专利名称：用tlr7活化剂对膀胱疾病的治疗的制作方法
用TLR7活化剂对膀胱疾病的治疗相关申请的交叉引用本申请要求2008年2月7日提交的系列号为61/026，999的美国专利申请的优先 权权益，该申请的公开内容以引用的方式纳入本文中。政府权力声明本发明——至少部分——是在美国联邦政府的资助(美国国家变态反应与传染性 病研究所的拨款AI050564)下进行的。美国政府享有本发明的某些权利。
背景技术：
在过去10年中，对于微生物病原体的天然免疫识别的分子机制已经有了很多了 解。一般公认的是，许多体细胞表达一系列不依赖适应性免疫系统而检测潜在病原体的模 式识别受体(Janeway et al.，200 。这些受体被认为与称为病原体相关分子模式(PAMP) 的微生物组件相互作用。PAMP的实例包括肽聚糖、格兰氏阳性细胞壁的脂磷壁酸、甘露糖 (其在微生物碳水化合物中常见但在人中罕见)、细菌DNA、病毒双链RNA和真菌细胞壁的葡 聚糖。PAMP通常满足某些标准，包括(a)它们为微生物但不为其哺乳动物宿主所表达，(b) 在多种病原体中具有结构保守性，和(c)激活天然免疫的能力。已发现Toll样受体(TLR)在PAMP的检测和对微生物感染的早期应答中起关键 作用(Underhill et al.，2002)。已经识别出10种哺乳动物TLR和若干种它们的激动剂。 例如，TLR7和TLR9分别识别并应答咪喹莫特(imiquimod)和免疫刺激性CpG寡核苷酸 (ISS-ODN)。合成免疫调节物R-848 (瑞喹莫德(resiquimod))激活TLR7和TLR8。内源性配体以及合成小分子可激活某些TLR通路的发现激发了开发用于免疫应 答相关疾病的新疗法的兴趣。TLR配体通过触发抗原呈递细胞尤其是树突细胞的成熟程 序——包括HLA和共刺激分子表达的上调以及促炎细胞因子例如TNF-α、IL_6、IL-12和 IFN-α的分泌——而控制其活化(Manley，2002)。尽管TLR激活启动了共同信号转导级联(包括连接蛋白MyD88、转录因子NF_kB、 促炎性细胞因子和效应细胞因子)，然而某些细胞类型趋于产生特定的TLR。例如，TLR7和 TLR9主要见于树突细胞(DC)和B淋巴细胞(在人中；小鼠巨噬细胞表达TLR7和TLR9)的 核内体的内表面。另一方面，TLR8见于人血单核细胞(Hornung et al.，2002)。尽管TLR的激动剂具有很大的治疗潜力，然而它们的应用受到与促炎细胞因子的 释放和全身性扩散相关的副作用所限制。因此，TLR7配体的主要体内应用是作为局部涂 敷用抗病毒或抗肿瘤试剂，或作为少量使用的肌内注射的免疫佐剂(Ambach et al. ,2004； Hemmi et al. ，2002)。
发明内容
本发明提供一种治疗浅表性膀胱癌和诸如间质性膀胱炎或膀胱过度活动症等的 炎性膀胱疾病的方法。所述方法包括给予合成TLR7活化剂(激动剂)，所述合成TLR7激动 剂被制成制剂以最优化所述合成TLR7激动剂在膀胱黏膜中相对于在血液中的浓度，或被修饰以最优化所述合成TLR7激动剂在膀胱黏膜中相对于在血液中的浓度，或与另一种治 疗共同给予以最优化所述合成TLR7激动剂在膀胱黏膜中相对于在血液中的浓度。例如，将 所述合成TLR7激动剂制成制剂、对其进行修饰或与另一种治疗共同给予，从而使膀胱黏膜 浓度较血液浓度高至少2倍、5倍或更多倍例如至少10倍。例如，如果所述TLR7激动剂在 血液中的浓度大体在约IOnM到约IOOOnM的范围内，那么其在膀胱中的浓度为约IOOnM到 约10，000nM。在一个实施方案中，将TLR7激动剂与局部应用的超声波、电磁辐射或电穿孔 或其他电基药物递送技术、局部化学磨蚀(local chemical abrasion)或局部物理磨蚀一 起给予，以打破膀胱渗透性屏障。在一个实施方案中，将TLR7激动剂结合局部应用的表面 活性剂给药以增强TLR7激动剂通过膀胱黏膜的渗透性。在一个实施方案中，所述TLR激动 剂，其制剂或其缀合物增强了核内体摄取(例如，由于粒度)，诱导受体多聚化，和/或提供 持续释放。具体地，TLR7的局部活化可破坏恶性细胞的生长和存活所需的癌细胞-基质相 互作用并可诱导细胞凋亡。在一个实施方案中，所述制剂或缀合物与对应的TLR7激动剂(非经配制或非轭 合)相比效力增强——例如如通过细胞因子诱导检测在体外或体内所测定的；全身性扩散 降低——例如如使用体内动物模型以及膀胱内或其他局部递送方法所测定的；和/或活性 /安全性比提高——使用体内动物模型以及膀胱内或其他局部递送方法所测定的。在一个实施方案中，所述TLR7激动剂可例如通过分散在乳剂中、封装在纳米 颗粒或脂质体中、聚集在纳米颗粒或纳米晶体中，或与蛋白或脂质化学结合(chemical tethering)而被制成制剂或经化学修饰，从而使系统性吸收最小化(参见例如美国专利申 请系列号60/710，337 ；60/809, 870 ；60/809, 879和10/824，833，这些申请以引用的方式纳 入本文中)。在一个实施方案中，用于本发明的TLR7激动剂具有下式I或为其可药用盐
权利要求
1.一种抑制或治疗哺乳动物中的浅表性膀胱癌的方法，包括将有效量的包含TLR7激 动剂的组合物通过膀胱内途径对患有浅表性膀胱癌的哺乳动物给药，所述激动剂被制成制 剂或经化学修饰以抑制所述激动剂的系统吸收或增加所述激动剂在膀胱黏膜中的局部浓度。
2.权利要求1的方法，其中所述组合物包含经化学修饰的TLR7激动剂。
3.权利要求2的方法，其中所述修饰为所述TLR7激动剂与蛋白或脂质的共价连接。
4 权利要求1-3任一项的方法，其中所述组合物包含乳剂。
5.权利要求1-4任一项的方法，其中所述组合物包含纳米颗粒。
6.权利要求1-5任一项的方法，其中所述组合物包含脂质体。
7.权利要求1-6任一项的方法，其中所述组合物包含纳米晶体。
8.权利要求1-7任一项的方法，其中导管被用于给予所述组合物。
9.权利要求1-8任一项的方法，还包括对所述膀胱应用超声波。
10.权利要求1-9任一项的方法，还包括对所述膀胱应用电磁辐射。
11.权利要求1-10任一项的方法，还包括对所述膀胱应用表面活性剂。
12.权利要求1-11任一项的方法，其中所述哺乳动物为人。
13.权利要求1-12任一项的方法，其中所述哺乳动物的肥大细胞的数量增加。
14.权利要求1-13任一项的方法，其中所述哺乳动物的尿中的神经激肽的水平升高。
15.权利要求1-14任一项的方法，其中对所述哺乳动物进行了经尿道切除术。
16.一种抑制或治疗哺乳动物中的浅表性膀胱癌的方法，包括将有效量的含有TLR7激 动剂的组合物通过膀胱内途径对患有浅表性膀胱癌的哺乳动物给药，并与增加所述激动剂 在膀胱黏膜中的局部浓度的治疗相结合。
17.权利要求16的方法，其中所述治疗包括对所述膀胱应用超声波。
18.权利要求16或17的方法，其中所述治疗包括对所述膀胱应用电磁辐射。
19.权利要求16-18任一项的方法，其中所述治疗包括对所述膀胱应用表面活性剂。
20.权利要求16-19任一项的方法，其中所述哺乳动物为人。
21.权利要求16-20任一项的方法，其中所述哺乳动物的肥大细胞的数量增加。
22.权利要求16-21任一项的方法，其中所述哺乳动物的尿中的神经激肽的水平升高。
23.权利要求16-22任一项的方法，其中对所述哺乳动物进行了经尿道切除术。
24.权利要求1-15任一项的方法，其中所述TLR激动剂被制成选自下述酸中的一种酸 的盐盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、 苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、亚甲基双羟萘酸、马来酸、丁酮二酸、苯乙酸、谷氨酸、苯 甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺 酸、草酸和羟乙磺酸。
25.权利要求16-23任一项的方法，其中所述TLR激动剂被制成选自下述酸中的一种酸的盐盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、 苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、亚甲基双羟萘酸、马来酸、丁酮二酸、苯乙酸、谷氨酸、苯 甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺 酸、草酸和羟乙磺酸。
26.TLR激动剂在制造以有效量抑制或治疗哺乳动物中的浅表性膀胱癌的药剂中的应
27.权利要求沈的应用，其中所述TLR激动剂被制成选自下述酸的一种酸的盐盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒 石酸、柠檬酸、抗坏血酸、亚甲基双羟萘酸、马来酸、丁酮二酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨 酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟 乙磺酸。
全文摘要
本发明提供一种使用某些Toll样受体(TLR)激动剂治疗浅表性膀胱癌和炎性膀胱疾病的方法。
文档编号A61K9/107GK102088974SQ200980112411
公开日2011年6月8日 申请日期2009年2月6日 优先权日2008年2月7日
发明者D·A·卡森, L·M·莱尼 申请人:加利福尼亚大学校务委员会, 泰勒麦迪克斯公司