专利名称：一种治疗痔疮外用中药制剂的制备及检测方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗痔疮药物制备及检测方法，具体涉及一种治疗痔疮外用中药 制剂的制备及检测方法。
背景技术：
由柿蒂、大黄、冰片、芒硝、田螺壳和咸橄榄核等制成痔疮栓，是一种疗效确切的中 药复方制剂，具有清热通便，止血，消肿止痛，收敛固脱的作用。国内有多家企业生产，现痔 疮栓制剂存在质量检测方法简单、落后，产品质量不易控制的缺点。现有技术痔疮栓的质量控制方法中，并没有对其柿蒂、大黄，冰片等主药进行检 测，仅检测芒硝含量一项，且检测方法的精密度、稳定性均差，不能有效控制痔疮栓的质量。 截至目前，未见有对该产品进行全面质量检测的研究文献报道。
发明内容
本申请的发明目的，在于提供一种能全面有效控制痔疮栓的质量的检测方法。本申请的技术方案是研制一种治疗痔疮外用中药制剂的检测方法，包括对该外用中药制剂内容物的鉴 别，对该外用中药制剂内容物的成分进行含量测定，其特征是(1)所述的治疗痔疮外用中药制剂是栓剂，软膏剂或凝胶剂；(2)对该外用中药制剂内容物的鉴别步骤如下①大黄的鉴别取栓剂2粒，切碎，加70 %乙醇20ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液蒸 干，残渣加水30ml使溶解；，加盐酸anl，加热回流30分钟，冷却，用乙醚振摇提取2次，每 次20ml，合并乙醚提取液，挥去乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品 溶液；参照中国药典2010版一部附录VIB薄层色谱法相关记载进行检测；吸取供试品溶液4μ 1，对照品溶液4μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合 剂的硅胶H薄层板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸比例为15 5 1的上层溶 液*为展开剂展开，取出，晾干；*将试剂按比例加入分液漏斗中，轻微振摇约5分钟，待分层后弃去下层液，取上 层液作为展开剂供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同橙黄色荧光斑点；氨蒸气熏 后，日光下检视，斑点变成红色；②柿蒂的鉴别取栓剂3粒，切碎，加70 %乙醇30ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液蒸
4干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，参照 中国药典2010版一部附录VIB薄层色谱法相关记载进行检测；吸取供试品溶液4μ 1，对照品溶液4μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合 剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙醚-乙酸乙酯-冰醋酸比例为20 5 8 0.5为展 开剂展开，取出，晾干；供试品色谱中，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，100°C加热至斑点显色清晰，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；③芒硝的鉴别取栓剂2粒，切碎，加水20ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液备用；参照中国药典2010版一部附录IV硫酸盐的鉴别方法相关记载进行检测；a.取滤液5ml于试管中，加氯化钡试液5 10滴，即有白色沉淀生成，再加过量硝 酸，沉淀不溶解；b.再取滤液5ml于另一只试管中，加醋酸铅试液5 10滴，亦有白色沉淀生成，但 再加氢氧化钠试液，沉淀溶解；(3)对该外用中药制剂含有的成分进行含量测定的步骤如下①色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇-20M为固定相；涂布浓度10%;氢火焰离子化检测器；进样口、检测器 温度均为210°C;柱温115°C;柱流量lOml/min;分流进样，分流比四1 ；理论塔板数按龙 脑峰计算应不低于6000 ；②校正因子测定精密称取水杨酸甲酯对照品适量，加乙酸乙酯制成每Iml约含0. Smg的溶液，作为 内标溶液；另取龙脑对照品5mg，精密称定，置IOml量瓶中，精密加内标溶液至刻度，摇勻，吸 取2μ 1，注入气相色谱仪，测定计算校正因子；③对照品溶液的制备精密称取龙脑对照品适量，加内标溶液制成每Iml含0. ISmg的溶液，即得；④供试品溶液的制备取栓剂2粒，切碎，取0. 5101g,精密称定，置具塞锥形瓶中，加内标溶液IOml密塞， 称定重量，功率250W，频率33kHz超声处理lOmin，冷却后用内标溶液补足减失的重量，用 0. 45 μ m微孔滤膜滤过，即得。⑤测定法取栓剂2粒，切碎，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液 10ml，密塞，称定重量，功率250W，频率33kHz超声处理20min，冷却后用内标溶液补足减失 的重量，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，精密吸取2 μ 1，注入气相色谱仪，测定，即得；本品含冰片以龙脑(CltlH18O)计，不得少于8mg/g或16mg/粒。上述的方法，其特征是所述的治疗痔疮外用中药制剂是由如下重量比例的药材制 成的柿蒂120 130份、大黄71 80份、冰片38 42份、芒硝44 48份、田螺壳140 158份、橄榄核140 158份。
上述的方法，其特征是所述的治疗痔疮外用中药制剂是按照如下方法制备的将 上述配方的药材按照要求进行挑选、清洗、炮制后，粉碎成细粉，加入制剂常规量的基质制 成栓剂或软膏剂或凝胶剂。本发明的优点本申请提供的《一种治疗痔疮外用中药制剂的制备及检测方法》， 能够较全面有效控制该产品的质量特征，具有专属性好，重现性好、稳定性高的特点，可作 为该产品质量控制和考察工艺稳定性有效技术手段。对提高该产品质量保证临床用药安全 有效有重大意义。
图1是痔疮栓样品GC图谱；图2是龙脑对照品GC图谱；图3是冰片药材与GC图谱；图4是阴性*样品GC图谱(*是不含冰片的痔疮栓样品图谱)；图5是龙脑对照品标准曲线，氺气相色谱(gas chromatography 简称 GC)图1 4中，为痔疮栓质量控制研究对照试验图谱，图中纵座标是样品通过检测器 的讯号强度，横座标为样品检测时间。其中，图1是痔疮栓样品与内标物水杨酸甲酯在此提取方法和色谱条件下的色谱峰，是 本品含龙脑的证据；图2是龙脑对照品和内标物水杨酸甲酯在此色谱条件下的色谱峰，为龙脑的阳性 标准对照图谱；图3是冰片药材与内标物水杨酸甲酯的色谱峰，是证明药材中含有龙脑的证据；图4是阴性样品(*不含冰片的痔疮栓样品)图谱，是仅有内标物水杨酸甲酯的图 谱，在此色谱条件下没有与冰片对应色谱峰出现，证明样品中的其他物质不会对龙脑的含 量测定造成干扰；图5是龙脑对照品标准曲线，其中纵座标为对照品的峰面积，横座标为对照品的 浓度。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明进一步阐述。实施例1制备痔疮栓配量柿蒂130g、大黄80g、冰片42g、芒硝48g、田螺壳158g、咸橄榄核158g。所用药材中，柿蒂(CALYX KAKI)、大黄(RADIX ET RHIZOMA RHEI)、冰片(合成龙脑 B0RNE0LUM SYNTHETLCUM)、芒硝(NATRII SULFAS)是中国药典收载的药材；田螺壳(CONCHA CIPANGPALUDINAE)和橄榄核(RADIX ET RHIZOMA RHEI)是《中药大辞典》收载的药材。(《中药大辞典》，江苏新医学院编，上海人民出版社出版，1977年7月第1版，统一 书号14171. 128。田螺壳记载在《中药大辞典》上册第649页；橄榄核记载在《中药大辞典》 下册第2599页。)所用药材中，田螺壳是指炒煅的炙品；橄榄核是盐炙后炒炭的；芒硝是指经过净化、纯化处理的净品；优选的外用制剂的制备方法以栓剂为例为以上六味，分别粉碎成细粉，过筛，按 配量比例混勻；再取混合脂肪酸甘油酯适量水浴60 80°C加热融化，边搅拌边加入上述药 粉，搅勻，经胶体磨研磨，在40 50°C灌模，冷却，制成每粒2. Og的鱼雷形栓剂1000粒。本发明提供的是针对以上外用制剂的质量检测方法，针对其特点及配方，我们提 供了如下质量检测方法。本发明所述的质量检测方法包括以下步骤成品的性状为黑褐色鱼雷形栓剂，根据药典方法对内容物进行检查，对内容物所 含柿蒂、大黄、进行薄层鉴别，芒硝照硫酸盐鉴别方法鉴别，对含有的冰片进行含量测定。本发明的质量控制方法主要步骤是A、对本发明药物制剂中的柿蒂、大黄、芒硝进行薄层和硫酸盐法鉴别；B、对冰片中所含龙脑进行含量测定；其中A鉴别的步骤是(1)大黄的鉴别取栓剂2粒，切碎，加70%乙醇20ml，50°C超声处理30分钟，放 冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，加盐酸2ml，加热回流30分钟，冷却，用乙醚振 摇提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，挥去乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品 溶液。取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶 液。参照薄层色谱法(中国药典2010版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液4μ 1，对照品 溶液4 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30 60°C)_甲酸乙酯-甲酸(15 5 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色 谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同橙黄色荧光斑点；氨蒸气熏后，日光下检视，斑 点变成红色。(2)柿蒂的鉴别取栓剂3粒，切碎，加70%乙醇30ml，50°C超声处理30分钟，放 冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。取熊果酸对照品，加无水乙 醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。参照薄层色谱法(中国药典2010版一部 附录VIB)试验，吸取供试品溶液4μ 1，对照品溶液4μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠 为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙醚-乙酸乙酯-冰醋酸QO 5 8 0.5)为 展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，100°C加热至斑点 显色清晰，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)芒硝的鉴别取栓剂2粒，切碎，加水20ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过， 滤液备用。照硫酸盐的鉴别方法(中国药典2010版一部附录IV)试验，(1)取滤液5ml于 试管中，加氯化钡试液5 10滴，即有白色沉淀生成，再加过量硝酸，沉淀不溶解；(2)再取 滤液5ml于另一只试管中，加醋酸铅试液5 10滴，亦有白色沉淀生成，但再加氢氧化钠试 液，沉淀溶解。其中B测定冰片中龙脑含量的具体步骤龙脑是冰片的主要成分，也是痔疮制剂清凉止痛的主要成分，建立其含量测定是 很有必要的，采用气相色谱法测定龙脑的含量准确性高。含量测定包括以下步骤龙脑的含量测定，参照气相色谱法(中国药典2005年版 一部附录VI E)测定。
色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇(PEG)_20M为固定相；涂布浓度10% ；氢 火焰离子化检测器(FID)；进样口、检测器温度均为210°C ；柱温115°C ；柱流量lOml/min ； 分流进样，分流比四1 ；理论塔板数按龙脑峰计算应不低于6000。校正因子测定精密称取水杨酸甲酯对照品适量，加乙酸乙酯制成每Iml约含 0. Smg的溶液，作为内标溶液。另取龙脑对照品5mg，精密称定，至IOml量瓶中，精密加内标 溶液至刻度，摇勻，吸取2 μ 1，注入气相色谱仪，测定计算校正因子。对照品溶液的制备精密称取龙脑对照品适量，加内标溶液制成每Iml含0. ISmg的 溶液，即得。供试品溶液的制备取栓剂2粒，切碎，取0. 5101g,精密称定，置具塞锥形瓶中，加 内标溶液IOml密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz) lOmin，冷却后用内标溶 液补足减失的重量，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，即得。测定法取栓剂2粒，切碎，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入内标溶 液10ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)20min，冷却后用内标溶液补足 减失的重量，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，精密吸取2 μ 1，注入气相色谱仪，测定，即得。本品含冰片以龙脑(CltlH18O)计，不得少于8mg/g或ltog/粒。本申请提供的痔疮栓剂中龙脑含量测定方法研究试验数据1、仪器与试药仪器日本岛津GC-2014气相色谱仪，毛细管柱 Rtx-Wax (30mX 0. 53mmX 1. OO μ m)，聚乙二醇(PEG) -20M为固定相，涂布浓度10 %，氢火焰 离子化检测器(FID)，Gcsolution数据处理软件，startorius BP211D电子分析天平(d = 0. Olmg)，startorius BS124S 电子分析天平(d = 0. Img)，HS3120 超声振荡器。试剂水为重蒸水，乙酸乙酯为分析纯。龙脑对照品(110881-200504，约20mg，中国药品生物制品检定所，供含量测定用)。水杨酸甲酯对照品(707-200106，约1ml，中国药品生物制品检定所，供含量测定用)。样品由荣昌制药(淄博)有限公司制备。2、色谱条件的选择采用日本岛津GC-2014气相色谱仪，分流进样，分流比四1，进样口、检测器温度 均为21(rc，进样量2μl。考虑到柱温和柱流量对色谱峰影响较大，故对柱温和柱流量进行 了试验选择。2. 1对照品、供试品溶液的制备内标溶液精密称取水杨酸甲酯对照品适量，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 198mg的溶液，即得。对照品溶液精密称取龙脑对照品适量，加内标溶液制成每Iml含0. ISmg的溶液，即得。供试品溶液取栓剂2粒，切碎，取0.5101g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加内标溶 液IOml密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz) IOmin,冷却后用内标溶液补足 减失的重量，用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，即得。
2. 2柱温选择将柱温分别设为110°C、115°C、120°C、130°C，对同一对照品和痔疮栓供试品溶液 进行了试验，结果柱温为115°C时龙脑峰和水杨酸甲酯峰峰形好，分离度均大于1.5，且出 峰时间较短、柱温较低，故确定柱温为115°C。2. 3柱流量选择将柱流量分别设为8ml/min、10ml/min、iaiil/min，对同一对照品和痔疮栓供试品 溶液进行了试验，结果柱流量为lOml/min时龙脑峰和水杨酸甲酯峰峰形好，分离度均大于 1. 5，且出峰时间较短、较节省载气，故确定柱流量为lOml/min。3、阴性对照试验取不含冰片的痔疮栓阴性样品约0. 5g，冰片药材细粉10mg，同前法处理后，分别 制得阴性对照液和冰片药材溶液，分别取对照品溶液、阴性对照液、痔疮栓供试品溶液、冰 片药材溶液各2μ 1注入气相色谱仪，记录色谱图。结果表明在阴性对照图谱中龙脑峰无干扰。4、精密度试验精密吸取龙脑对照品溶液(龙脑0. 52mg/ml,内标0. 64mg/ml)重复进样6次，每次 各2 μ 1，记录峰面积并计算f值及RSD，结果见表-1。表-1精密度试验结果
权利要求
1. 一种治疗痔疮外用中药制剂的检测方法，包括对该外用中药制剂内容物的鉴别，对 该外用中药制剂内容物的成分进行含量测定，其特征是(1)所述的治疗痔疮外用中药制剂是栓剂，软膏剂或凝胶剂；(2)对该外用中药制剂内容物的鉴别步骤如下①大黄的鉴别取栓剂2粒，切碎，加70%乙醇20ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干， 残渣加水30ml使溶解；，加盐酸anl，加热回流30分钟，冷却，用乙醚振摇提取2次，每次 20ml，合并乙醚提取液，挥去乙醚，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；取大黄素、大黄酚对照品，加甲醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液；参照中国药典2010版一部附录VIB薄层色谱法相关记载进行检测；吸取供试品溶液4μ 1，对照品溶液4μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的 硅胶H薄层板上，以30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸比例为15:5:1的上层溶液为 展开剂展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同橙黄色荧光斑点；氨蒸气熏后， 日光下检视，斑点变成红色；②柿蒂的鉴别取栓剂3粒，切碎，加70%乙醇30ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残 渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，参照中国 药典2010版一部附录VIB薄层色谱法相关记载进行检测；吸取供试品溶液4μ 1，对照品溶液4μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的 硅胶G薄层板上，以环己烷-乙醚-乙酸乙酯-冰醋酸比例为20 :5:8: 0.5为展开剂 展开，取出，晾干；供试品色谱中，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，100°C加热至斑点显色清晰，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；③芒硝的鉴别取栓剂2粒，切碎，加水20ml，50°C超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液备用；参照中国药典2010版一部附录IV硫酸盐的鉴别方法相关记载进行检测；a.取滤液5ml于试管中，加氯化钡试液5 10滴，即有白色沉淀生成，再加过量硝酸， 沉淀不溶解；b.再取滤液5ml于另一只试管中，加醋酸铅试液5 10滴，亦有白色沉淀生成，但再加 氢氧化钠试液，沉淀溶解；(3)对该外用中药制剂含有的成分进行含量测定的步骤如下①色谱条件与系统适用性试验以聚乙二醇-20M为固定相；涂布浓度10%;氢火焰离子化检测器；进样口、检测器温度 均为210°C;柱温115°C;柱流量lOml/min ；分流进样，分流比四1 ；理论塔板数按龙脑峰 计算应不低于6000 ；②校正因子测定精密称取水杨酸甲酯对照品适量，加乙酸乙酯制成每Iml约含0. Smg的溶液，作为内标 溶液；另取龙脑对照品5mg，精密称定，置IOml量瓶中，精密加内标溶液至刻度，摇勻，吸取 2μ 1，注入气相色谱仪，测定计算校正因子；③对照品溶液的制备精密称取龙脑对照品适量，加内标溶液制成每Iml含0. ISmg的溶液，即得；④供试品溶液的制备取栓剂2粒，切碎，取0. 5101g,精密称定，置具塞锥形瓶中，加内标溶液IOml密塞， 称定重量，功率250W，频率33kHz超声处理lOmin，冷却后用内标溶液补足减失的重量，用 0. 45 μ m微孔滤膜滤过，即得。⑤测定法取栓剂2粒，切碎，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液IOml，密 塞，称定重量，功率250W，频率33kHz超声处理20min，冷却后用内标溶液补足减失的重量， 用0. 45 μ m微孔滤膜滤过，精密吸取2 μ 1，注入气相色谱仪，测定，即得；本品含冰片以龙脑(CltlH18O)计，不得少于8mg/g或16mg/粒。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征是所述的治疗痔疮外用中药制剂是由如下重量 比例的药材制成的柿蒂120 130份、大黄71 80份、冰片38 42份、芒硝44 48份、 田螺壳140 158份、橄榄核140 158份。
3.按照权利要求2所述的方法，其特征是所述的治疗痔疮外用中药制剂是按照如下方 法制备的将上述配方的药材按照要求进行挑选、清洗、炮制后，粉碎成细粉，加入制剂常规 量的基质制成栓剂或软膏剂或凝胶剂。
全文摘要
本发明涉及一种治疗痔疮外用中药制剂的制备及检测方法。由柿蒂、大黄、冰片、芒硝、田螺壳和橄榄核等制成的痔疮栓，疗效确切，具有清热通便，止血，消肿止痛，收敛固脱的作用。现有技术痔疮栓存在质量检测方法简单、落后，产品质量不易控制的缺点。本发明的技术方案是研制一种治疗痔疮外用中药制剂的检测方法，包括对该外用中药制剂内容物大黄、柿蒂和芒硝的鉴别，对该外用中药制剂内容物的成分冰片进行含量测定，本发明提供的检测方法，能够较全面有效控制该产品的质量特征，具有专属性好，重现性好、稳定性高的特点，可作为该产品质量控制和考察工艺稳定性的有效技术手段。
文档编号A61K36/708GK102058680SQ20101060636
公开日2011年5月18日 申请日期2010年12月27日 优先权日2010年12月27日
发明者单亭森, 李钦刚, 李雪梅, 翟勇, 郗光建, 郭桂秋 申请人:荣昌制药(淄博)有限公司