一种超声波辅助从红花檵木叶中提取多酚类物质的方法
【专利摘要】本发明公开了一种超声波辅助从红花檵木叶中提取多酚类物质的方法，方法如下：(1)将红花檵木叶粉碎成粉末；(2)然后往红花檵木叶粉中加入乙醇，料液比为1：10-50，放入超声清洗器中，在超声功率为300-800W，提取温度为40-80℃，提取时间为15-60min，重复步骤(2)提取1-4次，提取结束，合并提取液；(3)将提取液放入冷冻高速离心机中进行低温高速离心，得到红花檵木叶提取物。本发明的红花檵木叶提取物能显著提高衰老小鼠肝内SOD酶和过氧化氢酶活性，降低MDA含量，保护膜脂免受过氧化，抑制活性氧自由基对细胞的损伤作用，并能与各种衰老相关作用因子结合，减缓由机体内外环境失调所引起的细胞凋亡和衰老，具有较强的抗衰老作用。
【专利说明】一种超声波辅助从红花繼木叶中提取多酚类物质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物提取方法【技术领域】，尤其涉及一种超声波辅助从红花檣木叶中提 取多酚类物质的方法。
【背景技术】
[0002] 红花檣木（LoropetalumchinenseOlivevar.rubrumYieh)系金缕梅科 (Hamamelidaceae)檣木属檣木（L.chinenseOlive)的变种，为常绿灌木或小乔木，是湖南 本土野生资源，零星分布于湖南浏阳、平江、醴陵和江西萍乡上栗区湘赣。《本草纲目》、《植 物名实图考》、《福建民间草药》、《湖南药物志》中都有记载檣木的根、叶、花、果均可入药，具 有清热解毒、通经活络、止咳、消炎、镇痛、止血、兴奋子宫、扩张血管等功效，有研究证实其 多种色素具抗氧化，抗菌活性。
[0003] 多酚广泛存在于水果、蔬菜、牧草和药用植物中，是植物在长期自然选择的过程中 产生的一些次级代谢产物。由于多酚是一种重要的生理活性物质，有着很强的生物活性和 药理活性，到目前为止，在植物中已经发现近一万种结构独特的多酚。近年来，国内外学者 对类多酚的研究更加深入，相对集中在分离纯化、结构鉴定、清除自由基、药理作用、抗辐射 作用、抗癌和抗肿瘤等方面。研究资料显示，植物多酚具有明显的抗氧化、抗衰老作用，较 强的抑菌、抑制胆固醇上升和抗癌等功效，摄取植物多酚对预防和控制疾病的发生具有明 显效果。大量试验结果表明，自由基是引起衰老的决定性因素。自由基代谢紊乱导致体内 产生超氧阴离子自由基（〇 2_)、过氧化氢（H202)、羟自由基（0HO和单线态氧（凡）等自由 基，这些自由基诱导脂质发生过氧化，产生过氧化脂质与氢过氧化脂，也可诱导蛋白质氧化 和DNA损伤，进而引发一系列与衰老相关的疾病。王贞丽等通过观察茶多酚对衰老小鼠红 细胞氧化损伤的影响，发现茶多酚能够增强小鼠红细胞SOD、Na+-K+-ATPase活性和唾液酸 含量，降低细胞脂质过氧化而发挥抗衰老作用。
[0004] 国内外对于植物多酚的应用研究介绍较多，相应技术已经较为成熟，然而作为从 红花檣木中提取的多酚，相关的研究不是很多，所以对于红花檣木多酚的研究还有很大的 空间，值得进行探讨。超声波辅助提取技术是利用超声波具有的机械效应、空化效应及热效 应，加强了胞内物质的释放、扩散和溶解，加速有效成分的浸出。超声波辅助提取技术具有 操作简便快捷、省时、高效、节能、对有效成分破坏小等优势，目前尚未见采用超声波辅助提 取红花檣木叶中多酚的研究报道。
【发明内容】
[0005] 本发明提供了一种超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法。
[0006] 本发明采用如下技术方案：
[0007] 本发明的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法的具体步骤如下：
[0008] (1)将红花檣木叶粉碎成粉末；
[0009] (2)然后往红花檣木叶粉中加入乙醇，料液比为1 :10_50,放入超声清洗器中，在 超声功率为300-800W，提取温度为40-80°C，提取时间为15-60min，重复步骤（2)提取1-4 次，提取结束，合并提取液；(3)将步骤（2)的提取液放入冷冻高速离心机中进行低温高速 离心，得到含有多酚类物质的上清液。
[0010] 步骤（1)中，红花檣木叶选自采摘3月新鲜的红花檣木大叶玫红鲜叶用电热恒温 干燥箱65°C烘干粉碎后，过18目筛。
[0011] 步骤（2)中，乙醇的浓度优选为20-80%，更优选乙醇的浓度为60%。
[0012] 步骤（2)中，料液比优选为1 :30。
[0013] 步骤⑵中，优选超声功率为600W，提取温度为65°C，提取时间为30min。
[0014] 步骤⑵中，优选提取次数为2次。
[0015] 步骤⑶中，低温高速离心温度控制在5°C以下，10000r/min离心15min。
[0016] 步骤（3)中，上清液转移至用锡箔纸包裹的棕色容量瓶中，-20°C下冷藏。
[0017] 本发明的方法制备的多酚类物质具备抗氧化的作用，可以用于制备抗氧化药物。
[0018] 本发明的积极效果如下：
[0019] 本发明的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法具有方法简单，用时 短，效率高，安全环保，无污染的优点，并且本发明的方法得到的提取液中总多酚含量高，具 有很好的抗氧化作用。
【具体实施方式】
[0020] 下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。
[0021] 实施例1
[0022] (1)将红花檣木叶粉碎成粉末；
[0023] (2)然后往红花檣木叶粉中加入乙醇，料液比为1 :10,放入超声清洗器中，在超声 功率为300W，提取温度为40°C，提取时间为60min，重复步骤（2)提取4次，提取结束，合并 提取液；
[0024] (3)将步骤⑵的提取液放入冷冻高速离心机中进行低温高速离心，得到含有多 酚类物质的上清液。
[0025] 步骤（1)中，乙醇的浓度为20%。
[0026] 步骤⑶中，低温高速离心温度控制在5°C以下，10000r/min离心15min。
[0027] 步骤（3)中，上清液转移至用锡箔纸包裹的棕色容量瓶中，-20°C下冷藏。
[0028] 实施例2
[0029] (1)将红花檣木叶粉碎成粉末；
[0030] (2)然后往红花檣木叶粉中加入乙醇，料液比为1 :50,放入超声清洗器中，在超声 功率为800W，提取温度为80°C，提取时间为15min，重复步骤（2)提取1次，提取结束，得到 提取液；
[0031] (3)将步骤（2)的提取液放入冷冻高速离心机中进行低温高速离心，得到含有多 酚类物质的上清液。
[0032] 步骤（1)中，乙醇的浓度为80%。
[0033] 步骤⑶中，低温高速离心温度控制在5°C以下，10000r/min离心15min。
[0034] 步骤（3)中，上清液转移至用锡箔纸包裹的棕色容量瓶中，-20°C下冷藏。
[0035] 实施例3
[0036] (1)将红花檣木叶粉碎成粉末；
[0037] (2)然后往红花檣木叶粉中加入乙醇，料液比为1 :30,放入超声清洗器中，在超声 功率为600W，提取温度为65°C，提取时间为30min，重复步骤（2)提取2次，提取结束，合并 提取液；
[0038] (3)将步骤（2)的提取液放入冷冻高速离心机中进行低温高速离心，得到含有多 酚类物质的上清液。
[0039] 步骤（1)中，乙醇的浓度为60%。
[0040] 步骤⑶中，低温高速离心温度控制在5°C以下，10000r/min离心15min。
[0041] 步骤（3)中，上清液转移至用锡箔纸包裹的棕色容量瓶中，-20°C下冷藏。
[0042] 样品测定
[0043] 吸取一定量的含有多酚类物质的上清液稀释100倍，加入Folin-ciocalteu试剂 0. 2mL，10%Na2C03溶液lmL，超纯水H206mL。室温下避光反应30min，在波长765nm处测吸 光度。用水代替萃取液做一次空白对照。每个处理重复3次。
[0044] 样品中总多酚含量按下式计算：
[0045]
【权利要求】
1. 一种超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在于：所述方法的 具体步骤如下： (1) 将红花檣木叶粉碎成粉末； (2) 然后往红花檣木叶粉中加入乙醇，料液比为1 :10-50,放入超声清洗器中，在超声 功率为300-800W，提取温度为40-80°C，提取时间为15-60min，重复步骤（2)提取1-4次，提 取结束，合并提取液；（3)将步骤（2)的提取液放入冷冻高速离心机中进行低温高速离心， 得到含有多酚类物质的上清液。
2. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤⑵中，乙醇的浓度为20-80%。
3. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤⑵中，乙醇的浓度为60%。
4. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤⑵中，料液比为1 :30。
5. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤（2)中，超声功率为600W，提取温度为65°C，提取时间为30min。
6. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤（2)中，提取次数为2次。
7. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤（3)中，低温高速离心温度控制在5°C以下，10000r/min离心15min。
8. 如权利要求1所述的超声波辅助从红花檣木叶中提取多酚类物质的方法，其特征在 于：步骤（3)中，上清液转移至用锡箔纸包裹的棕色容量瓶中，-20°C下冷藏。
9. 如权利要求1-8任一项所述的方法制备的多酚类物质在制备抗氧化药物中的用途。
【文档编号】A61K36/185GK104257705SQ201410497597
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月25日 优先权日:2014年9月25日
【发明者】朱丽娜, 于晓英, 陈仕贵, 陈淼芳 申请人:湖南农业大学