本发明涉及一种保健食品的技术领域，特别涉及一种蜂胶软胶囊及其制备方法。
背景技术：
蜂胶是蜜蜂从植物的树芽、树皮等部位采集的树脂，再混以蜜蜂的舌腺、蜡腺等腺体分泌物，经蜜蜂加工转化而成的一种胶状物质。蜂胶具有抗菌性、抗真菌、抗病毒、消炎、保肝、抗氧化、抗癌等广泛的药理活性，不但能增强体液免疫功能，还能增强细胞免疫功能，对胸腺、脾脏等免疫系统产生强有力的功能调整，使机体免疫功能处于动态平衡的最佳状态。
现有市场上的蜂胶软胶囊在制备过程中需要加入多种稀释剂等辅料来保证胶囊的稳定性，使得蜂胶的主要活性成分总黄酮偏低，仅为6％左右，增强免疫力的保健效果不佳，且现有市场上的产品通常使用食用油作为基质，产品稳定性较差。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明目的在于提供一种稳定性好，主要成分总黄酮含量高，更容易为人体吸收利用的蜂胶软胶囊及其制备方法，在保证蜂胶软胶囊天然安全性的同时，确保蜂胶软胶囊的保健功效。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种蜂胶软胶囊内容物，包括如下重量百分比的组分：50～75％的蜂胶乙醇提取物和25～50％的聚乙二醇400；
优选的内容物包括如下重量百分含量的组分：60～70％的蜂胶乙醇提取物和30～40％的聚乙二醇400；
本发明提供了一种利用上述方案所述内容物制备的蜂胶软胶囊，包括内容物和胶皮，所述胶皮由包括明胶、甘油和水的原料制备得到；
优选的明胶、甘油和水的质量比为1:0.4～0.6:0.9～1.1；
本发明提供了一种上述方案所述蜂胶软胶囊的制备方法，包括如下步骤：
将蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400混合脱泡，得到内容物料液；
将甘油、水和明胶混合脱泡，得到胶液；
将所述内容物料液和胶液进行压丸处理，得到蜂胶软胶囊；
优选的蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400在温度为65～70℃的条件下混合；
优选的将甘油、水和明胶混合的过程为：将甘油和水的混合液加热至60～65℃，再与明胶混合，继续加热至70～75℃保温使明胶全部溶解；
优选的压丸处理后还包括定型、干燥、洗丸、晾丸和选丸；
优选的定型的环境温度为18～24℃；优选的定型的相对湿度为30～40％；优选的定型的时间为1.5～3h；
优选的干燥的温度为22～30℃；优选的干燥的相对湿度为30％～40％；优选的干燥的时间为18～30h。
本发明提供了一种蜂胶软胶囊，包括内容物和胶皮，所述内容物包括如下重量百分含量的组分：50～75％的蜂胶乙醇提取物和25～50％的聚乙二醇400；所述胶皮包括明胶、甘油和水。本发明提供的蜂胶软胶囊中仅添加聚乙二醇400为稀释剂，且含量控制在25～50％，辅料种类和用量少，与市场上其他添加植物油等多种辅料的同类产品相比质量更加稳定，不会出现分层现象；且本发明提供的蜂胶软胶囊主要活性成分总黄酮含量高，可以达到8.3％，更容易为人体吸收利用，生物利用度高，在保证蜂胶软胶囊天然安全性的同时，确保了产品的保健功效。
本发明提供的蜂胶软胶囊的制备方法步骤简单，产品质量容易控制，可以进行大规模的生产。
具体实施方式
本发明提供了一种蜂胶软胶囊内容物，包括如下重量百分比的组分：50～75％的蜂胶乙醇提取物和25～50％的聚乙二醇400。
在本发明中，所述蜂胶软胶囊内容物优选包括如下重量百分比的组分：60～70％的蜂胶乙醇提取物和30～40％的聚乙二醇400，更优选为63～65％的蜂胶乙醇提取物和35～37％的聚乙二醇400。
本发明提供的蜂胶软胶囊以聚乙二醇400为稀释剂，相比于市场上常用的甘油、大豆油来说溶解度更高，且本发明利用聚乙二醇400与蜂胶乙醇提取物混合，得到的混合物具有良好的均匀度及稳定性，产品不易出现分层现象；且本发明提供的蜂胶软胶囊中仅加入聚乙二醇400一种辅料，从而使胶囊中活性成分总黄酮含量更高，更容易为人体吸收利用。
本发明以蜂胶乙醇提取物为原料，蜂场采集的蜂胶毛胶的成分非常复杂，约由质量含量为50％的树脂和植物香脂、30％的蜂蜡、10％的芳香油物质、5％的花粉和5％的包括器官碎屑物、重金属杂质在内的其他物质组成，所以蜂胶在使用前必须进行提取，以除去粗蜂胶中的蜂蜡、重金属等杂质。本发明使用乙醇提取蜂胶，得到蜂胶乙醇提取物，将粗蜂胶中的有效成分提取出来，去除对人体有害的杂质。
在本发明中，所述蜂胶乙醇提取物的制备方法优选包括以下步骤：
将粗蜂胶冷冻后粉碎、过筛，得到蜂胶颗粒；
将所述蜂胶颗粒与乙醇水溶液混合，进行浸泡和沉淀，得到蜂胶乙醇提取液；
将所述蜂胶乙醇提取液过滤、浓缩和冷却，得到蜂胶乙醇提取物。
本发明将粗蜂胶冷冻后粉碎、过筛，得到蜂胶颗粒。在本发明中，所述冷冻的温度优选为-5～-15℃，更优选为-10℃；所述冷冻的时间优选为40～50h，更优选为45～48h；
本发明对蜂胶的粉碎方法没有特殊要求，使用本领域中熟知的粉碎方法即可；在本发明中，所述过筛的目数优选为10～15目，更优选为13～14目。
得到蜂胶颗粒后，本发明将蜂胶颗粒与乙醇水溶液混合，进行浸泡和沉淀，得到蜂胶乙醇提取液。在本发明中，所述乙醇水溶液的体积浓度优选为75～85％，更优选为80％；所述蜂胶颗粒重量与乙醇的体积比优选为1g：3～7ml，更优选为1g：4～5ml。
在本发明中，所述浸泡的温度为室温，无需进行加热和降温；所述浸泡的时间优选为60～84h，更优选为70～80h，最优选为72h；本发明优选在搅拌的条件下进行浸泡，所述搅拌的速率优选为50～100r/min，更优选为60～80r/min。所述浸泡完成后，本发明将蜂胶乙醇混合物进行静置沉淀，所述静置沉淀的时间优选为6～10h，更优选为8h。所述静置沉淀完成后，本发明优选将上清液分离，向沉淀中加入乙醇，重复上述浸泡和沉淀的步骤，优选重复3～5次，将得到的上清液合并，得到蜂胶乙醇提取液。
得到蜂胶乙醇提取液后，本发明将所述蜂胶乙醇提取液过滤、浓缩、冷却，得到蜂胶乙醇提取物。本发明优选使用减压蒸馏的方式进行浓缩，在本发明中，所述减压蒸馏的温度优选为30～50℃，更优选为40～45℃；本发明优选使用水浴加热的方式进行减压蒸馏，蒸馏至无乙醇析出即停止蒸馏，蒸馏得到的乙醇进行重复使用；本发明对过滤和冷却的方式没有特殊要求，使用本领域中熟知的过滤和冷却方式即可。
本发明提供了一种利用上述方案所述内容物制备的蜂胶软胶囊，包括内容物和胶皮，所述胶皮由包括明胶、甘油和水的原料制备得到。
本发明提供的蜂胶软胶囊包括内容物，所述内容物与上述方案一致，在此不再赘述。
本发明提供的蜂胶软胶囊包括胶皮，所述胶皮包裹上述技术方案所述内容物形成胶囊，所述胶皮由包括明胶、甘油和水的原料制备得到。在本发明中，所述明胶、甘油和水的质量比优选为1:0.4～0.6:0.9～1.1，更优选为1:0.45～0.55:0.95～1.05，最优选为1:0.5:1。本发明提供的蜂胶软胶囊以明胶、甘油和水为原料，制备得到胶皮，该胶皮软硬适中，弹性、稳定性良好。
在本发明中，所述单个蜂胶软胶囊内容物的含量优选为490～510mg，优选为495～505mg，最优选为500mg，所述胶皮的厚度优选为0.7～0.8mm，更优选为0.75mm。
本发明还提供了一种上述方案所述蜂胶软胶囊的制备方法，包括如下步骤：
将蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400混合脱泡，得到内容物料液；
将甘油、水和明胶混合脱泡，得到胶液；
将所述内容物料液和胶液进行压丸处理，得到蜂胶软胶囊。
本发明将蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400混合脱泡，得到内容物料液。在本发明中，所述蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400混合的温度优选为65～70℃，更优选为66～68℃；所述蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400优选在搅拌的条件下混合，所述搅拌的速率优选为50～100r/min，更优选为60～80r/min；所述搅拌的时间优选为0.9～1.5h，更优选为1～1.2h；所述蜂胶乙醇提取物的来源于制备方法与上述方案一致，在此不再赘述。
本发明优选使用抽真空的方式对蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400的混合液进行脱泡，本发明优选抽真空至真空度为-0.06MPa-0.08MPa，更优选为-0.07MPa，在真空状态下保持3～10min，直至混合液无气泡为止。
所述脱泡完成后，本发明优选将脱泡后的内容物料液进行过筛，所述过筛的目数优选为140～160目，更优选为150目，通过过筛去除内容物料液中的杂质；所述过筛完成后，本发明优选将内容物料液进行冷却静置，备用。
本发明将甘油、水和明胶混合脱泡，得到胶液。在本发明中，所述的水优选为纯化水。
在本发明中，所述甘油、水和明胶混合的过程优选为：将甘油和水的混合液加热至60～65℃，再与明胶混合，继续加热至70～75℃，在70～75℃下使明胶全部溶解；更优选为：将甘油和水的混合液加热至62～63℃，加入明胶，继续加热至72～73℃，在72～73℃下保持1.9～1.5h，至明胶全部溶解；本发明优选在搅拌的条件下将甘油、水和明胶混合，所述搅拌的速率优选为50～100r/min，更优选为60～80r/min。
在本发明中，所述对甘油、水和明胶的混合液进行脱泡的方法与对蜂胶乙醇提取物和聚乙二醇400的混合液进行脱泡的方法一致，在此不再赘述。
所述脱泡完成后，本发明优选将得到的胶液过筛，所述过筛的目数优选为90～110目，更优选为100目；所述过筛完成后，本发明优选将胶液保温备用，所述保温的温度优选为55～65℃，更优选为58～62℃；本发明优选使用贮胶罐进行保温。
得到内容物料液和胶液后，本发明将所述内容物料液和胶液进行压丸处理，得到蜂胶软胶囊。本发明优选使用压丸机进行压丸处理，本发明对压丸处理的具体过程没有特殊要求，使用本领域熟知的压丸处理方法即可。
所述压丸后，本发明优选将所述压丸得到的软胶囊雏品定型、干燥、洗丸、晾丸和选丸，得到蜂胶软胶囊。在本发明中，所述定型的环境温度优选为18～24℃，更优选为20～22℃；所述定型相对湿度优选为30～40％，更优选为33～35％，所述定型的时间优选为1.5～3h，更优选为2～2.5h；本发明优选使用定型转笼进行定型处理。
在本发明中，所述干燥的温度优选为22～30℃，更优选为25～28℃；所述干燥的相对湿度优选为30％～40％，更优选为33％～35％；所述干燥的时间优选为18～30h，更优选为20～25h。
在本发明中，所述洗丸优选使用食用酒精进行清洗，所述食用酒精的体积浓度优选为93～96％，更优选为95％，本发明优选使用洗丸机进行洗丸，通过洗丸除去胶囊表面的油状物。
在本发明中，所述晾丸的温度优选为22～30℃，更优选为25～28℃；所述晾丸的相对湿度优选为30％～40％，更优选为33％～35％。
在本发明中，所述选丸的步骤优选为：将晾好的软胶囊置于灯检台上进行挑拣，除去大小丸、异型丸、瘪丸、破裂丸、薄壁丸、明显的网印丸、气泡丸、粘连丸等不合格的软胶囊。
本发明优选在10万级洁净生产区完成上述蜂胶软胶囊的制备。
下面结合实施例对本发明提供的蜂胶软胶囊及其制备方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将蜂胶乙醇提取物2.5kg加入2.5kg聚乙二醇400中，在65℃下搅拌1h，控制搅拌速率为500r/min，待蜂胶乙醇提取物完全溶解后，抽真空至-0.06MPa，至料液中无气泡，之后将料液过150目筛，冷却静置，得到内容物料液，备用；
将甘油1.5kg，纯化水1.5kg投入化胶罐中，加热至65℃后加入明胶3kg，继续加热至75℃，在75℃条件下搅拌1h，至明胶全部溶解；混合均匀后抽真空至-0.06MPa，脱尽气泡后过100目筛，得到胶液，将胶液放置于55℃的贮胶罐中保温，备用；
将内容物料液和胶液通过压丸机进行压丸处理，制成软胶囊，控制蜂胶软胶囊内容物的含量为500mg/粒；
将压制好的软胶囊置于定型转笼中进行定型处理，控制定型的环境温度为20℃，相对湿度30％，定型2小时；
将定型处理后的软胶囊进行干燥，干燥温度为25℃，相对湿度为30％干燥时间为24h；
将干燥后的软胶囊置于洗丸机中，用95％食用酒精清洗，除去表面的油状物；
将清洗后的软胶囊进行干燥，控制干燥温度为30℃，相对湿度为30％；
将干燥好的软胶囊置于灯检台上进行挑拣，除去大小丸、异型丸、瘪丸、破裂丸、薄壁丸、明显的网印丸、气泡丸、粘连丸等不合格的软胶囊。
上述操作均在30万级洁净区内完成。
对所得蜂胶软胶囊的数量进行统计，可得合格的蜂胶软胶囊0.9779万粒，成品得率为97.79％。
实施例2
将蜂胶乙醇提取物3.0kg加入2.0kg聚乙二醇400中，在70℃下搅拌1h，控制搅拌速率为600r/min，待蜂胶乙醇提取物完全溶解后，抽真空至-0.08MPa，至料液中无气泡，之后将料液过150目筛，冷却静置，得到内容物料液，备用；
将甘油1.5kg，纯化水3kg投入化胶罐中，加热至60℃后加入明胶3kg，继续加热至70℃，在70℃条件下搅拌1h，至明胶全部溶解；混合均匀后抽真空至-0.08MPa，脱尽气泡后过100目筛，得到胶液，将胶液放置于65℃的贮胶罐中保温，备用；
将内容物料液和胶液通过压丸机进行压丸处理，制成软胶囊，控制蜂胶软胶囊内容物的含量为500mg/粒；
将压制好的软胶囊置于定型转笼中进行定型处理，控制定型的环境温度为18℃，相对湿度40％，定型2小时；
将定型处理后的软胶囊进行干燥，干燥温度为30℃，相对湿度为40％，干燥时间为18h；
将干燥后的软胶囊置于洗丸机中，用95％食用酒精清洗，除去表面的油状物；
将清洗后的软胶囊进行晾丸，控制晾丸温度为22℃，相对湿度为40％；
将干燥好的软胶囊置于灯检台上进行挑拣，除去大小丸、异型丸、瘪丸、破裂丸、薄壁丸、明显的网印丸、气泡丸、粘连丸等不合格的软胶囊。
上述操作均在10万级洁净区内完成。
对所得蜂胶软胶囊的数量进行统计，可得合格的蜂胶软胶囊0.9819万粒，成品得率为98.19％。
实施例3
将蜂胶乙醇提取物3.75kg加入1.25kg聚乙二醇400中，在70℃下搅拌1.5h，控制搅拌速率为800r/min，待蜂胶乙醇提取物完全溶解后，抽真空至-0.07MPa，至料液中无气泡，之后将料液过150目筛，冷却静置，得到内容物料液，备用；
将甘油1.5kg，纯化水3kg投入化胶罐中，加热至65℃后加入明胶3kg，继续加热至70℃，在70℃条件下搅拌1h，至明胶全部溶解；混合均匀后抽真空至-0.08MPa，脱尽气泡后过110目筛，得到胶液，将胶液放置于60℃的贮胶罐中保温，备用；
将内容物料液和胶液通过压丸机进行压丸处理，制成软胶囊，控制蜂胶软胶囊内容物的含量为500mg/粒；
将压制好的软胶囊置于定型转笼中进行定型处理，控制定型的环境温度为24℃，相对湿度35％，定型2小时；
将定型处理后的软胶囊进行干燥，干燥温度为25℃，相对湿度为35％，干燥时间为20h；
将干燥后的软胶囊置于洗丸机中，用95％食用酒精清洗，除去表面的油状物；
将清洗后的软胶囊进行晾丸，控制晾丸温度为25℃，相对湿度为35％；
将干燥好的软胶囊置于灯检台上进行挑拣，除去大小丸、异型丸、瘪丸、破裂丸、薄壁丸、明显的网印丸、气泡丸、粘连丸等不合格的软胶囊。
上述操作均在10万级洁净区内完成。
对所得蜂胶软胶囊的数量进行统计，可得合格的蜂胶软胶囊0.9758万粒，成品得率为97.58％。
实施例4
对实施例1～3中得到的蜂胶软胶囊进行加速试验，加速试验在恒温恒湿箱中进行，恒温恒湿箱的温度设置为(38±1)℃，相对湿度为75％，将蜂胶软胶囊在恒温恒湿箱中持续放置三个月，每月对蜂胶软胶囊的功效成分总黄酮的含量以及理化、微生物指标进行测定，结果如表1～表3所示：
表1实施例1所得蜂胶软胶囊加速实验结果
表2实施例2所得蜂胶软胶囊加速实验结果
表3实施例3所得蜂胶软胶囊加速实验结果
由上述试验结果可以看出，本发明提供的蜂胶软胶囊通过三个月的加速试验观察，其总黄酮含量及各项理化、微生物等指标均无明显变化，其中功效成分总黄酮的含量在8％以上，总黄酮含量较高，且比较稳定；这说明本发明提供的蜂胶软胶囊稳定性好，保健效果能够得到保障。
实施例5
根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)，对本发明提供的蜂胶软胶囊的增强免疫功能进行评价。
1.蜂胶软胶囊对小鼠体重的影响
将蜂胶软胶囊设置低、中、高三个剂量组，分别相当于人实际用量的5、10和20倍，将小鼠分为5组，分别为免疫Ⅰ组、免疫Ⅱ组、免疫Ⅲ组、免疫Ⅳ组和免疫Ⅴ组，连续30天经口给予小鼠蜂胶软胶囊，观察给予蜂胶软胶囊后小鼠的体重变化，另设置一溶剂对照组，其余条件与实验组相同，试验结果如表4～8所示。
表4免疫Ⅰ组实验前后小鼠体重记录
表5免疫Ⅱ组实验前后小鼠体重记录
表6免疫Ⅲ组实验前后小鼠体重记录
表7免疫Ⅳ组实验前后小鼠体重记录
表8免疫Ⅴ组实验前后小鼠体重记录
根据上述试验结果可以看出，经口给予小鼠不同剂量的蜂胶胶囊30天，各个试验阶段的不同剂量组小鼠体重增长与对照组比较，均无显著性差异(P＞0.05)，这说明本发明提供的蜂胶软胶囊并不会影响小鼠的正常生理功能，且在后续的试验中小鼠的体重变化不会对试验结果产生影响。
2.蜂胶软胶囊对小鼠脏器/体重比的影响
观测经口给予蜂胶软胶囊30天后免疫Ⅰ组中小鼠的脏器/体重比变化，试验结果见表9。
表9蜂胶软胶囊对小鼠胸腺/体重比、脾脏/体重比的影响
根据上述试验结果可以看出，经口给予小鼠不同剂量的蜂胶胶囊30天，小鼠的胸腺/体重以及脾脏/体重比值与阴性对照组相比，均无显著性差异(P＞0.05)，说明本发明提供的蜂胶软胶囊不影响脏器器官的正常生理功能。
3.蜂胶软胶囊对小鼠细胞免疫功能的影响
对经口给予蜂胶软胶囊30天后免疫Ⅰ组中小鼠的细胞免疫功能进行评价，试验结果见表10。
表10蜂胶软胶囊对小鼠细胞免疫功能的影响
从表10的试验结果可以看出，样品的各剂量组小鼠的淋巴细胞转化能力均高于对照组，其中的高剂量组与对照组相比，有极显著差异(P＜0.01)；样品的各剂量组小鼠的左右耳片重量差值大于对照组，其中的高、中剂量组与对照组相比，有极显著差异(P＜0.01)，说明本发明提供的蜂胶软胶囊能够增强细胞的免疫功能。
4.蜂胶软胶囊对小鼠体液免疫功能的影响
对经口给予蜂胶软胶囊30天后免疫Ⅰ组中小鼠的体液免疫功能进行评价，试验结果见表11。
表11蜂胶软胶囊对小鼠体液免疫功能的影响
根据上述试验结果可以看出，样品各个剂量组小鼠的抗体生成细胞数均高于对照组，与对照组相比，高剂量组有极显著差异(P＜0.01)；样品各剂量小鼠的溶血素抗体积数均高于对照组，其中高、中剂量组与对照组相比差异极显著(P＜0.01)，这说明本发明提供的蜂胶软胶囊能够显著增强小鼠的体液免疫功能(抗体生成细胞增殖能力)。
5.蜂胶软胶囊对小鼠单核-巨噬细胞功能的影响
对经口给予蜂胶软胶囊30天后免疫Ⅰ组中小鼠的单核-巨噬细胞功能进行评价，试验结果见表12～13。
表12蜂胶软胶囊对单核-巨噬细胞吞噬功能的影响(碳廓清)
表13蜂胶软胶囊对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
从表12可以看出，样品的各个剂量组小鼠的吞噬指数均高于对照组，但相比对照组差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能没有明显的促进作用。
从表13中能够看到，样品各个剂量组小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数均高于对照组，其中高、中剂量组的吞噬率以及吞噬指数与对照组的差异具有显著性(P＜0.01或P＜0.05)，表明该样品具有促进小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能的作用。
6.蜂胶软胶囊对小鼠NK细胞活性的影响
对经口给予蜂胶软胶囊30天后免疫Ⅰ组中小鼠的NK细胞活性的影响进行评价，试验结果见表14。
表14蜂胶软胶囊对小鼠NK细胞活性的影响
从表14中能够看出，高剂量组小鼠的NK细胞活性均高于对照组，但与对照组比较差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对小鼠的NK细胞活性影响较小。
综合上述蜂胶软胶囊的各项增强免疫功能的评价结果可以看出，与对照组相比，蜂胶对小鼠体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、单核-巨噬细胞碳廓清功能、NK细胞活性等虽然均无明显影响(P＞0.05)。但高剂量(666mg/kg.bw)与中剂量(333mg/kg.bw)的蜂胶软胶囊能明显提高小鼠细胞免疫功能(迟发型变态反应)、体液免疫功能(血清溶血素水平)以及小鼠单核-巨噬细胞功能(腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力)，高剂量(666mg/kg.bw)还能明显增强细胞免疫功能(淋巴细胞增殖能力)和体液免疫功能(抗体生成细胞增殖能力)，而根据保健食品增强免疫力功能评价标准，本发明提供的蜂胶软胶囊具有显著的增强免疫力的功能，保健效果优异。
由以上实施例可知，本发明提供的蜂胶软胶囊中主要活性成分总黄酮含量高，性质稳定，不易出现分层现象，且增强免疫力的保健功能优异；本发明提供的蜂胶软胶囊的制备方法工艺简单、成品率高，适于大批量生产。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。