专利名称：：一种生眉液的制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种生眉液的制备方法，属化妆品领域。
背景技术：
：大青叶，维吾尔语称乌斯玛，是维吾尔族民间世世代代习用的一种生眉植物，学名口H蒋蓝(IsatistinctoriaL)新疆维吾尔族人几乎家家都在房前屋后种植大青叶(乌斯玛)，人们每天用其叶子挤汁涂抹女孩的双眉，使眉毛粗黑亮密，一直到成年，像天天洗脸一样，日复一日，年复一年，世代相传。这种传统的促进眉毛生长的技术和对眉毛的珍爱在我国各民族中绝无仅有的。随着人们生活水平的提高，人们对化妆品的追求也逐渐由安全性向功效性过渡，特别是对纯天然的功效性化妆品的需求，在国际上尤其受到极大关注。在经过多年维吾尔民间走访调查和经过大量的科学实验数据，依据自由基理论，证明大青叶(乌斯玛草)以水为溶剂的提取物和以乌斯玛为主的多种中药维吾尔药复方的提取物具有抗氧化的生物活性，有助于眉毛的生长。中国专利921148089研制了一种菘蓝眼部化妆品及其制备方法，该化妆品生眉笔因其具有鲜明的民族性、天然性和功效性，受到社会关注和消费者的青睐，显示出了巨大的市场潜力。近几年在全国市场的开拓中，特别是南方高温潮湿的环境中，该产品显示出了不稳定性。由于该产品生眉笔是水的提取物，含有大量杂质，主要是大分子的聚合鞣质，这种聚合鞣质的存在，不仅使有效成分无法检测出，而且在长期储存和高温气候条件下很不稳定，极易变色和分层。膜分离技术(包括微滤、超滤、纳滤和反渗透等)是利用天然或合成的具有选择透过性的膜，以外界能量或化学位差为推动力，对多种液体成分体系进行分离、分级、提纯和富积的技术，可以在原生物体系的环境下实现无相变纯化和浓縮，可以高效浓縮富集有效物，去除杂质。通过使用膜技术，在常温下实现了分离富集生眉液中的中药提取物的有效物，最大限度的去除鞣质等大分子杂质。使用此工艺生产的生眉液有效成分得到了很好的富集(产品使用HPLC法能检测到以吲哚苷为有效指标的成分)，并最大限度地去除了杂质，在高温高湿的环境中更稳定。药效学实验和临床实验都显示，产品的功效性得到了提升。
发明内容本发明目的在于，提供一种生眉液的制备方法，该方法是在中国专利921148089的基础上将水的提取物利用膜技术进一步研制而成，是将大青叶、黑种草子、何首乌、侧柏叶、诃子混合，加水，提取，合并提取液，静置过夜，得上清液；再加水稀释，用复合聚丙烯的中空纤维膜在室温进行超滤，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓縮，将浓縮液中，依次加入超微活性炭、汉生胶粉、甘油、防腐剂、香精，搅拌混合均匀，即可得到生眉液。通过该方法获得的生眉液能解决眉毛稀少、掉眉和缺眉广大群体的需求，满足人们对美和高精神质量生活的追求。从而解决在南方高温潮湿的环境中不稳定，极易变色和分层的问题。该生眉液为黑绿色的液体，具有独特的清香气味。本发明所述的一种生眉液的制备方法，按下列步骤进行a、将大青叶250-500g、黑种草子100-300g、何首乌150-400g、侧柏叶150-400g、诃子100-300g粉碎成细粉混合，加入8倍量的水，提取3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，静置过夜，得上清液；b、再加3-6倍量的水稀释，用复合聚丙烯的中空纤维膜在压力0.06-0.12MPa室温进行超滤，重复2-5次，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓縮；c、将步骤b浓縮液中，依次加入超微活性炭7-12g、汉生胶粉l-3g、甘油8-12ml、防腐剂15-30ml、香精0.2-0.8ml，搅拌24-48小时，即可得到生眉液。步骤b复合聚丙烯的中空纤维膜规格为6000-50000。步骤b纳滤膜浓縮液与原料药的体积比为1:1.步骤c中汉生胶粉用50ml水溶胀。本发明所述的一种生眉液的制备方法，通过该方法获得的生眉液进行了生眉的应用的动物试验实验材料实验动物近交系C57BL/6小鼠(全身为黑色毛发小鼠)，雌性，68周龄，体重1520g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心购入，动物许可证号SCXK-(军)2007-004。选择皮肤粉红、毛发处于休止期的小鼠。受试物给药组(生眉液)生眉液来源通过本发明方法获得的生眉液。对照组(蒸馏水)蒸馏水。阳性对照组(章光101):购入市售生发商品(章光101育发剂，批号20080701，北京章光101科技发展有限公司)。试剂硫化钠天津市化学试剂六厂三分厂，批号20061106;甲醛西安化学试剂厂，批号070530。试验方法生长期的诱导给药前24小时将小鼠背部用8%的硫化钠水溶液脱毛，去毛面积约为4cm2，2分钟后用湿布擦去脱落的毛发，保证局部毛发完全脱掉并无损伤。动物分组及给药取脱毛小鼠24只，随机分为对照组(蒸馏水)、阳性对照组(章光101)和给药组(生眉液)三组，每组8只，各组均在脱毛部位直接涂抹对照组(蒸馏水)、阳性对照组(章光IOI)和给药组(生眉液)，每天定时定量涂抹一次，每次涂抹约O.20ml，每天观察，连续23天。观察指标每天观察小鼠皮色变化，分别记录每只小鼠脱毛区皮肤颜色从粉红到开始变黑的时间(天)；皮肤开始变黑到毛发长出皮肤表面的时间(天)。病理组织学检查育毛实验结束后，以断椎法处死小鼠；在各组小鼠背部的涂抹部位切取皮肤标本；按常规病理学切片检验方法，用10%的甲醛溶液固定，脱水，石蜡包埋切片，苏木精_伊红染色；光镜下观察小鼠皮肤毛囊的组织学变化，并计数真皮浅层毛囊数。统计学处理实验数据以均数±标准差(；±S)表示，采用组间t检验。结果小鼠背部脱毛区皮肤颜色变化对照组(蒸馏水)小鼠于脱毛后第9至10天皮肤由粉红色变为黑色(即由休止期进入生长期)，脱毛后第14天毛发长出皮表，第23天部分小鼠皮肤颜色变为灰黑色(即由生长期进入退行期，即毛发生长缓慢)；阳性对照组(章光101)小鼠于脱毛后第7至8天皮肤由粉红色变为黑色(即由休止期进入生长期)，脱毛后第10天毛发长出皮表，第23天小鼠皮肤仍为黑色(生长期，即毛发持续生长)。给药组(生眉液)小鼠于脱毛后第6至7天皮肤由粉红色变为黑色(即由休止期进入生长期)，脱毛后第9天毛发长出皮表，第23天小鼠皮肤仍为黑色(生长期，即毛发持续生长)。统计学结果表明给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，给药组可非常显著縮短C57BL/6小鼠脱毛后皮肤颜色变黑的时间(P<0.01);给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，给药组(生眉液)可显著縮短皮肤开始变黑到毛发长出表皮的时间(P<0.05)。实验结果见表1。表1生眉液对小鼠背部脱毛区皮肤颜色的变化的影响G士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，**P<0.01*P<0.05，病理组织学检查组织病理学检查结果表明，给药组(生眉液)、对照组(蒸馏水)和阳性对照组(章光101)小鼠背部皮肤结构均完整，表皮未见坏死；真皮未见炎细胞浸润；各组均见结构正常的毛囊；以100倍视野计算数目，给药组(生眉液)和阳性对照组(章光101)毛囊数显著多于对照组(蒸馏水)。统计结果表明给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，给药组(生眉液)真皮浅层毛囊数明显增加，(P<0.05)见表2。表2生眉液对小鼠背部实验区皮肤毛囊计数G±SD)组别n毛囊计数(个)对照组863.9±5.4阳性对照组871.5±7.8*给药组_^_73.0±9.8*_注给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，给药组(生眉液)毛囊数显著多于对照组(蒸馏水)*P<0.05;给药组(生眉液)与阳性对照组(章光101)毛囊数没有显著性差异。C57BL/6小鼠育毛后皮肤病理学观察实验结论结论给药组(生眉液)对C57BL/6小鼠毛发生长影响实验，结果表明给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，给药组(生眉液)可非常显著的縮短C57BL/6小鼠脱毛后皮肤颜色变黑的时间(即促进生长期黑素的生成)；给药组(生眉液)还可显著縮短皮肤开始变黑到毛发长出皮肤表面的时间。证实给药组(生眉液)有显著促进毛发生长的作用；组织病理学检查结果表明，给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)比较，小鼠背部皮肤结构完整；表皮未见坏死；真皮未见炎细胞浸润；给药组与对照组均见结构正常的毛囊；给药组(生眉液)毛囊明显多于对照组(蒸馏水)。提示给药组(生眉液)对皮肤用药安全有效。小鼠育毛实验结束后，断椎处死取背皮，背皮组织经病理学检查结果表明，给药组(生眉液)与对照组(蒸馏水)和阳性对照组(章光101)比较小鼠背部皮肤结构完整，表皮未见坏死；真皮未见炎细胞浸润；均清晰可见结构正常的毛囊；给药组(生眉液)毛囊明显多于对照组(蒸馏水)。提示给药组(生眉液)对皮肤用药安全且毛囊明显多于其他组。通过本发明所述方法获得的生眉液作为制备生眉应用的临床试验实验材料6受试者眉毛稀疏的自愿受试者受试物生眉液通过本发明所述方法获得。试验方法眉毛稀疏的自愿受试者10人，每晚洁面后，用手指揉搓眉部1-2分钟后将受试药品顺着眉毛的方向涂抹2次，使用期为23天，观察用药前后眉毛的长度、密度和色泽的变化，对眉毛的长度、密度和色泽进行评分，分别以0分(差)、2分(一般)、4分(较好)和6分(很好)进行评价。统计学处理实验数据以均数±标准差(；±S)表示，采用组内t检验。表3生眉液对眉毛生长的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注给药(生眉液)23天后与给药(生眉液)0天比较，*P<0.05;**P<0.01。受试物有效性的评价根据受试物对眉毛长度、密度和色泽的评分，受试后23天每个受试者总的评分Tn减去0天总的评分T。(T=Tn-T。)①T《2为无效；②2<T《6为有效；③T>6为治愈，有效率％=(有效+治愈)/10X100%，结果无效3例，有效4例，治愈3例，有效率为70%。实验结论给药(生眉液)23天后与给药(生眉液)0天比较，给药(生眉液)23天后眉毛长度显著多于给药(生眉液)0天*<0.05;给药(生眉液)23天后与给药(生眉液)O天比较，有非常显著地促进眉毛密度增加和色泽变黑的功效。**P<0.01。给药(生眉液)23天后，对眉毛长度、密度和色泽的总有效率为70%。具体实施方式实施例1a、将大青叶250g、黑种草子300g、何首乌400g、侧柏叶400g、诃子300g粉碎成细粉混合，加入8倍量的水，提取3次，每次1.5小时，合并提取液，静置过夜，得上清液；b、再加3倍量的水稀释，用复合聚丙烯规格为6000的中空纤维膜在压力0.06MPa室温进行超滤，重复2次，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓縮，浓縮液与原料药的体积比为i:ic、将步骤b浓縮液中，依次加入超微活性炭7g、汉生胶粉lg用50ml水溶胀、甘油8ml、防腐剂15ml、香精0.2ml，搅拌24小时，即可得到生眉液，该生眉液为黑绿色的液体，具有独特的清香气味实例2a、将大青叶350g、黑种草子150g、何首乌250g、侧柏叶250g、诃子150g粉碎成细粉混合，加入8倍量的水，提取3次，每次1.0小时，合并提取液，静置过夜，得上清液；b、再加4倍量的水稀释，用复合聚丙烯规格为10000的中空纤维膜在压力O.08MPa室温进行超滤，重复3次，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓縮，浓縮液与原料药的体积比为i:i;c、将步骤b浓縮液中，依次加入超微活性炭9g、汉生胶粉2g用50ml水溶胀、甘油10ml、防腐剂20ml、香精0.4ml，搅拌30小时，即可得到生眉液，该生眉液为黑绿色的液体，具有独特的清香气味。实施例3a、将大青叶500g、黑种草子100g、何首乌150g、侧柏叶150g、诃子100g粉碎成细粉混合，加入8倍量的水，提取3次，每次0.5小时，合并提取液，静置过夜，得上清液；b、再加6倍的水稀释，用复合聚丙烯规格为50000的中空纤维膜在压力0.12MPa室温进行超滤，重复4次，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓縮，浓縮液与原料药的体积比为i:i;c、将步骤b浓縮液中，依次加入超微活性炭12g、汉生胶粉3g用50ml水溶胀、甘油10ml、防腐剂30ml、香精0.8ml，搅拌48小时，即可得到生眉液，该生眉液为黑绿色的液体，具有独特的清香气味。实施例4a、将大青叶430g、黑种草子250g、何首乌350g、侧柏叶350g、诃子250g粉碎成细粉混合，加入8倍量的水，提取3次，每次1.2小时，合并提取液，静置过夜，得上清液；b、再加5倍量的水稀释，用复合聚丙烯规格为30000的中空纤维膜在压力0.lOMPa室温进行超滤，重复4次，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓縮，浓縮液与原料药的体积比为i:i;c、将步骤b浓縮液中，依次加入超微活性炭10g、汉生胶粉2.5g用50ml水溶胀、甘油12ml、防腐剂25ml、香精0.6ml，搅拌36小时，即可得到生眉液，该生眉液为黑绿色的液体，具有独特的清香气味。8权利要求一种生眉液的制备方法，其特征在于按下列步骤进行a、将大青叶250-500g、黑种草子100-300g、何首乌150-400g、侧柏叶150-400g、诃子100-300g粉碎成细粉混合，加入8倍量的水，提取3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，静置过夜，得上清液；b、再加3-6倍量的水稀释，用复合聚丙烯的中空纤维膜在压力0.06-0.12MPa室温进行超滤，重复2-5次，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓缩；c、将步骤b浓缩液中，依次加入超微活性炭7-12g、汉生胶粉1-3g、甘油8-12ml、防腐剂15-30ml、香精0.2-0.8ml，搅拌24-48小时，即可得到生眉液。2.根据权利要求l所述方法，其特征在于步骤b复合聚丙烯的中空纤维膜规格为6000-50000。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤b纳滤膜浓縮液与原料药的体积比为i:L4.根据权利要求1所述方法，其特征在于步骤c中汉生胶粉用50ml水溶胀。全文摘要本发明涉及一种生眉液的制备方法，该方法是将大青叶、黑种草子、何首乌、侧柏叶、诃子混合，加水，提取，合并提取液，静置过夜，得上清液；再加水稀释，用复合聚丙烯的中空纤维膜在室温进行超滤，合并超滤液，再用纳滤膜进行浓缩，将浓缩液中，依次加入超微活性炭、汉生胶粉、甘油、防腐剂、香精，搅拌混合均匀，即可得到生眉液。通过该方法获得的生眉液能解决眉毛稀少、掉眉和缺眉广大群体的需求，满足人们对美和高精神质量生活的追求。该生眉液为黑绿色的液体，具有独特的清香气味。文档编号A61K8/97GK101716129SQ20091011359公开日2010年6月2日申请日期2009年12月24日优先权日2009年12月24日发明者于萍,井立萍,刘庆华申请人:刘庆华;井立萍;于萍