一种中药贞莲合剂及其制备方法与流程

本发明涉及动物保健和兽药技术领域，特别涉及一种中药贞莲合剂及其制备方法。

背景技术：

我国畜牧业的快速发展，给人们提供了丰富的肉蛋奶等畜产品，但与此同时，养殖业所造成的环境污染也与日俱增，抗生素的滥用、饲料添加剂的违规添加等，导致病原菌耐药性增强和动物免疫系统破坏，动物疾病越来越复杂、越来越难以控制；现有的养殖场普遍存在免疫失败、多种细菌混合感染、反复用药无效等顽固性问题，使畜禽动物长期处于亚健康及免疫抑制状态，其生产性能和生产效益低下，给养殖户带来极大损失。

亚健康是机体各系统生理功能低下所致，应着重从生物因素入手，重点关注是否与病毒细菌的感染、免疫抑制、内分泌失调等因素相关联。造成动物亚健康的根源是动物机体本身的抗逆性较弱和各种应激程度相对较强的结果，当应激程度减弱或机体抵抗力增强的时候，朝着健康的方向转化；如果应激程度加强，机体抵抗力下降，则朝着疾病的方向转化。

而传统的提升动物免疫力的方式是提高动物的营养水平、每日摄入的饲养搭配，当动物处于营养不良或低营养水平饲养状态下，许多动物抗应激能力差；还有一些有条件的饲养厂，会采用增加动物的运动量，来提升动物体质。

但是，现有技术中，由于单一饮食的营养摄入和运动量的增加，动物本身的免疫系统一般是处于正常平衡范围，抵抗力不会有大幅度的增加，使得处于正常免疫系统下的动物机体，不能对突发的疫病有所抵抗，因此，需要研发出通过日常摄入，就能大幅度增加动物免疫力的无残留无耐药性的中草药物是亟待解决的问题。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是提供一种中药贞莲合剂，与此相应的，本发明另一个要解决的技术问题是提供一种中药贞莲合剂的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：

一种中药贞莲合剂，用于增强动物免疫力，由以下重量份的组分组成：女贞子400～800份，墨旱莲400～800份，女贞子与墨旱莲的重量比为1:1；

采用的制备方法如下：

步骤1，将上述重量份数的女贞子和墨旱莲药材加6～10倍量的水煎煮提取2～3次，每次时间1～3小时；

步骤2，将步骤1中的提取液合并，过滤去除杂质沉淀，将滤液加热浓缩，得到相对密度为1.1～1.2g/mL(60℃)的膏状浓缩液；

步骤3，将步骤2中的浓缩液放冷后，边搅拌边加入乙醇使醇含量达到65％～70％，静置15～20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2～1.3g/mL(60℃)的膏状的精制液；

步骤4，将步骤3中的精制液放冷后，边搅拌边加入乙醇使醇含量达到75％～80％，静置15～20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2～1.3g/mL(60℃)的膏状的中药浓缩液。

作为进一步的技术方案，重量配比为女贞子500份，墨旱莲500份。

本发明要解决上述问题的制备方法，包括如下步骤：

步骤1，将上述重量份数的女贞子和墨旱莲药材加6～10倍量的水煎煮提取2～3次，每次时间1～3小时；

步骤2，将步骤1中的提取液合并，过滤去除杂质沉淀，将滤液加热浓缩，得到相对密度为1.1～1.2g/mL(60℃)的膏状浓缩液；

步骤3，将步骤2中的浓缩液放冷后，边搅拌边加入乙醇使醇含量达到65％～70％，静置15～20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2～1.3g/mL(60℃)的膏状的精制液；

步骤4，将步骤3中的精制液放冷后，边搅拌边加入乙醇使醇含量达到75％～80％，静置15～20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2～1.3g/mL(60℃)的膏状的中药浓缩液。

作为进一步的技术方案，还包括步骤6，将中药浓缩液，喷雾干燥，得到中药浸膏粉，压片制成片剂，或装入胶囊制成胶囊剂。

作为进一步的技术方案，步骤1中水煎煮提取的温度范围为80～100℃。

作为进一步的技术方案，步骤2中，提取液合并后过滤为趁热过滤或保温过滤。

作为进一步的技术方案，步骤3和步骤4中，乙醇的加入方式为缓慢逐滴加入，快速搅拌。

作为进一步的技术方案，步骤3和步骤4中，静置方式为密封冷藏静置。

作为进一步的技术方案，还包括步骤7，向步骤4中的中药浓缩液加入一种或多种食品学或药学上可接受的辅料，按常规工艺制成液体剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂。

本发明提供的贞莲合剂，采用女贞子400～800份，墨旱莲400～800份，女贞子与墨旱莲的重量比为1:1的配方制备成，安全可靠，无任何毒副作用，口感优良，价廉易得；对免疫器官，尤其是小白鼠的胸腺、脾脏都具有一定的保护作用，特别是对胸腺的保护作用明显，本发明提供的动物实验表明，本发明制备的贞莲合剂具有增强动物免疫力，改善机体的衰老体征，可用于预防和治疗衰老相关的动物疾病。

本发明提供的制备贞莲合剂的方法，采用水提醇沉技术，并以加水量、煎煮时间和煎煮次数为考察因素进行正交实验，优选出最佳煎煮条件；将女贞子和墨旱莲两味药的有效成分提取出来，操作工艺简单，制备条件温和，无高温高压，制备出的贞莲合剂能够使动物具有一定的免疫力。

附图说明

图1为水煎提取正交试验数据表图；

图2为水煎提取正交试验因素水平表图；

图3为水煎提取效果方差分析表图；

图4为贞莲合剂对小白鼠胸腺及脾脏的影响数据表图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

实施例1

中药贞莲合剂的制备

称取女贞子500kg，墨旱莲500kg，加6～10倍量的水煎煮，100℃提取1～3次，每次时间1～3小时；合并提取液，趁热过滤去除杂质沉淀，将滤液加热浓缩，得到相对密度为1.1～1.2g/mL(60℃)的膏状浓缩液；将浓缩液放冷后，边搅拌边加入体积浓度为95％的乙醇使醇含量达到65％～70％，密封冷藏静置15～20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2～1.3g/mL(60℃)的膏状的精制液；将精制液放冷后，缓慢逐滴加入体积浓度为95％的乙醇，并快速搅拌，使醇含量达到75％～80％，密封冷藏静置15～20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2～1.3g/mL(60℃)的膏状的中药浓缩液。

本发明提供的制备方法采用正交试验，以女贞子、墨旱莲的药用活性有效成分为评价指标，设计出合理的权重系数，优选出最佳煎煮工艺，最大限度地将药材中治疗有效成分提取出来。

由于本试验提取出的有效成分皆为水溶性，固采用水煎提取工艺，按照图1水煎提取正交试验因素水平表1，设计方案进行试验提取液过滤，浓缩，减压干燥，得到干品，进行女贞子苷、墨旱莲素指标含量的测定，水煎提取正交试验结果见附图2，水煎提取正交试验表2。

水煎提取正交试验的结果，采用综合评分法进行数据分析，女贞子苷、墨旱莲素的有效成分含量的权重系数均为0.5。每种有效成份评分＝该成份百分含量/最大该成份百分含量×该成份权重系数×100；每项试验的综合评分＝女贞子苷和墨旱莲素活性成份含量评分的总和。

表2中极差R显示各因素对提取效果影响大小，因素C＞A＞B；K值显示各水平对提取效果影响的大小，因素A为K2＞K3＞K1，因素B为K1＞K2＞K3，因素C为K2＞K3＞K1。从表2直观分析，最佳水煎提取条件为A2B1C2，即每次加8倍量水，煎煮2次，每次1h为最佳煎煮工艺。将各因素对药用有效成份转移率的影响进行方差分析，结果见图3，水煎提取效果方差分析表3。

查F分布临界值表，得F0.05(2，2)＝19.00，F0.01(2，2)＝99.00。

表3方差分析结果表明，A、C因素影响显著，B无显著意义，再结合表2直观分析，因素A中，K2＞K3＞K1，因素C中，K2＞K3＞K1，因此，优选A2C2；因素B中，K1＞K2＞K3，结合大生产时间，无显著差异的B因素，选择为B1；因此，最佳水煎提取条件为A2B1C2，即每次加8倍量的水，煎煮2次，每次1h。

本发明的两步醇沉工艺中，通过稠膏比例确定最佳酒精添加量，具体是量出醇沉前的中药浸膏体积，并假定其含醇量为0，再根据最后所要求达到的含醇量来计算加入的已知浓度的乙醇量。

实施例2

本实施例为最佳水煎提取条件下的优选实施例。

称取女贞子400kg，墨旱莲400kg，加8倍量的水煎煮，80℃提取2次，每次时间1小时；合并提取液，趁热过滤去除杂质沉淀，将滤液加热浓缩，得到相对密度为1.1g/mL(60℃)的膏状浓缩液；将浓缩液放冷后，边搅拌边加入体积浓度为95％的乙醇使醇含量达到65％，密封冷藏静置15小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2g/mL(60℃)的膏状的精制液；将精制液放冷后，缓慢逐滴加体积浓度为95％的入乙醇，并快速搅拌，使醇含量达到75％，密封冷藏静置15小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2g/mL(60℃)的膏状的中药浓缩液1。

实施例3

本实施例为最佳水煎提取条件下的优选实施例。

称取女贞子500kg，墨旱莲500kg，加8倍量的水煎煮，90℃提取2次，每次时间1小时；合并提取液，趁热过滤去除杂质沉淀，将滤液加热浓缩，得到相对密度为1.1g/mL(60℃)的膏状浓缩液；将浓缩液放冷后，边搅拌边加入体积浓度为95％的乙醇使醇含量达到70％，密封冷藏静置18小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2g/mL(60℃)的膏状的精制液；将精制液放冷后，缓慢逐滴加入体积浓度为95％的乙醇，并快速搅拌，使醇含量达到75％，密封冷藏静置18小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.2g/mL(60℃)的膏状的中药浓缩液2。

实施例4

本实施例为最佳水煎提取条件下的优选实施例。

称取女贞子800kg，墨旱莲800kg，加8倍量的水煎煮，100℃提取2次，每次时间1小时；合并提取液，趁热过滤去除杂质沉淀，将滤液加热浓缩，得到相对密度为1.2g/mL(60℃)的膏状浓缩液；将浓缩液放冷后，边搅拌边加入体积浓度为95％的乙醇使醇含量达到70％，密封冷藏静置20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.3g/mL(60℃)的膏状的精制液；将精制液放冷后，缓慢逐滴加入体积浓度为95％的乙醇，并快速搅拌，使醇含量达到80％，密封冷藏静置20小时，静置后过滤取上清液，回收乙醇，将滤液加热浓缩至相对密度为1.3g/mL(60℃)的膏状的中药浓缩液3。

实施例5

中药贞莲合剂制剂的制备

将上述实施例步骤6中制备的中药浓缩液1、中药浓缩液2、中药浓缩液3，喷雾干燥，分别得到相应的中药浸膏粉，压片制成片剂，或装入胶囊制成胶囊剂。

向上述实施例步骤5中制备的中药浓缩液1、中药浓缩液2、中药浓缩液3，加入一种或多种食品学或药学上可接受的辅料，按常规工艺制成液体剂、颗粒剂、片剂或胶囊剂。

实施例6

动物试验

取20只小白鼠，体重50g左右，饲养室温度20℃～25℃，相对湿度40％～60％。随机均等分成空白对照组、衰老组、贞莲合剂1高浓度组、贞莲合剂1低浓度组、贞莲合剂2高浓度组、贞莲合剂2低浓度组，空白对照组，每只小白鼠每天灌服生理盐水20g/(kg·d)；衰老组，每只小白鼠每天灌服生理盐水20g/(kg·d)，同时，每天从背部皮下注射0.3ml/(kg·d)的D-半乳糖，连续给药32天；贞莲合剂1高浓度组和贞莲合剂2高浓度组，每只小白鼠每天从背部皮下注射03.ml/(kg·d)的D-半乳糖，贞莲合剂1低浓度组、贞莲合剂2低浓度组，每只小白鼠每天从背部皮下注射0.1ml/(kg·d)的D-半乳糖，连续给药32天，同时，从8天开始，贞莲合剂1组灌服中药浓缩液2，贞莲合剂2组灌服中药浓缩液3，每天给药1次，连续给药24天。最后一次用药2h后断头处死小白鼠，解剖取胸腺、脾脏，福尔马林固定，石蜡包埋切片。

见附图4中，贞莲合剂对小白鼠胸腺及脾脏影响的数据表4，表中试验数据表明，不论是高浓度；还是低浓度贞莲合剂对免疫器官，尤其是小白鼠的胸腺、脾脏都具有一定的保护作用，特别是对胸腺的保护作用明显，因此，本发明制备的贞莲合剂具有增强动物免疫力，改善机体的衰老体征，可用于预防和治疗衰老相关的动物疾病。

不同重量比和制备条件制备出的同浓度中药浓缩液，所含有对机体的保护成分不同，实施例2为最优的。

以上结合附图对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。