专利名称：一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法
技术领域：
本发明属于药物提纯技术领域，涉及一种从植物上提取含有花青甙的提取物的方法，所述植物至少拥有较高花青甙含量，这样的植物可以是本发明所采用的原料越橘等。
背景技术：
现已证明，花青甙(英文名为Anthocyanosides)具有较大的药用价值，能够用于治疗微循环失调，并具有促进视红素再合成、改善循环、抗溃疡以及抗炎症等功效。然而花青甙难以通过化学合成的方法制备，因此花青甙通常从某些含量丰富的植物(例如越橘等)中提取，目前，花青甙的提取技术一般为树脂吸附法，即对富含花青甙的植物进行初步提取后，再通过树脂进行柱层分离。常见的提取工艺一般包含高温浓缩的步骤，由于花青甙是热敏性物质，因此部分花青甙在提取过程已经被高温环境破坏，降低提取物中花青甙的含量。专禾[I 串i青说明书〈〈Process for the preparation of extracts having high content in anthocyanosides》(公开号EP0412300A2)公开了一种含有花青甙的提取物的提取方法，该方法将花青甙含量丰富的植物进行初步提取浓缩，然后通入亚硫酸钠，使亚硫酸根充当花青甙在提取过程中易破坏基团的保护基，在后续提取操作完成后，再脱掉亚硫酸根，并以二氧化硫的形式排除。但目前为止并没有证据证明，使用亚硫酸根充当花青甙在提取过程中易破坏基团的保护基不会改变花青甙的分子结构，并且该工艺在实施过程中产生了污染性的二氧化
硫ο
发明内容
本发明所要解决的技术问题是现有提取含有花青甙的提取物的提取工艺通常用高温的方式来完成提取工艺中出现的浓缩步骤，从而在提取过程中即使得部分花青甙的结构遭到破坏的问题，并针对上述技术问题提供了一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法。本发明通过以下技术方案解决上述技术问题一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，包括a、将越橘浸泡在提取液中以得到浸泡液的浸泡步骤；b、用吸附树脂柱层分离浸泡液以得到分离液的分离步骤；C、干燥分离液使提取物形成的形成步骤；其特征在于该方法还包括位于b步骤及c步骤之间的将分离液通过纳滤膜的步骤，所述纳滤膜的孔径为0. 5-3nm。如本说明书背景技术部分所述现有提取工艺一般采用高温的方式进行浓缩，例如在上述技术方案中的b步骤及c步骤之间对分离液进行高温浓缩，而这种浓缩方式已经由于花青甙的热敏性的特性而对花青甙结构造成了破坏。
一种试图解决浓缩时花青甙被破坏的方法在于对待浓缩的分离液进行抽真空浓缩，在实验情况下，对待浓缩的分离液进行抽真空浓缩可以不用对待浓缩的分离液加热，延长抽真空的时间，即可最终完成对待浓缩分离液的浓缩。然而，在实际生产过程中，出于对保证一定的生产效率及控制生产成本方面的考虑，通常需要使抽真空浓缩的时间尽量的短，这就需要对待浓缩分离液进行适度的加热，一般的，加热温度应当至少控制在55°C以上。由此，用抽真空的方式进行浓缩在实际生产中是不适用的，较高的加热温度依然会破坏花青甙的结构。本发明提供的技术方案中采用的将分离液通过纳滤膜的方式进行浓缩，纳滤膜的主要特点是对二价离子、功能性糖类、小分子色素、多肽等物质的截留性能高于98%，而对于一些单价离子、小分子酸碱、醇等有30-80%的透过性能，可应用于溶质的分级、溶液中低分子物质的洗脱和离子组份的调整、溶剂体系浓缩等物质的分离、精制、浓缩工艺过程中。 处理过程始终处于常温状态，且过程无相变，对分离液中各有效成分无任何不良影响，特别适用于热敏性物质(例如本说明书所述的花青甙)的处理，有效的提高花青甙的提取率。一般情况下，为确保杂质的去除率，所述纳滤膜的孔径为0. 5-3nm。本发明还采用了以下技术方案b步骤还包括分离步骤之前对吸附树脂进行冲洗的步骤，b步骤所述的吸附树脂为XDA-6树脂或CAD-40大孔树脂；柱层分离所使用的洗脱液包括酸醇类组分以及水，所述酸醇类组分的体积百分比浓度为50% -95%，所述洗脱液的PH值为2-5 ；所述酸醇类组分包括盐酸、硫酸、柠檬酸中的一种或者多种；以及甲醇、乙醇、丁醇中的一种或者多种；该方法还包括位于a步骤与b步骤之间的将浸泡液通过纳滤膜的步骤；所述提取液还包括体积百分比浓度为0. 2-0. 7%的盐酸、硫酸或有机酸；所述提取液包括体积百分比浓度为5-70%的低级醇；所述a步骤包括越橘常温浸泡后进行的越橘粉碎过滤；所述c步骤包括对分离液进行的喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为 170-220°C，出风温度为 70-120°C。
具体实施例方式本具体实施方式
是对发明内容的详述。一、关于a步骤的改进本发明所述花青甙中存在高度分子共轭体系，同时具有酸性与碱性基因，因此，本发明所述提取液在原有低级醇的基础上还添加了酸类，对提取液的组分做这样的安排能确保对越橘的提取率较未添加酸类的醇溶液更高。本发明所选的酸类为盐酸、硫酸或者有机酸(可以是常见有机酸)，对于酸类浓度的设定，本发明发现，低浓度酸能防止非酰基化的花色苷的降解，而高浓度酸则容易导致花青素降解。为此，所添加的酸的体积百分比浓度通常为0. 2-0. %。一般的，所述低级醇的体积百分比浓度为5-70%，所述低级醇为甲醇、乙醇等。二、关于b步骤的改进
(1)、吸附树脂的选择及用量本发明所选用的XDA-6树脂或CAD-40大孔树脂除了一般大孔吸附树脂的功能外， 还具有专门吸附花青甙的基团，从而提高对花青甙的吸附能力。O)、洗脱剂的选择柱层分离所使用的洗脱液包括酸醇类组分以及水，所述酸醇类组分的体积百分比浓度为50% -95% (本说明书指酸与醇总的体积百分比)，所述洗脱液的PH值为2-5。本发明所使用的树脂适宜用上述洗脱液进行清洗，以确保浸泡液的有效成份解析率最大，在实际操作过程中，相对而言，50-70%范围低度醇洗花青甙含量高；70-95%高度醇洗含花青甙成分数量多。所述酸醇类组分包括盐酸、硫酸、柠檬酸中的一种或者多种；以及甲醇、乙醇、丁醇中的一种或者多种。三、对提取流程的改进在本发明之前，对越橘的浸泡一般采用两种方案，第一种方案是不粉碎越橘，直接将越橘放在浸泡液中浸泡；第二种方案是先将越橘进行粉碎，然后再进行浸泡；本发明发现，第一种方案由于果皮包覆，细胞壁未破碎，有效成分浸出不完全；第二种方案先在鲜果状态下粉碎，果汁浓度过高，高速粉碎产生的热及剪切力易对有效成分造成破坏。为此，本发明将越橘浸泡后进行的越橘粉碎过滤代替以上两种方案，就能有效的避免上述不良现象的发生。同时，本发明是在常温下对越橘进行浸泡，不需要对浸泡液进行降温，这至少避免了越橘提取物在降温这段时间中被氧化，并增加生产周期，间接提高了生产成本的问题。另外，本发明还在a步骤及b步骤之间设置将浸泡液通过纳滤膜的步骤，以分离醇及水。以下各实施例中采用的未标明浓度类型的均指体积百分比浓度，所使用的纳滤膜浓缩设备及灭菌过滤器均为常规设备，且设备的选择不会影响本发明的实施，纳滤膜浓缩设备中纳滤膜的孔径为lnm，树脂的用量与欧洲越橘的投入量相等。实施例1一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其步骤依次为欧洲越橘果实100kg，加入5倍量(也即500kg)的含0. 5%盐酸的30%乙醇，常温下浸提3小时，浸提后进行粉碎过滤；常温下，将滤液通过纳滤膜浓缩设备进行浓缩，然后用饮用水对CAD-40大孔树脂进行冲洗；随后将浸泡液通过CAD-40大孔树脂，用50%的乙醇水溶液进行洗脱，洗脱时，向乙醇水溶液加入盐酸，使得乙醇水溶液的PH在2. 5，洗脱到流出的分离液无色为止，取分离液部分；常温下，将分离液用纳滤膜分离设备进行浓缩，回收溶剂；然后将分离液通过灭菌过滤器后，进行喷雾干燥。控制进风温度170_220°C，出风温度70-120°C，虽然热风的温度较高，但由于热风进入过滤器干燥室内立即与喷雾液滴接触，室内温度急降，而物料的湿球温度基本不变，本实施例发现，上述温度范围的设定不会导致花青甙的分解。经干燥后最终得到花青甙质量百分数含量为37%的越橘提取物干1. 25kg。实施例2一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其步骤依次为欧洲越橘果实100kg，加入5倍量(也即500kg)的含0. 5%盐酸的60%甲醇，常温下浸提3小时，浸提后进行粉碎过滤；常温下，将滤液通过纳滤膜浓缩设备进行浓缩，然后用饮用水对CAD-40大孔树脂进行冲洗；将浸泡液通过CAD-40大孔树脂，用70 %的甲醇水溶液进行洗脱，洗脱时，向甲醇水溶液加入盐酸，使得乙醇水溶液的PH在3，洗脱到流出的分离液无色为止，取分离液部分；常温下，将分离液用纳滤膜分离设备进行浓缩，回收溶剂；喷雾干燥步骤将分离液通过灭菌过滤器后，进行喷雾干燥。控制进风温度 170-220°C，出风温度70-120°C，得到花青甙质量百分数含量为39%的越橘提取物干品 1. 27kgo实施例3一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其步骤依次为欧洲越橘果实100kg，加入5倍量(也即500kg)的含0. 5%盐酸的75%乙醇，常温下浸提3小时，浸提后进行粉碎过滤；常温下，将滤液通过纳滤膜浓缩设备进行浓缩，然后用饮用水对CAD-40大孔树脂进行冲洗；随后将浸泡液通过XDA-6大孔树脂，用70%的乙醇进行洗脱，洗脱时，向酸醇溶液加入盐酸，使得酸醇溶液的PH在4，洗脱到流出的分离液无色为止，取分离液部分；常温下，将分离液用纳滤膜分离设备进行浓缩，回收溶剂；喷雾干燥步骤将分离液通过灭菌过滤器后，进行喷雾干燥。控制进风温度 170-220°C，出风温度70-120°C，得到花青甙质量百分数含量为34%的越橘提取物干品 1. 22kg0
权利要求
1.一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，包括a、将越橘浸泡在提取液中以得到浸泡液的浸泡步骤；b、用吸附树脂柱层分离浸泡液以得到分离液的分离步骤；C、干燥分离液使提取物形成的形成步骤；其特征在于该方法还包括位于b步骤及c步骤之间的将分离液通过纳滤膜的步骤，所述纳滤膜的孔径为0. 5-3nm。
2.根据权利要求1所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于 b步骤还包括分离步骤之前对吸附树脂进行冲洗的步骤，b步骤所述的吸附树脂为XDA-6树脂或CAD-40大孔树脂；柱层分离所使用的洗脱液包括酸醇类组分以及水，所述酸醇类组分的体积百分比浓度为50% -95%，所述洗脱液的PH值为2-5。
3.根据权利要求2所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于所述酸醇类组分包括盐酸、硫酸、柠檬酸中的一种或者多种；以及甲醇、乙醇、丁醇中的一种或者多种。
4.根据权利要求1所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于该方法还包括位于a步骤与b步骤之间的将浸泡液通过纳滤膜的步骤。
5.根据权利要求1或2或3或4所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于所述提取液还包括体积百分比浓度为0. 2-0. 7%的盐酸、硫酸或有机酸。
6.根据权利要求5所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于所述提取液包括体积百分比浓度为5-70%的低级醇。
7.根据权利要求1或2或3或4所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于所述a步骤包括越橘常温浸泡后进行的越橘粉碎过滤。
8.根据权利要求1或2或3或4所述的一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，其特征在于所述c步骤包括对分离液进行的喷雾干燥，所述喷雾干燥的进风温度为 170-220°C，出风温度为 70-120°C。
全文摘要
本发明属于药物提纯技术领域，涉及一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，为了解决现有提取含有花青甙的提取物的提取工艺通常用高温的方式来完成提取工艺中出现的浓缩步骤，从而在提取过程中即使得部分花青甙的结构遭到破坏的问题，本发明提供了一种从越橘上提取含有花青甙的提取物的方法，该方法包括a、将越橘浸泡在提取液中以得到浸泡液的浸泡步骤；b、用吸附树脂柱层分离浸泡液以得到分离液的分离步骤；c、干燥分离液使提取物形成的形成步骤；以及位于b步骤及c步骤之间的将分离液通过纳滤膜的步骤，所述纳滤膜的孔径为1nm左右，采用以上技术方案即可有效解决上述技术问题。
文档编号A61P1/04GK102240316SQ20111018491
公开日2011年11月16日 申请日期2011年7月1日 优先权日2011年7月1日
发明者戴珊媛 申请人:宁波绿之健药业有限公司