专利名称：一种治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种治疗便秘的中药制 剂麻仁滋脾丸的质量控制方法。
背景技术：
麻仁滋脾丸由大黄、火麻仁、当归、厚朴、苦杏仁、枳实、郁李仁和白芍八位中药组 成，制备方法是以上八味，大黄、当归、厚朴、枳实、白芍粉碎成细粉，再与其余火麻仁等三 味共同粉碎成细粉，混勻，过筛，每IOOg粉末加炼蜜80 100g，制成大蜜丸，即得。麻仁滋脾丸现代临床常用治虚人及老人肠燥便秘、习惯性便秘、痔疮出血，痔疮便 秘属肠胃燥热者，特别是针对以津枯肠燥的老年人大便秘结症状疗效显著，其所含蜂蜜对 人体有多种益处。对于老年人肠燥便秘，除药物本身作用外，蜂蜜也起到很好的滋润作用。 因此本方润下治法比苦寒攻下治法对于中老年人便秘尤其适合，所谓“下而不伤正”。随着经济的不断发展，中药受到世人更多的了解与瞩目。中药是在传统的中医理 论指导下发展起来的，原料多是草根树皮、矿物、动物等天然材料，来源广泛，成分复杂。这 就决定了中药安全性标准的特殊性，安全性标准问题也同样成为中药进入国际市场的一个 难题。目前国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟及我国传统出口中药的 东南亚地区均有提高中药标准的趋势。在此情况下，更要提出适合我国产品质量的标准以 适应国际标准，而且中药在中国有数千年的使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品 质量标准中也多参考我国的中药标准。完善、提高中药的质量标准更加成为了迫在眉睫的 事情了。薄层色谱法(TLC)鉴别中对照药材的确定越来越多的运用在中药制剂中，由于对 照品的限制或选择对照品不够专属等原因，常选用对照药材作为TLC鉴别的色谱对照。高效液相色谱(HPLC)具有快速、灵敏、分离效能高等优点，在中药鉴定中，采用 HPLC法分离特征成分后，用紫外检测器(UV)或质谱检测器(MQ进行结构分析和定量分析， 是全面评价质量的有效方法。中国药典(2000年版)一部中就有59种药材和50种中成药 采用HPLC法进行鉴定，而且还不断有人用HPLC法对其它的中药进行鉴定和成分分析研究。麻仁滋脾丸原有质量标准表述“取本品，置显微镜下观察果皮石细胞淡黄色至 红棕色，表面观多角形，壁厚。石细胞橙黄色，贝壳形，壁较厚较宽，一边纹孔明显。草酸钙 簇晶直径18 32 μ m，存在于薄壁细胞中，常排列成行，或一个细胞中含数个簇晶。草酸钙 方晶存片于薄壁组织中，油细胞圆形或椭圆形，含棕黄色油状物。梯纹及网纹导管多见，直 径约至80 μ m。有时可见油室碎片。”对于该品种的上述质量控制标准而言，显然十分的模 糊和不足。原有标准中仅有部分中药显微鉴别特征的描述，对于质量控制标准而言，远远 不够，应该添加对照药材和对照品作为薄层色谱鉴别检验方法的依据。没有特征药材的鉴 别和反映药物内在质量的指标成分的含量测定项，无法在生产中有效的保证产品的内在质 量，药效也得不到保证。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性定量检测且检测 手段简单、检测结果准确的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，步骤是(1)性状鉴别:性状描述为麻仁滋脾丸为深棕色至黑褐色的大蜜丸；气微香，味苦；置显微镜下 观察大黄为草酸钙簇晶大、直径60 140 μ m ；厚朴为石细胞分枝状、壁厚、层纹明显；枳实 为草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中；白芍为草酸钙簇晶直径18 32 μ m，存在于薄壁细 胞中，常排列成行，或一个细胞中含有数个簇晶；(2)薄层色谱法鉴别枳实、当归、厚朴采用薄层色谱法以枳实和当归为对照药材、厚朴酚、和厚朴酚为对照品，鉴别麻仁 滋脾丸处方中枳实、当归、厚朴；(3)薄层色谱法鉴别白芍采用薄层色谱法以芍药苷为对照品，鉴别麻仁滋脾丸处方中的白芍；(4)高效液相法测定大黄采用高效液相法以大黄素和大黄酚为对照品，测定处方麻仁滋脾丸中的大黄。而且，所述薄层色谱法鉴别枳实、当归、厚朴的方法是①将麻仁滋脾丸制成供试品溶液；②取枳实对照药材制成对照药材溶液；③取厚朴酚以及和厚朴酚对照品，各加甲醇分别制成对照品溶液；④取上述四种溶液在薄层板上，以体积比环己烷丙酮=10 3为展开剂展开；⑤将薄层板分别置紫外光灯365nm和254nm波长下检视，确定供试样品中是否含 有枳实、当归、厚朴成分。而且，所述薄层色谱法鉴别白芍的方法是①将麻仁滋脾丸制成供试品溶液；②取芍药苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；③取供试品溶液和对照品溶液于同一硅胶薄层板上，以体积比三氯甲烷乙酸乙 酯甲醇甲酸=40 5 10 0.2为展开剂展开；④分析硅胶薄层板上相同颜色的斑点的位置，确定供试品中是否含有白芍成分。而且，所述高效液相法测定大黄的方法是①标准品溶液的制备；②供试品溶液的制备；③阴性样品溶液的制备；④液相色谱条件的设定；⑤测定大黄色谱图；⑥结果分析根据色谱图可推算得到麻仁滋脾丸中大黄的含量。本发明的优点和积极效果是1、本发明的检测方法在《卫生部药品标准》中药成方制剂第十五册原标准的基础上，对性状和显微鉴别进行了修订，增加了对照药材和对照品的薄层鉴别检验方法；并制定 了高效液相色谱法进行含量测定的方法。修订后的质量标准，提高了药品质量标准的可控 性，确保产品内在质量，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义 重大。2、本发明在麻仁滋脾丸的检测方法中增加对照药材的薄层色谱法鉴别检验项目， 更有利于中药制剂的质量控制，从而更加准确地检验出假药和劣药，对于中药现代化和中 药走出国门意义重大。3、本发明对麻仁滋脾丸的质量标准进行了提高、完善，在原标准基础上，修订了麻 仁滋脾丸的性状和显微鉴别特征，增加了处方中当归、厚朴、枳实及白芍的薄层鉴别检验方 法，以大黄素、大黄酚为对照品，制定了采用高效液相色谱法测定处方中大黄的含量；修订 后的质量标准，提高了麻仁滋脾丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，而 且对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。
图1为本发明供试样品中枳实、当归、厚朴在波长为365nm紫外光灯下的检视图；其中，图1中条带从左至右依次为1.枳实阴性样品，2.枳实对照药材(中检所)， 3.供试品溶液1 (批号E492001)，4.供试品溶液2 (批号E49200;3)，5.供试品溶液3 (批号 E492004)，6.当归对照药材(中检所)，7.当归阴性样品，8.厚朴酚、和厚朴酚对照品(中 检所)，9.厚朴阴性样品；图2为本发明供试样品中枳实、当归、厚朴在波长为2Mnm紫外光灯下的检视图 (标号含义同图1)；图3为本发明白芍在紫外光灯下的检视图；其中，图3中的条带从左至右依次为阴性样品，供试品1(批号E492001)，供试 品2 (批号E49200;3)，供试品3 (批号E492004)，芍药苷对照品(中检所)；图4为本发明大黄素标准品和大黄酚标准品的液相色谱图；图5为本发明供试样品的液相色谱图；图6为本发明大黄阴性样品的液色相图谱。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的， 不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。一种治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，其方法步骤是(1)性状鉴别性状描述为麻仁滋脾丸为深棕色至黑褐色的大蜜丸；气微香，味苦。置显微镜下 观察大黄为草酸钙簇晶大、直径60 140 μ m ；厚朴为石细胞分枝状、壁厚、层纹明显；枳实 为草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中；白芍为草酸钙簇晶直径18 32 μ m,存在于薄壁细 胞中，常排列成行，或一个细胞中含有数个簇晶；(2)薄层色谱法鉴别枳实、当归、厚朴采用薄层色谱法以枳实和当归为对照药材，厚朴酚、和厚朴酚为对照品，鉴别麻仁滋脾丸处方中枳实、当归、厚朴。①取麻仁滋脾丸5g，剪碎，加硅藻土 3g，研勻，加石油醚(30 60°C)30ml，超声处 理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；②取枳实对照药材lg，加石油醚(30 60°C ) 20ml，超声处理10分钟，同法制成对 照药材溶液；再取当归对照药材0. 5g，加石油醚(30 60°C )20ml，超声处理10分钟，同法 制成对照药材溶液；③取厚朴酚、和厚朴酚对照品，加甲醇制成每ml含Img的混合溶液，作为对照品溶 液；④照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述四种溶液 各5μ1，分别点于同一硅胶GF2M薄层板上，以环己烷-丙酮(10 3)为展开剂，展开，取 出，晾干；⑤结果分析将实验得到的薄层板分别置紫外光灯365nm和254nm波长下检视， (其中各自阴性对照样品无干扰)，结果见图1(检测波长为365nm)、图2(检测波长为 254nm)。供试样品色谱中在枳实对照药材及当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色 的荧光斑点，表明供试样品含有枳实和当归成分，供试品色谱中，在与厚朴酚、和厚朴酚对 照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，表明供试样品含有厚朴成分。(3)薄层色谱法鉴别白芍采用薄层色谱法以芍药苷为对照品，鉴别麻仁滋脾丸处方中的白芍。①取麻仁滋脾丸1丸，剪碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣 加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；②另取芍药苷对照品，加甲醇制成每ml含Img的溶液，作为对照品溶液；③照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液 10 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲 酸00 5 10 0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点 显色清晰；④结果分析不同生产批次麻仁滋脾丸供试品的检测结果见图3，根据供试品色 谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰，说明供试品含 有白芍成分；(4)高效液相法测定大黄采用高效液相法测定处方麻仁滋脾丸中的大黄，以大黄素和大黄酚为对照品。①标准品溶液的制备取大黄素对照品、大黄酚对照品适量，精密称定，加乙酸乙 酯-无水乙醇(1 2)混合溶液制成每Iml含大黄素10 μ g、大黄酚25 μ g的混合溶液，即得。液相色谱检测结果见图4 ；②供试品溶液的制备取重量差异项下的麻仁滋脾丸，剪碎，取约2g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，称定重量，用 甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，加热回收甲醇至干，残渣 加盐酸溶液(1 — 10) 10ml，再加三氯甲烷10ml，置水浴上加热回流1小时，立即冷却，移至 分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次15ml，合并三氯甲烷液，回收至干，残渣用乙酸乙酯-无水乙醇(1 幻混合溶液使溶解，转移至IOml定量瓶中， 稀释至刻度，摇勻，即得。液相色谱检测结果见图5。③阴性样品溶液的制备按处方取除大黄的各味药材，按制法制得样品，再按供试 品溶液制备方法，制得阴性样品溶液，再按同样的色谱条件分析，阴性样品在大黄素、大黄 酚相应的保留时间处未见色谱峰。结果表明，阴性样品对检测无干扰。液相色谱检测结果见图6。④液相色谱条件的设定色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为 甲醇-0. 磷酸溶液(85 15)，检测波长为2Mnm，理论板数按大黄素峰计算应不低于 1500。⑤测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，检 测，即得到各种样品的色谱图。⑥结果分析由保留时间可以确定供试样品中含有大黄素和大黄酚，根据《中国药 典》2000年版一部药材大黄的含量限度每g含大黄以大黄素(C15HltlO5)、大黄酚(C15HltlO4) 的总量计，不得少于0. 50 %。根据色谱图可推算得到麻仁滋脾丸中大黄的含量，该含量与 国家药典进行比较，即可判断供试样品的大黄含量是否合格，进而判断不同厂家、不同批次 的麻仁滋脾丸的品质。本实验样品中麻仁滋脾丸中大黄占总量的31. 37% (占制剂总量 15. 69% )，鉴于麻仁滋脾丸为生粉入药，按照国家药典委员会要求(生粉入药按80%转移 率计算)，每Ig含大黄以大黄素O^15HltlO5)、大黄酚(C15HltlO4)的总量计，不得少于0. 63mg ；每 丸含大黄以大黄素(C15HltlO5)、大黄酚(C15HltlO4)的总量计，不得少于5. 6mg。
权利要求
1.一种治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，其特征在于质量控制方法 的步骤是(1)性状鉴别性状描述为麻仁滋脾丸为深棕色至黑褐色的大蜜丸；气微香，味苦；置显微镜下观察 大黄为草酸钙簇晶大、直径60 140 μ m ；厚朴为石细胞分枝状、壁厚、层纹明显；枳实为草 酸钙方晶成片存在于薄壁组织中；白芍为草酸钙簇晶直径18 32 μ m，存在于薄壁细胞中， 常排列成行，或一个细胞中含有数个簇晶；(2)薄层色谱法鉴别枳实、当归、厚朴采用薄层色谱法以枳实和当归为对照药材、厚朴酚、和厚朴酚为对照品，鉴别麻仁滋脾 丸处方中枳实、当归、厚朴；(3)薄层色谱法鉴别白芍采用薄层色谱法以芍药苷为对照品，鉴别麻仁滋脾丸处方中的白芍；(4)高效液相法测定大黄采用高效液相法以大黄素和大黄酚为对照品，测定处方麻仁滋脾丸中的大黄。
2.根据权利要求1所述的治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，其特征在 于所述薄层色谱法鉴别枳实、当归、厚朴的方法是①将麻仁滋脾丸制成供试品溶液；②取枳实对照药材制成对照药材溶液；③取厚朴酚以及和厚朴酚对照品，各加甲醇分别制成对照品溶液；④取上述四种溶液在薄层板上，以体积比环己烷丙酮=10 3为展开剂展开；⑤将薄层板分别置紫外光灯365nm和254nm波长下检视，确定供试样品中是否含有枳 实、当归、厚朴成分。
3.根据权利要求1所述的治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，其特征在 于所述薄层色谱法鉴别白芍的方法是①将麻仁滋脾丸制成供试品溶液；②取芍药苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；③取供试品溶液和对照品溶液于同一硅胶薄层板上，以体积比三氯甲烷乙酸乙酯 甲醇甲酸=40 5 10 0. 2为展开剂展开；④分析硅胶薄层板上相同颜色的斑点的位置，确定供试品中是否含有白芍成分。
4.根据权利要求1所述的治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，其特征在 于所述高效液相法测定大黄的方法是①标准品溶液的制备；②供试品溶液的制备；③阴性样品溶液的制备；④液相色谱条件的设定；⑤测定大黄色谱图；⑥结果分析根据色谱图可推算得到麻仁滋脾丸中大黄的含量。
全文摘要
本发明涉及一种治疗便秘的中药制剂麻仁滋脾丸的质量控制方法，步骤是(1)性状鉴别；(2)薄层色谱法鉴别枳实、当归、厚朴；(3)薄层色谱法鉴别白芍；(4)高效液相法测定大黄。本发明对麻仁滋脾丸的质量标准进行了提高、完善，并在原标准基础上修订了麻仁滋脾丸的性状和显微鉴别特征，增加了处方中当归、厚朴、枳实及白芍的薄层鉴别检验方法；以大黄素、大黄酚为对照品，制定了采用高效液相色谱法测定处方中大黄的含量；修订后的质量标准，提高了麻仁滋脾丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。
文档编号A61K36/752GK102038789SQ20091007092
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月22日 优先权日2009年10月22日
发明者刘稚菲, 宋立平, 李妍, 江永萍, 金兆祥 申请人:天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂