周血液淋巴细胞丝裂原来促进T淋巴细胞的成熟，增加各种淋巴因子如α、β干扰素的分泌，从而有增强细胞免疫功能的作用。胸腺生成素是分子量为5562的多肽，由49个氨基酸构成。胸腺五肽(Tp-5)是合成的五肽(Arg-Lys-Asp-Val-Tyr)为胸腺生成素的32-36活性中心，具有胸腺生成素90％以上的活性，可以诱导T细胞分化、促进T淋巴细胞亚群发育、成熟并活化的功能，并能调节T淋巴细胞亚群的比例，使其趋于正常；在机体中，胸腺五肽通过提高cAMP水平，促进T细胞分化，并与T细胞特异受体结合，使细胞内GMP水平提高，从而诱发一系列胞内反应，起到调节机体免疫功能的作用。
胸腺肽α1和胸腺五肽在胸腺功能正常时由胸腺上皮细胞同时分泌，而临床上也采取单独分别使用的方式，本发明意外的发现，将胸腺肽α1与胸腺五肽组合使用并制备成药物组合物，能充分发挥二者的协同增效功能，降低使用剂量，得到更佳的治疗效果。
发明内容
胸腺肽α1和胸腺五肽在临床上现均作为免疫调节剂用于病毒感染性疾病、免疫缺陷病、自体免疫性疾病、肿瘤等的治疗。作为胸腺分泌的最重要2个活性组分胸腺肽α1和胸腺五肽，对T淋巴细胞发育分化起着至关重要的作用。
本发明发现胸腺肽α1和胸腺五肽组合应用能同时发挥两者的免疫调节作用，具有明显的协同效应。为此，本发明提供具有协同增加效应的胸腺肽α1和胸腺五肽组合物以及它们的制备方法。
由于胸腺肽α1和胸腺五肽口服经胃肠道消化酶的作用降解，所以无法制成口服制剂。因此，本发明经过筛选，将胸腺肽α1和胸腺五肽制成一种供注射用的药物组合物，可以用于皮下、静脉或肌内注射。
本发明的药物组合物，是注射剂，将胸腺肽α1和胸腺五肽按比例组合而成，根据药物制剂的需要，其中可以加入相应辅料，制成冻干粉针或注射液。所述辅料包括渗透压调节剂或赋形剂、pH调节剂等。
本发明的组合物，优选的药量配比为(以每支或每瓶计) 胸腺肽α10.1mg～10mg，胸腺五肽0.1mg～100mg。
更优选的为(以每支或每瓶计) 胸腺肽α10.1mg～5mg，胸腺五肽0.1mg～50mg。
特别优选的为(以每支或每瓶计) 胸腺肽α10.1mg～2.0mg，胸腺五肽0.1mg～20mg。
本发明最优选的配比见实施例。
如冷冻干燥注射剂 胸腺肽α1 1.6g 胸腺五肽 0.8g 甘露醇50g 磷酸二氢钠0.796g 磷酸氢二钠1.755g 注射用水加至 1000ml 共制成1000瓶 本发明优选的配方组成是经过筛选获得的，具有稳定性好，副作用少，溶解迅速等优点。
本发明的注射用药物组合物，在使用时可以和其他注射用液体制剂合用，如加入到等渗注射溶液中，等渗注射溶液可选自0.9％的氯化钠注射液、5％的葡萄糖注射液、5％的甘露醇注射液、5％的山梨醇注射液、2.1％的甘氨酸注射液或其他等渗注射溶液中的任一种。
本发明的药物组合物，制成注射液时，由处方量的胸腺肽α1和胸腺五肽加入适当的辅料，活性炭除热原后，经过微孔滤膜过滤、灌装、轧盖等制剂学常规技术操作制成。
所加入的辅料有pH缓冲液调节剂选自磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、醋酸钠-醋酸、柠檬酸钠-柠檬酸缓冲体系；渗透压调节剂选自甘露醇、氯化钠、葡萄糖。
其中pH缓冲液调节剂的量控制在0～10mmol(以每支或每瓶计)。
渗透压调节剂的量控制在0～100mmol(以每支或每瓶计)。
本发明的注射剂，制成冻干粉针剂时，由适量的胸腺肽α1和胸腺五肽加入适当的辅料，活性炭除热原后，经过微孔滤膜过滤、灌装、冷冻干燥、轧盖等制剂学常规技术操作制成。
所加入的辅料有pH调节剂选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、盐酸、氢氧化钠、醋酸钠、醋酸、柠檬酸钠、柠檬酸；赋形剂包括甘露醇、乳糖。
其中pH调节剂的量控制在0～10mmol(以每支或每瓶计)。
赋形剂的量控制在0～100mmol(以每支或每瓶计)。
本发明的注射剂，其pH值控制在4.0～8.0之间。
本发明的注射用药物组合物，进行了稳定性试验，证明其质量稳定可靠，结果如下。
表1加速试验(25℃×RH 75％)结果
表2长期试验(2～8℃)结果
以下通过试验数据说明本发明的协同增效功能。
胸腺肽α1与胸腺五肽组合物对机体免疫力的药效学试验 1、试验材料 动物昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半。
供试品及其他(1)按如下的规格配制胸腺肽α1与胸腺五肽组合物作为供试品 表3处方编号表
其中①～②号作为参照组，③～⑩为样品组。
(2)0.9％氯化钠注射液(生理盐水)在供试品临用前以生理盐水制成上述浓度。
2、复方组合物对小鼠单核巨噬细胸吞噬功能的影响 取在实验室已观察1周昆明小鼠121只，随机分为11组，每组11只。对照组只给予等体积的生理盐水，①～⑩号供试品按1ml/只尾静脉注射给药，每日一次，连续7d，末次给药后1h，小鼠尾静脉注射25％印度墨水20ml/Kg，于注射后1min、10min分别从右内眦静脉丛取血20μl，置于3ml的0.1％NaCO3溶液中，混匀后在紫外分光光度计上在680nm下测定OD值，计算单位时间内血清中碳粒清除速度。
结果表明，胸腺肽α1与胸腺五肽的复方组合物能明显增加血清中异物清除率值，与对照组比较，有显著性差异；复方组合物其异物清楚率值与参照组比较，非简单的叠加关系，而是显示出明显的协同效应。
表4复方组合物对小鼠碳粒廊清的影响 3、复方组合物对小鼠半数溶血值(HC50)的影响 动物分组(每组10只)及给药(给药时间为连续10d)同2项下，给药后第6d各组腹腔注射2.5％绵羊红细胞0.5％ml/只进行免疫，末次给药后1h从右内眦静脉丛取血至死，置于血管中分离血清，并按血清溶血素测定法测定小鼠血清的半数溶血值(HC50)。
结果表明，胸腺肽α1与胸腺五肽的复方组合物与对照组比较能明显提高小鼠血清半数溶血素，与参照组比较显示其非简单的叠加关系，而具有协同效应。
表5复方组合物对小鼠半数溶血素的影响 由此可见，胸腺肽α1与胸腺五肽组合物其在动物的免疫力功能试验结果取得了较好的效果，二者具有明显协同效应，对于相应慢性乙型肝炎、肿瘤辅助治疗能确保在单独使用时的总剂量降低情况下提高治疗效果，进而获得更好的经济性能。
具体实施例方式 下面通过具体实施方式
对本发明做进一步说明，但并不意味着对本发明保护范围的限定。
实施例1 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物注射液的制备 1、处方 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(1) 胸腺肽α1 1.6g 胸腺五肽1.0g 甘露醇 50g 磷酸二氢钠 0.796g 磷酸氢二钠 1.755g 注射用水加至1000ml 共制成1000瓶 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(2) 胸腺肽α1 1.0g 胸腺五肽1.0g 甘露醇 25g 醋酸钠 0.1g 注射用水加至1000ml 醋酸调pH值至5.5～7.5共制成1000瓶 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(3) 胸腺肽α1 1.6g 胸腺五肽 1.6g 氯化钠9g 磷酸二氢钠0.796g 磷酸氢二钠1.755g 注射用水加至 1000ml 共制成1000瓶 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(4) 胸腺肽α1 1.0g 胸腺五肽 0.5g 氯化钠 9g 醋酸钠 0.4g 注射用水加至1000ml 醋酸调pH值至5.5～7.5共制成1000瓶 2、具体步骤 1)临用前将配液用的管道及容器进行去热原处理、注射用水冲洗后灭菌备用。
2)取配液量80％的注射用水，加入处方量的胸腺肽α1、胸腺五肽及相应辅料搅拌至完全溶解，补加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的针用活性炭，搅拌30分钟。
4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
5)经0.22μm的微孔滤膜精滤。
6)检查药液的澄明度、细菌内素毒、含量等，合格后灌装。
7)百级层流下将药液封装于西林瓶或预灌封注射器中。
8)如分装于西林瓶中，则轧盖后灯检；如分装于预灌封注射器中，则灯检后装上推杆。
9)成品全检合格后，包装入库。
实施例2胸腺肽α1和胸腺五肽组合物剂冻干粉针的制备 1、处方 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(1) 胸腺肽α1 1.6g 胸腺五肽 0.8g 甘露醇50g 磷酸二氢钠0.796g 磷酸氢二钠1.755g 注射用水加至 1000ml 共制成1000瓶 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物剂处方(2) 胸腺肽α1 0.5g 胸腺五肽1.0g 甘露醇 25g 醋酸钠 0.1g 注射用水加至1000ml 醋酸调pH值至5.5～7.5 共制成1000瓶 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(3) 胸腺肽α1 1.0g 胸腺五肽 2.0g 甘露醇50g 注射用水加至 1000ml 盐酸或氢氧化钠调pH值至5.5～7.5共制成1000瓶 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物处方(4) 胸腺肽α1 1.6g 胸腺五肽3.2g 甘露醇 40g 醋酸钠 0.4g 注射用水加至1000ml 醋酸调pH值至5.5～7.5共制成1000瓶 2、具体步骤 1)临用前将配液用的管道及容器进行去热原处理、注射用水冲洗后灭菌备用。
2)取配液量80％的注射用水，加入处方量的胸腺肽α1、胸腺五肽及相应辅料搅拌至完全溶解，补加注射用水至全量。
3)加入配液量0.1％的针用活性炭，搅拌30分钟。
4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
5)经0.22μm的微孔滤膜精滤。
6)检查药液的澄明度、细菌内素毒、含量等，合格后灌装。
7)百级层流下根据含量检测结果调整装量体积并将药液分装于西林瓶中，半压塞后放入冷冻干燥机中冷冻干燥。-45℃预冻5小时，-2℃低温真空干燥12小时，升温至25℃真空干燥5小时。
8)冻干结束，压塞，轧盖并进行灯检。
9)成品全检合格后，包装入库。
实施例3胸腺肽α1和胸腺五肽组合物的制备 胸腺肽α1的剂量为0.1mg；胸腺五肽的剂量为0.1mg。
制备方法同权利要求1 实施例4胸腺肽α1和胸腺五肽组合物的制备 胸腺肽α1的剂量为5mg；胸腺五肽的剂量为50mg。
制备方法同权利要求1 实施例5 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物的制备 胸腺肽α1的剂量为2.0mg；胸腺五肽的剂量为20mg。
制备方法同权利要求1 实施例6 胸腺肽α1和胸腺五肽组合物的制备 胸腺肽α1的剂量为10mg；胸腺五肽的剂量为100mg。
制备方法同权利要求权利要求
1、一种含有胸腺肽α1和胸腺五肽的药物组合物。
2、根据权利要求1所述的组合物，其特征在于其中胸腺肽α1的剂量范围为0.1mg～10mg；胸腺五肽的剂量范围为0.1mg～100mg。
3、根据权利要求2所述的组合物，其特征在于其中胸腺肽α1的剂量范围为0.1mg～5mg；胸腺五肽的剂量范围为0.1mg～50mg。
4、根据权利要求2所述的组合物，其特征在于其中胸腺肽α1的剂量范围为0.1mg～2.0mg；胸腺五肽的剂量范围为0.1mg～20mg。
5、根据权利要求1～4的任一项组合物，其特征在于是注射剂制剂形式。
6、根据权利要求5的组合物，其特征在于所述注射剂是注射液或冻干粉针。
7、根据权利要求6所述的组合物，其特征在于其中注射液需要加入辅料，辅料选自pH缓冲液调节剂磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、醋酸钠-醋酸、柠檬酸钠-柠檬酸；渗透压调节剂甘露醇、氯化钠、葡萄糖；其中冻干粉针需要加入辅料，辅料选自pH值调节剂磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、盐酸、氢氧化钠、醋酸钠、醋酸、柠檬酸钠、柠檬酸；赋形剂甘露醇、乳糖、右旋糖酐、山梨醇。
8、根据权利要求7所述的组合物，其特征在于其中注射液pH缓冲液调节剂加入量为0～10mmol，渗透压调节剂加入量为0～100mmol；其中冻干粉针pH调节剂加入量为0～10mmol，赋形剂加入量为0～100mmol；pH值控制在4.0～8.0之间。
9、根据权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于其中注射液由适量胸腺肽α1和胸腺五肽加入辅料，活性炭除热原后，经过过滤、灌装、轧盖制成；其中冻干粉针由适量的胸腺肽α1和胸腺五肽加入辅料，活性炭除热原后，经过微孔滤膜过滤、灌装、冷冻干燥、轧盖制成。
10、权利要求1所述的组合物在制备治疗乙型肝炎；各种免疫功能受损的疾病；肿瘤的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种胸腺肽α1和胸腺五肽的组合物及其制备方法，该复方制剂可用于治疗慢性乙型肝炎、各种免疫功能受损的疾病以及肿瘤的辅助治疗，该组合物主要由0.1mg～10mg的胸腺肽α1及0.1mg～100mg胸腺五肽组成，同时加入适宜辅料制成注射液或冻干剂型，按上述比例制成的组合物有显著的协同增效作用，对于慢性乙型肝炎、各种免疫功能受损的疾病以及肿瘤的辅助治疗能达到更佳的疗效剂量比。
文档编号A61P1/00GK101683519SQ20081021088
公开日2010年3月31日 申请日期2008年8月25日 优先权日2008年8月25日
发明者崔学云, 周宗贞, 凌振宏, 宗永斌, 陈振博, 彭利洪 申请人:海南中和多肽药物研发有限公司, 海南中和药业有限公司