一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的痫愈胶囊的检测方法
【专利摘要】本发明提供一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参，其中，所述薄层色谱的条件包括：采用硅胶Ｇ薄层板和体积比为70~100∶5~10∶1~5，优选为80~100∶6~9∶1~4，更优选为90∶8∶2的A、B、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烷、苯、甲苯、三氯甲烷、异丙醇和正丁醇，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙二醇、甲醇和二恶烷，优选为甲醇；所述C溶液选自甲酸、冰醋酸、二甲醚、甲酸甲酯和水，优选为甲酸。本发明能够有效控制所述药物的质量，使所述药物质量达到稳定、可控、高效及安全。
【专利说明】—种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痙挛的痫愈胶囊的检测方法
【技术领域】
[0001]本发明属于制药【技术领域】，具体涉及一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，特别是涉及一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的胶囊剂，例如痫愈胶囊的检测方法。
【背景技术】
[0002]癫痫无论是原发性或继发性，均可造成神经元损害、智力减退、外伤、甚至突然意外的死亡等。治疗最重要的目的是控制发作，维持神经精神功能的正常，而控制发作的主要手段是药物治疗。有明确病灶的、药物治疗无效的或产生无法耐受的毒副作用的病人需考虑手术治疗。
[0003]惊风是小儿并发于多种疾病过程中的一个急症。现代医学一般按发作期和缓解期分别治疗。发作期以镇痉有保持呼吸道通畅为要；缓解期以治疗原发病为主。一般惊风发作，需要到医院治疗，较为安全。缓解恢复期，除治疗原发病外，主要是饮食调养。因此，食疗也仅适用于缓解恢复期，有增强体质，加速康复，减少发作的功效。
[0004]面肌痉挛(又称半面痉挛、面肌抽搐)为一侧面部肌肉不自主的无痛性阵发性抽搐。每当情绪激动时(如高兴、生气、接见不认识的人等)，抽搐越发频繁、严重。病程长、症状重者可使眼裂变小，影响视物、看书；由于频繁的面部抽搐，致使患者口眼歪斜，不愿与人接触，影响患者的社交和工作，病人的思想压抑也甚大。面肌痉挛和原发性三叉神经痛多见于一侧和老年人，虽然有多种治疗方法，包括手术治疗，但进颅手术存在并发症、术后疾病复发、神经功能丧失等风险，中西医结合治疗既不破坏神经功能，又可避免手术风险，而且无痛、无创，尤其适合不能手术的老年患者。
[0005]痫愈胶囊(标准编号WS-10525 (ZD-0525) -2002,国药准字Z20025728)的处方为黄苗140g,党参140g,丹参140g,柴胡70g,酸率仁105g,远志70g,天麻105g,钩藤105g,石菖蒲70g,胆南星70g,当归140g,僵蚕105g,六神曲70g,郁金70g,甘草70g,制白附子35g,制成1000粒。其具有豁痰开窍，安神定惊，息风解痉的功效。用于风痰闭阻所致的癫痫抽搐、小儿^(风、面肌痉挛。
[0006]中国专利ZL200510096351.8公开了一种治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物及其制备方法。该药物由天麻、钩藤、僵蚕、黄芪、党参、丹参、柴胡、酸枣仁、远志、石菖蒲、胆南星、当归、郁金、制白附子、六神曲、甘草等多味中药材组成，具有协同作用，符合中药组方原则，能够达到标本兼治的目的。
[0007]在现有的治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物，例如痫愈胶囊的检测方法中，仅对黄芪进行了薄层色谱(TLC)鉴别，而未制定其他成分，特别是丹参的鉴别方法。而丹参作为重要原料药材对于该药物的质量和疗效影响很大。为进一步控制该产品的质量、保证疗效，需要对该产品的检测方法进行完善。
【发明内容】
[0008]本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，该检测方法能够有效控制药物的质量，从而更好地满足医疗需要。
[0009]本发明的目的是采用如下技术方案来实现的。
[0010]一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物，的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参，其中，所述薄层色谱的条件包括:采用硅胶G薄层板和体积比为7(Tl00:5~10:1~5，优选为80~100:6~9:1~4，更优选为90:8:2的A、B、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烷、苯、甲苯、三氯甲烷、异丙醇和正丁醇，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙二醇、甲醇和二恶烷，优选为甲醇；所述C溶液选自甲酸、冰醋酸、二甲醚、甲酸甲酯和水，优选为甲酸。
[0011]上述检测方法中，所述展开剂为体积比为90:8:2的三氯甲烷-甲醇-甲酸。
[0012]上述检测方法中，采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参包括如下步骤:
[0013](I)取所述药物加入乙醇，加热回流，滤过，滤液加水溶解，加酸调节pH值至广2，以乙酸乙酯提取，蒸干，加甲醇溶解，作为供试品溶液；
[0014](2)取原儿茶醛对照品，加甲醇制成对照品溶液；
[0015](3)吸取上述步骤(1 )和步骤(2)的两种溶液各2~5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为70~100:5~10:1~5，优选为80~100:6~9:1~4，更优选为90:8:2的Α、B、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烷、苯、甲苯、三氯甲烷、异丙醇和正丁醇，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙二醇、甲醇和二恶烷，优选为甲醇；所述C溶液选自甲酸、冰醋酸、二甲醚、甲酸甲酯和水，优选为甲酸，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇液，检视。
[0016]上述检测方法中，采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参包括如下步骤:
[0017](I)取所述药物加入乙醇，加热回流，滤过，滤液加水溶解，加酸调节pH值至广2，以乙酸乙酯提取，蒸干，加甲醇溶解，作为供试品溶液；
[0018](2)取原儿茶醛对照品，加甲醇制成对照品溶液；
[0019](3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5 μ I，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为90:8:2的三氯甲烷-甲醇-甲酸，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇液，检视。
[0020]在一个具体实施方案中，采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参包括如下步骤:
[0021](I)取所述药物IOgJP 70%乙醇35ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥干无乙醇味，加水20ml溶解，加lmol/L盐酸调pH至1-2，再用乙酸乙酯振摇提取3次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；
[0022](2)另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
[0023](3 )吸取上述步骤(1)和步骤(2 )的两种溶液各2~5 μ I，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为90:8:2的三氯甲烷-甲醇-甲酸，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇液，检视。
[0024]上述检测方法还包括采用薄层色谱法检测所述药物中的黄芪，其中，所述薄层色谱的条件包括:采用硅胶G薄层板和体积比为If 17:5^10 5，优选为13:7:2的A、B、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烷、三氯甲烷、环己烷、正丁醇和苯，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲醇和乙醇，优选为甲醇；所述C溶液选自冰醋酸、甲酸、水、二甲醚和甲酸甲酯，优选为水。
[0025]上述检测方法中，所述展开剂为体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水。
[0026]上述检测方法中，采用薄层色谱法检测所述药物中的黄芪包括如下步骤:
[0027]( I)取所述药物加入三氯甲烷，加热回流，滤过，弃去滤液，残渣加甲醇，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，以加水饱和的正丁醇提取，加氢氧化钠洗涤，以正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液；
[0028](2)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液；
[0029](3 )吸取上述步骤(1)和步骤(2 )的两种溶液各2~5 μ I，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，加热，检视。
[0030]在一个具体实施方案中，采用薄层色谱法检测所述药物中的黄芪包括如下步骤:
[0031](I)取所述药物10g，加三氯甲烷30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，加水饱和正丁醇振摇提取3次(20ml、20ml、10ml)，合并正丁醇液，加I %氢氧化钠溶液洗涤2次，每次20ml，弃去碱液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；
[0032](2)另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；
[0033](3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上`，以体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水10°C以下放置的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C加热至斑点显色清晰，分别置日光及365nm的紫外光灯下检视。
[0034]供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点。
[0035]上述检测方法中，所述药物包括下列重量份的原料药:
[0036]
【权利要求】
1.一种用于治疗癫痫抽搐、小儿惊风、面肌痉挛的药物的检测方法，该检测方法包括采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参，其中，所述薄层色谱的条件包括:采用硅胶G薄层板和体积比为70~100:5~10:1~5，优选为80~100:6~9:1~4，更优选为90:8:2的A、B、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烷、苯、甲苯、三氯甲烷、异丙醇和正丁醇，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙二醇、甲醇和二恶烷，优选为甲醇；所述C溶液选自甲酸、冰醋酸、二甲醚、甲酸甲酯和水，优选为甲酸。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂为体积比为90:8:2的三氯甲烷-甲醇-甲酸。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参包括如下步骤: (1)取所述药物加入乙醇，加热回流，滤过，滤液加水溶解，加酸调节PH值至f2，以乙酸乙酯提取，蒸干，加甲醇溶解，作为供试品溶液； (2)取原儿茶醛对照品，加甲醇制成对照品溶液； (3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为7(Tl00:5~10:1~5，优选为80~100:6~9:1~4，更优选为90:8:2的Α、Β、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烧、苯、甲苯、三氯甲烷、异丙醇和正丁醇，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自乙醇、乙酸乙酯、丙酮、乙二醇、甲醇和二恶烷，优选为甲醇；所述C溶液选自甲酸、冰醋酸、二甲醚、甲酸甲酯和水，优选为甲酸，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇液，检视。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参包括如下步骤: (1)取所述药物加入乙醇，加热回流，滤过，滤液加水溶解，加酸调节PH值至广2，以乙酸乙酯提取，蒸干，加甲醇溶解，作为供试品溶液； (2)取原儿茶醛对照品，加甲醇制成对照品溶液； (3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为90:8:2的三氯甲烷-甲醇-甲酸，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇液，检视。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的丹参包括如下步骤: (1)取所述药物IOgJp70%乙醇35ml，加热回流30分钟，滤过，滤液挥干无乙醇味，加水20ml溶解，加lmol/L盐酸调pH至1_2，再用乙酸乙酯振摇提取3次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液； (2)另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液； (3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为90:8:2的三氯甲烷-甲醇-甲酸，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇液，检视。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括采用薄层色谱法检测所述药物中的黄芪，其中，所述薄层色谱的条件包括:采用硅胶G薄层板和体积比为11~17:5~10:1-5，优选为80^100:6~9:1~4，优选为13:7:2的A、B、C混合溶液作为展开剂，其中所述A溶液选自二氯甲烷、三氯甲烷、环己烷、正丁醇和苯，优选为三氯甲烷；所述B溶液选自丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲醇和乙醇，优选为甲醇；所述C溶液选自冰醋酸、甲酸、水、二甲醚和甲酸甲酯，优选为水； 优选地，所述展开剂为体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法检测所述药物中的黄芪包括如下步骤: (1)取所述药物加入三氯甲烷，加热回流，滤过，弃去滤液，残渣加甲醇，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，以加水饱和的正丁醇提取，加氢氧化钠洗涤，以正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液； (2)取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成对照品溶液； (3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-7Κ，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，加热，检视； 优选地，采用薄层色谱法检测所述药物中的黄芪包括如下步骤: (1)取所述药物10g，加三氯甲烷30ml，加热回流30分钟，滤过，弃去滤液，药渣加甲醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，加水饱和正丁醇振摇提取3次，合并正丁醇 液，加I %氢氧化钠溶液洗涤2次，每次20ml，弃去碱液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液； (2)另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液； (3)吸取上述步骤(1)和步骤(2)的两种溶液各2~5μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水10°C以下放置的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，100°C加热至斑点显色清晰，分别置日光及365nm的紫外光灯下检视。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物包括下列重量份的原料药:
9.根据权利要求1至8中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物包括下列重量份的原料药:
10.根据权利要求1至9中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述药物的制备方法如下: 将僵蚕、六神曲粉碎成细粉，过筛，备用；其余黄芪等十四味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60°C下相对密度为1.36的稠膏，加入上述细粉，混合均匀，真空干燥，粉碎成细粉，用80%乙醇适量制粒，70°C干燥，装入胶囊，制粒，即得。
【文档编号】A61K35/64GK103592406SQ201210288834
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2012年8月14日 优先权日:2012年8月14日
【发明者】胡小虎, 赵宗平 申请人:西安千禾药业有限责任公司