本发明涉及药物领域，具体涉及一种用于治疗聋哑或耳聋的中药组合物。
背景技术：
：耳聋分为感应神经性耳聋和传导性耳聋，传导性耳聋是可以治愈的，而感音神经性耳聋的治疗是世界临床难治的多发病。既往研究表明，哺乳动物毛细胞就是听觉细胞，感音神经性耳聋是听神经和耳蜗毛细胞退变和破坏消失造成的。西医认为感音神经性耳聋至今不能根治的原因在于内耳感觉上皮细胞损伤后不能再生，耳蜗的毛细胞破坏后无法修复。虽然目前的药物治疗对于改善听功能有一定效果，但十分有限，有些药物还有较大的毒副作用。目前大多数人耳聋或者聋哑患者采用佩戴助听器及电子耳蜗植入的方式来实现听力重建，经过几年时间的语言训练，取得一定效果，但是，不能根治，摘掉助听器，耳聋患者的听力还是不能恢复。并且植入耳蜗也存在两个问题，一是植入人工电子耳蜗破坏原有身体组织，使患者永久失去药物治疗的机会，二是人工电子耳蜗价格昂贵(价格约在10-30万元之间)，加上康复训练费用，一般残疾人家庭难以承受。近年来，中药治疗耳聋的研究也取得了很大发展。中国专利CN1876152A公开了一种治疗神经性耳聋的药物及其制备工艺，由淫羊霍、制何首乌、熟地黄、黄精、龟甲、磁石、川芎、郁金、炙黄芪和僵蚕组成。按中药原料性质不同分别进行煎煮三次，滤液、混合、乙醇提取，再将滤液混合，浓缩干燥，制成胶囊。本发明对于肾虚耳聋及感音神经性耳聋具有一定作用，但是治疗效果欠佳。中国专利CN1173371A于1998年02月18日公开了一种治疗耳聋的中药，由葛根、丹参、柴胡、石菖蒲、熟地、金银花、野菊花等19味中药配制而成，功能通窍开闭，活血通络，滋肾聪耳，主治突发性耳聋、神经性耳聋、老年性耳聋、药物中毒性耳聋，经临床848例验证，痊愈率为38.2-67.2％，但有效治愈率低。传统医学对耳聋或者聋哑进行了深入的研究，中医理论认为:耳是听觉器官，肾开窍于耳，是指耳的听觉功能，依据于肾中精气充养、肾中精气充盈、髓海得新，则听觉灵敏。因此，脾肾两虚，精气不足是聋哑患者耳聋的主要原因。但目前尚无治疗耳聋或者聋哑的特效药。基于上述存在的问题，特提出本发明。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种用于治疗聋哑或耳聋的中药组合物。本发明的中药组合物属于纯中药制剂，使用方便，价格低廉，并且本发明的中药组合物不仅能够降低耳蜗毛细胞的损失，而且对受损的耳蜗毛细胞有一定的修复再生作用，能够有效地恢复聋哑病人的听力，具有显著的治疗效果。为解决上述问题，本发明采用的技术方案为：本发明的中药组合物包括下列重量份的原料：黄芪40-80份、当归5-15份、川芎3-9份、赤芍10-20份、桃仁3-9份、红花3-9份、肉桂3-8份、苏木5-15份、水蛭3-9份、王不留10-30份、磁石10-30份。优选地本发明的中药组合物包括下列重量份的原料：黄芪60份、当归10份、川芎6份、赤芍15份、桃仁6份、红花6份、肉桂5份、苏木10份、水蛭6份、王不留20份、磁石20份。进一步，所述中药组合物的剂型为片剂、颗粒剂、胶囊剂、汤剂、滴耳剂。进一步，所述中药组合物可以采用口服或者滴耳方式给药。本发明还提供了上述中药组合物在制备治疗耳聋或聋哑药物中的应用。制备方法：(1)清洗:将已经粉碎或切片的黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、肉桂、苏木、王不留于40℃的低氘水中浸泡12h，超声处理20min，超声功率280w；将已经粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超声处理20min，超声功率280w；(2)炒制：中火对黄芪，当归，桃仁，苏木这几味药材进行炒制；(3)水煎:将步骤(2)和步骤(1)中的药材，按照先加入根茎类药物，后加入叶片类药物的顺序加入120℃的低氘水中，恒温恒压下封闭回流20-25min；回流完毕后，收集煎液，并于相同温度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为30-40％，提取10-12h；(5)过滤浓缩:：将步骤(4)中的提取液过滤，得药液，药液蒸馏浓缩，即得成品。优选的，步骤(3)中封闭回流时间为20min。优选的，步骤(4)中乙醇浓度为30％。本发明的有益效果为：本发明选用具有补肾益精、健脾强身、宣通耳窍的多种中药成分制成的中药组合物，君臣药配伍，能够对损伤和死亡的感音母细胞和传导神经的再生修复，进而达到听力提高和恢复，根除病灶，完全恢复听力功能，经过特殊语言训练，使聋哑患者具有和掌握听、说的语言能力，达到彻底治愈的目的，而且不再复发，用于治疗聋哑有显著效果。附图说明图1是本发明中庆大霉素致聋后中药治疗90天豚鼠耳蜗外毛细胞正常存活的百分数与致聋后对照组比较；图2是本发明中庆大霉素致聋后对照组90天后豚鼠耳蜗毛细胞增殖与修复的扫描电镜观察(20KV×1000)；图3是本发明中庆大霉素致聋后对照组90天后豚鼠耳蜗毛细胞增殖与修复的扫描电镜观察(20KV×3000)；图4是本发明中庆大霉素致聋后中药治疗90天豚鼠后耳蜗毛细胞增殖与修复的扫描电镜观察(20KV×1000)；图5是本发明中庆大霉素致聋后中药治疗90天后豚鼠耳蜗毛细胞增殖与修复的扫描电镜观察(20KV×3500)。具体实施方式实施例1处方：黄芪60份、当归10份、川芎6份、赤芍15份、桃仁6份、红花6份、肉桂5份、苏木10份、水蛭6份、王不留20份、磁石20份。制备方法：(1)清洗:将1000ml去离水照常规方法制备氘丰度为20×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，搅拌均匀后，进行增氧处理，至水中氧含量为15ul/L时，停止增氧；将已经粉碎或切片的黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、肉桂、苏木、王不留于40℃的低氘水中浸泡12h，超声处理20min，超声功率280w；将已经粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超声处理20min，超声功率280w；(2)炒制：中火对黄芪，当归，桃仁，苏木这几味药材进行炒制；(3)水煎:将步骤(2)和步骤(1)中的药材，按照先加入根茎类药物，后加入叶片类药物的顺序加入120℃的低氘水中，恒温恒压下封闭回流20min；回流完毕后，收集煎液，并于相同温度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为30％，提取12h；(5)过滤浓缩:将步骤(4)中的提取液过滤，得药液，药液蒸馏浓缩，直到药液密度达到1.1g/ml，除菌后用无菌软包、玻璃瓶或塑料瓶包装成药，装量为100ml。实施例2处方：黄芪40份、当归5份、川芎3份、赤芍10份、桃仁3份、红花3份、肉桂3份、苏木5份、水蛭3份、王不留10份、磁石10份。制备方法：(1)清洗:将1000ml去离水照常规方法制备氘丰度为50×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，搅拌均匀后，进行增氧处理，至水中氧含量为15ul/L时，停止增氧；将已经粉碎或切片的黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、肉桂、苏木、王不留于40℃的低氘水中浸泡12h，超声处理20min，超声功率280w；将已经粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超声处理20min，超声功率280w；(2)炒制：中火对黄芪，当归，桃仁，苏木这几味药材进行炒制；(3)水煎:将步骤(2)和步骤(1)中的药材，按照先加入根茎类药物，后加入叶片类药物的顺序加入120℃的低氘水中，恒温恒压下封闭回流20min；回流完毕后，收集煎液，并于相同温度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为30％，提取12h；(5)过滤浓缩:将步骤(4)中的提取液过滤，得药液，药液蒸馏浓缩成浸膏，添加适量辅料，制成颗粒剂。实施例3处方：黄芪80份、当归15份、川芎9份、赤芍20份、桃仁9份、红花9份、肉桂8份、苏木15份、水蛭9份、王不留30份、磁石30份。制备方法：(1)清洗:将1000ml去离水照常规方法制备氘丰度为60×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，搅拌均匀后，进行增氧处理，至水中氧含量为15ul/L时，停止增氧；将已经粉碎或切片的黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、肉桂、苏木、王不留于40℃的低氘水中浸泡10h，超声处理20min，超声功率280w；将已经粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超声处理20min，超声功率280w；(2)炒制：中火对黄芪，当归，桃仁，苏木这几味药材进行炒制；(3)水煎:将步骤(2)和步骤(1)中的药材，按照先加入根茎类药物，后加入叶片类药物的顺序加入120℃的低氘水中，恒温恒压下封闭回流25min；回流完毕后，收集煎液，并于相同温度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为35％，提取10h；(5)过滤浓缩:将步骤(4)中的提取液过滤，得药液，药液蒸馏浓缩成浸膏，添加适量辅料，制粒，填入空胶囊，制成胶囊剂。实施例4处方：黄芪80份、当归20份、川芎9份、赤芍30份、桃仁9份、红花9份、肉桂8份、苏木20份、水蛭9份、王不留30份、磁石30份。制备方法：(1)清洗:将1000ml去离水照常规方法制备氘丰度为80×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，搅拌均匀后，进行增氧处理，至水中氧含量为15ul/L时，停止增氧；将已经粉碎或切片的黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、肉桂、苏木、王不留于40℃的低氘水中浸泡11h，超声处理20min，超声功率280w；将已经粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超声处理20min，超声功率280w；(2)炒制：中火对黄芪，当归，桃仁，苏木这几味药材进行炒制；(3)水煎:将步骤(2)和步骤(1)中的药材，按照先加入根茎类药物，后加入叶片类药物的顺序加入120℃的低氘水中，恒温恒压下封闭回流20min；回流完毕后，收集煎液，并于相同温度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为30％，提取12h；(5)过滤浓缩:将步骤(4)中的提取液过滤，得药液，药液蒸馏浓缩成浸膏，添加适量辅料，压制成片剂。实施例5处方：黄芪50份、当归8份、川芎5份、赤芍12份、桃仁5份、红花5份、肉桂6份、苏木12份、水蛭5份、王不留24份、磁石24份。制备方法：(1)清洗：将1000ml去离水照常规方法制备氘丰度为100×104atm％的低氘水，加入少量的微量元素硒，搅拌均匀后，进行增氧处理，至水中氧含量为15ul/L时，停止增氧；将已经粉碎或切片的黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、肉桂、苏木、王不留于40℃的低氘水中浸泡9h，超声处理20min，超声功率280w；将已经粉碎的磁石、水蛭浸泡于60℃的低氘水中，超声处理20min，超声功率280w；(2)炒制：中火对黄芪，当归，桃仁，苏木这几味药材进行炒制；(3)水煎:将步骤(2)和步骤(1)中的药材，按照先加入根茎类药物，后加入叶片类药物的顺序加入120℃的低氘水中，恒温恒压下封闭回流25min；回流完毕后，收集煎液，并于相同温度下低氘水煎2次，合并煎液；(4)乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为40％，提取12h；(5)过滤浓缩:将步骤(4)中的提取液过滤，得药液，药液蒸馏浓缩，经脱色制成滴耳剂。对比例1处方：黄芪50份、当归8份、川芎5份、赤芍12份、桃仁5份、红花5份、肉桂6份、苏木12份、水蛭5份、王不留24份、磁石24份制备方法：将上述处方中的药材加水(未添加低氘水以及微量元素)煎煮二次，每次煎煮20min；合并煎液；乙醇提取：将煎液中加入乙醇，使得乙醇浓度为30％，乙醇回流提取10h；过滤浓缩：将提取液进行过滤，得滤液，所得药液蒸馏浓缩，直到药液密度达到1.1g/ml，除菌后用无菌软包、玻璃瓶或塑料瓶包装成药，装量为100ml。对比例2按照中国专利CN1876152A的方法制备治疗耳聋制剂淫羊霍307g制何首乌230g熟地黄230g黄精230g龟甲460g磁石123g川穹230g郁金230g炙黄芪307g僵蚕153g制备方法：在上述10味原料中，取淫羊霍、制何首乌、川穹、郁金4味，加口水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮1小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加8倍量水，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.15(70-75OC)，待冷至室温，加乙醇至含醇量达60％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至相对密度为1.25(70-75OC)，备用；取熟地黄、黄精、炙黄茂3味，加水提取3次，第一次加10倍量水，煎煮1小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，第三次加8倍量水，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩至生药:药液＝1:5(W/W)，加入ZTC1+l天然澄清剂，沉淀12小时，滤过，滤液备用：取龟甲、僵蚕、磁石，混合在一起，加水提取3次，第一次加6倍量水，煎煮l小时，第二次加4倍量水，煎煮l小时，第二次加4倍量水，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液备用。将上述3项滤液合并，浓缩并干燥，加入5％微粉硅胶及糊精适量，混匀，装入1000粒胶囊，即得。对比例3按照中国专利CN1173371A的方法制备治疗耳聋制剂：分别称取葛根60克、丹参40克、柴胡30克、石菖蒲30克、熟地30克、金银花30克、野菊花30克、路路通20克、赤芍20克、郁金20克、川芎20克、香附20克、骨碎补20克、山萸肉20克、山药20克、丹皮20克、茯苓20克、连翘20克及泽泻10克。将以上药物除熟地、山萸肉外，均粉碎研磨成细粉，加入8-10倍水量进行煎煮2次，每次1小时，然后过滤，将滤液合并浓缩至1:1后烘干，加入上述药物细粉混合均匀，灭菌后按疗程及一次服用量装入胶囊即得中成药。实验例1(1)致聋模型的构建1)GM致聋模型选用健康豚鼠100只，耳廓反射正常，体重250-300g，雌雄各半。分为正常对照组(10只)、庆大霉素致聋组(GM组80只)、庆大霉素拮抗组(10只)。三组动物用戊巴比妥钠80mg/kg麻醉，进行脑干诱发电位(ABR)和畸变耳声发射(DPOAE)检测。测定后的GM组和庆大霉素拮抗组按80mg.kg-1.d-1肌肉注射庆大霉素，连续注射22-30天。测定动物的ABR值和DPOAE值，再将GM组分为再将GM组分为GM致聋对照组、GM致聋中药治疗组(本发明实施例1-5中药治疗组)以及对比例组1、对比例组2、对比例组3。正常对照组给予同样剂量及疗程的生理盐水。(2)豚鼠致聋治疗方法根据《中药药理研究方法学》中的方法，按成人量(mg/kg)换算成动物剂量的倍数简表，换算成豚鼠为4.5倍剂量服用上述中药组合物。其中，GM致聋中药治疗组从致聋模型建立之后每天服用上述实施例1-5的中药组合物，对比例组1、对比例组2、对比例组3从致聋模型建立之后每天分别服用相应对比例中的制剂，GM致聋对照组和正常对照组给予同样剂量及疗程的生理盐水。庆大霉素拮抗组从开始注射庆大霉素开始，每天边注射庆大霉素边服用上述实施例1的中药组合物10ml。(3)听功能测定方法采用听觉诱发电位-耳声发射仪测定豚鼠的ABR及DPOAE。ABR的测定：将上述动物麻醉后，用针电极插入颅顶作为记录电极，同侧为参考电极，对侧接地。测量治疗90天的ABR的反应阈。DPOAE的测定：将大小合适的探头塞入外耳道，使外耳道密封，当刺激信号平稳后进行测试，重复2次。测量中药治疗90天不同刺激强度时DPOAE的幅值，以反应幅值高出本底噪声3dB时的最小刺激强度作为DPOAE有无的指标，确定检出率。上述测试均叠加100次。具体结果见表1-表4。表1不同组小鼠治疗90天DPOAE各频率幅值(dBSPL,x±s)表2不同组小鼠治疗90天的ARB反应阈(dBSPL,x±s)注：**与实验前比较，P<0.05.表3庆大霉素拮抗组中药治疗10天、20天、30天DPOAE各频率幅值(dBSPL,x±s)表4庆大霉素拮抗组中药治疗10天、20天、30天ARB反应阈(dBSPL,x±s)组别分类ABR反应阈实验前20.15±4.77本发明中药治疗10天18.87±5.25本发明中药治疗20天19.01±5.36本发明中药治疗30天19.11±3.98由表1可以看出，实验前所有动物DPOAE幅值正常(5.0-32dBSPL)，GM致聋后，在中高频率区(1005-8000Hz),DPOAE幅值明显降低(P<0.05)。本发明中药治疗90天后DPOAE幅值明显上升，尤其在GM损害严重的中高频区(1005-8000Hz)，与GM致聋后相比，差异有显著统计学意义(P<0.01)，而对比例1-3中DPOAE虽然有一定恢复，但是与GM致聋对照组相比，并无统计学意义(P>0.05)。说明中药治疗90天使GM致聋豚鼠耳蜗的DPOAE幅值基本恢复正常。由表2可以看出，实验前各组的ABR平均阈值为21dBSPL左右，GM致聋后ABR阈值上升到平均为50dBSPL左右，本发明中药组合物治疗90天后，治疗组总体ABR的平均阈值由50dBSPL左右下降到22dBSPL左右，较GM致聋后相比，差异有显著统计学意义(P<0.01)。而对比例1-3中ABR虽然有一定恢复，但是与GM致聋对照组相比，并无统计学意义(P>0.05)。由此说明，采用本发明制备的中药制剂90天，能够使GM致聋豚鼠耳蜗的ABR幅值基本恢复正常。由表3-表4可以看出，每天给予庆大霉素后，同时服用本发明制备的中药制剂，能够降低庆大霉素致聋的概率，有效的保护耳蜗免受损害。(4)耳蜗铺片及毛细胞数的观察测定ABR，DPOAE完后，在麻醉状态下，快速断头，迅速取出右侧听泡，分离出耳蜗，在解剖显微镜下，用纤细钢针在耳蜗尖顶钻一小孔，将前庭膜挑破，再挑破圆窗膜和卵圆窗膜，并在耳蜗底回骨隆起处钻一小孔，吸取0.5％的硝酸银溶液从蜗尖的小孔和两窗及底回的小孔反复灌入用双蒸水洗涤数次，再灌入10％的福尔马林固定液。标本在日光下曝光2-4小时后，在解剖显微镜下分离铺片。将耳蜗置于纯净蒸馏水中，用细钢针先挑破耳蜗骨壁，用密合良好的纤细镊子去除血管纹和前庭膜，并平行于Corti器轻取盖膜及遮盖基底膜的组织，用线状刀逐回切断基底膜，逐回将基底膜按次序放置在载玻片的甘油中，辨识正反面无误后，加盖盖玻片，供光镜观察和进行毛细胞计数。具体结果见图1。由图1可以看出，致聋后中药治疗组治疗90天后，可见耳蜗基底回约50％以上的外毛细胞正常存活，约占耳蜗观察数的66.67％。而致聋后对照组耳蜗基底回平均仅20％左右的外毛细胞存活，大多数耳蜗基底回内外毛细胞完全缺失。说明治疗组有毛细胞修复和再生。(5)扫描电镜观察将取材的左侧耳蜗样品用缓冲液把组织表面洗净，在解剖显微镜下，用纤细钢针在耳蜗顶部打一小孔，一定要挑破耳蜗管前庭膜，再挑破圆窗膜和卵圆窗膜，并去除镫骨及足板，用细滴管将2.5％戊二醛固定液从蜗尖小孔和圆窗卵圆窗反复滴灌3-5次，明显看到液体从两窗流出。将样品浸泡在固定液中，置于4冰℃箱中4h。置于0.1mmol/LLPB缓冲液中，在解剖显微镜下在耳蜗各回骨壁钻孔，使耳蜗各回与固定液相通，再浸泡于固定液中4h用0.1mmol/LLPB漂洗3次后，用1％OSO4后固定2h。用0.1mmol/LLPB漂洗20-30min。用乙醇梯度脱水，乙醇的浓度依次为30％-50％-70％-90％-100％(2次)，乙醇与乙酸异戊酯1:1的混合液10-20h；纯乙酸异戊酯10-20h。临界点干燥后，即可取出样品。将样品置于解剖显微镜下，去除覆盖于观察部位的骨质和膜性结构，清洁样品后，将样品用双面胶带固定于样品台上，离子溅射镀膜，于扫描电镜观察。具体实验结果见图2-图5。由图4及图5可以看出，致聋后中药治疗组90天后，在豚鼠的耳蜗顶回可以看到成熟的再生毛细胞，其最大特点是静纤毛束完整，具有小束样的纤毛束，其周围生长着许多微绒毛这是正在发育成熟的再生毛细胞。由图2及图3可以看出，致聋后对照组90天耳蜗表面的微绒毛较少，未见到新生的纤毛样凸起，且毛细胞再生少。实施例7临床治疗效果：(1)病人的选择：选择经医院确诊为先天性聋哑57人，后天性聋哑137病人，共194人，男101例，女93例。听力损失程度在110db以内(视为有残余听力)的142例，听力损失程度在115db以上(视为无残余听力)的52例。(2)疗效判定标准：无效：在原听力基础上经过系统治疗3-6个月，听力提高不到15db为无效；有效：在原听力基础上经过系统治疗3-6个月，听力提高20db为有效；显效：在原听力基础上经过系统治疗3-6个月，听力提高30db-40db，能简单面对面对话，但语言欠清晰为显效；痊愈：在原听力基础上经过系统治疗3-6个月，听力提高41db以内，通过语言训练能进行正常语言对话为痊愈。(3)治疗方法及效果本组主要治疗方法为中药治疗与语言康复训练结合，对上述病人服用中药组合，并通过局部按摩、语言培训等方法治疗3-6个月，根据疗效判定标准，统计治疗效果。统计治疗效果见表5。表5治疗效果由上表可以看出，采用本发明制备的中药制剂治疗194例聋哑病人3-6个月，根据疗效判定标准，194例中有效184例，无效例为10例，总有效率达到94.84％。经统计学处理，P<0.01，差异有显著性。在中药治疗的基础上，听力恢复的基础上，进行语言训练，使患者的听力和言语能力提高。当前第1页1 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