马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法
【专利摘要】本发明公开了马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法。本发明采用油包油技术，以马来酸噻吗洛尔、改性蒙脱石、丙烯酸树脂、吐温、增塑剂制备内相，以植物油、司盘制备外相，将获得的油包油乳液经超声处理后，再通过电磁搅拌蒸发内相，获得马来酸噻吗洛尔缓释微球，其粒径可控制在10μm范围内，符合眼用制剂的要求。其药物包封率高达80～99%，体外释放时间可延长至10～12h。该方法制备的马来酸噻吗洛尔缓释微球作为降眼压药物，可减小眼内不适感，减少用药次数，实现一次给药达到长时间降眼压的目的。
【专利说明】马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于医药【技术领域】，特别涉及一种水溶性降眼压药物缓释微球的制备方法。
【背景技术】
[0002]马来酸噻吗洛尔(timolol maleate)为选择性β受体阻断剂,可减少房水生成，有明显降低眼内压的作用，并对瞳孔大小、对光反应及视力均无影响。临床上广泛应用马来酸噻吗洛尔滴眼液治疗原发性开角型青光眼及无晶状体青光眼。眼用药物的疗效依赖于药物在角膜的有效浓度和滞留时间，传统滴眼液在角膜前的滞留时间是30s，仅有5%药物被角膜吸收，需要频繁给药，滴眼液剂量难以控制，且大部分通过结膜或泪小管、泪囊、鼻泪管、鼻腔进入血液循环，可导致副作用。但目前这种传统的给药方式占整个市场的90%。如何提高药物的眼部吸收，改善其治疗效果，减少其不良反应，是目前眼部给药系统研究的热点问题。
[0003]载药微球(microspheres)是一种应用较为广泛的新型给药体系,其以适宜的高分子材料为载体，制成包裹或吸附药物的球形或类球形微粒，粒径一般在I~250 μ m。微球制剂可延长药物在角膜前的滞留时间并缓慢释放药物，提高药物的生物利用度，减少用药次数，改善治疗指数，降低药物在眼部或全身的毒副作用。因此，缓释微球给药系统的研究与应用将成为今后眼用制剂发展的新趋势。微球制剂可靶向、缓释药物，可以混悬液体状态用作滴眼剂或眼内注射剂，减小眼内不适感。
[0004]用于制备缓释微球的载体材料有多种，按来源可分为(I)天然高分子材料，如纤维素、壳聚糖、蛋白质；(2)合成高分子材料，按生物降解特性又可分为:非生物降解型高分子材料，如聚丙烯酸树脂及 其衍生物、聚乙烯醇；生物降解型高分子材料，如聚酯、聚酸酐、聚原酸酯、聚碳酸酯等。
[0005]制备微球的方法按乳剂类型可分为单乳(0/W型，W/0型，0/0型)_液中干燥法和复乳(W/0/W型和0/W/0型)-液中干燥法两类:(I)单乳(0/W)-液中干燥法是疏水性药物微球化常用的方法，该方法不足之处在于，制得的微球表面往往镶嵌着药物晶体，另外该方法不适于包载水溶性较大的药物，因为在乳化和液中干燥过程中药物很容易从油水界面分配至外水相中导致药物包封率明显下降。(2)复乳(W/0/W)-液中挥发法，该方法耗时较长，不易控制，产量低。由于引入了油水界面，特别是在初乳形成时系统很不稳定。Yilmaz Capan等采用W/0/W-溶剂挥发法制备载有水溶性蛋白——人生长激素的聚丙交酯乙交酯微球，该方法制备的微球表面不够圆整并有孔洞，平均粒径达44.6±2.47 μ m，粒径相对较大且分布不均匀。且，由于水溶性药物易从内水相扩散到外水相中导致其载药量相对较低。(3)单乳(0/0)-液中挥发法，由于内外相溶媒都为疏水性物质，可使水溶性药物包封率和载药量大大提高。制得的微球外观圆整，突释小，而且大部分可以释放出全部药物。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法。
[0007]本发明所采取的技术方案是:
马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法，包括以下步骤:
1)将马来酸噻吗洛尔、丙烯酸树脂、吐温、增塑剂、蒙脱石分散于有机溶剂，使丙烯酸树脂的浓度为30~100g/L，吐温的浓度为20~60g/L，增塑剂的浓度为5~20g/L，得内相；
2)将司盘溶于植物油，使司盘的浓度为10~40g/L，得外相；
3)搅拌状态下，将内相滴入外相，形成油包油乳液；
4)乳液经超声处理5~30min后，电磁搅拌下蒸发内相，洗涤，干燥，即得缓释微球。
[0008]优选的，内相中，马来酸噻吗洛尔的浓度为5~20g/L。
[0009]优选的，蒙脱石为改性蒙脱石，其改性方法如下:将蒙脱石置于3~15v/v%的强酸中，50~90°C活化2~9h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
[0010]优选的，内相中，蒙脱石的浓度为4~25g/L。
[0011]优选的，丙烯酸树脂为Eudragit RSPO与Eudragit RLP0，其质量比为2~6:1。
[0012]优选的，增塑 剂为聚乙二醇、丙二醇、甘油、柠檬酸三乙酯中的至少一种。
[0013]优选的，有机溶剂为乙腈或二氯甲烷。
[0014]优选的，步骤3)中，内相与外相的质量比为0.03~0.1:1。
[0015]优选的，步骤3)中，搅拌速度为500~2000rpm。
[0016]优选的，步骤4)中，一10~20°C下进行电磁搅拌。
[0017]本发明的有益效果是:
本发明采用油包油技术，以马来酸噻吗洛尔、改性蒙脱石、丙烯酸树脂、吐温、增塑剂制备内相，以植物油、司盘制备外相，将获得的油包油乳液经超声处理后，再通过电磁搅拌蒸发内相，获得马来酸噻吗洛尔缓释微球，其粒径可控制在IOym范围内，符合眼用制剂的要求。其药物包封率高达80~99%，体外释放时间可延长至10~12h。该方法制备的马来酸噻吗洛尔缓释微球作为降眼压药物，可减小眼内不适感，减少用药次数，实现一次给药达到长时间降眼压的目的。
【专利附图】
【附图说明】
[0018]图1为缓释微球的电镜图。
[0019]图2为体外缓释试验结果。
【具体实施方式】
[0020]马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法，包括以下步骤:
5)将马来酸噻吗洛尔、丙烯酸树脂、吐温、增塑剂、蒙脱石分散于有机溶剂，使丙烯酸树脂的浓度为30~100g/L，吐温的浓度为20~60g/L，增塑剂的浓度为5~20g/L，得内相；
6)将司盘溶于植物油，使司盘的浓度为10~40g/L，得外相；
7)搅拌状态下，将内相滴入外相，形成油包油乳液；
8)乳液经超声处理5~30min后，电磁搅拌下蒸发内相，洗涤，干燥，即得缓释微球。
[0021]乳化剂对油包油乳液的稳定性至关重要，本发明乳化剂优选为价廉易得的吐温和司盘，通过调整吐温和司盘的比例获得合理的HLB值，使乳液稠度适中，形成稳定油包油型乳液。
[0022]丙烯酸树脂优选为Eudragit RSPO与Eudragit RLP0，其质量比为2~6:1。通过调节Eudragit RSPO与Eudragit RLPO的比例达到调节马来酸噻吗洛尔释放速率的目的。
[0023]丙烯酸树脂系列材料的膜材转变温度较高，脆性较大，在成球时因机械性能差而导致球破裂，因此须向膜材中加入一定比例的增塑剂，用以增加膜材成球时的柔韧性，以自由控制微球的粒径大小。增塑剂的种类繁多，本发明优选广泛易得且安全性高的柠檬酸三乙酯(TEC)、聚乙二醇(PEG)、丙二醇和甘油中的至少一种。更优选的，增塑剂为TEC和甘油。
[0024]下面结合具体实施例，进一步阐述本
【发明内容】
。
[0025]实施例1
I)精密称取马来酸噻吗洛尔30mg、钠基蒙脱石20mg、TEC 50mg、甘油50mg、丙烯酸树脂(RSPO: RLPO质量比=2:l) 400mg、吐温80 124mg，加入5ml乙腈中，搅拌分散混匀得到内相。
[0026]2)将248mg司盘80溶于IOml植物油中，得外相。
[0027]3)600rpm搅拌速度下，将0.3g内相逐滴加入5g外相中，分散均匀，得到油包油乳液。
[0028]4)先将该乳液置于超声细胞粉碎仪中超声处理lOmin，再在冰浴下电磁搅拌蒸发内相，正己烷洗涤，常温干燥即可。
[0029]实施例2
I)将500mg钠基蒙脱石置于5v/v%的硫酸中，90°C下活化2h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
[0030]2)精密称取马来酸噻吗洛尔30mg、改性蒙脱石20mg、TEC 50mg、甘油50mg、丙烯酸树脂(RSPO: RLPO质量比=2:1)共400mg、吐温80 124mg，加入5ml乙腈中，搅拌分散混匀得到内相。
[0031 ] 3)将248mg司盘80溶于IOml植物油中，得外相。
[0032]4)600rpm搅拌速度下，将0.3g内相逐滴加入5g外相中，分散均匀，得到油包油乳液。
[0033]5)先将该乳液置于超声细胞粉碎仪中超声处理lOmin，再在冰浴下电磁搅拌蒸发内相，正己烷洗涤，常温干燥即可。
[0034]实施例3
I)将500mg钠基蒙脱石置于8v/v%的硫酸中，80°C下活化4h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
[0035]2)精密称取马来酸噻吗洛尔50mg、改性蒙脱石35mg、PEG40mg、丙二醇50mg、丙烯酸树脂(RSPO: RLPO质量比=4:1)共500mg、吐温80 150mg，加入5ml乙腈中，搅拌分散混匀得到内相。
[0036]3)将300mg司盘80溶于IOml植物油中，得外相。
[0037]4) 1200rpm搅拌速度下，将0.4g内相逐滴加入5g外相中，分散均匀，得到油包油乳液。
[0038]5)先将该乳液置于超声细胞粉碎仪中超声处理8min，再在冰浴下电磁搅拌蒸发内相，正己烷洗涤，常温干燥即可。[0039]实施例4
I)将500mg钠基蒙脱石置于10v/v%的硫酸中，65°C下活化7h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
[0040]2)精密称取马来酸噻吗洛尔75mg、改性蒙脱石50mg、TEC 50mg、甘油25mg、丙烯酸树脂(RSPO: RLPO质量比=4:1)共325mg、吐温80 200mg，加入5ml 二氯甲烷中，搅拌分散混匀得到内相。
[0041 ] 3)将350mg司盘80溶于IOml植物油中，得外相。
[0042]4) 1000rpm搅拌速度下，将0.4g内相逐滴加入5g外相中，分散均匀，得到油包油乳液。
[0043]5)先将该乳液置于超声细胞粉碎仪中超声处理15min，再在4°C下电磁搅拌蒸发内相，正己烷洗涤，常温干燥即可。
[0044]实施例5
I)将500mg钠基蒙脱石置于15v/v%的盐酸中，50°C下活化9h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
[0045]2)精密称取马来酸噻吗洛尔lOOmg、改性蒙脱石75mg、TEC 20mg、PEG 20mg、丙烯酸树脂(RSPO: RLPO质量比=4:1)共250mg、吐温80 lOOmg，加入5ml乙腈中，搅拌分散混匀得到内相。
[0046]3)将400mg司盘80溶于IOml植物油中，得外相。
[0047]4) 2000rpm搅拌速度下，将0.5g内相逐滴加入5g外相中，分散均匀，得到油包油乳液。
[0048]5)先将该乳液置于超声细胞粉碎仪中超声处理5min，再在_10°C下电磁搅拌蒸发内相，正己烷洗涤，常温干燥即可。
[0049]实施例6
I)将500mg钠基蒙脱石置于3v/v%的磷酸中，85°C下活化5h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
[0050]2)精密称取马来酸噻吗洛尔25mg、改性蒙脱石125mg、TEC 25mg、丙烯酸树脂(RSPO: RLPO质量比=6:1)共150mg、吐温80 300mg，加入5ml 二氯甲烷中，搅拌分散混匀得到内相。
[0051 ] 3)将IOOmg司盘80溶于IOml植物油中，得外相。
[0052]4) 500rpm搅拌速度下，将0.15g内相逐滴加入5g外相中，分散均匀，得到油包油乳液。
[0053]5)先将该乳液置于超声细胞粉碎仪中超声处理30min，再在20°C下电磁搅拌蒸发内相，正己烷洗涤，常温干燥即可。
[0054]试验例 电镜观察:
图1为实施例2制备的马来酸噻吗洛尔缓释微球的电镜观察图，可见，本发明方法制备的缓释微球表面光滑致密，无孔隙裂纹，粒径分布在3~10 μ m之间，符合眼用制剂的要求，可减小眼内不适感。
[0055]微球载药量和包封率的测定:测定方法:(1)以吸光度A对所对应的马来酸噻吗洛尔对照品浓度C(mg/L)进行线性回归，得标准曲线。
[0056](2)精密称取缓释微球0.03g,置30ml无水乙醇中，再精密吸取0.3ml于IOml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，放置15min，微孔滤膜过滤，在273nm处测定吸光度A，代入标准曲线计算质量浓度C，再分别按公式(I)、(2)计算马来酸噻吗洛尔在微球中的载药量及包封率。
【权利要求】
1.马来酸噻吗洛尔缓释微球的制备方法，包括以下步骤: 1)将马来酸噻吗洛尔、丙烯酸树脂、吐温、增塑剂、蒙脱石分散于有机溶剂，使丙烯酸树脂的浓度为30~100g/L，吐温的浓度为20~60g/L，增塑剂的浓度为5~20g/L，得内相； 2)将司盘溶于植物油，使司盘的浓度为10~40g/L，得外相； 3)搅拌状态下，将内相滴入外相，形成油包油乳液； 4)乳液经超声处理5~30min后，电磁搅拌下蒸发内相，洗涤，干燥，即得缓释微球。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:内相中，马来酸噻吗洛尔的浓度为5 ~20g/L。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:蒙脱石为改性蒙脱石，其改性方法如下:将蒙脱石置于3~15v/v%的强酸中，50~90°C活化2~9h后，洗涤至中性，干燥，得改性蒙脱石。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的制备方法，其特征在于:内相中，蒙脱石的浓度为 4 ~25g/L。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:丙烯酸树脂为EudragitRSPO与Eudragit RLP0，其质量比 为2~6:1。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:增塑剂为聚乙二醇、丙二醇、甘油、柠檬酸三乙酯中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:有机溶剂为乙腈或二氯甲烷。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤3)中，内相与外相的质量比为0.03 ~0.1:1。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤3)中，搅拌速度为500~2000rpmo
10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤4)中，一10~20°C下进行电磁搅拌。
【文档编号】A61K9/16GK103735518SQ201310697827
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2013年12月17日 优先权日:2013年12月17日
【发明者】侯冬枝, 刘莉, 桂茹艺, 潘育方, 张兰春, 胡晟, 宋凤兰 申请人:广东药学院