使用seh抑制剂来治疗神经性疼痛的制作方法
【专利摘要】本发明提供了用于治疗、减轻、缓解和/或抑制神经性疼痛的方法，所述方法是通过向有需要的患者口服、静脉内或鞘内施用有效量的可溶性环氧化物水解酶(“sEH”)的抑制剂来实现的。所治疗的神经性疼痛选自由以下组成的组：带状疱疹后神经痛，三叉神经痛，局灶性周围神经损伤，和痛性感觉缺失，由于中风或肿块、脊髓损伤或多发性硬化引起的中枢性疼痛，和由于糖尿病、HIV或化疗引起的周围神经病变。
【专利说明】使用SEH抑制剂来治疗神经性疼痛
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2012年2月I日提交的美国临时申请号61/593，811的优先权，所述美国临时申请出于所有目的整体并入本文中。
[0003]关于在联邦赞助的研究或开发下作出的对发明的权利的声明
[0004]本发明是根据由环境健康科学研究所授予的批准号ES002710下通过政府支持来产生。政府享有本发明中的某些权利。
[0005]发明背景
[0006]疼痛一般分为伤害性疼痛和神经性疼痛。伤害性疼痛响应于组织损伤或潜在的组织损伤信号来源于神经途径，并且包括炎症性疼痛。神经性疼痛往往与神经系统内的功能障碍有关。不幸的是，治疗一种疼痛的药物不一定治疗其它疼痛。例如，抗炎症剂不能减轻被截肢者感受到的“幻肢”疼痛。
[0007]在哺乳动物中，炎症性疼痛主要由花生四烯酸(有时简称为“AA”)驱动。炎症性疼痛由于组织损伤，如切伤或细菌感染而发生，在所述组织损伤后，大量AA通过磷脂酶的作用而在损伤部位释放。与这个事件同时发生的是环氧合酶-2 (C0X-2)的上调，所述环氧合酶-2是将所释放的AA转化为前列腺素的酶，所述前列腺素是有效的疼痛产生分子。所释放的AA通过环氧合酶(“C0X”)、脂氧合酶(“L0X”)和细胞色素P450表氧化酶来代谢以分别产生前列腺素、白三烯和环氧二十碳三烯酸(“EET”)。这些材料可进一步代谢，例如它们可被转化成生物活性酰胺和偶联物。炎症性疼痛与AA的Cox-2代谢物的产生有很好的相关性，这些代谢物是前列腺素系列分子。因此，疼痛的完全减轻在抑制可诱导的Cox-2后发生，而疼痛的完全减轻往往归因于一种关键调节剂PGE2的减少。
[0008]与此相反，在神经性疼痛中，几乎没有由花生四烯酸、环氧合酶和前列腺素介导的炎症过程的迹象。神经性疼痛是由显示感觉症状和体征的周围或中枢神经系统(或两者)的病变引起的。根本原因包括感染、外伤、代谢异常、化疗、手术、放射、神经毒素、遗传神经退行性病变、神经压迫和肿瘤浸润。神经性疼痛的机制例如在Zhuo，MolecularPain(2007)3:14 ；Campbell 和 Meyer, Neuron(2006)52(I):77-92 ；Dworkin 等人,ArchNeurol (2003) 60:1524-34 中进行了描述。
[0009]最常被证明有效阻断神经性疼痛的药物制剂是三环类抗抑郁药(TCA)。然而，这些药物在一些患者中完全无效，并且在其它患者中只是部分有效的。因此，神经性疼痛的治疗是一种未满足的和不断增长的临床需要。TCA具有本领域中众所周知的许多缺点。然而，因为神经性疼痛是一种使人衰弱和难以治疗的病状，所以在缺乏具有较少有害作用的药剂的情况下，TCA尽管有缺点，但是一直被使用。
[0010]所需要的是可以治疗神经性疼痛的化合物。意外地，本发明满足了这种和其它需要。
[0011]发明简述
[0012]本发明提供了用于通过向有需要的患者施用可溶性环氧化物水解酶(“sEH”)的抑制剂来治疗、减轻、缓解和/或抑制神经性疼痛的方法。
[0013]因此，在一个方面，本发明提供了用于缓解有需要的受试者的神经性疼痛的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的可溶性环氧化物水解酶(“sEH”)的抑制剂，从而减轻所述受试者的所述神经性疼痛。
[0014]在一些实施方案中，神经性疼痛选自由以下组成的组:带状疱疹后神经痛，三叉神经痛，局灶性周围神经损伤，和痛性感觉缺失，由于中风或肿块、脊髓损伤或多发性硬化引起的中枢性疼痛，和由于糖尿病、HIV或化疗引起的周围神经病变。
[0015]在一些实施方案中，神经性疼痛是慢性的。在一些实施方案中，所述受试者正经历神经性疼痛。
[0016]在一些实施方案中，所述药剂是通过口服施用。在一些实施方案中，所述药剂是静脉内施用。在一些实施方案中，所述药剂是鞘内施用。在一些实施方案中，所述药剂被直接输送到受损的神经。
[0017]在一些实施方案中，神经性疼痛是中枢神经性疼痛。在一些实施方案中,神经性疼痛是周围神经性疼痛。
[0018]在一些实施方案中，受试者或患者是人。
[0019]附图简述
[0020]图1显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UCl 153 (APAU)的剂量(0、l、3、10、30、100mg/kg(mpk))和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。(结果是6只大鼠的平均值。)
[0021]图2显示了在3小时后作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC1153的剂量反应曲线(基线反应的％)，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。(结果是6只大鼠的平均值。)
[0022]图3显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC1153(10mpk)和塞来昔布(1mpk)的剂量和时间依赖，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。(结果是6只大鼠的平均值)。与1mpk塞来昔布相比，1mpk UC1153可以显著减轻神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病大鼠模型的疼痛反应。
[0023]图4显示了从针对人sEH的放射测定法(tDPPO)获得的抑制剂的抑制常数(Ki)和IC5tl (上表)；下表显示了来自针对大鼠SEH和人SEH的LC/MS-MS测定法(EET)的抑制剂的IC500
[0024]图5显示了大鼠的1mpk下的UC1153(APAU)的药代动力学曲线。大鼠通过灌胃以UC1153治疗。UC1153溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。结果是6只大鼠的平均值。
[0025]图6显示了大鼠的UC2383 (KLA)的药代动力学曲线。大鼠通过灌胃以UC2383治疗。UC2383溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。结果是6只大鼠的平均值。
[0026]图7显示了大鼠的UC2414(KLB)的药代动力学曲线。大鼠通过灌胃以UC2414治疗。UC2414溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。结果是6只大鼠的平均值。
[0027]图8显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC2414的剂量(Impk)和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。大鼠通过灌胃以UC2414治疗。UC2414溶于纯PEG400。(结果是6只大鼠的平均值)。
[0028]图9显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC2389的剂量(Impk)和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。大鼠通过灌胃以UC2389治疗。UC2389溶于纯PEG400。(结果是6只大鼠的平均值)
[0029]图10示出了小鼠不同sEH抑制剂的药代动力学曲线。小鼠通过灌胃用三种抑制剂盒治疗。抑制剂溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。结果是6只小鼠的平均值。
[0030]图11显示了大鼠的UC2695 (KLC)和UC2383 (KLA)的药代动力学曲线。大鼠通过灌胃用 UC2695 (KLC)和 UC2383 (KLA)治疗。UC2695 (KLC)和 UC2383 (KLA)溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。结果是6只大鼠的平均值。
[0031]图12显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC2414、UC2372和UC 2389的剂量(Impk)和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。大鼠通过灌胃用药物治疗。药物溶于纯PEG400。(结果是6只大鼠的平均值。)
[0032]图13示出来自使用14，15-EET作为人和大鼠sEH的底物的LC/MS-MS测定的抑制剂的IC5Q。
[0033]图14显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC2389的剂量(0.1mpk)和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。大鼠通过灌胃用UC2389治疗。UC2389溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(结果是6只大鼠的平均值。)
[0034]图15显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC2696的剂量(0.1和0.3mpk)和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。大鼠通过灌胃用UC2696治疗。UC2696溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(结果是6只大鼠的平均值。)
[0035]图16显示了作用于大鼠神经性疼痛的链脲佐菌素(STZ)诱导I型糖尿病模型的UC2391和UC2696的剂量(0.1mpk)和时间依赖效应，其中低于基线的60%是疼痛状态并且基线的100%是未检测到疼痛增加。大鼠通过灌胃用UC2391和2696治疗。UC2391和2696溶于富含油酸的甘油三酯的20% PEG中。(结果是6只大鼠的平均值。)
[0036]发明详述
[0037]1.概述
[0038]酶“可溶性环氧化物水解酶”(“sEH”)作用于使抗炎和镇痛代谢物降解的花生四烯酸途径的重要分支。顺式-环氧二十碳三烯酸(“EET”)是通过细胞色素P450表氧化酶合成的生物介体,并通过sHl水解成相应的二元醇，这些二元醇是促炎症性的。EET和sEH的抑制剂(术语“sEH抑制剂”有时缩写为“sEHI ”)以前已发现可用作抗炎症药。
[0039]意外地，我们现在已经发现sEHI也可用于减轻神经性疼痛。我们使用了在用于神经性疼痛的众所周知的模型中量化疼痛的行之有效的方法，以阐明抑制sEH，并因此增加EET和/或含有环氧官能团的其它分子的生理浓度对于疼痛感觉的效果。我们证明了 sEH抑制剂意外地通过以前鲜为人知的机制减少了患有神经性疼痛的所治疗动物的疼痛感觉。sEH的抑制剂、EET和/或多不饱和脂肪酸像含有环氧官能团的分子和其前体，例如2-花生四烯酸甘油、环氧脂类的乙醇酰胺和/或它们的组合提供作为单独的治疗剂在治疗、改善、缓解、减少和/或抑制神经性疼痛的独特优势。我们证明，sEH抑制剂是镇痛药并且在治疗和控制神经性疼痛，包括慢性神经性疼痛，包括中枢和周围神经性疼痛中具有广泛的治疗效果。
[0040]所使用的神经性疼痛模型通常被认为不涉及炎症过程。这是因为，化学和分子分析不显示环氧合酶的上调，并且众所周知的抗炎剂，如COX抑制剂不能有效地减少神经性疼痛。因为Sffi抑制剂非常有效地减少炎症和伤害性疼痛并且因为sEHI减少关键的疼痛产生前列腺素PGE2的释放，我们推测sHl抑制剂将有效地减少神经性疼痛。
[0041]神经病变通过向动物注射细菌毒素(链脲佐菌素)来诱导，所述细菌毒素已知可杀死胰腺β细胞，从而防止胰岛素的产生，所述胰岛素是调节血糖水平的关键肽。其结果是，这些动物具有葡萄糖的较高血浆水平，并成为糖尿病，具有伴随的神经性疼痛状态。这种神经病变与由花生四烯酸释放和前列腺素和其它炎症介体产生所驱动的炎症性疼痛状态无关。然后，我们使用临床相关疼痛定量方法来测量在诱导神经病变之前和之后这些动物的疼痛阈值，随后使用sEH抑制剂来进行干预。
[0042]I1.定义
[0043]单位、前缀和符号以它们的国际单位制(SI)公认的形式来表示。数字范围包括定义该范围的数字。除非另有指明，否则核酸从左至右以5’至3’方向书写；氨基酸序列从左至右以氨基至羧基方向书写。本文所提供的标题不是对本发明的各个方面或实施方案的限制，这些方面或实施方案可以通过参考整个说明书来获得。因此，紧接在下文中定义的术语通过参考整个说明书中来更加全面地定义。未在本文中定义的术语具有本领域技术人员所理解的其普通含义。
[0044]“烷基”是指具有所指示的碳原子数目的直链或支链、饱和、脂族基团。烷基可以包括任意数目的碳原子，例如 Cl-2> C卜3' C卜4' C卜5' C^6-, C^7-, C卜8、C卜9、。卜10、C2_3、C2-4> ^2-5' C2-6->C3_4、C3_5、C3_6、C4_5、C4_6和C5_6。例如，C^6烧基包括，但不限于，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戍基、异戍基、己基等。烧基也可以是指具有至多20个碳原子的烧基，例如，但不限于:庚基、羊基、壬基、癸基等。烧基可以是取代的或未取代的。
[0045]“烷氧基”指的是具有氧原子的烷基，所述氧原子将烷基连接到连接点:烷基-O-。作为烷基，烷氧基可具有任何合适数目的碳原子，例如(V6。烷氧基包括，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、2- 丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戍氧基、己氧基等。烧氧基可进一步被本文描述的各种取代基取代。烧氧基可以是取代的或者未取代的。
[0046]“齒素”是指氟、氯、溴和碘。
[0047]“卤代烷基”是指如上定义的烷基，其中一些或全部氢原子被替换成卤原子。作为烷基，卤代烷基可以具有任何合适数目的碳原子，例如Cm。例如，卤代烷基包括三氟甲基、氟甲基等。在一些实例中，术语“全氟”可以用来定义其中所有的氢被氟取代的化合物或基团。例如，全氟甲烷是指1，1，1-三氟甲基。
[0048]“卤代烷氧基”指的是其中一些或全部氢原子被卤原子取代的烷氧基。作为烷基，卤代烷氧基可具有任何合适数目的碳原子，例如CV6。烷氧基可以被1、2、3或更多个卤素取代。当所有的氢被卤素，例如氟取代时，所述化合物是全取代的，例如，全氟化的。卤代烷氧基包括，但不限于，三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基、全氟乙氧基等。
[0049]“杂烷基”指的是任何合适长度并且具有I至3个杂原子如N、0和S的烷基。另外的杂原子也可能是有用的，包括，但不限于，B、Al、Si和P。杂原子也可被氧化，例如，但不限于，-S(O)-和-S(O)2_。例如，杂烷基可包括醚、硫醚和烷基胺。杂烷基的杂原子部分可以取代烷基的氢以形成羟基、巯基或氨基。或者，杂原子部分可以是连接原子，或者插入于两个碳原子之间。
[0050]“环烷基”是指包含3至12个环原子，或所指示的原子数目的饱和或部分不饱和、单环、稠合二环或桥连多环组件。环烷基可以包括任意数目的碳原子，例如C3_6、c4_6、c5_6、C3_8、C4_8、C5_8、C6_8、C3_9、C3_1(l、C3_n和C3_12。饱和单环环烧基环包括，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环辛基。饱和的二环和多环环烷基环包括，例如，降冰片烷、[2.2.2] 二环辛烷、十氢化萘和金刚烷。环烷基也可以部分不饱和的，在环中具有一个或多个双键或三键。部分不饱和的代表性的环烷基包括，但不限于，环丁烯、环戊烯、环己烯、环己二烯(1，3-和
I,4-异构体)、环庚烯、环庚二烯、环辛烯、环辛二烯(1，3-、1，4-和1，5-异构体)、降冰片烯及降冰片二烯。当环烷基是饱和的单环C3_8环烷基时，示例性基团包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。当环烷基是饱和的单环C3_6环烷基时，示例性基团包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。环烷基可以是取代的或未取代的。
[0051]“亚环烷基”是指连接至少两个其它基团的如上所定义的环烷基，即二价烃基。与亚环烷基相连的两个基团可以连接到亚环烷基的相同的原子或不同的原子。代表性的亚环烷基包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、和环辛基。亚环烷基可以是取代的或未取代的。
[0052]“杂环烷基”是指具有3至12个环成员和I至4个杂原子N、0和S的饱和环系统。另外的杂原子也可以是有用的，包括，但不限于，B、Al、Si和P。杂原子也可被氧化，例如，但不限于，-S(O)-和-S(O)2_。杂环烷基可以包含任何数目的环原子，例如，3至6个、4至6个、5至6个、3至8个、4至8个、5至8个、6至8个、3至9个、3至10个、3至11个或3至12个环成员。任何合适数目的杂原子可以包括在杂环烷基中，如1、2、3或4个，或I至2个、I至3个、I至4个、2至3个、2至4个，或3至4个。杂环烷基可包括基团例如氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烷、氮杂环辛烷、奎宁环、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪(1，2_、1，3-和1，4-异构体)、环氧乙烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、噁烷(四氢吡喃)、氧杂环庚烷、硫杂丙环、硫杂环丁烷、硫杂环戊烷(四氢噻吩)、噻烷(四氢噻喃)、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、二氧杂环戊烷、二硫戊环、吗啉、硫代吗啉、二噁烷或二噻烷。杂环烷基也可以稠合到芳族或非芳族环系统，以形成成员，包括但不限于，二氢吲哚。杂环烷基可以是未取代的或取代的。例如，杂环烧基可以被Cu烧基或氧代基(=O)等等取代。
[0053]杂环烷基可以通过环上的任意位置进行连接。例如，氮丙啶可为1-或2-氮丙啶、氮杂环丁烷可以是1-或2-氮杂环丁烷、吡咯烷可以是1-、2_或3-吡咯烷、哌啶可以是1-、
2-,3-或4-哌啶、吡唑烷可以是1-、2_、3-或4-吡唑烷、咪唑烷可以是1-、2_、3-或4-咪唑烷、哌嗪可以是1-、2_、3-或4-哌嗪、四氢呋喃可以是1-或2-四氢呋喃、噁唑烷可以是2_、
3-,4-或5-噁唑烷、异噁唑烷可以是2-、3-、4_或5-异噁唑烷、噻唑烷可以是2-、3_、4_或5-噻唑烷、异噻唑烷可以是2-、3-、4_或5-异噻唑烷，并且吗啉可以是2-、3_或4-吗啉。
[0054]当杂环烷基包括3-8个环成员和I至3个杂原子时，代表性成员包括，但不限于，吡咯烷、哌啶、四氢呋喃、噁烷、四氢噻吩、噻烷、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、吗啉、硫代吗啉、二噁烷和二噻烷。杂环烷基也可以形成具有5至6个环成员和I至2个杂原子的环，其中代表性的成员包括，但不限于，吡咯烷、哌啶、四氢呋喃、四氢噻吩、吡唑烷、咪唑烷、哌嗪、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷和吗啉。
[0055]“芳基”是指具有任何合适数量的环原子与任何合适数量的环的芳族环系统。芳基可以包括任意合适数目的环原子，例如，6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个或16个环原子，以及6至10个、6至12个，或6至14个环成员。芳基可以是单环、稠合以形成二环或三环基团，或由一个键连接以形成联芳基。代表性芳基包括苯基、萘基和联苯基。其它芳基包括苄基，其具有亚甲基连接基团。一些芳基具有6至12个环成员，如苯基、萘基或联苯基。其它芳基具有6至10个环成员，例如苯基或萘基。一些其它芳基具有6个环成员，例如苯基。芳基可为取代的或未取代的。
[0056]“盐”是指在本发明的方法中使用的化合物的酸或碱式盐。药学上可接受的盐的代表性例子是无机酸(盐酸、氢溴酸、磷酸等)盐，有机酸(乙酸、丙酸、谷氨酸，柠檬酸等)盐，季铵(甲基碘，乙基碘等)盐。应理解药学上可接受的盐是无毒的。合适的药学上可接受的盐的其它信息可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences,第 17版，Mack PublishingCompany, Easton, Pa., 1985中找到,它通过引用并入本文。
[0057]本发明的酸性化合物的药学上可接受的盐是用碱形成的盐，即阳离子盐诸如碱金属盐和碱土金属盐，如钠、锂、钾、钙、镁以及铵盐，如铵、三甲基铵、二乙基铵和三_(羟甲基)_甲基-铵盐。
[0058]类似酸加成盐，如无机酸、有机羧酸和有机磺酸，如盐酸、甲磺酸、马来酸的酸加成盐也是可能的，只要碱性基团如吡啶基构成结构的一部分。
[0059]所述化合物的中性形式可以通过用碱或酸接触所述盐，并按照常规方式分离母体化合物来再生。化合物的母体形式在某些物理性质方面不同于各种盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度，但在其它方面，对于本发明目的，盐等同于化合物的母体形式。
[0060]本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋体、非对映体、几何异构体和单独的异构体均意欲包括在本发明的范围内。
[0061]“水合物”是指复合到至少一个水分子的化合物。本发明的化合物可以与I至10个水分子复合。
[0062]“顺式-环氧二十碳三烯酸”(“EET”)是通过细胞色素P450表氧化酶合成的生物介体。如下面进一步论述的，虽然使用未修饰的EET是最优选的，但是EET衍生物，如酰胺和酯(天然的和合成的)、EET类似物和EET光学异构体都可以在本发明的方法中使用，无论是在纯的形式和这些形式的混合物。为了便于参考，如本文使用的术语“EET”指的是所有的这些形式，除非上下文另有要求。
[0063]“环氧化物水解酶” ("EH ； ”EC 3.3.2.3)是在α β折叠水解酶家族中的酶，其添加水到被称为环氧化物的3员环醚。水添加到环氧化物产生相应的1，2-二醇(Hammock，B.D.等人，于 Comprehensive Toxicology:B1transformat1n (Elsevier, New York),第283-305 页(1997) ；0esch, F.Xenob1tica 3:305-340(1972))。四个主要 EH 是已知的:白三烯环氧化物水解酶、胆固醇环氧化物水解酶、微粒体EH( “mEH”)，和可溶性EH( "sEH",以前称为胞浆EH)。白三烯作用于白三烯A4，而胆固醇EH使与胆固醇的5，6-环氧化物相关的化合物水合。微粒体环氧化物水解酶将单取代的、1，1-二取代的、顺式-1，2-二取代的环氧化物和环状系统上的环氧化物代谢成其相应的二醇。由于其广泛的底物特异性，这种酶被认为在改善环氧化物的毒性中发挥显著作用。解毒反应通常降低化合物的疏水性，从而得到更具极性，从而可分泌的物质。
[0064]“可溶性环氧化物水解酶”(“sffi”)是一种环氧化物水解酶，其在许多细胞类型中将EET转化成称为二羟基二十碳三烯酸(“DHET”)的二羟基衍生物。鼠科sEH的克隆和序列阐明于 Grant 等人，J.B1l.Chem.268(23):17628-17633(1993)。人 sEH 序列的克隆、序列和登录号阐明于 Beetham 等人,Arch.B1chem.B1phys.305 (I): 197-201 (1993)。NCBI Entrez核苷酸登录号L05779阐明编码所述蛋白质的核酸序列，以及5’非翻译区和3’非翻译区。所述基因的进化和命名在Beetham等人，DNACell B1l.14 (I):61-71 (1995)论述。可溶性环氧化物水解酶代表示在啮齿动物与人类(Arand等人，FEBSLett.,338:251-256(1994))之间在超过90%同源性的单一高度保守的基因产物。可溶性EH与mEH只具有非常远的关系，并且使不在循环系统上的广泛环氧化物水合。与由π￡Η在潜在有毒的环氧化物的降解中发挥的作用相反，Sffi被认为在内源性化学介体的形成或降解中发挥作用。除非另外指明，否则如本文所用，术语“可溶的环氧化物水解酶”和“sEH”是指人的sHL
[0065]除非另外指明，否则如本文所用，术语“sEH抑制剂”(也简称为“sEHI”)或“sffi的抑制剂”指的是人sHl的抑制剂。优选地，所述抑制剂在所述抑制剂抑制sHl至少50 %的浓度下还不抑制微粒体环氧化物水解酶的活性超过25 %，并且更优选地在所述浓度下不抑制mEH超过10 %。为了便于参考，除非上下文另有要求，否则如本文所用，术语“ sEH抑制齐U”包括被代谢为sEH的活性抑制剂的前药。为进一步方便参考，并且除上下文另有要求，否则本文提及一种化合物作为sEH的抑制剂包括提及保留作为sEH抑制剂的活性的所述化合物的衍生物(如所述化合物的酯)。
[0066]“生理条件”是指具有允许所感兴趣的细胞的营养或生长的条件(如温度、pH和渗透压摩尔浓度)的细胞外环境。
[0067]“微RNA” ( “miRNA”)是指许多真核生物中的在转录后水平下负调节其互补mRNA的18-25个核苷酸长度的小的、非编码RNA。参见例如Kurihara和Watanabe, Proc NatlAcad Sci USA 101 (34): 12753-12758 (2004)。微 RNA 在 20 世纪 90 年代早期首次在蛔虫线虫(C.elegans)中发现，并且目前在许多物种，包括人类中是已知的。如本文所用，它是指外源施用的miRNA，除非特别说明，或上下文另有要求。
[0068]术语“共同施用”是指在血液中同时存在两种活性剂。被共同施用的活性制剂可以同时(即，同时)或顺序输送。
[0069]术语“患者”、“受试者”或“个体”可互换地指哺乳动物，例如，人类或非人类哺乳动物，包括灵长类动物(例如，猴、泛类人猿、猩猩)、家养哺乳动物(例如，猫科动物、犬科动物)、农业哺乳动物(例如，牛、羊、猪、马)和实验室哺乳动物或啮齿动物(例如，鼠属、鼠科、兔形目、仓鼠)。
[0070]术语“减少”、“抑制”、“减轻”、“缓解”是指在神经性疼痛的症状的可检测的降低，如由受过训练的临床观察者来确定。神经性疼痛的减少可以通过自我评估(例如，通过所述患者的报告)、通过采用在本领域中公知的疼痛测量试验(例如，痛觉过敏和/或异常性疼痛的测试)和/或客观地(例如，使用功能性磁共振成像或f-MRI)来测量。神经性疼痛减少的确定可以通过在治疗前后进行患者状况的比较来作出。
[0071]“治疗有效量或剂量”或“治疗足够量或剂量”或“有效或足够量或剂量”指的是产生针对其来施用的治疗效果的剂量。精确剂量将取决于治疗目的并且由本领域技术人员使用已知技术来确定(参见例如Lieberman, Pharmaceutical DosageForms (第 1-3 卷，1992) ；Lloyd, The Art, Science and Technology of PharmaceuticalCompounding(1999) ；Pickar, Dosage Calculat1ns (1999)；和 Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy,第 20版，2003，Gennaro编，Lippincott, Williams&Wilkins)。在致敏细胞中，治疗有效剂量通常可以比非致敏细胞的常规治疗有效剂量低。
[0072]II1.减轻神经性疼痛的方法
[0073]本发明提供了缓解神经性疼痛的方法，通过向有需要的受试者施用治疗有效量的sEH抑制剂，从而缓解神经性疼痛。
[0074]在一些实施方案中，正用she抑制剂治疗的个人不是接受以下疾病的治疗:动脉粥样硬化、其它炎性病症，或需要抑制特别是在内皮细胞上的粘附分子表达的其它病状。
[0075]A.sEH的抑制剂
[0076]在本发明的方法中有用的Sffi抑制剂包括任何合适的Sffi抑制剂。在一些实施方案中，sHl抑制剂可以是式I的化合物:
[0077]
(R1<XWR2
H H(I)
[0078]其中每个R1可独立地为H、齒素、C^6烧基、Cp6烧氧基、CV6齒代烧基、C1^齒代烧氧基、-O-芳基、具有5-6个环成员和至少I个N杂原子和I个O杂原子作为环成员的杂环烷基、-OH、-NO2或-C (0) 0R3，其中至少I个R1不是H ;X可为-C (0)-或-S (0) 2_ ;R2可为C2_6烷基、C1^6卤代烷基、具有3-6个环成员的环烷基、具有5-6个环成员和至少2个N杂原子作为环成员并且被可为苄基或-C (0) -C1^6烷基的成员取代的CV6烷基-杂环烷基、任选地被OH取代的苯基，或具有5-6个环成员和至少I个N杂原子作为环成员并且任选地被卤素取代的Cch6烷基-杂芳基；R3可为H或C^6烷基；下标η可为I至5的整数；这样使得当R1是
4-0CF3时，则R2可为C2_6烷基、C2_6卤代烷基、具有3-6个环成员的环烷基、具有5-6个环成员和至少2个N杂原子作为环成员并且被可为苄基或-C(O)-Ch烷基的成员取代的Cu烷基-杂环烷基、任选地被OH取代的苯基，或具有5-6个环成员和至少I个N杂原子作为环成员并且任选地被卤素取代的Cch6烷基-杂芳基；或其盐和异构体。
[0079]在一些实施方案中，每个R1可为卤素、C2_6卤代烷基，或CV6卤代烷氧基。在其它实施方案中，每个 R1 可为 F、Cl、Br、1、CF3> CF2CF3^ CF (CF3) 2、CH (CF3) 2 或 0CF3。在一些其它实施方案中，每个R1可为C1、CF3*0CF3。在其它实施方案中，每个R1可为CF3，或0CF3。
[0080]在一些实施方案中，R2可为C2_6烷基、Ch6卤代烷基，或具有3-6个环成员的环烷基。在其它实施方案中，R2可为乙基、丙基、异丙基、丁基、仲-丁基、异-丁基、叔丁基、戊基、戊-2-基、戊-3-基、异戊基、新戊基、己基、CF3、CH2CF3、(CH2) 2CF3、环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些其它实施方案中，R2可为异丙基、仲-丁基、(S)-仲-丁基、戊-3-基或环丙基。在其它实施方案中，R2可为异丙基或(S)-仲丁基。
[0081]在一些实施方案中，X可为-C(O)-。在其它实施方案中，X可为-S(O)2_。
[0082]在一些实施方案中，化合物可为下式任何一个:
[0083]
【权利要求】
1.一种缓解有需要的受试者的神经性疼痛的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式I化合物:
其中 每个R1独立地选自由以下组成的组:H、卤素、C^6烷基、Cp6烷氧基、Cu卤代烷基、C^6卤代烷氧基、-O-芳基、具有5-6个环成员和至少I个N杂原子和I个O杂原子作为环成员的杂环烷基、-OH、-NO2和-C (O) 0R3，其中至少I个R1不是H ; X选自由_C (O)-和-S (O) 2-组成的组； R2选自由以下组成的组:C2_6烷基、CV6卤代烷基、具有3-6个环成员的环烷基、具有5-6个环成员和至少2个N杂原子作为环成员并且被选自由苄基和-C (O) -C1^6烷基组成的组的成员取代的C^6烷基-杂环烷基、任选地被OH取代的苯基，以及具有5-6个环成员和至少I个N杂原子作为环成员并且任选地被卤素取代的Cch6烷基-杂芳基； R3选自由H和CV6烷基组成的组； 下标η是I至5的整数； 这样使得当R1是4-0CF3时，则R2选自由以下组成的组:C2_6烷基、C2_6卤代烷基、具有3-6个环成员的环烷基、具有5-6个环成员和至少2个N杂原子作为环成员并且被选自由苄基和-C (O) -C1^6烷基组成的组的成员取代的Cu烷基-杂环烷基、任选地被OH取代的苯基，以及具有5-6个环成员和至少I个N杂原子作为环成员并且任选地被卤素取代的^?烷基-杂芳基； 或其盐和异构体，从而缓解所述受试者的所述神经性疼痛。
2.如权利要求1所述的方法，其中每个R1选自由以下组成的组:卤素、C2_6卤代烷基和C1-S卤代烷氧基。
3.如权利要求1所述的方法,其中每个R1选自由以下组成的组:F、Cl、Br、1、CF3>CF2CF3' CF (CF3) 2 > CH (CF3) 2 和 OCF3。
4.如权利要求1所述的方法，其中每个R1选自由以下组成的组:(:1、0&和0CF3。
5.如权利要求1所述的方法，其中每个R1选自由以下组成的组=CF3和0CF3。
6.如权利要求1所述的方法，其中R2选自由以下组成的组:C2_6烷基、C^6卤代烷基，和具有3-6个环成员的环烷基。
7.如权利要求1所述的方法，其中R2选自由以下组成的组:乙基、丙基、异丙基、丁基、仲-丁基、异-丁基、叔丁基、戍基、戍_2_基、戍-3_基、异-戍基、新戍基、己基、CF3、CH2CF3、(CH2) 2CF3、环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
8.如权利要求1所述的方法，其中R2选自由以下组成的组:异丙基、仲-丁基、(S)_仲-丁基、戍-3-基和环丙基。
9.如权利要求1所述的方法，其中R2选自由以下组成的组:异丙基和(S)-仲-丁基。
10.如权利要求1所述的方法，其中X是-C(O)-。
11.如权利要求1所述的方法，其中X是-S(O) 2-。
12.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ia:
13.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ib:
14.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ic:
15.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Id:
16.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ie:
17.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式If:
18.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ig:
19.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物具有式Ih:
20.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物选自由以下组成的组: 1-(1-异丁酰基哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 (S)-1-(1-(2-甲基丁酰基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 1-(1-( 丁基磺酰基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲，和 (S)-1-(1-(2-甲基丁酰基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲。
21.如权利要求1所述的方法，其中所述化合物选自由以下组成的组: 1-(1-异丁酰基哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲、 (S)-1-(1-(2-甲基丁酰基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)脲，和 (S)-1-(1-(2-甲基丁酰基)哌啶-4-基)-3-(4-(三氟甲氧基)苯基)脲。
22.如权利要求1所述的方法，其中所述药剂口服施用。
23.如权利要求1所述的方法，其中所述药剂静脉内施用。
24.如权利要求1所述的方法，其中所述药剂鞘内施用。
25.如权利要求1所述的方法，其中所述神经性疼痛是中枢神经性疼痛。
26.如权利要求1所述的方法，其中所述神经性疼痛是周围神经性疼痛。
27.如权利要求1所述的方法，其中所述神经性疼痛选自由以下组成的组:带状疱疹后神经痛，三叉神经痛，局灶性周围神经损伤，和痛性感觉缺失，由于中风或肿块、脊髓损伤或多发性硬化引起的中枢性疼痛，和由于糖尿病、HIV或化疗引起的周围神经病变。
28.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者在施用时正经历神经性疼痛。
【文档编号】A61K31/17GK104136022SQ201380010112
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2013年2月1日 优先权日:2012年2月1日
【发明者】B·D·哈莫克, K·S·李, B·因杰奥卢, K·瓦格纳 申请人:加利福尼亚大学董事会