专利名称：一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的方法
一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的方法
一、 所属领域
本发明涉及一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的方法，属于天然产物化学 研究领域。
二背景技术：
白桦树皮化学成分复杂，含三萜类物质(包括桦木醇、桦木酸、羽扇豆醇、白桦烯三醇)、 各种高级脂肪酸、氨基酸、糅质、酚类物质、还原性物质、多糖类、各种微量元素等。白桦 树皮的药用价值早在明代就有记录。文献调研表明从白桦树皮中提取的白桦三蔽类粗提物对 多种肿瘤有较好的抑制作用，且具有高效低毒的良好效果，尤其是对B16黑色素瘤和S180肉 瘤的抑瘤效果最好。而更多的研究是有关桦木酸单体的抗肿瘤效果及有机合成方法，但桦木 酸单体在植物中普遍含量颇低，提取分离或者有机合成复杂，成本高，产量低，因而大大限 制其开发。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺流程简单，生产成本低，生产效率高，目标成分转移率高 的白桦树皮抗肿瘤有效部位的提取分离方法。 本发明的实现方法如下
(1) 取桦树皮最粗粉，加入8-14倍量80%或以上浓度的乙醇，加热回流提取2-4次，每次 30min-60min，合并提取液；
(2) 提取液减压回收乙醇至较难浓縮，合并浓縮液，继续于敞口容器中加热尽可能挥尽乙醇， 加入过程中可加入水调节，至较难进行，放凉沉淀，加入0.5-5倍量水，进一步沉淀，过 滤或者离心取沉淀，即为提取浓縮物；
(3) 提取浓缩物用5-50倍量水调节混悬后，分别用0.5-5倍量二氯甲烷萃取3-5次，合并萃 取液；
(4) 二氯甲烷萃取液用0.2-2倍量1%-10%的NaOH/KOH溶液进行沉淀，回收位于 下层二氯甲垸，取混悬有沉淀的上层进行离心或者过滤，得沉淀，用水洗去残余的二氯甲 烷和碱液；
(5) 然后用酸处理，充分研碎并搅拌均匀使体系充分反应，使最终pH〈3，过滤或者离心，水 洗沉淀至近中性，干燥后即得产品，用HPLC法测定干燥产品中桦木酸的含量不低于20。/0。
具体实施例方式
31、 实施例l:
取白桦树皮最粗粉200g,用2000m]90。/。的乙醇回流提取2次，每次lh，合并提取液，减压回收乙醇得浓縮液，进一歩蒸发乙醇，蒸发过程中加入适量水调节，浓縮液放凉后沉淀大量析出，加入约等量水进一歩沉淀，抽滤得提取浓縮物；提取浓縮物用IO倍量水调节，用i倍量二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，然后用1/3倍量W的NaOH溶液进行萃取沉淀，回收二氯甲烷后，取上层混悬有沉淀的水层，3000rpm下离心10min，得到沉淀，水洗残余二氯甲烷和碱液，再用约6M盐酸调节酸性至p^2左右，水洗沉淀至近中性，80'C烘箱中干燥至恒重，得到的产品称重为11.77g，其中桦木三萜酸类含量为60. 74%，桦木酸含量为21. 78%。
2、 实施例2:
本实施例与实施例1所不同的是将NaOH换成KOH，结果得到产品11. 46g，其中桦木三萜酸类含量为60.68%，桦木酸含量为21. 71%。
3、 实施例3:
本实施例与实施例1所不同的是将所用桦树皮最粗粉的量提高到4kg，并分别用40L和50L的90%乙醇回流两次，结果得到产品218. 96g,其中桦木三萜酸类含量为60. 70%，桦木酸含量为21. 86%。
权利要求
1、一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的方法，具体步骤如下(1)取白桦树皮最粗粉，加入8-14倍量80％或以上浓度的乙醇，加热回流提取2-4次，每次30min-60min，合并提取液；(2)提取液减压蒸馏回收乙醇至较难浓缩，合并浓缩液，继续置于敞口容器中加热尽可能挥尽乙醇，加热过程中可加入水调节，至较难进行，放凉沉淀，加入0.5-5倍量水，进一步沉淀，过滤或者离心取沉淀，即为提取浓缩物；(3)提取浓缩物用5-50倍量水调节混悬后，用0.5-5倍量二氯甲烷萃取3-5次，合并萃取液；(4)二氯甲烷萃取液用0.2-2倍量1％-10％的NaOH/KOH溶液进行沉淀，回收位于下层的二氯甲烷，取混悬有沉淀的上层液进行离心或过滤，得沉淀，用水洗去沉淀中残余的二氯甲烷和碱液；(5)然后用酸处理沉淀，充分研碎并搅拌均匀使体系充分反应，使最终pH<3，过滤或离心，水洗沉淀至近中性，干燥后即得产品，用HPLC法测定干燥产品中桦木酸的含量不低于20％。
2、 根据权力要求1的方法，其特征在于白桦树皮回流提取时所用的乙醇浓度大于或等于80%。
3、 根据权力要求l的方法，其特征在于该方法中所提及的过滤和离心被视为等同效果。
4、 根据权力要求l的方法，其特征在于该方法中所用的萃取剂为二氯甲烷。
5、 根据权力要求1的方法，其特征在于该方法中二氯甲烷萃取液用0. 2-2倍量1%-10%的 NaOH/KOH溶液进行沉淀。
6、 根据权力要求l的方法，其特征在于步骤(5)中用酸处理沉淀后，溶液pH〈3。
7、 根据权力要求l的方法，其特征在于所得到的有效部位中桦木酸的含量不低于20%。
全文摘要
本发明公开了一种从白桦树皮中提取分离抗肿瘤有效部位的工艺路线，步骤如下(1)将粉碎后的白桦树皮用乙醇提取数次，合并提取液；(2)过滤或离心得浓缩物；(3)水调节后，用适量二氯甲烷萃取数次，合并萃取液；(4)用NaOH/KOH溶液进行沉淀，过滤或离心沉淀部分，水洗沉淀；(5)加入酸溶液，搅拌调成酸性(pH＜3)，水洗沉淀至中性，干燥，即得抗肿瘤有效部位，主要物质为桦木三萜酸类，主要成分为桦木酸。该方法能够用于工业生产。
文档编号A61K36/185GK101485703SQ20091011994
公开日2009年7月22日 申请日期2009年2月27日 优先权日2009年2月27日
发明者夏爱华, 岩 李, 玮 李, 念 辛, 边学文, 郑春巍, 陈平华 申请人:李 岩;陈芝芳;苗 壮