一种从新鲜核桃青皮中制备核桃青皮多酚的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从新鲜核桃青皮中制备核桃青皮多酚的方法，属核桃青皮多酚的 制备技术领域。
【背景技术】
[0002]核桃青皮(walnut green husk)又名胡桃青龙，是核桃外部一层厚厚的绿色外果 皮。核桃青皮味辛苦，性涩平、微寒，具有清热解毒、祛风疗癣、止痛止痢功效，现代药理研究 表明核桃青皮具有抗肿瘤、镇痛、抗菌消炎等活性。核桃青皮富含多酚，多酚具有抗氧化、抗 辐射、抗病毒、降脂、抑菌、延缓衰老、提高机体免疫能力、抑制高脂血症总胆固醇(TC)、甘油 三酯(TG)升高、抑制肝脂质过氧化、提高超氧化物歧化酶(SOD)活力、减少自由基生成、预防 和治疗高脂血症、抑制心血管疾病等作用。
[0003] 现报道的核桃青皮多酚提取纯化方法有：
[0004] 1、以干燥粉碎的核桃青皮粉为原料经乙醇水提、有机溶剂萃取核桃青皮总单宁的 方法（ZL2009100700385);
[0005] 2、以核桃青皮粉碎后用加水拌合超声波破壁提取，固液分离，分子超滤膜分级分 离纯化，然后纳滤膜浓缩，减压外循环浓缩，微波干燥，获得核桃青皮单宁酸的方法 (ZL2011101155114)；
[0006] 3、一种核桃青皮晾干粉碎，用果胶酶和纤维素酶水溶液酶解、酶解液明胶沉淀、沉 淀物乙酸乙酯萃取、萃取液氧化铝层析分离获取核桃鞣质的方法(CN2013102461953);
[0007] 4、一种亚临界水提取核桃青皮粉色素多酚的方法(CN2015106713562);
[0008] 5、一种超声水提取核桃青皮粉多酚的方法(CN2014103330145);
[0009] 6、朱霞，刘育聪，吴振琳，郭丽娟，罗游，李焕荣.响应面法优化超声波提取核桃青 皮多酚的工艺研究[J].食品科，2014,39(11):207~211;
[0010] 7、乙醇提取的核桃青皮多酚浸膏的大孔吸附树脂分离纯化核桃青皮总多酚方法 【李琼，陈恺，陈燕勤，李焕荣.大孔吸附树脂分离纯化核桃青皮总多酚[J].食品与机械， 2015,31(1):175~180】。
[0011]上述方法均采用干燥粉碎的核桃青皮粉，用水提或乙醇或甲醇水提取，然后再进 行分离纯化;存在新鲜核桃青皮需先干燥，需要消耗热量、自然干燥时间长、且核桃收获季 节气候极不利于自然干燥，提取纯化需要大量有机溶剂、干燥及提取温度较高、有效成分易 被破坏的问题。
[0012]我国核桃种植面积和产量均居世界第一，云南又居全国之首，其种植面积超过 2400万亩，核桃采收期间，大量的核桃青皮废弃于田间、地头或沟边，不仅造成环境污染和 资源浪费，还会产生化感现象、干扰其它植物的生长繁殖，加强核桃青皮资源的开发利用研 究，对核桃产业的健康发展具有重要意义。
【发明内容】
[0013] 本发明的目的在于克服现有从核桃青皮中制备核桃青皮多酚方法中的不足，而提 供一种从新鲜核桃青皮制备青皮多酚的方法。
[0014] 本发明的一种从新鲜核桃青皮中制备核桃青皮多酚的方法，不需要对新鲜核桃青 皮进行干燥、粉碎和提取，具体包括以下步骤：
[0015] a)剥取新鲜核桃青皮，用榨汁机榨汁；
[0016] b)将前述汁液于3000~4500转/分钟，离心10~20分钟，之后分离上层液体和下面 残渣；
[0017] C)将步骤b得到的上层液体的pH值调至3~4,混匀；
[0018] d)将步骤C得到的溶液以上样液多酚浓度2-3mg/mL，上样液pH3~4,上样体积为 1.6BV，上样流速为2BV/h加入到其内装有1000-2000克AB-8型树脂的层析柱中；
[0019] e)在步骤d中的层析柱中加入水，用水洗涤至从层析柱下方流出的液体无色；
[0020] f)以体积百分数为65 %~75 %的乙醇洗脱步骤e中的层析柱，洗脱流速1~2BV/h， 洗脱体积2. IOBV;
[0021] g)收集步骤f中从层析柱下方流出的洗脱液；
[0022] h)将步骤g得到的洗脱液真空浓缩至溶液的固溶物含量>52%~55% ;其中：真空 度0 · 065Pa~0 · 09Pa，温度55 cC ~60 cC ;
[0023] i)将步骤h中得到的浓缩液真空冷冻干燥得核桃青皮多酚;其真空冷冻干燥程序 如下： 千燥时段： 1、 2、 3s： 4、 5、 ：6s: 7s :8 :;
[0024] 千燥温度sC: -50, -50, -10 , -Ss 0、4、 10、 10? 干燥时间 h: 6、： 6、 6 12 9、4、 4、 3 ；
[0025]干燥系统真空度Pa:8个干燥时段均为< 9。
[0026]本发明方法所用的试剂及仪器均为是市场购买。
[0027]本发明的有益效果在于：
[0028] 1.制备温度低，不需将新鲜核桃青皮先干燥和粉碎，避免常规煎煮法和回流提取 法中需对新鲜核桃青皮干燥和粉碎，避免干燥中长时间加热对多酚的不良影响。
[0029] 2.不需采用乙醇或甲醇溶剂进行提取，鲜核桃青皮榨汁后，直接用AB-8型树脂分 离纯化核桃青皮汁，避免常规煎煮法和回流提取法中需用乙醇或甲醇提取，避免提取中长 时间加热对多酚的不良影响，避免消耗大量的有机溶剂。
[0030] 3.采用新鲜核桃青皮为原料，榨汁后和离心处理后，直接利用AB-8型树脂分离纯 化核桃青皮汁中的多酚，有效的减少了核桃青皮在加热干燥过程中与空气和热量长时间接 触而发生的氧化，快速分离纯化出其中多酚，使核桃青皮多酚纯度从9%提高到53%。
【具体实施方式】
[0031] 实施例所用的从新鲜核桃青皮中制备核桃青皮多酚的方法同
【发明内容】
部分所述。 实施例所用的试剂及仪器均为是市场购买。
[0032] 本发明的技术方案，通过如下实施方式予以进一步说明。
[0033] 实施例一：
[0034] 新鲜核桃剥取新鲜核桃青皮，新鲜核桃青皮用榨汁机榨汁，汁液于3000转/分钟， 离心20分钟，之后分离上层液体和下面残渣，上层液体的pH值调至3，混匀，以上样液多酚浓 度2mg/mL，上样体积1.6BV，上样流速2BV/h加入到其内装有1000克AB-8型树脂的层析柱中， 在层析柱中加入水，并用水洗涤至从层析柱下方流出的液体无色后，以体积分数为65%的 乙醇洗脱层析柱，洗脱流速lBV/h，洗脱体积2. IOBV，收集从层析柱下方流出的洗脱液，将该 洗脱液在真空度0. 〇65Pa、温度60°C时真空浓缩至溶液的固溶物含量52 %后，真空冷冻干燥 得核桃青皮多酸，其真空冷冻干燥程序如下： 干燥时段： 1、 .1' 3、 4、 5, :6、 ?:、 8 ：；：
[0035] 干燥温度 °C: -50、-50、 -10、-5、 0、4、10、10；； 干燥时间 h: 6、 6, 6, 12、 9、 4、 4, 3 ?：
[0036]干燥系统真空度Pa:8个干燥时段均为< 9。
[0037] 实施例二：
[0038] 新鲜核桃剥取新鲜核桃青皮，新鲜核桃青皮用榨汁机榨汁，汁液于4500转/分钟， 离心10分钟，之后分离上层液体和下面残渣，上层液体的pH值调至4,混匀，以上样液多酚浓 度3mg/mL，上样体积1.6BV，上样流速2BV/h加入到其内装有2000克AB-8型树脂的层析柱中， 在层析柱中加入水，并用水洗涤至从层析柱下方流出的液体无色后，以体积分数为70%的 乙醇洗脱层析柱，洗脱流速2BV/h，洗脱体积2. IOBV，收集从层析柱下方流出的洗脱液，将该 洗脱液在真空度0. 〇8Pa、温度58°C时真空浓缩至溶液的固溶物含量54%后，真空冷冻干燥 得核桃青皮多酸，其真空冷冻干燥程序如下： 干燥时段： 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8
[0039] 千燥温度°C: -50s -50, -1:0、-5、 0、4、 10, 10；： 干燥时间 k 6、 6、 6、 12、 9、 4、 4、 3 ；
[0040] 干燥系统真空度Pa:8个干燥时段均为< 9。
[0041] 实施例三：
[0042]新鲜核桃剥取新鲜核桃青皮，新鲜核桃青皮用榨汁机榨汁，汁液于4000转/分钟， 离心15分钟，之后分离上层液体和下面残渣，上层液体的pH值调至3.6，混匀，以上样液多酚 浓度2.5mg/mL，上样体积1.6BV，上样流速2BV/h加入到其内装有1500克AB-8型树脂的层析 柱中，在层析柱中加入水，并用水洗涤至从层析柱下方流出的液体无色后，以体积分数为 75%的乙醇洗脱层析柱，洗脱流速1~2BV/h，洗脱体积2.10BV，收集从层析柱下方流出的洗 脱液，将该洗脱液在真空度0. 〇9Pa，温度55 °C下真空浓缩至溶液的固溶物含量55 %后，真空 冷冻干燥得核桃青皮多酚，其真空冷冻干燥程序如下： 干燥时段： 1、 2、： 3、 4、 5> 6、 7、 8 ；
[0043] 干燥温度。C: -50、-50、 -1:0、-5、 0、4、 10、1? 千燥时间 h: 6 % 6、 6、： 12、 .9:、'4、： .4.、 3 *?
[0044] 干燥系统真空度Pa:8个干燥时段均为< 9。
【主权项】
1. 一种从鲜核桃青皮中制备核桃青皮多酚的方法，其特征在于该方法包括如下步骤： a) 剥取新鲜核桃青皮，用榨汁机榨汁； b) 将前述汁液于3000~4500转/分钟，离心10~20分钟，之后分离上层液体和下面残 渣； c) 将步骤b得到的上层液体的pH值调至3~4,混匀； d) 将步骤c得到的溶液以上样液多酚浓度2~3 m g / m L，上样液p Η 3~4，上样体积为 1.6BV，上样流速为2BV/h加入到其内装有1000~2000克ΑΒ-8型树脂的层析柱中； e) 在步骤d中的层析柱中加入水，用水洗涤至从层析柱下方流出的液体无色； f) 以体积百分数为65%~75%的乙醇洗脱步骤e中的层析柱，洗脱流速1~2BV/h，洗脱 体积2.10BV; g) 收集步骤f中从层析柱下方流出的洗脱液； h) 将步骤g得到的洗脱液真空浓缩至溶液的固溶物含量>52 %~55 % ;其中：真空度 0 · 065Pa~0 · 09Pa，温度55 Γ ~60 Γ ; i) 将步骤h中得到的浓缩液真空冷冻干燥得核桃青皮多酚;其真空冷冻干燥程序如下： 干燥时段： 1、 2、 3、 4、 5、6、7、 8； 干燥温度。C: -50、-50、-10、-5、0、4、10、10； 干燥时间 h: 6、 6、 6、 12、9、4、4、 3; 干燥系统真空度Pa: 8个干燥时段均为< 9。
【专利摘要】本发明涉及一种从新鲜核桃青皮中制备核桃青皮多酚的方法，属核桃青皮多酚制备技术领域。本发明方法的工艺流程是：新鲜核桃青皮榨汁，离心，固液分离，将液体pH值调至3～4后，以上样液多酚浓度2?3mg/mL，上样液pH3～4，上样体积1.6BV，上样流速2BV/h加入到其内装有AB?8型树脂的层析柱中，用水洗涤至从层析柱下方流出的液体无色后，以65～75％乙醇洗脱，洗脱流速1～2BV/h，洗脱体积2.10BV。收集65～75％乙醇洗脱液，真空浓缩，真空干燥得含量为53％的核桃青皮多酚。本发明方法与传统方法相比较，减少了核桃青皮干燥和用有机溶剂提取的步骤，缩短了青皮与空气的接触时间，减少了核桃青皮多酚的氧化，有效的保护多酚物质，显著地节约了热量和有机溶剂消耗量。
【IPC分类】A61K131/00, A61K36/52
【公开号】CN105708894
【申请号】CN201610107933
【发明人】赵声兰, 陈丹, 张旭, 赵庆宇婧, 曹丽娟
【申请人】云南中医学院