一种治疗男性不育组合药物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种治疗男性不育组合药物，所述配方包括枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉和生甘草；本发明提供的组合药物，对于不孕症具有良好的治疗效果，虽然本方源于五子衍宗，但是且其作用优于市售的五子衍宗品种。并且本发明提供的组方其治疗后的效果优于未给药的正常组。可见其良好的治疗效果。
【专利说明】一种治疗男性不育组合药物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药组合药物，更具体的说涉及一种治疗男性不育组合药物及其 应用。 技术背景
[0002] 临床上把男性不育分为性功能障碍和性功能正常两类，后者依据精液分析结果可 进一步分为无精子症、少精子症、弱精子症、精子无力症和精子数正常性不育。
[0003] 弱精足导致男性不育的主要原因。而导致弱精的病因复杂且原因不明，难以严格 按照循征医学的原理确定治疗方案，西医针对病因的治疗效果不理想。中医《素问?六节藏 象沦》中云："肾者，主蛰，封藏之本，精之处也。"精子来源于肾。《素问·上古天真论》中又 云："二八，肾气盛，天癸至，精气溢泻，阴阳和，故能有子。"朱丹溪云："有精虚精弱不能成 胎者。"可见中医认为肾所藏之精的亏虚是造成弱精症的根本原因，也是采用补肾益精为主 治疗少精、弱精症的依据，因此治疗弱精症多以补肾为主。熟地、山茱萸、山药滋肾补精；枸 杞、淮牛膝补肝肾，健腰膝，鹿角胶、龟胶血肉有情之品以填精补髓，滋生真阴，同时配伍菟 丝子温阳益阴，合鹿角胶"阳中求阴"，使肾中阴精的产生有阳气作为化生动力而源源不绝。 全方对促进精子的生成，提高精子的数量、增强精子的活动力都有良好的作用。免疫性不孕 不育分为肾阴虚型、肾阳虚型、湿热型进行辨证施治。中医认为肾藏精，主生殖，《素问?奇 病论》说："胞络者，系于肾。"肾阳虚型由于肾虚冲任失养，血海不充；肾阴虚型由于阴血亏 虚，致阳气偏旺，血海蕴热；湿热型由于湿热下注胞络，故婚久无子。所以中医治以补肾，祛 湿热。瘀血阻于胞脉也会婚久无子，故治疗中常加上活血祛瘀中药。现代药理证明："补肾 中药"有调节免疫功能的作用。茯苓、党参、杞子、淮山、白术、仙灵脾等同样有调节免疫功能 作用。生甘草、当归、川芎、绵茵陈、黄芩、黄连、丹参、赤芍、丹皮有抑制抗体产生的作用，黄 连、黄柏也有免疫调节作用。
[0004] 男性精液质量普遍下降和男性不育明显增加已经引起极大的关注，应用补肾生精 中药对精液质量进行正向干预广泛于临床治疗工作中。五子衍宗方具有补肾益精养肾强 身之功效，对男性不育症有较好的疗效，成为补肾生精的经典方剂，被誉为"古今种子第一 方"，目前临床中使用的诸多补肾生精中药以此方药为基础化载形成。动物试验中发现五子 衍宗丸主要作用于睾丸的生精上皮细胞、具有较强的促进曲细精管生精能力的作用；睾丸 全基因表达谱分析显示促进生精过程中的基因表达以负向抑制/下调作用为主，以正向促 进/上调作用为辅，可以明显促进免疫网络通路系统。
【发明内容】
[0005] 本发明在五子衍宗方的基础上，中医学认为：肾的精气的盛衰直接关系着人的生 殖和生长发育，肾虚是男性不育症的主要病因。治疗男性不育组合药物枸杞子、菟丝子、覆 盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉和生甘草为基本方，方中五子衍宗丸具有 补肾益精，种嗣衍宗之功，山萸肉、首乌能养血益阴、补精益髓；枸杞子味甘平，滋补肝肾，黄 芪健脾益气；共用滋肾填精，覆盆子、五味子酸平敛阴，菟丝子补阳益阴，二者既补肾阴，又 补肾阳，且能固精。
[0006] 在基本方的基础上，一种加味的方案是：加味淫羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药。 其中淫羊藿、巴戟天味辛性热，以温肾壮阳；锁阳、山药兴阳固精，强阴益髓。人参大补元气， 固脱生津。
[0007] 第二种加味的方案是加味仙灵脾、巴戟天、锁阳和党参。其中，仙灵脾、巴戟天温肾 壮阳；锁阳固精，党参生津止渴。
[0008] 第三种加味方案是加味、熟地黄和西洋参。其中，淫羊藿温肾壮阳；熟地黄补血滋 阴，益精填髓，西洋参补益扶正，滋阴生津。
[0009] 所述的枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘 草、淫羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药的重量比为1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10: 1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:I-IOo
[0010] 所述的枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘 草、仙灵脾、巴戟天、锁阳和党参的重量比为1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10: 1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:I-IOo
[0011] 所述的枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘 草、淫羊藿、熟地黄和西洋参的重量比为1-10: 1-10: 1-10: 1-10: 1-10: 1-10: 1-10: 1-10:1-1 0:1-10:1-10:1-10:1-10。
[0012] 所述的治疗男性不育组合药物在制备治疗免疫性不育病症药物中的应用。
[0013] 所述的治疗男性不育组合药物在制备治疗弱精子不育病症药物中的应用。
[0014] 本发明的有益技术效果是：本发明提供的组合药物，对于不孕症具有良好的治疗 效果，虽然本方源于五子衍宗，但是且其作用优于市售的五子衍宗品种。并且本发明提供的 组方其治疗后的效果由于正常组。可见其良好的治疗效果。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1不同提取方式对组合药物活性的影响
[0016] 枸杞子、英丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄苗、肉灰蓉和生甘草根 据重量比1:1:1:1:1:1:1:1:1:1称取4组，命名为基本方组。
[0017] 枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘草、淫 羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药根据重量比1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1称取4组药 材，命名为组方A。
[0018] 枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘草、仙 灵脾、巴戟天、锁阳和党参根据重量比1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1称取4组药材，命名 为组方B。
[0019] 枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘草、淫 羊藿、熟地黄和西洋参根据重量比1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:1称取4组药材，命名为实验 V组和实验VI组。
[0020] 水煮提取物：分别水煮提取基本方组、组方A、组方B和组方C各300g生药材，水 量为药材重量的8倍，提取一次，分别得到得干物质重61. 9g、61. 5g、60. lg、62. 3g，提取率 分别是 20. 6%、20· 5%、20· 0%和 20. 8%。
[0021] 70%乙醇提取：用70%乙醇分别回流提取基本方组、组方Α、组方B和组方C各 300g生药材，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，得干物质重38. 5g、37. 0g、37. 3g和 39. 2g，提取率 12. 8%、12· 3%、12· 4%和 13. 1%。
[0022] 80 %乙醇提取：用80 %乙醇分别回流提取基本方组、组方Α、组方B和组方C各 300g生药材，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，得干物质重35. 2g、33. 4g、32. 5g和 36. 8g，提取率 11. 7%、11· 1%、10· 6%和 12. 3%。
[0023] 90%乙醇提取：用90%乙醇回流提取基本方组、组方Α、组方B和组方C各300g生 药材，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，得干物质重26. 0g、27. 5g、24. 6g和26. lg，提 取率 8· 7%、8· 9%、8· 2%和 8· 7%。
[0024] 实施例2组方A的活性研宄
[0025] 分别根据枸杞子、英丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄苗、肉灰蓉和 生甘草根据重量比6:8:3:1:3:2:2:3:3:2称取药材2份，命名为基本方组A。
[0026] 枸杞子、英丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄苗、肉灰蓉、生甘草、淫 羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药的重量比为6:8:3:1:3:2:2:3:3:2:6:6:2:3:1称取药材2 份，命名为治疗男性不育组合药物I组。
[0027] 枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘草、淫 羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药的重量比为1:1:1:1:1:2:2:3:3:2:10:10:8:8:10称取药 材2份，命名为治疗男性不育组合药物II组。
[0028] 枸杞子、英丝子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄苗、肉灰蓉、生甘草、淫 羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药的重量比为10:10:10:10:10:10:10:10:10:1:1:1:1:1:1 称取药材2份，命名为治疗男性不育组合药物III组。
[0029] 分别取治疗男性不育组合药物I、II、111组和基本方组A各1份，用70%乙醇分别 回流提取，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，回收乙醇得到干物质备用。
[0030] 分别取治疗男性不育组合药物I、II、111组和基本方组A各1份水煮提取，水量为 药材重量的8倍，提取一次，回收得到干物质备用。
[0031] 对免疫性不育病症的活性考察
[0032] 选取成熟、健康、有生育力，体重300?330g(4月龄）雄性豚鼠72只，室温22? 28°C，光照12h/d，动物自由饮水和进食。每周称重1次，以调节给药剂量。
[0033] 取雄性豚鼠6只，处死，取睾丸和附睾，剪碎，匀浆，辅以福氏佐剂，在脊柱两侧分 四点皮下注射，15天后开始实验。将余下的66只豚鼠随机分成11组，每组6只，其中11组 复制模型，1组为空白对照组。分组情况如下：
[0034] 空白对照组（以下简称空白组）：整个过程中灌服生理盐水。造模对照组（以下 简称造模组）：连续生理盐水灌胃45天。治疗男性不育组合药物治疗组分别为水提和醇提 的基本方组、治疗男性不育组合药物I、II、ΠΙ组（以下称I组、II组、III组），在造模后继续 用治疗男性不育组合药物灌服45天，每日灌药剂量分别为16g (生药）/kg，分别是成人剂量 的10倍。市售的五子衍宗丸（2005版《中国药典》一部）组（以下简称五子组）：造模后用 市售五子衍宗丸混悬液，灌服45天，每日灌药剂量I. 5g/只，为成人剂量的10倍。
[0035] 解剖豚鼠取附睾尾部，置于2ml Tyroid液中剪碎，37°C恒温5分钟。取上清液 0. 02ml，加人0. 38ml精子稀释液，送精子分析检查。测定精子参数：精子数量、存活率、活动 力和直线运动。
[0036] 实验结束时，断颈处死动物，取左侧睾丸用bouin液固定24小时，石蜡包埋，HE和 PSA染色，Johnsons积分法定量分析曲细精管的面积及各期生精细胞的变化。
[0037] 取右侧睾丸，将其切成Imm的组织块，采用25%的戊二醛行前固定，用0. IM磷酸缓 冲液配制的1%锇酸溶液（PH7. 4)固定2小时，固定过程温度保持在4°C，固定后用递增浓 度的序列酒精脱水，用环氧树脂Epon812包液，进行浸透和包埋，超薄切片经醋酸钠及柠檬 酸铅染色，H600电镜观察。
[0038] 计算均数及标准误G 土 S)，配对资料t检验。
[0039] 各组实验动物体重随治疗时间的延续而持续增长，其中空白组增长速率稍快，但 空白组与造模组比较无显著差异（P > 0. 05)。各组治疗前后体重变化差比较无显著性差异 (P > 0.05)〇
[0040] 表1各组豚鼠睾丸和附睾重量变化（g，i ±s)
[0041]
【权利要求】
1. 一种治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述配方包括枸杞子、菟丝子、覆盆子、 五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉和生甘草。
2. 根据权利要求1所述的治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述配方中还包括了 淫羊藿、巴戟天、锁阳、人参和山药。
3. 根据权利要求1所述的治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述配方中还包括了 仙灵脾、巴戟天、锁阳和党参。
4. 根据权利要求1所述的治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述配方中还包括了 淫羊藿、熟地黄和西洋参。
5. 根据权利要求2所述的治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述的枸杞子、菟丝 子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘草、淫羊藿、巴戟天、锁阳、人 参和山药的重量比为 1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10 :1-10:1-10:1-10。
6. 根据权利要求3所述的治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述的枸杞子、菟丝 子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄苗、肉灰蓉、生甘草、仙灵脾、巴戟天、锁阳和 党参的重量比为 1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10: 1-10:1-10:1-10:1-10: 1-10: 1-10〇
7. 根据权利要求4所述的治疗男性不育组合药物，其特征在于：所述的枸杞子、菟丝 子、覆盆子、五味子、车前子、山萸肉、首乌、黄芪、肉苁蓉、生甘草、淫羊藿、熟地黄和西洋参 的重量比为 1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10。
8. 权要求1-7任一所述的治疗男性不育组合药物在制备治疗免疫性不育病症药物中 的应用。
9. 权要求1-7任一所述的治疗男性不育组合药物在制备治疗弱精子不育病症药物中 的应用。
【文档编号】A61K36/8945GK104435353SQ201410668005
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年11月14日 优先权日:2014年11月14日
【发明者】马静 申请人:马静