生脉复方提取物及在制备改善记忆药品或保健品中的应用的制作方法

本发明涉及一种生脉复方提取物的制备方法及其用途，具体涉及该生脉复方提取物在制备改善记忆药品或保健品中的应用，属于生物医药领域。

技术背景

所谓记忆，就是人们对经验的识记、保持和应用过程，是对信息的选择、编码、储存和提取过程，记忆联结着人的心理活动的过去和现在，是人们学习、工作和生活的基本机能。科学研究发现，一方面人类的记忆随着年龄的增长而逐渐下降，另一方面，一些青少年在进行记忆时头脑中有数以万计的神经细胞在不停的进行着繁重的运算活动，需要大量的营养与能量的供应。如果不能保证其需求也会造成记忆力迅速下降，这些都属于生理性记忆减退现象而非病理性记忆减退。生理性记忆障碍可严重影响人的生活质量，急需有效的改善记忆的药品或保健品，但无奈的是这方面的产品还很少。因此，开发有效的适应于改善生理性记忆障碍的药品或保健品非常必要。

中药的多靶点效应在改善记忆方面具有显著的优势。本发明使用的生脉复方为重量比为3:2:1的人参、麦冬、五味子，本发明在对生脉复方进行醇提后，其醇提物不仅能改善东莨菪碱所致的记忆障碍，而且能显著改善正常昆明小鼠的记忆功能，本发明的生脉复方提取物可在制备改善记忆药物及保健品中应用。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种生脉复方提取物，该生脉复方提取物不仅能改善东莨菪碱所致的记忆障碍，还能显著改善正常昆明小鼠的记忆功能。

本发明的另一个目的是提供所述生脉复方提取物的制备方法。

本发明的主要目的是提供所述生脉复方提取物的新用途，即在制备改善记忆的药品或保健品中的应用。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种生脉复方提取物，所述生脉复方提取物原料药为人参、麦冬、五味子，人参、麦冬、五味子的重量比为3:2:1。

其中，所述的生脉复方提取物是无水乙醇提取物。

本发明还提供了一种制备上述生脉复方提取物的制备方法，所述生脉复方提取物的制备方法如下：用无水乙醇浸泡人参，麦冬，五味子，加热回流，过滤，减压浓缩后得浸膏，充分挥干乙醇，干燥之后即得生脉复方提取物。

其中，无水乙醇浸泡的时间是0.5h。

其中，加热回流两次，每次的时间为2.5h。

另外，本发明还提供了上述的生脉复方提取物在制备改善记忆的药品或保健品中的应用。

其中，所述的药品或保健品不仅能改善东莨菪碱所致的记忆，还能显著改善正常昆明小鼠的记忆功能，适用于制备改善正常人记忆的药品或保健品。

其中，在应用中所述生脉复方提取物的制备方法如下：用无水乙醇浸泡人参，麦冬，五味子，加热回流，过滤，减压浓缩后得浸膏，充分挥干乙醇，干燥之后即得生脉复方提取物。

其中，无水乙醇浸泡的时间是0.5h。

其中，加热回流两次，每次的时间为2.5h。

本发明的有益效果为：

1.本发明使用人参、麦冬、五味子的重量比为3:2:1，在对生脉复方进行醇提后，该生脉复方提取物能有效改善记忆。

2.以往改善记忆的药物大多仅能改善小鼠东莨菪碱所致的记忆障碍，而不能改善正常小鼠的记忆，比如脑尔康，而本发明公开的生脉复方提取物不仅能改善东莨菪碱所致的记忆障碍，而且能显著改善正常昆明小鼠的记忆功能，可在制备改善记忆的药品或保健品中应用。

附图说明

图1、2：生脉复方提取物灌胃小鼠的跳台实验。图1中横坐标是各组别，纵坐标是小鼠跳下平台的潜伏期。图2中横坐标是各组别，纵坐标是小鼠跳下平台的错误次数。

图3、4：生脉复方提取物灌胃小鼠的避暗实验。图3中横坐标是各实验的组别，纵坐标是各组小鼠进入暗箱的潜伏期。图4是各组别，纵坐标时候各组小鼠进入暗箱的错误次数。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步详细描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于所述实施例。

实施例一生脉复方提取物的制备

材料：人参、麦冬、五味子购买于甘肃省兰州市惠仁堂药业连锁有限责任公司。

生脉复方提取物原料药包括人参、麦冬、五味子，人参、麦冬、五味子的重量比为3:2:1。

称取人参120g、麦冬80g、五味子40g，用2400ml无水乙醇浸泡0.5h，加热回流两次，每次回流2.5h，过滤，减压浓缩得到生脉复方浸膏。充分挥干乙醇，干燥之后即得生脉复方提取物。

实施例二生脉复方提取物改善正常小鼠记忆的跳台实验

1、实验药品与试剂

生脉复方提取物(SM)的配制：按照实施例一所述的制备方法制备得到生脉复方提取物，称量300mg的生脉复方提取物溶于20ml蒸馏水中，制备成合适的浓度生脉复方提取物(SM)，浓度为15mg/ml。

阳性药物(P)的配制：称取奥拉西坦胶囊内容物150mg溶于20ml蒸馏水中，配制成15mg/ml的溶液。

2、实验动物

雌性清洁级昆明小鼠，购自兰州大学GLP实验动物中心，体重20.0±2.0g；其中从70只小鼠中筛选出50只动物用于跳台实验。

3、主要仪器：电子天平(0.0001g)、YLS-3TB跳台仪(成都泰盟科技有限公司)。

4、实施步骤：

(1)昆明小鼠的饲养

将体重基本一致的健康成年雌性小鼠饲养在温度在18～22℃，湿度50％～60％。同时给予12h日照和12h夜照。

(2)实验动物的筛选

实验动物适应实验室环境3d后，用跳台仪进行跳台筛选。先将小鼠进行随机分组，分组后用酚红进行标记并称量其体重。将各组每只小鼠放在跳台暗箱中适应3分钟后接通电源开始测试，跳台仪自动记录各小鼠跳下平台的次数和跳下平台的时间。每只小鼠测试5分钟。

跳台仪自动记录每只小鼠跳下平台的错误次数和跳下平台的时间，第一次跳下平台的时间记为其潜伏期，并记录错误小鼠的只数和错误次数，通过跳台实验筛选出实验智力和体力基本一致的小鼠作为生脉复方提取物功效实验的模型小鼠。

(3)生脉复方提取物改善正常小鼠记忆的作用

跳台实验筛选出智力和体力基本一致的小鼠后，将小鼠进行分组，平均分成5组，使得每组的小鼠智力基本一致。分组后的小鼠每天20:00-21:00进行灌胃，每只小鼠灌胃0.2ml以上各组药液与蒸馏水。共灌胃30天。30天后进行跳台测试，先将小鼠进行随机分组，分组后用酚红进行标记并称量其体重。将各组每只小鼠放在跳台暗箱中适应3分钟后接通电源开始测试，跳台仪自动记录各小鼠跳下平台的次数和跳下平台的时间。每只小鼠测试5分钟。

跳台仪自动记录每只小鼠跳下平台的错误次数和跳下平台的时间，第一次跳下平台的时间记为其潜伏期，并记录错误小鼠的只数和错误次数。

图1中横坐标表示药物处理组别，纵坐标表示小鼠跳下平台的潜伏期，纵坐标数值越大，表示小鼠的记忆越好。其中，###表示P<0.001，##表示P<0.01，#表示P<0.05。

从图1中可知，生脉复方提取物(SM)及阳性药组(P)均有改善记忆的功效。

图2的横坐标表示药物处理组，纵坐标表示小鼠跳下平台的错误次数，纵坐标数值越小，表示小鼠的记忆越好。其中，###表示P<0.001，##表示P<0.01，#表示P<0.05。

从图2中可知，生脉复方提取物及阳性药组(P)均有改善记忆的功效。

综上所述，生脉复方提取物(SM)能够显著地改善小鼠的记忆。实验结果呈阳性。

因此，本发明提供生脉复方提取物具有改善小鼠记忆的潜力，可作为一种改善记忆的药物或保健品使用。

实施例三生脉复方提取物改善正常小鼠记忆的避暗实验

1、实验药品与试剂

同实施例二所示方法配制各组溶液，图中，C为空白对照组；P为阳性药奥拉西坦组。

2、实验动物

雌性清洁级昆明小鼠，购自兰州大学GLP实验动物中心，体重20.0±2.0g；其中从120只小鼠中筛选出75只动物用于水迷宫实验

3、主要仪器：

电子天平(0.0001g)、YLS-17避暗穿梭仪(成都泰盟科技有限公司)。

4、实施步骤

(1)昆明小鼠的饲养

将体重基本一致的健康成年雌性小鼠饲养在温度在18～22℃，湿度50％～60％。同时给予12h日照和12h夜照。

(2)实验动物的筛选

实验动物适应实验室环境3d后，用避暗穿梭仪进行智力筛选。先将小鼠进行随机分组，分组后用酚红进行标记并称量其体重。将各组小鼠分别适应避暗环境3分钟后进行为期1天的避暗筛选实验，通过避暗实验选出智力和体力基本一致的小鼠作为评估生脉复方提取物功效的模型小鼠。

避暗仪自动记录各组小鼠进入暗箱的潜伏期及错误次数。

(3)生脉复方改善小鼠记忆的作用

通过避暗实验选出智力和体力基本一致的小鼠后，将小鼠进行分组，平均分成5组，使得每组的小鼠智力基本一致。分组后的小鼠每天20:00-21:00进行灌胃，每只小鼠灌胃0.2ml的各组药液与蒸馏水，共灌胃30天。30天后用避暗穿梭仪进行智力测试。先将小鼠用苦味酸进行标记并称量其体重。将各组小鼠分别适应避暗环境3分钟后进行为期1天的避暗测试实验，第二天将各组小鼠放进避暗箱中的明处，实验小鼠进入暗箱避暗仪自动记录各组小鼠进入暗箱的潜伏期和进入暗箱的次数，此为记录指标。

图3中横坐标表示药物处理组别，纵坐标表示小鼠进入暗箱的潜伏期，纵坐标数值越大，表示小鼠的记忆越好。其中，###表示P<0.001，##表示P<0.01，#表示P<0.05。

从图3中可知，生脉复方提取物(SM)及阳性药组(P)均有改善记忆的功效。

图4的横坐标表示药物处理组，纵坐标表示小鼠进入暗箱的错误次数，纵坐标数值越小，表示小鼠的记忆越好。其中，###表示P<0.001，##表示P<0.01，#表示P<0.05。

从图4中可知，生脉提取物(SM)及阳性药组(P)均有改善记忆的功效。

实验结果表明，生脉复方提取物(SM)与阳性药组(P)同空白对照组(C)相比能显著改善小鼠的记忆，实验结果呈阳性。

综上所述，本发明提供生脉复方提取物具有改善小鼠记忆的潜力，可作为一种改善记忆的药品或保健品使用。

实施例四改善正常小鼠记忆的生脉复方提取物标志性成分检测

本实施例测定了生脉复方提取物中总皂苷和总黄酮的含量。总皂苷含量的测定方法参照《中国药典》2010版一部中人参总皂苷的含量测定方法；总黄酮含量的测定方法参照《中国药典》2010版一部中山楂叶提取物中总黄酮的含量测定方法。

结果表明，改善正常小鼠记忆的生脉复方提取物中总皂苷的含量为3.09±0.100(g/100g)，总黄酮的含量为17.7±1.19(g/100g)。