专利名称：一种小叶丁香树皮提取物的制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种小叶丁香树皮提取物的 制备方法及其用途。
背景技术：
小叶丁香(Syringa Pubescens Turcz.)又名巧玲花、雀舌花、毛丁香，为木樨科 (Oleaceae) 丁香属(Syringa)植物，分布于我国河南、河北、陕西、山西、甘肃等地，生长在 海拔800 2400m的山地、沟内或崖石上。民间对其药用价值早有认识，曾采其花、果实泡 茶饮用，有消炎、镇咳、治疗肝炎和肝硬化之疗效，但至今未被药典收录。目前，国内外对小 叶丁香这种植物的研究少有报道，对树皮的研究更属罕见。自由基是一类具有不配对电子的活泼化学基团。目前认为，人类疾病如各种炎症、 动脉粥样硬化、早老性痴呆、帕金森氏病、急性脑血管病、癌症、衰老等，均与自由基的氧化 刺激密切相关。由于氧化损伤的机制在疾病的发生发展中起着重要的作用，因此，中药的抗 氧化作用是其达到治疗效果的重要因素。研究发现，当前主要使用的抗氧化剂多为人工合 成抗氧化剂，其对人的健康存在许多负面影响。因此，近年来，学术界对植物中存在的天然 抗氧化剂的研究兴趣与日俱增。为了寻找高效的抗氧化物质，对天然抗氧化剂的研究显得 非常重要。目前抗氧化的研究已成为热点，但对小叶丁香树皮的抗氧化活性研究还未见报 道。
发明内容
本发明旨在探讨小叶丁香树皮提取物的制备方法及其用途，为医学、食品科学等 领域开发天然抗氧化剂提供新资源。1、一种小叶丁香树皮提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤(一)取小叶丁香树皮40目粉末，用6-8倍量70%乙醇室温下浸提8-10h，静置过 滤；( 二 )将滤渣再分别用8倍量与6倍量70 %的乙醇重复以上步骤各一次，超声 30min ；(三)合并滤液，回收溶剂即得总提取物；(四)用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取总提取物3次；(五)分别合并石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液；(六)将(五)石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液分别减压浓缩，冷冻干燥， 得到小叶丁香树皮石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物。2、权利要求1所述的小叶丁香树皮提取物的制备方法，特征在于其原料为小叶丁 香 Syringa Pubescens Turcz.的树皮。3、一种小叶丁香树皮提取物的用途，其特征在于该树皮提取物对羟自由基有很强 的清除作用。
4、一种小叶丁香树皮提取物的用途，其特征在于该树皮提取物可开发为天然抗氧 化药品，代替人工合成的抗氧化剂治疗因人体内自由基过多而产生的疾病。5、权利要求3、4任一项所述的小叶丁香树皮提取物的 用途，特征在于其制备原料 为小叶丁香 Syringa Pubescens Turcz.的树皮。根据本发明，本发明中的“ ％，，是重量百分比。
具体实施例方式本发明所述的涉及一种小叶丁香树皮提取物的制备方法及其用途包括以下实施 例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例1 (一)取小叶丁香树皮40目粉末100g，用6倍量70%乙醇室温下浸提8h，静置过 滤；( 二 )将滤渣再分别用8倍量与6倍量70 %的乙醇重复以上步骤各一次，超声 30min ；(三)合并滤液，回收溶剂即得总提取物；(四)用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取总提取物3次；(五)分别合并石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液；(六)将(五)石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液分别减压浓缩，冷冻干燥， 得到小叶丁香树皮石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物。(七)将(六)石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物进行抗氧化 试验，该提取物对羟自由基有很强的清除作用。实施例2 (一 )取小叶丁香树皮40目粉末200g，用8倍量70%乙醇室温下浸提10h，静置 过滤；( 二)将滤渣再分别用8倍量与6倍量70 %的乙醇重复以上步骤各一次，超声 30min ；(三)合并滤液，回收溶剂即得总提取物；(四)用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取总提取物3次；(五)分别合并石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液；(六)将(五)石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液分别减压浓缩，冷冻干燥， 得到小叶丁香树皮石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物。(七)将(六)石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物进行抗氧化 试验，该提取物对羟自由基有很强的清除作用。药理试验例小叶丁香树皮提取物的抗氧化活性1材料与方法1. 1实验样品来源药材采自吉林农业大学校园，由吉林农业大学园艺学院胡全德教授鉴定为木樨科 丁香属植物小叶丁香Syringa Pubescens Turcz.的树皮。1. 2 仪器
76新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；百灵 LAl 14型电子天平(110g/0. OOOlg)(常熟市百灵天平仪器有限公司)；电子计数天平 (500g/0. OOlg)(金羊天平仪器厂)；KQ-250DB型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公 司)；101-2A型数显电热鼓吹干燥箱(上海锦屏仪器仪表有限公司通州分公司)；旋转蒸发 仪(上海亚荣生化仪器厂)；移液枪(20ul)；水浴锅。1. 3 试齐[J DPPH溶液，蒸馏水，无水乙醇，甲醇，ABTS,过硫酸钾，铁氰化钾，磷酸盐缓冲液(PH =6. 6)，三氯乙酸，三氯化铁，Vc (维生素C)2实验方法与步骤2. 1药材组分的提取取小叶丁香树皮样品粉末100g，经剪碎后分别加10倍，8倍，6倍量的75%乙醇浸 泡过夜后，超声30min，静置过滤，经抽滤后合并3次滤液，将滤液置于旋转蒸发仪中回收， 旋到液体粘稠至无醇味约得150 300mL溶液后，倒入蒸发皿中，用水浴锅(温度60°C)将 溶液蒸干，即得总提取物，提取率为18. 32%。取出部分用水混悬成30mL混悬液，一次用3 倍量石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取3次，合并石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇 层萃取液，减压浓缩，冷冻干燥，分别得到石油醚层萃取物5g，乙酸乙酯层萃取物8g，正丁 醇层萃取物12g，备用。2. 2ABTS法测定抗氧化活性2. 2. 1样品溶液的制备分别精确称取干燥至恒重的总提物、石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取物 30mg，用水定容于IOmL容量瓶中，配成浓度为3mg/mL的样品母液，将样品母液用水逐级 稀释成浓度为 0. 018mg/mL, 0. 037mg/mL, 0. 075mg/mL, 0. 15mg/mL, 0. 31mg/mL, 0. 62mg/mL, 1.25mg/mL的样品溶液待用。2. 2. 2ABTS—溶液的制备5mL, 14mM的ABTS和5mL，4. 9mMk2S208混合产生ABTS+，黑暗中静止16h，用之前用 乙醇稀释工作液，要求其在734nm波长下的吸光度为0. 70士0. 02。2. 2. 3样品测定取3ml样品溶液加入158 μ LABTS+(Asample)，用乙醇做空白，158 μ LABTS+和3ml水 为标准液(Acontrol)，6min后在734nm波长下测定吸光度，用VC作对照。清除率(％) = [(AControI-ASample)/AControl] X 100%2. 3DPPH法测定抗氧化活性2. 3. 1样品溶液的制备分别准确称取干燥至恒重的总提物、石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取物 30mg，用无水乙醇定容于IOmL容量瓶中，配成浓度为3mg/mL的样品母液，将样品母液用无 水乙醇逐级稀释成浓度为 0. 018mg/mL，0. 037mg/mL，0. 075mg/mL，0. 15mg/mL，0. 31mg/mL, 0. 62mg/mL, 1. 25mg/mL的样品溶液待用。2. 3. 2DPPH溶液的制备精密称取DPPH样品0. 01g，加入无水乙醇定容至50ml容量瓶中，得到DPPH母液 (浓度0. 2mg/mL)。从母液中移取10mL，用无水乙醇定容置50mL容量瓶中，得到DPPH溶液，浓度0. 04mg/mL(整个过程都需要避光)。2. 3. 3样品测定
总提取物、石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取物样品溶液按表1加入反应液， 摇勻后于室温避光静置30min，在515nm处测定吸光度值。用VC作对照。表1总提取物、石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取物样品溶液加样表
权利要求
一种小叶丁香树皮提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤(一)取小叶丁香树皮40目粉末，用6 8倍量70％乙醇室温下浸提8 10h，静置过滤；(二)将滤渣再分别用8倍量与6倍量70％的乙醇重复以上步骤各一次，超声30min；(三)合并滤液，回收溶剂即得总提取物；(四)用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取总提取物3次；(五)分别合并石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液；(六)将(五)石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液分别减压浓缩，冷冻干燥，得到小叶丁香树皮石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物。
2.权利要求1所述的小叶丁香树皮提取物的制备方法，特征在于其原料为小叶丁香 Syringa Pubescens Turcz.的树皮。
3.一种小叶丁香树皮提取物的用途，其特征在于该树皮提取物对羟自由基有很强的清 除作用。
4.一种小叶丁香树皮提取物的用途，其特征在于该树皮提取物可开发为天然抗氧化药 品，代替人工合成的抗氧化剂治疗因人体内自由基过多而产生的疾病。
5.权利要求3、4任一项所述的小叶丁香树皮提取物的用途，特征在于其制备原料为小 叶丁香 Syringa Pubescens Turcz.的树皮。
全文摘要
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种小叶丁香树皮提取物的制备方法及其用途。取小叶丁香树皮40目粉末，用6-8倍量70％乙醇室温下浸提8-10h，静置过滤，滤渣再分别用8倍量与6倍量70％的乙醇重复以上步骤各一次，超声30min，合并滤液，回收溶剂即得总提取物，用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别萃取总提取物3次，分别合并石油醚层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液，减压浓缩，冷冻干燥，分别得到小叶丁香树皮石油醚层提取物，乙酸乙酯层提取物，正丁醇层提取物。本发明产品对羟自由基有很强的清除作用，可开发为天然抗氧化药品，代替人工合成的抗氧化剂治疗因人体内自由基过多而产生的疾病。
文档编号A61P39/06GK101966212SQ20101050509
公开日2011年2月9日 申请日期2010年9月28日 优先权日2010年9月28日
发明者孙丽, 张岩, 张崇禧, 张腾, 徐蕊, 杨淑超, 郑友兰, 陈晓芳 申请人:山东大学威海分校