含有巯基哌啶的培南化合物的制作方法

专利名称：：含有巯基哌啶的培南化合物的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及含有巯基哌啶的培南化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在用于制备治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途。2
背景技术：
：培南类抗生素是七十年代发展起来的一类P-内酰胺类抗生素。因其抗菌谱广，抗菌活性强，并对P-内酰胺酶稳定，而备受关注。其结构特点是，青霉烷母核1位的硫被碳取代，2位具有双键，复合了青霉素的五元环和头孢菌素的共轭双键活化(3-内酰胺环的作用。目前已经上市的该类药品有亚胺培南、美罗培南、多尼培南、比阿培南、厄他培南等。美罗培南是日本住友株式会社和阿斯利康制药公司共同开发的第一个可单独用药的1(3-甲基培南类抗生素，其结构式如下美罗培南容易穿透大多数革兰氏阳性和阴性细菌的细胞壁，而达到其作用耙点青霉素结合蛋白。除金属(3-内酰胺酶以外，其对大多数P-内酰胺酶(包括由革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌所产生的青霉素酶和头孢菌素酶)的水解作用具有较强的稳定性。但由于长期应用，美罗培南对其它培南类的耐药菌株表现出交叉耐药性。EP0411636中公开了编号27的如下结构式的化合物，它对大肠埃希菌具有很好的抗菌活性，其他活性没有做进一步研究。因此，急需研究开发具有较好的抗菌活性，并且具有良好的化学稳定性和DHP-I稳定性的培南类抗生素。
发明内容本发明的技术方案如下本发明提供了通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构其中，Ri代表羧基，《00117或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基；112代表氢原子，低级垸基或氨基保护基；R3、W分别独立的代表氢原子，被卤素原子、羟基、羧基或氨基取代或未取代的低级烷基，或RS和W与它们所连接的氮原子一起形成饱和或不饱和的38元环状基团，形成的环状基团可被取代基取代，所述的取代基选自羟基、羧基、氨基或低级垸基；RS代表氢原子，被卤素原子、羟基、羧基或氨基取代或未取代的低级烷基；rs代表氢原子或低级垸基。优选的化合物为其中，R!代表羧基，《00117或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基；RM戈表氢原子，低级烷基或氨基保护基；R3、W分别独立的代表氢原子，甲基，三氟甲基，羟甲基，羧甲基，氨甲基，乙基，或W和W与它们所连接的氮原子一起形成饱和或不饱和的46元环状基团，形成的环状基团可被取代基取代，所述的取代基选自羟基、羧基、氨基、甲基或乙基；RS代表氢原子，甲基，三氟甲基，羟甲基，羧甲基，氨甲基或乙基；RS代表氢原子或甲基。进一步优选的化合物为其中，rM戈表接基，《00117或易水解的酯，所述的117代表羧基保护基；W代表氢原子，甲基或氨基保护基；R3、R4分别独立的代表氢原子，甲基，三氟甲基，乙基，或W和R"相互连接形成-ch2-ch2-ch2-，-<:^12-(:^12-(:112-012-或-(:112-(:1"1=<:1^(:112-，与它们所连接的氮原子一起形成环状基团；RS代表氢原子，甲基，三氟甲基或乙基；RS代表甲基。表l本发明的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>更进一步优选的化合物如下化学名称(4R,5S，6S)-3-[2-(N-二甲氨基)亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(1R)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸，简称化合物l，结构式如下COOH化学名称(4R，5S，6S)-3-[2-[吡咯烷-l-基]亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸，简称化合物2，结构式如下H3CCOOH化学名称(4R，5S,6S)-3-[2-[(2H-吡咯-l(5/f)-基)]亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]斗甲基-7-氧-1-氮杂双环[3,2,0據-2-烯-2-羧酸，简称化合物3，结构式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>化学名称(411，53，68)-3-[2-(氮杂环丁烷-1-基)亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(111)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸，简称化合物4，结构式如下:本发明所述"低级垸基"为C"直链或支链的垸基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基等。本发明所述"W和W与它们所连接的氮原子一起形成饱和或不饱和的38元环状基团"，可进一步含有一个或多个氮原子、硫原子或氧原子，包括氮杂环丙垸-l-基、氮杂环丁烷-l-基、吡咯烷-l-基、吡咯-l-基、2//-吡咯-1-基、咪唑垸-l-基、咪唑-l-基、吡唑垸-l-基、吡唑-l-基、哌啶子基、二氢或四氢吡啶-l-基、哌嗪子基等；形成的环状基团还可被取代基取代，所述的取代基选自羟基、羧基、氨基或低级垸基。本发明所述"氨基保护基"指常规用于取代氨基酸性质子的保护基团，此类基团的实例包括环丙甲基、l-甲基-l-环丙甲基、9-芴甲基、9-(2-硫代)芴甲基、2-呋喃甲基、2,2,2-三氯甲基、2-卣代甲基、2-碘乙基、2-三甲基甲硅烷基乙基、2-甲硫基乙基、2-甲磺酰基乙基、2-(对甲苯磺酰基)乙基、2-磷鐵基乙基、1，l-二甲基-3-(N，N-二甲基甲酰氨基)丙基、1,1-二苯基-3-(N,N-二乙氨基)丙基、l-甲基-l-(金刚垸萄乙基、l-甲基-l-苯乙基、1-甲基-1-(3,5-二甲氧苯基)乙基、l-甲基-l-(4-联苯基)乙基、l-甲基-l-(对苯偶氮基苯基)乙基、1,1-二甲基-2，2，2-三氯乙基、1,1-二甲基-2-氰乙基、环丁基、1-甲基环丁基、环戊基、环己基、1-甲基环己基、1-金刚垸基、异冰片基、乙烯基、烯丙基、肉桂基、苯基、2,4，6-二叔丁基苯基、间硝基苯基、S-苯基、8-喹啉基、N'-羟基哌啶基、4-(l，4-二甲基哌啶基)、4，5-二苯基-3-噁唑啉-2-酮、苄基、2,4,6-三甲基苄基，对甲氧基苄基、对甲氧基苄氧基羰基、3,5-二甲氧基苄基、对癸氧基苄基、对硝基节基、对硝基苄氧基羰基、邻硝基节基、3,4-二甲氧基-6-硝基苄基、对溴苄基、氯苄基、2,4-二氯苄基、对氰基苄基、邻(N,N-二甲基甲酰氨基)苄基、间-氯-对-酰氧基苄基、对(二羟基硼烷基)苄基、对(苯偶氮基)苄基、对(对甲氧基苯偶氮基)苄基、5-苯并异噁唑基甲基、9-蒽基甲基、二苯甲基、苯基(邻硝基苯基)甲基、二(2-吡啶基)甲基、l-甲基-l-(4-吡啶基)乙基、异烟碱基、S-苄基、N'-哌定基羰基、N'-对甲苯磺酰基氨基羰基及N'-苯氨基硫代羰基的氨基甲酸酯；甲酰基、乙酰基、乙酰基-吡啶錄、(N'-二硫代苄氧羰基氨基)乙酰基、3-苯基丙酰基、3-(对羟苯基)丙酰基、3-(邻硝基苯萄丙酰基、2-甲基-2-(邻硝基苯氧基)丙酰基、2-甲基-2-(邻苯偶氮基苯氧基)丙酰基、4-氯代丁酰基、异丁酰基、邻硝基肉桂酰基、吡啶甲酰基、N'-乙酰甲硫氨酰基、N'-苯甲酰基-苯基烷基、苯甲酰基、对苯基苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、邻硝基苯甲酰基、邻(苯甲酰氧基甲基)苯甲酰基和对-P-苯甲酰基的酰胺；邻苯二甲酰基、2，3-二苯基马来酰基和二硫代琥珀酰基的环亚酰胺；叔丁氧基羰基、烯丙基、烯丙氧基羰基、苯甲酰甲基、3-乙酰氧基丙基、4-硝基-l-环己基-2-氧代-3-吡咯垸-3-基、季铵盐、甲氧基甲基、2-氯乙氧基甲基、苄氧基甲基、新戊酰基甲基、[l-(烷氧羰基氨基)]-2,2,2,三氟乙基、[l-三氟甲基-l-(对氯苯氧基甲氧基)2，2,2，-三氟]乙基、2-四氢吡喃基、2，4-二硝基苯基、苄基、3,4-二甲氧基苄基、邻硝基节基、二(对甲氧苯基)甲基、三苯甲基、(对甲氧苯基)二苯基甲基、二苯基-4-吡啶基甲基、2-吡啶甲基-N'-氧化物、5-二苯丙环庚烷基、N，,N，-二甲氨基亚甲基、N'-异亚丙基、亚苄基、对甲氧基亚苄基、对硝基亚苄基、亚水杨基、5-氯亚水杨基、二苯亚甲基、(5-氯-2-羟苯基)苯基亚甲基、(酰基乙烯基)、5，6-二甲基-3-氧代-1-环己烯基、硼垸、[苯基(五羰基铬或钨XI羰基、铜或锌螯合物、硝基、亚硝基、氧化物、二苯基膦基、二甲硫基氧膦基、二苯硫基氧膦基、二乙基磷酰基、二苄基磷酰基、二苯基磷酰基、磷酰基、三甲基甲硅烷基、苯硫基、邻硝基苯硫基、2,4-二硝基苯硫基、2-硝基-4-甲氧基苯硫基、三苯甲硫基、苯磺酰基、对甲氧基苯磺酰基、2,4，6-三甲基苯磺酰基、甲基磺酰基、苯甲磺酰基、对甲苯甲磺酰基、三氟甲基磺酰基、苯甲酰甲基磺酰基、重氮基等。本发明所述的"羧基保护基"指常规用于取代羧酸酸性质子的保护基团。此基团的实例包括甲基、甲氧基甲基、甲硫甲基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、甲氧乙基甲基、苄氧甲基、苯甲酰甲基、对溴苯甲酰甲基、a-甲基苯甲酰甲基、对甲氧基苯甲酰甲基、二酰基甲基、N-邻苯二甲酰亚氨基甲基、乙基、2,2,2-三氯乙基、2-卤代乙基、G)-氯代垸基、2-(三甲基甲硅垸基)乙基、2-甲硫基乙基、2-(对硝基苯硫基)乙基、2-(对甲苯硫基)乙基、l-甲基-l-苯乙基、烯丙基、叔丁基、环戊基、环己基、二(邻硝基苯基)甲基、9-荷基甲基、2-(9,10-二氧代)芴基甲基、二苯基甲基、5-二苯硫基、苄基、2,4,6-三甲基苄基、对溴苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、对甲氧基苄基、胡椒基、4-吡啶甲基、三甲基甲硅垸基、三乙基甲硅垸基、叔丁基二甲基甲硅烷基、异丙基二甲基甲硅垸基、苯基二甲基甲硅垸基、S-叔丁基、S-苯基、S-2-吡啶基、N-轻基哌啶基、N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基邻苯二甲酰亚氨基、N-羟基苯并三唑基、0-酰基肟、2，4-二硝基苯硫基、2-烷基-l，3-噁唑啉、4-垸基-5-氧代-l,3-噁唑烷、5-烷基-4-氧代-1，3-二噁烷、三乙基锡烷、三正丁基锡烷；N,N'-二异丙基酰肼。本发明上述任一化合物药学上可接受的盐为有机酸盐、无机酸盐、有机碱盐或无机碱盐，其中有机酸包括乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、富马酸；无机酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸；有机碱包括葡甲胺、氨基葡萄糖；无机碱包括钠、钾、钡、钙、镁、锌、锂的碱性化合物。本发明要求保护的化合物易水解的酯，包括烷酰氧烷基酯，例如乙酰氧甲酯、丙酰氧甲酯、丁酰氧甲酯、异丙基甲酰氧甲酯、叔丁基甲酰氧甲酯、新戊基甲酰氧甲酯、异丁基甲酰氧甲酯、新戊乙酰氧甲酯、辛酰氧甲酯、癸酰氧甲酯等；垸氧羰氧基垸基酯，例如甲氧基甲酰氧甲酯、乙氧基甲酰氧甲酯、异丙氧基甲酰氧-l-乙酯、己氧基甲酰氧-l-乙酯、辛氧基甲酰氧-l-乙酯、癸氧基甲酰氧-l-乙酯、十二烷氧基甲酰氧-l-乙酯等；垸氧基甲酯，例如甲氧甲酯、l异丙氧甲酯等；烷酰氨基甲酯，例如甲酰氨基甲酯、乙酰氨基甲酯等；环烷酰氧烷基酯，例如环己垸基甲酰氧甲酯、环己烷基甲酰氧-l-乙酯、l-甲基-环己烷基甲酰氧-l-乙酯、4-甲基-环己烷基甲酰氧甲酯等；环垸氧基酰氧烷基酯，例如环戊烷氧基甲酰氧-l-乙酯、环己烷氧基甲酰氧-l-乙酯等；(5-甲基-2-氧代-l,3-间二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯，2-[(2-甲基丙氧基)羰基]-2-戊烯酯等。优选为丙酰氧甲基酯、丁酰氧甲基酯、叔丁基甲酰氧甲基酯、异丙氧甲酰氧甲基酯、异内氧甲酰氧-l-乙基酯、环己垸氧甲酰氧-l-乙基酯、(5-甲基-2-氧代-l,3-间二氧杂环戊烯一4-萄甲基酯等。本发明所述异构体是指其所有差向立体异构，非对映异构及互变异构形式。当一个键用一个楔表示时，这表明在三维上该键将从纸面出来，而当一个键是阴影时，这表明在三维上该键将返入纸面中。式(I)化合物具有许多立体中心，即在4-位上、5-位上、6-位上。本发明进一步要求保护包括上面所述的任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体与其它药用活性成分的药物组合物，如西司他丁及其钠盐、倍他米隆等。木发明进一步要求保护包括t面所述的任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物，为临床上或药学上可接受的任一剂型，优选为口服制剂或注射剂。其中含有生理有效量的通式(I)所示的化合物0.05g5g，可以为0.05g、O.lg、0.125g、0.2g、0.25g、0.3g、0.4g、0.5g、0.6g、0.75g、lg、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、4g、5g等。本发明任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体，可以口服或肠胃外给药等方式施用于需要这种治疗的患者。用于肠胃外给药时，可制成注射剂。注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，可用于肌内注射、静脉注射、静脉滴注等；其规格有lml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、lOOml、200ml、250ml、500ml等，其中供静脉滴注用的大体积(一般不小于100ml)注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，可用适宜的注射用溶剂配制后注射，也可用静脉输液配制后静脉滴注；无菌粉末用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，可选用水性溶剂或非水性溶剂。最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9%氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。配制注射剂时，可以不加入附加剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、填充剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸-醋酸钠、乳酸、枸橼酸-枸橼酸钠、碳酸氢钠-碳酸钠等；常用的增溶剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充剂包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂为苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射剂常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。用于口服时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂，依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂，包括滴丸、糖丸、小丸等。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂，可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。口服混悬剂系指难溶性固体药物，分散在液体介质中，制成供口服的混悬液体制剂，也包括干混悬剂或浓混悬液。糖浆剂系指含有药物的浓蔗糖水溶液。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。常用填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；常用粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、径丙甲纤维素、胶化淀粉等；常用崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；常用润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二垸基硫酸钠、微粉硅胶等。本发明还提供了上述化合物的制备方法，但不仅限于以下方法，反应方程式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反应步骤步骤l化合物l的制备于干燥反应瓶中，加入二氧六环，无水氯化锌，硼氢化钾，室温搅拌，加入原料1，搅拌下缓慢升温至回流反应，冷至室温，加入盐酸稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和盐水洗，千燥，浓縮得化合物l。步骤2化合物2的制备干燥反应瓶中，加入化合物1和硫代乙酸钾，然后加入DMF，搅拌加热至溶解后，保温反应，冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用水洗涤，干燥，浓縮，得化合物2。步骤3化合物3的制备于氮气保护下，加入化合物2，二氯甲垸，滴入TMSI，室温下剧烈搅拌反应，冰水浴冷却，搅拌，减压抽滤，滤饼用少量二氯甲烷洗涤，滤液收集在预冷的烧瓶中，向该溶液中滴加原料2的四氢呋喃溶液，滴加完毕后，反应，反应液脱色，抽滤，滤液减压浓縮至干，然后加入盐酸，搅拌反应，冷至室温，抽滤，干燥，得化合物3。步骤4化合物4的制备于干燥反应瓶中，加入原料3的乙腈溶液冷却，加入二异丙基乙胺和化合物3的乙腈溶液，搅拌，反应完毕后，加乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和盐水洗，有机层干燥、浓縮，得化合物4。步骤5化合物5的制备将化合物4溶于THF和水的混合液中，加入林德拉Pd-C，搅拌反应，滤除钯炭，滤液中加入乙酸乙酯，分层，收集水层，再向有机层中加入水溶液，静置，分出水层，水相合并，慢慢滴入乙醇，搅拌，过滤，滤饼用异丙醇重结晶，得化合物5。以上反应方程式中的R2、R3、R4、R5、116代表的基团如前文所述，化合物5上的羧基可以被羧基保护基保护，或者可以成体内易水解的酯。通常，已经发现培南类对温血动物来说是无毒的，而这个通则也适用于本发明化合物。将本发明的优选化合物以能预防细菌感染所需要的过量剂量对小鼠给药，未注意到由本发明化合物所引起的明显的中毒病兆或副作用。本发明还提供了新的培南类化合物在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途。本发明新的培南类化合物对革兰氏阳性和阴性、需氧和厌氧菌以及医院临床病原菌如铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌均有较好的抗菌活性，可用于治疗和/或预防由病原微生物引起的各种疾病，如呼吸道感染和泌尿道感染。本发明的含有巯基哌啶的培南化合物与现有技术相比，具有以下优点(1)本发明化合物具有优良的抗菌活性并且显示低毒性，能被安全的用于治疗和z或预防各种哺乳动物(包括人类)由敏感菌所引起的各种疾病；(2)本发明化合物抗菌谱广，对革兰氏阳性和阴性、需氧和厌氧菌以及医院临床病原菌均有较好的抗茼活性；(3)本发明化合物对p-内酰胺酶和DHP-I具有高度稳定性，可用于p-内酰胺酶产生菌，并且不需要与其它药物合用；(4)本发明化合物具有较好的抗生素后效应，抗菌作用持久，用药方便；(5)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高、收率高、质量稳定，易于进行大规模工业生产。以下通过体外抗菌实验进一步阐述本发明的培南化合物的有益效果，但不应将此理解为本发明的培南化合物仅具有下列有益效果。实验例本发明化合物的体外抗菌活性供试菌种以下为临床分离菌株，均在公众机构购买革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、粪肠球菌；革兰阴性菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、奇异变形杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、费氏柠檬酸杆菌。供试品本发明化合物14,自制，化学名称和结构式如前文所述亚胺培南市购；注射用美罗培南市购；化合物27:EP0411636中公开的编号27的化合物，结构式如前所述实验方法琼脂稀释法，参考《药理试验方法学》P1659-1660，人民卫生出版社，主编徐叔云等，版次1982年8月第1版2002年1月第3版第5次印刷。实验结果和结论表2本发明化合物对临床分离革兰阳性菌的抗菌活性抗菌活性MIC90(吗/ml)\金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌肺炎链球菌粪肠球菌亚胺培南0.0320.0160細1注射用美罗培南0.1250.125o馬8化合物270.250.250.0324化合物10.0160扁0.0040.5化合物20.0160細0細0.5化合物30.0160扁0駕0.25化合物40細0細0.0080.5由表2实验结果可见，与亚胺培南和注射用美罗培南相比，本发明化合物l4对临床分离的供试革.^阳性菌均有很好的抗菌活性。表3本发明化合物对临床分离革兰阴性菌的抗菌活性\^菌株抗菌活性MIGso(ng/ml)大肠肺炎克雷奇异变形阴沟铜绿费氏柠\埃希菌伯杆菌杆菌肠杆菌假单胞菌檬酸杆菌亚胺培南0.1250.2540.5160.5注射用美罗培南0.0160.0320.1250.063160.032化合物270.0250.0630.250.5160.125化合物10.0040.0160.0630馬20.008化合物20細0.0040.0320.03220馬化合物30.0080扁0.0630.01610細化合物40.0080.0080.0320馬20細由表3实验结果可见，与亚胺培南和注射用美罗培南相比，本发明化合物14对临床分离的供试革兰阴性菌均有很好的抗菌活性。上述实验结果表明，本发明化合物对革兰阳性菌、阴性菌均具有强效抗菌作用，同最接近的现有技术相比，抗菌活性相当或更好，且抗菌谱广，具有很好的临床应用潜力。具体实施例方式以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。实施例ll-叔丁氧羰基-5-甲磺酰氧基哌啶-2-甲醇的制备于干燥反应瓶中，加入二氧六环100ml，然后加入无水氯化锌6.8g(50mmo1)，硼氢化钾5.4g(100mmd)，室温搅拌lh后，加入1-叔丁氧羰基-5-甲磺酰氧基哌啶-2-甲酸甲酯8.4g(25mmo1)，搅拌下缓慢升温至回流反应2h，冷至室温，加入lmol/L的盐酸100ml稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和盐水洗，干燥，浓缩得l-叔丁氧羰基-5-甲磺酰氧基哌啶-2-甲醇6.6g，收率853%。实施例25-乙酰硫基-l-叔丁氧羰基哌啶-2-甲醇的制备干燥反应瓶中，加入l-叔丁氧羰基-5-甲磺酰氧基哌啶-2-甲醇15.5g(50mmo1)和硫代乙酸钾9.2g(100mmo1)，然后加入DMF150ml，搅拌加热至溶解后，保温反应10h，冷却至室温后，加水200ml稀释，乙酸乙酯萃取，有机相用水洗涤，干燥，浓縮，得产物13.4g,收率92.5%。实施例35-巯基-2-(N-二甲氨基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶的制备于氮气保护下，加入5-乙酰硫基-l-叔丁氧羰基哌啶-2-甲醇8.7gGOmmol)，二氯甲烷100ml，滴入TMSI6ml(45mmo1)，室温下剧烈搅拌反应4h，冰水浴冷却至0'C，搅拌30min，减压抽滤，滤饼用少量二氯甲烷洗涤，滤液收集在预冷的烧瓶中，于O'C氮气保护下，向该溶液中滴加2.2g(5Ommo1)二甲胺的20ml四氢呋喃溶液，滴加完毕后，于05'C反应4h，反应液脱色，抽滤，滤液减压浓縮至干，然后加入50ml的5moI/L盐酸，5(TC搅拌反应lh，冷至室温，抽滤，干燥，得产物7.0g，收率为85.3%。实施例45-巯基-2-呲咯垸-l-基l亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶的制备参照实施例3制备方法，投5-乙酰硫基-l-叔丁氧羰基哌啶-2-甲醇8.7gGOmmol)，吡咯烷3.6g(5Ommo1)，得产物7.9g，收率87.3%。实施例55-巯基-2-[(2H-吡咯-l(5fl)-基)l亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶的制备参照实施例3制备方法，投(2S，4R)斗乙酰硫基-l-叔丁氧羰基吡咯垸-2-甲醇8.7g(30mmo1)，2，5-二氢-1//-吡咯3.5g(50mmo1)，得产物7.7g,收率85.6%。实施例65-巯基-2-(氮杂环丁垸-l-基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶的制备参照实施例3制备方法，投(2S,4R)-4-乙酰硫基-l-叔丁氧羰基吡咯垸-2-甲醇8.7g(3Ommo1)，氮杂环丁烷2.9g(5Ommo1)，得产物7.5g，收率87.4°/。。实施例7(411，58,68)-3-2-(N-二甲氨基〗亚甲基-1-(叔丁氧羰基〗哌啶-5-基1硫基-6-[(1R)-1-羟乙基M-甲基-7-氧-l-氮杂双环3,2,01庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯的制备于干燥反应瓶中，加入(4R,5S,6S)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯11.9g(20mmo1)的乙腈150ml溶液冷至-l(TC以下，加入二异丙基乙胺5ml和5-巯基-2-(N-二甲氨基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶5.5g(20mmo1)的乙腈溶液100ml，0'C搅拌15h，反应完毕后，加乙酸乙酯200ml稀释，依次用水、饱和盐水洗，有机层干燥、浓縮，得固体6.7g，收率54.2%。实施例8"R,5S,6S)-342-『吡咯烷-l-基l亚甲基-l"叔丁氧羰基)哌啶-5-基l硫基-6-(110-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3,2,01庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯的制备参照实施例7制备方法，投(4R，5S,6S)-3-二苯氧磷酷氧基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯11.9g(20mmo1)，5-巯基-2-[吡咯烷-l-基]亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶6g(20mmo1),得产物6.9g，收率53.5%。实施例9(4R，5S,6S)-3-2-(2好-吡咯-l(5^)-基)l亚甲基-;U叔丁氧羰基)哌啶-5-基l硫基-6-[(110-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环3,2,01庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯的制备参照实施例7制备方法，投(4R,5S,6S)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3,2，0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯11.9g(20mmo1)，5-巯基-2-[(2//-吡咯-1(5均-基)]亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶6g(20mmo1)，得产物6.4g，收率49.6%。实施例10(4R,5S，6S)-3-[2-(氮杂环丁烷-l-基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶-5-基l硫基-6-(110-1-羟乙基1-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环|3,2,0凍-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯的制备参照实施例7制备方法，投(4R，5S,6S)-3-二苯氧磷酰氧基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3，2,0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯11.9g(20mmo1)，5-巯基-2-(氮杂环丁烷-l-基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶11.3g(20mmo1)，得产物6.5g，收率51.3%。实施例11(4R,5S,6S)-3-[2-(N-二甲氨基)亚甲基-哌啶-5-基l硫基-6-fflR)-l-羟乙基l-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环3,2,01庚-2-烯-2-羧酸的制备将(4R，5S，6S)-3-[2-(N-二甲氨基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯12.4g(20mmo1)溶于300mlTHF和水30ml的混合液中，加入10%林德拉Pd-C4g，室温2MPa氢压下搅拌反应2h，滤除钯炭，滤液中加入乙酸乙酯100ml，分层，收集水层，再向有机层中加入水溶液20ml，静置，分出水层，水相合并，O'C慢慢滴入乙醇100ml，-l(TC搅拌lh，过滤，滤饼用异丙醇重结晶，得目标化合物3.5g，收率45.2%。分子式C18H29N304S分子量383.51元素分析实测值C,56.15%;H，7.91%;N,10.74%;S，8.44%理论值C,56.37%;H,7.62%;N,10.96%;S,8.36%实施例12(4R，5S,6S)-3-〖2-f吡咯烷-l-基l亚甲基-哌啶-5-基l硫基-6-flR)-l-羟乙基l-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环3,2，0展-2-烯-2-羧酸的制备参照实施例11制备方法，投(411,53,68)-3-[2-[吡咯烷-1-基]亚甲基-1-(叔丁氧羰基)哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯12.9g(20mmo1)，得产物4.1g，收率49.8%。分子式C2QH31N304S分子量409.54元素分析实测值C,58.34°/。；H,7.81%;N，10.07%;S,7.69%理论值C,58.65%;H,7.63%;N,10.26%;S，7.83%实施例13(4仏58，68)-3-2-(2/7-吡咯-1(5//)-基)1亚甲基-哌啶-5-基1硫基-6-(1!0-1-羟乙基斗甲基-7-氧-l-氮杂双环3,2,0嵌-2-烯-2-羧酸的制备参照实施例11制备方法，投(4R,5S,6S)-3-[2-[(2/f-吡咯-l(5/7)-基)]亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基:i-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯12.9g(20mmol)，得产物3.8g，收率46.7%。分子式C2GH29N304S分子量407.53元素分析实测值C，58.72%;H,7.39%;N,10.07%;S，7.65%理论值C,58.94%;H,7.17%;N,10.31%;S,7.87%实施例14(4R,5S,6S)-3-t2-f氮杂环丁垸-l-基)亚甲基-哌啶-5-基l硫基-6-KlR)-l-羟乙基M-甲基-7-氧-l-氮杂双环3,2,0嵌-2-烯-2-羧酸的制备参照实施例11制备方法，投(4R，5S，6S)-3-[2-(氮杂环丁烷-l-基)亚甲基-l-(叔丁氧羰基)哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基H-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸对硝基苄酯12.6g(20mmol)，得产物4.0g，收率50.1%。分子式C19H29N304S分子量395.52元素分析实测值C，57.57%;H,7.68%;N，10.52%;S，8.30°/o理论值C,57.70%;H,7.39°/。;N,10.62%;S,8.11o/o实施例15本发明化合物无菌粉针的制备1、处方处方l化合物1250g精氨酸共制备1000支处方2化合物2500g右旋糖酐_500g_共制备1000支2、制备工艺将制备所用的抗生素玻璃瓶、胶塞等进行无菌处理；按处方称取原料(折算后投料)和辅料(如果有)，置于分装机中分装，随时检测装量；加塞，压盖，成品全检，包装入库。实施例16本发明化合物片剂的制备1、处方处方1化合物3125g预胶化淀粉80g微晶纤维素50g1%HPMC水溶液适量微粉硅胶4.0g硬脂酸镁4.0g处方2共制备1000片化合物4250g淀粉腦g低取代羟丙基纤维素50g微晶纤维素4.0g2。/。PVP(K30)水溶液适量微粉硅胶4,0g共制备画片2、制备工艺按处方配比称取化合物和辅料进行如下操作将化合物粉碎过100目筛，其余辅料分别过IOO目筛；将原料、预胶化淀粉(或淀粉)、微晶纤维素(或低取代羟丙基纤维素)混合均匀，加入混合制粒机，加入1°/。HPMC水溶液(或2n/oPVP(K30)水溶液)适量，搅拌15min，制粒；颗粒在低于6(TC的条件下烘干；干燥好的颗粒加入微粉硅胶(和硬脂酸镁)，整粒，混合均匀；取样，半成品化验；按照化验确定的片重压片；成品全检，包装入库。权利要求1、通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体其中，R1代表羧基，-COOR7或易水解的酯，所述的R7代表羧基保护基；R2代表氢原子，低级烷基或氨基保护基；R3、R4分别独立的代表氢原子，被卤素原子、羟基、羧基或氨基取代或未取代的低级烷基，或R3和R4与它们所连接的氮原子一起形成饱和或不饱和的3～8元环状基团，形成的环状基团可被取代基取代，所述的取代基选自羟基、羧基、氨基或低级烷基；R5代表氢原子，被卤素原子、羟基、羧基或氨基取代或未取代的低级烷基；R6代表氢原子或低级烷基。2、如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体其中，RM戈表羧基，-000117或易水解的酯，所述的W代表羧基保护基；W代表氢原子，低级烷基或氨基保护基；R3、W分别独立的代表氢原子，甲基，三氟甲基，羟甲基，羧甲基，氨甲基，乙基，或W和R"与它们所连接的氮原子一起形成饱和或不饱和的46元环状基闭，形成的环状基团可被取代基取代，所述的取代基选自羟基、羧基、氨基、甲基或乙基；RS代表氢原子，甲基，三氟甲基，羟甲基，羧甲基，氨甲基或乙基；W代表氢原子或甲基。3、如权利要求2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体其中，R"代表羧基，《00117或易水解的酯，所述的RM戈表羧基保护基；f代表氢原子，甲基或氨基保护基；R3、R4分别独立的代表氢原子，甲基，三氟甲基，乙基，或W和R"相互连接形成-ch2-ch2-ch2-，-012-<:112-012-(:112-或-012-01=01-012-，与它们所连接的氮原子一起形成环状基团；RS代表氢原子，甲基，三氟甲基或乙基；W代表甲基。4、如权利要求3所述的化合物，选自(4R,5S,6S)-3-[2-(N-二甲氨基)亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3，2，0廣-2-烯-2-羧酸，咯烷-l-基]亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3,2,0]庚-2-烯-2-羧酸，(411,58,68)-3-[2-[(2//-吡咯-1(5印-基)]亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(111)-1-羟乙基]-4-甲基-7-氧-l-氮杂双环[3,2，0]庚-2-烯-2-羧酸，或(4R,5S,6S)-3-[2-(氮杂环丁烷-l-基)亚甲基-哌啶-5-基]硫基-6-[(lR)-l-羟乙基]-4-甲基-7-氧-1-氮杂双环[3,2，0]庚-2-烯-2-羧酸，及其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体。5、如权利要求14任-一权利要求所述的化合物，其药学上可接受的盐为有机酸盐、无机酸盐、有机碱盐或无机碱盐。6、如权利要求14任一权利要求所述的化合物，其易水解的酯包括烷酰氧烷基酯，垸氧羰氧基烷基酯，烷氧基甲酯，烷酰氨基甲酯，环烷酰氧烷基酯，环垸氧基酰氧烷基酯，(5-甲基-2-氧代-l,3-间二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯，2-[(2-甲基丙氧基)羰基]-2-戊烯酯。7、包括权利要求14任一权利要求所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物。8、如权利要求7所述的药物组合物，为药学上可接受的任一剂型。9、如权利要求7所述的药物组合物，含有权利要求14任一权利要求所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体0.05g5g作为必需的活性成分。10、如权利耍求14任一权利要求所述的化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体，在用于制备治疗和/或预防感染性疾病的药物中的应用。全文摘要本发明属于医药
技术领域：
，具体涉及通式(I)所示的含有巯基哌啶的培南化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的酯、其异构体；其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶如说明书中所定义；本发明还涉及这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在制备治疗和/或预防感染性疾病的药物中的应用。文档编号A61P31/00GK101362762SQ200810210410公开日2009年2月11日申请日期2008年8月9日优先权日2007年8月12日发明者黄振华申请人:山东轩竹医药科技有限公司