专利名称：蟾毒它灵在制备治疗颅内肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及蟾毒它灵及其组合物的新用途，具体是涉及蟾毒它灵及其组合物在制备治疗颅内肿瘤药物中的应用。
背景技术：
颅内肿瘤又称脑肿瘤，是临床常见疾病，一般分为原发和继发两大类。原发性颅内肿瘤可发生于脑组织、脑膜、颅神经、垂体、血管残余胚胎组织等。继发性肿瘤指身体其它部位的恶性肿瘤转移或侵入颅内形成的转移瘤。脑肿瘤每年的发病率在我国为4-10万， 近年来，颅内肿瘤发病率呈上升趋势，据统计，颅内肿瘤约占全身肿瘤的5%，占儿童肿瘤的 70 %，而其它恶性肿瘤最终会有20-30 %转入颅内，由于其膨胀的浸润性生长，在颅内一旦占据一定空间时，不论其性质是良性还是恶性，都势必使颅内压升高，压迫脑组织，导致中枢神经损害，危及患者生命。颅内肿瘤可发生于任何年龄，以20-50岁为最多见。少儿以颅后窝及中线肿瘤较多见，主要为髓母细胞瘤，颅咽管瘤及室管膜瘤。成人以大脑半球胶质瘤为最多见，如星形细胞瘤、胶质母细胞瘤、室管膜瘤等，其次为脑膜瘤、垂体瘤及颅咽管瘤、 神经纤维瘤、海绵状血管瘤、胆脂瘤等。目前，国内外对颅内肿瘤的治疗多采用手术、化疗、放疗、X刀、Y刀等，但大多难以治愈。恶性肿瘤病程短，发展快，根据恶性程度高低手术切除的多少或放化疗的敏感度， 复发有早有晚，生长在脑干、丘脑等重要部位的肿瘤难以手术或不能手术；X刀、放射等治疗后的肿瘤可有缩小或短时间内控制增长，以后瘤体不再生长、复发。生长在脑干等重要部位的脑瘤手术只能部分或大部分切除，手术后瘤体还会再复发、再生长。颅内恶性肿瘤手术后放、化疗平均存活率不足一年。偏良性的胶质瘤，垂体瘤、颅咽管瘤、胆脂瘤等颅内良性肿瘤手术不易切除干净，Y刀、X刀、放射治疗并不可能彻底杀死肿瘤，因此大部分患者手术后仍然会再复发。除此之外作为化疗手段，现有的化疗药物因多数不能有效通过血脑屏障 (BloodBrain Barrier, BBB)，因此也就不能有效发挥治疗颅内肿瘤的作用。中药蟾酥及蟾酥类制剂在临床中用于治疗肿瘤多有报道，主要报道用于治疗肺癌、肝癌、消化道肿瘤、白血病、宫颈癌及阴茎癌、乳腺癌及皮肤癌等。对蟾酥的活性成分的研究也十分广泛，但大部分研究局限于蟾毒灵、脂蟾毒配基、华蟾素毒基等。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是公开蟾毒它灵在制备治疗颅内肿瘤药物中的应用， 以满足临床应用的需要。蟾毒它灵，是从中药蟾酥或蟾皮以及蟾蜍分泌物中提取分离得到的一种化合物， 其结构式为
所述蟾毒它灵可采用文献报道的方法进行制备(杨秀伟等，华蟾毒精和羟基华蟾毒精的人肠内细菌代谢研究[J]·北京大学学报(医学版)，2001，33(3) =199-204.；张英等.中华大蟾蜍皮的化学成分[J].沈阳药科大学学报，2007，M (8) :484-487.),或者可采用商业化的产品，如J&K CHEMICAL LTD.公司提供CAS号为471-95-4的产品。发明人发现，蟾毒它灵体外具有很好的抑制脑肿瘤细胞生长的活性，动物给药研究发现，蟾毒它灵可以很好透过血脑屏障，并且脑内药物浓度高于有效药物浓度数倍，因此可将蟾毒灵及其组合物作为活性成分用以制备治疗脑部肿瘤药物。可以以组合物的形成，通过口服、静脉注射或者是透皮渗透方式，施加于需要治疗的患者，剂量一般为0. 05 ;3mg/天/Kg，具体可根据病人的病情、年龄等，由医师决定；所述组合物，包括治疗有效量的蟾毒它灵和医药学上可接受的载体，所述载体包括稀释剂、赋形剂如水等，填充剂，如淀粉、蔗糖等，粘合剂，如纤维素衍生物明胶、聚乙烯吡咯烷酮等，润滑剂，如滑石粉等。含有蟾毒它灵的组合物中，蟾毒它灵的重量含量为0. 01% 99. 9% ；优选的重量含量为0. 99. 0%。可采用本领域公知的方法，将含有蟾毒它灵的组合物，制备成为粉针剂、颗粒剂、 胶囊、膏剂、霜剂、透皮贴剂或其他口服剂。蟾毒它灵体外抗肿瘤实验证明，蟾毒它灵对人胶质瘤及其它颅内肿瘤细胞株具有较强的抑制活性，IC50在50 200ng/ml，并且具有较好的量效关系。实验结果显示蟾毒它灵的抑制肿瘤生长效果优于临床现在应用的药物。动物脑内药物浓度均高于起效药物浓度，具有很大开发应用前景。
具体实施例方式实施例1化合物蟾毒它灵的分离精制将蟾酥药材敲碎后利用粉碎机打成细小颗粒，称取300g置于5L圆底烧瓶中，加入 3L体积浓度为95%的乙醇，水浴加热回流他，提取液过滤；药渣再加5L体积浓度为95%的乙醇同上操作，共提取3次，合并全部滤液在55°C水浴旋转浓缩至约250ml时，转移至大梨型瓶中再加入500ml纯水，加入500ml氯仿，盖塞振摇并超声2h，放置过夜分层，分取氯仿层；剩余水层再加入氯仿同上操作，共萃取多次。合并全部氯仿层减压浓缩至干，得固体。取氯仿萃取物，用适量氯仿溶解后加薄层层析硅胶G拌样，用硅胶H上柱，用石油醚和乙酸乙脂梯度洗脱层析分离，得到多个流份。将含有蟾毒它灵的流份以体积浓度55%的甲醇为流动相进行分离收集相应组分并浓缩至干，即可获得蟾毒它灵纯品。实施例2配制蟾毒它灵注射液配方(以重量比例计)蟾毒它灵1-10份，药用级乙醇5 100份Cremophor EL 5 100 份.维生素C0.001 2份.采用公知的方法，配制成为注射液。实施例3片剂(以重量比例计)蟾毒它灵1-10份淀粉5-100 份轻丙甲纤维素 0.1-10份微粉娃胶0. 01-0. 5份硬脂酸镁0. 01-0. 5份采用公知的方法，制备成为片剂。实施例4蟾毒它灵对人脑胶质瘤U-251的抑制作用采用文献(黄银久，等'‘SRB法和MT法抗肿瘤药物蹄选结果相关性研究.‘‘生物 学杂志(04) :13-16.)报道相同的SRB法，对人脑胶质瘤U-251进行体外抑制活性测试。人脑胶质瘤U-251細胞株由中国科学院上海细胞库提供。蟾毒它灵由J&K CHEMICAL LTD提供。试验药物将蟾毒它灵溶解在甲醇或DMSO中配制成不同浓度的溶液，其中，蟾毒 它灵由J&K CHEMICAL LTD提供。将不同浓度的药物分别加样测其对人脑胶质瘤U-251细 胞生长的抑制活性，加样量不超过1%。试验结果见表1。采用SRB法，对人脑胶质瘤U-251进行体外抑制活性测试。实验结果显示蟾毒它 灵对人脑胶质瘤U-251具有较强的抑制作用，呈现了较好的量效关系，其IC5。在0. Iii g/ml。表1对人脑胶质瘤U-251細胞生长的抑制率％
权利要求
1.蟾毒它灵在制备治疗颅内肿瘤药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括治疗有效量的蟾毒它灵和医药学上可接受的载体。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物为注射剂、粉针剂、颗粒剂、胶囊、膏剂、霜剂、透皮贴剂或其他口服剂。
4.根据权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于，所述颅内肿瘤为脑胶质瘤及其他颅内肿瘤。
全文摘要
本发明公开了蟾毒它灵在制备治疗颅内肿瘤药物中的应用，蟾毒它灵体外抗肿瘤实验证明，蟾毒它灵对人胶质瘤及其它颅内肿瘤细胞株具有较强的抑制活性，IC50在50～200ng/ml，并且具有较好的量效关系。实验结果显示蟾毒它灵的抑制肿瘤生长效果优于临床现在应用的药物。动物给药后，测其体内药物分布发现，脑内药物浓度均高于起效药物浓度，具有很大开发应用前景。
文档编号A61K31/585GK102204919SQ20101013604
公开日2011年10月5日 申请日期2010年3月30日 优先权日2010年3月30日
发明者于垂亮, 侯惠民 申请人:上海现代药物制剂工程研究中心有限公司