一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物及其应用的制作方法

本发明属于中草药提取技术领域，更具体地，涉及一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物及其应用。

背景技术：

积雪草又叫连钱草、马蹄草、崩大碗等，为伞形科植物积雪草的干燥全草或带根全草。积雪草在我国分布广泛，主要分布于华南、华东、中南及西南地区。

积雪草在我国有着悠久的入药历史，长期以来人们在中医领域积累了丰富的经验，积雪草始载于《神农本草经》，据《本草纲目》记载，积雪草味苦、辛，性寒，无毒，归肝、脾、肾经，其功效为活血、消肿止痛，并具有清热解毒、利尿等功效，1977年被《中国药典》收录并应用于临床。现代药理研究表明，积雪草提取物及其制品在治疗硬皮病、瘢痕增生以及美白、皮肤损伤修复、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗溃疡、抗抑郁等方面有着广泛的应用。

积雪草提取物的功效是由其所含化学成分决定的。积雪草化学组成十分复杂，主要成分有三萜类、多炔烯烃类、黄酮类和挥发油类，此外，还含有绿原酸、内消旋肌醇、积雪草糖、黄酮醇、脂肪酸、天胡荽碱、甾醇、蜡、叶绿素、烃类、

木脂素类、糖、鞣质和多元酚类等成分。

公开号为CN 101455693的中国专利公开了一种利用渗漉技术从积雪草中提取积雪草总苷的方法，该提取方法并未对粗提液进一步纯化，功效成分含量低；公开号为CN 101456894的中国专利公开了一种利用积雪草总苷碱水解制备积雪草总苷元的方法，该方法要用到大量酸碱且制备原料为积雪草苷；公开号为CN 103079573的中国专利公开了一种利用积雪草制备高纯度积雪草苷组合物的方法，该方法采用固定床逆流提取技术反复提取积雪草苷，通过甲醇、甲基异丁基酮等试剂纯化得到较高纯度的积雪草苷,提取设备复杂,且提取步骤繁琐。

随着现代人工作压力增大、生活节奏加快，在外界不良刺激影响下，敏感肌肤人群日益增多。常见敏感肌肤产生原因主要有：紫外线引起的光过敏、涂抹化妆品引起的过敏、外界粉尘等引起的过敏等。敏感肌肤容易出现红肿、红斑、荨麻疹、色素沉着、瘙痒等问题。随着人们健康意识的提高，人们对于化妆品的品质要求也越来越高，利用中草药制备得到的天然提取物作为美容护肤化妆品的添加剂，具有对皮肤作用温和、刺激性小、安全性高等特点。文献（中国美容医学，2009,18（1）：72-75）研究了积雪草甙对瘢痕的治疗效果，证明积雪草甙可减少增生性瘢痕的表达，表明其在促进皮肤损伤修复方面有效。因此，在安全、健康的基础上，研究制备具有抗敏功效的积雪草提取物，并将其应用到护肤品中，具有实际意义。

技术实现要素：

本发明的目的在于根据现有技术中的不足，提供了一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物。

本发明的另一目的在于提供上述积雪草提取物在制备抗敏护肤品中的应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物，采用如下制备方法制备得到：

S1.将积雪草粉加入乙醇提取，超声波辅助提取，提取后离心或抽滤，收集滤液；

S2.将S1中滤液加入活性炭脱色，离心，收集脱色滤液；

S3.将S2中脱色滤液浓缩，加入壳聚糖溶液除杂，过滤后，收集除杂滤液；

S4.将S3中除杂滤液加入大孔吸附树脂纯化，用乙醇洗脱后得到洗脱液；

S5.将S4中洗脱液浓缩、除盐、干燥后，得到所述积雪草提取物；

S1中乙醇浓度为60~90%，超声波功率为228W~380W，S1中料液比为1：20~80。

优选地，S2中，活性炭的加入量占S1中滤液的0.5~2.5%。

活性炭对于体系物质的吸附不具有选择性，添加量过低脱色效果不佳，也会影响其吸附杂质，添加量过高，虽然脱色效果好，但是吸附量增加，会吸附较多的目标组分，造成体系有效物质损失过大。

优选地，S3中浓缩至脱色滤液中积雪草总苷的浓度为2.5~4.5mg/ml。本发明中浓缩的目的在于去除溶剂乙醇，压缩至该浓度条件下乙醇去除效果好，若再浓缩，有效物质极易析出，造成损失，影响效果。

优选地，S3中加入质量百分比为0.25%~1.5%的1%壳聚糖溶液。

低于或高于该浓度条件下的壳聚糖溶液提取效果均不理想，添加量过低，则体系除杂效果差，添加量过高，则有效组分损失过大，影响目标组分的效果。

优选地，S4中洗脱采用2~5倍柱体积的50%~90%乙醇洗脱。

优选地，S5中将S4中洗脱液减压浓缩至原体积的1/2~1/10；S5中采用超滤进行浓缩，超滤的膜截留分子量为1K~10K道尔顿，超滤压力5~10psi。

优选地，S1中积雪草粉的目数为30~80目。

优选地，S4中大孔吸附树脂为弱极性大孔吸附树脂，弱极性大孔吸附树脂型号为HPD-100、NKA-Ⅱ、S-8、D-101或D-5030。

更优选地，弱极性大孔吸附树脂型号为D-101。

本发明保护上述积雪草提取物在制备抗炎舒敏护肤品中的应用，所述积雪草提取物按照1~10%的质量百分数含量加入到抗炎抗敏化妆品中。

进一步地，所述抗炎舒敏护肤品包括如下按质量百分比计的组分制成：

A：1%~6%所述积雪草提取物、0.5%~4.5%马齿苋提取物；

B：1%~7%丁二醇、1%~6%甘油；

C：0.1%~0.8%汉生胶、0.05%~0.5%透明质酸钠；

D：0.1%~1.2%丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、0.05%~0.5%丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物；

E：1%~8%异壬酸异壬酯；

F：0.5%~5%环五聚二甲基硅氧烷；

G：0.05%~0.25%乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）、0.1%~0.5%氨甲基丙醇；

H：去离子水：余量。

上述抗炎舒敏护肤品的制备过程如下：

S1.将丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物置于容器中，加入异壬酸异壬酯、环五聚二甲基硅氧烷，搅拌均匀，搅拌速度800r/min，保温备用，保温时间10~15min，得油相原料；

S2.将去离子水总用量的80%、丁二醇、甘油、汉生胶、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、透明质酸钠、乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）置于容器中，搅拌升温，搅拌速度800~1000r/min，升温到80~85℃，保温备用，保温时间15~20min；得水相原料；

S3.将水相原料加入乳化装置内，补加剩余去离子水，搅拌均匀，加入氨甲基丙醇中和，均质完全；搅拌速度800~1000r/min，均质速度1000~2000r/min，均质时间1~2min；

S4.加入油相原料，高速均质使其混合均匀，然后保持低速搅拌，冷却降温，加入积雪草提取物、马齿苋提取物，搅拌均匀，出料，得到护肤精华液。低速搅拌速度600r/min，均质速度2500r/min，均质时间2~3min。

本发明采用超声波辅助提取积雪草总苷，超声波的空化作用及机械振动效应和热效应，可在保证高提取率的同时，大大减少提取时间并降低能源消耗；采用壳聚糖絮凝法除杂，与传统有机溶剂萃取或酸碱反复沉淀等技术相比，纯化时间短、操作简单且目标组分损失少；本发明将超滤技术应用于滤液脱盐，相对于传统的阴阳离子交换树脂脱盐和透析脱盐，超滤技术属于纯物理分离技术，具有能耗低、工序简单的优势；超滤分离技术属于纯物理分离技术，分离条件在极其温和条件下进行，分离过程不发生相变化，具有不需化学试剂，无污染的优势；（该工艺操作与传统的离子交换树脂脱盐方法对比，具有绿色无污染的优势。）

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：

本发明提取分离工艺简单，能耗低，适合工业化连续生产。利用本发明提供的积雪草提取物其制备得到的护肤精华液，制备方法简单，所制得的产品绿色安全且极易吸收。积雪草提取物具有显著的抗敏功效，且抗氧化、清除自由基效果好，故其在抗炎舒敏的护肤品中具有广泛地应用。

附图说明

图1为本发明提供的积雪草提取物的生产工艺流程图。

图2为本发明所提供的积雪草提取物对DPPH·抑制率比较。

图3为本发明所提供的积雪草提取物的体外抗敏性能比较。

具体实施方式

以下结合具体实施例和附图来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。

实施例1:

一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物，是按照以下步骤制备得到的：

（1）原料预处理：将积雪草粉碎过30目筛；

（2）提取：将过筛后的积雪草粉末用85%的乙醇加热提取，料液比1:50(w/v)，提取温度60℃，超声波辅助提取，超声功率320W，提取两次，每次80min，合并提取滤液，上述提取滤液用硅藻土滤饼抽滤或离心，离心速度4000rpm，离心8min；

（3）脱色：向步骤（2）所得滤液中添加1.5%质量比的活性炭，40℃脱色25min，脱色滤液经硅藻土滤饼抽滤或离心，离心速度4000rpm，离心5min；

（4）浓缩：将步骤（3）所得脱色滤液减压浓缩回收乙醇，至浓缩液中积雪草总苷的浓度为3.5mg/ml；

（5）絮凝除杂：向步骤（4）所得浓缩液中添加1%质量比的1%壳聚糖溶液，50℃絮凝50min，抽滤去除沉淀得到滤液；

（6）大孔吸附树脂纯化：将步骤（5）所得滤液进大孔吸附树脂，蒸馏水清洗吸附后的树脂至流出液呈无色透明状态，再用3倍柱体积的85%乙醇洗脱，收集洗脱液；大孔吸附树脂型号为D-101。

（7）浓缩：将步骤（6）所得洗脱液减压浓缩至原体积的1/6，抽滤去除沉淀得到滤液；

（8）脱盐：将步骤（7）所得滤液进行超滤脱盐，超滤膜截留分子量为5K道尔顿，超滤压力8psi，得到超滤截留浓缩液；

（9）干燥：将步骤（8）所得浓缩液冷冻干燥，得到积雪草提取物。

实施例2:

一种具有抗炎舒敏功效的积雪草提取物，是按照以下步骤制备得到的：

（1）原料预处理：将积雪草粉碎过30目筛；

（2）提取：将过筛后的积雪草粉末用60%的乙醇加热提取，料液比1:50(w/v)，提取温度60℃，超声波辅助提取，超声功率320W，提取两次，每次80min，合并提取滤液，上述提取滤液用硅藻土滤饼抽滤或离心，离心速度4000rpm，离心8min；

（3）脱色：向步骤（2）所得滤液中添加1.5%质量比的活性炭，40℃脱色25min，脱色滤液经硅藻土滤饼抽滤或离心，离心速度4000rpm，离心5min；

（4）浓缩：将步骤（3）所得脱色滤液减压浓缩回收乙醇，至浓缩液中积雪草总苷的浓度为3.5mg/ml；

（5）絮凝除杂：向步骤（4）所得浓缩液中添加1%质量比的1%壳聚糖溶液，50℃絮凝50min，抽滤去除沉淀得到滤液；

（6）大孔吸附树脂纯化：将步骤（5）所得滤液进大孔吸附树脂，蒸馏水清洗吸附后的树脂至流出液呈无色透明状态，再用3倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集洗脱液；大孔吸附树脂型号为D-101。

（7）浓缩：将步骤（6）所得洗脱液减压浓缩至原体积的1/6，抽滤去除沉淀得到滤液；

（8）脱盐：将步骤（7）所得滤液进行超滤脱盐，超滤膜截留分子量为5K道尔顿，超滤压力8psi，得到超滤截留浓缩液；

（9）干燥：将步骤（8）所得浓缩液冷冻干燥，得到积雪草提取物。

将实施例1和2中得到的积雪草提取物进行对DPPH·清除效果和对透明质酸酶抑制效果测试。

表1中分别为实施例1和2中积雪草提取物的对DPPH·清除效果和对透明质酸酶抑制效果

表1

*表1中实施例1和2提取物溶解采用的溶剂为无水乙醇。

对比例1：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是积雪草提取过程中不采用超声波辅助提取。

对比例2：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是积雪草提取过程中不采用壳聚糖溶液进行絮凝除杂。

对比例3：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是积雪草提取过程中采用水作为提取溶剂。

对比例4：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是积雪草纯化过程中，活性炭脱色步骤放到脱盐步骤前进行。

对比例5：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是活性炭的加入量占S1中滤液的0.3%。

对比例6：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是活性炭的加入量占S1中滤液的5%。

对比例7：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是S3中浓缩至脱色滤液中积雪草总苷的浓度为1.5mg/ml。

对比例8：制备方法和组分配比同实施例1，不同的是S3中浓缩至脱色滤液中积雪草总苷的浓度为6mg/ml。

对比例9：备方法和组分配比同实施例1，不同的是S4中大孔吸附树脂为为HPD-100型弱极性大孔吸附树脂。

表2分别为对比例1-9中积雪草提取物的对DPPH·清除效果和对透明质酸酶抑制效果：

表2

*表2中对比例提取物溶解采用的溶剂为无水乙醇。

实施例3：一种利用实施例1制备得到的积雪草提取物制备的护肤精华液，由下述质量百分比的原料制成：

（1）天然提取物：实施例1的1.5%积雪草提取物、市售的1.5%马齿苋提取物；

（2）醇类：2%丁二醇、3%甘油；

（3）糖类：0.2%汉生胶、0.1%透明质酸钠；

（4）高分子聚合物：0.4%丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、0.3%丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物；

（5）油脂：3%异壬酸异壬酯；

（6）硅油：2%环五聚二甲基硅氧烷；

（7）其它添加剂：0.1%乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）、0.2%氨甲基丙醇；

（8）去离子水：余量。

护肤精华液的制备方法如下：

（1）将丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物置于容器中，加入异壬酸异壬酯、环五聚二甲基硅氧烷，搅拌均匀，搅拌速度800r/min，保温备用，保温时间10~15min，得油相原料；

（2）将去离子水总用量的80%、丁二醇、甘油、汉生胶、丙烯酸（酯）类/C10-30 烷醇丙烯酸酯交联聚合物、透明质酸钠、乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）置于容器中，搅拌升温，搅拌速度800~1000r/min，升温到80~85℃，保温备用，保温时间15~20min；得水相原料；

（3）将水相原料加入乳化装置内，补加剩余去离子水，搅拌均匀，加入氨甲基丙醇中和，均质完全；搅拌速度800~1000r/min，均质速度1000~2000r/min，均质时间1~2min；

（4）加入油相原料，高速均质使其混合均匀，然后保持低速搅拌，冷却降温，加入积雪草提取物、马齿苋提取物，搅拌均匀，出料，得到护肤精华液。低速搅拌速度600r/min，均质速度2500r/min，均质时间2~3min。

实施例4：

配方同实施例3，不同的是采用的是实施例2的积雪草提取物。

对比例10：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例1的积雪草提取物。

对比例11：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例2的积雪草提取物。

对比例12：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例4的积雪草提取物。

对比例13：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例5的积雪草提取物。

对比例14：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例6的积雪草提取物。

对比例15：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例7的积雪草提取物。

对比例16：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例8的积雪草提取物。

对比例17：

配方同实施例3，不同的是采用的是对比例9的积雪草提取物。

表3分别为实施例3、4和对比例10~19中抗炎舒敏护肤品的对DPPH·清除效果和对透明质酸酶抑制效果

表3

从实施例和对比例中可以看出，制备过程中影响其最终抗炎舒敏效果的因素较多，例如活性炭的浓度、浓缩的要求等等，甚至吸附树脂的选择上也会产生较大的影响，而采用实施例1和2的条件下制备得到的积雪草提取物不仅DPPH·清除率和透明质酸酶抑制率高，将其应用到制备相应的护肤品中，也得到了较好的抗炎舒敏抗敏，而对比例1~9及对比例1~9中积雪草提取物制备得到的护肤品，效果较实施例1和2差。