本发明属于生理活性物质提取技术领域，具体涉及一种芹维康胶囊中总黄酮及叶绿素的提取方法。
背景技术：
总黄酮，是黄酮类化合物的总称，包括黄酮、黄酮醇、双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能进入脂肪组织，进而具有帮助人体防御辐射、消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑及其他脏器细胞、抗脂肪氧化、抗衰老的功能。
叶绿素是植物进行光合作用的主要色素，是一类含脂的色素家族，位于类囊体膜。叶绿素结构与人类和大多数动物体内血液中红色素结构极其相似，具有促进伤口愈合、造血、脱臭、改善便秘、降解胆固醇、提供维生素、解毒、抗病等诸多功能。
由于总黄酮和叶绿素具备上述多种优异的功效，如何从植物中获取总黄酮和叶绿素就成为了研究人员的一个研究方向。芹菜中含有丰富的黄酮类化合物和叶绿素，是现有技术中常用的提取黄酮类化合物和叶绿素的物质。
现有技术中，从芹菜中提取总黄酮和叶绿素的方法主要是将芹菜粉末溶于相应的有机提取液中，通过加热回流、恒温温浸或者超声分别提取总黄酮和叶绿素。这类方法虽然能够提取总黄酮和叶绿素，但是这类方法无法一次性完成两种物质的提取，只能分别提取两种物质，操作繁琐；提取过程需要加热，容易造成功效成分流失；工业化程度相对较复杂，成本较高；有机提取液易残留对人体造成不必要的伤害；且总黄酮种类多，单一的有机提取液很难提取完全，可能会造成某种或某些黄酮类化合物的遗失。
技术实现要素：
本发明的目的是解决现有技术中，从芹菜中提取总黄酮及叶绿素的方法操作复杂、成本高、提取不完全、易造成功效成分流失、存在对人体造成不必要伤害的隐患的技术问题，提供一种芹维康胶囊中总黄酮及叶绿素的提取方法。
本发明的一种芹维康胶囊中总黄酮及叶绿素的提取方法，步骤如下：
步骤一、将清洗后的芹菜茎叶切成1～4cm的小段，然后加入密封避光的榨汁机中榨汁，得到芹菜浆；
步骤二、先将芹菜浆置于洁净容器中，然后按芹菜浆与纯净水的体积比为1:(1～1.5)，向洁净容器中加入纯净水，4～20℃静止48～72h，得到沉淀完全的芹菜浆；
所述洁净容器的容积为芹菜浆和纯净水的体积之和的二倍到三倍；
步骤三、将沉淀完全的芹菜浆倾去上清液，沉淀物过70～90目筛绢后，-30～-35℃冷冻干燥至水分含量小于等于4％，取出，粉碎成细粉，得到总黄酮及叶绿素。
优选的，步骤三中，所述沉淀物过80目绢布。
优选的，步骤三中，所述冷冻干燥的时间为30h。
优选的，步骤三中，粉碎得到的细粉过200目筛，得到总黄酮及叶绿素。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明的芹维康胶囊中总黄酮及叶绿素的提取方法，利用叶绿素和总黄酮不溶于水的特性，将含有该成分的芹菜组织进行浓集，用物理方法同时提取出总黄酮和叶绿素，部分保留了芹菜的原生形态；提取过程中无高温加热过程，且在避光下进行，避免了叶绿素和总黄酮等成分因高温及光照等原因导致功效成分的降解，提高了有效成分的利用度，以100g芹菜计，提取的叶绿素的量能够达到80～300mg，提取的总黄酮的量能够达到100～350mg；提取过程中不接触任何有机试剂，提取后的叶绿素和总黄酮无毒、有效、安全。
附图说明
图1为本发明的芹维康胶囊中总黄酮及叶绿素的提取方法的工艺流程图。
具体实施方式
为了进一步了解本发明，下面结合具体实施方式对本发明的优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明专利要求的限制。
本发明的一种芹维康胶囊中总黄酮及叶绿素的提取方法，步骤如下：
步骤一、将清洗后的芹菜茎叶切成1～4cm的小段，尽量切断芹菜组织中的维管束，加入密封避光的榨汁机中榨汁，得到芹菜浆；
其中，芹菜新鲜，不得腐烂，满足GB 2763的要求，一般选择长白山地区产的优质新鲜芹菜；芹菜去除根，保留芹菜完整茎及叶片；一般采用饮用水清洗芹菜茎叶，去除泥沙；密封避光的榨汁机能够避免芹菜浆氧化。
步骤二、密闭且避光条件下，先将芹菜浆置于洁净容器中，然后按芹菜浆与纯净水的体积比为1:(1～1.5)向洁净容器中加入纯净水，4～20℃静止48～72h，得到沉淀完全的芹菜浆(含有上清液和沉淀物)；
其中，洁净容器的容积为芹菜浆和纯净水的体积之和的二倍到三倍，即保证芹菜浆和纯净水加入后，具有一定的液面高度，以利于芹菜浆沉淀分层；
在4～20℃静止48～72h，是本发明必须要保证的实验条件，如果温度低于4℃，会造成芹菜浆结冻，变质，如果温度高于20℃，微生物活动频繁，也会造成芹菜浆变质，如果静止时间低于48h，芹菜浆无法沉淀充分，如果高于72h，芹菜浆会受环境影响，氧化，降低有效成分含量。
步骤三、将沉淀完全的芹菜浆倾去上清液，沉淀物过70～90目，优选80目筛绢后，过滤后的沉淀物加入冷冻干燥机中，在-35～-30℃冷冻干燥至水分含量小于等于4％，一般需要30h，取出冻干物，加入粉碎机粉碎成细粉，过200目筛，得到总黄酮及叶绿素；
其中，如果沉淀物筛绢超过90目，会降低总黄酮及叶绿素的得率，如果低于70目，会引入杂质。
以下结合实施例进一步说明本发明。
实施例1
步骤一、将100g清洗沥干后的芹菜茎叶切成4cm小段，加入密封避光的榨汁机中榨汁，得到50mL的芹菜浆；
步骤二、密闭且避光条件下，将芹菜浆置于250mL锥形瓶中，向锥形瓶中加入75mL的纯净水，20℃静止48h，得到沉淀完全的芹菜浆；
步骤三、将沉淀完全的芹菜浆倾去上清液，沉淀物过80目筛绢后，过滤后的沉淀物加入冷冻干燥机中，在-35℃冷冻干燥30h，得到水分含量为4％的冻干物，加入粉碎机粉碎成细粉，过200目筛，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为256mg，叶绿素为310mg。
实施例2
步骤一、将100g清洗沥干后的芹菜茎叶切成1cm小段，加入密封避光的榨汁机中榨汁，得到60mL的芹菜浆；
步骤二、密闭且避光条件下，将芹菜浆置于250mL锥形瓶中，向锥形瓶中加入60mL的纯净水，4℃静止72h，得到沉淀完全的芹菜浆；
步骤三、将沉淀完全的芹菜浆倾去上清液，沉淀物过80目筛绢后，过滤后的沉淀物加入冷冻干燥机中，在-30℃冷冻干燥30h，得到水分含量3％的冻干物，加入粉碎机粉碎成细粉，过200目筛，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为262mg，叶绿为素305mg。
对比例1
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，60℃烘干，粉碎后过80目筛，得到芹菜粉末；
步骤二、将芹菜粉末置于500mL锥形瓶中，以芹菜粉末与乙醇水溶液(浓度70％)的料液比为1g:50mL向锥形瓶中加入乙醇水溶液(浓度70％)，70℃恒温水浴提取1.5h后速冷，过滤，离心分离得上清液，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为175mg，叶绿素为55mg。
对比例2
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，粉碎；
步骤二、将粉碎的芹菜茎叶置于500mL锥形瓶中，以粉碎的芹菜茎叶与乙醇水溶液(浓度40％)的料液比为1g:18mL向锥形瓶中加入乙醇水溶液(浓度40％)，65℃提取3次，每次1h，冷却，过滤，滤液于50℃水浴中蒸发浓缩至呈粘稠膏状，移至真空十燥箱内50℃干燥2h，取出，冷却至室温，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为166mg，叶绿素为49mg。
对比例3
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，粉碎；
步骤二、将粉碎的芹菜茎叶置于500mL锥形瓶中，以粉碎的芹菜茎叶与乙醇水溶液(浓度40％)的料液比为1g:50mL向锥形瓶中加入乙醇水溶液(浓度40％)，85℃水浴1h，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为192mg，叶绿素为45mg。
对比例4
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，粉碎；
步骤二、将粉碎的芹菜茎叶置于500mL锥形瓶中，以粉碎的芹菜茎叶与乙醇水溶液(浓度40％)的料液比为1g:50mL向锥形瓶中加入乙醇水溶液(浓度40％)，60℃超声提取25min，超声功率为200W，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为176mg，叶绿素为49mg。
对比例5
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，粉碎；
步骤二、将粉碎的芹菜茎叶置于500mL锥形瓶中，以粉碎的芹菜茎叶与乙醇水溶液(浓度40％)的料液比为1g:50mL向锥形瓶中加入乙醇水溶液(浓度40％)，45℃恒温浸提1h，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为183mg，叶绿素为42mg。
对比例6
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，粉碎；
步骤二、将粉碎的芹菜茎叶置于500mL锥形瓶中，以粉碎的芹菜茎叶与乙醇丙酮混合水溶液(浓度90％，乙醇与丙酮体积比1:1)的料液比为1g:30mL向锥形瓶中加入乙醇丙酮混合水溶液(浓度90％，乙醇与丙酮体积比1:1)，50℃恒温浸提20min，过滤，即得产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为48mg，叶绿素为199mg。
对比例7
步骤一、取100g与实施例2的芹菜来源相同的清洗沥干后的芹菜茎叶，将芹菜茎叶切成1cm小段，加入密封避光的榨汁机中榨汁，得到60mL的芹菜浆；
步骤二、将芹菜浆置于500mL锥形瓶中，以芹菜浆与乙醇水溶液(浓度40％)的用量比为1g:50mL向锥形瓶中加入乙醇水溶液(浓度40％)，85℃水浴1h，得到产物。
经分析产物，100g芹菜提取的总黄酮为192mg，100g芹菜提取的叶绿素为126mg。
通过对比实施例2和对比例1～7可以看出，本发明的提取方法能够同时提取总黄酮和叶绿素，且提取量远高于现有技术。