本发明属于医药领域，涉及制备治疗鼻窦炎的药物，具体涉及一种鼻腔洗液及其制备方法和应用。
背景技术：
：鼻窦炎是常见疾病，常见细菌包括肺炎链球菌、溶血性链球菌、葡萄球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌属、链球菌类、厌氧菌等，真菌感染也是致病因素。鼻窦炎全身表现为畏寒发热、周身不适、精神不振、食欲减退等。局部表现为鼻阻塞、脓涕、头痛和嗅觉下降。治疗包括抗生素控制感染，药物滴鼻收缩鼻腔，上颌窦穿刺冲洗术，激素治疗，中药，理疗，高渗盐水冲洗，手术等。鼻腔冲洗是鼻窦炎重要辅助治疗方法。例如，高渗盐水冲洗可以改善鼻黏膜纤毛清除率，临床试验结果显示高渗盐水在咳嗽、流涕、鼻后滴漏症状各个评价指标中均有明显效果。但高渗盐水只能改善症状，不能控制细菌和真菌感染。激素类鼻剂，如糠酸莫米松、布地奈德、丙酸氟替卡松鼻喷雾剂等，这类药物对过敏性鼻炎疗效较好，但对细菌、真菌感染是禁忌症，长期应用激素类滴鼻剂可能加重感染。中药滴鼻剂，如复方薄荷脑、苍夷、十三味辛夷滴鼻剂等，能改善临床症状，但对细菌、真菌感染治疗效果受限。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能有效抑制鼻窦细菌和/或真菌感染、无明显副作用的鼻腔洗液及其制备方法和应用。为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种鼻腔洗液，所述鼻腔洗液包括大蒜素和溶剂。上述的鼻腔洗液中，优选的，所述溶剂包括蒸馏水或高渗盐水；和/或，所述大蒜素与溶剂的质量体积比为0.02％～0.08％，单位为g/ml(也可以为100mg～400mg∶500ml)。上述的鼻腔洗液中，优选的，所述大蒜素与溶剂的质量体积比为0.02％～0.04％，单位为g/ml(也可以为100mg～200mg∶500ml)。上述的鼻腔洗液中，优选的，所述鼻腔洗液还包括亚硫酸氢钠和聚山梨酯-80。作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的鼻腔洗液的制备方法，包括以下步骤：将大蒜素加入初始溶剂中，加热后，加入亚硫酸氢钠溶液和聚山梨酯-80溶液，得到混合液，将混合液的ph值调至6.0～6.5，经过滤后，所得滤液先在60℃～80℃下进行一次保存，然后在0℃～4℃下进行二次保存，再过滤，将大蒜素用溶剂调至预设浓度，调ph值至6.0～6.5，得到鼻腔洗液。上述的鼻腔洗液的制备方法中，优选的，所述加热的温度为35℃～42℃；和/或，所述ph值采用盐酸调节；和/或，所述一次保存的时间为40min～60min；所述二次保存的时间为24h～48h。上述的鼻腔洗液的制备方法中，优选的，所述亚硫酸氢钠溶液∶聚山梨酯-80溶液∶初始溶剂的体积比＝1～1.2∶46～55∶100；所述亚硫酸氢钠溶液的质量浓度为8％～10％，所述聚山梨酯-80溶液的质量浓度为8％～10％。上述的鼻腔洗液的制备方法中，优选的，所述大蒜素以大蒜素提取物的形式加入所述初始溶剂中，所述大蒜素的提取方法包括以下步骤：将大蒜籽粉碎，然后于80kpa～101.325kpa压力、40℃～41℃的条件下进行酶解，得到大蒜泥；向大蒜泥中加入乙醇，室温下保持1h～2h，对所得大蒜-乙醇混合物进行离心和过滤，所得滤液采用减压蒸馏法除去乙醇，得到大蒜素提取物，大蒜素提取物通过定硫法测定大蒜素含量。上述的鼻腔洗液的制备方法中，优选的，所述大蒜籽的粉碎速度为1800r/min～2000r/min，粉碎时间为20s～30s；和/或，所述酶解的时间为0.5h～1h；和/或，所述乙醇的体积为大蒜泥体积的2倍～6倍；和/或，所述大蒜-乙醇混合物的离心速度为1800r/min～2000r/min，离心时间为2min～3min。作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的鼻腔洗液或上述的制备方法制得的鼻腔洗液在制备治疗鼻窦炎制品中的应用。本发明中，鼻腔洗液产品中的溶剂是指最终的溶剂，大蒜素与溶剂的质量体积比也是指大蒜素与最终溶剂的比值，即稀释后得到的终浓度。本发明的制备方法中，预设浓度是指产品要求的终浓度，优选大蒜素与溶剂的质量体积比为0.02％～0.08％，单位为g/ml。本发明提供了一种鼻腔洗液，能够治疗细菌和真菌混合感染鼻窦炎，同时安全方便应用。大蒜自古就被当作天然杀菌剂，有天然抗生素之称，它没有任何副作用，是人体循环及神经系统的天然强健剂。大蒜作为天然杀菌剂的机理在于鳞茎中含有大蒜素。大蒜素的分子式为c6h10s2o，分子量为162，结构如式(ⅰ)所示。大蒜素对多种致病菌如葡萄球菌、脑膜炎、肺炎双球菌、链球菌及白喉、痢疾、大肠杆菌、伤寒、副伤寒、百日咳、结核杆菌和霍乱弧菌等都有明显抑制杀灭作用。抗菌原理是大蒜素分子中的氧原子与细菌生长繁殖所必需的半胱氨酸分子中的巯基相结合而抑制了细菌的生长和繁殖。大蒜素对多种致病真菌包括白色念珠菌有抑制或杀灭作用。低浓度时主要抑制真菌生长，高浓度时可完全杀死真菌。抗真菌机制是通过对巯基的氧化使蛋白质灭活；对含巯基的化合物如胱氨酸、谷胱氨酸发生竞争性抑制；非竞争性地抑制真菌内酶的活性。临床上应用的大蒜素制品主要有大蒜素胶囊和大蒜素注射液两种。大蒜素胶囊为抗深部霉菌和细菌的口服抗菌药，通过口服给药治疗急慢性菌痢和肠炎、百日咳、隐球菌性脑膜炎、白色念珠菌菌血症、肺部和消化道的真菌感染等疾病；大蒜素注射液为抗深部霉菌和细菌的注射用抗菌药，通过静脉滴注给药，适用于深部真菌和细菌感染，可用于防治急慢性菌痢和肠炎、百日咳、隐球菌性脑膜炎、白色念珠菌菌血症、肺部和消化道的真菌感染、肺结核等，一般不推荐常规使用，通常在其它抗感染药无效或不能耐受时选用。个别病人在静脉滴注时有刺痛感觉，甚至出现全身灼热感、出汗等现象。外用的大蒜素制品少见，用于滴鼻的未见报道。与现有技术相比，本发明的优点在于：1、本发明的鼻腔洗液包括大蒜素，利用大蒜素对多种致病菌和真菌抑制杀灭作用，抑制鼻腔细菌和真菌感染。本发明首次利用大蒜素治疗鼻腔炎，外用，无需注射，可直达病灶，效果好，且无副作用。与其它洗鼻液比较，本发明的主要优势是能同时抑制鼻窦细菌和真菌混合感染，且没有明显副作用。2、本发明的鼻腔洗液可由蒸馏水配大蒜素组成，适用于各种急慢性鼻窦炎，也可由高渗盐水配大蒜素组成，适用于治疗分泌物多的鼻窦炎，可用于治疗慢性鼻窦炎引起的滴漏性咳嗽。3、本发明的鼻腔洗液通过选择合适的浓度，在人体承受范围内使抑菌效果更佳。过高浓度可导致强烈的不良反应，而浓度过低，抑菌效果大大减弱。4、本发明的制备方法简单，原料方便易得。亚硫酸氢钠和聚山梨酯-80分别可起到防腐和分散助溶的作用，ph值在6～6.5的范围可避免大蒜素降解同时不增加对人体粘膜的刺激，ph值大于7的环境大蒜素容易降解，高温保温有助于大蒜素分布均匀，而进一步低温保存有助于稳定溶液。具体实施方式以下结合具体优选的实施例对本发明作进一步描述，但并不因此而限制本发明的保护范围。以下实施例中所采用的材料和仪器均为市售。实施例1：本发明的鼻腔洗液中所用大蒜素可优选采用以下方法进行提取(实施方式1)，步骤如下：取大蒜籽1000克，先去皮洗净，用粉碎机以1800转/每分的速度粉碎30秒，然后于101.325kpa压力、40～41℃的条件下酶解0.5小时，得到大蒜泥，加入大蒜泥2倍体积的95％(体积分数)乙醇，室温下维持1小时后，将所得大蒜-乙醇混合物以1800转/每分的速度离心3分钟，双层滤纸过滤，滤液以减压蒸馏法回收乙醇，直至检测回收的乙醇不含大蒜素时为止，得到大蒜素提取物，采用定硫法测定大蒜素含量。以上提取过程中，相关检测方法如下：回收乙醇时的检测方法：取回收的乙醇2ml置于试管内，加入1滴5wt％的硫酸溶液，2滴0.5wt％的高锰酸钾溶液，摇动试管后溶液颜色立即消失则回收的乙醇含有大蒜素。定硫法：取大蒜素提取物5ml置于烧杯中，加入浓硝酸2ml，搅拌至黄色。室温下静置20分钟后，用蒸馏水洗入100ml容量瓶，摇匀，定容，量取80ml加0.1wt％甲基橙溶液5滴，以l0wt％氢氧化钠调至黄色，再用18wt％的盐酸调至红色，再加1ml18wt％的盐酸，砂浴上加热浓缩至50ml，于500瓦电炉上微沸，加5wt％氯化钡溶液10ml，摇匀，90℃水浴2小时，定量滤纸过滤，蒸馏水冲至无氯离子(洗下的液体以硝酸银溶液检测无沉淀)。将滤纸滤出的硫酸钡沉淀放入已知重量的坩埚中，于500瓦电炉上烘干并使滤纸碳化，移至2000瓦电炉上灼烧约30分钟至灰分变白，冷却称重。根据硫酸钡的重量按下式计算大蒜素的含量：大蒜素含量(‰)＝(233.39×a×162.26×2×v0)/(w×v×233.39)×1000‰。其中，a为硫酸钡质量(g)，w为大蒜素提取液的克重，v为用于检测的大蒜素提取液毫升数，v0为大蒜素提取液总体积毫升。减压蒸馏法：采用旋转蒸发仪，检查气密性后加入滤液，关闭安全瓶活塞，开启油泵，调节毛细管导入的空气流量为小串气泡冒出，压力计稳定后开始加热。蒸发仪转速75转/每秒，0.01mpa，50℃条件下，多尾接液管接受馏分即回收的乙醇。蒸馏完毕时除去热源，活塞平衡内外压力，关闭气泵。大蒜素还可以采用以下方法提取(实施方式2)：取大蒜籽1000克，先去皮洗净，用粉碎机以2000转/每分的速度粉碎20秒，然后于80kpa压力、40～41℃的条件下酶解1小时，得到大蒜泥，加入大蒜泥6倍体积的95％乙醇，室温下维持2小时后，将所得大蒜-乙醇混合物以2000转/每分的速度离心2分钟，双层滤纸过滤，滤液以减压蒸馏法回收乙醇，直至检测回收的乙醇不含大蒜素时为止，得到大蒜素提取液。实施例2：一种本发明的鼻腔洗液，主要由大蒜素和蒸馏水组成，大蒜素与蒸馏水(最终溶剂量)的质量体积比为0.02％g/ml。本实施例中，鼻腔洗液还包括亚硫酸氢钠和聚山梨酯-80，用以防腐和分散助溶，使鼻腔洗液保持稳定。本实施例的鼻腔洗液可用于各种急慢性鼻窦炎。一种上述本实施例的鼻腔洗液的制备方法，包括以下步骤：将大蒜素提取液20g加入500ml蒸馏水(初始溶剂)中，该大蒜素提取液优选实施例1中实施方式1制备的大蒜素提取液，加热至40℃后(微热)，加入l0wt％亚硫酸氢钠溶液5ml和10wt％聚山梨酯-80溶液230ml，二者溶剂均为蒸馏水，然后用10wt％盐酸调ph至6.0～6.5，经双层滤纸过滤后，放入80℃温箱中保存60分钟，再放入4℃冰箱48小时，双层滤纸滤过后，得到鼻腔洗液前体，用定硫法测得鼻腔洗液前体中大蒜素的含量，并用蒸馏水将其稀释为0.02％g/ml浓度(定浓度不定容)。测定鼻腔洗液前体的ph值，并用盐酸调ph至6.0，得到鼻腔洗液成品。经分装，蒸汽灭菌(可采用流通蒸汽灭菌器，待灭菌器内水加热至100℃后将分装产品放入，维持加热时间即可)30min，冷却，再次检查溶液透明度及ph值，装盒。本实施例制备的鼻腔洗液可应用于制备治疗鼻窦炎的制品。实施例3：一种本发明的鼻腔洗液，主要由大蒜素和高渗盐水组成，大蒜素与高渗盐水(最终溶剂量)的质量体积比为0.04％g/ml。本实施例中，鼻腔洗液还包括亚硫酸氢钠和聚山梨酯-80，用以防腐和分散助溶，使鼻腔洗液保持稳定。本实施例的鼻腔洗液适用于治疗分泌物多的鼻窦炎，可用于治疗慢性鼻窦炎引起的滴漏性咳嗽。一种上述本实施例的鼻腔洗液的制备方法，包括以下步骤：将大蒜素提取液20g加入500ml高渗盐水中，该大蒜素提取液优选实施例1制备的大蒜素提取液，加热至40℃后，加入l0wt％亚硫酸氢钠溶液5ml和10wt％聚山梨酯-80溶液230ml，然后用10wt％盐酸调ph至6.0～6.5，经双层滤纸过滤后，放入60℃温箱保存40分钟，再放入0℃冰箱24小时，双层滤纸滤过后，得到鼻腔洗液前体，用定硫法测得鼻腔洗液前体中大蒜素含量，高渗盐水稀释浓度为0.04％，单位为g/ml。测定鼻腔洗液前体的ph值并用盐酸调ph至6.5，得到鼻腔洗液成品。经分装，蒸汽灭菌30min，冷却，再次检查溶液透明度及ph值，装盒。本实施例制备的鼻腔洗液可应用于制备治疗鼻窦炎的制品。实施例4：本发明进行的体外实验证明，将实施例2和实施例3两种配方的鼻腔洗液加入细菌培养皿中，能明显抑制肺炎链球菌、溶血性链球菌、葡萄球菌、流感嗜血杆菌、和卡他莫拉菌、链球菌类、厌氧菌、金黄色葡萄球菌、假单胞菌和大肠杆菌。本发明进行的体外实验证明，将实施例2和实施例3两种配方的鼻腔洗液加入真菌培养皿中，能明显抑制念珠菌、曲霉菌、隐球菌和接合菌。以下是本发明进行的体外实验的例子，将两种配方鼻腔洗液加入细菌培养皿中，能明显抑制假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。实验方法：在ph6.5的条件下采用营养琼脂固体培养基与试验品10ml混合为原液，待固体培养基凝固备用，以加等量生理盐水组为对照。在各处理的培养基中分别加入浓度均为1×l05cfu/ml的大肠杆菌、假单胞菌、金黄色葡萄球菌菌液，3次重复。其中接种大肠杆菌的培养在37℃条件下24h；接种假单胞菌的培养在30℃条件下24h；接种金黄色葡萄球菌的培养在30℃条件下48h。用游标卡尺测定菌圈直径，单位mm；用目测法测定病原菌生长的速度，将病原菌生长速度分为5级，完全无生长者为“-”，菌生长迟缓且形成的菌落很小者为“+”，菌生长比较快且形成菌落较小者为“++”；菌生长快且形成菌落较大者为“+++”；对照病原菌生长迅速且形成菌落大者为“++++”。结果显示，两种鼻腔洗液对假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有显著抑制作用，实施例2为鼻腔洗液1，实施例3为鼻腔洗液2，如下表1所示。表1两种鼻腔洗液对假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的实验结果临床实验发现两种配方鼻腔洗液治疗鼻窦炎及鼻窦炎引起的滴漏性咳嗽(pnds)有明显疗效。实验方法：诊断为滴漏性咳嗽(pnds)的患者，近3月内未使用滴鼻剂治疗，有显著症状者。实验组分别使用本鼻腔洗液1、2，对照组使用生理盐水，每次5滴，每日3次，持续7日。由患者主观评估咳嗽情况是否有变化。结果显示，两种鼻腔洗液对滴漏性咳嗽有较为显著的治疗作用，如下表2所示。表2两种鼻腔洗液对滴漏性咳嗽的实验结果例数显效有效无效加重总有效率(％)鼻腔洗液15026193290.00鼻腔洗液25033141294.00对照组5051131332.00以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例。凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应该指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下的改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3