专利名称：一种兽用复方泰拉霉素纳米乳及其制备方法
一种兽用复方泰拉霉素纳米乳及其制备方法
技术领
本发明属于医药领域，涉及ー种具有抗菌作用的泰拉霉素新剂型，具体地说是ー种透明稳定的水包油型复方泰拉霉素纳米乳注射液及其制备方法。
背景技术：
泰拉霉素(Tulathromycin)是ー种新近上市且为动物专用的大环内酯类半合成抗生素。我国农业部在2008年第957号公告中首次允许泰拉霉素在动物生产中使用。泰拉霉素是广谱抗菌药，对引起猪和牛呼吸系统疾病的病原菌如溶血性巴氏杆菌、出血败血性巴氏杆菌、睡眠嗜血杆菌、支原体、胸膜肺炎的放线杆菌、支气管败血性博德特菌、副猪嗜血杆菌等及引起牛传染性角膜結膜炎的牛莫拉氏菌尤其敏感。具有用量少、一次给药、低残留、低毒不致畸和动物专用等众多优点。在我国，大环内酯类药物现行使用较为广泛的是泰乐菌素和替米考星，虽然这2种药物在生产中都取得了良好的效果，但随着使用时间的延长，我国很多地区出现了不同程度的耐药性，导致用量不断増大，但治疗效果却在逐步降低，而泰拉霉素药效均强于泰乐菌素和替米考星等市场广泛使用的大环内酯类药物，并且大环内酯类药物一般对细菌起抑制作用，泰拉霉素则兼有抑菌和杀菌作用。泰拉霉素有以下特点1)肌肉、皮下注射吸收迅速，达峰时间短。据报道，猪按2.5 mg/kg体重肌注后，达峰时间为15 min0泰拉霉素在消化道的吸收率很低，不适合口服使用。2)泰拉霉素体外抑菌实验表明，把培养基的pH控制在7. 2 . 4是达到最大抑菌效果的关键因素，且培养基中存在血清时，抑菌能力成倍提高。3)国外报道，将泰拉霉素单次肌注(2. 5 mg/kg)与头孢噻呋连续ロ服给药3天(3 mg/kg)治疗720头自然感染呼吸系统疾病猪的效果，治愈率分别为71. 1%和63. 1%。这些特点都表明泰拉霉素具有強大的单次肌肉注射用药的优势。乳酸甲氧苄氨嘧啶，是水溶性抗菌增效剂，干扰ニ氢叶酸的合成，使细菌或球虫的核酸合成受阻。泰拉霉素属于大环内酯类，能抑制细菌蛋白质的合成，乳酸甲氧苄氨嘧啶干扰细菌核酸合成，从而起到双重阻断作用。经研究表明，将乳酸甲氧苄氨嘧啶与泰拉霉素按1:41:5配比联合用药时，不仅扩大了泰拉霉素的抗菌谱，所产生的双重阻断作用使泰拉霉素的抗菌活力大大增強。泰拉霉素不溶于水。目前注射使用的泰拉霉素均为混悬液，混悬液使用不方便，容易堵塞针孔，生物利用度低，吸收不好。也有将泰拉霉素溶于稀酸中供注射使用的方法，这样同样面对着两个问题1)稀酸注射刺激性大，2)酸性pH值会降低泰拉霉素的药效。无论是混悬液或稀酸溶液注射，药物达峰速度快，为了避免毒性，经常要降低用药量，同时也就降低了药效。因此，ー种溶解性好、无刺激、具有缓释作用的复方泰拉霉素注射液有着广阔的市场前景。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的问题与缺陷，提供ー种溶解性好、物理性质稳定、无刺激、具有缓释作用的复方泰拉霉素纳米乳注射液。实现上述发明目的的技术方法是ー种水包油型复方泰拉霉素纳米乳注射液，由下列组分的原料组成表面活性剂为30% 40%、助表面活性剂为5% 15%、油相5% 15%、泰拉霉素2% 5%、乳酸甲氧苄氨嘧啶O. 5% I. 25%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100%。制备本发明药物的配方优选质量百分比范围是表面活性剂30% 35%、助表面活 性剂8% 12%、油相8% 12%、泰拉霉素3% 5%、乳酸甲氧苄氨嘧啶O. 7% I. 25%、余量为去尚子水，上述原料的质量百分比之和为100%。制备本发明药物的配方最佳质量百分比是表面活性剂33.2%、助表面活性剂12%、油相11. 2%、泰拉霉素3. 8%、乳酸甲氧苄氨嘧啶1%、去离子水38. 8%。
所述的表面活性剂是EL-40、RH-40、吐温-80和泊洛沙姆188中的ー种或几种的混合
物；
所述的助表面活性剂是无水こ醇、1，2-丙ニ醇、丙三醇和聚こニ醇-600中的一种或几种的混合物；
所述的油相为こ酸こ酷、こ酸丁酷、肉豆蘧酸异丙酷、油酸こ酷、三こ酸甘油酯和肉桂醛的ー种或几种的混合物。本发明在表面活性剂的选择上，本发明选用无毒性和生物相容性好的非离子型表面活性剤。非离子型表面活性剂在溶液中比较稳定，不易受强电解质、无机盐类的影响，也不易受酸碱的影响，与其他表面活性剂的相容性好，溶血作用较小。可选用的表面活性剂有EL-40、RH-40、吐温-80和泊洛沙姆188中的ー种或几种混合物。助表面活性剂除了稳定纳米乳以外，对于泰拉霉素的良好溶解性使得载药量进ー步増大。本发明根据当乳化油相所需的表面活性剂HLB值与表面活性剂相近时，所形成的乳状液稳定的原则，选用的油相为こ酸こ酷、こ酸丁酷、肉豆蘧酸异丙酷、油酸こ酷、三こ酸甘油酯和肉桂醛的ー种或几种的混合物。这些油常温下呈液态、无不良气味。本发明还有ー个目的是提供上述复方泰拉霉素纳米乳注射液的制备方法，其特征在干包括以下步骤
(1)称取配方比例的表面活性剤、助表面活性剤、油相、泰拉霉素、乳酸甲氧苄氨嘧啶、去尚子水，备用；
(2)将表面活性剂与助表面活性剂混匀，然后加入油相，混匀；
(3)加入泰拉霉素,混勻；
(4)加入乳酸甲氧苄氨嘧啶，混匀；
(5)室温下缓慢加入去离子水，且边加去离子水边搅拌，直至形成澄清透明、无色或微黄色、粘度小且流动性好的液体；
(6)将步骤5所得液体经过孔径为O.22 μ m的滤膜过滤除菌即得。本发明的一种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液主要用于预防和治疗放线杆菌、支原体、巴氏杆菌、副嗜血杆菌引起的猪、牛的呼吸系统疾病，或由莫拉氏菌引起的牛传染性角膜結膜炎。用法肌肉注射,50 70 mg/kg。
本发明经透射电子显微镜检测，液滴直径分布在10 100 nm之间，外观为黄色或无色透明液体，具有很好的稳定性
I.经时稳定性
经时稳定性是指纳米乳注射液在室温自然变化条件下贮藏时，外观随时间延长而发生变化的程度。该复方泰拉霉素纳米乳注射液持久透明，未发现浑浊或沉淀，说明其经时稳定性好。2.热贮稳定性
将该复方泰拉霉素纳米乳注射液置于试管，密封，置于37°C恒温水浴箱中储存14天，该液贮存后外观透明。3.抗冷冻稳定性 将该复方泰拉霉素纳米乳注射液于_4°C保存一周，取出后恢复至室温。该复方泰拉霉素纳米乳注射液在_4°C时成固体，恢复至室温后其恢复至透明，且放置一周后仍透明，说明该纳米乳状液抗冷冻性好。4.加速稳定性
将该复方泰拉霉素纳米乳注射液置于试管中，密封，于15000 r/min离心20 min,未分层，仍澄清透明。本发明的一种复方泰拉霉素纳米乳注射液与现有技术相比，具有以下优点
1)本发明纳米乳滴粒径小于100nm，药物脂溶性高，药物借助载体极易透过细菌的细胞壁，能直接在菌体内发 车抗菌或杀菌功能，极大的提闻了泰拉霉素的药效，从而减少了药物的摄入量；
2)经表面活性剂包裹的纳米泰拉霉素纳米乳具有缓释作用，解决了普通泰利霉素注射液作用时间短的缺陷，减少了动物的应激反应；
3)本发明复方配方提高了泰拉霉素的药效、扩大了其抗菌谱，具有双重杀菌效果；
4)本发明制剂pH呈中性，为泰拉霉素提供了发挥药效的最佳pH环境；
5)本发明注射液一次给药即达到抑菌杀菌的效果，在体内发挥药效时间长，治疗效果与头孢类及大环内酯类数日多次ロ服给药效果相同；
6)本发明制剂能避免肝首过效应，減少药物用量，降低毒性；
7)外观澄清透明，乳液液滴分散度良好，任何不均匀性或沉淀物均易被发现，感观品质提闻;
8)防腐性能提高，分散相液体比较小，能防止细菌的侵入；
9)本品可无限稀释，可根据用量需要配以葡萄糖注射液或生理盐水注射液稀释使用；
10)制备エ艺简单，适合规模化生产。
具体实施例方式以下通过药效学试验和对比试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。(所用纳米乳配方为制备本发明药物的配方最佳重量百分比表面活性剂33. 2%、助表面活性剂12%、油相11. 2%、泰拉霉素3. 8%、乳酸甲氧苄氨嘧啶1%、去离子水38. 8%，总组分100%)
试验例I 毒性试验
O ロ服毒性试验将本发明一种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液对犬和鼠进行ロ服毒性试验，犬和鼠的半数致死量分别大于26. 316 g/kg (即泰拉霉素1000 mg/kg)体重和52. 631 g/kg (即泰拉霉素2000 mg/kg)体重,属于ロ服低毒药物。2)静脉给药毒性试验静脉注射时，犬和鼠的最大无致死量为300 mg/kg (即泰拉霉素11. 4 mg/kg)。是推荐使用剂量的5倍，表示该制剂注射使用安全无毒。试验例2 兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液体外抗菌活性试验
在不同的培养基(均加入血清)上分别接种巴氏杆菌、嗜血杆菌、支原体、放线杆菌、博德特菌、牛莫拉氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、肺炎球菌，在37°C，培养24 h后缓慢向培养基上滴加O. 2%、0. 5%、1%复方泰拉霉素纳米乳注射液、复方泰拉霉素悬液(与O. 5%复方泰拉霉素纳米乳注射液中的泰拉霉素及乳酸甲氧苄氨嘧啶含量相同)、复方替米考星悬液(与O. 5%复方泰拉霉素纳米乳注射液中的泰拉霉素及乳酸甲氧苄氨嘧啶含量相同)悬液各I ml，经12 h培养，观察抑菌情况，结果见表I。表I兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液体外抗菌活性试验
权利要求
1.一种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液，其特征在干由下列组分的原料组成表面活性剂为30% 40%、助表面活性剂为5% 15%、油相5% 15%、泰拉霉素2% 5%、乳酸甲氧苄氨嘧啶O. 5% I. 25%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100% ；所述的表面活性剂是EL-40、RH-40、吐温-80和泊洛沙姆188中的ー种或几种的混合物； 所述的助表面活性剂是无水こ醇、1，2-丙ニ醇、丙三醇和聚こニ醇-600中的一种或几种的混合物； 所述的油相为こ酸こ酷、こ酸丁酷、肉豆蘧酸异丙酷、油酸こ酷、三こ酸甘油酯和肉桂醛的ー种或几种的混合物。
2.根据权利要求I所述的ー种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液，其特征在干由下列组分的原料组成 表面活性剂30% 35%、助表面活性剂8% 12%、油相8% 12%、泰拉霉素3% 5%、乳酸甲氧苄氨嘧啶O. 7% I. 25%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100%。
3.根据权利要求I所述的ー种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液，其特征在干由下列组分的原料组成表面活性剂33. 2%、助表面活性剂12%、油相11. 2%、泰拉霉素3. 8%、乳酸甲氧苄氨嘧啶1%、去离子水38. 8%。
4.根据权利要求I所述的ー种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液，其特征在于该纳米乳的粒径为I 100 nm。
5.权利要求I所述的ー种兽用复方泰拉霉素纳米乳的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)称取配方比例的表面活性剤、助表面活性剤、油相、泰拉霉素、乳酸甲氧苄氨嘧啶、去尚子水，备用； (2)将表面活性剂与助表面活性剂混匀，然后加入油相，混匀； (3)加入泰拉霉素,混勻； (4)加入乳酸甲氧苄氨嘧啶，混匀； (5)室温下缓慢加入去离子水，且边加去离子水边搅拌，直至形成澄清透明、无色或微黄色、粘度小且流动性好的液体； (6)将步骤5所得液体经过孔径为O. 22 μ m的滤膜过滤除菌即得。
全文摘要
本发明公开了一种兽用复方泰拉霉素纳米乳注射液，该纳米乳的粒径为1～100nm，由下述重量百分比的原料制成表面活性剂为30%～40%、助表面活性剂为5%～15%、油相5%～15%、泰拉霉素2%～5%、乳酸甲氧苄氨嘧啶0.5%～1.25%、余量为去离子水，上述原料的质量百分比之和为100%。本发明注射剂一次给药即可达到杀菌抑菌的效果，起效快，且具有缓释效果。能避免肝首过效应，pH呈中性，减少了动物的应激反应。安全性高，制备简单，能耗低，不需要特殊设备即可大量生产，在医药领域有广阔的市场前景。
文档编号A61K31/7052GK102657672SQ20121011503
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月19日 优先权日2012年4月19日
发明者周莹, 欧阳五庆, 欧阳伸雨 申请人:西北农林科技大学