单独和与PDE5抑制剂组合的sGC刺激剂、sGC活化剂用于治疗伴随系统性硬化症(SSc)的指溃疡(DU)的用途的制作方法

单独或与pde5抑制剂组合的sgc刺激剂、sgc活化剂用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的用途。

发明背景

系统性硬化症和伴随的指溃疡(du)

系统性硬化症(ssc)的发病机制仍不清楚，且仍然难以捉摸。然而，硬皮病是非遗传性、非感染性疾病，且被认为是自身免疫性疾病。ssc具有通过真皮中细胞外基质的过量沉积(导致皮肤纤维化)触发的多种症状。在后期，ssc的特征在于进行性组织纤维化，影响其它内脏，如肠、肺或肾。因此，硬皮病是该疾病的标志，还包括例如肺纤维化、肾纤维化、心脏、肠或血管的纤维化。除了皮肤和内部器官中的过量纤维化外，ssc的特征还在于血管病变和微血管病变。特别是，小血管血管病变和伴随的血管灌注不良和局部缺血可引起雷诺氏现象(rp)，也引起指溃疡(du)的形成。而组织纤维化可引起终末器官衰竭并且导致具有终末期ssc的患者中的高发病率和死亡率，du的形成显著降低ssc患者的生活质量、损害手部功能且导致残疾。(harris等人2005-kelley´stextbookofrhematology第7版elseviersaunders,philadelphiapa)。

还没有可用的系统性硬化症(ssc)的病因治疗，且目前的疗法基于经由皮质类固醇、环磷酰胺、甲氨蝶呤对免疫系统的抑制。更近来，激酶抑制剂和抗炎药作为ssc中的免疫抑制剂和抗纤维化药剂正在研究中，但耐受性在ssc患者中受限(khanna和denton2010-best.pract.res.clin.rheumatol.24:387-400,onganddenton2010-curr.opin.rheumatol.22:264-272,spiera2011-ann.rheum.dis.epubmar2011)。作为独立治疗或组合使用的这些疗法的效力有限并且表现出相当大的副作用。因此，迫切需要在ssc中有效和安全的替代治疗选项。此外，目前还没有批准用于du的愈合的治疗，但使用血管活性药物作为前列环素激动剂和内皮素拮抗剂。

cgmp的抗纤维化作用：

数十年前发现环核苷酸(环单磷酸腺苷(camp)和环单磷酸鸟苷(cgmp))，并且代表细胞内最重要的第二信使途径之一。充分确立的是，细胞内cgmp库的调节对生理学和病理生理学具有重大影响，并且是药理学干预的一个基本原则(evgenov等人2006-nat.rev.drug.discov.5(9):755-768)。除了治疗心血管、肺或cns-病症之外，存在充分的证据证明cgmp的增加对于泌尿道病症同样是一种非常有效的治疗选项(sandner等人2009–handbookexper.pharmacol.191:507-531)。pde5抑制剂是用于治疗勃起功能障碍(ed)的金标准，但显示，pde5抑制剂可以用于治疗特征在于膀胱过度活动(oab)和下尿路症状(luts)的症状性bph(porst等人2008-curr.urol.rep.9:295-301;.mcvary等人2007-j.urol.177:1071-1077,jurol.177:1401-1407,kaplan和gonzalez.2007-rev.urol.9:73-77)。尚未理解伐地那非、sgc刺激剂和sgc活化剂的抗纤维化作用。存在一些关于一氧化氮的抗纤维化作用的描述，其据推测由其它器官中的cgmp介导，并且pde5抑制剂或鸟苷酸环化酶刺激剂已经分别在阴茎纤维化(peyronie氏病)(ferrini等人2006-b.j.urol.97:625-633)和肝纤维化(knorr等人2008-arzneimittelforschung58:71-80)中显示效力。

不知道no/cgmp系统是否参与ssc且cgmp增加是否为该疾病提供治疗选项。我们假设-独立于内源性no/cgmp产生-sgc刺激剂和活化剂通过减少皮肤纤维化可能是系统性硬化症(ssc)的有效治疗选项。在wo2011/147810中，我们最近已显示，单独和与pde5抑制剂组合的sgc刺激剂、sgc活化剂可以直接靶向皮肤纤维化，所述皮肤纤维化是系统性硬化症(ssc)的一种标志。这清楚地表明，单独和与pde5抑制剂组合的sgc刺激剂、sgc活化剂是ssc的有效的未来治疗选项。然而，不知道ssc患者中的血管病变(其导致例如du形成(du为ssc中最麻烦的症状之一))是否也可以用单独和与pde5抑制剂组合的sgc刺激剂、sgc活化剂进行有效治疗。由于这些化合物可诱导外周血管舒张，所以可以假设ssc驱动的血管病变可能减少，从而防止du的新形成。然而，考虑到单独和与pde5抑制剂组合的sgc刺激剂/sgc活化剂的抗纤维化作用模式，不清楚ssc驱动的du是否也可以愈合。因此，增加的血流量可能被减少的胶原合成或细胞外基质的合成(其是伤口闭合所必不可少的)抵消，而这继而可能削弱ssc患者中的伤口愈合。

因此，我们在tsk小鼠(特征在于过量皮肤纤维化的ssc的动物模型)中针对伤口愈合研究sgc刺激剂和sgc活化剂，即下式的化合物，以及其与pde5抑制剂的组合产品：

；

我们在体内动物模型中发现：

•与wt小鼠相比，tsk小鼠具有减弱的伤口愈合。

•sgc刺激剂或sgc活化剂，即根据式(27)和(3)的化合物在tsk小鼠中显著且剂量依赖性地加速伤口愈合。

•sgc刺激剂或sgc活化剂，即根据式(27)和(3)的化合物使愈合时间正常化至健康wt对照小鼠。这些数据表明，尽管scc刺激剂和sgc活化剂在ssc中具有抗纤维化作用，但ssc中的伤口愈合可以显著加速，并且正常化至健康对照个体的水平。

总之，我们完全意外且首次发现，sgc刺激剂或sgc活化剂，即根据式(27)和(3)的化合物(其在炎性和非炎性ssc的不同动物模型中防止纤维化且退化已确定的纤维化)，也可以导致tsk-小鼠ssc模型中的显著增强的伤口愈合。

总之，这些数据首次表明，sgc刺激剂和sgc活化剂，即根据式(27)和(3)的化合物可以改善ssc中的伤口愈合。这些数据还表明，尽管存在抗纤维化作用模式，但这些化合物能够治愈ssc患者中的du。

发明公开内容

本发明的治疗剂所解决的、特别且相当有利地可以通过单独或与pde5抑制剂组合的上述sgc刺激剂或sgc活化剂治疗的纤维化病症包括但不限于系统性硬化症(ssc)、系统性硬化症(ssc)伴随的纤维化和纤维化疾病。

本发明的治疗剂所解决的、特别且相当有利地可以通过单独或与pde5抑制剂组合的上述sgc刺激剂或sgc活化剂治疗的纤维化病症包括但不限于系统性硬化症(ssc)伴随的血管病变、雷诺氏现象(rd)和指溃疡(du)的形成和愈合。

系统性硬化症(ssc)是指但不限于弥漫性系统性硬化症(dssc)、局限性系统性硬化症(issc)、重叠型系统性硬化症、未分化型系统性硬化症、无硬皮病的系统性硬化症、皮肤纤维化、硬皮病、肾源性纤维化皮肤病变(nfd)、肾源性系统性纤维化(nsf)、瘢痕疙瘩形成。

ssc伴随的纤维化是指内部器官(包括但不限于肠、肺、肾和血管)的纤维化。

纤维化疾病包括但不限于这样的病况，其中胶原蛋白过量(不依赖于病因，即自身免疫性病症、慢性移植物抗宿主病、放射疗法、中毒、糖尿病、手术)导致皮肤、肠、肝、肺、心脏、膀胱、前列腺、血管的纤维化或组织中的任何其它局部或全身性纤维化病况。

在本发明的意义上，术语纤维化疾病特别包括以下术语：肝纤维化、肝硬化、肺纤维化、心内膜心肌纤维化、肾病、肾小球性肾炎、间质性肾纤维化、由糖尿病引起的纤维化病变、骨髓纤维化和类似的纤维化疾病、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、肥大性瘢痕(包括手术后)、痣、糖尿病性视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变和结缔组织疾病(例如肉状瘤病)。

ssc伴随的血管病变包括但不限于血管闭塞性疾病血管炎、微血管病变和大血管病变、雷诺氏现象、指缺血性损伤、指溃疡、指坏死性损伤、坏疽和指损失。

在本发明的意义上，sgc刺激剂是一氧化氮(no)非依赖性和血红素(heam)依赖性的可溶性鸟苷酸环化酶调节剂。

在本发明的意义上，sgc活化剂是一氧化氮(no)和血红素(heam)非依赖性的可溶性鸟苷酸环化酶调节剂。

本发明的一个优选实施方案是根据wo03/097063、wo03/09545、wo04/009589、wo03/004503、wo02/070462、wo2007/045366、wo2007/045369、wo2007/045370、wo2007/045433、wo2007/045367、wo2007/124854、wo2007/128454、wo2008/031513、wo2008/061657、wo2008/119457、wo2008/119458、wo2009/127338、wo2010/079120、wo2010/102717、wo2011/051165、wo2011/147809、wo2011/141409、wo2014/012935、wo2012/059549、wo2012/004259、wo2012/004258、wo2012/059548、wo2012/028647、wo2012/152630、wo2012/076466、wo2014/068099、wo2014/068104、wo2012/143510、wo2012/139888、wo2012/152629、wo2013/004785、wo2013/104598、wo2013/104597、wo2013/030288、wo2013/104703、wo2013/131923、wo2013/174736、wo2014/012934、wo2014/068095、wo2014/195333、wo2014/128109、wo2014/131760、wo2014/131741、wo2015/018808、wo2015/004105、wo2015/018814、wo98/16223、wo98/16507、wo98/23619、wo00/06569、wo01/19776、wo01/19780、wo01/19778、wo02/042299、wo02/092596、wo02/042300、wo02/042301、wo02/036120、wo02/042302、wo02/070459、wo02/070460、wo02/070461、wo02/070510、wo2012/165399、wo2014/084312、wo2011115804、wo2012003405、wo2012064559、wo2014/047111、wo2014/047325、wo2011/149921、wo2010/065275、wo2011/119518中公开的化合物的化合物用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。本发明的一个优选实施方案是根据式(1)-(28)的化合物用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途，如下所示：

2-[1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-(4-吗啉基)-4,6-嘧啶二胺(1)，其公开为wo00/06569中的实施例16，

•2-[1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-(4-吡啶基)-4-嘧啶胺(2)，其公开为wo02/42301中的实施例1，

•4,6-二氨基-2-[1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-嘧啶基(甲基)氨基甲酸甲酯(3)，其公开为wo03/095451中的实施例8，

•4,6-二氨基-2-[1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-嘧啶基氨基甲酸甲酯(4)，其公开为wo03/095451中的实施例5，

•4-({(4-羧基丁基)[2-(2-{[4-(2-苯基乙基)苄基]氧基}苯基)乙基]氨基}甲基)甲酸(5)，其公开为wo01/019780中的实施例8a，

•{4,6-二氨基-2-[5-氟-1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]嘧啶-5-基}氨基甲酸甲酯(6)、{4,6-二氨基-2-[5-氟-1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]嘧啶-5-基}甲基氨基甲酸甲酯(7)、{4,6-二氨基-2-[5-氟-1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]嘧啶-5-基}(2,2,2-三氟乙基)氨基甲酸甲酯(8)，其公开于wo2011/147809中，

•作为钠盐的5-氯-2-(5-氯噻吩-2-磺酰基氨基-n-(4-(吗啉-4-磺酰基)-苯基)-苯甲酰胺(9)，其公开于wo00/02851中，

•2-(4-氯-苯基磺酰基氨基)-4,5-二甲氧基-n-(4-(硫代吗啉-4-磺酰基)-苯基)-苯甲酰胺(10)，其公开于wo00/02851中，

•1-{6-[5-氯-2-({4-反-4-}三氟甲基)环己基]苄基}氧基)苯基]吡啶-2-基}-5-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酸(11)，其公开于wo2009/032249中，

•1-[6-(2-(2-甲基-4-(4-三氟甲氧基苯基)苄基氧基)-苯基)吡啶-2-基]-5-三氟甲基-吡唑-4-甲酸(12)，其公开于wo2009/071504中，

•1-[6-(3,4-二氯苯基)-2-吡啶基]-5-(三氟甲基)-1h-吡唑-4-甲酸(13)，其公开于wo2009/068652中，

•1-({2-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1,3-噻唑-4-基}甲基)-1h-吡唑-4-甲酸(14),4-({2-[3-(三氟甲基)苯基]-1,3-噻唑-4-基}甲基)苯甲酸(15)和1-({2-[2-氟-3-(三氟甲基)苯基]-5-甲基-1,3-噻唑-4-基}甲基)-1h-吡唑-4-甲酸(16)，其公开于wo2009/123316中，

•4-氨基-2-[5-氯-3-(3,3,3-三氟丙基)-1h-吲唑-1-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(17)、4-氨基-2-[5-氯-3-(2,3,6-三氟苄基)-1h-吲唑-1-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(18)、4-氨基-5,5-二甲基-2-[3-(2,3,6-三氟苄基)-1h-噻吩并[3,4-c]吡唑-1-基]-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(19)、4-氨基-5,5-二甲基-2-[3-(2,3,6-三氟苄基)-1h-噻吩并[2,3-d]吡唑-1-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(20)、4-氨基-5,5-二甲基-2-[7-(2,3,6-三氟苄基)咪唑并[1,5-b]哒嗪-5-基]-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(21)、4-氨基-2-[6-氯-3-(2,3,6-三氟苄基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-基]]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(22)、4-氨基-2-[6-氟-3-(2,3,6-三氟苄基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-基]]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(23)、4-氨基-2-[6-氟-3-(2,3,6-三氟苄基)6-氟咪唑并[1,5-a]吡啶-1-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(24)、4-氨基-5,5-二甲基-2-[3-(2,4,6-三氟苄基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-基]]-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(25)、4-氨基-2-[3-(2-环戊基乙基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(26)，其公开于wo2010/065275中，

•已知为bay41-2272的3-(4-氨基-5-环丙基嘧啶-2-基)-1-(2-氟苄基)-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶(27)，其公开为wo00/06568中的实施例1，

•2-{5-氟-1-[(3-氟吡啶-2-基)甲基]-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基}-5-甲基-5-(三氟甲基)-4-[(3,3,3-三氟丙基)氨基]-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(28)，其公开为wo2014/131760中的实施例1。

根据式(1)、(2)、(3)、(4)、(6)-(8)和(17)-(27)的化合物已知为sgc刺激剂。优选使用根据式(1)、(2)、(3)、(4)、(6)、(7)、(27)和(28)的化合物。

特别优选使用根据式(3)、(4)、(6)、(7)和(28)的化合物。

特别优选使用根据式(3)、(4)、(6)和(28)的化合物。

特别优选使用根据式(3)、(7)和(28)的化合物。

特别优选使用根据式(3)的化合物。

根据式(5)和(9)-(16)的化合物已知为sgc活化剂。优选使用根据式(5)的化合物。

本发明的另一个实施方案是可溶性鸟苷酸环化酶的刺激剂和/或活化剂与pde5抑制剂的组合产品用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。

优选使用以下pde5抑制剂用于与sgc刺激剂和/或活化剂的组合产品：

他达拉非((6r,12ar)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-(3,4-亚甲基-二氧基苯基)吡嗪并(1',2':1,6)吡啶并(3,4-b)吲哚-1,4-二酮)、伐地那非(2-(2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基-1-磺酰基)苯基)-5-甲基-7-丙基-3h-咪唑并(5,1-f)(1,2,4)三嗪-4-酮)、西地那非(3-[2-乙氧基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基-苯基]-7-甲基-9-丙基-2,4,7,8-四氮杂双环[4.3.0]壬-3,8,10-三烯-5-酮)、乌地那非5-[2-丙基氧基-5-(1-甲基-2-吡咯烷基乙基酰氨基磺酰基)苯基]-甲基-3-丙基-1,6-二氢-7h-吡唑并(4,3-d)嘧啶-7-酮、dasantafil7-(3-溴-4-甲氧基苄基)-1-乙基-8-[[(1,2)-2-羟基环戊基]氨基]-3-(2-羟基乙基)-3,7-二氢-1-嘌呤-2,6-二酮、阿伐那非4-{[(3-氯-4-甲氧基苯基)甲基]氨基}-2-[(2s)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-基]-n-(嘧啶-2-基甲基)嘧啶-5-甲酰胺、米罗那非、罗地那非(lodenafil)、uk369.003、uk371.800、surfacelogix的slx2101、las34179三唑并[1,2-]黄嘌呤,6-甲基-4-丙基-2-[2-丙氧基-5-(4-甲基哌嗪子基)磺酰基]苯基或盐、水合物或盐的水合物。

特别优选的是根据式(1)、(2)、(3)、(4)、(6)、(7)、(27)、(28)和/或(5)的化合物与伐地那非和/或西地那非的组合产品用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。

特别优选的是根据式(3)、(4)、(6)、(7)、(27)、(28)和/或(5)的化合物与伐地那非和/或西地那非的组合产品用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。

特别优选的是根据式(3)、(4)、(6)、(7)和/或(28)的化合物用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。

特别优选的是根据式(3)、(4)和/或(6)的化合物用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。

特别优选的是至少一种根据式(3)、(4)、(6)和/或(7)的化合物与伐地那非或西地那非的组合产品用于制备用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途。

sgc刺激剂诸如根据式(3)的化合物在小鼠中的tsk-1皮肤纤维化模型中剂量依赖性地且显著地加速伤口愈合。tsk-1小鼠模型的特征在于反映非炎性驱动的、稳定的ssc表型的大量皮肤纤维化。这些数据暗示sgc刺激剂诸如根据式(3)的化合物可以成为ssc相关血管病变的有效治疗选项，特别是用于指溃疡的预防和愈合。

如果必要，根据本发明的化合物可以单独使用或与其它活性物质组合使用。本发明还涉及含有至少一种根据本发明的化合物和一种或多种其它活性物质的药用产品，其特别是用于治疗和/或预防上述疾病。作为合适的组合活性物质，我们可以例如且优选提及：

•有机硝酸盐和no-供体，例如硝普钠、硝酸甘油、单硝酸异山梨酯、二硝酸异山梨酯、吗多明或sin-1和吸入性no；

•其它血管活性药物，例如前列腺素类，诸如伊洛前列素、贝前列素、西卡前列素、依前列醇、曲前列环素；

•其它血管活性药物，例如rho激酶抑制剂，诸如法舒地尔；

•其它血管活性药物，例如内皮素受体拮抗剂，诸如波生坦、达卢生坦、安贝生坦或西他生坦、马西替坦；

•用于降低血压的活性物质，例如且优选自钙拮抗剂，诸如硝苯地平、氨氯地平、维拉帕米或地尔硫卓；

•用于降低血压的活性物质，例如且优选自血管紧张素aii拮抗剂、ace抑制剂、肾素抑制剂、α-阻断剂、β-阻断剂、盐皮质激素受体拮抗剂和利尿剂；和/或

•抗血栓形成剂，例如且优选自血小板聚集抑制剂、抗凝血剂、凝血酶抑制剂或纤维蛋白溶解物质；

•改变脂肪代谢的活性物质，例如且优选自甲状腺受体激动剂、胆固醇合成抑制剂，诸如例如且优选hmg-coa还原酶或角鲨烯合成抑制剂、acat抑制剂、cetp抑制剂、mtp抑制剂、ppar-α、ppar-γ和/或ppar-δ激动剂、胆固醇吸收抑制剂、脂肪酶抑制剂、聚合胆汁酸吸附剂、胆汁酸重吸收抑制剂和脂蛋白(a)拮抗剂；

•用于纤维化病症的活性物质，例如且优选自蛋白激酶抑制剂诸如索拉非尼、瑞戈非尼、伊马替尼、达沙替尼、尼罗替尼、尼达尼布、硼替佐米和/或吡非尼酮；

•改变炎性反应和/或抑制免疫应答的活性物质，例如诸如环磷酰胺、甲氨蝶呤、雷帕霉素、咪唑硫嘌呤(azathioproin)、托珠单抗、英夫利昔单抗、利妥昔单抗、阿达木单抗、贝利木单抗、阿巴西普、sar100842、沙利度胺衍生物；

•作用于不同途径的活性物质，例如吡非尼酮、sar100842、沙利度胺衍生物、整联蛋白抑制剂。

本发明的另一个优选实施方案是如上所示的化合物和/或组合产品，其用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和/或硬皮病的指溃疡的预防和愈合。

本发明的另一个优选实施方案是用于生产用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和/或硬皮病的指溃疡的预防和愈合的药物的用途，所述药物包含有效量的如上所示的化合物和/或组合产品。

本发明的另一个优选实施方案是包含如上所示的至少一种化合物或一种组合产品的药物制剂，其用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和/或硬皮病的指溃疡的预防和愈合。

本发明的另一个优选实施方案是包含至少一种如上所示的sgc刺激剂和/或活化剂或如上所示的组合产品的试剂盒，其用于伴随纤维化疾病诸如系统性硬化症和/或硬皮病的指溃疡的预防和愈合。

本发明的药物组合物被配制成与其预期给药途径相容。给药途径的实例包括胃肠外，例如静脉内、皮内、皮下、经口(例如吸入)、透皮(局部)、透粘膜和直肠给药。适于可注射使用的药物组合物包括无菌水溶液(当为水溶性时)或分散液和用于临时制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。载体可以是溶剂或分散介质，其含有例如，水，乙醇，药学上可接受的多元醇如甘油、丙二醇、液态聚乙二醇，及其合适的混合物。可以维持适当的流动性，例如，通过使用包衣诸如卵磷脂，通过在分散液情况下维持所需的粒径和通过使用表面活性剂。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂实现微生物作用的预防，例如对羟苯甲酸酯类、氯丁醇、酚、抗坏血酸、硫柳汞等。在许多情况下，组合物中优选包括等渗剂，例如糖类，多元醇类诸如甘露醇(maitol)、山梨醇，氯化钠。

口服组合物通常包括惰性稀释剂或可食用载体。它们可以被包封在明胶胶囊中或压制成片剂。对于口服治疗给药的目的，活性化合物可以掺入赋形剂，并且以片剂、糖锭剂或胶囊的形式应用。口服组合物也可以使用流体载体制备以用作漱口水，其中流体载体中的化合物经口施用并且漱口和吐出或吞下。

药学上相容的粘合剂和/或辅助材料可以作为组合物的一部分包括。片剂、丸剂、胶囊、糖锭剂等可以含有任何下列成分或类似性质的化合物：粘合剂，诸如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂诸如淀粉或乳糖，崩解剂诸如藻酸、primogel或玉米淀粉(con1starch)；润滑剂诸如硬脂酸镁或sterotes；助流剂诸如胶体二氧化硅；甜味剂诸如蔗糖或糖精；或调味剂诸如薄荷、水杨酸甲酯或橙调味剂。

对于通过吸入给药，从含有适当抛射剂例如气体诸如二氧化碳的加压容器或分配器、或喷雾器中以气溶胶喷雾的形式递送化合物。

也可以通过透粘膜或透皮方式进行全身给药。对于透粘膜或透皮给药，在制剂中使用适于待渗透屏障的渗透剂。此类渗透剂是本领域中通常已知的，并且对于透粘膜给药包括例如去垢剂、胆酸盐和梭链孢酸衍生物。透粘膜给药可以通过使用鼻喷雾或栓剂而完成。对于透皮给药，将活性化合物配制成本领域通常已知的软膏、药膏(salve)、凝胶或乳膏剂。

化合物也可以以用于直肠递送的栓剂(例如具有常规栓剂基质诸如可可脂和其它甘油酯)或保留灌肠剂的形式配制。

在一个实施方案中，将活性化合物与保护该化合物免于从身体快速消除的载体一起配制，诸如控释制剂，包括植入物和微胶囊化的递送系统。可以使用生物可降解的生物相容性聚合物，诸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐类、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯类和聚乳酸。

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附图：

图1：三天后用安慰剂治疗的wt小鼠(左)和tsk-1小鼠(右)中的伤口大小的减小。数据是平均值-sem，n=46(wt+安慰剂)和n=44(tsk-1+安慰剂)，*/**/***/****=显著的，其中p<0.05/0.01/0.001/0.0001

图2：三天后用安慰剂或根据式(27)的化合物(bay41-2272)或根据式(3)的化合物(bay63-2521)治疗的tsk-1小鼠中伤口大小的减小。数据是平均值-sem,n=44-46(安慰剂组)，n=16(根据式(27)的化合物bay41-2272组)和n=30-32(根据式(3)的化合物bay63-2521组)，*/**/***/****=显著的，其中p<0.05/0.01/0.001/0.0001；ns=不显著的；bay41对应于bay41-2227。

实验部分

实施例a

tsk-1小鼠vs.wt-小鼠中的伤口愈合

使用ssc的紧皮(tsk-1)小鼠模型评估根据式(27)和(3)的化合物(bay41-2272和bay63-2521)对具有大量皮肤纤维化的小鼠中的伤口愈合的影响。由于常染色体显性突变，即原纤蛋白-1基因的串联重复，tsk-1小鼠的表型的特征在于皮下厚度增加(beyer等人2010)。用以下引物通过pcr进行tsk-1小鼠的基因分型：突变的原纤蛋白-1/tsk-1正向引物：5’–gttggcaactatacctgcat–3’，反向引物：5’–cctttcctggtaacatagga–3’。

在wt小鼠或tsk-1小鼠中研究安慰剂(=测试化合物的媒介物=0.5侵填体(tylose)溶液)的作用。将tsk-1小鼠麻醉并仔细剃毛，3天后设置伤口以精确定量伤口大小。为了避免日常处理动物对伤口愈合的影响，将通常的每日两次灌胃治疗替换为食物中的药物给药。wt小鼠和tsk-1小鼠接受正常小鼠食物(安慰剂)，其在剃毛当天开始。剃毛后三天，将小鼠小心麻醉，且以4mm的直径打开圆形伤口。打开后3天，将小鼠安乐死并评价伤口大小。数据的统计分析通过单因素anova、随后tuckey氏多重比较事后分析进行。

在tsk-1小鼠中，安慰剂治疗后，伤口大小减小52％±2％(图1)。相比之下，安慰剂治疗的wt小鼠在3天后显示伤口大小减小68％±2％(图1)。因此，与wt小鼠相比，tsk-1小鼠的伤口愈合部分受损，并且在安慰剂治疗的tsk-1小鼠中伤口闭合显著减弱。

用根据式(27)和(3)的化合物(bay41-2272和bay63-2521)治疗的tsk-1小鼠中的伤口愈合

在tsk-1小鼠中研究安慰剂(=化合物的媒介物=0.5％侵填体(tylose)溶液)或根据式(27)或(3)的化合物(bay41-2272或bay63-2521)的作用。将tsk-1小鼠麻醉并仔细剃毛，3天后设置伤口以精确定量伤口大小。为了避免日常处理动物对伤口愈合的影响，将每日两次灌胃治疗替换为食物中的药物给药。小鼠接受正常小鼠食物(安慰剂)或小鼠食物，小鼠食物分别含有15和45ppm的根据式(27)的化合物(bay41-2272)或含有5ppm、15ppm和45ppm的根据式(3)的化合物(bay63-2521)。这些剂量–如通过定向dmpk-研究所证实–导致分别与1和3mg/kg的根据式(27)的化合物(bay41-2272)bid以及0.3、1和3mg/kg的根据式(3)的化合物(bay63-2521)bid类似的暴露。治疗组由每组至少8只tsk-1小鼠组成。治疗在剃毛当天开始，以达到稳态暴露。剃毛后三天，将小鼠小心麻醉，且以4mm的直径打开圆形伤口。打开后3天，将小鼠安乐死并评价伤口大小。数据的统计分析通过单因素anova、随后tuckey氏多重比较事后分析进行。

在tsk-1小鼠中，在用15和45ppm根据式(27)的化合物(bay41-2272)治疗后，伤口大小分别剂量依赖性地且显著地减小64±2％和73±2％(图2)。此外，在tsk-1小鼠中，在用5、15和45ppm根据式(3)的化合物(bay63-2521)治疗后，伤口大小分别剂量依赖性地且显著地减小59％±4％、65±3%和70％±2％(图2)。此外，用45ppm根据式(27)的化合物(bay41-2272)和45ppm根据式(3)的化合物(bay63-2521，riociguat)治疗，使伤口愈合正常化至与安慰剂治疗的wt小鼠中观察到的(68％±2％)类似的程度(图1，图2)。因此，在tsk-小鼠中，根据式(27)和(3)的化合物(bay41-2272和bay63-2521)与安慰剂治疗相比加速伤口愈合，并且导致如在健康对照小鼠中发现的伤口闭合的正常化。

总之，这些数据表明：

a)与wt小鼠相比，tsk-1小鼠的伤口愈合显著减弱。

b)通过用根据式(27)的化合物(bay41-2272)和/或根据式(3)的化合物bay63-2521治疗，显著且剂量依赖性地改善tsk-1小鼠的伤口愈合。

•最大效力导致与健康wt小鼠相似的伤口闭合。

由于tsk-1小鼠是具有广泛皮肤纤维化的动物模型(其反映ssc中的病况)，该数据表明上述化合物不仅可以减少纤维化，而且加速ssc中的伤口愈合，暗示这些化合物可用于治疗ssc患者中的du。