专利名称：中药制剂的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种中药制剂保幼化风 丹的质量控制方法。
背景技术：
保幼化风丹由胆南星、薄荷、羌活、独活、天麻、荆芥穗、川芎、全蝎、甘草、人参、防 风组成，其制备方法为以上十一味，粉碎成细粉，混勻，过筛，每IOOg粉末加炼蜜105 115g，制成大蜜丸，即得。保幼化风丹具有清热散风，止嗽化痰之功效，用于惊风里热，痰涎 壅盛，咳嗽发烧，头痛身痛，四肢抽动，睡卧不安。随着经济的不断发展，中药受到世人更多的了解与瞩目，中药在传统的中医理论 指导下发展起来，原料多是草根树皮、矿物、动物等天然材料，来源广泛，成分复杂，使中药 安全性标准具有特殊性，安全性标准问题也同样成为中药进入国际市场的一个难题。目前 国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟、我国及传统出口中药的东南亚地 区均有提高中药标准的趋势，在此情况下，需要提出适合我国产品质量的标准以适应国际 标准，我国有数千年的中药使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品质量标准中多参 考我国的中药标准，所以完善、提高中药的质量标准更已经迫在眉睫。薄层色谱法(TLC)鉴别中对照药材的确定越来越多的运用在中药制剂中，由于对 照品的限制或选择对照品不够专属等原因，常选用对照药材作为TLC鉴别的色谱对照品。高效液相色谱(HPLC)具有快速、灵敏、分离效能高等优点，在中药鉴定中，采用 HPLC法分离特征成分后，用紫外检测器(UV)或质谱检测器(MQ进行结构分析和定量分析， 是全面评价质量的有效方法。中国药典(2000年版)一部中就有59种药材和50种中成药 采用HPLC法进行鉴定，而且还不断有人用HPLC法对其它的中药进行鉴定和成分分析研究。保幼化风丹现有质量标准表述“草酸钙簇晶直径20 68 μ m,棱角锐尖，纤维束 周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。厚壁细胞多角形或长多角形，直径70 180 μ m， 壁较厚，微木化，纹孔明显。橙皮甙结晶稍带黄色，存在于叶肉组织中，栅栏细胞中尤多。油 管含棕黄色分泌物，直径约100 μ m。体壁碎片淡黄色至黄色，有网状纹及圆形毛窝，有时可 见棕褐色刚毛。据检索，目前没有关于保幼化风丹的质量控制方法的相关专利，现有专利主要集 中在保幼化风丹的重要配方和方法上。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物 成分的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，本方法具有检测手段简单、检测结果准确的 特点。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，步骤是
(1)显微鉴别；(2)以羌活为对照药材，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有羌活成分；(3)以防风为对照药材、5-0-甲基维斯阿米醇苷为对照品，薄层色谱法鉴别保幼 化风丹处方中是否含有防风成分；(4)以川芎为对照药材，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有川芎成分；(5)以人参皂苷Rbl、Re及Rgl为对照品，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否 含有人参成分；(6)以甘草为对照药材，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有甘草成分；(7)以甘草酸铵为对照品，高效液相法测定保幼化风丹处方中的甘草含量。而且，所述显微鉴别的显微描述为本品为生粉入药，草酸钙簇晶直径20 68μπι，棱角尖锐；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；厚壁细胞多角形或长 多角形，直径70 180μπι，壁较厚，微木化，纹孔明显；橙皮苷结晶稍带黄色，存在于叶肉组 织中，栅栏细胞中尤多；油管含棕黄色分泌物，直径约100 μ m;体壁碎片淡黄色至黄色，有 网状纹理及圆形毛窝，有时可见棕褐色刚毛；油管含金黄色分泌物，直径30 μ m。而且，所述薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中羌活的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研细，加乙醚 20ml，冷浸30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液；
②对照药材溶液的制备取羌活对照药材0. 5g，加乙醚5ml，冷浸30分钟，滤过，滤 液挥干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，制成对照药材溶液；③薄层条件及结果吸取供试品溶液10 μ 1、对照药材溶液2 μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙 醇溶液，加热至斑点显色，根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有羌活成分。而且，所述薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中防风的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研细，加丙酮 20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取防风对照药材lg，加丙酮10ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为对照药材溶液；③对照品溶液的制备取5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每Iml含 Img的溶液，作为对照品溶液；④薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述三种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅 胶GF2M薄层板上，以三氯甲烷甲醇=4 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 254nm下检视，根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有防风成分。而且，所述薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中川芎的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研细，加乙醚 20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取川芎对照药材0. 5g，加乙醚10ml，加热回流30分钟，滤 过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；③薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=9 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有川芎成分。而且，所述薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中人参的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品10g，剪碎，加甲醇50ml，超声处理1小 时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液， 水液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次 20ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的的制备取人参皂苷Rbl、Re及Rgl对照品，加甲醇制成每ml各含 2mg的溶液，作为对照品溶液；③薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述供试品溶液6 μ 1，对照品溶液2 μ 1， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=I3 7 2在10°C以下放置分层 的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，根 据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有人参成分。而且，所述薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中甘草的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研细，加乙醚 30ml，加热回流1小时，滤过，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣 加水40ml使溶解，用正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次 20ml，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取甘草对照药材lg，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过， 药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇 振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20ml，弃去洗液，正丁醇液蒸 干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；③薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述两种溶液各6 μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以乙酸乙酯甲酸冰醋酸水=15 :1:1: 2为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视， 根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有甘草成分。而且，所述高效液相法测定处方保幼化风丹中的甘草含量的方法为①色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相甲醇-0. 2mol/L醋酸铵 溶液-冰醋酸=62 38 1;检测波长25011111;柱温401;流速1.01111/分钟，理论板数 按甘草酸峰计算不低于3000 ；②对照品溶液的制备取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成每Iml含 0. Img的溶液，摇勻，即得，精密吸取10 μ 1，注入液相色谱仪，每Iml甘草酸铵0. lmg，折合甘 草酸为0. 0980mg ；③供试品溶液的制备取保幼化风丹样品适量，剪碎，取3g，精密称定，精密加入 流动相25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇 勻，滤过，取续滤液，即得，精密吸取10μ 1，注入液相色谱仪；④检测及结果测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液以及使用溶剂各 10 μ 1，注入液相色谱仪，测定处方中的甘草含量，根据国家规定每丸含甘草以甘草酸 (C42H62O16)计，不得少于 L7mg。本发明的优点和积极效果是
1、本发明的检测方法在《卫生部药品标准》中药成方制剂第三册原标准的基础上， 增加了对照药材和对照品的薄层鉴别检验方法，制定了高效液相色谱法进行含量测定的方 法，修订后的质量标准控制方法，提高了保幼化风丹质量标准的可控性，进一步确保产品内 在质量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。2、本发明对保幼化风丹的质量标准进行了提高、完善，在原标准基础上，增加了防 风显微特征的描述，增加了处方中羌活、防风、川芎、人参及甘草的薄层鉴别方法，以及以甘 草酸铵为对照品，制定了甘草的含量测定方法，修订后的质量标准提高了药品的质量控制， 可更加准确地检验出假药和劣药，对中药现代化和中药走出国门具有重大意义。
图1为本发明供试样品中羌活的薄层色谱图，其中条带从左至右依次为样品 1(批号200601)，样品2 (批号200602)，样品3 (批号200603)，羌活对照药材(中检所)， 阴性样品；图2为本发明供试样品中防风的薄层色谱图在紫外光灯OMnm)检视图，其中条 带从左至右依次为样品1 (批号200601)，样品2 (批号20060 ，样品3 (批号200603)， 防风对照药材(中检所)，5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品(中检所)，阴性样品；图3本发明供试样品中川芎的薄层色谱图在紫外光灯(365nm)下的检视图，其 中条带从左至右依次为样品1(批号200601)，样品2(批号200602)，样品3(批号 200603)，川芎对照药材(中检所)，阴性样品；图4为本发明供试样品中人参的薄层色谱图在日光下的检视图，其中，其中条带 从左至右依次为样品1 (批号200601)，样品2 (批号20060 ，样品3 (批号200603)，人 参皂苷Rbl对照品(中检所)，人参皂苷Re对照品(中检所)，人参皂苷Rgl对照品(中检 所)，阴性样品；图5、图6为本发明供试样品中甘草的薄层色谱图在分别置日光及紫外光灯 (365nm)下检视图，从左至右依次为样品1(批号200601)，样品2 (批号200602)，样品3 (批号200603)，甘草对照药材(中检所)，阴性样品；图7为本发明供试样品中薄荷的薄层色谱图在日光下的检视图，从左至右依次 为薄荷脑对照品(中检所)，阴性样品，样品1(批号200601)，样品2 (批号200602)，样 品 3(批号200603)；图8为本发明甘草酸铵对照品液相色谱图；图9为本发明保幼化风丹供试品液相色谱图；图10为本发明阴性样品液相色谱图；图11为本发明天麻素对照品液相色谱图；图12为本发明保幼化风丹供试品液相色谱图。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的， 不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。一种中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其方法的步骤是
(1)显微鉴别显微描述为鉴于本品为生粉入药，草酸钙簇晶直径20 68 μ m，棱角尖锐；纤 维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；厚壁细胞多角形或长多角形，直径70 180 μ m,壁较厚，微木化，纹孔明显；橙皮苷结晶稍带黄色，存在于叶肉组织中，栅栏细胞中 尤多；油管含棕黄色分泌物，直径约100 μ m ；体壁碎片淡黄色至黄色，有网状纹理及圆形毛 窝，有时可见棕褐色刚毛；油管含金黄色分泌物，直径30 μ m。(2)采用薄层色谱法，以羌活为对照药材，鉴别保幼化风丹处方中的羌活。①供试品溶液的制备取本品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研细，加乙醚20ml，冷浸30 分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。②对照药材溶液的制备取羌活对照药材0. 5g，加乙醚5ml，冷浸30分钟，滤过，滤 液挥干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，制成对照药材溶液。③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除羌活外的其他药材，按药典中制法项 下的工艺制成丸剂，再按①供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取供试品溶液和阴性样品溶液各10μ 1，对照药材溶液2μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以正己烷乙酸乙酯=4 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热 至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，表 明该供试样品中含有羌活，阴性对照样品无干扰，结果见图1。(3)采用薄层色谱法，以防风为对照药材，鉴别保幼化风丹处方中防风。①供试品溶液的制备取本品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研细，加丙酮20ml，超声处 理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。②对照药材溶液的制备取防风对照药材lg，加丙酮10ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为对照药材溶液。③对照品溶液的制备取5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每Iml含 Img的溶液，作为对照品溶液。④阴性样品溶液的制备按处方配比，取除防风外的其他药材，按药典中制法项 下的工艺制成丸剂，再按上①供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。⑤薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸 取上述四种溶液各10μ1，分别点于同一硅胶GF2M薄层板上，以三氯甲烷甲醇=4 1 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对 照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，表明该供试样品中含有防风成分，阴性对照样 品无干扰，结果见图2。(4)采用薄层色谱法，以川芎为对照药材，鉴别保幼化风丹处方中川芎。①供试品溶液的制备取本品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研细，加乙醚20ml，加热回流 30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。②对照药材溶液的制备取川芎对照药材0. 5g，加乙醚10ml，加热回流30分钟，滤 过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液。③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除川芎外的其他药材，按药典中制法项 下的工艺制成丸剂，再按①供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述三种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=9 1为 展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相 应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，表明该供试样品中含有川穹成分，阴性对照样品无干 扰，结果见图3。(5)采用薄层色谱法，以人参皂苷Rbl、Re及Rgl为对照品，鉴别保幼化风丹处方 中人参。①供试品溶液的制备取本品10g，剪碎，加甲醇50ml，超声处理1小时，滤过，滤液 蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水液用水饱和 的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨试 液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。②对照品溶液的的制备取人参皂苷Rbl、Re及Rgl对照品，加甲醇制成每ml各含 2mg的溶液，作为对照品溶液。③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除人参外的其他药材，按药典中制法项 下的工艺制成丸剂，再按①供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述供试品溶液和阴性样品溶液各6μ 1，对照品溶液2μ 1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以三氯甲烷甲醇水=13 7 2在10°C以下放置分层的下层溶液为展开剂，展 开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，表明该供试样品中含有人参成分，阴性对照样品无 干扰，结果见图4。(6)采用薄层色谱法，以甘草为对照药材，鉴别保幼化风丹处方中的甘草。①供试品溶液的制备取本品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研细，加乙醚30ml，加热回流 1小时，滤过，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶 解，用正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20ml，弃去洗液， 正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。②对照药材溶液的制备取甘草对照药材lg，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过， 药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇 振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20ml，弃去洗液，正丁醇液蒸 干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除甘草外的其他药材，按药典中制法项 下的工艺制成丸剂，再按①供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述三种溶液各6 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯甲酸冰醋酸 水=15 1 1 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色 清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点，表明该供试样品中含有甘草成分，阴性对照样品无 干扰，结果见图5、图6。(7)采用薄层色谱法，以薄荷脑为对照品，鉴别保幼化风丹处方中的薄荷。
①供试品溶液的制备取本品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研细，加石油醚(60 900C ) 15ml，浸泡1小时，滤过，滤液浓缩至^iil,作为供试品溶液。②对照品溶液的制备取薄荷脑对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对 照品溶液。③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除薄荷外的其他药材，按药典中制法项 下的工艺制成丸剂，再按①供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述供试品溶液和阴性样品溶液各5 μ 1，对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以甲苯乙酸乙酯=19 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加 热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同的斑点，表明 该供试样品中不含有薄荷，阴性样品无干扰，结果见图7，由于在相同位置上不显示相同斑 点，则不纳入质量控制当中。(8)采用高效液相法，以甘草酸铵为对照品，测定保幼化风丹处方中的甘草含量。①参照《中国药典》2005年版一部有关含量测定方法制定。用十八烷基硅烷键合 硅胶为填充剂；流动相甲醇0. 2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸=62 38 1 ；检测波长 250nm ；柱温40°C ；流速1. Oml/分钟，理论板数按甘草酸峰计算不低于3000。②对照品溶液的制备取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成每Iml含 0. Img的溶液，摇勻，即得，精密吸取10 μ 1，注入液相色谱仪，每Iml甘草酸铵0. lmg，折合甘 草酸为0. 0980mg，结果见图8。③供试品溶液的制备取本品适量，剪碎，取3g，精密称定，精密加入流动相25ml， 称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇勻，滤过，取 续滤液，即得，精密吸取 ο μ 1，注入液相色谱仪，检测结果见图9。④阴性样品溶液的制备按处方取除甘草的各味药材，按药典中制法制得样品， 再按②供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液。精密吸取10 μ 1，注入液相色谱仪，与甘草 酸对照品色谱峰相对应的保留时间处，无色谱峰出现，结果阴性样品溶液无干扰，检测结果 见图10。⑤检测及结果测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液以及使 用溶剂各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，处方中，甘草占处方总量的7. 69 %，鉴于本品为生 粉入药，按照国家药典委员会要求(生粉入药按80%转移率计算)，参照《中国药典》2005 年版一部甘草项下含量限度计算，每丸含甘草以甘草酸(C42H62O16)计，不得少于1.7mg。(9)处方中天麻含量测定①色谱条件参照《中国药典》2005年版一部天麻项下含量测定方法，对本品处方 中天麻进行了研究，用十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂；甲醇磷酸盐溶液(O. lmol/L磷 酸二氢钾与0. lmol/L磷酸氢二钠等量混合)水=1.5 3 95为流动相；检测波长为 270nm。②对照品溶液的制备取天麻素对照品适量，精密称定，制成每Iml含0. 2mg的溶 液，即得。检测结果见图11。③供试品溶液的制备取本品6g(批号200601)，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液。检测结果见图12。 ④试验结果供试品溶液中，天麻素含量很低，仅为0. 10mg/g。处方中，天麻占处 方总量的7. 69%，《中国药典》2005年版一部天麻中天麻素含量限度为0. 20%，转移率按照 80%计算，理论含量仅为0. 057mg/g。因此，在制定本品含量测定项中，未制定处方中天麻的含量。
权利要求
1.一种中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于其方法的步骤是(1)显微鉴别；(2)以羌活为对照药材，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有羌活成分；(3)以防风为对照药材、5-0-甲基维斯阿米醇苷为对照品，薄层色谱法鉴别保幼化风 丹处方中是否含有防风成分；(4)以川芎为对照药材，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有川芎成分；(5)以人参皂苷Rbl、Re及Rgl为对照品，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有 人参成分；(6)以甘草为对照药材，薄层色谱法鉴别保幼化风丹处方中是否含有甘草成分；(7)以甘草酸铵为对照品，高效液相法测定保幼化风丹处方中的甘草含量。
2.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述显 微鉴别的显微描述为本品为生粉入药，草酸钙簇晶直径20 68 μ m，棱角尖锐；纤维束周 围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；厚壁细胞多角形或长多角形，直径70 180 μ m，壁 较厚，微木化，纹孔明显；橙皮苷结晶稍带黄色，存在于叶肉组织中，栅栏细胞中尤多；油管 含棕黄色分泌物，直径约100 μ m;体壁碎片淡黄色至黄色，有网状纹理及圆形毛窝，有时可 见棕褐色刚毛；油管含金黄色分泌物，直径30 μ m。
3.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述薄 层色谱法鉴别保幼化风丹处方中羌活的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品10g，剪碎，加硅藻土3g，研细，加乙醚20ml， 冷浸30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取羌活对照药材0.5g，加乙醚5ml，冷浸30分钟，滤过，滤液挥 干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，制成对照药材溶液；③薄层条件及结果吸取供试品溶液10μ 1、对照药材溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶 液，加热至斑点显色，根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有羌活成分。
4.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述薄 层色谱法鉴别保幼化风丹处方中防风的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品10g，剪碎，加硅藻土3g，研细，加丙酮20ml， 超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取防风对照药材lg，加丙酮10ml，超声处理20分钟，滤过，滤 液蒸干，残渣加乙醇Iml使溶解，作为对照药材溶液；③对照品溶液的制备取5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的 溶液，作为对照品溶液；④薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述三种溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶 GF254薄层板上，以三氯甲烷甲醇=4 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm 下检视，根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有防风成分。
5.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述薄 层色谱法鉴别保幼化风丹处方中川芎的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研细，加乙醚20ml，力口热回流30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取川芎对照药材0.5g，加乙醚10ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；③薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以正己烷乙酸乙酯=9 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检 视，根据显色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有川芎成分。
6.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述薄 层色谱法鉴别保幼化风丹处方中人参的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品10g，剪碎，加甲醇50ml，超声处理1小时，滤 过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水液用 水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃 去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的的制备取人参皂苷Rbl、Re及Rgl对照品，加甲醇制成每ml各含2mg 的溶液，作为对照品溶液；③薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述供试品溶液6μ1，对照品溶液2μ 1，分别 点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=I3 7 2在10°C以下放置分层的下 层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10 %硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，根据显 色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有人参成分。
7.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述薄 层色谱法鉴别保幼化风丹处方中甘草的方法为①供试品溶液的制备取保幼化风丹样品6g，剪碎，加硅藻土2g，研细，加乙醚30ml， 加热回流1小时，滤过，药渣挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水 40ml使溶解，用正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20ml， 弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照药材溶液的制备取甘草对照药材lg，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过，药渣 挥干，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇振摇 提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20ml，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残 渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；③薄层条件及结果薄层色谱试验，吸取上述两种溶液各6μ1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以乙酸乙酯甲酸冰醋酸水=15 1 1 2为展开剂，展开，取出，晾干，喷 以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，根据显 色斑点的位置判断保幼化风丹样品中是否含有甘草成分。
8.根据权利要求1所述的中药制剂保幼化风丹的质量控制方法，其特征在于所述高 效液相法测定处方保幼化风丹中的甘草含量的方法为①色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶 液-冰醋酸=62 38 1;检测波长250nm;柱温40°C;流速1.0ml/分钟，理论板数按 甘草酸峰计算不低于3000 ；②对照品溶液的制备取甘草酸铵对照品适量，精密称定，加流动相制成每Iml含 0. Img的溶液，摇勻，即得，精密吸取10 μ 1，注入液相色谱仪，每Iml甘草酸铵0. lmg，折合甘草酸为0. 0980mg ；③供试品溶液的制备取保幼化风丹样品适量，剪碎，取3g，精密称定，精密加入流动 相25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇勻， 滤过，取续滤液，即得，精密吸取10μ 1，注入液相色谱仪；④检测及结果测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液以及使用溶剂各10μ1，注 入液相色谱仪，测定处方中的甘草含量，根据国家规定每丸含甘草以甘草酸(C42H62O16)计， 不得少于1. 7mgo
全文摘要
本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，步骤是首先进行显微鉴别；其次采用薄层色谱法，鉴别保幼化风丹处方中是否含有羌活、防风、川芎、人参以及甘草成分；最后采用高效液相法，以甘草酸铵为对照品，测定处方保幼化风丹中的甘草含量。本发明的检测方法在《卫生部药品标准》中药成方制剂第三册原标准的基础上，增加了对照药材和对照品的薄层鉴别检验方法，制定了高效液相色谱法进行含量测定的方法，修订后的质量标准控制方法，提高了保幼化风丹质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。
文档编号A61P11/10GK102038869SQ20091007090
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月22日 优先权日2009年10月22日
发明者李妍, 李艳钰, 江永萍, 荣子丹, 赵晨 申请人:天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂