用于治疗疼痛和其它α2肾上腺素能介导疾病的方法及组合物的制作方法

专利名称：用于治疗疼痛和其它α2肾上腺素能介导疾病的方法及组合物的制作方法
用于治疗疼痛和其它Ct 2肾上腺素能介导疾病的方法及组合物本申请是2004年8月19提交的题为“用于治疗疼痛和其它α 2肾上腺素能介导疾病的方法及组合物”的第200480033439. 9号(国际申请号PCT/US2004/027415)专利申请的分案申请。本申请根据35U.S.C. § 119 Ce) (I)要求2003年9月12日提交的临时专利申请60/502, 327的优先权，该临时专利申请的内容通过引用纳入本说明书中。
背景技术：
人类肾上腺素能受体属于膜内在蛋白质(integral membrane protein),它被分为两个大类，即α和β肾上腺素能受体。两种类型都在与儿茶酚胺、去甲肾上腺素和肾上腺素结合后介导外周交感神经系统的作用。去甲肾上腺素由肾上腺素能神经末梢产生，而肾上腺素由肾上腺髓质产生。肾上腺素能受体对这些化合物的结合亲和力成为分类的基础受体对去甲肾上腺素的结合倾向强于肾上腺素，更强于合成化合物异丙基肾上腺素。β受体对这些激素的优选的结合亲和力与上述顺序相反。在很多组织中，由α受体激活引起的功能响应，例如平滑肌收缩，与β受体结合引起的响应相反。接下来，通过来自各种动物和组织源的所述受体的药理学特征，将α和β受体之间的功能差别进一步突出并细化。结果，将α和β肾上腺素能受体进一步细分为三种α I、二种α 2和二种β亚型。现已认识到α I和α 2受体之间的功能差别，并开发了与这两种亚型选择性结合的化合物。这样，在WO 92/00073中，报道了特拉唑嗪的R ( + )对映异构体与α I亚型的肾上腺素能受体选择性结合的选择能力。由于α2受体的激动剂刺激被认为抑制肾上腺素和去甲肾上腺素的分泌，而α 2受体的拮抗作用被认为增加这些激素的分泌，因此该化合物的α I/α 2选择性显著。这样，由于α 2肾上腺素能受体介导引起血浆儿茶酚胺浓度升高，并伴有生理后遗症(心率增加，且平滑肌舒张或收缩)，因此一般认为非选择性的α肾上腺素能阻断剂例如苯氧苄胺和酚妥拉明的使用受到限制。此外，测定α激动剂活性和选择性的方法包括RSAT (受体选择与扩增技术)测定法，该测定法在 Messier 等，High Throughout Assays Of Cloned Adrenergic,Muscarinic, Neurokinin And Neurotrophin Receptors In Living Mamma.Iian Cells,Pharmacol. Toxicol. 76:308_11( 1995)中有报道，并针对α 2受体的测定进行了调整。该测定法检测受体介导的接触抑制损失，所述损失导致汇合细胞的混合群中含有受体的细胞的选择性增殖。细胞数目的增加可用合适的转染标记基因例如β_半乳糖苷酶进行检测，其活性可简单地在96孔板中检测。激活G蛋白Gq的受体引起该响应。当与具有Gi受体识别域的杂合Gq蛋白即Gq/ 52共表达(coexpress)时,通常与Gi偶联的α 2受体激活RSAT响应。见Conklin等，Substitution of Three Amino Acids Switches Receptor Spec ificityOf Gaa To That Of Gia, Nature 363:274-6. (1993)。为了解α-肾上腺素能受体的全面背景，读者可以关注Robert R. Ruffolo,Jr., a -Adrenoreceptors:Molecular Biology, Biochemistry and Pharmacology,(Progress in Basic and Clinical Pharmacology 系列，Karger，1991)，其中讲述了 a Jα2亚分类基础、分子生物学、信号转导、激动剂结构-活性关系、受体功能以及表现出α-肾上腺素能受体亲和性的化合物的治疗应用。来自人类组织源的α受体亚型的克隆、测序和表达使得将α I肾上腺素能受体细分为α ΙΑ、a IB和a ID。类似地,人类α 2肾上腺素能受体也可分为α 2Α、α 2Β和a 2C受体。每种α2受体亚型表现 出自身的药理学和组织特异性。诸如可乐定和美托咪定的α 2受体全激动剂具有有效的止痛活性，因此，目前通常直接向中枢神经系统给药，例如鞘内或硬膜外给药。这样的α 2受体全激动剂有时可用于治疗慢性痛，例如肿瘤痛、术后疼痛、神经病变性疼痛、异常性疼痛、疱疹后神经痛、应激性肠道综合征以及其它内脏痛。所述α2全激动剂在其中具有某种治疗活性的其它疾病包括成瘾治疗(例如戒毒或戒烟)、注意力缺损-活性过高障碍(ADHD)、图雷特综合征、抑郁及其它精神病障碍、高血压、高眼压(例如与某些类型的青光眼相关的高眼压)以及痉挛。然而，这些药剂并非普遍地、有效地用作止痛剂或用于治疗所述的其它适应症，这是由于其疗效和显著的、有时甚至是占优势的心血管活性及镇静活性之间的治疗窗带很窄，并且这些药剂与其它和镇静效果相关的药物之间有显著的相互作用。作为后一原因的例子，参见例如 Higuchi H.等，The Interaction Between Propofol And Clonidine For LossOf Consciousness, Anesth. Analg. 94 (4) :886_91, (2002 年 4 月)；Jaffe, R.等，AdverseInteraction between Clonidine and Verapamil,Annals Pharmacother. 28 (7-8):881-3(1994年7-8月)(报道可乐定和异搏定的镇静效果之间潜在的致命的协同作用)。由于在治疗剂量下常见的副作用，包括高的镇静和心血管抑制活性，FDA批准的α 2受体激动剂(到目前仅包括α 2受体全激动剂)更常用作局部药物或局部施用的药物，而较少用作全身性药剂。这样，α 2全激动剂可乐定用于高眼内压(IOP)的眼科治疗，所述高眼内压是由于例如青光眼引起的。由于药物以滴眼液的形式直接给药至眼睛，因此可将许多常见的全身效应最小化。然而，即使将该药物向眼睛局部施用(这使得药物可以渗透进入眼内的血管，并通过鼻泪管进入鼻子，从而导致全身递送)，也不能消除该副作用，因此治疗有效剂量仍然被该副作用所限制。

发明内容
本发明的第一个实施方案涉及如下意外发现，即向哺乳动物、特别是人类共同给药I)第一组分，该组分含有一种其活性导致α 2肾上腺素能受体直接或间接激活的化合物，以及2)第二组分，该组分含有α I肾上腺素能受体拮抗剂，导致第一组分治疗活性的效能提高，且第一组分的镇静活性没有明显提高。这样，所述两种组分的共同给药使第一组分的治疗活性和镇静活性之间的治疗窗带变宽。在一个目前优选的实施方案中，本发明涉及治疗疾病的方法，所述疾病选自疼痛，特别是慢性痛；神经变性疾病；交感神经增强的、应激相关的疾病；以及眼病，包括青光眼和高眼压。
优选地，包含于所述第一组分中的化合物选自a 2受体激动剂和去甲肾上腺素转运抑制剂(例如三环抗抑郁剂或TCA)。a 2全激动剂和TCA的例子在本领域早已是公知的；然而，本发明的发明人相信，本说明书公开的方法是在本专利申请中首次提出的。TCA (包括阿米替林(Amitril、Elavil)和去甲替林(Aventyl、Pamelor);去甲丙咪嗪(Pertofrane、Norpramin);多虑平(SinequaruAdapin);丙咪嗪(Janamine、Tofranil)；普罗替林(Vivactil);三甲丙咪嗪(Surmontil)；以及氯米帕明(Anafranil))最初用于治疗抑郁症。然而，已有报告称它们可治疗的疾病的范围很宽，例如重郁发作、所谓的非典型抑郁症、惊恐性障碍、社交恐怖症、食欲过盛、发作性睡病、(未)伴有过度兴奋的注意力缺陷障碍(ADD)、偏头痛以及各种其它慢性痛综合征，包括神经病变性疼痛、儿童遗尿症以及强迫性神经失调。在其它严重精神病一例如躁郁症、精神分裂症和情感性精神障5寻一的情况下发生的抑郁症状也可用TCA治疗，下面会讨论一些对此的说明。
对于很多TCA而言,与a 2受体全激动剂一样,一种危险的副作用是镇静作用。为此，通常医生要求在夜间睡前服用。心血管作用也与这些药物有关。常见的有直立性高血压，即站起或快速改变姿势时的晕眩。经常报道的有快速心跳，有时伴有心悸。所述药物会对不健康的心脏有害，例如导致EKG (心电图)改变或心律不齐(心脏节律或传导的紊乱)；或者，会恶化或加快心绞痛、心力衰竭或心肌梗死(心脏病发作)。这些心脏作用可能使很多患者不考虑采用TCA。正是这些心脏作用使得过量服用三环类药物相当危险。过量服用可导致严重的、可能致命的心脏并发症。在美国，三环抗抑郁剂是目前因服药过量导致死亡的首要原因。已有报道称，在分娩过程中，a 2全激动剂可乐定的硬膜外给药有效地提供缓解疼痛和运动阻滞的作用,这类似于局部麻醉剂丁哌卡因-芬太尼(bupivacaine-fentanyl)的作用。在此将Angelo，Reg. Anaesth. &Pain Med. 25:3 (2000年1-2月)通过引用纳入本说明书中。然而，与采用局部麻醉剂相比，这些作用伴有明显更大的镇静作用和心血管作用。其它a 2全激动剂例如美托咪定也得到类似的结果。a 2激动剂，例如a 2受体全激动剂，已通过外周或非外周给药用于治疗慢性痛，例如肿瘤痛、术后疼痛、疱疹后神经痛、应激性肠道综合征以及其它内脏痛，糖尿病性神经病变、与肌肉痉挛相关的疼痛、复杂性局部疼痛综合征(CRPS)、交感神经维持性疼痛(sympa thetically maintained pain)、头痛、异常性疼痛(allodynicpain)，炎性疼痛，例如与关节炎相关的炎性疼痛，胃肠疼痛，例如应激性肠道综合征(IBS)和克罗恩病，以及神经病变性疼痛。然而，在各种情况下，用这样的化合物进行的治疗被一方面的止痛作用和另一方面的过度镇静之间窄的治疗窗带所限制。同样，诸如阿可乐定(一种全激动剂)和溴莫尼定的a 2肾上腺素能激动剂已用于眼用制剂中，以治疗青光眼和其它涉及高IOP或涉及葡萄膜巩膜房水流出减小的眼病。虽然通过将药物直接置入(installation)眼内而给药降低了药物的全身浓度，并因而降低了不期望的副作用，但是药物的吸收或摄入仍然通过置入而发生。因此，最有效地治疗高眼内压所需要的药物剂量经常因在该浓度下可能也存在有害的副作用而受限。相反，本发明包括治疗哺乳动物(含人类)的方法，所述哺乳动物患有对a 2激活剂 (activating agent)的治疗有应答的疾病，所述方法包括将a I肾上腺素能受体拮抗剂和 a 2激活剂向所述哺乳动物给药，其中的镇静作用或心血管抑制作用的程度小于将等效剂量的A2AA单独给药后的上述作用的程度。
“ a 2激活剂”或“A2AA”指的是其活性导致将a 2肾上腺素能受体直接或间接激活的a 2激动剂、TCA或其它化合物。当用于治疗疼痛、特别是慢性痛时，与组合物中仅含有单独的止痛剂A2AA的情况相比，本发明的方法提供了虽然不是独有的、但是明显更好的止痛活性(即更低的EC50)。此外，这样的共同给药不会严重影响药物浓度和镇静以及降血压活性之间的剂量-应答关系，而在采用仅含有一种止痛剂A2AA的组合物的情况下，所述的严重影响是常见的。“EC50”指的是一种给定试剂的浓度，在该浓度下观察到活性是测得的最大活性的一半。在止痛及其它应用中，A2AA的优选给药途径可以是外周或非外周给药，包括口服、静脉内给药、鞘内给药以及硬膜外给药。任一组分(或两种组分)的其它可能的给药方式包括，但不限于，鞘内泵、皮下泵、皮肤贴片、静脉注射、皮下注射、肌肉注射、局部乳膏或凝胶，或口服药丸，或上述方法的组合。虽然A2AA的外周给药方法目前在某些应用中并不是优选的，但在这些应用中也可观察到所要求的方法的优势，该优势至少部分地取决于试剂及其给药所针对的适应症的特性。 除了活性成分之外，第一和第二组分优选含有一种或多种与所选的给药方式相适应的可药用载体。本说明书使用的短语“可药用载体”指的是可药用材料、组合物或赋形齐U，例如液体或固体的填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或封装材料。每种载体必须在以下意义上是“可接受的”:与制剂的其它成分相容，与给药方式相容，且对患者无害。可充当可药用载体材料的一些实例包括，但不限于(a)糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(b)淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(C)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；(d)西黄蓍胶粉；(e)麦芽；(f)明胶；(g)滑石；(h)赋形剂，例如可可油和栓剂蜡；
(i)油类，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油以及大豆油；(j) 二醇类，例如丙二醇；(k)多元醇类，例如甘油、山梨醇、甘露醇以及聚乙二醇；(I)酯类，例如油酸乙酯和十二酸乙酯；(m)琼脂；(n)缓冲剂，例如氢氧化镁、氢氧化铝、硼酸和硼酸钠，以及磷酸盐缓冲剂；(O)藻酸；(P)无热源水；(q)等渗盐水；(r)林格溶液；(S)乙醇；(t)磷酸盐缓冲溶液；以及U)其它适合用于药物制剂的无毒、相容物质。在用于治疗慢性痛的方法中，以下说明可能有助于理解本发明。已知慢性痛(例如源于肿瘤、关节炎以及很多神经病变损伤的疼痛)和急性痛(例如由即时机械刺激，例如组织切割、挤压、刺、碾压产生的疼痛)是不同的神经现象，它们在很大程度上或者由不同的神经纤维和神经受体介导，或者由这些神经在慢性刺激下的重排或功能改变介导。急性疼痛的镇静作用传递非常快，其传递主要是通过传入的神经纤维，即C纤维，这种神经纤维对机械刺激、热刺激和化学刺激的阀值通常较高。虽然慢性痛的机理还没有被完全理解，但是急性组织损伤能在最初的刺激之后几分钟或几小时内引起继发症状(secondary symptom),包括引起疼痛响应所需的刺激强度在局部降低。该现象通常发生于从最初刺激的位置向外发散的一个区域内(但大于所述位置)，这被称为痛觉过敏。继发应答可以引起显著提高的对机械或热刺激的敏感性。A传入纤维(AP和AS纤维)受刺激的阈值比C纤维的低，且A传入纤维可能涉及慢性痛的感觉。例如，在正常条件下，对这些纤维的低阈值刺激(例如轻刷或撩痒)是不痛的。然而，在某些条件下，例如神经损伤后，或在称为带状疱疹的疱疹病毒介导疾病中，即使是施以轻触或衣服的拂拭也可以是很痛的。该状况被称为异常性疼痛，并且可能至少部分地由AP传入神经介导。C纤维也可能涉及慢性痛的感觉，但是如果是这样，那么很明显，神经元长时间持续的炎症(firing)导致某种改变，该改变导致慢性痛的感觉。本说明书使用的术语“疼痛”包括急性和慢性痛。本说明书使用的术语“急性痛”指的是快速的、通常具有高阈值的疼痛，它由损伤引起，例如切割、挤压、烧灼，或化学刺激，例如暴露于辣椒的活性成分辣椒素中。本说明书使用的术语“慢性痛”指的是除急性痛之外的其它疼痛，包括但不限于，神经病变性疼痛、内脏疼痛、纤维肌疼痛、炎性疼痛、头痛、肌肉痛和牵涉痛。可以理解的是，慢性痛相对来说是长期的，例如几个月或几年，且可以是持续的或间歇的。在一个实施方案中，本发明的方法用于治疗“神经病变性疼痛”，本说明书使用的术语“神经病变性疼痛”指的是因神经损伤引起的疼痛。神经病变性疼痛不同于伤害感受性疼痛，是因涉及小的皮肤神经、肌肉或结缔组织中的小神经的急性组织损伤而引起的疼痛。与神经病变性疼痛相反，伤害感受性疼痛通常限于组织修复期间，通常可通过止痛剂或类鸦片物质缓解(Myers, Regional Anesthesia 20:173-184 (1995))。 神经病变性疼痛通常是长期的或慢性的，可以在最初的急性组织损伤之后发展数天或数月。神经病变性疼痛可涉及持续自发性疼痛以及异常性疼痛或痛觉过敏，所述异常性疼痛是一种对通常不痛的刺激所产生的疼痛反应，所述痛觉过敏是一种对通常轻微的疼痛刺激，例如针刺所产生的强化的反应。神经病变性疼痛通常对类鸦片物质治疗有抗性(Myers, supra,1995)。本发明的方法可用于治疗由下述原因导致的神经病变性疼痛，所述原因包括但不限于，外周神经、背根神经节、脊髓、脑干、丘脑或皮层的外伤、损伤或疾病。可由本发明的方法治疗的神经病变性疼痛包括，神经痛例如疱疹后神经痛，去传入痛，以及糖尿病性神经病变。可以理解的是，本发明的方法可用于治疗神经病变性疼痛，而不论所述疼痛的病因如何。作为非限制性的例子，本发明的方法可用于治疗由下述原因导致的神经病变性疼痛外周神经障碍例如神经瘤；神经压迫；神经压伤或拉伸，或神经不完全横切；或单一神经病变或多发性神经病变。作为进一步的非限制性的例子，本发明的方法可用于治疗下述疾病引起的神经病变性疼痛，例如背根神经节压迫；脊髓发炎；脊髓挫伤、脊髓瘤或脊髓半切除(hemisection)；以及脑干、丘脑或皮层的瘤或损伤。如上所述，本发明的方法可用于治疗单一神经病变或多发性神经病变导致的神经病变性疼痛。神经病变是外周神经系统中的机能失调或病变，其临床特征是感觉或运动神经元异常。术语单一神经病变是指仅单一外周神经受影响的神经病变，而术语多发性神经病变是指多个外周神经受影响的神经病变。神经病变的病因可以是已知的或未知的。已知的病因包括疾病或中毒状态的并发症，所述疾病或中毒状态包括例如引起神经病变的最常见的代谢失调一糖尿病，或辐射、缺血或脉管炎。可由本发明的方法治疗的多发性神经病变包括，但不限于，由脊髓灰质炎后综合征、糖尿病、酒精、淀粉状蛋白、毒素、HIV、甲状腺机能减退、尿毒症、维生素缺乏、化疗、2’，3’ -双脱氧胞苷(ddC)治疗或法布里病(Fabry’ sdisease)引起的多发性神经病变。可以理解的是，本发明的方法可用于治疗这些或其它类型的、病因已知或未知的慢性神经病变性慢性痛。本发明的方法也可用于治疗由头痛导致的慢性痛，所述头痛包括紧张性头痛、偏头痛、丛集性头痛、激素性头痛(hormone headache)、反弹性头痛、窦性头痛以及器质性头痛。本发明的方法还可用于治疗由活动导致的慢性痛，所述活动包括但不限于，例如长时间用电脑工作、用重物或重型机械工作或长时间站立，以及重复运动障碍(repetitivemotion disorder) (RMD)0 RMD是多种能导致慢性痛的肌肉疾病。可导致RMD的原因有用力过度、不正确的姿势、肌肉疲劳、神经或组织压迫、活动或运动的过多不间断重复，或由不自然的或笨拙的运动，例如臂或腕的扭曲引起的摩擦。常见的RMD发生于手、腕、肘、肩、颈、背、臀、膝、脚、腿和踝，而手和臂最经常受影响。本发明的方法可用于治疗任何类型的RMD弓丨起的慢性痛。本发明的方法还可用于治疗由肌肉过度紧张导致的慢性痛，例如某种类型的背痛，例如因椎间盘突出而导致的背痛；坐骨神经痛和关节痛，以及由发炎导致的慢性痛，所述发炎包括由发炎性疾病一例如骨关节炎和类风湿性关节炎一引起的发炎；组织或关节的损伤例如压碾、刺、拉伸引起的发炎；由感染例如结核病引起的发炎；或神经性发炎。作为非限制性的例子，本发明的方法可用于治疗慢性胃肠炎，包括克罗恩病、溃疡性结肠炎、胃炎、应激性肠病，以及慢性内脏痛，例如肿瘤引起的或肿瘤治疗时伴随的疼痛，例如化疗或 放疗时伴随的疼痛。类似地，本发明的方法可用于治疗慢性炎症疼痛，例如由关节炎一例如类风湿性关节炎、痛风性关节炎或骨关节炎；脊椎炎；或自身免疫性疾病例如红斑狼疮引起的慢性炎症疼痛。本发明的方法还可用于治疗慢性肌肉痛、与物质滥用或戒除相关的慢性痛以及病因已知或未知的其它类型的慢性痛。在本发明的方法中，可以理解的是，第一和第二药物可采用任何相应的方法共同给药。它们可采用相同或不同的方法、同时或不同时地给药。除治疗疼痛以外，已知a 2激动剂和TCA可用于神经保护。例如，下列疾病可用本说明书所述的第一和第二组分治疗，该组分根据本发明的方法将导致较小的副作用，所述疾病包括但不限于，神经变性疾病，例如帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化症和多发性硬化；局部缺血，例如中风；癫痫；以及神经病，例如糖尿病性和缺血性视网膜病。此夕卜，精神病例如精神分裂症和双相形精神障碍现在也被认为在某种程度上涉及神经变性。此外，现在已知本发明的组合物以及方法可用于预防或治疗多种交感神经增强的、应激相关的疾病中的任意一种，且没有伴随的镇静作用。所述疾病包括，但不限于，感觉超敏反应，例如，与纤维肌痛或头痛例如偏头痛相关的感觉超敏反应；胃肠疾病，例如应激性肠道综合征和消化不良；皮肤病，例如牛皮癣；心血管障碍；心动过速；外周血管收缩障碍，例如雷诺综合征和硬皮病；恐慌发作；代谢障碍，例如II型糖尿病、胰岛素抗性和肥胖症；肌肉收缩障碍，包括骨骼肌收缩障碍、平滑肌收缩障碍、痉挛以及与紧张型头痛相关的肌肉收缩障碍；行为失常；以及性功能障碍。在一个实施方案中，所述交感神经增强疾病是除了交感神经维持性疼痛之外的疾病，所述交感神经维持性疼痛是任何能通过交感神经阻断缓解的疼痛。有关该应用的背景知识见于2003年9月12日提交的、名称为“用于识别改进的非镇静a -2激动剂的新方法”的美国专利申请No. 60/502，840，该专利申请与本专利申请具有相同的申请日，并且根据共同的转让义务具有相同的受让人，在此通过引用将其纳入本说明书。在a 2激活剂和a I拮抗剂共同给药的基础上，本发明具有了治疗神经变性疾病的治疗功效，并且与单独使用A2AA相比，其镇静或心血管副作用更低。通过减少或防止神经元死亡，可以认识到对病理生理学或症状的改善。本说明书使用的术语“神经元死亡”指的是响应损伤或异常的死亡诱导而导致的神经细胞破坏。“神经元死亡”的定义中不包括非病理学的神经元凋亡，例如在胚胎发育过程中发生的神经元凋亡，或在含有易凋亡神经元(apoptosis-liable neuron) 一例如嗅上皮一的自我更新组织中发生的神经元凋亡。因此，术语神经元死亡可以包括非嗅觉神经上皮的神经元损伤，例如中枢神经系统神经元一例如脑神经元一的损伤，以及非易凋亡神经元中的神经元损伤。当用于涉及神经元死亡时，本说明书使用的术语“减少”指的是防止、降低或消除神经细胞中的死亡诱导。通过将有 效量的A2AA和a I拮抗剂给药以减少神经元死亡，是一种治疗涉及神经元死亡或功能障碍的疾病的有效方法，且具有最小化的镇静或心血管副作用。本说明书使用的术语“神经变性疾病”指的是特征为进行性神经系统功能障碍的疾病。神经变性疾病包括一组不同种类的中枢或外周神经系统疾病，所述疾病具有多种不同的病因。这样的疾病可以是，但不限于，遗传性的、继发于中毒或代谢过程，且可以因感染而导致。神经变性疾病是可与年龄有关的或慢性的进行性疾病。该疾病的特征可以是脑的相对特定的区域的异常或特定神经元群的异常。在不同的神经变性疾病中，受影响的特定细胞群通常决定了该疾病的临床表型。具体而言，神经变性疾病可以与特定的染病中枢或外周神经系统结构的萎缩相关。示例性的神经变性疾病包括，但不限于，运动神经元病(ALS)、帕金森综合征、多发性硬化、弥漫性大脑皮层萎缩、路易体痴呆、皮克病、中脑皮质边缘痴呆(mesolimbocortical dementia)、丘脑变性、延髓性麻痹、亨廷顿舞蹈病、皮质纹状体脊髓变性、皮质基底神经节变性、大脑小脑变性(cerebrocerebellar degeneration)、具有疫挛性下肢轻瘫的家族性痴呆、葡聚糖体病(polyglucosan body disease)、希-德综合征、橄榄体脑桥小脑萎缩、进行性核上麻痹、畸形性肌张力障碍、哈-斯病、Meige综合征、家族性震颤、吉累斯 德拉图雷特综合征、棘红细胞增多症伴发舞蹈病(acanthocytic chorea)、弗里德赖希共济失调、霍姆斯家族性小脑皮层萎缩(Holmes familial cortical cerebellaratrophy)、AIDS 相关痴呆、GSS 氏病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease)、进行性脊髓性肌萎缩、进行性延髓性麻痹(progressive balbar palsy)、原发性侧索硬化、遗传性肌萎缩、痉挛性截瘫、腓侧肌萎缩、肥大性间质性多发性神经病、多神经炎型遗传性共济失调、视神经病变、糖尿病性视网膜病变、阿尔茨海默病以及眼肌麻痹。本领域技术人员理解，这些和其它轻度、中度或重度的神经变性疾病可以用本发明的方法治疗。在本发明的另一个实施方案中，提供了治疗眼病的方法，该方法包括将含有A2AA的第一组分和含有a I受体拮抗剂的第二组分共同给药。在该实施方案中，能够在所产生的镇静和心血管作用大幅降低的A2AA浓度下获得治疗功效。可用本发明的方法治疗的眼病的例子包括但不限于，青光眼一包括开角型青光目艮，高眼压，黄斑病和视网膜变性，例如非渗出性年龄相关黄斑变性(ARMD)、渗出性年龄相关黄斑变性(ARMD)、脉络膜新生血管形成、糖尿病性视网膜病、中心性浆液性脉络膜视网膜病变、囊样黄斑水肿、糖尿病性黄斑水肿、近视性视网膜变性；炎性疾病，例如急性多灶性鳞状色素上皮病变、贝切特病、鸟枪弹样视网膜脉络膜病变、传染性疾病(梅毒、莱姆病、结核病、弓形体病)、中间葡萄膜炎(睫状体平坦部炎)、多灶性脉络膜炎、多发性一过性白点综合征(Multiple Evanescent White Dot Syndrome, MEWDS)、眼结节病(OcularSarcoidosis)、后巩膜炎、匍行性脉络膜炎(ser piginous choroiditis)、视网膜下纤维化和葡萄膜炎综合征、伏-小柳-原田综合征、点状内层(punctate inner)脉络膜病变、急性后极部多灶性鳞状色素上皮病变、急性视网膜色素上皮炎、急性黄斑视神经视网膜病；血管和渗出性疾病，例如糖尿病性视网膜病、视网膜中央动脉阻塞病、视网膜中央静脉阻塞、弥散性血管内凝血病、视网膜分支静脉阻塞、高血压性眼底改变(Hypertensive FundusChanges)、眼缺血综合征、视网膜动脉微动脉瘤、慢性渗出性视网膜病(Coat’ s Disease)、旁中心凹毛细血管扩张、半侧视网膜静脉阻塞、视乳头静脉炎(Papillophlebitis)、视网膜中央动脉阻塞、视网膜分支动脉阻塞、颈动脉病(CAD)、霜样树枝状(Frosted Branch)脉管炎、镰状红细胞性视网膜病和其它血红蛋白病、血管样条纹、家族性渗出性玻璃体视网膜病变；伊尔斯病；创伤性疾病、外科疾病以及环境疾病，例如交感性眼炎、葡萄膜炎性视网膜病(Uveitic Retinal Disease)、视网膜脱离、外伤、视网膜激光治疗、光动力学治疗、光凝固、手术中血流灌注不足、辐射性视网膜病、骨髓移植性视网膜病(Bone MarrowTransplant Retinopathy);增殖性疾病，例如增殖性玻璃体视网膜病以及视网膜前膜(Epiretinal Membrane);传染性疾病,例如眼组织胞衆菌病、眼弓蛔虫病、拟眼组织胞衆菌病综合征(PH0S)、眼内炎、弓形体病、与HIV感染相关的视网膜病、与HIV感染相关的脉络膜病、与HIV感染相关的葡萄膜病、病毒性视网膜炎、急性视网膜坏死、进行性视网膜外层 (outer retinal)坏死、真菌性视网膜病、眼梅毒、眼结核、弥漫性单侧亚急性视神经视网膜炎、蝇蛆病；遗传病，例如视网膜色素变性、伴有视网膜营养不良的全身性疾病、先天性静止性夜盲、锥体(cone)营养不良、斯塔加特病和眼底黄色斑点症(Fundus Flavimaculatus)、贝斯特病、视网膜色素上皮的图形营养不良(pattern dystrophy)、X伴性(X-linked)视网膜劈裂症、索斯比眼底营养不良(Sorsby’ s Fundus Dystrophy)、良性同心性黄斑病、Bietti结晶样营养障碍、弹性假黄瘤(pseudoxanthoma elasticum);视网膜损伤,例如黄斑洞、巨大视网膜撕裂；视网膜肿瘤，例如与肿瘤相关的视网膜病、RPE的先天性肥大、后部葡萄膜黑色素瘤(Posterior Uveal Melanoma)、脉络膜血管瘤、脉络膜骨瘤、脉络膜转移、视网膜及视网膜色素上皮的混合性错构瘤(Combined Hamartoma)、视网膜母细胞瘤、眼底的血管增生瘤(Vasoproliferative Tumor)、视网膜星形细胞瘤和眼内淋巴瘤。视神经视网膜和视神经的缺血可在以下情况下发生视网膜分支静脉阻塞、视网膜分支动脉阻塞、视网膜中央动脉阻塞、视网膜中央静脉阻塞、玻璃体内手术、视网膜变性例如视网膜色素变性和与年龄相关的黄斑变性。本发明的方法中使用的组合物一例如共同给药的A2AA和a I拮抗剂一其减少神经元死亡或功能障碍的能力，可以通过在用所述化合物进行治疗和未进行治疗的情况下分析可观测的神经细胞破坏的信号或征兆而加以测定。神经元凋亡死亡的引发对细胞功能和形态具有可观测的影响，并且对含有功能障碍或凋亡神经元的组织、器官以及动物体也有可观测的影响。因此，神经元破坏的指标可以包括可观测的分子参数变化，例如凋亡诱导基因表达的增加；细胞功能变化，例如线粒体功能降低；细胞形态变化，例如细胞收缩和起泡(bleb);器官和组织的功能以及形态变化，例如出现梗塞或其它损害，其严重性可以通过包括损伤体积(lesion volume)和损伤尺寸(lesion size)在内的参数进行测定；动物模型中的生理变化，包括功能变化和行为变化，前者包括例如运动功能损失、死亡率增加以及存活率减小，后者包括例如痴呆发作或记忆损失。可以通过在细胞、组织、器官或动物体中对其至少两个状态的神经元破坏指标进行比较，来测定所述细胞、组织、器官或动物体的神经元破坏指标的降低。这样，神经元破坏指标的降低可采用相对于对照条件的方式表达。对照条件可以是，例如治疗前的、未进行治疗的、以其它方法治疗的或正常动物中的细胞、组织、器官或动物体，或者由本领域技术人员确定的其它合适条件。在具体的实施方案中，本发明的方法通过将本发明的第一和第二组分进行外周给药来实施。本说明书中使用的术语“外周给药”或“通过外周给药”指的是将试剂引入研究对象的中枢神经系统之外。外周给药包括除直接向脊柱或脑给药之外的其它任何给药途径。这样，清楚的是，鞘内和硬膜外给药以及卢页内注射(cranial injection)或植入虽然在本发明的实施方案的范围内，但不在术语“外周给药”或“通过外周给药”的范围内。外周给药可以是局部或全身给药。局部给药导致递送至局部给药部位的药用组合物显著多于远离给药部位的区域。全身给药导致药用组合物的递送基本上遍及研究对象的整个外周神经系统，也可导致递送至中枢神经系统，这有赖于该组合物的特性。可用于本发明方法的外周给药途径包括，但不限于，口服、局部给药、眼内给药、静脉或其它注射，以及植入微泵或其它缓释装置或制剂。可用于本发明的药用组合物可以以下方式进行外周给药，例如任何可接受形式的口服，例如片剂、液体、胶囊、粉剂等；静脉注射、腹膜内注射、肌肉注射、皮下注射或非经肠注射；经皮扩散或电泳；任何可接受形式的局部给药，例如滴剂、乳膏、凝胶或药膏；以及通过微泵或其它植入的缓释装置或制剂。本发明还涉及治疗哺乳动物疼痛的方法，所述方法包括外周或非外周共同给药a)第一组分，该组分含有一种其活性导致a 2肾上腺素能受体直接或间接激活的化合物，以及b)第二组分，该组分含有a I肾上腺素能受体拮抗剂，其中根据该方法第一组分以有效引起半数最大止痛作用的剂量给药时所引起的镇静程度，小于相似的染病哺乳动物中，在没有所述第二组分的情况下，以有效引起半数最大止痛作用的剂量给药时所引起的镇静程度。本发明的本实施方案和其它实施方案可以是非外周的，例如鞘内或硬膜外给药，或全身给药，例如口服、腹膜内给药、静脉给药、肌肉给药或经皮给药。除了治疗疼痛以外，本发明的另一实施方案涉及治疗已知a受体激动剂对其有效的其它疾病。这样的疾病包括但不限于，诸如高眼压和青光眼的眼病，交感神经增强的、应激相关的疾病，神经变性疾病，以及痉挛。用a肾上腺素能药物治疗这些疾病可能也会引起有害的镇静副作用，本发明可帮助改善该副作用。在本实施方案中，对于将第一和第二组分向眼睛的治疗性给药，可优选将第一和第二组分进行局部递送。局部眼用制剂在本领域是公知的。眼用药用组合物可以通过以下所述制备将治疗有效量的第一和第二组分(或者作为单一制剂，或者作为独立的制剂)作为活性组分与常规的可眼用药用赋形剂结合，并制成适合于局部眼用的单位剂型。在液体制剂中，每种成分的治疗有效量通常在约0. 0001到约5% (W/W)之间，优选约0. 001到约I. 0% (W/W)之间。对于眼用，优选的溶液可采用生理盐水溶液作为主要赋形剂来制备。优选采用合适的可药用缓冲体系(例如，但不限于，硼酸盐、氨基丁三醇或磷酸盐缓冲体系)将这样的眼用溶液的PH保持在约6. 2到约7. 8之间。所述制剂也可含有常规的可药用防腐剂、稳定剂和表面活性剂。优选的可用于本发明的眼用局部方法和组合物中的防腐剂包括，但不限于，氯化苯甲烷铵、其它聚合(polymeric)季铵防腐剂(例如PHMB和:Polyquad )、氯代丁醇、硫柳汞、醋酸苯汞以及硝酸苯汞。特别优选的一类防腐剂是氧化性防腐剂，例如稳定化的二氧化氯(例如Plir i te 稳定化的二氧化氯)、稳定化的氧硼酸盐(oxyborate)等。用于眼用制剂的表面活性剂可以包括离子或非离子表面活性剂，例如，但不限于，Triton (例如TritonX-100),Tween(例如聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯80)和Pluronic 表面活性剂。同样，多种优选的赋形剂可用于本发明的眼用制剂中。这些赋形剂包括，但不限于，聚乙烯醇；Carbopols (丙酸与烯丙基蔗糖交联的聚合物)；Pemulin ;聚乙烯吡咯烷酮；泊洛沙姆；纤维素制品，例如羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟甲基纤维素 等。可优选将所述眼用制剂制成乳剂。如果这样，所述乳剂可以是水包油乳剂或油包水乳剂。该乳剂可含有防腐剂和/或赋形剂；然而，乳剂通常会含有至少一种表面活性剂，
并会含有乳化剂。乳化剂也可以是一种表面活性剂。一种优选的乳化剂是Pemulin ，它
是一种交联的聚丙烯酸酯。如果方便,或者根据需要,可以加入张力调节剂(tonicity adjustor)。张力调节剂包括但不限于，盐类，特别是氯化钠、氯化钾，甘露醇和甘油，或任何其它合适的可眼用张力调节剂。可以采用多种缓冲剂以及调节pH值的方法，只要获得的制剂是可眼用的。相应地，缓冲剂包括醋酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂和硼酸盐缓冲剂。酸或碱可以根据需要用于调节这些制剂的PH值。类似地，用于本发明的可眼用抗氧化剂包括，但不限于，偏亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、乙酰半胱氨酸、丁基化羟基茴香醚以及丁基化羟基甲苯。可包括于眼用制剂中的其它赋形剂组分有螯合剂。优选的螯合剂是依地酸二钠，但是其它螯合剂也可代替其使用或与其结合使用。各组分可按以下的量使用组分量(% w/w)
各活性成分约0. 001-5
防腐剂约0-0.10
赋形剂约0-40
张力调节剂约0-10
缓冲剂约0.01-10
PH值调节剂按将pH值调至4. 5-7. 5所需
抗氧化剂按需
表面活性剂按需
纯水按需补至100%本发明的活性化合物的实际剂量取决于具体的化合物和待治疗的疾病；对合适剂量的选择是本领域技术人员熟知的。将本发明的眼用制剂方便地包装为适合于计量施用的形式，例如于装有滴管的容器中，以方便向眼睛的施用。适合于滴用的容器通常由合适的惰性、无毒塑料制成，通常容纳约0. 5到约15ml的溶液。通常将不含防腐剂的溶液装于不可再封的(non-resealable)容器中，该容器中可容纳最多约10个、优选最多约5个单位剂量，其中典型的单位剂量是I到约8滴，优选I到约3滴。一滴的体积通常在约20-35. mu. I。在本发明的方法中，第一组分优选选自a2激动剂或TCA;更优选a 2激动剂；最优选为选自可乐定、溴莫尼定、美托咪定、米伐折醇(mivazerol)和替扎尼定的a 2全激动剂。这些化合物及其合成方法是公知的。在具体的实施方案中，a I肾上腺素能受体拮抗剂选自哌唑嗪、特拉唑嗪和5-甲基乌拉地尔。前两种化合物及其合成方法分别在美国专利3，511，836和4，026，894中记述；后一化合物是一种易于合成的乌拉地尔衍生物，其合成方法记述于美国专利3，957，786中。这些和本专利申请中所参引的所有其它参考文献在此通过引用纳入本说明书中。此外，其它a I受体拮抗剂在本领域是公知的；很多这样的化合物已获临床批准。另参见Lagu，26 Drugs of the Future 757-765 (2001)和 Forray 等，8Exp. Opin. Invest. Drugs 2073(1999)，在此通过引用将其纳入本说明书中，其中提供了很多a I拮抗剂的例子。在本发明说明书的教导下，对于本领域技术人员而言，其它实施方案将是显而易见的。


图I示出了在采用硫前列酮诱导异常性疼痛模型的野生型小鼠中，与5-甲基乌拉地尔共同给药时或不与5-甲基乌拉地尔共同给药时的可乐定的止痛活性。图2是与5-甲基乌拉地尔共同给药时或不与5-甲基乌拉地尔共同给药时的可乐定的剂量应答曲线，下面将对其实施加以更详细的记述。结果表明，5-甲基乌拉地尔对可乐定的镇静作用没有影响。
图3示出了在采用硫前列酮诱导异常性疼痛模型的野生型小鼠中，与5-甲基乌拉地尔共同给药时或不与5-甲基乌拉地尔共同给药时的阿米替林的止痛活性。图4示出了将哌唑嗪(图4A)、溴莫尼定(图4B )、溴莫尼定和0. 001%哌唑嗪(图4C)以及溴莫尼定和0. 003%哌唑嗪向兔眼局部给药的情况下，经处理的和未处理的兔眼的眼内压。
具体实施例方式在第一个实施方案中，本发明涉及申请人的如下意外发现向需要治疗的哺乳动物外周或非外周共同给药一种组合物，所述组合物含有
I)第一组分，该组分含有一种其活性导致直接或间接刺激a 2肾上腺素能受体活性的化合物，以及2)第二组分，该组分含有一种a I肾上腺素能受体拮抗剂，当产生治疗效果所需的第一组分的剂量小于在相似的接受第一组分作为单独的治疗剂给药的、染病哺乳动物中产生类似治疗效果所需的剂量时，上述给药导致较低的镇静和/或心血管副作用。这意味着，可通过将第一和第二组分向哺乳动物、包括人类共同给药来获得治疗有效的效果，该效果包括例如止痛、降眼压活性、神经保护等，而且，和类似的有效治疗剂量的第一组分的给药相比，所述共同给药在治疗剂量下的镇静作用显著降低，并且心血管活性有所抑制。在目前优选的实施方案中，所述哺乳动物因慢性痛而需要止痛剂。因此，在本发明的该实施方案中，申请人发现，将一种其活性导致a 2肾上腺素能受体直接或间接激活的化合物(A2AA) —例如a 2受体全激动剂，例如可乐定、美托咪定或替扎尼定或TCA，与一种a I受体拮抗剂共同给药，可导致a 2介导的A2AA治疗活性的“暴露(unmasking)”或增大，并伴有A2AA治疗效能的提高，且使用该试剂时常见的镇静副作用基本未升高。结果，对于用选定的A2AA进行的治疗而言，其治疗窗带与无a I拮抗剂的给药相比有所增大，这使得可以在某些情况下增加A2AA的用量，而在另一些情况下用量不变但副作用减小。优选地，所述A2AA为a 2肾上腺素能受体激动剂。虽然应将本发明理解为不受任何具体理论的限制，但是申请人相信，本发明之所以起作用是因为，对a I受体或其一种或多种亚型一包括人类a 1A、a IB和a ID受体一的刺激，使刺激a2A、028和/或a 2C受体所产生的活性(例如止痛、降眼压、神经保护或其它活性)减弱。另外还相信，大多数A2AA并没有确定为缺乏a I刺激活性(无论其是否被称为a 2 “选择性”的)，因此具有足够的内在a I激动剂活性以导致所述减弱作用。因此可以相信，a I拮抗剂的共同给药阻止了刺激a I受体所导致的有害反作用。优选地，所述a I拮抗剂至少具有a IA受体拮抗剂活性、a IB拮抗剂活性或a ID受体拮抗剂活性。更优选地，所述a I受体拮抗剂至少具有a IA受体拮抗剂活性。所述拮抗剂可以在一个以上的a I受体亚型上具有拮抗剂活性。将A2AA和a I拮抗剂向哺乳动物共同给药，除了不增加、甚至有时减少用a 2激动剂治疗哺乳动物时出现的镇静副作用以外，还提高了 A2AA的治疗效果(即拓宽了 “治疗窗带”)，因而使得能够以低于其它情况下可能的剂量进行治疗。在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物疼痛的方法，所述方法包括给药I)第一组分，其活性导致a 2肾上腺素能受体的直接或间接激活，以及2)第二组分，该组分含有一种a I肾上腺素能受体拮抗剂。优选地，所述A2AA选自a 2受体激动剂和去甲肾上腺素转运抑制剂(例如三环抗抑郁剂或TCA);更优选选自a受体激动剂。或者，所述A2AA优选选自溴莫尼定、可乐定、替扎尼定、美托咪定、去甲肾上腺素和MPV-2426 (雷度咪定)。另外，在另一个实施方案中，本发明涉及治疗哺乳动物的高眼内压的方法，所述方法包括给药1)第一组分，其活性导致a 2肾上腺素能受体的直接或间接激活，以及2)第二组分，该组分含有一种a I肾上腺素能受体拮抗剂。在该实施方案中，优选的给药途径可以是局部眼用制剂，例如溶液剂、悬浮剂或乳剂。在一个优选的实施方案中，A2AA是a 2激动剂，更优选a 2全激动剂。优选将第一和第二组分包含于单一制剂中以进行共同给药，但是第一和第二组分也可作为单独的组合物共同给药。本说明书使用的“共同给药”应当包括第一和第二组分作为单一的组合物给药，或者分别作为单独的组合物给药。此外，各组分可通过不同的途径 给药，并且/或者可同时或稍微不同时给药。在另一个实施方案中，本发明包括组合物，所述组合物含有治疗有效量的第一和第二组分，并配有可药用载体。在另一个实施方案中，所述第一和第二组分可以各自是单个分子的结构域(domain)。例如,通过采用化学连接剂(chemical linker)例如双官能试剂,使AA2A (选自TCA或a 2激动剂)和a I拮抗剂缀合(conjugation),从而可将第一和第二组分连接起来。申请人:现给出实施例，以解释本发明的某些实施方案。本发明不受这些实施例的限制。实施例I :通过a 2激动剂和a I拮抗剂的共同给药减轻慢性痛一种慢性疼痛(特别是外周神经病变)模型涉及实验动物中某侧L5 (也可选用L6)脊柱神经的手术结扎。手术后痊愈的大鼠体重恢复并表现出与正常大鼠相似的一般活性水平。然而，上述大鼠的足部出现异常，其中后爪中度外翻并且脚趾紧握在一起。更重要的是，受手术影响一侧的后爪在手术后约I周内对诸如对人类产生轻触感的低阀值的机械刺激引起的疼痛表现出敏感性。上述对通常非疼痛性轻触的敏感性称为“触觉异常疼痛”并持续至少两个月。该反应包括抬起受影响的后爪以逃避刺激，轻舔爪并保持其悬空多秒。上述反应在对照组中均不常见。手术前使大鼠麻醉。将手术部位的毛刮净并用聚烯吡酮磺或奴佛卜因准备好手术部位后，从胸椎XIII向下到骶骨切开，并使肌肉组织从L4到S2水平的脊椎骨(左侧)上分离。找到L6脊椎骨，用小骨钳仔细横切除去，使得可目视辨别L4 L6脊柱神经。分出L5 L6脊柱神经并用6-0丝线紧紧结扎起来。在右侧进行相同的手术步骤以作为对照，除了不进行脊柱神经的结扎。确定止血完全后缝合伤口。在切开区域涂抹少量抗生素药膏后，将大鼠转移到调热-温灯下的塑料恢复笼中。在实验当天即手术后至少七天，通过鞘内注射、腹膜内注射、口服管饲法或这些方法中之一或多种的组合，向大鼠(每试验组有6只)给药试验药物。或者，可以通过鞘内给药5iU于50%DMS0中的硫前列酮(前列腺素E2受体激动齐U) 200ng，在动物中引起异常性疼痛。在该模型中，从硫前列酮的脊柱给药后15分钟起的35分钟内，对画刷触摸胁腹的疼痛反应评分8次。Minami等，57Pain 217-223 (1994)。按16分制，单独的硫前列酮给药得到的分数为12-13分。将化合物配制到0. 01-5%的DMSO中，对于全身给药，剂量为lml/kg体重，对于鞘内给药,剂量为于盐水中的5 ii I。以0. 01至10. Oii g的鞘内剂量对可乐定进行测试。在Chung大鼠模型中，在给药前及给药后30分钟用弗雷氏毛测量触觉的异常疼痛，所述弗雷氏毛是一系列硬度递增的细毛。将大鼠置于底部为金属丝网的塑料笼中并允许适应约30分钟。穿过丝网用足以产生轻微弯曲的力向大鼠后爪的脚底中部区域垂直施加弗雷氏毛并保持6 8秒。施加的力据计算在0.41 15. I克的范围内。如果爪收缩敏捷，则认为是积极应答。正常的动物将不对此范围内的刺激产生应答，但经手术结扎的爪将对 I 2 克毛产生收缩应答。米用 Dixon,ff. J. , Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 20:441一462(1980)的方法测定50%爪收缩阀值，将该文通过引用纳入本说明书中。比较用药前后的阀值并以15. I克的正常阀值为基础计算触觉敏感性的逆转百分比。结果表明，可乐定在大鼠和小鼠中都具有剂量依赖方式的止痛作用。在异常疼痛大鼠的Chung模型中，鞘内剂量为0. I ii g时没有止痛作用，而在剂量为I. 0 ii g时观察到最大的止痛作用。为了确定治疗窗带，用各种剂量的可乐定治疗大鼠，并检测其镇静作用。为了测定镇静作用，用各种剂量的可乐定对六只雄性Sprague-Dawley大鼠进行鞘内注射。注射药物30分钟后，按以下所述监测运动能力以对镇静作用评分。将大鼠置于被覆盖的暗室中，并用数字通信分析器(digicom analyzer) (Omnitech Electronic)每5分钟测量其探究行为(exploratory behavior)—次。每当大鼠将沿X和Y方向的32光电束阵列遮断时，机器进行记录，并量化该大鼠与用盐水代替可乐定给药的对照动物之间的行为差异。在该检测中，3. Oiig的鞘内剂量具有温和的镇静作用，而IOiig的剂量引起最大的镇静作用。因此，止痛与镇静之间的分离为大约3-10倍。在硫前列酮诱导异常性疼痛的小鼠模型中，得到类似的结果。如图I所示，在硫前列酮诱导小鼠模型中，在可乐定给药之前5分钟，以30 ii g/kg的剂量将a I拮抗剂5-甲基乌拉地尔腹膜内给药，使有效止痛剂量比单独使用可乐定的剂量应答降低了 10倍(见图1)，而镇静剂量不变(见图2)。这样，在慢性痛模型中，可乐定(一种a 2激动剂)和一种a I拮抗剂的共同给药将疼痛和镇静之间的治疗窗带从3-10倍“加宽”到30-100倍。实施例2 :通过TCA和a I拮抗剂(5_甲基乌拉地尔)的共同给药减轻慢件痛三环抗抑郁剂(TCA)是一种常用的处方抗抑郁剂和止痛剂，它通过抑制去甲肾上腺素的摄取而间接刺激a 2受体。用硫前列酮诱导异常性疼痛小鼠模型和TCA阿米替林(amitriptylene)进行实验，实验方式类似于以上实施例I中所述。化合物阿米替林及其制备方法记述于美国专利3，205，264中，在此通过引用将其纳入本说明书中。将所述剂量的阿米替林溶于50%DMS0中并对每只小鼠鞘内注射5 ii 1，并且IP注射30 u g/kg的5-甲基乌拉地尔或通过类似途径注射盐水。按实施例I中所述对画刷的刺激评分，结果示于图3中。与a 2激动剂和a I拮抗剂的组合一样，阿米替林和a I拮抗剂的 组合也降低了获得最大止痛作用所需的剂量，在本例中，降低了约3倍。因此，本实施例表明，对a 2肾上腺素能受体的直接或间接(例如通过增加去甲肾上腺素的产生，或者通过限制去甲肾上腺素的摄取或转化(turnover))刺激与a I拮抗作用相结合，与单独使用A2AA相比增加了镇静作用和治疗功效之间的治疗窗带。实施例3 :通过a 2激动剂和a I拮抗剂(哌哔嗪)的共同给药减轻慢性痛在采用类似于针对硫前列酮诱导异常性疼痛模型所述方法的情况下，腹膜内给药a I拮抗剂哌唑嗪(100ng/kg)在单独给药时(疼痛分数=4. 8±0. 6)或在硫前列酮诱导异常性疼痛模型中(12. 8±0. 8)均没有效果。将哌唑嗪向小鼠给药，15分钟后将硫前列酮和各种鞘内剂量的可乐定(0. 03,0. I和0. 4微克，于5微升的50%DMS0中)向小鼠给药。在与a I拮抗剂共同给药的情况下，可 乐定的止痛剂量应答如下0. 03微克剂量为13. 3±0. 9，0. I微克剂量为4. 8±0. 8，0. 4微克剂量为4.8±0.6。这表明，可乐定的EC5tl与可乐定的单独i.t.给药相比降低了大约4倍。这样，A2AA和a I拮抗剂的共同给药与单独使用A2AA相比，再次提高了其效能。在该实验中，0. I微克的可乐定在不存在哌唑嗪的情况下没有止痛作用。实施例4 :通过相同途径将a 2激动剂和a I拮抗剂给药减轻慢性痛实验步骤与实施例I相同，不同之处在于将总体积5微升、于50%DMS0中的可乐定(各种剂量)和5-甲基乌拉地尔(I微克，鞘内)通过鞘内注射共同给药。结果基本上与Cil拮抗剂通过腹膜内注射的情况相似。因此，可将两种试剂同时或稍微不同时给药，可通过相同或不同的途径给药，且具有相同或相似的治疗效果。实施例5 :用a 2激动剂和a I拮抗剂治疗高眼内压采用雄性新西兰兔评估对正常IOP测量的药效。小心地握住兔子以将刺激最小化。应当通过颈背部将其抓起，并用另一只手支撑其后腿。将兔子从笼中取出后，向每只眼
睛给药约25yi的稀释的Ophthet ic⑧〔O. 05%)局部麻醉剂。在双眼中进行初始的iop
测定。此时将左右眼之间的IOP差等于或大于3mmHg的兔子替换掉。在时间零点(T=O)对两眼测定后，立即将0. 1% (w/w)的溴莫尼定酒石酸盐眼用制剂滴入每只实验兔的一只随机选择的测试眼的角膜上。还将0.001%或0.003% (w/w)的盐酸哌唑嗪向非对照(non-control)兔给药。向另一只眼给予不含药的赋性剂。所述眼用制
剂含有50ppm的Pur i (稳定化的二氧化氯)、0. 5%的羧甲基纤维素、0. 6% (w/w)的硼
酸盐缓冲剂(PH7. 7)和少量盐(NaCl、KC1、CaCl2' MgCl2X在7小时内，以指定的时间间隔测量给药的(本侧)和未给药的(对侧)眼的眼内压。使用Model 30ClassiCTM眼压计作为测量和记录仪器进行压力读取。该仪器通过扁平张力测量法非侵入地测量眼内压(I0P)。图4A示出了将35微升0. 003%的哌唑嗪滴入本侧兔眼得到的眼内压。可以看出，与未给药的眼相比，开始时眼内压有一个小的下降，然后在2小时内返回基线。图4B示出了滴入0. 1%的a 2激动剂溴莫尼定的结果。在该情况下，眼内压在开始的30分钟内有显著上升，然后下降约30%。虽然在人类中未观察到该效果，但是IOP开始的上升与a I激动剂活性有关。在0. 1%的溴莫尼定和0. 001%的哌唑嗪共同给药的情况下，观察到很小的差另IJ，如图4C所示。然而，当将0. 1%的溴莫尼定和0. 003%的哌唑嗪滴入兔眼时(图4D)，开始时仅观察到很小的眼压升高，然后IOP最多降低约40%，这表明a I拮抗剂的加入提高了该剂量的溴莫尼定的治疗效果，并伴有该剂量的a I活性的降低。
以下权利要求 基于本发明的这些和其它实施方案。
权利要求
1.用于治疗哺乳动物的感觉超敏反应的方法，包括共给予 1)选自溴莫尼定、替扎尼定、美托咪定和米伐折醇的第一化合物，以及 2)选自5-甲基乌拉地尔、乌拉地尔、特拉唑嗪和布那唑嗪的第二化合物， 其中第一化合物以有效引起对所述感觉超敏反应的半数最大治疗功效的剂量给药时所引起的镇静程度，小于在相似的染病哺乳动物中，在没有所述第二化合物的情况下，给予所述第一化合物时所引起的镇静程度。
2.权利要求I的方法，其中所述第一化合物以选自外周、非外周及其结合的方式给药。
3.权利要求I的方法，其中所述第二化合物以选自外周、非外周及其结合的方式给药。
4.权利要求2的方法，其中所述外周给药选自鞘内给药、硬膜外给药、口服给药、腹膜内给药、静脉内给药、肌内给药、经皮给药及其组合。
5.权利要求3的方法，其中所述外周给药选自鞘内给药、硬膜外给药、口服给药、腹膜内给药、静脉内给药、肌内给药、经皮给药及其组合。
6.权利要求I的方法，其中所述第一化合物和第二化合物以单一组合物给药。
7.权利要求I的方法，其中所述第一组合物和第二组合物以不同组合物给药。
全文摘要
治疗哺乳动物的包括眼病、应激相关的疾病以及神经变性疾病在内的疾病的方法和组合物，采用直接或间接刺激α2肾上腺素受体激动剂活性、且具有最小的镇静作用或其它副作用的组合物。
文档编号A61K31/4168GK102657664SQ201210139388
公开日2012年9月12日 申请日期2004年8月19日 优先权日2003年9月12日
发明者D·W·吉尔, J·E·唐奈罗 申请人:阿勒根公司