病毒性皮肤病的治疗的制作方法

本发明涉及某些病毒性皮肤病的治疗，特别是用于单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和俗称为带状疱疹或水痘-带状疱疹病毒(VZV)的带状疱疹的治疗。

背景技术：

病毒性皮肤病特别包括由疱疹病毒(通常俗称为疱疹)引起的疾病和/或感染。疱疹病毒广泛存在于脊椎动物中，特别是哺乳动物中，尤其是在人、马、猪、牛、山羊、绵羊、猫和狗中。

人类致病性疱疹病毒(HHV)根据α、β和γ-疱疹病毒(HHV-1到HHV-8)进行区分，其中，α和γ病毒也属于能够感染例如马(马疱疹病毒)、牛(牛疱疹病毒)、猪(猪疱疹病毒)、猫(猫疱疹病毒)、狗(犬疱疹病毒)和鸡(鸡疱疹病毒1)等动物的病毒。

在人类致病性疱疹病毒中，那些感染人类的病毒，尤其是α-疱疹病毒，是非常重要的。α-疱疹病毒包括单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)和水痘带状疱疹病毒(VZV)。

由单纯疱疹病毒HSV-1和HSV-2引起的皮肤疾病包括例如唇疱疹和鼻疱疹(二者均主要由HSV-1引起)，疱疹性角膜结膜炎、疱疹性口腔炎、面疱疹、口腔疱疹、生殖器疱疹、肛周疱疹、臀部疱疹。唇疱疹也称为热病疱疹或唇疱疹。水痘带状疱疹病毒(VZV)引起如水痘和带状疱疹。

病毒学家估计全球人口的80％已经具有潜伏的HSV-1感染和30％具有潜伏的HSV-2感染。HSV-1和HSV-2彼此密切相关且具有高百分比的相同核苷酸序列。虽然HSV-1主要感染口腔和面部区域，HSV-2主要发生在生殖器部位。

α-疱疹病毒通常首先感染上皮细胞，例如皮肤细胞、粘液细胞和粘膜细胞，随后病毒在宿主细胞内显著复制且受感染宿主细胞死亡。

例如，HSV-1将在面部和口部的皮肤细胞和/或粘膜细胞扩散，通常引起局部损害，即以囊泡的形式。很短的时间之后，抗体在囊泡内中和病毒，但病毒在体液免疫应答发生之前也可通过受感染宿主细胞的裂解而释放。由此释放的病毒通过在口部附着在神经末梢上的受体而感染某些神经细胞(神经元)，这会通向面部神经(三叉神经)的神经节点。病毒DNA穿入轴突，进入神经细胞的细胞质并最终进入细胞核，所述病毒DNA并入神经细胞的基因组，从而导致仅少数病毒基因表达的延迟(溶原性周期)。各种外部刺激可导致病毒的重新激活，即，从延迟和/或溶源性周期到最终导致神经细胞破坏(裂解)的裂解周期的过渡期。所述刺激包括例如免疫抑制、应力、激素波动、身体或情绪压力、发热(这也是为什么它们被称为热病疱疹的原因)、紫外线辐射、组织损伤和在许多情况下的免疫缺陷。HSV-1发生的这种激活被认为依赖于遗传和环境因素，且年龄和激素改变可以发挥作用。作为激活的一部分发生的病毒子代首先由轴突传送到原始皮肤感染的位点和/或区域，它们再次通过在皮肤细胞和/或粘膜细胞中传染和复制来建立囊泡或水泡(热病疱疹)。即使这些病毒再次被免疫系统中和，但通过免疫系统来完全免疫HSV-1是不可能的，是因为其中的病毒DNA依旧整合到基因组(延迟)的其他神经细胞不断地被感染。

疱疹病毒性皮肤病通常通过使用抗病毒活性成分来治疗，该抗病毒活性成分具体干预病毒的复制，这将在下面更详细地讨论。

在抗病毒活性成分的发展以及病毒性皮肤病的预防和/或治疗方面的重要通用方法是干预病毒复制周期和抑制宿主细胞的病毒感染或宿主细胞中病毒核酸的复制，例如通过抑制病毒核酸编码病毒蛋白质的表达。

近几十年来，这些抗病毒活性成分，所谓的病毒抑制剂已经开发出来。许多病毒抑制剂例如抑制DNA聚合酶、逆转录酶或蛋白酶，从而抑制病毒复制和/或将合成的长病毒蛋白质处理成较小蛋白片段。这些治疗方法的实施例可在本文找到，尤其是HIV感染的治疗中。然而，全身和局部施用的病毒抑制剂在治疗由疱疹病毒HSV-1和HSV-2引起的病毒性皮肤病的领域中也是已知的。实例包括活性成分阿昔洛韦、伐昔洛韦、膦甲酸和更昔洛韦。

通常两种方法对于用病毒抑制剂预防和/或治疗病毒性皮肤病是已知的：(1)全身给药：通过全身施用病毒抑制剂，实现了存在于宿主细胞中的病毒激活显著减少，因为活性成分抑制了病毒核酸在细胞核中的复制或病毒颗粒的组装，而不能在宿主细胞细胞质中形成完整病毒；(2)局部给药：通过在由病毒引起的初始感染区域局部给药病毒抑制剂，例如在HSV-1感染的情况下引起的热病疱疹的病毒复制的其他路径可在激活早期阻止，这可能导致热病疱疹更快消肿。

这两种方法对于施用病毒抑制剂都有一些重要的缺点：在全身给药中，用于有效治疗所需的剂量相对较高，且与对接受治疗生物体的严重副作用相关，例如非特异性的免疫应答和自身免疫应答。在阿昔洛维的情况下，大量的副作用可从文献中得知。因此，不建议长期治疗和重复治疗，患者也不期望那样。在局部给药中，活性成分(病毒抑制剂)的剂量可以在病毒感染区域内每单位时间释放并生物利用，例如，热病疱疹很低。这种病毒抑制剂低的生物利用度对有效局部治疗是重要障碍。例如，在水溶解度很低的阿昔洛韦的情况下，生物利用度低的原因是活性成分经皮传输很差。对病毒抑制剂作为前药概念用于改善供应的病毒抑制剂的活性成分的各种化学修饰在此现象中并没有引起任何改善。

现有技术的上述讨论基本衍生自美国专利8,609,147，其提出使用氧化氘，通过局部使用氧化氘到患有疱疹病毒疾病的患者皮肤，用于治疗疱疹病毒皮肤疾病。

技术实现要素：

本发明提供了用于治疗疱疹病毒皮肤病的替代和改进方法。更具体地，我已经发现蒲公英嫩叶、叶和根的水和水/醇提取物出乎意料地可以用于治疗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和带状疱疹(VZV)的局部治疗。

更具体地，我已经发现蒲公英的水、水/醇和天然植物油提取物在局部应用时，出乎意料地缓解了单纯疱疹和带状疱疹。

附图说明

本发明进一步的特征和优点可根据以下详细说明结合附图得知，其中：

图1-3是已知核苷类似物的MS/MS质谱；

图4是核苷标准物和蒲公英(T.mongolicum)提取物中发现的核苷的LC/MS/MS分析；

图5-7是比较已知核苷和蒲公英提取物中发现的那些新型核苷类似物的LC/MS/MS分析。提出的新型核苷结构由红色圆圈标出。

图8是本发明中使用的整体识别过程流程图。

具体实施方式

本文所用的“醇”是指低级醇，优选C₁到C₄的醇。天然植物油是指亚麻油，其是优选的，或另一种市售的油，例如杏仁油、椰子油、荷荷芭油、柠檬油、橄榄油、芝麻籽油及葵花籽油，这些作为实施例给出。

制备和萃取方案干蒲公英(原产国，蒙古)被切碎并在蒸馏水或甲醇中通过煮沸提取(50克蒲公英放入1250毫升水或甲醇)。去离子水和醇提取物通过1：1，1：2，1：5，1：10不同的稀释范围与病毒接触30分钟，对HSV-1进行测试，然后吸出提取物。然后将该病毒吸入MRC-5细胞管，所述管用于观察细胞病变效应。浓度1：1和1：2的蒲公英提取物防止了病毒扩散。

在带状疱疹的情况下，仅在去离子水中以类似的方式制备植物。诊断为带状疱疹的个人使毛巾浸满液体蒲公英提取物并用毛巾将材料施加到自己的身体每次20分钟，每两个小时一次或根据需要而定。他们需要这样做一天或两天。两天之内带状疱疹都消失不见。

提取物按照图8所列的通用方法在LC/MS和UV仪器上去除并分级。用LC/MS/MS分析的去离子水提取物随后通过不同的稀释(与上述相同的稀释)与病毒接触30分钟，对HSV-1进行测试，然后将溶液吸入含MRC-5细胞的测试管。所述管用于观察细胞病变效应(CPE)。

类似的结果可见于不同批次的蒙古蒲公英和不同提取溶液，包括油，验证了结果的可重复性。虽然不希望受理论限制，但应该确信的是，蒲公英提取物所含某些核苷酸可能更有助于观察到的效果。将这些化合物分离，且其提出的结构在图5-7中识别。尽管如此，提取物的其他组分也可能发挥作用。