专利名称：：一种银屑病治疗药及其制备方法和质量控制标准的制作方法
技术领域：
：本发明属于中药
技术领域：
。具体涉及一种用于银屑病治疗的中药片剂及其制备方法和质量控制标准。
背景技术：
：丹皮酚(C9H1()03)具有提高机体免疫力、抗菌消炎、抗变态反应的作用，其有益于银屑病治疗是现有技术人员所公知的。比如"丹皮酚霜治疗湿疹类皮肤病40例临床小结"(《中医杂志》1983年第10期，P19)报道，用5%的丹皮酚霜治疗湿疹类皮肤病。消银片是2005年版药典收载的药品，该产品自1993上市以来，以其疗效确切，价格低廉，深受广大患者的信赖和青眸，消银片是由牡丹皮等十三味药材组成。2005年版药典中，牡丹皮药材的丹皮酚的限度为1.2%。按丹皮酚的转移率100%计算，消银片中丹皮酚的含量应为0.552mg/片，而原工艺的消银片成品的丹皮酚含量仅为O.15mg/片，按药材算转移率仅为10%左右。因而，消银片的现有制备工艺仍然存在着一些不合理的问题，使丹皮酚没有完全提取出来或者损失掉，最终产品中的丹皮酚含量很低，会影响到该品种疗效的最大发挥。因而，期待着一种能够有最大转移率的丹皮酚的消银片的制备工艺的发明。
发明内容本发明提供了一种消银片的新的制备工艺，该工艺通过用水蒸汽蒸馏的方法对牡丹皮单独提取，制得的消银片的丹皮酚的含量较原有消银片的丹皮酚含量大大提高，也就是说转移率大大提高。本发明采用的技术方案是一种用于银屑病治疗的中药片剂的制备方法，地黄的重量份数为90、牡丹皮的重量份数为46、赤芍的重量份数为46、当归的重量份数为46、苦参的重量份数为46、金银花的重量份数为46、玄参的重量份数为46、牛蒡子的重量份数为46、蝉蜕的重量份数为23、白鲜皮的重量份数为46、防风的重量份数为23、大青叶的重量份数为46、红花的重量份数为23:以上十三味药材，金银花、红花粉碎成细粉，牡丹皮酌以碎段，力Q48倍量水浸泡12小时，水蒸气蒸馏l.54小时得蒸馏液，蒸馏液经低温放置24小时，滤取沉淀物得丹皮酚，过滤液备用。牡丹皮药渣与其余地黄等十味酌予碎段合并，加6080%乙醇适量浸渍12小时，滤过，得浸渍液；力的8倍量6080%乙醇，加热回流12小时，滤过，得乙醇提取液；将提取液与浸渍液合并，回收乙醇至无醇味，乙醇回收液与丹皮酚过滤液合并浓縮成稠膏，稠膏与金银花粉和红花粉混匀干燥，粉碎，得浸膏粉，取丹皮酚用无水乙醇溶解并均匀喷洒于浸膏粉与淀粉制得的干燥颗粒上，加适量硬脂酸镁，总混后压制成片，包薄膜衣，即得。为了实现本发明，优选的技术方案是一种用于银屑病治疗的中药片剂的制备方法，地黄的重量份数为90、牡丹皮的重量份数为46、赤芍的重量份数为46、当归的重量份数为46、苦参的重量份数为46、金银花的重量份数为46、玄参的重量份数为46、牛蒡子的重量份数为46、蝉蜕的重量份数为23、白鲜皮的重量份数为46、防风的重量份数为23、大青叶的重量份数为46、红花的重量份数为23:以上十三味药材，金银花、红花粉碎成细粉，牡丹皮酌以碎段，力ne倍量水浸泡2小时，水蒸气蒸馏3小时得蒸馏液，蒸馏液经低温放置24小时，滤取沉淀物得丹皮酚，过滤液备用。牡丹皮药渣与其余地黄等十味酌予碎段合并，力卩70%乙醇适量浸渍12小时，滤过，得浸渍液；力卩7倍量70%乙醇，加热回流12小时，滤过，得乙醇提取液；将提取液与浸渍液合并，回收乙醇至无醇味，乙醇回收液与丹皮酚过滤液合并浓縮成稠膏，稠膏与金银花粉和红花粉混匀干燥，粉碎，得浸膏粉，取丹皮酚用无水乙醇溶解并均匀喷洒于浸膏粉与淀粉制得的干燥颗粒上，加适量硬脂酸镁，总混后压制成片，包薄膜衣，即得。本发明提供了一种用于银屑病治疗的中药片剂，该片剂由下列药材制成为地黄的重量份数为90、牡丹皮的重量份数为46、赤芍的重量份数为46、当归的重量份数为46、苦参的重量份数为46、金银花的重量份数为46、玄参的重量份数为46、牛蒡子的重量份数为46、蝉蜕的重量份数为23、白鲜皮的重量份数为46、防风的重量份数为23、大青叶的重量份数为46、红花的重量份数为23。本发明还提供了一种的上述方法制备的用于银屑病治疗中药片剂的质量标准，全文引用《中国药典2005年版(一部)》P581中"消银片"的质量标准，增加了HPLC法测定丹皮酚含量，所述片剂中的丹皮酚的重量百分含量为不低于0.30mg/片。通常为0.3mg0.55mg/片。上述HPLC法优选的是《中国药典2005年版(一部)》P119中"牡丹皮"的质量标准。本发明中所说的"转移率"是指成品中活性成分的含量(mg)与药材中的活性成分的含量(mg)百分比值。牡丹皮提取工艺研究过程如下1、牡丹皮中丹皮酚提取条件的优选为确定牡丹皮的最佳提取工艺，采用设计正交试验进行最佳提取条件的考察。参照水蒸气蒸馏的提取方法，选择加水量、回流时间、浸泡时间为考察因素(由于通过水蒸气蒸馏提取的物质为挥发油和小分子物质，蒸馏温度均小于等于10(TC，所以温度不作为考察因素)，每个因素选择3个水平进行考察，选用U(34)正交表进行试验。并以收得丹皮酚重量为评价指标，筛选最佳工艺条件。因素水平表见表l:表l正交试验因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>根据U(3,正交表进行试验。试验方法为分别称取处方量的牡丹皮，按表2试验方案进行试验，蒸馏液经冷却使丹皮酚析出，过滤得丹皮酚湿品，干燥后得丹皮酚干品，称定重量。进行综合评分，考察最佳提取方案，直观分析结果见表2:表2:正交试验方案及直观分析结果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>为A2B3C3D2，但由于B3与B2差别不大，从大生产节约能源角度考虑，采用B2的提取条件，所以丹皮酚提取的最佳工艺条件为A2B2C3D2。对丹皮酚提取正交试验结果进行方差分析，方差分析结果见表3。表3:正交试验方案方差分析结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>因此，从方差分析结果可知，因素B影响最显著，其次是A因素，依直观分析结果，采取最佳提取条件A2B2C3。综上所述，选择最优水平A2B2C3对牡丹皮进行水蒸气蒸馏，即药材酌以碎段，力Q6倍量水浸泡2小时，水蒸气蒸馏3小时得蒸馏液，将蒸馏液冷却，析出丹皮酚，过滤，干燥，得丹皮酚干品。上清液与醇提液合并浓縮，本发明技术方案有以下有益效果1.本发明产品有抑制基底层细胞过度增殖分裂、增加颗粒层细胞数量，促进角化完全的作用。有抗炎、止痒作用。2.本发明产品能拮抗血浆中过度高的ET-1水平，有助于抑制细胞增殖和新血管形成。3.本发明产品能降低血清IL-2和E-selection水平，有助于抑制过高的细胞免疫，改善免疫功能状态。4.经实验证明本发明产品能减轻二甲苯导致的小鼠耳廓肿胀和大鼠棉球肉芽肿，作用于家兔硫化钠接触性皮炎动物模型后，动物皮肤炎消退迅速，皮肤损伤修复快，脱痂早，愈合好，有抑制炎症反应的作用，提示减轻炎症反应，减少炎症细胞浸润也是本产品治疗和减轻银屑病症状的作用机理之一。5.经过实验证明本产品能够抑制小鼠阴道粘膜基底层细胞有丝分裂，使基底层细胞分裂系数显著降低，还能对抗心得安致豚鼠耳廓过度不全角化，减轻真皮血管扩张和炎症细胞浸润；此外，还能增加小鼠尾部表皮颗粒层的细胞数量，阳性药甲胺蝶呤能使颗粒层细胞明显增加，抑制基底层细胞过度增殖分裂，增加颗粒层细胞数量，促进角化完全是治疗银屑病的机理之一。6.本发明产品通过减少活化的T淋巴细胞数量，降低血清IL-2水平和E-Selection水平，抑制过高的细胞免疫，改善免疫功能状态，降低炎症介质水平而起到一定的抗银屑病作用。7.本发明产品对皮肤增殖分化异常的治疗作用下述详细实验结果1.l对小鼠阴道上皮基底细胞有丝分裂指数的影响表4本发明产品对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂指数的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注与模型组相比林P〈0.01;*P<0.05。结果显示本发明产品高、中、低剂量组基底细胞有丝分裂指数明显降低，与模型组比，低剂量组由显著性差异，高、中剂量组有非常显著性差异。1.1.1本发明产品对小鼠ET-1的影响表5本发明产品对小鼠血浆内皮素-1的影响单位为pg/ml<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注与对照组相比林P<0.01。结果显示本发明产品高、中剂量组ET-1水平明显降低，与模型组相比，高、中剂量组有非常显著性差异。1.2对心得安致豚鼠耳部银屑病样病理改变的影响表6、本发明产品对心得安致豚鼠耳部银屑病样病理改变的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注与模型相比*补<0.01;*P<0.05，与基质组相比AAp〈0.01。结果显示本发明产品高、中、低剂量组能显著抑制心得安所致的表皮异常角化与增殖，与模型组相比，有非常显著性差异。1.3对小鼠尾部表皮颗粒层的影响表7、本发明产品对鼠尾表皮颗粒层的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注与对照组相比林P〈0.01,结果显示本发明产品高、中、低剂量组每100个鳞片中有颗粒层的细胞数明显增加，与模型组相比，有非常显著性差异。1.3.l本发明产品对小鼠IL-2的影响表8、本发明产品对小鼠血清白介素IL-2的影响单位口8/1111<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注与对照组相比林P〈0.01。结果显示本发明产品中、低剂量组IL-2水平明显降低，与模型组相比，中、低剂量组有非常显著性差异。1.3.2本发明产品对小鼠血清可溶性E-选择的影响。表9、本发明产品对小鼠血清可溶性E-选择素的影响单位为pg/ml<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注与对照组相比林P〈0.01。结果显示本发明产品高、中、低剂量组E-Selectin水平明显降低，与模型组相比，高、中、低剂量组均有非常显性差异。2.本发明产品的抗炎作用2.l对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响。表10、本发明产品对二甲苯所致鼠耳肿胀度的影响。组另'J动物数(只)肿胀度(mg)抑制率(％)正常对照组107.6±4.0阿四匹林组0.2g/kg103.3±2.3林56.6原工艺消银片组2.58mg/kg104.1±3.2林46.1高剂量组4.92g/kg102.8±2.0林63.2中剂量组2.46g/kg104.2±2.l林44.7低剂量组1.23g/kg105.8±3.3**23.7注与对照组相比林P〈0.01;*P<0.05。结果显示本发明产品高、中剂量组能明显抑制二甲基苯所致小鼠耳肿胀，与盐水对照组相比，高剂量组有非常显著性差异，中剂量组有显著性差异。2.2对大鼠棉球肉芽肿的影响。表ll、本发明产品对大鼠棉球肉芽肿的影响组另'J动物数(只)肉芽肿(mg)抑制率(％)正常对照组8377.3±182.6阿四匹林组0.2g/kg8232.0±71.9*38.5原工艺消银片组l.72mg/kg8239.2±94.8林36.6高剂量组3.28g/kg8225.6±109.9*40.2中剂量组1.64g/kg8264.7±92.629.8低剂量组O.82g/kg8355.3±127.0**5.8注与盐水对照组相比林P〈0.01;*P<0.05。结果显示本发明产品高剂量组可明显抑制棉球肉芽组织生成。2.3对硫化钠所致家兔刺激性接触性皮炎的影响表9、对家兔皮肤反应强度进行的大体评分组别动物数(只)沃3天5天7天9天12天模型组68±06.8±0.45.7±0.54.0±0.04.0±0.03.7±0.5原工艺消银片组2.58g/kg67.8±0.46.3±1.05.5±0.83.7±0.52.8±0.沐1.0±0.6林高剂量组4.92g/l6;7.8±0.46.3±0.85.0±0.62.8±0.沐2.0±1.1*-0.7±1.2林中剂量2.46g/kg67.8±0.46.5±0.54.8±1.02.7±0.沐1.8±1.2*-0.8±1.6林低剂量1.23g/kg68±06.5±0.55.0±0.93.3±0.沐2.5±1.0*-2.3±1.9林注与对照组相比林P〈0.01;*P<0.05。结果显示各动物皮肤反应强度大体评分在l、3、5d各组间无显著性差异，自7d起本发明产品治疗与模型组间比较开始出现显著性差异，7、9、12d时各给药组间皮肤炎症的评分与盐水对照组比较差异明显。3.本发明产品的止痒作用3.l对右旋糖酐所致小鼠全身瘙痒的抑制作用表IO、本发明产品对右旋糖酐所致小鼠瘙痒时间及瘙痒次数的影响组另'J动物数(只)瘙痒时间(秒)瘙痒次数正常对照组10121.7±59.219.6±7.3扑尔敏2mg/kg1074.5±32.6*12.0±4.8*原工艺消银片组2.58mg/kg1074.1±45.612.6±6.9*高剂量组4.92g/kg1067.8±34.8*13.3±6.6中剂量组2.46g/kg1065.7±27.8*12.3±9.4低剂量组1.23g/kg1086.5±37.913.1±6.4*注与对照组相比*<0.05。结果显示本发明产品高、中剂量组的瘙痒时间与正常对照组比较，均有显著性差异;本发明产品低剂量的瘙痒次数与正常对照组比较有显著性差异。3.2对磷酸组织胺诱发豚鼠皮肤痒的影响表l1、本发明产品对磷酸组织胺致痒阈的影响12组另'J动物数(只)致痒阈磷酸组织胺总量(yg)正常对照组8165±197扑尔敏组2mg/kg8985±1039*原工艺消银片组l.72mg/kg8280±411高剂量组3.28g/kg81535±1141**中剂量组1.64g/kg8190±112低剂量组O.82g/kg8155±74注与对照组相比林P〈0.01;*P<0.05。结果显示本发明产品高剂量组致痒阈明显高于模型，与模型组相比，有非常显著性差巳升。通过本发明实验根据文献报道动物造模，其中，雌激素周期的小鼠阴道上皮增生活跃，有丝分裂增多，细胞转化加快，模拟了细胞表皮增生过快的特点；鼠尾表皮的角化缺少颗粒层的形形成的过程，模拟了银屑病表皮角化不全的特点；而将心得安涂在豚鼠耳朵上造成了表皮角化过度、角化不全和棘层肥厚等类似银屑病的组织改变。现有研究表明，银屑病是多基因遗传背景下T细胞失常的免疫性疾病，IL-2是一种重要的Thl型细胞因子，其受体IL-2是由a、e和y链组成的异三聚体。作为T细胞活化所必需的第3种信号，IL-2与IL-2受体(IL-2R)的结合对于T细胞活化与增殖起着至关重要的作用；另外IL-2还可诱导c-myc及IL-2R表达，诱导细胞分泌IFN-y、TFN、CSF等细胞因子，引起细胞因子网络的失衡。银屑病人皮损处的IL-2异常增高是银屑病发病组织损伤的病理基础，是导致疾病发生的重要环节。此外，参与T细胞局部聚集及向表皮移行的另一重要因素是由局部微环境所调控的粘附分子的表达。有资料表明银屑病皮损中E-选择素的表达显著上调，本研究采用ELISA方法测定各组模型小鼠血清的IL-2水平和E-Selection水平，结果表明新工艺消银片中、低两个剂量组均可显著降低小鼠血清IL-2的水平，而本发明产品三个剂量组均可显著降低小鼠E-Selection水平。在银屑病的发病机理中，ET-1对调节血管的张力及促使新血管形成也起到了重要作用，银屑病患者存在着明显的微血管及内皮细胞异常，血管扩张、纤曲及高内皮小静脉形成是其主要形态学改变，作为血管收縮因素，ET-1对于调节血管扩张力及局部血流具有重要意义。银屑病患者的ET-1水平增高，则皮肤微血管收縮，血流减少，本发明产品具有良好的活血功效，因而从不同程度上拮抗了血浆中过高的ET-1水平，有助于抑制细胞增殖和新血管生成。新血管形成在银屑病发病中是一个复杂的过程，新血管形成受着许多因素的影响，其中转化生长因子、肿瘤坏死因子-a是刺激新血管形成的重要因素。研究表明ET-1与转化生长因子有协同促进血管平滑肌细胞DNA合成作用。因此，ET-1在银屑病病理性新血管形成过程中亦起了重要作用。在正常情况下，痒觉和痛觉一样，是由于多种因素刺激，引起表皮与真皮交界处的游离神经末梢网络受到刺激，经无髓神经纤维末端产生冲动，由脊髓丘脑侧束传达到丘脑和大脑感觉皮层的结果。已知瘙痒的外周和中枢介质包括组胺、神经肤、前列腺素、5-羟色胺、鸦片肤等，实验表明本产品能够显著提高实验动物的致痒阈，对右旋糖酐所致小鼠全身瘙痒又明显的抑制作用。具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步描述实施例l:新的工艺的消银片的制备包括如下步骤1.浸膏粉的制备地黄9.lg牡丹皮4.6g赤芍4.6g当归4.6g苦参4.6g金银花4.6g玄参4.6g牛蒡子4.6g蝉蜕2.3g白鲜皮4.6g防风2.3g大青叶4.6g红花2.3g以上十三味药材，金银花、红花粉碎成细粉，牡丹皮酌以碎段，力ne倍量水浸泡2小时，水蒸气蒸馏3小时得蒸馏液，蒸馏液经低温放置24小时，滤取沉淀物得丹皮酚，过滤液备用。牡丹皮药渣与其余地黄等十味酌予碎段合并，力卩70%乙醇适量浸渍12小时，滤过，得浸渍液；力卩7倍量70%乙醇，加热回流12小时，滤过，得乙醇提取液；将提取液与浸渍液合并，回收乙醇至无醇味，乙醇回收液与丹皮酚过滤液合并浓縮成稠膏，稠膏与金银花粉和红花粉混匀干燥，粉碎，得浸膏粉。2.制片醇提干粉16.3g、淀粉9g，将以上细粉混匀，用70%乙醇做粘合剂，制粒，干燥，将丹皮酚O.42g用无水乙醇溶解喷入颗粒中，压片之前颗粒与硬脂酸镁O.4g混匀。3.包衣消银片采用LE包衣剂(胃溶型)，根据LE包衣剂的常用制备方法，采用醇水溶型。包衣液的配制LE包衣粉3.0kg14雾化压力5.0kg/cm^进风量3000m3/h喷液量150-200g/分乙醇25.4kg水9.1kg包衣剂重量37.5kg包衣操作条件片床温度38-4CTC进风温度49-52°C转速6-14转/分包衣操作将消银片片芯l.Okg置于包衣机中，点动预热至4(TC左右，将筒内压力调至0.OlMpa，并调整喷枪的位置，启动包衣机，开始喷浆，调节扇面、雾化及喷量。不断提高锅的转速，使片床温度始终保持在38-4(TC，并保持单位时间喷出包衣液的溶剂量等于蒸发量，待喷浆结束后，将药片点动冷却至室温，出锅，压膜，装盒。质量检测药材中丹皮酚含量2.0%成品中丹皮酚含量0.45mg/片丹皮酚的转移率为转移率=成品中丹皮酚含量/药材中丹皮酚含量*100%艮卩0.45/(4.6*1000/100*2.0%)*100%=48.91%实施例2中试样品制备按本发明的方法所确定的工艺条件制备三批中试样品，结果如表12:表12:中试制备结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>权利要求1.一种用于银屑病治疗的中药片剂的制备方法，其特征在于该片剂的制备方法为地黄的重量份数为90、牡丹皮的重量份数为46、赤芍的重量份数为46、当归的重量份数为46、苦参的重量份数为46、金银花的重量份数为46、玄参的重量份数为46、牛蒡子的重量份数为46、蝉蜕的重量份数为23、白鲜皮的重量份数为46、防风的重量份数为23、大青叶的重量份数为46、红花的重量份数为23以上十三味药材，金银花、红花粉碎成细粉，牡丹皮酌以碎段，加4～8倍量水浸泡1～2小时，水蒸气蒸馏1.5～4小时得蒸馏液，蒸馏液经低温放置24小时，滤取沉淀物得丹皮酚，过滤液备用。牡丹皮药渣与其余地黄等十味酌予碎段合并，加60～80％乙醇适量浸渍12小时，滤过，得浸渍液；加6～8倍量60～80％乙醇，加热回流12小时，滤过，得乙醇提取液；将提取液与浸渍液合并，回收乙醇至无醇味，乙醇回收液与丹皮酚过滤液合并浓缩成稠膏，稠膏与金银花粉和红花粉混匀干燥，粉碎，得浸膏粉，取丹皮酚用无水乙醇溶解并均匀喷洒于浸膏粉与淀粉制得的干燥颗粒上，加适量硬脂酸镁，总混后压制成片，包薄膜衣，即得。2一种用于银屑病治疗的中药片剂的制备方法，其特征在于该片剂的制备方法为地黄的重量份数为90、牡丹皮的重量份数为46、赤芍的重量份数为46、当归的重量份数为46、苦参的重量份数为46、金银花的重量份数为46、玄参的重量份数为46、牛蒡子的重量份数为46、蝉蜕的重量份数为23、白鲜皮的重量份数为46、防风的重量份数为23、大青叶的重量份数为46、红花的重量份数为23:以上十三味药材，金银花、红花粉碎成细粉，牡丹皮酌以碎段，力Q6倍量水浸泡2小时，水蒸气蒸馏3小时得蒸馏液，蒸馏液经低温放置24小时，滤取沉淀物得丹皮酚，过滤液备用。牡丹皮药渣与其余地黄等十味酌予碎段合并，力卩70%乙醇适量浸渍12小时，滤过，得浸渍液；力卩7倍量70%乙醇，加热回流12小时，滤过，得乙醇提取液；将提取液与浸渍液合并，回收乙醇至无醇味，乙醇回收液与丹皮酚过滤液合并浓縮成稠膏，稠膏与金银花粉和红花粉混匀干燥，粉碎，得浸膏粉，取丹皮酚用无水乙醇溶解并均匀喷洒于浸膏粉与淀粉制得的干燥颗粒上，加适量硬脂酸镁，总混后压制成片，包薄膜衣，即得。3一种用于银屑病治疗的中药片剂，其特征在于该片剂由下述药材制成地黄的重量份数为90、牡丹皮的重量份数为46、赤芍的重量份数为46、当归的重量份数为46、苦参的重量份数为46、金银花的重量份数为46、玄参的重量份数为46、牛蒡子的重量份数为46、蝉蜕的重量份数为23、白鲜皮的重量份数为46、防风的重量份数为23、大青叶的重量份数为46、红花的重量份数为23。4如上述任一权利要求的用于银屑病治疗中药片剂的质量标准，其特征在于，采用HPLC法测定丹皮酚，所述片剂中的丹皮酚的重量百分含量为不低于0.3mg/片全文摘要本发明涉及一种用于银屑病治疗的中药片剂及其制备方法和质量控制标准。对消银片的原有工艺进行了改进，主要是增加了水蒸气蒸馏的步骤，使消银片中的丹皮酚的含量显著增加。文档编号A61K36/808GK101628055SQ200810302799公开日2010年1月20日申请日期2008年7月18日优先权日2008年7月18日发明者吴光彦申请人:黑龙江福和华星制药集团股份有限公司