复方鸦胆子油软胶囊的制作方法
【专利摘要】复方鸦胆子油软胶囊，属于中药制剂【技术领域】。其特征在于采用以下方法制备：1）称取鸦胆子油6-10%、冷冻干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蜡12-20%、大豆磷脂3-6%、对羟基苯甲酸乙酯0.2-0.6%，备用；2）将蜂蜡和大豆磷脂熔融于聚乙二醇-400中；再加入鸦胆子油、冷冻干燥蟾皮超微粉、对羟基苯甲酸乙酯充分研磨混匀，制成粘稠度适中、流动性好的药液；3）按重量比2-4:2-4:1的比例称取水、明胶、甘油倒入胶罐中制备囊材；4）采用压制法制作复方鸦胆子油软胶囊。上述复方鸦胆子油软胶囊，将鸦胆子油、冷冻干燥蟾皮超微粉采用压制法制备软胶囊，制得的软胶囊能掩盖蟾皮的臭味，克服鸦胆子油味苦，提高药物稳定性，服用方便，抗肿瘤效果好，毒副作用小。
【专利说明】复方鸦胆子油软胶囊
【技术领域】
[0001]本发明属于中药制剂【技术领域】，具体为复方鸦胆子油软胶囊。
【背景技术】
[0002]中药鸦胆子为苦木科植物鸦胆子(Brucea javanica L.Merr.)的卵形或灰黑色长圆形的干燥成熟果实，具有清热解毒、抗疟、抗炎和抗肿瘤的作用。鸦胆子油为鸦胆子果实中提取得到的脂肪油 ，在我国临床已有多种剂型广泛应用。其具体机制为:为细胞周期非特异性抗癌药，对肿瘤细胞G0、G1、G2、M期具有抑制和杀伤作用，能明显抑制肿瘤细胞的DNA、RNA及蛋白质的合成，干扰肽腱的形成；能诱导癌细胞的凋亡；可以作用于细胞膜上的P糖蛋白而产生逆转耐药的作用，使其它抗癌药物的活性增强。这些现象提示TOPO II是鸦胆子油细胞内作用靶点之一。鸦胆子油与其他化疗药合用可提高疗效，毒副反应少，很少出现恶心，呕吐、脱发等常规化疗药的毒副反应。
[0003]蟾皮为蟾餘科(Bufonidae)动物中华大蟾餘(Bufobufo gargarizans Cantor)的干燥皮，最早记载于《本经逢原》，具有抗肿瘤、抗乙肝病毒等药理作用，用于治疗乙型肝炎、慢性气管炎、咽喉肿痛、痈肿疔毒等病症。具体作用机制:蟾皮的提取物中含有多种蟾蜍二烯羟酸内酯类化合物，其中蟾蜍毒素类化合物只存在于新鲜的蟾皮内。可以诱导肝癌细胞H印G2细胞阻滞于G2/M期；提高机体免疫功能以及诱导肿瘤细胞凋亡抑制移植性肝肿瘤的生长。多年来用于多种癌症和配合化疗，不仅能提高疗效，还能减轻副作用，改善血常规。
[0004]软胶囊是继片剂、针剂后发展起来的一种剂型，能将油状药物、药物溶液或药物混悬液、糊状物甚至药物粉末定量压注并包封于胶膜内，形成大小、形状各异的密封胶囊。软胶囊作为临床上常用剂型，其具有能掩盖药物的不良嗅味，提高药物稳定性作用，能使液体药物固体化，同时其内容物为粉末或颗粒状态，在胃肠道中能迅速分散、溶出和吸收，从而提高药物的生物利用度。
【发明内容】
[0005]针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种复方鸦胆子油软胶囊的技术方案，能掩盖蟾皮的臭味，克服鸦胆子油味苦，提高药物稳定性，服用方便，抗肿瘤效果好，毒副作用小。
[0006]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于包括以下步骤:
O按重量百分含量比例称取鸦胆子油6-10%、冷冻干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蜡12-20%、大豆磷脂3-6%、对羟基苯甲酸乙酯0.2-0.6%，备用；
所述的鸦胆子油采用以下方法制备:将鸦胆子药材粉碎过18目筛，加石油醚冷浸提取2-3次，每次提取6-10h，石油醚的用量为鸦胆子药材重量的10-14倍，粗提的鸦胆子油通入氮气，100-110°C加热2-3h，除去残留石油醚，再加鸦胆子药材重量4-6%的活性炭在100-110°C条件下加热1-1.5h，进行脱色处理，即得鸦胆子油；
所述的冷冻干燥蟾皮超微粉采用以下方法制备:将干燥蟾皮超微粉碎，其粒径为10-7 μ m ；
2)按照蜂蜡重量为Ig则聚乙二醇-400的用量为25-35ml的比例，将蜂蜡和大豆磷脂熔融于聚乙二醇-400中；再加入鸦胆子油、冷冻干燥蟾皮超微粉、对羟基苯甲酸乙酯充分研磨混匀，制成粘稠度适中、流动性好的药液；
3)囊材的制备:按重量比2-4:2-4:1的比例称取水、明胶、甘油倒入胶罐中，溶胶时温度先设置成70-80°C，在温度到达55-60°C的时候开始加水，加水10-15分钟，用手触有微烫的感觉，开始加入甘油，搅拌2-3分钟，从胶罐底部取2次，倒回胶罐中，迅速加明胶，搅拌时间为1.5-2小时，搅拌后温度设定为55-65°C，静置回气泡7-8小时；
4)采用压制法制作软胶囊，室温20-24°C制胶囊，胶皮厚度为0.6-0.8_，制得的软胶囊在转笼里冷却7-9小时，出笼，干燥即得复方鸦胆子油软胶囊。
[0007]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于将制得的复方鸦胆子油软胶囊用乙醇洗去胶囊表面油质，选择30-40°C，烘干8-10小时。
[0008]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤I)中:鸦胆子油的含量为7-8%、冷冻干燥蟾皮超微粉68-72%、蜂蜡15-18%、大豆磷脂4_5%、对羟基苯甲酸乙酯0.3-0.5%。
[0009]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤I)鸦胆子油制备方法中:鸦胆子药材加石油醚冷浸提取时间为7-8h，石油醚的用量为鸦胆子药材重量的11-13倍，粗提的鸦胆子油通入氮气后加热时间为2.5h，脱色处理时间为1.2-1.3h。
[0010]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤3)中水:明胶:甘油的重量比为3:3:10
[0011]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤3)中:溶胶时温度先设置成75-78°C，在温度到达58°C的时候开始加水，加水11_13分钟，加明胶后搅拌时间为1.6-1.8小时，搅拌后温度设定为60°C。
[0012]所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在步骤4)中:室温22_23°C制胶囊，胶皮厚度为 0.7mm η
[0013]所述的鸦胆子油、蟾皮可从市场上直接购得。
[0014]上述复方鸦胆子油软胶囊，将鸦胆子油、冷冻干燥蟾皮超微粉采用压制法制备软胶囊，制得的软胶囊能掩盖蟾皮的臭味，克服鸦胆子油味苦，提高药物稳定性，服用方便，抗肿瘤效果好，毒副作用小。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1为鸦胆子油体外分析方法中对照品色谱图，图2为鸦胆子油体外分析方法中溶剂色谱图，图3为鸦胆子油体外分析方法中空白色谱图，图4为鸦胆子油体外分析方法中样品色谱图，图5为鸦胆子油体外分析方法中油酸标准曲线图；图6为冷冻干燥蟾皮超微粉体外分析方法中对照品色谱图，图7为冷冻干燥蟾皮超微粉体外分析方法中溶剂色谱图，图8为冷冻干燥蟾皮超微粉体外分析方法中空白色谱图，图9为冷冻干燥蟾皮超微粉体外分析方法中样品色谱图，图10为华蟾酥毒基标准曲线图；图11脂蟾毒配基标准曲线图。
【具体实施方式】
[0016]以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。[0017]实施例1:
复方鸦胆子油软胶囊采用以下方法制备:
O按重量百分含量比例称取鸦胆子油22g、冷冻干燥蟾皮超微粉176g、蜂蜡40g、大豆磷脂10g、对羟基苯甲酸乙酯lg，备用；
所述的鸦胆子油采用以下方法制备:将鸦胆子药材粉碎过18目筛，加石油醚冷浸提取2次，每次提取8h，石油醚的用量为鸦胆子药材重量的12倍，粗提的鸦胆子油通入氮气，110°C加热2h，除去残留石油醚，再加鸦胆子药材重量4-6%的活性炭在110°C条件下加热lh，进行脱色处理，即得鸦胆子油；
所述的冷冻干燥蟾皮超微粉采用以下方法制备:将干燥蟾皮超微粉碎，其粒径为
9μ m ；
2)将蜂蜡和大豆磷脂熔融于500ml聚乙二醇-400中；再加入鸦胆子油、冷冻干燥蟾皮超微粉、对羟基苯甲酸乙酯充分研磨混匀，制成粘稠度适中、流动性好的药液；
3)囊材的制备:按重量比3:3:1的比例称取水、明胶、甘油倒入胶罐中，溶胶时温度先设置成75°C，在温度到达60°C的时候开始加水，加水10分钟，用手触有微烫的感觉，开始加入甘油，搅拌2分钟，从胶罐底部取2次，倒回胶罐中，迅速加明胶，搅拌时间为1.5-2小时，搅拌后温度设定为60°C，静置回气泡7-8小时；
4)采用压制法制作软胶囊，室温22°C制胶囊，胶皮厚度为0.7mm，制得的软胶囊在转笼里冷却8小时，出笼，干燥即得复方鸦胆子油软胶囊；
5)将制得的复方鸦胆子油软胶囊用乙醇洗去胶囊表面油质，选择30-40°C，烘干8-10小时。
[0018]上述步骤I)中鸦胆子油的重量含量为6-10%、冷冻干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蜡12-20%、大豆磷脂3-6%、对羟基苯甲酸乙酯0.2-0.6% ;鸦胆子药材加石油醚冷浸提取时间为6 h、7 h、9 h或10h，石油醚的用量为鸦胆子药材重量的11或13倍，粗提的鸦胆子油通入氮气后加热时间为2h或3h，脱色处理时间为1.2h或1.5h。步骤2)中水:明胶:甘油的重量比为2:2:1、4:4:1、2:4:1或4:2:1。步骤3)中:溶胶时温度先设置成70°C或80°C，在温度到达55°C或60°C的时候开始加水，加水12或15分钟，用手触有微烫的感觉，开始加入甘油，搅拌3分钟。步骤4)中室温20或24°C制胶囊，胶皮厚度为0.6或0.8mm。其它同实施例1，也能达到本发明所述的有益效果。
[0019]以下结合相应的试验数据进一步说明本发明的有益效果。
[0020]试验一、复方鸦胆子油软胶囊处方前研究
处方前研究(Preformulation Studies)是设计和制备一个安全、有效、稳定的药物制剂的重要部分。制剂的处方前研究，为剂型的选择、处方的筛选和制备工艺提供依据，其目的就是使药物稳定、有效并适合工业化生产中制剂处方和制剂工艺要求。本发明对鸦胆子油和蟾皮微粉的有关理化性质进行了初步研究，建立其体外分析方法，为复方鸦胆子油软胶囊工艺和质量标准研究等提供参考依据。
[0021]一、实验材料
(一)实验药品与试剂
正己烷(江苏永华精细化学品有限公司20120507，色谱纯)
石油醚(60-90°C，江苏永华精细化学品有限公司20120714)油酸对照品(中国食品药品检定研究院提供111621-201004 )
华蟾酥毒基对照品(中国食品药品检定研究院提供10803-200605)
脂膽毒配基对照品(中国食品药品检定研究院提供110718-200507)
鸦胆子油(实验室自制，批号20120920)
氢氧化钾(杭州萧山化学试剂厂20081206)
无水硫酸钠(国药集团化学试剂有限公司20090811) 三氟化硼乙醚(瑞鼎化学技术上海有限公司20110213，化学纯)
乙腈、甲醇为色谱纯，其他所用试剂，如未注明规格，均指分析纯。
[0022](二)实验器材 GC-14A气相色谱仪(岛津)
KQ5200DE超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)
CP225D准微量电子分析天平(德国赛多利斯公司)
METTLER TOLEDO电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)
HH-S型水浴锅(巩义市英峪予华仪器厂)
高效液相(天美公司LC2000梯度系统)
LC2130输液泵(日本原装进口)，配梯度洗脱和在线洗脱装置 LC2030紫外检测器手动进样器775i色谱工作站T2000P 二、方法和结果
(一)鸦胆子油体外分析方法的建立
1.色谱条件
仪器:岛津气相色谱仪GC-14A，FID检测器
色谱柱=DM-1nertWax 毛细柱(30 mX0.25 mmX0.25 μ m)
条件:柱温:150°C ;进样口温度:250°C ;检测器温度:250°C ;载气为高纯氮，流速:1.0mL.min-Ι ;恒流，分流比30:1柱前压IOpsi,柱温采用程序升温方式，150 °C (停留Imin) — 200°C (10°C.min-l,停留 2 min) — 220°C (10°C.min-l,停留 IOmin)。在本色谱条件下，样品中油酸与其他成分能够达到基线分离，且分离度大于1.5，理论塔板数按油酸峰面积计算，不低于40000。对照品、溶剂、空白、样品色谱图见图1-4。
[0023]2.油酸对照品溶液的制备
精密称取油酸对照品33.8mg，至25mL容量瓶中，加正己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，制成1.352mg/mL对照品溶液。精密吸取1.352mg/mL油酸对照品溶液2.0mL至试管中，氮气吹干溶剂，加入0.5moL/L氢氧化钾甲醇溶液2mL，在60°C恒温水浴中皂化25min，待油珠完全溶解后，放冷，加入15%三氟化硼乙醚溶液2mL，摇匀。在60°C恒温水浴中甲酯化2min，放冷，精密加入正己烷2.0mL，充分振摇2min。加入过饱和氯化钠溶液适量，使正己烷溶液上浮至瓶颈，立即吸取上层有机液，用0.5g无水硫酸钠脱水，即得1.352mg/mL的对照品溶液。
[0024]3.供试品溶液的制备
取复方鸦胆子油软胶囊内容物适量，置IOmL容量瓶中，加正己烷定容，取ImL按照对照品溶液的制备项下自“氮气吹干溶剂”起依法操作，即得供试品溶液。
[0025]4.方法学考察
4.1标准曲线绘制精密吸取1.352mg/mL浓油酸对照品溶液0.4,0.8、1.2、1.6,2.0,2.4至15 mL具塞试管中加入0.5moL/L氢氧化钾甲醇溶液2mL，在60°C恒温水浴中皂化25min，待油珠完全溶解后，放冷，加入15%三氟化硼乙醚溶液2mL，摇匀。在60°C恒温水浴中甲酯化2min，放冷，精密加入正己烷2.0mL,充分振摇2min。加入过饱和氯化钠溶液适量，使正己烷溶液上浮至瓶颈，立即吸取上层有机液，用0.5g无水硫酸钠脱水，制得系列对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液进样，测定峰面积，以峰面积Y为纵坐标，以对照品溶液的浓度X为横坐标，绘制标准曲线。油酸在0.2704~1.6224mg/mL范围内线性关系良好。回归方程:Y=433993X+4816，相关系数R2=0.9996。结果见图5。
[0026]4.2精密度试验
精密吸取1.352mg/mL油酸对照品溶液1.2mL至15mL具塞试管中，按照对照品溶液的
制备项下自“氮气吹干溶剂”起依法操作制备对照品溶液，精密吸取对照品溶液5 μ L，连续
进样6次，测定峰面积。计算精密度RSD为2.05%，表明仪器精密度良好。结果见表1。
【权利要求】
1.复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于采用以下方法制备: O按重量百分含量比例称取鸦胆子油6-10%、冷冻干燥蟾皮超微粉65-75%、蜂蜡12-20%、大豆磷脂3-6%、对羟基苯甲酸乙酯0.2-0.6%，备用； 所述的鸦胆子油采用以下方法制备:将鸦胆子药材粉碎过18目筛，加石油醚冷浸提取2-3次，每次提取6-10h，石油醚的用量为鸦胆子药材重量的10-14倍，粗提的鸦胆子油通入氮气，100-110°C加热2-3h，除去残留石油醚，再加鸦胆子药材重量4-6%的活性炭在100-110°C条件下加热1-1.5h，进行脱色处理，即得鸦胆子油； 所述的冷冻干燥蟾皮超微粉采用以下方法制备:将干燥蟾皮超微粉碎，其粒径为10-7 μm ； 2)按照蜂蜡重量为Ig则聚乙二醇-400的用量为25-35ml的比例，将蜂蜡和大豆磷脂熔融于聚乙二醇-400中；再加入鸦胆子油、冷冻干燥蟾皮超微粉、对羟基苯甲酸乙酯充分研磨混匀，制成粘稠度适中、流动性好的药液； 3)囊材的制备:按重量比2-4:2-4:1的比例称取水、明胶、甘油倒入胶罐中，溶胶时温度先设置成70-80°C，在温度到达55-60°C的时候开始加水，加水10-15分钟，用手触有微烫的感觉，开始加入甘油，搅拌2-3分钟，从胶罐底部取2次，倒回胶罐中，迅速加明胶，搅拌时间为1.5-2小时，搅拌后温度设定为55-65°C，静置回气泡7-8小时； 4)采用压制法制作软胶囊，室温20-24°C制胶囊，胶皮厚度为0.6-0.8_，制得的软胶囊在转笼里冷却7-9小时，出笼，干燥即得复方鸦胆子油软胶囊。
2.如权利要求1所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于将制得的复方鸦胆子油软胶囊用乙醇洗去胶囊表面油质，选择30-40°C，烘干8-10小时。
3.如权利要求1所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤I)中:鸦胆子油的含量为7-8%、冷冻干燥蟾皮超微粉68-72%、蜂蜡15-18%、大豆磷脂4_5%、对羟基苯甲酸乙酯0.3_0.5%ο
4.如权利要求1所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤I)鸦胆子油制备方法中:鸦胆子药材加石油醚冷浸提取时间为7-8h，石油醚的用量为鸦胆子药材重量的11-13倍，粗提的鸦胆子油通入氮气后加热时间为2.5h，脱色处理时间为1.2-1.3h。
5.如权利要求1所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤3)中水:明胶:甘油的重量比为3:3:1。
6.如权利要求1所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在于步骤3)中:溶胶时温度先设置成75-78°C，在温度到达58°C的时候开始加水，加水11-13分钟，加明胶后搅拌时间为1.6-1.8小时，搅拌后温度设定为60°C。
7.如权利要求1所述的复方鸦胆子油软胶囊，其特征在步骤4)中:室温22-23°C制胶囊，胶皮厚度为0.7mm。
【文档编号】A61K35/56GK103919822SQ201310523246
【公开日】2014年7月16日 申请日期:2013年10月30日 优先权日:2013年10月30日
【发明者】黄绳武, 蒋杉杉, 王俊俊, 李雅雅, 赵丹丹, 王坚 申请人:浙江中医药大学