一种长春瑞滨长循环脂质体制剂及其制备方法

专利名称：一种长春瑞滨长循环脂质体制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种在体内具有长循环作用并能逃避网状内 皮系统捕获的水溶性抗肿瘤药物长春瑞滨的脂质体制剂及其制备方法。
背景技术：
长春瑞滨也叫去甲长春花碱，是一种半合成酒石酸盐，属于长春花属生物碱。1924 年由法国学者Poter发现并合成，1994年12月由美国FDA批准用于非小细胞肺癌(NSCLC) 一线治疗。长春瑞滨属于抑制微管聚合药物，它通过粘合微管，抑制微管聚合，诱导微管解 聚，使肿瘤细胞在有丝分裂过程中微管合成障碍，而停止于有丝分裂中期，从而发挥抗癌作 用。同时对神经轴索微管抑制较轻，与其他长春碱类抗癌药物相比具有更大治疗指数。作为细胞周期特异性药物，长春瑞滨毒性较强，具有较多副作用如骨髓损耗、恶 心、脱发、腹泻、便秘、手脚麻痹、头疼等。有研究者将其制备成静脉脂质微球注射液，减少药 物在注射部位的局部吸收，降低了药物在注射部位可能产生的毒性及刺激性，由于药物存 在于油水界面膜中，因此提高了药物的稳定性。另外，长春瑞滨半衰期较短、毒副作用大，为 了增强药物的靶向性，延长体内滞留时间，增强疗效，降低毒性，国内外许多研究者正在试 图将长春碱类药物包入脂质体中。如加拿大的INEX公司研究开发了硫酸长春新碱脂质体， 其动物体内实验和临床前的研究表明，将长春新碱制成脂质体，可以改善药物体内行为，降 低毒性，提高疗效。因此，脂质体包裹长春瑞滨，能增加与癌细胞的亲和力，提高药物在肿瘤 中的浓度，从而提高疗效，减少不良反应的发生。脂质体是靶向给药系统的一种新剂型，一直是药剂学研究的热点之一，它可以将 药物选择性地输送到肿瘤部位，发挥治疗作用，同时又不影响正常细胞、组织或器官的功 能，从而达到提高疗效、减少毒副作用的目的。脂质体具有类似于细胞膜的结构，构成双分 子层的类脂亲水性的头部形成膜的内表面，而亲脂性的尾部则处于膜的中间。正由于脂质 体的这种类膜结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两亲的物质，它们被包入脂质体内 部水相、插入类脂双分子层或吸附连接在脂质体的表面。脂质体作为药物载体，既起到了对药物的保护作用，又提高了药物对机体特定部 位的靶向性，因此在提高药效方面具有很多优越的特性。主要表现在以下几个方面①脂 质体对机体无毒或毒副作用小，其脂质体双分子层与生物膜有较大的相似性以及组织相溶 性，从而易于被组织吸收，提高了药物的吸收利用率；②脂质体包裹药物为物理过程，不改 变药物分子结构，不会破坏药物成分，而包裹的药物则可以避免被体内水解酶所破坏；③包 裹后的药物可以降低其对机体特定部位的毒性，减小药物使用量，使药物具有缓释和控释 作用；④与病毒载体不同，脂质体在宿主体内可以生物降解，无免疫原性；⑤在基因治疗上 易于与基因复合，有较高的靶向性，实现特定细胞的治疗；⑥材料廉价，便于大量制备。普通脂质体进入体内后很快被网状内皮系统吞噬，而主要靶向在肝、脾、骨髓等 网状内皮系统较为丰富的器官中，对其他部位的靶向性较差。而且其在体内易受蛋白、酶 等的作用而发生渗漏，影响疗效并使毒性增大。上世纪80年代，加拿大科学家Allen等
4发现，与单唾液酸神经节苷脂类似，在脂质体中加入的聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇 胺(PEG-DSPE)能延长脂质体在血液中的存留时间，于是将这种脂质体称为隐形脂质体。 Klibanov等研制的表面含有棕榈酰葡萄糖苷酸或PEG类脂衍生物的脂质体能在血循环中 存在更长时间，并增加靶部位的吸收，故称其为空间稳定脂质体或长循环脂质体(LCL)。因 此，LCL是在脂质体的组成成分中加入一定比例的糖脂或在其磷酸分子上连接保护性聚合 物，如两亲性的PEG化的二硬脂酸磷脂酰胺的衍生物——PEG-DSPE、聚丙烯酰胺、聚乙烯吡 咯烷酮(PVP)等，使一些亲水性的多糖或多羟基基团暴露于脂质体表面，从而减少脂质体 与血浆中调理素的结合，增加其血液稳定性，延长半衰期和药物在血液中的时间。目前，常用的脂质体制备方法包括以下几种方法(1)薄膜分散法将磷脂、胆固醇等类脂及脂溶性药物溶于有机溶剂中，然后将有 机溶剂蒸发，使其在容器内壁上形成干燥的薄膜，将水溶性药物溶于缓冲液中，加入容器中 不断搅拌，即得脂质体。该方法应用得较多，所制脂质体形态圆整，分布较均勻，平均粒径为 550nm，粒径范围为150-1000nm，平均包封率也较高。若想得到粒径更小的脂质体，则需要配 合适当的后处理手段，如超声、高压均质以及挤压等。(2)注入法将磷脂等类脂质及脂溶性药物溶于有机溶剂中，然后将此药液经注 射器缓缓注入一定温度的缓冲液(或含有水溶性药物)中，边加边搅拌，不断搅拌至溶剂除 尽，即得。此法制备工艺简单，易于操作。(3)跨膜梯度主动载药法跨膜梯度主动载药法包括pH梯度法和硫酸铵梯度法。 PH梯度法是通过调节脂质体内外水相的pH，使之形成一定的pH梯度差，利用药物在不同pH 溶液中解离状态的差异，以分子型透过外水相在内水相中形成离子型药物而被包封。硫酸 铵梯度法是先将硫酸铵包于脂质体内水相，然后通过透析、凝胶色谱或超滤的方法除去外 水相的硫酸铵。它是通过游离氨扩散到脂质体外，形成PH梯度，使药物集聚到脂质体内的。(4)超声波分散法在薄膜分散法的基础上，再经超声波处理，可得到单室脂质体 (SUV)。超声技术有两种一种是将超声仪的探头浸入脂质体分散体中，此方法是小规模制 备SUV应用最广泛的方法；另外一种是将样品放在试管或烧杯内，再置于水浴式超声仪中。 由于超声探头处能量的释放会导致局部过热，因此必须有降温或散热措施。(5)冷冻干燥法(冻干再水化法)冷冻干燥法即将类脂高度分散于在水溶液中， 冷冻干燥，然后再分散到含药的水性递质中，形成脂质体。在一定范围内，脂质体的包封率 和粒度随冻融次数的增加而略有增大；冻融后搅拌或超声均可使聚集的脂质体解聚，从不 影响包封率的角度考虑，搅拌比超声处理更好。冻干再水化囊泡亦称为冻干再水化脂质体 (FRV)是由预制囊泡制备而成。此法包封率很高，甚至对于大分子也可实现较高的包封率。 干燥工艺使脂质双分子层和待包药物紧密接触，重新溶胀时对附着于脂质上的分子包封机 会较大。(6)逆向蒸发法(REV) :SZOka等于1978年提出了“REV脂质体”的制备工艺，即通 过逆向蒸发法制得内水相体积大且包封率高的脂质体。该方法是脂质体技术的一个突破， 因为其首次考虑到制备具有高内水相体积-脂质比特性的脂质体，且能够包封现有的大部 分水溶性物质。REV脂质体可由各种脂质和脂质混合物制得，其内水相体积-脂质比SUV高 约30倍，比多层脂质体或手摇法制得的囊泡高4倍。在低盐浓度和最佳条件下，有65%的 水相包封在囊泡中，甚至对大分子物质的包封率也很高。此法的基础是“反胶束”的形成，即被磷脂单分子层稳定的小水滴分散于大量有机溶剂中。这种反胶束是由缓冲水相和有机 相的混合物经超声形成的，其中缓冲水相含有待包封入脂质体的水溶性分子，而有机相溶 有两亲性磷脂。缓慢除去有机相使反胶束转变形成黏稠凝胶状。在此过程的临界点，凝胶 塌陷，部分反胶束破裂。反胶束破裂而产生的过量磷脂，反过来在余下的胶束周围形成完整 的双分子层，形成囊泡即REV脂质体。REV脂质体主要是单室的，但是每个REV制剂中都有 一些囊泡是由几个同心双分子层构成，从而组成寡层囊泡。REV脂质体的大小与磷脂类型及 其在有机溶剂中的溶解度、水相缓冲液和有机溶剂之间的表面张力以及水相、有机溶剂和 脂质的相对量等因素有关。

发明内容
针对现有技术的不足，本发明的主要目的是提供一种包封率高、稳定性好、具有长 循环作用并且能够明显降低普通长春瑞滨注射液血管刺激性及骨髓毒性的可注射的脂质 体制剂。该制剂由空白脂质体、重酒石酸长春瑞滨药物和缓冲液三部分各自独立包装，在临 床应用上既能够提高药物及制剂的稳定性又便于医生的使用。本发明的另一目的是提供该长循环脂质体制剂的制备方法。与现有的制备方法相 比，本发明所提供的制备方法具有工艺简单易行的优点，因此更有利于实现工业化生产。术语说明PEG化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇 胺，是一种长循环膜材；mPEG2_-DSPE 甲氧基聚乙二醇2000 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺；可市 场购得，也可按现有技术自行制备。本发明的技术方案如下长春瑞滨长循环脂质体制剂，包括三个分装单元2-10ml空白脂质体、l_20ml磷 酸钠缓冲液、5_20mg重酒石酸长春瑞滨；其中所述的空白脂质体由PEG化的二硬脂酰磷脂 酰乙醇胺、胆固醇、磷脂按(0.05-0.5) (0.1-0.5) 1的质量比，按以下方法制得称取磷脂、PEG化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和胆固醇溶于有机溶剂中，充分溶解； 加入缓冲液，振荡反应；然后均质得到平均粒径为50-200纳米的空白脂质体溶液，再经微 孔滤膜过滤除菌即得。所得空白脂质体作为膜材用于包封重酒石酸长春瑞滨药物成分。上述均质采用现有技术，例如高压均质、挤出或超声技术。上述的磷脂优选氢化大豆卵磷脂(HSPC)，HSPC较为稳定，不易氧化，而且安全性 好，是一种安全药用辅料。所述的磷酸盐缓冲液浓度为100-800mM，优选地为300-600mM。本发明空白脂质体组分中选用长循环材料PEG化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 (PEG-DSPE)，可以增加长春瑞滨脂质体的空间稳定性，赋予脂质体长循环性能，其中优选采 用的是mPEG2Q(1(1-DSPE(甲氧基聚二醇2000 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)，mPEG2(1(1(1-DSPE与HSPC 的质量比为0.05 1-0.5 1。上述的所述空白脂质体pH为2. 0-5. 0，优选地pH为3. 0-4. 5。上述的有机溶剂选自无水乙醇、叔丁醇、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇或乙酸乙 酯；其中优选无水乙醇或叔丁醇。有机溶剂用量以能使磷脂、PEG化的二硬脂酰磷脂酰乙醇 胺和胆固醇溶解即可，本发明优选有机溶剂用量不超过空白脂质体体积的20 %。
优选的，本发明所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂中，每1000ml空白脂质成分如 下空白脂质体的pH值为3. 0-4. 5。本发明所述长春瑞滨长循环脂质体制剂的制备方法，步骤如下a、空白脂质体的制备(1)称取HSPC、mPEG2000_DSPE以及胆固醇溶于适量有机溶剂中，充分溶解；(2)采用注射用水配制柠檬酸缓冲液，以氢氧化钠调节pH至2. 0-5. 0，并将其加入 至上述步骤(1)制得的溶液中，在40-70°C温度下振荡反应10-60min ；(3)用高压均质、挤出或超声技术将步骤(2)得到溶液中脂质体的平均粒径降至 50-200纳米，即得到空白脂质体；(4)将上述空白脂质体经微孔滤膜过滤除菌，单独包装。b、配制无菌磷酸钠缓冲液，单独包装。c、重酒石酸长春瑞滨药物，单独包装。使用前，按如下步骤将以上三个分装单元混和d、将磷酸钠缓冲液加入至步骤a制备的空白脂质体中，调pH值至6. 5-8. 0，置于 30-50°C水浴中温浴，加入重酒石酸长春瑞滨，30-50°C保温5_20分钟进行载药，得到长春 瑞滨长循环脂质体注射液。上述步骤d中pH值调节剂优选Na3P04溶液或者Na2HP04溶液。优选的，上述步骤d中加入重酒石酸长春瑞滨，35_45°C保温8_15分钟进行载药。为了防止制成的长春瑞滨脂质体制剂长期放置药物泄漏导致包封率降低，本发明 采用将空白脂质体、磷酸钠缓冲液、重酒石酸长春瑞滨分别独立包装，使用时再将三个分装 单元混和加热即可。三个分装单元混和加热的温度是30-50°C保温5-20分钟。优选的，三 个分装单元混和加热的温度是35-45°C保温8-15分钟。上述方法制备空白脂质体时无需将溶解膜材的有机溶剂蒸除，最终制剂中的残留 量小于20% wt，优选地小于10% wt。本发明所制备的长春瑞滨长循环脂质体制剂，重酒石酸长春瑞滨药物与磷脂的质 量比为0.05 1-0.5 1，简称药脂比，平均粒径为50-200内米，药物包封率大于85%。上述长春瑞滨长循环脂质体制剂中使用的药物重酒石酸长春瑞滨，可以是重酒石 酸长春瑞滨无菌水溶液也可以是重酒石酸长春瑞滨粉末。由于重酒石酸长春瑞滨是一种水溶性抗肿瘤药物，因此制备成脂质体制剂后药物 被包封于由脂质双层膜围成的内部水相空间中。水溶性药物采用被动载药的方法制备的脂 质体其包封率和载药量均比较低，因此本发明采用了目前较为常用的主动载药的方法。另 外，水溶性药物制备而成的脂质体制剂长期放置后药物会发生不同程度的泄漏，导致包封氢化大豆卵磷月丨mPEG2_-DSPE
10-100g 0. 5-5g l-50g 20-100g胆固醇柠檬酸氢氧化钠注射用水
0.l-100g 1000ml
7率降低而影响使用；为了较好的解决这一问题本发明采用将药物重酒石酸长春瑞滨与空白 脂质体分开储存，临床使用时再混在一起进行载药，所得制剂载药量高，包封率最高可达到 99%以上；而且，空白脂质体可长期放置而不会发生质量下降现象。现有技术中空白脂质体的制备采用薄膜分散法，制备工艺技术一般是将磷脂、胆 固醇等膜材溶于适量有机溶剂中，充分溶解后通过旋蒸、干燥等工艺步骤将有机溶剂全部 去除，制备成干燥的薄膜之后再进行水化。本发明对此工艺过程进行了改良，将膜材溶于适 量有机溶剂中，充分溶解后可直接进行下一步操作，因此不必制成干燥的薄膜，从而减少了 工艺的复杂程度，有利于工业化生产。与现有技术相比，本发明的主要优点包括(1)稳定性好脂质体粒径100纳米左右，包封率85%以上，载药后的脂质体可于 2-8 °C稳定放置24小时而主要质量指标均无无明显变化；(2)使用方便临床应用前，只需将三个分装单元混在一起进行适当加热即可；(3)制备工艺简单制备工艺简便、操作易行，省去了长时间的旋蒸及干燥过程， 降低了磷脂氧化的可能性，适合于工业化放大生产；(4)药物毒性及刺激性降低由于药物被包封于脂质体内部，因此能有效降低长 春瑞滨临床上常见的血管刺激性及静脉炎的发病率；另外，药物包封于脂质体内部，进入人 体后能够有效避免网状内皮系统的吞噬作用，延长了药物的半衰期，能提高治疗指数；且较 小的粒径能够提高药物在肿瘤部位的释放，具有一定靶向性。
具体实施例方式下面结合实施例来进一步说明本发明，但不限于此。实施例1.不同载药方法的长春瑞滨脂质体的包封率包封重酒石酸长春瑞滨的脂质体膜材均为氢化大豆磷脂、胆固醇及 mPEG2_-DSPE，质量比为1 0.2 0.1。包封率的测定方法采用微柱离心法将葡聚糖凝 胶S印hadex G-50浸泡在蒸馏水中过夜，充分溶胀。装于2. 5ml注射器中，待水分自然流 下，凝胶部分高约1. 5厘米，2000rpm离心4分钟除去水分，凝胶柱高约1厘米。取制备好 的重酒石酸长春瑞滨脂质体两份，各0. 1ml，一份于10ml容量瓶中，加入0.5ml 10%曲拉通 X-100于60摄氏度加热10秒，冷却后破乳，以注射用水定容至刻度，混勻，HPLC法测定峰面 积A1。另取一份上样于葡聚糖凝胶柱，2000rpm离心3min，继续加入注射用水于凝胶柱顶 端，2000rpm离心洗脱，共洗脱2次，收集洗脱液于10ml容量瓶中，加入0.5ml 10%曲拉通 X-100于60摄氏度加热10秒，冷却后破乳，以注射用水定容至刻度，混勻，HPLC法测定峰面 积A2。包封率等于A2/Alx 100%。薄膜分散法将脂质体膜材溶于适量乙醇中，减压除去乙醇，形成薄膜；加入重酒石酸长春瑞滨 生理盐水溶液(2mg/ml)，水化磷脂膜，制得长春瑞滨脂质体。包封率为25%。逆相蒸发法适量二氯甲烷-乙醚(1 1 V/V)溶解膜材，加入重酒石酸长春瑞滨生理盐水溶 液(2mg/ml)，进行短时超声，直至形成稳定的w/o型乳剂。减压除去溶剂，加入生理盐水水 化，制得长春瑞滨脂质体。包封率为15%。
乙醇注入法脂质体膜材以适量乙醇溶解，注入重酒石酸长春瑞滨生理盐水溶液中水化，制得 长春瑞滨脂质体。包封率为10%。硫酸铵梯度法脂质体膜材以适量二氯甲烷溶解，挥除溶剂，加入硫酸铵溶液(300mmol L—1)， 60°C水浴水化，均质机处理，0. 22um微孔滤膜过滤除菌，透析除去外水相硫酸铵，得硫酸铵 梯度脂质体。将重酒石酸长春瑞滨生理盐水溶液(4mg/ml)加入此梯度脂质体中，60°C水浴 保温载药10分钟，即得。包封率为29%。pH梯度法脂质体膜材以适量乙醇溶解，挥除乙醇，加入枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液 (300mmol L_1，pH4. 0)，65°C水浴水化20min，得到空白脂质体初品。均质机处理，降低粒径， 过0. 22 y m微孔滤膜除菌，得空白脂质体。取空白脂质体混悬液10. OmL，加入磷酸钠溶液(500mmol L_1)6mL，混合，随后加入 重酒石酸长春瑞滨生理盐水溶液(4mg mLlSmLJCTC保温lOmin，制得长春瑞滨脂质体。 包封率为99%。测定包封率，结果表明，除了 pH梯度法制备的长春瑞滨脂质体包封率大于90% 外，其他方法制备的长春瑞滨脂质体包封率均小于30. 0%。实施例2. pH梯度法制备重酒石酸长春瑞滨包封率影响因素考察若无特殊说明，以下因素考察均在药脂质量比为1 10，60°C保温lOmin条件下进 行载药。药脂质量比是简称，含义为重酒石酸长春瑞滨药物与磷脂的质量比，下同。1、外水相pH调节剂对包封率的影响采用不同碱液调节脂质体外水相pH为7. 0，测定包封率结果见表1。表1外水相pH调节剂对包封率的影响
Na3P04溶液Na2HP04 溶液NaOH溶液Na2C03溶液NaHC03溶液包封率％99. 597. 219. 218. 119. 92、内外水相pH梯度(A pH)对包封率的影响以Na3P04溶液调节脂质体外水相pH，建立A pH分别为0、1. 0、2. 0、2. 4、3. 0，载药，
测定包封率，结果见表2。表2内外水相pH梯度(A pH)对包封率的影响
ApH01. 02. 02. 43. 0包封率％28. 832. 863. 275. 899. 23、载药温度对包封率的影响分别于30、40、50、60及70°C保温lOmin，测定包封率，结果见表3。表3载药温度对包封率的影响
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权利要求
长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于包括三个分装单元2 10ml空白脂质体、1 20ml磷酸钠缓冲液、5 20mg重酒石酸长春瑞滨；其中所述的空白脂质体由PEG化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇、磷脂按(0.05 0.5)∶(0.1 0.5)∶1的质量比，按以下方法制得称取磷脂、PEG化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺和胆固醇溶于有机溶剂中，充分溶解；加入缓冲液，振荡反应；然后均质得到平均粒径为50 200内米的空白脂质体溶液，再经微孔滤膜过滤除菌即得。
2.如权利要求1所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于所述的有机溶剂选自 无水乙醇、叔丁醇、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇或乙酸乙酯。
3.如权利要求1所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于所述的有机溶剂是无 水乙醇或叔丁醇，加入量不超过空白脂质体体积的20%。
4.如权利要求1所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于所述的磷脂为氢化大 豆卵磷脂。
5.如权利要求1所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于所述的磷酸盐缓冲液 浓度为100_800mM，优选地为300_600mM。
6.如权利要求1所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于PEG化的二硬脂酰磷 脂酰乙醇胺是甲氧基聚乙二醇2000聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(mPEG2_-DSPE)。
7.如权利要求1所述的长春瑞滨长循环脂质体制剂，其特征在于每1000ml空白脂质如 下成分氢化大豆卵磷脂IO-IOOgmPEG2_-DSPE0. 5_5g胆固醇l_50g柠檬酸20-100g氢氧化钠0. I-IOOg注射用水IOOOml空白脂质体的PH值为3. 0-4.5。
8.权利要求1所述重酒石酸长春瑞滨长循环脂质体制剂的制备方法，步骤如下a、空白脂质体的制备(1)称取HSPC、mPEG2000-DSPE以及胆固醇溶于适量有机溶剂中，充分溶解；(2)采用注射用水配制柠檬酸缓冲液，用氢氧化钠调节PH至2.0-5. 0，并将其加入至上 述步骤(1)制得的溶液中，在40-70°C温度下振荡反应10-60分钟；(3)用高压均质、挤出或超声技术将步骤(2)得到溶液中脂质体的平均粒径降低至 50-200纳米，即得到空白脂质体；(4)将上述空白脂质体经微孔滤膜过滤除菌，单独包装；b、配制无菌磷酸钠缓冲液，单独包装；c、重酒石酸长春瑞滨，单独包装；使用前，按如下步骤将以上a、b、c的三个分装单元混和d、将磷酸钠缓冲液加入至步骤a制备的空白脂质体中，调pH值至6.5-8.0，置于 30-50°C水浴中温浴，加入重酒石酸长春瑞滨，30-50°C保温5_20分钟进行载药，得到重酒石酸长春瑞滨长循环脂质体注射液。
9.权利要求7所述重酒石酸长春瑞滨长循环脂质体制剂的制备方法，其特征在于所述 步骤d中pH值调节剂为Na3PO4溶液或者Na2HPO4溶液。
全文摘要
本发明涉及一种长春瑞滨长循环脂质体制剂及其制备方法，该制剂包括三个分装单元空白脂质体、磷酸钠缓冲液和重酒石酸长春瑞滨；使用前，只需将三个分装单元混在一起进行适当加热即可。本制备方法工艺简单、易于操作，适合工业化生产，采用本发明方法所制备的长春瑞滨长循环脂质体包封率高、稳定性好。
文档编号A61K47/34GK101933904SQ20091001666
公开日2011年1月5日 申请日期2009年7月1日 优先权日2009年7月1日
发明者张明会, 李伯涛, 杨光丽, 杨清敏, 王晶翼, 王栋海 申请人:齐鲁制药有限公司