用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉、制备方法及其应用。所述鹅血冻干粉的制备方法，包括以下步骤：将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂和保鲜剂混合均匀后，0℃以下低温保存；将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；将过滤后的血浆灭活除菌；将除菌后的血浆冷冻干燥1-5小时；加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为0.5-2μm；血浆纯粉抽真空将水分升华干燥而得冻干粉。本发明的鹅血冻干粉对小鼠肉瘤S180、小鼠结肠癌Clon-26、人体移植性肿瘤(胃癌)SGC具有明显的抑制作用，说明本发明的鹅血冻干粉能够有效治疗消化道肿瘤，特别是食道癌、胃癌、肠癌等。
【专利说明】用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法和 应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药制剂领域，更具体地说，本发明涉及用于预防和治疗消化道肿瘤 的鹅血冻干粉、制备方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 现代健康的需要，在中药制剂领域在传承、复兴和发扬中形成众多中医药老字号 品牌，如同仁堂（1669)、胡庆余堂（1874)、大生祥（1885)、韩杏堂（1901)、阜通（1644)、杏和 堂（1600)、公益大、陈直翁、怀德鹤（1948)、老人和泰、翁长春（1699)、傅济春、雅观斋（明万 历年间）、雷允上等以及中医药健康茶老字号品牌如万泰元（I860)、朱乾升、大鹏红日、乾 泰聚等，其中万泰元茶號更是荣获1915年万国世界博览会金奖、1926年美国费城世界博览 会甲等大奖和1929年首届西湖博览会金奖。
[0003] 肿瘤（Tumor)是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平 上失去对其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。
[0004] 随着人类饮食结构的改变及各种因素影响，肿瘤的发生率逐步攀升，尤以消化道 肿瘤发病率为最高。据统计，亚洲消化道肿瘤发病率占全部肿瘤的60%以上。消化道肿瘤 指发生在食管、胃、十二指肠、结肠等部位的肿瘤，如食管癌、胃癌、直肠癌等。
[0005] 现在，对于肿瘤的治疗大多采用化疗的方法。化疗是化学药物治疗的简称，是利用 化学药物阻止癌细胞的增殖、浸润、转移，直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方式。它是一种 全身性治疗手段，和手术、放疗一起，并称为癌症的三大治疗手段。由于化疗药物的选择性 不强，在杀灭癌细胞的同时也会不可避免地损伤人体正常的细胞，特别是对于增殖旺盛的 骨髓造血干细胞，毒害作用非常明显。因此，接受化疗的病人往往外周血白细胞等全血细胞 数量下降，进而会引起贫血、抗感染能力下降等严重不良反应，若不采取相应的治疗措施， 会加重患者病情，导致化疗失败。
[0006] 抗肿瘤药物在目前肿瘤治疗中发挥着越来越重要的作用，然而目前绝大多数抗肿 瘤药物在抑制或杀伤肿瘤细胞的同时，对机体的正常细胞也会有毒害作，尤其是骨髓造血 细胞和胃肠道黏膜上皮细胞。因此，在有效的肿瘤治疗中，毒副反应几乎是不可避免的，部 分病人可因严重的毒副反应或引起并发症而中断，使有些肿瘤患者不能按期化疗或不能接 受有效剂量而致肿瘤复发，如何提高化效，降低其毒副反应是目前国内外临床研究的主要 课题。
[0007] 针对上述问题，现有技术中研制出一些治疗中药的中药组合物。但是，中药组合物 成分及其含量之间关系较为复杂，即便是相同的中药成分，不同的含量其君臣佐使关系也 不相同，可能导致药效的降低甚至出现相反的疗效。现有技术中中药组合物的生治疗效果 往往不好。因此，对于具有治疗肿瘤功能的中药组合物的研究，具有现实而又久远的意义。
[0008] 另外，在传统中医的组方临床应用中，一般采用配方制，即医生开好处方后，而抓 配的过程由制药房完成，这样的流程使得药物的配比不精准，往往达不到最好的疗效。因 此，仍需要治疗消化道肿瘤的具有确切疗效的中药。
【发明内容】
[0009] 本发明的主要目的在于克服现有技术中中药组合物的治疗效果不好的缺陷，提供 一种用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉、制备方法及应用。
[0010] 为了实现上述发明目的，本发明通过以下技术方案解决上述技术问题：
[0011] 一种用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
[0012] (1)、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂和保鲜剂混合均匀后，(TC以下低温保存；
[0013] (2)、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；
[0014] (3)、将过滤后的血浆灭活除菌；
[0015] (4)、将除菌后的血浆在低于1个大气压，-20°C?_45°C条件下冷冻干燥1-5小 时；
[0016] (5)、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 0· 5-2 μ m ;
[0017] ￠)、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分升华干燥而得冻干粉。
[0018] 优选地，步骤（4)中所述冷冻干燥的条件为-35°C，干燥4小时。
[0019] 优选地，步骤（5)中经超细粉碎机打粉后，粒径为0. 5-1 μ m。
[0020] 更优选地，经超细粉碎机打粉后，粒径为0. 5-0. 6 μ m。
[0021] 优选地，步骤（6)中所述干燥温度为45°C，干燥温度为24小时。
[0022] 优选地，步骤（3)中所述灭活除菌处理为射线灭菌、微波灭菌、湿热蒸汽灭菌或臭 氧灭菌的一种或几种。
[0023] 优选地，步骤（1)中所述抗凝剂为枸橼酸钠，加入的重量百分比为新鲜鹅血的 0. 3-0. 4%，所述保鲜剂为糖苷水解酶，加入的重量百分比为新鲜鹅血的0. 1-0. 3%。
[0024] 本发明还提供了上述制备方法制备得到的鹅血冻干粉。
[0025] 本发明还提供上述鹅血冻干粉在制备预防和治疗消化道肿瘤药物上的应用。
[0026] 本发明的有益效果在于：
[0027] 1、本发明的鹅血冻干粉的制备方法中，通过对冷冻干燥的时间、温度等参数进行 合理的设计，可以最大限度地保存鹅血的药效成分的性能，经检测，成品鹅血冻干粉的有效 成份利用率相当于新鲜饿血的有效成分的5倍。
[0028] 2、本发明的鹅血冻干粉的制备方法中，通过采用超微粉体技术，提高鹅血冻的细 胞破壁率，增大比表面积，使得粉体粒径达到了微米级（0. 5-2 μ m)，使得鹅血冻干粉的药效 成份充分完全的释放出来，对提高鹅血的利用率、增强药物疗效有非常重要的现实意义。
[0029] 3、利用本发明的鹅血冻干粉对小鼠肉瘤S180、小鼠结肠癌Clon-26、人体移植性 肿瘤（胃癌）SGC具有明显的抑制作用，说明本发明的鹅血冻干粉能够有效治疗消化道肿 瘤，特别是食道癌、胃癌、肠癌等。
【具体实施方式】
[0030] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实 施例范围之中。
[0031] 在符合本领域常识的基础上，本发明所述各优选条件，可任意组合，即得本发明各 较佳实例。
[0032] 本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0033] 实施例1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法
[0034] 在该实施例中，用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，包括以下 步骤：
[0035] (1)、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂枸橼酸钠和保鲜剂糖苷水解酶混合均匀后， (TC以下低温保存；所述抗凝剂加入的重量百分比为新鲜鹅血的0.3%，所述保鲜剂为，力口 入的重量百分比为新鲜鹅血的〇. 2%。
[0036] (2)、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；
[0037] (3)、将过滤后的血浆湿热蒸汽灭活除菌；
[0038] (4)、将除菌后的血浆在低于1个大气压，_35°C条件下冷冻干燥4小时；
[0039] (5)、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 0· 5 μ m ;
[0040] ￠)、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分45 °C升华干燥24小时而得冻干 粉。
[0041] 实施例2用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法
[0042] 在该实施例中，用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，包括以下 步骤：
[0043] (1)、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂枸橼酸钠和保鲜剂糖苷水解酶混合均匀后， (TC以下低温保存；所述抗凝剂加入的重量百分比为新鲜鹅血的0.4%，所述保鲜剂为，力口 入的重量百分比为新鲜鹅血的〇. 3%。
[0044] (2)、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；
[0045] (3)、将过滤后的血浆射线灭活除菌；
[0046] (4)、将除菌后的血浆在低于1个大气压，_25°C条件下冷冻干燥3小时；
[0047] (5)、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 0· 6 μ m ;
[0048] ￠)、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分45 °C升华干燥24小时而得冻干 粉。
[0049] 实施例3用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法
[0050] 在该实施例中，用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，包括以下 步骤：
[0051] (1)、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂枸橼酸钠和保鲜剂糖苷水解酶混合均匀后， (TC以下低温保存；所述抗凝剂加入的重量百分比为新鲜鹅血的0. 35%，所述保鲜剂为，力口 入的重量百分比为新鲜鹅血的〇. 2%。
[0052] (2)、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；
[0053] (3)、将过滤后的血浆微波灭活除菌；
[0054] (4)、将除菌后的血浆在低于1个大气压，_45°C条件下冷冻干燥2小时；
[0055] (5)、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 0· 8 μ m ;
[0056] ￠)、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分45 °C升华干燥24小时而得冻干 粉。
[0057] 实施例4用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法
[0058] 在该实施例中，用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，包括以下 步骤：
[0059] (1)、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂枸橼酸钠和保鲜剂糖苷水解酶混合均匀后， (TC以下低温保存；所述抗凝剂加入的重量百分比为新鲜鹅血的0. 25%，所述保鲜剂为，力口 入的重量百分比为新鲜鹅血的〇. 2%。
[0060] (2)、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；
[0061] (3)、将过滤后的血浆射线灭活除菌；
[0062] (4)、将除菌后的血浆在低于1个大气压，_35°C条件下冷冻干燥5小时；
[0063] (5)、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 1 μ m ；
[0064] ￠)、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分45 °C升华干燥24小时而得冻干 粉。
[0065] 实施例5用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉及其制备方法
[0066] 在该实施例中，用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，包括以下 步骤：
[0067] (1)、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂枸橼酸钠和保鲜剂糖苷水解酶混合均匀后， (TC以下低温保存；所述抗凝剂加入的重量百分比为新鲜鹅血的0.2%，所述保鲜剂为，力口 入的重量百分比为新鲜鹅血的〇. 2%。
[0068] (2)、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质；
[0069] (3)、将过滤后的血浆射线灭活除菌；
[0070] (4)、将除菌后的血浆在低于1个大气压，_40°C条件下冷冻干燥4小时；
[0071] (5)、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 1 μ m ；
[0072] ￠)、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分45 °C升华干燥24小时而得冻干 粉。
[0073] 药效学研究
[0074] 通过对本发明的鹅血冻干粉的药效学研究发现：本发明的鹅血冻干粉对小鼠肉瘤 S180、小鼠结肠癌Clon-26、人体移植性肿瘤（胃癌）SGC具有明显的抑制作用。
[0075] 1、本发明的鹅血冻干粉对不同移植性动物肿瘤的抑制作用
[0076] 动物实验的剂量设计为：0. lg/kg、0. 5g/kg、2. 5g/kg三个剂量组。
[0077] 用注射用水配制成各个剂量组，给药方法为：注射，每日一次，连续七天。
[0078] I. 1对小鼠肉瘤S180的抑制作用研究
[0079] 取生长良好的小鼠肉瘤S180腹水，用生理盐水按1 :5比例稀释制成细胞悬液接种 于昆明雌性小鼠一侧腋皮下，〇. 2ml/只。随机分组，每组10只，设生理盐水对照组、环磷酰 胺（CTX)阳性药组；本发明实施例1的鹅血冻干粉高、中、低三个剂量组。接种次日起给药， 连续七天，阳性药环磷酰胺（lOOmg/kg)腹腔注射，共两次（1、4)天，于第10天脱颈处死动 物，解剖取瘤块、称重，按如下公式计算结果。
[0080] 肿瘤抑制率（％) = (对照组平均瘤重-给药组平均瘤重）/对照组平均瘤重
[0081] 结果见表1。
[0082] 表1鹅血冻干粉对小鼠 S180的抑制作用
[0083]
【权利要求】
1. 一种用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下 步骤： (1) 、将采集的新鲜的鹅血加入抗凝剂和保鲜剂混合均匀后，〇°c以下低温保存； (2) 、将新鲜鹅血在打浆机中搅拌成血浆，过滤去除纤维物质及杂质； (3) 、将过滤后的血浆灭活除菌； (4) 、将除菌后的血浆在低于1个大气压，_20°C ?_45°C条件下冷冻干燥1-5小时； (5) 、将干燥好的血浆加入超细粉碎机中进行打粉，打粉后所述血浆纯粉的粒径为 0? 5-2 u m ; (6) 、将步骤（5)中制得的血浆纯粉抽真空将水分升华干燥而得冻干粉。
2. 根据权利要求1所述的用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特 征在于，步骤（4)中所述冷冻干燥的条件为-35°C，干燥4小时。
3. 根据权利要求1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在 于，优选地，步骤（5)中经超细粉碎机打粉后，粒径为0. 5-1 y m。
4. 根据权利要求1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在 于，经超细粉碎机打粉后，粒径为0. 5-0. 6 ii m。
5. 根据权利要求1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在 于，步骤（6)中所述干燥温度为45°C，干燥温度为24小时。
6. 根据权利要求1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在 于，步骤（3)中所述灭活除菌处理为射线灭菌、微波灭菌、湿热蒸汽灭菌或臭氧灭菌的一种 或几种。
7. 根据权利要求1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在 于，步骤（1)中所述抗凝剂为枸橼酸钠，加入的重量百分比为新鲜鹅血的0.3-0. 4%。
8. 根据权利要求1用于预防和治疗消化道肿瘤的鹅血冻干粉的制备方法，其特征在 于，步骤（1)中所述保鲜剂为糖苷水解酶，加入的重量百分比为新鲜鹅血的0.1-0. 3%。
9. 根据权利要求1-8任一项所述的制备方法制备得到的鹅血冻干粉。
10. 权利要求9所述的鹅血冻干粉在制备预防和治疗消化道肿瘤药物上的应用。
【文档编号】A61K9/19GK104352525SQ201410543072
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年10月15日 优先权日:2014年10月15日
【发明者】傅苗青, 何雪心, 董颖, 傅旭华 申请人:磐安县道地磐药中药研究所