一种锦灯笼清火胶囊的制备方法与流程

本发明涉及生物医药领域，特别涉及一种锦灯笼清火胶囊的制备方法。

背景技术：

锦灯笼的药用来源地理分布较广，以东北三省品质最佳，急慢性咽炎和扁桃体炎时目前常见病和多发病，现在临床用药多为合成的西药，毒副作用大，而且效果差。

技术实现要素：

本发明提供了锦灯笼清火胶囊的制备方法，并保持锦灯笼的无毒害纯度高针对于清热解毒效果更好。

本发明是根据以下方法进行的，包括下列步骤：

取锦灯笼干燥(干燥温度为50-60℃)至恒重，按质量比1-2：30加入提取溶剂(50％-70％的乙醇溶液，优选为70％乙醇)，浸泡12-24h后，于加热套上回流提取，提取30min-50min，次数2-3次，每次的提取液量为原重量的20-30％，合并提取液后经减压浓缩至提取物样品浓度为1mg/L，所得得到的提取物样品经过预先填装好的D101树脂柱中，先经过3-4倍柱体积纯水淋洗，后洗脱液弃去；后用3-4倍柱体积75％乙醇溶液洗脱，收集、浓缩75％乙醇洗脱液，待无乙醇味后，经冷冻干燥，制得锦灯笼提取物粉末。

所述的将锦灯笼提取物粉末为原始重量的30-50％。

所述的提取溶剂中含有1％的碳酸氢钠。

本发明的优势是：

锦灯笼清火胶囊采取特殊工艺，可掩盖药物的不良气味，提高药物稳定性，且服用方便，因此将锦灯笼中清热解毒、利咽化痰的主要化学成分提取纯化，制成有利于服用的胶囊剂有较高的社会价值和经济价值。

附图说明

图1为锦灯笼提取物中黄酮类化合物的纯化的线性图。

图2为乙醇体积分数对总黄酮提取的影响图。

图3为料液比对总黄酮提取的影响图。

图4为取时间对总黄酮提取的影响图。

图5为提取次数对总黄酮提取的影响图。

具体实施方式

1.1本发明使用的仪器与试药：

TU-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)，VFD-2000冻干机(北京博医康实验仪器有限公司)，旋转蒸发仪(上海亚荣)。

芦丁对照品(中国食品药品检定研究院，纯度>98％)，锦灯笼采摘时晒干，用前60℃烘干至恒重，所用试剂均为分析纯。

1.2溶液的配制：

精密称取芦丁对照品25mg于棕色50mL量瓶中，用乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，得0.5mg/mL芦丁标准溶液，冷藏于4℃冰箱中备用。

1.3标准曲线的绘制：

精密吸取芦丁对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0mL，分别置于50mL量瓶中，各加乙醇定容，在350nm处测吸光度A。以吸光度A为纵坐标(y)，浓度为横坐标(x)，进行回归分析得线性方程；r＝0.9993，表明在该方法在10ug/mL～80ug/mL范围内线性关系良好。

实施例1

使用上述的试药锦灯笼样品中黄酮含量的测定：

取锦灯笼干燥粉末1g，按料液比加入提取溶剂(1：30)，浸泡24h后，于加热套上回流提取，提取45min，次数3次合并提取液后经减压干燥得提取物样品50mg，加乙醇溶解并转移定容于50mL量瓶中，作为锦灯笼提取物的供试品液,为提高提取物中主要药效成分的含量1mg/L，去除色素、糖类等其他化合物，应用大孔树脂对锦灯笼提取物进行纯化。纯化工艺如下：

锦灯笼提取物中黄酮类化合物的纯化

应用优化后的提取工艺制得锦灯笼提取物，加水溶解成浓度为1mg/mL的上样溶液，缓慢加入到预先填装好的D101树脂柱中，先经过3倍柱体积纯水淋洗，后洗脱液弃去；后用4倍柱体积75％乙醇溶液洗脱，收集、浓缩75％乙醇洗脱液，待无乙醇味后，用冻干机冷冻干燥制成锦灯笼提取物的冻干粉。精密称取冻干粉0.05g，加乙醇溶液溶解并定容于50mL量瓶中，按上述方法测定纯化后提取物中黄酮的含量。结果显示，经大孔树脂纯化后，提取物中黄酮类成分的含量增加近2倍。

实施例2

乙醇体积分数对总黄酮提取的影响：

按实施例1的方法操作，分别用纯水、30％乙醇，50％乙醇，60％乙醇，70％乙醇，80％乙醇和90％乙醇溶液浸泡提取，以不含芦丁的乙醇溶液作为空白样品，测定上述条件下锦灯笼提取物中的总黄酮含量。结果显示，随着提取溶液中乙醇的增加，黄酮类成分也随之增加，当使用70％乙醇作为提取溶剂时提取物中的总黄酮含量最高，而高乙醇浓度的提取率反而下降。

实施例3

料液比对总黄酮提取的影响：

按实施例1的方法操作，分别按1：10，1：20，1：30，1：40，1：50加入提取溶剂，以不含芦丁的乙醇溶液为空白样品，测定上述条件下锦灯笼提取物中的总黄酮含量。结果显示，当料液比增加到1：20时，总黄酮的含量明显增加，料液比1：30时含量最高，随后随着料液比的增加，总黄铜的含量增加并不显著，考虑到环保和工业生产成本最终确定料液比为1：30。

实施例4提取时间对总黄酮提取的影响：

按实施例1的方法操作，分别提取30min，40min，50min，60min和90min，以不含芦丁的乙醇溶液为空白样品，测定上述条件下锦灯笼提取物中的总黄酮含量。结果显示，提取40min总黄酮的含量最高，随后黄酮的含量无明显增加。

实施例5提取次数对总黄酮提取的影响

按实施例1的方法操作，分别提取1，2，3，4次，以不含芦丁的乙醇溶液为空白样品，测定上述条件下锦灯笼提取物中的总黄酮含量。结果显示，提取3次后，黄酮类成分的含量不再增加，因此确定提取次数为3次。

实施例6

所述的提取溶剂中含有质量浓度为1％的碳酸氢钠，最终得到的黄酮含量增高为2mg/L。

运用单因素考察法考察了锦灯笼中黄酮类成分的提取工艺，最终确定的提取工艺为70％乙醇溶液为提取溶剂，料液比为1：30，提取3次，每次40min。所得粗提物用大孔树脂进行纯化，收集75％乙醇洗脱物，经冷冻干燥，制得锦灯笼提取物粉末。将提取物粉碎后，过筛，填装至空胶囊中，制得锦灯笼清火胶囊。此方法简单、易行且环境友好，可有助于锦灯笼资源的合理开发拓展。