专利名称：一种中药液体制剂的质量控制方法
技术领域：
本发明提供了一种质量控制方法，其为一种检测中药制剂中某种中药成分 的方法，尤其是指采用一种方法检测中药制剂中两种中药成分的质量控制方法。
背景技术：
现有的中药制剂，尤其是复方中药制剂，其质量控制方法鉴别复方制剂中 某二种以上的中药成分时，普遍采用的方法是采用薄层色谱分别检视不同的中 药成分，方法重复、繁琐、耗时费力。以同时含有黄柏和续断的中成药为例， 一般是分别鉴别黄柏和续断，增加了操作步骤，耗时长、浪费样品和试剂，且 还造成过多的有机溶剂浪费，增加污染。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，该方 法可以同时检测黄柏和续断，达到了 l个试验检测多个成分的目的。
本发明提供一种含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，该方法为鉴 别黄柏和续断的检测方法，包括
1. 供试品溶液的制备取样品30-75ml，该样品为含有黄柏和续断的中药液 体制剂，蒸干，残渣加水溶解(水的用量一般可为样品的0.4 3体积倍)，之后 加水饱和的正丁醇振摇，振摇1-5次即可，取正丁醇液，用0.1-5%wt的氢氧化 钠溶液洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤，洗涤次数为l-5次即可，取正丁醇液， 蒸干，残渣加甲醇使其溶解，溶液作为供试品溶液，简称A;
2. 制备对照品溶液，取续断药材，加醇溶液，超声处理，滤过，残渣加续 断药材质量的10-20倍的水使溶解，之后加水饱和的正丁醇振摇(振摇1-5次即可)，取正丁醇液，用0.1-5Q/。wt的氢氧化钠溶液洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤 (洗涤次数为1-5次)，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，溶液为续断 的对照药材溶液，简称B;
取川续断皂苷VI对照品，加醇溶液制成含川续断皂苷VI lmg/lml的溶液作
为川续断皂苷VI的对照品溶液，简称C;
取盐酸小檗碱对照品，加醇溶液制成含盐酸小檗碱大约lmg/lml的的溶液， 作为盐酸小檗碱的对照品溶液，简称D;
以上加醇溶液中的醇浓度以达到分析醇的浓度为宜；
3. 采用薄层色谱法进行检测，用不同的吸管(薄层色谱法专用的毛细吸管) 分别吸取上述A、 B、 C和D四种溶液，吸取量大约2-10lU，将其点在同一硅 胶G薄层板上同一水平高度的不同位置，分别记为A、 B、 C、 D位置，以体积 比为4: 0.1-10: 1-10的正丁醇一醋酸一水的上层溶液为展开剂，在紫外波长 300-400nm下进行紫外检测，观察硅胶G薄层板上显示的荧光斑点和斑点颜色；
步骤3在紫外波长300-400nm下进行紫外检测，硅胶G薄层板上在D位置 的上方显示一荧光斑点，其为盐酸小檗碱对照品的特征荧光斑点；硅胶G薄层 板上A位置的上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点水平高度相同或者近似 相同的位置，如果显示出与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点相同颜色的荧光斑点， 则证明样品中含有黄柏的有效成分。盐酸小檗碱是黄柏的主要的有效成分之一， 也是黄柏的标示性有效成分。
4. 在硅胶G薄层板上喷硫酸乙醇溶液，加热，观察硅胶G薄层板上所显 示的斑点和斑点颜色。
步骤4在硅胶G薄层板上喷以10%的硫酸乙醇溶液并且加热后，硅胶G薄 层板上在B、 C位置的上方显示有斑点，其为续断对照药材和川续断皂苷VI对照 品的特征斑点；硅胶G薄层板上A位置的上方且在与续断对照品和川续断皂苷 VI对照品的斑点高度相同的位置，如果显示与续断对照品和川续断皂苷VI对照 品的斑点相同颜色的斑点，贝U证明样品中含有续断。在本发明的检测方法中，尤其是制备供试品溶液的步骤1和/或制备对照品
溶液的步骤(2)中，所述的水饱和的正丁醇的用量(体积ml)为样品(ml)的 0.8-1.5倍；所述的0.1-5。/。wt的氢氧化钠溶液的用量(体积ml)为样品(ml)的 1-2倍，优选45-100ml氢氧化钠溶液/50ml样品，更优用0.1-5%wt的氢氧化钠 溶液洗涤两次，每次约为50ml氢氧化钠溶液/50ml样品；该氢氧化钠溶液的质 量浓度为0.1-5%wt，优选为0.5-3^wt，更优选为l^wt;所述的洗涤用的正丁 醇饱和的水的量(体积ml)为样品(ml)的0.8-1.5倍，优选45-100ml/50ml样 品，更优选约50ml/50ml样品；所述取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解， 该甲醇的量(体积ml)为样品(ml)白勺0.01-0.1倍，优选约2ml甲醇/50ml样品。 在本发明的检测方法中，步骤3所述的展开剂为体积比4: 0.5-5: 5-10的 正丁醇一醋酸一水的上层溶液。
在本发明的优选实施例中，供试品的制备优选取样品(即含有黄柏和续断 的中药液体制剂)在水浴上浓缩至大约2/5 4/5体积，再用乙醚(大约等量) 振摇提取，乙醚层、水层备用。其中的水层用来制备本发明检测方法中的供试 品溶液。
上述含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，在制备对照品溶液的步 骤(2)中，所述的加醇溶液超声处理续断的醇可以是甲醇或乙醇，优选为甲醇； 在加醇溶解川续断皂苷VI对照品和/或加醇溶解盐酸小檗碱对照品的步骤中，所 述的醇可以是甲醇或乙醇，优选为乙醇。
上述含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，在步骤3中，所述的展 开剂为体积比更优选为4: 0.5-5: 5-10的正丁醇一醋酸—水的上层溶液。
在本发明的检测方法中，上述供试品溶液的制备方法可先采用样品(即含 有黄柏和续断的中药液体制剂)大约50ml，用30-60ml的乙醚振摇提取，取水 层，蒸干，残渣加水溶解，该溶解残渣的水的用量约为10-30ml，优选约15ml; 再用水饱和的正丁醇振摇提取，该水饱和的正丁醇的用量约15-100ml，优选 20-60ml，更优选振摇提取3次，每次用水饱和的正丁醇的量大约20ml;合并正丁醇液，用0.1-5%Wt (质量浓度)的氢氧化钠溶液洗涤，该氢氧化钠溶液的量
约为30-150ml，优选45-100ml，更优选用0.1-5%wt的氢氧化钠溶液洗涤两次， 每次氢氧化钠溶液用量大约为50ml;该氢氧化钠溶液质量浓度优选为0.5-3 %wt， 更优选为l^wt;也就是说，最优选用1%氢氧化钠溶液洗涤两次，每次氢氧化 钠溶液的量约为50mh然后，用正丁醇饱和的水洗涤，洗涤用的正丁醇饱和的 水约为30-150ml，优选45-100ml，更优选约50ml;取正丁醇液，蒸干，残渣加 甲醇使溶解，甲醇的量约为l-10ml，优选2ml，将得到的溶液作为供试品溶液。
在本发明的检测方法中，对照品溶液的制备方法分为其一，取续断对照 药材1.0g，加甲醇溶液(分析醇)超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加水15ml 使溶解，同上述供试品溶液的制备方法制备对照药材续断的对照品溶液，简称B。
其二，另取川续断皂苷VI对照品，加乙醇溶液(分析醇)制成含川续断皂 苷VI约lmg/lml的溶液，作为川续断皂苷VI的对照品溶液，简称C。
其三，再取盐酸小檗碱对照品，加乙醇溶液(分析醇)制成含盐酸小檗碱 约lmg/lml的的溶液，作为黄柏有效成分的对照品溶液，简称D。
本发明的检测方法中，所述的薄层色谱法检测方法是按照薄层色谱法(中 国药典2005版一部附录VI B)试验，吸取上述四种液各5ul，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以正丁醇一醋酸一水(优选体积比例约为4: 1: 5)的上层溶 液为展开剂，展开剂正丁醇一醋酸一水的体积比例优选4: 0.5-2: 3-7，更优选 体积比4: 0.7-1.5: 4-6，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视，检测波长优选 350-380nm，在本发明的优选实施例中，紫外检测的波长约为365nm。
供试品中由于含有黄柏和续断的有效成分，在供试品色谱中，在与盐酸小 檗碱对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；再喷以10°/。的硫酸乙醇溶 液，在15(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与续断对照药材、川续断 皂苷VI对照品相应的位置上，显相同颜色的斑点。
若样品中同时含有黄柏和续断的有效成分，即，样品的原料同时含有中药 材黄柏和续断，则同时满足(1)硅胶G薄层板上在与盐酸小檗碱对照品相应的位置显相同颜色的荧光斑点；(2)在硅胶G薄层板上喷以硫酸乙醇溶液，加 热后斑点显色清晰，并且在与B、 C对照品溶液的斑点的相应的位置上，显相同
颜色的斑点。
含有黄柏和续断的中药液体制剂很多，例如复方杜仲强腰酒、国公酒、壮 骨药酒等。以下仅以含有黄柏和续断的药酒——复方杜仲强腰酒为例，具体描 述本发明的技术方案。
复方杜仲强腰酒是由杜仲、桑寄生、续断、牛膝、补骨脂、鹿角、鳖甲(醋 制)、当归、延胡索、木香、关黄柏等十一味药材煮酒而成的保健酒剂。为深棕
红色的澄清液体；气香，味微苦、甘。功能滋肾补肝，通经活血。用于肾阳虚 所致的腰痛，转侧不利，腰膝酸软，倦怠无力等症的辅助治疗。
其质量控制方法鉴别复方杜仲强腰酒中黄柏、续断时，已有的方法是采用 薄层色谱分别检视黄柏和续断，方法重复、繁琐、耗时费力。本发明重新研究 开发出新的鉴别方法，仍采用薄层色谱，样品采用水饱和的正丁醇提取，展开 剂采用正丁醇一醋酸一水(优选体积比例约为4: 1: 5)展开，可同时检视续断
和黄柏，检视效果良好。使两味药材在同一薄层板上实现同时鉴别，达到了 1
个试验检测多个成分，同时鉴别该药酒中2种药材的目的。既简化了操作，减
少了实验时间，而且结果更加清晰，同时还节省了耗材和试剂，提高了效率。
盐酸小檗碱对照品(中国生物制品检定所提供，批号110713-200208); 续断对照药材(中国生物制品检定所提供，批号121033-200507); 川续断皂苷VI对照品(中国生物制品检定所提供，批号1U685-200401); 黄桕、续断阴性对照无干扰，经三批样品实验观察，确认现行方法可行。 具体方法为
(1)制备供试品溶液，先采用样品(即含有黄桕和续断的中药液体制剂) 大约50ml，水浴浓缩至大约30ml，再用大约30-ml的乙醚振摇提取，取水层， 水浴蒸干，残渣加水约15ml溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml， 合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶液洗涤两次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水
950ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；
(2) 制备对照品溶液，取续断对照药材1.0g，加甲醇20ml，超声处理30 分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水15ml使溶解，按照上述步骤(1)所述的方 法制备续断的对照药材溶液；
取川续断皂苷VI对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为川续断皂 苷VI的对照品溶液；
取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为盐酸小檗碱 的对照品溶液；
(3) 采用薄层色谱法进行检测，按照中国药典2005版一部附录VI B的薄 层色谱法，吸取上述供试品溶液以及续断、川续断皂苷VI、盐酸小檗碱的对照 品溶液各5tU,点于同一硅胶G薄层板上同一水平高度的不同位置，以体积比 4: h 5的正丁醇一醋酸一水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外 灯于365nm下，观察硅胶G薄层板上所显示的荧光斑点和斑点颜色；
硅胶G薄层板上在点盐酸小檗碱对照品溶液的位置上方显示有盐酸小檗碱 对照品的荧光斑点，检视点样品的位置上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑 点高度相同的位置是否显示有与盐酸小檗碱对照品荧光斑点相同颜色的荧光斑 点；若有，则证明样品中含有黄柏的有效成分，或证明样品的原料中含有黄柏；
(4) 在步骤(3)的硅胶G薄层板上再喷10%的硫酸乙醇溶液，150。C加 热至斑点显色，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色；
硅胶G薄层板上在点续断的对照品溶液和川续断皂苷VI的对照品溶液的位 置上方显示有续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点；点样品的位置上方且 在与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点高度相同的位置检视是否显示有 与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点相同颜色的斑点；若有，则可以证 明样品中含有续断的有效成分，或者证明样品的原料中含有续断。
本发明的上述方法改变了现有技术检测一种样品中同时含有的两种不同的 成分需要两种检测方法和技术手段的鉴别标准，使两味药材在同一薄层板上实现同时鉴别，达到了仅仅一个试验即可检测多个成分，同时鉴别该样品(例如 药酒)中两种药材的目的，既简化了操作，又减少了实验时间，而且结果更加 清晰，同时还节省了耗材和试剂，提高了效率。
具体实施例方式
以下结合实施例详细说明本发明，但不限定本发明的实施范围。 制备对照品溶液
l取续断对照药材1.0g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干， 残渣加水15ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁 醇液，用1%氢氧化钠溶液洗涤两次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水50ml洗 涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为续断对照药材的供试品 溶液。
2取川续断皂苷VI对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为川续断 皂苷VI的对照品溶液。
3取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为盐酸小檗碱的 对照品溶液。
以下实施例的对照品溶液均来自上述三种方法制备得到的对照品溶液。 实施例 一 、复方杜仲强腰酒中黄柏和续断的检测方法 复方杜仲强腰酒是由杜仲、桑寄生、续断、牛膝、补骨脂、鹿角、鳖甲(醋 制)、当归、延胡索、木香、关黄柏等十一味药材煮酒而成的保健酒剂。 检测方法为-
l.制备供试品溶液，先采用样品(即复方杜仲强腰酒)大约50ml，水浴浓 縮至约30ml，用约30ml的乙醚振摇提取，取水层，水浴蒸干，残渣加水15ml 溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用1°/。氢氧 化钠溶液洗涤两次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇液， 蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；2. 制备对照品溶液如上；
3. 采用薄层色谱法进行检测
3.1按照中国药典2005版一部附录VI B的薄层色谱法，吸取上述供试品溶 液以及续断、川续断皂苷VI、盐酸小檗碱的对照品溶液各5ul，点于同--硅胶G
薄层板上同一水平高度的不同位置，以体积比4: 1: 5的正丁醇一醋酸一水的
上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯于365nm下，观察硅胶G薄 层板上所显示的荧光斑点和斑点颜色；
3.2硅胶G薄层板上在点盐酸小檗碱对照品溶液的位置上方显示有盐酸小 檗碱对照品的荧光斑点，点样品的位置上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑 点高度相同的位置检视显示有与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点相同颜色的荧光 斑点；证明样品中含有黄柏的有效成分；
4. 薄层色谱法进行检测
4.1在步骤3的硅胶G薄层板上再喷10%的硫酸乙醇溶液，15(TC加热至斑 点显色清晰，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色；
4.2硅胶G薄层板上在点续断的对照品溶液和川续断皂苷VI的对照品溶液的 位置上方显示有续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点；点样品的位置上方 且在与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点高度相同的位置检视显示有与
续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点相同颜色的斑点；证明样品中含有续
断的有效成分。
实施例二、国公酒中黄柏和续断的检测方法
l.制备供试品溶液，先采用样品(即国公酒)大约50ml，水浴浓縮至约30ml， 用约30ml的乙醚振摇提取，取水层，水浴蒸干，残渣加水12-18ml溶解，用水 饱和的正丁醇50-80ml振摇提取，正丁醇液用0.5-1.5%的氢氧化钠溶液50-100ml 洗涤，再用正丁醇饱和的水40-80ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇l-5ml 使溶解，作为供试品溶液；该样品是国公酒；
122. 制备对照品溶液如上；
3. 采用薄层色谱法进行检测
3.1按照中国药典2005版一部附录VI B的薄层色谱法，吸取上述供试品溶 液以及续断、川续断皂苷VI、盐酸小檗碱的对照品溶液各5"1，点于同一硅胶G
薄层板上同一水平高度的不同位置，以体积比3-5: 1: 4-6的正丁醇一醋酸一水
的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯于350-380nm下，观察硅 胶G薄层板上所显示的荧光斑点和斑点颜色；
3.2硅胶G薄层板上在点盐酸小檗碱对照品溶液的位置上方显示有盐酸小 檗碱对照品的荧光斑点，点样品的位置上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑 点高度相同的位置检视显示有与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点相同颜色的荧光 斑点；证明样品(国公酒)中含有黄柏的有效成分；
4. 薄层色谱法进行检测
4.1在步骤3的硅胶G薄层板上再喷5-15%的硫酸乙醇溶液，100°C-200°C 加热至斑点显色清晰，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色；
4.2硅胶G薄层板上在点续断的对照品溶液和川续断皂苷VI的对照品溶液的 位置上方显示有续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点;点样品的位置上方 且在与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点高度相同的位置显示有与续断
对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点相同颜色的斑点；证明样品(国公酒)中
含有续断的有效成分。
实施例三、对比例的检测方法
对比例是删除了黄柏和续断的复方杜仲强腰酒，其由杜仲、桑寄生、牛膝、 补骨脂、鹿角、鳖甲(醋制)、当归、延胡索、木香九味药材按照十一味中药组 成的复方杜仲强腰酒的上述组分含量煮制而成的对照用药酒。
检测方法为
l.制备供试品溶液，先采用样品(即对照用药酒)大约50ml，水浴浓缩至
13约30ml，用约30ml的乙醚振摇提取，取水层，水浴蒸干，残渣加水15ml溶解， 用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶 液洗涤两次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇液，蒸干， 残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；该样品为对照用药酒；
2. 制备对照品溶液如上；
3. 采用薄层色谱法进行检测
3.1按照中国药典2005版一部附录VI B的薄层色谱法，吸取上述供试品溶 液以及续断、川续断皂苷VI、盐酸小檗碱的对照品溶液各5iU，点于同一硅胶G
薄层板上同一水平高度的不同位置，以体积比4: 1: 5的正丁醇一醋酸一水的
上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯于365nm下，观察硅胶G薄 层板上所显示的荧光斑点和斑点颜色；
3.2硅胶G薄层板上在点盐酸小檗碱对照品溶液的位置上方显示有盐酸小 檗碱对照品的荧光斑点，点样品的位置上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑 点高度相同的位置检视没有显示与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点相同颜色的荧 光斑点；证明样品(对照用药酒)中不含有黄柏的有效成分；
4. 薄层色谱法进行检测
4.1在步骤3的硅胶G薄层板上再喷10%的硫酸乙醇溶液，15(TC加热至斑 点显色清晰，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色；
4.2硅胶G薄层板上在点续断的对照品溶液和川续断皂苷VI的对照品溶液的 位置上方显示有续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点；点样品的位置上方 且在与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点高度相同的位置检视没有显示 与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点相同颜色的斑点；证明样品(对照 用药酒)中不含有续断的有效成分。
上述测试结果与对比例的实际组成吻合，表明本发明的方法确切可行。
权利要求
1. 一种含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，该检测方法为中药液体制剂中黄柏和续断的鉴别方法，该方法包括(1)制备供试品溶液，取样品30-75ml，该样品为含有黄柏和续断的中药液体制剂，蒸干，残渣加水溶解，之后加水饱和的正丁醇振摇，取正丁醇液，用0.1-5％wt的氢氧化钠溶液洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，溶液为供试品溶液，简称A；(2)制备对照品溶液，取续断药材，加分析纯醇溶液超声处理，所述的醇为甲醇或乙醇；滤过，残渣加续断药材质量的10-20倍的水使溶解，之后加水饱和的正丁醇振摇，取正丁醇液，用0.1-5％wt的氢氧化钠溶液洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，溶液为续断的对照品溶液，简称B；取川续断皂苷VI对照品，加分析纯醇溶液制成含川续断皂苷VI1mg/1ml的溶液作为川续断皂苷VI的对照品溶液，简称C；所述的醇为甲醇或乙醇；取盐酸小檗碱对照品，加分析纯醇溶液制成含盐酸小檗碱大约1mg/1ml的的溶液，作为盐酸小檗碱的对照品溶液，简称D；所述的醇为甲醇或乙醇；(3)采用薄层色谱法进行检测，用四根吸管吸取上述A、B、C和D四种溶液，依次点在同一硅胶G薄层板上同一水平高度的不同的A、B、C、D位置，以体积比为40.1-101-10的正丁醇—醋酸—水的上层溶液为展开剂，在波长300-400nm下进行紫外检测，观察硅胶G薄层板上显示的荧光斑点和斑点颜色；(4)在步骤(3)的硅胶G薄层板上喷含有1-30％wt硫酸的硫酸乙醇溶液，加热，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色。
2.如权利要求1所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，其中， 在制备供试品溶液的步骤(1)和/或制备对照品溶液的步骤(2)中，所述的水 饱和的正丁醇的体积用量为样品体积的0.8-1.5倍。
3. 如权利要求1所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，其中， 在制备供试品溶液的步骤(1)和/或制备对照品溶液的步骤(2)中，所述的 的氢氧化钠溶液的体积用量为样品体积的1-2倍。
4. 如权利要求1所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，其中， 在制备供试品溶液的步骤(1)和/或制备对照品溶液的步骤(2)中，所述的洗 涤用的正丁醇饱和的水的体积用量为样品体积的0.8-1.5倍。
5. 如权利要求1所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，其中， 在步骤(3)中，所述的展开剂为体积比为4: 0.5-5: 5-10的正丁醇一醋酸一水 的上层溶液。
6. 如权利要求1所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，该检 测方法还包括步骤(3)在紫外波长300-400nm下进行紫外检测，硅胶G薄层 板上在D位置的上方显示一荧光斑点，其为盐酸小檗碱对照品的特征荧光斑点； 硅胶G薄层板上A位置的上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点高度相同的 位置，如果显示与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点相同颜色的荧光斑点，则该样 品中含有黄柏。
7. 如权利要求1或6所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法， 该检测方法还包括步骤(4)在硅胶G薄层板上喷以10°/。的硫酸乙醇溶液并且 加热后，硅胶G薄层板上在B、 C位置的上方显示有斑点，其为续断对照药材 和川续断皂苷VI对照品的特征斑点；硅胶G薄层板上A位置的上方且在与续断 对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点高度相同的位置，如果显示与续断对照品 和川续断皂苷VI对照品的斑点相同颜色的斑点，则该样品中含有续断。
8. 如权利要求1所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，其中， 制备供试品溶液的步骤(1)和/或制备对照品溶液的步骤(2)中，所述取正丁 醇液，蒸干，残渣加甲醇使其溶解，该甲醇的用量为样品的0.01-0.1重量倍。
9. 如权利要求l-8任一项所述的含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方 法，该检测方法包括(1) 制备供试品溶液，取样品45-55ml，蒸干，残渣加水15ml溶解，用 水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用1%氢氧化钠溶液 洗涤两次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水50ml洗涤，取正丁醇液，蒸干，残 渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；(2) 制备对照品溶液，取续断对照药材1.0g，加甲醇20ml，超声处理30 分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水15ml使溶解，按照上述步骤(1)所述的方 法制备续断的对照药材溶液；取川续断皂苷VI对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为川续断皂 苷W的对照品溶液；取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为盐酸小檗碱 的对照品溶液；(3) 采用薄层色谱法进行检测，按照中国药典2005版一部附录VI B的薄 层色谱法，吸取上述供试品溶液以及续断、川续断皂苷VI、盐酸小檗碱的对照 品溶液各5iU，点于同一硅胶G薄层板上同一水平高度的不同位置，以体积比 4: 1: 5的正丁醇一醋酸一水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外 灯于365nm下，观察硅胶G薄层板上所显示的荧光斑点和斑点颜色；硅胶G薄层板上在D点盐酸小檗碱对照品溶液的位置上方显示有盐酸小檗 碱对照品的荧光斑点，A点样品的位置上方且在与盐酸小檗碱对照品的荧光斑 点高度相同的位置检视是否显示有与盐酸小檗碱对照品的荧光斑点相同颜色的 荧光斑点；(4) 在步骤(3)的硅胶G薄层板上再喷含有10%的硫酸的硫酸乙醇溶液， 15(TC加热至斑点显色，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色；硅胶G薄层板上在B、 C点续断的对照品溶液和川续断皂苷VI的对照品溶 液的位置上方显示有续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点；A点样品的位 置上方且在与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点高度相同的位置检视是 否显示有与续断对照品和川续断皂苷VI对照品的斑点相同颜色的斑点。
全文摘要
本发明提供了一种含有黄柏和续断的中药液体制剂的检测方法，包括制备供试品溶液；制备三种对照溶液，包括续断的对照药材溶液、川续断皂苷VI及盐酸小檗碱的对照品溶液；采用薄层色谱法，以正丁醇-醋酸-水的上层溶液为展开剂，首先在紫外波长300-400nm下进行检测，观察硅胶G薄层板上所显示的荧光斑点和斑点颜色；再在该硅胶G薄层板上喷硫酸乙醇溶液，加热，观察该硅胶G薄层板上所显示的斑点和斑点颜色；以观测到的斑点情况鉴定中药液体制剂中是否含有黄柏和续断；本发明的方法使两种药材在同一薄层板上同时鉴别，既简化了操作，减少了实验时间，节省了耗材和试剂，又提高了效率。
文档编号A61K36/756GK101461860SQ20081024701
公开日2009年6月24日 申请日期2008年12月29日 优先权日2008年12月29日
发明者鹏 彭, 银 李, 菁 杜, 檀 王, 王铭文 申请人:北京同仁堂股份有限公司