专利名称：中药制剂催乳丸的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种中药制剂催乳丸的 质量控制方法。
背景技术：
催乳丸主要成分为黄芪、当归、白芍、熟地黄、川芎、漏芦、麦芽、鹿角霜、王不留 行、穿山甲、木香、通草，制备方法以上十二味，粉碎成细粉，过蹄，混勻，每IOOg粉末加炼 蜜110 130g，制成大蜜丸，即得，主要功能助气补血，活络、下乳，用于产后气血亏损，乳 汁不通，乳汁稀少，临床用于产后少乳属气血不足、乳腺不畅者。现有质量标准表述本品为 棕色至棕褐色的大蜜丸；味甜、微苦，该简单描述难以很好的鉴别药物。随着经济的不断发展，中药受到世人更多的了解与瞩目。中药是在传统的中医理 论指导下发展起来的，原料多是草根树皮、矿物、动物等天然材料，来源广泛，成分复杂。这 就决定了中药安全性标准的特殊性，安全性标准问题也同样成为中药进入国际市场的一个 难题。目前国际上虽然尚无植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟及我国传统出口中药的 东南亚地区均有提高中药标准的趋势。在此情况下，更要提出适合我国产品质量的标准以 适应国际标准，而且中药在中国有数千年的使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品 质量标准中也多参考我国的中药标准。完善、提高中药的质量标准更加成为了迫在眉睫的 事情了。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物 成分的中药制剂催乳丸的质量控制方法，本方法具有检测手段简单、检测结果准确的特点。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种中药制剂催乳丸的质量控制方法，步骤是(1)显微鉴别；(2)以去氢木香内酯和木香烃内酯为对照品，薄层色谱法鉴别催乳丸处方中是否 含有木香；(3)以当归及川芎为对照药材，薄层色谱法鉴别催乳丸处方中是否含有当归及川 芎；(4)以黄芪甲苷为对照品，薄层色谱法鉴别催乳丸处方中是否含有黄芪；(5)以芍药苷为对照品，高效液相法测定催乳丸处方中的白芍含量。而且，所述显微鉴别为置显微镜下观察无定形碎块近无色或淡黄色，有大小不 一的类圆形或椭圆形空洞，碎块边缘常凹凸不平；纤维成束或散离，多碎断，壁厚，表面有纵 裂纹，两端断裂成帚状或较平截；表皮细胞纵列，常由1个长细胞与2个短细胞相间连接，长 细胞壁厚，波状弯曲，木化；种皮表皮碎片红棕色或黄棕色，细胞表面观垂周壁增厚，星角状 或深波状弯曲，作镶嵌状排列。
而且，所述薄层色谱法鉴别催乳丸处方中的木香的步骤为①供试品溶液的制备取催乳丸样品2丸，剪碎，加三氯甲烷30ml，超声处理30分 钟，滤过，残渣备用，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的制备取去氢木香内酯对照品、木香烃内酯对照品，分别加三氯甲 烷制成每Iml各含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；③薄层条件及结果薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2 6μ 1，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以环己烷丙酮=5 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫 酸溶液，加热至斑点显色清晰，检测供试品溶液色谱中在对照品的斑点位置上是否显示有 相同的斑点，进而确定供试样品是否含有木香成分。而且，所述薄层色谱法鉴别催乳丸处方中的当归及川芎成分的步骤为①供试品溶液的制备取木香鉴别中的供试品溶液；②对照药材溶液的制备取当归及川芎对照药材各0.5g，加三氯甲烷20ml，超声 处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；③薄层条件及结果薄层色谱法试验，吸取木香鉴别中的供试品溶液及上述对照 药材各2 4μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，检测供试品溶液色谱中在对照品的斑点位置 上是否显示有相同的斑点，进而确定供试样品是否含有当归及川芎成分。而且，所述薄层色谱法鉴别催乳丸处方中的黄芪成分的步骤为①供试品溶液的制备取木香鉴别中的残渣，加氢氧化钠甲醇溶液50ml，回 流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取两次，每次 30ml，合并正丁醇液，用氨试液振摇提取2次，每次25ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣 加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为 对照品溶液；③薄层条件及结果薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各2 6 μ 1，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=I3 7 2的下层溶液为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以10 %硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下 检视，检测供试品溶液色谱中在对照品的斑点位置上是否显示有相同的斑点，进而确定供 试样品是否含有黄芪成分。而且，所述采用高效液相法，以芍药苷为对照品，测定催乳丸处方中白芍含量的方 法为①色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈0. 磷酸溶液 =18 82，检测波长为230nm，柱温40°C，流速1. Oml/分钟，理论板数按芍药苷峰计算应 不低于5000 ；②对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 60 μ g的溶液，即得，并检测色谱图；③供试品溶液的制备取催乳丸样品适量，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入稀 乙醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇勻， 离心10分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得，并检测色谱④检测及结果测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液以及使用溶剂各 10μ 1，注入液相色谱仪，测定；催乳丸处方中，白芍占处方总量的9.8%，制备中按每IOOg 生粉加炼蜜IlOg计算，每克样品约含白芍生粉46. 5mg，参照《中国药典》2005年版一部白 芍项下含量限度计算，每g样品含芍药苷应为0. 74mg,生粉入药按80%转移率计算，本品每 g含白芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0. 59mg,参照《中国药典》2005年版一部白芍项下 含量限度计算，故含量限度制定为每丸含白芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于5. 31mg。本发明的优点和积极效果是1、本发明的检测方法在《卫生部药品标准》中药成方制剂第一册原标准的基础上， 增加了对照药材和对照品的薄层鉴别检验方法，制定了高效液相色谱法进行含量测定的方 法，修订后的质量标准控制方法，提高了催乳丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质 量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。2、本发明参照《中国药典》2005年版一部等有关方法，增加了处方中穿山甲、黄芪、 麦芽、王不留行的显微鉴别方法；增加了当归与川芎、木香及黄芪的薄层鉴别方法；以芍药 苷为对照品，制定了白芍的含量测定方法，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制，可 更加准确地检验出假药和劣药，对中药现代化和中药走出国门具有重大意义。
图1为本发明供试样品木香检测中的自制薄层板上的色谱图在实验设定的色谱 条件下的检视图，从左至右依次为去氢木香内酯对照品(中检所，批号11525-200404)， 木香烃内酯对照品(中检所，批号115对-20050；3)，木香对照药材(中检所，批号 120921-200506)，样品 1 (批号200601)，样品 2 (批号20060 ，样品 3 (批号200603)，阴 性对照；图2为本发明供试样品木香检测中的自制薄层板上的色谱图在《中国药典》2005 年版一部的色谱条件下的检视图，从左至右依次为阴性对照，样品1(批号200601)，样品 2(批号200602)，样品3 (批号200603)，去木香对照药材(中检所)，木香对照药材(中检 所)；图3为本发明供试样品中木香检测中的在市售板(烟台产)上的检视图，从 左至右依次为阴性对照，样品1 (批号200601)，样品2 (批号200602)，样品3 (批号 200603)，去氢木香内酯对照品(中检所)，木香烃内酯对照品(中检所)；图4为本发明供试样品中当归及川芎在紫外光灯(365nm)下的检视图，从左至右 依次为阴性对照，样品1(批号200601)，样品2 (批号200602)，样品3 (批号200603)， 当归与川芎对照药材(中检所，批号120927-200512)、(中检所，批号:120917-200503)；图5、图6分别为本发明供试样品中黄芪检测中的薄层色谱图在日光和紫外光灯 365nm下的检视图，从左至右依次为样品1(批号200601)，样品2 (批号200602)，样品 3(批号200603)，黄芪甲苷对照品(中检所，批号110781-200512)，阴性对照；图7为本发明白芍液相色谱检测中对照品图谱图；图8为本发明白芍液相色谱检测中供试品图谱图；图9为本发明白芍液相色谱检测中阴性样品图谱。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的， 不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。中药制剂催乳丸的质量控制方法，其方法的步骤是(1)显微鉴别本品为生粉入药，参照《中国药典》2005年版一部等有关内容，对处方中穿山甲、黄 芪、麦芽、王不留行的显微特征进行了描述，置显微镜观察具体描述为“无定形碎块近无色 或淡黄色，有大小不一的类圆形或椭圆形空洞，碎块边缘常凹凸不平(穿山甲)。纤维成束 或散离，多碎断，壁厚，表面有纵裂纹，两端断裂成帚状或较平截(黄芪)。表皮细胞纵列，常 由1个长细胞与2个短细胞相间连接，长细胞壁厚，波状弯曲，木化(麦芽)。种皮表皮碎 片红棕色或黄棕色，细胞表面观垂周壁增厚，星角状或深波状弯曲，作镶嵌状排列(王不留 行)。(2)采用薄层色谱法，以去氢木香内酯和木香烃内酯为对照品，鉴别催乳丸处方中 的木香成分。①供试品溶液的制备取催乳丸样品2丸，剪碎，加三氯甲烷30ml，超声处理30分 钟，滤过，残渣备用，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的制备取去氢木香内酯对照品、木香烃内酯对照品，分别加三氯甲 烷制成每Iml各含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除木香外的其他药材，按原药品的工艺制 成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液；④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述四种溶液各2 6μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷丙酮=5 1为 展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰，结果见图1，另曾采 用《中国药典》2005年版一部中木香药材的薄层色谱条件试验，结果去氢木香内酯斑点不集 中，见图2，采用其他品牌的薄层板，以环己烷丙酮=5 1为展开剂重复试验，重复性好， 见图3。(3)采用薄层色谱法，以当归、川芎为对照药材，鉴别催乳丸处方中的当归及川芎 成分。①供试品溶液的制备取木香鉴别中的供试品溶液；②对照药材溶液的制备取当归及川芎对照药材各0. 5g，加三氯甲烷20ml，超声 处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；③阴性样品溶液的制备按处方配比，取除当归及川芎外的其他药材，按原药品的 工艺制成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液；④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸 取木香鉴别中的供试品溶液、上述对照药材及阴性样品溶液各2 4μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm 下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样 品对照无干扰，结果见图4。
(4)采用薄层色谱法，以黄芪甲苷为对照品，鉴别催乳丸处方中黄芪成分。①供试品溶液的制备取木香鉴别中的残渣，加氢氧化钠甲醇溶液50ml，加热 回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取两次，每次 30ml，合并正丁醇液，用氨试液振摇提取2次，每次25ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣 加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为 对照品溶液；③阴性样品溶液制备按处方配比，取除黄芪以外的其他药味，按原药品的工艺制 成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液；④薄层条件及结果照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验， 吸取上述三种溶液各2 6μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水= 13 7 2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显 色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点，结果阴性样品溶液无干扰，其中日光下检视图 见图5、紫外光灯(365nm)检视图见图6，经观察，可得到同样的效果。(5)采用高效液相法，以芍药苷为对照品，测定处方催乳丸中的白芍的含量。①色谱条件参照《中国药典》2005年版一部有关含量测定方法制定，用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈0.1%磷酸溶液=18 82;检测波长为230nm;柱 温40°C ；流速1. Oml/分钟，理论板数按芍药苷峰计算应不低于5000 ；②对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含 60 μ g的溶液，即得，结果见图7;③供试品溶液的制备取催乳丸样品适量，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入稀 乙醇25ml，称定重量，超声处理(功率MOW，频率45kHz) 30分钟，放冷，称定重量，用稀乙醇 补足减失的重量，摇勻，离心(3000转/分钟)10分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得，结 果见图8;④阴性样品溶液的制备按处方取除白芍的各味药材，按原药品的工艺制成丸剂， 再按②供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液，结果见图9 ；⑤检测及结果测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液以及使 用溶剂各ΙΟμΙ，注入液相色谱仪，测定；催乳丸处方中，白芍占处方总量的9.8%，制备中 按每IOOg生粉加炼蜜IlOg计算，每克样品约含白芍生粉46. 5mg，参照《中国药典》2005年 版一部白芍项下含量限度计算，每g样品含芍药苷应为0. 74mg,生粉入药按80%转移率计 算，本品每g含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于0. 59mg，参照《中国药典》2005年版一 部白芍项下含量限度计算，故含量限度制定为每丸含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于 5. 31mg0
权利要求
1.一种中药制剂催乳丸的质量控制方法，其特征在于其方法的步骤是(1)显微鉴别；(2)以去氢木香内酯和木香烃内酯为对照品，薄层色谱法鉴别催乳丸处方中是否含有 木香；(3)以当归及川芎为对照药材，薄层色谱法鉴别催乳丸处方中是否含有当归及川芎；(4)以黄芪甲苷为对照品，薄层色谱法鉴别催乳丸处方中是否含有黄芪；(5)以芍药苷为对照品，高效液相法测定催乳丸处方中的白芍含量。
2.根据权利要求1所述的中药制剂催乳丸的质量控制方法，其特征在于所述显微鉴 别为置显微镜下观察无定形碎块近无色或淡黄色，有大小不一的类圆形或椭圆形空洞， 碎块边缘常凹凸不平；纤维成束或散离，多碎断，壁厚，表面有纵裂纹，两端断裂成帚状或较 平截；表皮细胞纵列，常由1个长细胞与2个短细胞相间连接，长细胞壁厚，波状弯曲，木化； 种皮表皮碎片红棕色或黄棕色，细胞表面观垂周壁增厚，星角状或深波状弯曲，作镶嵌状排 列。
3.根据权利要求1所述的中药制剂催乳丸的质量控制方法，其特征在于所述薄层色 谱法鉴别催乳丸处方中的木香的步骤为①供试品溶液的制备取催乳丸样品2丸，剪碎，加三氯甲烷30ml，超声处理30分钟， 滤过，残渣备用，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的制备取去氢木香内酯对照品、木香烃内酯对照品，分别加三氯甲烷制 成每Iml各含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；③薄层条件及结果薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2 6μ1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以环己烷丙酮=5 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶 液，加热至斑点显色清晰，检测供试品溶液色谱中在对照品的斑点位置上是否显示有相同 的斑点，进而确定供试样品是否含有木香成分。
4.根据权利要求1所述的中药制剂催乳丸的质量控制方法，其特征在于所述薄层色 谱法鉴别催乳丸处方中的当归及川芎成分的步骤为①供试品溶液的制备取木香鉴别中的供试品溶液；②对照药材溶液的制备取当归及川芎对照药材各0.5g，加三氯甲烷20ml，超声处理 10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为对照药材溶液；③薄层条件及结果薄层色谱法试验，吸取木香鉴别中的供试品溶液及上述对照药材 各2 4μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，检测供试品溶液色谱中在对照品的斑点位置上是否 显示有相同的斑点，进而确定供试样品是否含有当归及川芎成分。
5.根据权利要求1所述的中药制剂催乳丸的质量控制方法，其特征在于所述薄层色 谱法鉴别催乳丸处方中的黄芪成分的步骤为①供试品溶液的制备取木香鉴别中的残渣，加氢氧化钠甲醇溶液50ml，回流1小 时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取两次，每次30ml，合 并正丁醇液，用氨试液振摇提取2次，每次25ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 2ml使溶解，作为供试品溶液；②对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；③薄层条件及结果薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各2 6μ 1，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=I3 7 2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视， 检测供试品溶液色谱中在对照品的斑点位置上是否显示有相同的斑点，进而确定供试样品 是否含有黄芪成分。
6.根据权利要求1所述的中药制剂催乳丸的质量控制方法，其特征在于所述采用高 效液相法，以芍药苷为对照品，测定催乳丸处方中白芍含量的方法为①色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈0.磷酸溶液= 18 82，检测波长为230nm，柱温40°C，流速1. Oml/分钟，理论板数按芍药苷峰计算应不 低于5000 ；②对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含60μg的 溶液，即得，并检测色谱图；③供试品溶液的制备取催乳丸样品适量，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入稀乙醇 25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇勻，离心 10分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得，并检测色谱图；④检测及结果测定分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液以及使用溶剂各10μ1，注 入液相色谱仪，测定；催乳丸处方中，白芍占处方总量的9. 8%，制备中按每IOOg生粉加炼 蜜IlOg计算，每克样品约含白芍生粉46. 5mg，参照《中国药典》2005年版一部白芍项下含 量限度计算，每g样品含芍药苷应为0. 7%ig，生粉入药按80%转移率计算，本品每g含白芍 以芍药苷C23H28O11计，不得少于0. 59mg，参照《中国药典》2005年版一部白芍项下含量限度 计算，故含量限度制定为每丸含白芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于5. 31mg。
全文摘要
本发明涉及一种中药制剂催乳丸的质量控制方法，步骤是首先进行显微鉴别；其次采用薄层色谱法，鉴别催乳丸处方中是否含有木香、当归及川芎以及黄芪成分；最后采用高效液相法，以芍药苷为对照品，测定处方催乳丸中的白芍含量。本发明的检测方法在《卫生部药品标准》中药成方制剂第一册原标准的基础上，增加了对照药材和对照品的薄层鉴别检验方法，制定了高效液相色谱法进行含量测定的方法，修订后的质量标准控制方法，提高了催乳丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争力、保证患者用药安全意义重大。
文档编号A61K35/36GK102038892SQ200910070909
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月22日 优先权日2009年10月22日
发明者刘淑, 耿彤, 贺云杰, 郑歆, 金兆祥 申请人:天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂