本发明涉及中药制剂领域，具体涉及一种中药提取物及其应用。
背景技术：
：球虫病(Coccidiosis)是畜禽养殖过程中一种高发病率和高死亡率的寄生虫病。全球每年由本病造成的经济损失高达50亿美元，我国在30亿元人民币以上，其中抗球虫药物费用每年为6亿元左右。牛、羊、猪、犬、兔、鸡、鸭、鹅、鸽和部分野生动物等均可感染发病，其中对鸡和兔的危害最为严重。规模化养兔场、养鸡场是球虫病的最易暴发场所,其中鸡发病率为50％-70％,死亡率20％-80％；兔发病率可达70％,死亡率80％-100％。目前，国内外对于球虫病的防治主要依靠化学药物，如地克珠利、妥曲珠利和常山酮等，它们对现代养禽业的健康发展贡献巨大。随着球虫耐药性的日趋严重、免疫预防尚未普遍应用和人们健康意识的不断加强，迫切需要研发安全、高效、环保的抗球虫新药。研究表明，从中药常山(DichroafebrifugaLour)中提取得到的常山碱对鸡球虫、鸭球虫、兔球虫、猪球虫和犬球虫均有良好的治疗效果。常山碱属于喹唑酮类化合物，包括常山碱甲和常山碱乙，过去人医主要用于抗疟疾和退热。常山碱作为一类中药组分，具有安全高效、低毒低残留和不易产生耐药性等特点，不仅可直接杀灭球虫，还可提高机体免疫力。研究表明，纯度为0.24％的常山碱按照0.05g/kg饲料添加给药对人工感染柔嫩艾美耳球虫病具有良好的治疗效果，抗球虫指数为169.01，与地克珠利对照无显著性差异(P﹥0.05)；常山碱可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖和一氧化氮的分泌(P﹤0.05)；常山碱粗提物毒性较低，临床用药安全可靠。常山碱作为一类新型抗球虫药物，可以最大限度挽回因畜禽死亡、饲料利用率下降以及药物残留所致禽产品废弃、出口受限等多方面的巨大经济损失，对于提高我国中兽药的自主研发水平和畜禽产品的国际竞争力意义重大。公开号为CN103272091A的中国专利申请，公开了一种治疗鸡球虫病的中药口服制剂及其制备方法，其复方组成为常山、槟榔、白头翁各为1-3份。公开号为CN102813850A的中国专利申请，公开了一种防治禽类球虫病的中药组合物及其制备方法，其复方组成为常山、苦参、野菊花、大蒜、白茅根等。公开号为CN103565987A的中国专利申请，公开了一种治疗乌鸡球虫病的中药散剂配方，其复方组成为常山、白头翁、柴胡、车前子等。公开号为CN102319309A的中国专利申请，公开了一种治疗鸡球虫病的中药制剂，其复方组成为常山、青蒿、柴胡、白头翁、钩藤等。公开号为CN101664437A的中国专利专利，公开了一种治疗球虫病的中药及其制备方法和用途，其复方组成为常山、绵马贯众、石榴皮、苦参、小蓟。综上，本领域现有抗球虫中药以含有常山的复方居多，剂型包括散剂和口服液。散剂虽然成本较低、生产工艺简单，直接组方粉碎添加到饲料即可；但由于禽类的生理结构和反刍动物不同，对纤维素不能很好消化(中药材细胞壁主要成分为纤维素)，致使药物中有效抗球虫成分不能被完全吸收利用，严重降低了抗球虫效果。口服液传统的制备方法是煎煮，但常山碱属于大分子仲胺生物碱，易溶于亲脂性溶剂，难溶于水，但易溶于酸水，故传统煎煮法常山碱不能被充分提取出来。因此，现有的抗球虫中药复方中常山碱含量均很低，严重降低了常山的抗球虫效果，对常山药材本身也是极大的浪费。技术实现要素：本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种通过超声提取或乙醇回流提取从常山中提取常山碱，所得浸膏应用低浓度乙醇溶解制得口服液，并应用于畜禽球虫病的防治的技术方案。为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种中药提取物，所述中药提取物的活性成分主要包括常山碱，是以中药常山为原料，经过超声提取或乙醇回流提取得到的。进一步的，上述的一种中药提取物，所述常山碱的超声提取方法，是将中药原料常山粉碎后，按照盐酸体积：常山质量为6:1加入摩尔浓度为0.2M的盐酸，以超声提取两次，超声频率40kHZ，每次2h，提取液过滤，调pH值至大于10，再以氯仿萃取两次，合并萃取液，减压浓缩并蒸干后，即可得中药提取物常山碱浸膏。进一步的，上述的一种中药提取物，所述常山碱的乙醇回流提取方法，是将中药原料常山粉碎后，按照乙醇溶液体积：常山质量为6：1加入体积分数为90％的乙醇溶液，回流提取两次，每次2h，提取液过滤，回收乙醇至无醇味，剩余提取液调pH值至大于10，再以氯仿萃取两次，合并萃取液，减压浓缩并蒸干后，即得中药提取物常山碱浸膏。本发明的第二个目的是提供了上述的中药提取物在制备防治畜禽球虫病的口服液中的应用。进一步的，上述的应用，所述防治畜禽球虫病的口服液的制备方法为：将上述的常山碱浸膏，按照乙醇溶液体积：常山碱浸膏质量为(50-5)：1加入质量百分浓度为5-30％的乙醇溶液溶解，调节pH值为4-7，过滤或离心，离心转速为2000-3000rpm，离心时间为10min，即可得到防治畜禽球虫病的常山碱口服液。本发明的有益效果为：本发明提供的中药提取物及其应用，是采用酸水处理+超声提取的组合方法或乙醇回流的提取方法，将常山中有效抗球虫成分常山碱被充分提取出来，大幅提高常山的抗球虫效果，同时对常山资源也是一种保护。另外，通过用本身具有防腐作用的低浓度乙醇溶解常山碱浸膏制得口服液，具有生产工艺简便、节约成本、保质期长、临床使用方便和便于工业化生产等优点。本发明与现有的抗球虫中药单体或复方相比具有很高的创新性。乙醇用作助溶剂制备中药口服液，未见文献报道很少，酒精有灭菌活性，可用于医用消毒，乙醇可延长口服液保质期。附图说明图1为邻氨基苯甲酸标准曲线。具体实施方式实施例1：将常山粉碎后，加入0.2M盐酸(体积质量比6:1)，超声提取2次，每次2h，提取液过滤，滤液调节pH值至11，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。加入10％乙醇(体积质量比30:1)，充分溶解后，调节pH值至4.5，过滤，即得常山碱口服液。常山碱含量测定：常山碱为混合物，利用其在碱水条件下完全水解成邻氨基苯甲酸，并遇乙二胺盐酸盐显色的原理，用紫外-可见分光光度计测定浸膏中常山碱含量。(李禄先，区嘉炜，谢淑敏.常山碱的比色测定法[J].化学学报，1965，31(6):482-483.)。表1显示为邻氨基苯甲酸的吸光度值。图1为邻氨基苯甲酸标准曲线。表2为各实施例中常山碱含量表。表1浓度(μg/mL)1.02.55.07.510.0吸光度0.0570.1270.2640.3650.516表2病例1：2013年7月宁夏中卫某肉鸭养殖场，总存栏500只，13日龄，疑似球虫病鸭125只。病鸭精神沉郁、食欲废绝、剧烈腹泻、便中带血；解剖其中5只病鸭发现，病鸭十二指肠严重肿胀，有大量血液性内容物，肠淋巴结肿大；粪便镜检发现大量球虫卵囊，确诊为鸭球虫病。和畜主沟通后，病鸭全部供试验用(治愈后返还畜主)，其余健康鸭地克珠利饮水3天进行预防。试验鸭随机分为4组，即常山碱组(1mL/kg饮水)、地克珠利组(西药对照，1mg/kg饮水)、鸡球虫散组(中药对照，300mg/kg饮水)和健康对照组，对照组按照说明书给药，5天为一个疗程，观察给药后各组试验鸭平均增重和存活率。结果表明，给药3天后，各组试鸭临床症状明显减轻，血便排出明显减少；给药5天后，除死亡鸭外，各组试验鸭临床症状消失、血便排出停止，饮食(水)量均恢复正常。表3显示为病例1抗球虫效果。表3实施例2：常山粉碎后，加入0.2M盐酸(体积质量比6:1)，超声提取2次，每次2h，提取液过滤，滤液调节pH值至11，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。浸膏中加入25％乙醇溶液(体积质量比50:1)，充分溶解后，调节pH值至5，过滤，即得常山碱口服液。病例2：2012年4月甘肃省白银市某蛋鸡养殖场，总存栏2500只，疑似球虫病鸡370只，25日龄。病鸡精神不振、羽毛蓬乱、食欲骤减、排出脓性血便；解剖发现，病鸡十二指肠、盲肠严重肿胀，遍布大量出血点，肠内容物呈血样；粪便镜检发现大量球虫卵囊，确诊为混合球虫感染。经过和畜主沟通，病鸡全部供试验用(治愈后返还畜主)，其余健康鸡使用地克珠利连续饮水3天进行预防。试验鸡分组和给药同“病例1”。结果表明，给药3天后，各组试验鸡临床症状明显减轻，血便排出明显减少；给药5天后，除死亡鸡外，各组试验鸡临床症状消失、血便排出停止，饮食(水)量均恢复正常。表4显示为病例2抗球虫效果。表4病例3：2013年6月甘肃榆中县某蛋鸡场，总存栏3500只，疑似球虫病鸡380只，大约40日龄。病鸡临床症状和病例解剖变化和“病例2”类似经临床症状观察、粪便镜检和解剖检查，确诊为混合球虫感染。和畜主沟通后，病鸡全部供试验用(治愈后返还畜主)，其余健康鸡应用地克珠利饮水3天进行预防。因畜主不太认同中药，故试验鸡分为3组，未设鸡球虫散组，其他同实施例1-鸭球虫病。结果表明，给药3天后，各组试验鸡临床症状明显减轻，血便排出明显减少或停止；给药5天后，除死亡鸡外，各组试验鸡临床症状消失，血便排出停止，饮食(水)均恢复正常。表5显示为病例3抗球虫效果。表5实施例3：常山粉碎后，加入90％乙醇(体积质量比6:1)，回流提取2次，每次2h，所得提取液过滤，回收乙醇至无醇味，滤液调节pH值至11，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。浸膏中加入15％乙醇溶液(体积质量比45:1)，充分溶解后，调节pH值至6，离心，即得常山碱口服液。病例4：2013年8月，宁夏吴忠某獭兔养殖场，总存栏300只，病兔86只(约4周龄)，经临床症状观察、粪便镜检和解剖检查，确诊为兔球虫病。课题组成员到达时，已有12只獭兔死亡。据畜主口述，病兔精神沉郁，食欲骤减，剧烈腹泻，后期出现神经症状，头后仰，四肢抽搐，尖叫，最后死亡。解剖发现病死兔肠胀气，肝脏肿大，十二指肠、空肠和回肠肠壁血管及黏膜充血。和畜主沟通后，其余病兔(74只)全部供试验用，健康兔地克珠利饮水3天进行预防。试验兔随机分成常山碱组(1mL/kg饲料)、地克珠利组(1mg/kg饲料)和健康对照组，连续给药7天。每组兔分单笼饲养。结果表明，给药3天后，各试验兔精神好转，腹泻减轻；给药5天后，各组试验兔临床症状明显减轻，腹泻停止；给药7天后，除死亡兔外，各组试验兔临床症状消失，精神状态、饮食(水)量均恢复正常。表6显示为病例4抗球虫效果。表6实施例4：常山粉碎后，加入90％乙醇(体积质量比6:1)，回流提取2次，每次2h，提取液过滤，回收乙醇至无醇味，滤液调节pH值至12，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。浸膏中加入8％乙醇溶液(体积质量比15:1)，充分溶解后，调节pH值至6.5，离心，即得常山碱口服液。病例5：2013年3月，甘肃定西某小型养猪场，因连续几天下雨，猪场中6窝49头7-8日龄哺乳仔猪发生不同程度的腹泻；有3窝仔猪病情特别严重，表现为水样腹泻，粪便呈黄色或灰色。畜主按照仔猪黄痢投药，连用2天，效果不明显。课题组成员到达时，已有2只死亡，解剖发现肠内容物呈褐色，带恶臭味，有纤维素性的薄膜和黏膜碎片，小肠有出血性的炎症，肠系膜淋巴结肿大。经临床症状观察、粪便镜检和解剖检查确诊为球虫病。经畜主同意，剩余47只病猪全部用于试验。试验猪分球痢净组(球痢净30g溶解在150mL温开水中)和常山碱组(原液加5倍温开水)，每头灌服5-10mL，2-3次/天。结果表明，连续给药2天后，大部分仔猪腹泻停止或明显减轻；给药5天后，仔猪临床症状消除，精神状态和吃奶恢复正常。治疗期间球痢净组有2头仔猪死亡。表7显示为病例5常山碱口服液的抗球虫效果。表7组别药物试验猪数(只)治愈数(只)治愈率(％)第1组常山碱1010100第2组球痢净373594.6病例6：2014年4月，甘肃皋兰县某散养户，有2窝16头10-12日龄哺乳仔猪，该养猪户采用地面散养，仔猪于7-10日龄发病。陆续出现被毛粗乱、精神不振、食欲减退或废绝、腹泻、粪便恶臭等症状。当地兽医初步诊断为猪球虫病。为了进一步确诊，我们每窝带回1头猪的肠内容物和3头猪的新鲜粪便，实验室镜检发现大量卵囊存在，确诊为猪球虫病。经畜主同意，16头仔猪全部用于试验，试验猪分球痢净组(球痢净30g溶解在150mL温开水中)和常山碱组(原液加5倍温开水)，每头灌服5-10mL，2-3次/天。结果表明，连续给药2天后，大部分仔猪腹泻停止或明显减轻；给药4天后，仔猪临床症状基本消除，精神状态和吃奶恢复正常。表8显示为病例6抗球虫效果。表8组别药物试验猪数(只)治愈数(只)治愈率(％)第1组常山碱88100第2组球痢净88100实施例5：常山粉碎后，加入0.2M盐酸(体积质量比6:1)，超声提取2次，每次2h，提取液过滤，滤液调节pH值至11，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。加入18％乙醇溶液(体积质量比45:1)，充分溶解后，调节pH值至5.5，离心，即得常山碱口服液。病例7：本实验调查了2012.10-2014.03甘肃农业大学下属动物医院接诊的8例犬球虫病，包括吉娃娃、腊肠、京巴、贵宾等犬种。病犬一般表现为腹泻、粪稀薄、红色黏性、消瘦贫血衰弱，使用止泻、止血药疗效不好。实验室镜检发现，粪便中存在大量球虫卵囊，确证为犬球虫病。试验犬分2组，百球清组(主要成分是甲苯三嗪酮)和常山碱组，百球清，25mg/kg体重，口服，连用3天；常山碱按照0.5mL/kg体重灌服，1-2次/天；同时结合补液、止血等辅助治疗。结果表明，连续给药4天后，病犬腹泻停止，饮食(水)恢复正常，建议病犬可以出院，让畜主在家多观察几天，提高犬的食物营养，后续畜主反应恢复良好。表9显示为病例7抗球虫效果。表9组别药物试验犬数(只)治愈数(只)治愈率(％)第1组常山碱33100第2组百球清55100实施例6：常山粉碎后，加入90％乙醇(体积质量比6:1)，回流提取2次，每次2h，提取液过滤，回收乙醇至无醇味，滤液调节pH值至12，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱口服液。浸膏中加入12％乙醇溶液(体积质量比5:1)，充分溶解后，调节pH值至4，过滤，即得常山碱口服液。实施例7：常山粉碎后，加入90％乙醇(体积质量比6:1)，回流提取2次，每次2h，提取液过滤，回收乙醇至无醇味，滤液调节pH值至12，氯仿萃取3次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。浸膏中加入15％乙醇溶液(体积质量比30:1)，充分溶解后，调节pH值至5，过滤，即得常山碱口服液。实施例8：常山粉碎后，加入0.2M盐酸溶液(体积质量比6:1)，超声提取2次，每次2h，提取液过滤，滤液调节pH值至11，氯仿萃取2次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，即得常山碱浸膏。加入10％乙醇溶液(体积质量比35:1)，充分溶解后，调节pH值至6.5，离心，即得常山碱口服液。最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。图1当前第1页1 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