用于静脉内施用反丁烯二酸酯以治疗神经疾病的方法和组合物与流程

相关申请的交叉引用本申请要求2015年3月20日提交的美国临时专利申请第62/136,431号的权益，该临时专利申请以引用的方式整体并入本文中。1.发明领域本文公开了用于静脉内施用反丁烯二酸酯以治疗神经疾病，诸如中风、肌萎缩性侧索硬化、亨廷顿病(huntington'sdisease)、阿尔茨海默病(alzheimer’sdisease)、帕金森病(parkinson’sdisease)和多发性硬化的方法和组合物。2.发明背景神经疾病一般影响中枢神经系统中的神经元，即脑和脊髓。需要用安全且有效的化合物治疗这些疾病。中风中风为美国第四大死亡原因。中风可由血管中阻断血流流向脑的血块引起(缺血性中风)或由血管破裂且阻止血流流向脑引起(出血性中风)。第三种类型中风为暂时性缺血性发作，通俗称为“轻微中风”，其是由暂时血液凝块引起。缺血性中风占人类中发生的中风大部分。血流流向脑的破坏导致由缺乏葡萄糖和氧引起的患病区域中的细胞死亡。从中风的恢复常常为部分的，且幸存者罹患长期或永久性运动、感觉和认知损伤。经常，中风幸存者遭受永久性神经破坏和感觉运动损伤，估计15％-30％中风幸存者变成终身残废(roger等,circulation2012；125:22-e220)。迄今为止，缺血性中风的直接医药管理限于在中风后的急性期，即从损伤开始的时间至损伤后近乎六小时施用的药物。目前，尚无已知的药物用于治疗出血性中风。除组织纤维蛋白溶酶原活化剂(tpa)和在中风急性期期间采用的其他手术方法以外，目前美国尚无疗法批准用于治疗中风。可进行的治疗后，患者常常遗留下一定程度的功能异常。患者必须进行物理疗法，以试图恢复丧失的感觉运动功能，复原成功程度不同(sun等,2014,ann.transl.med.,2(8):80)。目前研究用于治疗中风的大部分药物聚焦于减少急性细胞死亡、发炎和细胞凋亡，且因此必须在缺血性事件后数小时内递送(prakash等,2013pharmacology,92:324-334)。肌萎缩性侧索硬化(als)肌萎缩性侧索硬化(als)为成年发作型神经退化性疾病。als为致命的且具有短暂疾病过程，在大多数情况下在诊断约五年内死亡(mitchell等,2007,lancet369:2031-41)。疾病发作一般出现在40岁与70岁之间。根据alscare数据库，数据库中的60％als患者为男性且数据库中的93％als患者为白种人。als的特征为运动皮质、脊髓和脑干中上运动神经元和下运动神经元逐渐退化。此导致无法控制和开始肌肉运动。死亡常常由呼吸衰竭引起，因为横隔膜和肋间肌最终丧失能力。对als的病源学尚无充分了解。已知疾病以以下两种形式中的一者存在：偶发性形式，其影响约90％患者；或家族性形式，其影响约10％als患者，其中后者与特定遗传突变相关联。迄今为止，als已与c9orf72、超氧化物歧化酶1(sod1)、tardna结合蛋白43(tdp-43)和肉瘤融合(fus)基因的突变相关联(baloh等,2013,neurol.clin.31:4)。该疾病的偶发性和家族性形式展现类似临床表现。目前，尚无已知的als药物，且已最低限度地成功试图减缓疾病进展。亨廷顿病亨廷顿病为由遗传突变引起的遗传性神经退化性病症。患有该疾病的患者在编码亨廷顿蛋白质的htt基因中具有异常数目的cag三核苷酸重复序列(cabouche等,2013,frontiersinneurology4:127)和aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第16页。在美国10,000人中亨廷顿病影响约1人。目前，约30,000人患有亨廷顿病且其他200,000人处于出现该疾病的风险中(shannon,hersch和lovecky,huntington’sdisease,aguideforfamilies,(2009)huntington’sdiseasesoc’yofamerica,在网站hdsa.org/images/content/1/4/14765.pdf)。疾病发作在约30或40岁开始。一些患者在20多岁时开始展现症状(青少年型亨廷顿病)，此还与该疾病更快进展相关联。目前，尚无治疗可用来治愈亨廷顿病且预防疾病发作，但药物治疗可帮助运动和精神病症的症状。治疗选择包括多巴胺耗尽剂(例如利血平(reserpine)、丁苯那嗪(tetrabenazine))和多巴胺受体拮抗剂(例如神经安定药(neuroleptics))，但这些药物具有高风险的副作用，尤其为长时间使用(kori等,2010,globalj.pharmacology4(1):06-12)。已显示神经安定药加重疾病的其他特征，诸如运动徐缓和僵硬，导致功能进一步下降(kori等,2010,globalj.pharmacology4(1):06-12)。一些研究已表明丙戊酸和氯硝西泮可有效治疗舞蹈病，而其他研究的结果为更少结论性的(kim等,2014j.mov.disord.7(1):1-6)。丁苯那嗪为一种多巴胺耗尽剂，其经fda批准来抑制与亨廷顿病相关联的不自主急跳和翻腾动作。认为其比利血平治疗舞蹈病更有效，且更可能引起血压过低，但该药物的一个严重副作用为加重或触发抑郁症或其他精神病状(药物标签，可得自网站accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2008/021894lbl.pdf)。阿尔茨海默病阿尔茨海默病为神经退化的日益普遍形式，其占超过65岁人中痴呆总病例的约50％-60％。阿尔茨海默病目前影响全世界估计一千五百万人，且由于群体中年老者相对增加，其发病率很可能在未来二十年至三十年间增加。虽然进展速度可改变，但诊断后的平均寿命预期值为约七年。低于3％的个体在诊断后生存超过14年。锥体神经元死亡和与更高心理机能相关联的脑区域中的神经元突触丧失导致典型症状，特征为认知功能的总体和渐进损伤(francis等,1999,j.neurol.neurosurg.psychiatry66:137-47)。阿尔茨海默病为世界上老年性痴呆和早老性痴呆的最常见形式，且在临床上公认为无情渐进痴呆，呈现增加的记忆丧失、智力功能和言语干扰(merritt,1979,atextbookofneurology,第6版,第484-489页lea和febiger,philadelphia)。疾病本身通常具有缓慢且隐伏的进展，同等地影响全世界男女。其以适度不当的行为、不严厉的叙述、易怒、趋向于夸大、欣快和工作时效能降低开始；进展至操作判断力降低、理解力丧失、抑郁和近事记忆丧失；以严重迷失方向和意识模糊、无法走路、全身僵硬和失禁结束(gilroy和meyer,1979,medicalneurology,第175-179页macmillanpublishingco.)。阿尔茨海默病的病因未知。基于家族发病率、血统分析、单合子和异卵双生研究以及该疾病与唐氏综合征(down'ssyndrome)的关联，阿尔茨海默病的发展似乎存在遗传因素(关于综述参见baraitser,1990,thegeneticsofneurologicaldisorders,第2版,第85-88页)。诸如脑中升高浓度的铝、组织中锰的其他因素也可能在阿尔茨海默病的发展中起作用(crapper等,1976,brain,99:67-80,banta和markesberg,1977,neurology,27:213-216)。还已表明存在微管相关蛋白质的τ复合物的mrna编码的转录剪接的缺陷(关于综述参见kosik,1990,curr.opinioncellbiol.,2:101-104)和/或存在这些蛋白质的不当磷酸化(grundke-igbak等,1986,proc.natl.acad.sci.usa,83:4913-4917；wolozin和davies,1987,ann.neurol.22:521-526；hyman等,1988,ann.neurol.,23:371-379；bancher等,1989,brainres.,477:90-99)，还可能在阿尔茨海默病的发展中起作用。另外，参与合成乙酰胆碱的酶的减少已导致阿尔茨海默病视为胆碱能系统衰竭(danes和moloney,1976,lancet,ii:1403-14)。目前阿尔茨海默病尚无已证实的疗法，且尚无药剂一致有效地预防疾病的进展。大部分治疗剂聚焦于管理阿尔茨海默病的症状。当前疗法包括抗精神病药以及安定剂和乙酰胆碱酯酶抑制剂。由于这些药物的副作用和不引人注意的给药需求，高度需要能够治疗阿尔茨海默病和其症状的新方法和化合物。帕金森病帕金森病为一种运动系统病症，由产生多巴胺的神经元丧失引起。帕金森病特征可为四种主要症状，包括震颤(例如手、臂、腿、颌和面部发抖)；僵硬(例如四肢和躯体僵硬；运动徐缓(例如运动缓慢)；和姿势不稳定(例如平衡和协调减弱)。当帕金森病进展时，患者可能难以行走、交谈或完成其他简单任务。帕金森病通常影响年龄超过50的人。在有些人中，帕金森病的早期症状可为隐蔽的且逐渐出现。在其他人中，疾病可更快速地进展。随着帕金森病进展且症状的严重程度增加，诸如发抖或震颤的症状可开始干扰日常活动。帕金森病症状还可包括行为症状，诸如抑郁症和其他情绪改变。另外，帕金森病患者可能经历吞咽、咀嚼和说话的困难。其他帕金森病症状包括(但不限于)泌尿问题或便秘；皮肤问题；和睡眠破坏。参见whatisparkinson'sdisease？,nindsparkinson'sdiseaseinformationpage,nationalinstituteofneurologicaldisordersandstroke,在ninds.nih.gov。目前尚无治疗帕金森病的药物，但当前疗法减轻一种或多种症状。当前疗法可包括左旋多巴(levodopa)与甲基多巴肼(carbidopa)、抗胆碱能药、溴麦角环肽(bromocriptine)、普拉克索(pramipexole)和罗匹尼罗(ropinirole)组合。诸如金刚烷胺的抗病毒剂还用以治疗帕金森病。虽然左旋多巴可帮助减轻帕金森病患者中帕金森病的一些症状，但并非所有症状均同等地对该药物起反应。诸如运动徐缓和僵硬的一些症状反应更佳，而诸如震颤的其他症状可仅减少极少。参见whatisparkinson'sdisease？,nindsparkinson'sdiseaseinformationpage,nationalinstituteofneurologicaldisordersandstroke,在ninds.nih.gov。在一些情况下，对当前药物疗法不反应的帕金森病患者用手术治疗。手术可涉及深度大脑刺激(dbs)。在dbs中，电极植入脑中且连接至称为脉冲发生器的小型电气装置，其可在外部程序化。dbs需要刺激装置小心程序化以准确地工作。参见whatisparkinson'sdisease？,nindsparkinson'sdiseaseinformationpage,nationalinstituteofneurologicaldisordersandstroke,在ninds.nih.gov。多发性硬化多发性硬化(ms)为一种具有针对中枢神经系统(cns)抗原的自身免疫活性的自身免疫疾病。该疾病特征为部分cns中发炎，导致神经元轴突周围的髓磷脂鞘损失(脱髓鞘)、轴突损失和神经元、寡突神经胶质细胞和胶质细胞最终死亡。关于ms和当前疗法的全面综述，参见例如alastaircompston等的mcalpine’smultiplesclerosis,第4版,churchilllivingstoneelsevier,2006。世界上超过210万人罹患ms，其中美国生活约400,000人(参见例如hanson等,patientpreferadherence,2014,8:415-422)。其为青年人中cns的最常见疾病之一。ms为慢性进展性失能疾病，其一般在青春期后某时攻击其受害者，诊断一般在20岁与40岁之间进行，不过可能更早地发作。女性比男性更可能患该疾病，且在不同患者之间，ms本身在症状和严重程度上高度变化(参见例如ruggieri等,ther.clin.riskmanag.,2014,10:229-239)。该疾病不直接为遗传性的，不过遗传易感性在其发展中起作用。ms为一种具有错杂临床、病理学和免疫表型的复杂疾病。ms存在四种主要临床类型：1)复发缓解型ms(rr-ms)，特征为完全恢复下或恢复后后遗症和残留不足下界限清楚的复发；特征为缺乏疾病进展的疾病复发之间的时间段；2)继发进行性ms(sp-ms)，特征为初始复发缓解过程，接着进展，有或无偶然复发、微小症状缓解和平台期；3)原发进行性ms(pp-ms)，特征为自发作疾病进展，允许有偶然平台期和暂时性微小改善；和4)进展复发型ms(pr-ms)，特征为进行性疾病发作，具有清楚急性复发，有或无完全恢复；特征为持续进展的复发之间的时间段。临床上，该疾病最常呈现为复发缓解型疾病，且在较低程度上，呈现为神经失能的稳定进展。复发缓解型ms(rr-ms)以病灶或多灶神经病功能异常的复发性发作形式存在。发作可在多年中出现、缓解和复发，看上去随机。症状缓解常常为不完全的，且当一个接着一个发作时，接着逐步向下进展，永久性神经缺陷增加。rr-ms的常见过程特征为大部分患者与疾病进展最终发作相关的重复复发。该疾病的随后过程为不可预知的，不过大部分患有复发缓解型疾病的患者将最终发展继发进行性疾病。在复发缓解型阶段，复发与临床不活动期交替，且可能具有或可能无后遗症的标记，取决于发作之间神经缺陷的存在。在复发缓解阶段期间复发之间的时间段为临床上稳定的。另一方面，患有进行性ms的患者展现如上定义且自发作起或者急性发作期后缺乏稳定增加，但此名称不排除新复发的进一步出现。ms病理部分反映在白质中病灶性发炎脱髓鞘病变的形成，此为患有急性和复发疾病的患者中的标志。在患有进行性疾病的患者中，脑在更整体的意义上受影响，其中在正常外观白质中具有扩散但分布广(主要轴突)的破坏，且也在灰质中、尤其皮层中大量脱髓鞘。已建议诸如以存在的反丁烯二酸酯的盐与反丁烯二酸二甲酯(dmf)组合用于治疗ms(参见例如schimrigk等,eur.j.neurol.,2006,13(6):604-610；drugsr&d,2005,6(4):229-30；美国专利第6,436,992号)。含有反丁烯二酸二甲酯、反丁烯二酸氢乙酯的钙盐、反丁烯二酸氢乙酯的镁盐和反丁烯二酸氢乙酯的锌盐(参见例如schimrigk等,eur.j.neurol.,2006,13(6):604-610)。虽然目前尚无治疗ms的药物，但治疗选择可用于患有该疾病的患者。当前可用治疗通常聚焦于减缓疾病随着时间推移的进展，提高生活品质，且降低ms症状的数目和严重程度。对于患有复发ms的那些患者，常见初步治疗包括干扰素-β(ifn-β)及格拉默(glatiramer)乙酸盐(参见例如fox等,n.engl.j.med.,2012,367(12):1087-1097；勘误见：n.engl.j.med.,2012,367(17):1673)。其他治疗已包括那他珠单抗(natalizumab)。过去几年，芬戈莫德(fingolimod)、特立氟胺(teriflunomide)和延迟释放dmf发展为口服治疗，预计其提高治疗坚持率(参见例如creeb.a.,neurohospitalist,2014,4(2):63-65)。为口服使用的反丁烯二酸二甲酯延迟释放胶囊，2013年由美国食品与药物管理局(u.s.foodanddrugadministration)批准用于治疗患有多发性硬化复发形式的受试者。含有反丁烯二酸二甲酯(dmf)。总之，在治疗神经疾病，诸如中风、肌萎缩性侧索硬化、亨廷顿病、阿尔茨海默病、帕金森病和多发性硬化的领域内需要发展新疗法和更有效治疗方案。3.发明概要本文提供治疗有需要的人类患者的神经疾病的方法，其包括向所述患者静脉内施用包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。在一个实施方案中，疾病为中风。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。在一个实施方案中，疾病或病症为肌萎缩性侧索硬化。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。在一个实施方案中，疾病为亨廷顿病。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。在一个实施方案中，疾病为阿尔茨海默病。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。在一个实施方案中，疾病为帕金森病。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。在一个实施方案中，疾病为多发性硬化。在一个实施方案中，多发性硬化为多发性硬化的进行性形式。在一个实施方案中，多发性硬化的进行性形式为原发进行性多发性硬化(pp-ms)或继发进行性多发性硬化(sp-ms)。在一个实施方案中，多发性硬化为多发性硬化的复发形式。在一个实施方案中，多发性硬化的复发形式为复发缓解型多发性硬化(rr-ms)。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，药物组合物为无菌等张溶液。本文提供包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中所述药物组合物为纳米悬浮液。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约1mg/ml至约150mg/ml。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约150mg/ml。在一个实施方案中，药物组合物还包含一种或多种选自小分子稳定剂、聚合物稳定剂和缓冲剂的赋形剂。在一个实施方案中，小分子稳定剂为十二烷基硫酸钠。在一个实施方案中，聚合物稳定剂为羟丙基甲基纤维素(hpmc)。在一个实施方案中，缓冲剂为磷酸盐缓冲液。在一个实施方案中，组合物的ph值在约4至约7范围内。在一个实施方案中，组合物的ph值为约5.0。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯具有约100nm至约250nm的平均粒度(d50)。在一个实施方案中，d50为约180nm。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，其中药物组合物还包含十二烷基硫酸钠、hpmc和磷酸盐缓冲液，其中药物组合物的ph值为约5.0且d50为约180nm。本文提供包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中所述药物组合物为水溶液，其中所述水溶液包含环糊精，其中所述环糊精为α环糊精或取代的β环糊精。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约1mg/ml至约16mg/ml。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约2mg/ml至约4mg/ml。在一个实施方案中，环糊精为取代的β环糊精。在一个实施方案中，取代的β环糊精以约5％(w/v)至约40％(w/v)存在。在一个实施方案中，取代的β环糊精以约20％(w/v)存在。在一个实施方案中，取代的β环糊精为羟丙基β环糊精或磺基丁基醚β环糊精。在一个实施方案中，取代的β环糊精为磺基丁基醚β环糊精。在一个实施方案中，药物组合物包含一种或多种式xx的磺基丁基醚β环糊精：其中r独立地选自h或-ch2ch2ch2ch2so3na，其限制条件为除其中r为-ch2ch2ch2ch2so3na的6或7种情况外，r为h。在一个实施方案中，药物组合物包含captisol。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且其中水溶液包含20％(w/v)captisol，且dmf的浓度为约2mg/ml至约4mg/ml。在一个实施方案中，药物组合物为纳米悬浮液。在一个实施方案中，药物组合物为水溶液，其中所述水溶液包含环糊精，其中所述环糊精为α环糊精或取代的β环糊精。3.1术语为了提供说明书和权利要求书的清楚和一致了解，提供以下定义：如本文所用，术语“烷二基”是指具有例如1至6个碳原子的二价直链或支链烷基链。烷二基的代表性实例包括(但不限于)-ch2-、-(ch2)2、-ch(ch3)-、-(ch2)3-、-ch2ch(ch3)-、-ch(ch3)ch2-、-ch(c2h5)-、-c(ch3)2-、-(ch2)4-、-(ch2)2ch(ch3)-、-ch2ch(ch3)ch2-、-ch(ch3)(ch2)2-、-ch(c2h5)ch2-、-ch2ch(c2h5)-、-c(ch3)2ch2-、-ch2c(ch3)2-、-ch(ch3)ch(ch3)-、-ch(c3h7)-、-(ch2)5、-(ch2)3ch(ch3)、-(ch2)2ch(ch3)ch2-、-ch2chch3(ch2)2-、-ch2c(ch3)2ch2-、-(ch2)2c(ch3)2-、-(ch2)6-、-(ch2)4ch(ch3)-、-(ch2)3ch(ch3)ch2-、-ch2chch3(ch2)3-、-(ch2)3c(ch3)2-和-(ch2)2c(ch3)2ch2-。如本文所用，术语“烯基”是指具有两至六个碳和至少一个碳-碳双键的单价直链或支链烃。烯基的代表性实例包括(但不限于)-ch＝ch2、-ch＝ch-ch3、-ch2-ch＝ch-ch3或-ch(ch3)-ch＝ch-ch3。如本文所用，术语“烷基”是指单价完全饱和支链或无支链烃部分。在一个实施方案中，烷基包含1至20个碳原子、1至16个碳原子、1至10个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子。烷基的代表性实例包括(但不限于)甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基或正癸基。如本文所用，术语“炔基”是指具有两至六个碳和至少一个碳碳三键的单价直链或支链烃。炔基的代表性实例包括(但不限于)2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、4-戊炔基、3-戊炔基。如本文所用，术语“芳基”是指环部分中具有例如5至14个碳原子的单环、双环或三环芳族烃基。在一个实施方案中，芳基是指具有6至10个碳原子的单环和双环芳族烃基。芳基的代表性实例包括(但不限于)苯基、萘基、芴基和蒽基。如本文所用，术语“芳基烷基”是指其中键结至碳原子(通常末端或sp3碳原子)的一个氢原子被芳基置换的非环状烷基。芳基烷基的代表性实例包括(但不限于)苯甲基、2-苯基乙-1-基、萘基甲基、2-萘基乙-1-基、萘并苯甲基或2-萘并苯基乙-1-基。在某些实施方案中，芳基烷基为c7-30芳基烷基，例如芳基烷基的烷基部分为c1-10且芳基部分为c6-20。在某些实施方案中，芳基烷基为c6-18芳基烷基，例如芳基烷基的烷基部分为c1-8且芳基部分为c6-10。在某些实施方案中，芳基烷基为c7-12芳基烷基。如本文所用，术语“烷基接头”是指c1、c2、c3、c4、c5或c6直链(直链)饱和脂族烃基和c3、c4、c5或c6支链饱和脂族烃基。在一个实施方案中，c1-6烷基接头为c1、c2、c3、c4、c5或c6烷基接头。烷基接头的代表性实例包括(但不限于)具有一个至六个碳原子的部分，诸如甲基(-ch2-)、乙基(-ch2ch2-)、丙基(-ch2ch2ch2-)、异丙基(-chch3ch2-)、正丁基(-ch2ch2ch2ch2-)、仲丁基(-chch3ch2ch2-)、异丁基(-c(ch3)2ch2-)、正戊基(-ch2ch2ch2ch2ch2-)、仲戊基(-chch3ch2ch2ch2-)或己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch2-)。术语“取代的烷基接头”是指在烃主链的一个或多个碳上具有替换一个或多个氢原子的取代基的烷基接头。此类取代基不改变其连接的碳原子的sp3-杂交且包括以下在术语“取代的”的定义中列出的那些取代基。如本文所用，术语“碳环”是指具有指定数目的碳的任何稳定单环、双环或三环，其中任一种环可为饱和或不饱和。在一个实施方案中，c3-14碳环预计包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子的单环、双环、三环或螺环(单环或多环)。碳环的代表性实例包括(但不限于)环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、环辛二烯基、芴基、苯基、萘基、茚满基、金刚烷基、四氢萘基、八氢并环戊二烯、八氢-1h-茚、双环[2.2.2]辛烷、螺[3.4]辛烷、螺[4.5]癸烷、螺[4.5]癸-1,6-二烯和二螺[2.2.4.2]十二烷。在一个实施方案中，键联于非相邻碳原子以形成三环的环的桥为c1或c2桥。当环桥连时，针对环叙述的取代基也可存在于桥上。如本文所用，术语“环烷基”是指饱和或部分不饱和环状烷基。环烷基的代表性实例包括(但不限于)环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷。在一个实施方案中，环烷基为c3-15环烷基、c3-12环烷基或c3-8环烷基。如本文所用，术语“环烷基烷基”是指其中键结至碳原子(通常末端或sp3碳原子)的一个氢原子被环烷基置换的非环状烷基。在某些实施方案中，环烷基烷基为c4-30环烷基烷基，且例如环烷基烷基的烷基部分为c1-10且环烷基部分为c3-20。在另一个实施方案中，环烷基烷基为c3-20环烷基烷基，且例如环烷基烷基的烷基部分为c1-8且环烷基部分为c3-12。在一个具体实施方案中，环烷基烷基为c4-12环烷基烷基。如本文所用，术语“氘富集系数”是指既定化合物样品中同位素丰度与氘天然丰度之间的比率。如本文所用，术语“氘引入百分比”是指既定化合物样品中具体位置上具有氘的分子占包括氘化和未氘化的分子总量的百分比。如本文所用，术语“氘化甲基”和“氘化乙基”分别是指含有至少一个氘原子的甲基和乙基。氘化甲基的实例包括-cdh2、-cd2h和-cd3。氘化乙基的实例包括(但不限于)-chdch3、-cd2ch3、-chdcdh2、-ch2cd3。如本文所用，术语“卤素”是指氟基、氯基、溴基或碘基。如本文所用，单独或作为另一取代基的一部分的术语“杂烷基”是指一个或多个碳原子(和某些相关氢原子)独立地被杂原子基团置换的烷基。杂原子基团的实例包括(但不限于)-o-、-s-、-o-o-、-s-s-、-o-s-,-nr’、＝n-n＝、-n＝n-、-n＝n-nr’-、-pr’-、-p(o)2-、-por’-、-o-p(o)2-、-so-、-so2-和-sn(r’)2-，其中各r’独立地为氢、c1-6烷基、取代的c1-6烷基、c6-12芳基、取代的c6-12芳基、c7-18芳基烷基、取代的c7-18芳基烷基、c3-7环烷基、取代的c3-7环烷基、c3-7杂环烷基、取代的c3-7杂环烷基、c1-6杂烷基、取代的c1-6杂烷基、c6-12杂芳基、取代的c6-12杂芳基、c7-18杂芳基烷基或取代的c7-18杂芳基烷基。在一个实施方案中，c1-6杂烷基意谓例如至少一个碳原子(和某些相关氢原子)被杂原子置换的c1-6烷基。在一个具体实施方案中，c1-6杂烷基例如包括具有五个碳原子和一个杂原子的基团、具有四个碳原子和两个杂原子的基团等。在一个实施方案中，各r’独立地为氢或c1-3烷基。在另一个实施方案中，杂原子基团为-o-、-s-、-nh-、-n(ch3)-或-so2-。在一个特定实施方案中，杂原子基团为-o-。如本文所用，术语“杂芳基”是指例如具有1至10个独立地选自n、o或s的杂原子的5-14员单环、双环或三环环系统，其中n和s可任选氧化成各种氧化态，且其中环系统中的至少一个环为芳族。在一个实施方案中，杂芳基为单环且具有5或6个环成员。单环杂芳基的代表性实例包括(但不限于)吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基和四唑基。在另一个实施方案中，杂芳基为双环且具有8至10个环成员。双环杂芳基的代表性实例包括吲哚基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、二氢吲哚基、异吲哚基、吲哚嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、5,6,7,8-四氢喹啉和6,7-二氢-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶。如本文所用，术语“杂芳基烷基”是指其中键结至碳原子(通常末端或sp3碳原子)的一个氢原子被杂芳基置换的非环状烷基。在某些实施方案中，杂芳基烷基为c7-12杂芳基烷基，且例如杂芳基烷基的烷基部分为c1-2且杂芳基部分为c6-10。如本文所用，术语“杂环”是指含有至少一个环杂原子(例如n、o或s)的任何环结构(饱和或部分不饱和)。杂环的实例包括(但不限于)吗啉、吡咯烷、四氢噻吩、哌啶、哌嗪和四氢呋喃。如本文所用，术语“杂环烷基”是指其中一个或多个碳原子(和某些相关氢原子)独立地被一个或多个杂原子置换的饱和或不饱和环状烷基；或是指其中一个或多个碳原子(和某些相关氢原子)独立地被一个或多个杂原子置换使得环系统不再含有至少一个芳环的母体芳环系统。替换碳原子的杂原子的代表性实例包括(但不限于)n、p、o、s和si。杂环烷基的代表性实例包括(但不限于)环氧化物、氮杂环丙烯、硫杂环丙烷、咪唑烷、吗啉、哌嗪、哌啶、吡唑烷、吡咯烷和奎宁环。在一个实施方案中，杂环烷基为c5-10杂环烷基、c5-8杂环烷基。在一个特定实施方案中，杂环烷基为c5-6杂环烷基。如本文所用，术语“杂环烷基烷基”是指其中键结至碳原子(通常末端或sp3碳原子)的一个氢原子被杂环烷基置换的非环状烷基。在某些实施方案中，杂环烷基烷基为c7-12杂环烷基烷基，且例如杂环烷基烷基的烷基部分为c1-2且杂环烷基部分为c6-10。如本文所用，术语“同位素物”是指同位素富集的反丁烯二酸酯。如本文所用，术语“同位素富集”是指原子同位素组成不同于该原子的天然同位素组成。在一个实施方案中，“同位素富集”反丁烯二酸酯含有至少一个同位素组成不同于其天然同位素组成的原子。如本文所用，术语“同位素组成”是指既定原子存在的各同位素的量。如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒酸或碱，包括无机酸和碱以及有机酸和碱制备的盐。本文中提供的反丁烯二酸酯的适合药学上可接受的碱加成盐包括(但不限于)由铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌制成的金属盐或由赖氨酸、n,n’-二苯甲基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(n-甲基葡糖胺)和普鲁卡因制成的有机盐。适合无毒酸包括(但不限于)无机和有机酸，诸如乙酸、海藻酸、邻氨基苯甲酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙烯磺酸、甲酸、反丁烯二酸、糠酸、半乳糖醛酸、葡萄糖酸、葡糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、氢溴酸、盐酸、羟乙基磺酸、乳酸、顺丁烯二酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘液酸、硝酸、双羟萘酸、泛酸、苯基乙酸、磷酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、硫酸、酒石酸和对甲苯磺酸。特定无毒酸包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和甲磺酸。其他为本领域中所熟知，参见例如remington’spharmaceuticalsciences,第18版,mackpublishing,eastonpa(1990)或remington:thescienceandpracticeofpharmacy,第19版,mackpublishing,eastonpa(1995)。如本文所用，术语“立体异构体”是指反丁烯二酸酯的一种立体异构体基本上不含该反丁烯二酸酯的其他立体异构体。举例来说，具有一个手性中心的“立体异构纯”的反丁烯二酸酯将基本上不含反丁烯二酸酯的相反对映体。具有两个手性中心的“立体异构纯”的反丁烯二酸酯将基本上不含反丁烯二酸酯的其他非对映体。典型“立体异构纯”反丁烯二酸酯包含超过约80重量％反丁烯二酸酯的一种立体异构体和少于约20重量％反丁烯二酸酯的其他立体异构体、超过约90重量％反丁烯二酸酯的一种立体异构体和少于约10重量％反丁烯二酸酯的其他立体异构体、超过约95重量％反丁烯二酸酯的一种立体异构体和少于约5重量％反丁烯二酸酯的其他立体异构体，或超过约97重量％反丁烯二酸酯的一种立体异构体和少于约3重量％反丁烯二酸酯的其他立体异构体。反丁烯二酸酯可具有手性中心且可作为外消旋物、个别对映体或非对映体及其混合物存在。所有此类异构形式包括在本文公开的实施方案内，包括其混合物。本文公开的实施方案涵盖此类反丁烯二酸酯的立体异构纯形式的用途以及那些形式的混合物的用途。举例来说，包含相等或不相等量的具体反丁烯二酸酯的对映体的混合物可用于本文公开的方法和组合物中。这些异构体可不对称地合成，使用标准技术，诸如手性柱或手性拆分试剂拆分。参见例如jacques,j.等,enantiomers,racematesandresolutions(wileyinterscience,newyork,1981)；wilen,s.h.等,tetrahedron33:2725(1977)；eliel,e.l.,stereochemistryofcarboncompounds(mcgrawhill,ny,1962)；和wilen,s.h.,tablesofresolvingagentsandopticalresolutions第268页(e.l.eliel编辑,univ.ofnotredamepress,notredame,in,1972)。如本文所用，术语“取代的”是指其中一个或多个氢原子独立地被相同或不同取代基置换的基团。在某些实施方案中，各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、＝o、-no2、苯甲基、-c(o)nh2、-r”、-or”、-c(o)r”、-coor”、-s(o)2r”或-nr2”，其中各r”独立地为氢或c1-6烷基。在某些实施方案中，各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、-no2、苯甲基、-r”、-or”或-nr2”，其中各r”独立地为氢或c1-4烷基。在某些实施方案中，各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、＝o、-no2、苯甲基、-c(o)nr2”、-r”、-or”、-c(o)r”、-coor”或-nr2”，其中各r”独立地为氢或c1-4烷基。在某些实施方案中，各取代基独立地为-oh、c1-4烷基和-nh2。基团中的碳原子数目在本文中通过前缀“cx-xx”说明，其中x和xx为整数。举例来说，“c1-4烷基”为具有1至4个碳原子的烷基，“c1-6烷基”为具有1至6个碳原子的烷基；且“c6-10芳基”为具有6至10个碳原子的芳基。4.附图简述图1展示来自pet成像(图1a)和mr成像(图1b)小鼠的矢状、冠状和横断面，以及经口施用0.5mg/kg的(11c)-dmf的小鼠的pet和mr成像的合并图像(图1c)。图2展示来自pet成像(图2a)和mr成像(图2b)小鼠的矢状、冠状和横断面，以及经口施用200mg/kg的(11c)-dmf的小鼠的pet和mr成像的合并图像(图2c)。图3展示来自pet成像(图3a)和mr成像(图3b)小鼠的矢状、冠状和横断面，以及静脉内施用0.5mg/kg的(11c)-dmf的小鼠的pet和mr成像的合并图像(图3c)。图4展示来自施用0.5mg/kg浓度的(11c)-dmf(静脉内)的小鼠的pet成像的各种小鼠组织中的定量信号。图5展示来自施用0.5mg/kg浓度的(11c)-dmf(经口)的小鼠的pet成像的各种小鼠组织中的定量信号。图6展示来自施用200mg/kg浓度的(11c)-dmf(经口)的小鼠的pet成像的各种小鼠组织中的定量信号。图7展示来自施用0.5mg/kg浓度的(11c)-dmf(静脉内)的小鼠的pet成像的各种脑区域中的定量信号。图8展示来自施用0.5mg/kg浓度的(11c)-dmf(经口)的小鼠的pet成像的各种脑区域中的定量信号。图9展示来自施用200mg/kg浓度的(11c)-dmf(经口)的小鼠的pet成像的各种脑区域中的定量信号。图10展示施用0.5mg/kg浓度的(11c)-dmf(静脉内)的小鼠的pet成像结果的时程。灰度：0至12％％id/g。图11展示施用0.5mg/kg浓度的(11c)-dmf(经口)的小鼠的pet成像结果的时程。灰度：0至12％％id/g。图12展示施用200mg/kg浓度的(11c)-dmf(经口)的小鼠的pet成像结果的时程。灰度：0至12％％id/g。图13展示以矢状切面看，静脉内施用0.5mg/kg浓度的(14c)dmf的小鼠在施用后10分钟(图13a和b)或60分钟(图13c和d)的结果。图14展示以矢状切面看，经口施用0.5mg/kg浓度的(14c)dmf的小鼠在施用后10分钟(图14a和b)或60分钟(图14c和d)的结果。图15展示mmf暴露盒须图。dmf给药后10分钟和2小时的血浆(图15a)、空肠(图15b)、前脑(图15c)、小脑(图15d)、肾(图15e)和脾(图15f)。黑条代表po给药(100mg/kg)且灰条代表iv给药(30mg/kg)。图15g展示不同组织中iv和po给药后组织与血浆比(组织[mmf]/血浆[mmf]×100)。对于盒须图：盒代表第一和第三四分位数值，中值为盒内的水平线，且条代表最小值和最大值；n＝5。统计比较用曼恩-惠特尼u检验(mann-whitneyutest)进行(*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001)。图16展示在dmfiv和po施用后2小时和6小时的前脑转录变化。nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图16a)；氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图16b)；醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图16c)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图16d)；血红素加氧酶1(hmox1)(图16e)；硫氧还蛋白还原酶1(txnrd1)(图16f)。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝5)。标记影线的条代表媒介物对照，黑条代表2小时时间点，且灰条代表6小时时间点。误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多重比较(tukey’smultiplecomparison)进行以评估相同给药方案内接受媒介物或dmf的动物之间的差异(*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001)。图17展示在dmfiv和po施用后2小时和6小时的小脑转录变化。nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图17a)；氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图17b)；醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图17c)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图17d)；血红素加氧酶1(hmox1)(图17e)；硫氧还蛋白还原酶1(txnrd1)(图17f)。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝5)。标记影线的条代表媒介物对照，黑条代表2小时时间点，且灰条代表6小时时间点。误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多重比较进行以评估相同给药方案内接受媒介物或dmf的动物之间的差异(*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001)。图18展示在dmfiv和po施用后2小时和6小时的肾转录变化。nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图18a)；氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图18b)；醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图18c)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图18d)；血红素加氧酶1(hmox1)(图18e)；硫氧还蛋白还原酶1(txnrd1)(图18f)。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝5)。标记影线的条代表媒介物对照，黑条代表2小时时间点，且灰条代表6小时时间点。误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多重比较进行以评估相同给药方案内接受媒介物或dmf的动物之间的差异(*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001)。图19展示在dmfiv和po施用后2小时和6小时的脾转录变化。nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图19a)；氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图19b)；醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图19c)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图19d)；血红素加氧酶1(hmox1)(图19e)；硫氧还蛋白还原酶1(txnrd1)(图19f)。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝5)。标记影线的条代表媒介物对照，黑条代表2小时时间点，且灰条代表6小时时间点。误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多重比较进行以评估相同给药方案内接受媒介物或dmf的动物之间的差异(*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001)。图20展示在dmfiv和po施用后2小时和6小时的空肠转录变化。nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图20a)；氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图20b)；醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图20c)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图20d)；血红素加氧酶1(hmox1)(图20e)；硫氧还蛋白还原酶1(txnrd1)(图20f)。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝5)。标记影线的条代表媒介物对照，黑条代表2小时时间点，且灰条代表6小时时间点。误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多重比较进行以评估相同给药方案内接受媒介物或dmf的动物之间的差异(*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001)。图21展示10分钟的mmf暴露的分析(平均值±标准偏差，n＝5，x轴)，比较po(100mg/kg，黑色圆)和iv(30mg/kg，灰色正方形)施用的dmf，其针对在2或6小时药效反应的标准化倍数变化(平均值±标准偏差，n＝5，y轴)绘图。图21a-c：前脑中2小时的osgin1(图21a)、6小时的akr1b8(图21b)和6小时的hmox1(图21c)的暴露-药效关系。图21d-f：肾中6小时的nqo1(图21d)、2小时的hmox1(图21e)和6小时的txnrd1(图21f)的暴露-药效关系。图21g-i：脾中6小时的nqo1(图21g)、2小时的osgin1(图21h)和2小时的akr1b8(图21i)的暴露-药效关系。图22展示在施用媒介物或dmfpo(100mg/kg，黑条)或iv(17.5mg/kg，空条，或30mg/kg，灰条)10分钟后在血浆(图22a)、脑(图22b)、空肠(图22c)和肾(图22d)中测量的mmf水平。条代表平均值(n＝4)，误差条表示标准偏差。评估在给予dmfpo或iv10分钟后脑(图22e)、肾(图22f)和空肠(图22g)中mmf组织穿透。条代表(组织[mmf]/血浆[mmf]×100)的平均值，误差条表示标准偏差(n＝4)。统计比较使用方差分析(anova)用图基多次比较检验进行，以评估施用途径之间和iv剂量水平之间的改变。*p<0.05；**，p<0.01；****，p<0.0001。图23展示相对于媒介物对照，通过经口管饲法(po，100mg/kg，黑条)或静脉内输注(iv，17.5mg/kg，空心条，或30mg/kg，灰条)施用dmf两小时后，脑中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图23a)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图23b)；血红素加氧酶1(hmox1)(图23c)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图23d)；和氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图23e))的转录产物水平的倍数变化。标记影线的条代表媒介物对照水平。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝4)，误差条指示标准偏差。使用studentt检验对po组进行统计比较。iv组用图基多次对比检验使用anova进行分析以评估媒介物、dmf17.5mg/kg和dmf30mg/kg组之间的差异。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001。图24展示相对于媒介物对照，通过经口管饲法(po，100mg/kg，黑条)或静脉内输注(iv，17.5mg/kg，空心条，或30mg/kg，灰条)施用dmf两小时后，肾中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图24a)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图24b)；血红素加氧酶1(hmox1)(图24c)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图24d)；和氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图24e))的转录产物水平的倍数变化。标记影线的条代表媒介物对照水平。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝4)，误差条指示标准偏差。使用studentt检验对po组进行统计比较。静脉内组用图基多次对比检验使用anova进行分析以评估媒介物、dmf17.5mg/kg和dmf30mg/kg组之间的差异。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001。图25展示相对于媒介物对照，通过经口管饲法(po，100mg/kg，黑条)或静脉内输注(iv，17.5mg/kg，空心条，或30mg/kg，灰条)施用dmf两小时后，空肠中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图25a)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图25b)；血红素加氧酶1(hmox1)(图25c)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图25d)；和氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图25e))的转录产物水平的倍数变化。标记影线的条代表媒介物对照水平。条代表相对于媒介物对照，指示基因的倍数变化的平均测定值(n＝4)，误差条指示标准偏差。使用studentt检验对po组进行统计比较。iv组用图基多次对比检验使用anova进行分析以评估媒介物、dmf17.5mg/kg和dmf30mg/kg组之间的差异。*，p<0.05；**，p<0.01。图26展示对于dmfpo(100mg/kg，实心黑色圆)和iv(17.5mg/kg，空心灰色正方形或30mg/kg，空心灰色三角形)，10分钟的平均组织mmf暴露(±标准偏差，x轴)的评估，其针对脑(图26a、b)、肾(图26c、d)和空肠(图26e、f)的药效转录改变绘图。在2小时下测量的平均倍数变化在y轴±标准偏差上针对osgin1(图26a)、akr1b8(图26b、e)、hmox1(图26c、f)和nqo1(图26d)绘图。y＝1的虚线代表在媒介物对照中观测到的基本基因表达水平。图27展示在iv施用dmf(30mg/kg，黑条)或mmf(27mg/kg，灰条)10分钟后在血浆(图27a)、脑(图27b)、肾(图27c)、空肠(空肠27d)和脾(图27e)中测量的mmf水平。条代表平均值(n＝4)，误差条表示标准偏差。图27f展示在iv给药dmf或mmf后10分钟脑、肾、空肠和脾中mmf组织穿透的评估。条代表(组织[mmf]/血浆[mmf]×100)的平均值，n＝4。误差条表示标准偏差。使用t检验，针对个别组织，进行统计比较，比较dmf与mmfiv施用。*p<0.05。图28展示相对于媒介物对照，在iv施用dmf、mmf或媒介物(分别为30mg/kg，黑条，或27mg/kg，灰条，媒介物影线条)2或6小时后，脑中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图28a)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图28b)；血红素加氧酶1(hmox1)(图28c)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图28d)；和氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图28e))的转录产物水平的倍数变化。条表示对于匹配时间点(n＝4)，相对于媒介物对照(影线条)，指示基因的倍数变化的平均测定值，误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多比较检验进行以评估接受媒介物、dmf或mmf的动物之间的改变。2和6小时时间点分开分析。*，p<0.05；**，p<0.01。图29展示相对于媒介物对照，在iv施用dmf、mmf或媒介物(分别为30mg/kg，黑条，或27mg/kg，灰条，媒介物影线条)2或6小时后，肾中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图29a)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图29b)；血红素加氧酶1(hmox1)(图29c)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图29d)；和氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图29e))的转录产物水平的倍数变化。条表示对于匹配时间点(n＝4)，相对于媒介物对照(影线条)，指示基因的倍数变化的平均测定值，误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多比较检验进行以评估接受媒介物、dmf或mmf的动物之间的改变。2和6小时时间点分开分析。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001。图30展示相对于媒介物对照，在iv施用dmf、mmf或媒介物(分别为30mg/kg，黑条，或27mg/kg，灰条，媒介物影线条)2或6小时后，空肠中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图30a)；谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图30b)；血红素加氧酶1(hmox1)(图30c)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图30d)；和氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图30e))的转录产物水平的倍数变化。条表示对于匹配时间点(n＝4)，相对于媒介物对照(影线条)，指示基因的倍数变化的平均测定值，误差条指示标准偏差。统计比较使用anova用图基多比较检验进行以评估接受媒介物、dmf或mmf的动物之间的改变。2和6小时时间点分开分析。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001；****，p<0.0001。图31展示对于ivdmf(30mg/kg，实心黑色圆)和ivmmf(27mg/kg，灰色三角形)，10分钟的组织mmf暴露(平均值±标准偏差，n＝4，x轴)的评估，其针对脑(图31a、b)、肾(图31c、d、e)和空肠(图31f、g、h)的药效转录改变绘图。在2小时下测量的平均倍数变化在y轴±标准偏差上针对osgin1(图31a、e)、akr1b8(图31f)、hmox1(图31c)和nqo1(图31b、d、g)(n＝4)绘图。y＝1的虚线代表在媒介物对照中观测到的基本基因表达水平。图32展示在iv给药dmf(30mg/kg，黑条)、mmf(27mg/kg，灰条)或媒介物(20％captisol，空心条)10分钟、2小时和6小时(hr)后白细胞计数的分析。白细胞(图32a)、嗜中性粒细胞(图32b)、淋巴细胞(图32c)、单核细胞(图32d)、嗜酸性粒细胞(图32e)和嗜碱性粒细胞(图32f)。条表示平均细胞计数，误差条指示标准偏差(n＝4，各组)。图33展示在iv给药dmf(30mg/kg，黑条)、mmf(27mg/kg，灰条)或媒介物(20％captisol，空心条)10分钟、2小时和6小时(hr)后红细胞和血小板的分析。红细胞(图33a)、血红蛋白水平(图33b)、血细胞比容(图33c)、平均红细胞容积(图33d)和血小板(图33e)。条表示平均细胞计数和值，误差条指示标准偏差(n＝4，各组)。图34展示相对于媒介物对照，在最后一次(第五次)iv给药dmf30mg/kg或媒介物媒介物2小时后，不同组织中某些基因(醛酮还原酶家族1成员b8(akr1b8)(图34a)；血红素加氧酶1(hmox1)(图34b)；nadp(h)脱氢酶醌1(nqo1)(图34c)；氧化应激诱发的生长抑制剂1(osgin1)(图34d))；和谷氨酸盐-半胱氨酸连接酶催化亚单位(gclc)(图34e)的转录产物水平的倍数变化。灰条表示对于匹配时间点(媒介物n＝4，dmfn＝5)，相对于媒介物对照(黑条)，dmf诱发的指示基因的倍数变化的平均测定值，误差条指示标准偏差。studentt检验用以比较不同组织内媒介物与dmf。*p<0.05，**p<0.01，****p<0.0001。图35展示最后一次(第五次)iv给药dmf(30mg/kg，灰条)或媒介物(20％captisol，黑条)10分钟后血细胞计数的分析。条表示平均细胞计数，误差条指示标准偏差(媒介物n＝4，dmfn＝5)。针对每一指示细胞类型，使用studentt检验进行统计比较，比较媒介物与dmf。*p<0.05。图36展示经口施用的dmf(每日100mg/kg)对sod1-g93a小鼠的转棒效能的影响。图37展示对于媒介物和dmf组，经口施用的dmf(经口，每日100mg/kg)对sod1-g93a小鼠中运动神经元症状的发作(图37a)和存活(图37b)的影响。图38展示对于媒介物和dmf组，指示自重量增加至重量减轻的转变的断点分析。图39展示在丙二酸盐诱发的纹状体病变模型中，对于实验1(图39a)和实验2(图39b)，与媒介物比较，dmf(经口)的作用。图40展示施用阿朴吗啡(1.0mg/kg，皮下)后dmf(经口)对大鼠中旋转行为的作用。图41展示免疫荧光的病变大鼠脑切片染色的代表性图像(星形细胞，图41a、b；神经元，图41c、d)。媒介物(图41a、c)和dmf(经口，100mg/kg)(图41b、d)。图42展示血浆、脑和脑脊髓液(csf)中最后一次经口给药dmf(mg/kg)30min后丙二酸盐模型中的mmf暴露。图43展示第1天(图43a；t＝3.829min(mmf)和t＝7.196min(dmf))和第7天(图43b；t＝3.819min(mmf)；t＝7.163min(dmf))的纳米悬浮液的hplc。图44展示第1天(图44a)和第7天(图44b)的纳米悬浮液的粒度分布。5.发明详述本文提供治疗有需要的人类患者的神经疾病的方法，其包括向所述患者静脉内施用包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，所述方法基本上由所述施用步骤组成。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯为向患者施用以进行所述治疗的唯一活性剂。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为至少一种反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为一种选自所述组的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯和在所述施用之前通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在一个实施方案中，药物组合物中的唯一活性剂为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，药物组合物基本上由至少一种反丁烯二酸酯组成。在一个实施方案中，药物组合物基本上由反丁烯二酸二甲酯组成。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。本文公开的各种方面、实施方案和选择均可以任何和所有变化组合。所提供的组合物和方法为示例性的，且不欲限制所要求的实施方案的范围。5.1用于本文中提供的方法的反丁烯二酸酯用于本文公开的方法和组合物的活性剂(即药物)为至少一种反丁烯二酸酯。此类反丁烯二酸酯可为反丁烯二酸二烷酯(例如反丁烯二酸二甲酯)、反丁烯二酸单烷酯(例如反丁烯二酸单甲酯)、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯(例如反丁烯二酸二甲酯与反丁烯二酸单甲酯)的组合、反丁烯二酸单烷酯(例如反丁烯二酸单甲酯)的前药、上述任一者的氘化形式或上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合。在一个实施方案中，用于本说明书中描述的方法、组合物和产物中的反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为(i)反丁烯二酸单烷酯或其前药，或(ii)反丁烯二酸二烷酯。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯为反丁烯二酸单甲酯(“mmf”)。在另一个实施方案中，反丁烯二酸二烷酯为反丁烯二酸二甲酯(“dmf”)。5.1.1反丁烯二酸单烷酯和反丁烯二酸二烷酯具体来说，本文中提供反丁烯二酸单烷酯和反丁烯二酸二烷酯，或其药学上可接受的盐或立体异构体，其用于本文中提供的方法中。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为式(i)的反丁烯二酸单烷酯：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中r1为c1-6烷基。在式(i)化合物的某些实施方案中，r1为甲基(反丁烯二酸单甲酯，“mmf”)。在一个实施方案中，式(i)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第4,959,389号中所公开来制备。在另一个实施方案中，反丁烯二酸酯为式(ii)的反丁烯二酸二烷酯：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中各r2独立地为c1-6烷基。在式(ii)化合物的某些实施方案中，各r2为甲基(反丁烯二酸二甲酯，“dmf”)。在一个实施方案中，式(ii)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第4,959,389号中所公开来制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯和/或反丁烯二酸单甲酯。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。5.1.2反丁烯二酸单烷酯的前药本文中还提供反丁烯二酸单烷酯的前药或其药学上可接受的盐或立体异构体，其用于本文所提供的方法中。具体来说，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(iii)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，r3为c1-6烷基；r4和r5各独立地为氢、c1-6烷基或取代的c1-6烷基；r6和r7各独立地为氢、c1-6烷基、取代的c1-6烷基、c1-6杂烷基、取代的c1-6杂烷基、c4-12环烷基烷基、取代的c4-12环烷基烷基、c7-12芳基烷基或取代的c7-12芳基烷基；或r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5-10杂芳基、取代的c5-10杂芳基、c5-10杂环烷基和取代的c5-10杂环烷基；且其中各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、＝o、-no2、苯甲基、-c(o)nr82、-r8、-or8、-c(o)r8、-coor8或-nr82，其中各r8独立地为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，当r3为乙基时，则r6和r7各独立地为氢、c1-6烷基或取代的c1-6烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、-r8、-or8或-nr82，其中各r8独立地为氢或c1-4烷基。在某些实施方案中，各取代基独立地为-oh或-cooh。在式(iii)化合物的某些实施方案中，各取代基独立地为＝o、c1-4烷基或-coor8，其中r8为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为乙基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为c3-6烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5各为氢。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为甲基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7各独立地为氢或c1-6烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7各独立地为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7各独立地为氢、甲基或乙基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7各为氢；在某些实施方案中，r6和r7各为甲基；且在某些实施方案中，r6和r7各为乙基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6为氢；且r7为c1-4烷基、取代的c1-4烷基，其中各取代基独立地为＝o、-or8、-coor8或-nr82，且其中各r8独立地为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6为氢；且r7为c1-4烷基、苯甲基、2-甲氧基乙基、羧基甲基、羧基丙基、1,3,4-噻二唑基、甲氧基、-cooch3、2-氧代-1,3-氧氮杂环戊烷基、2-(甲基乙氧基)乙基、2-乙氧基乙基、(叔丁基氧基羰基)甲基、(乙氧基羰基)甲基、(甲基乙基)氧基羰基甲基或乙氧基羰基甲基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5-6杂环烷基、取代的c5-6杂环烷基、c5-6杂芳基和取代的c5-6杂芳基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5杂环烷基、取代的c5杂环烷基、c5杂芳基和取代的c5杂芳基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c6杂环烷基、取代的c6杂环烷基、c6杂芳基和取代的c6杂芳基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：哌嗪、1,3-氧氮杂环戊烷基、吡咯烷和吗啉环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7连同其连接的氮一起形成c5-10杂环烷基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为c1-6烷基；r6为氢；r7为氢、c1-6烷基或苯甲基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为c1-6烷基；r6为氢；且r7为氢、c1-6烷基或苯甲基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为氢或c1-6烷基；且r6和r7各为c1-6烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为氢或c1-6烷基；且r6和r7各为c1-6烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r5为甲基；r4和r5各为氢；且r6和r7各为c1-6烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为氢或c1-4烷基；r6为氢；且r7为c1-4烷基或取代的c1-4烷基，其中取代基为＝o、-or8、-coor8或-nr82，其中各r8独立地为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为甲基；r6为氢；且r7为c1-4烷基或取代的c1-4烷基，其中取代基为＝o、-or8、-coor8或-nr82，其中各r8独立地为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5各为氢；r6为氢；且r7为c1-4烷基或取代的c1-4烷基，其中取代基为＝o、-or11、-coor11或-nr112，其中各r11独立地为氢或c1-4烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7连同其连接的氮一起形成c5-10杂环烷基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为氢或c1-6烷基；且r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5-6杂环烷基、取代的c5-6杂环烷基、c5-6杂芳基和取代的c5-6杂芳基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为甲基；r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5-6杂环烷基、取代的c5-6杂环烷基、c5-6杂芳基和取代的c5-6杂芳基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5各为氢；且r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5-6杂环烷基、取代的c5-6杂环烷基、c5-6杂芳基和取代的c5-6杂芳基环。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为氢或c1-6烷基；且r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：吗啉、哌嗪和n上取代的哌嗪。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3为甲基；r4和r5中一者为氢且r4和r5中另一者为氢或c1-6烷基；且r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：吗啉、哌嗪和n上取代的哌嗪。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r3不为甲基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r4为氢，且在某些实施方案中，r5为氢。在式(iii)化合物的某些实施方案中，r6和r7独立地为氢、c1-6烷基、取代的c1-6烷基、c6-10芳基、取代的c6-10芳基、c4-12环烷基烷基、取代的c4-12环烷基烷基、c7-12芳基烷基、取代的c7-12芳基烷基、c1-6杂烷基、取代的c1-6杂烷基、c6-10杂芳基、取代的c6-10杂芳基、c4-12杂环烷基烷基、取代的c4-12杂环烷基烷基、c7-12杂芳基烷基、取代的c7-12杂芳基烷基；或r6和r7连同其连接的氮一起形成选自以下的环：c5-10杂芳基、取代的c5-10杂芳基、c5-10杂环烷基和取代的c5-10杂环烷基。在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n,n-二乙基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯[n-苯甲基氨基甲酰基]甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-吗啉-4-基-2-氧代乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-丁基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸[n-(2-甲氧基乙基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；2-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰氨基}乙酸；4-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰氨基}丁酸；(2e)丁-2烯-1,4-二酸甲酯(n-(1,3,4-噻二唑-2-基)氨基甲酰基)甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n,n-二甲基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-甲氧基-n-甲基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸双-(2-甲氧基乙基氨基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸[n-(甲氧基羰基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；4-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰氨基}丁酸钠盐；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-氧代-2-哌嗪基乙酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸甲酯2-氧代-2-(2-氧代(1,3-氧氮杂环戊烷-3-基)乙酯；(2e)丁-2烯-1,4二酸{n-[2-(二甲基氨基)乙基]氨基甲酰基}甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-(4-甲基哌嗪基)-2-氧代乙酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸甲酯{n-[(丙基氨基)羰基]氨基甲酰基}甲酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸2-(4-乙酰基哌嗪基)-2-氧代乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸{n,n-双[2-(甲基乙氧基)乙基]氨基甲酰基}甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-(4-苯甲基哌嗪基)-2-氧代乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸[n,n-双(2-乙氧基乙基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸2-{(2s)-2-[(叔丁基)氧基羰基]吡咯烷基}-2-氧代乙酯甲酯；1-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰基}(2s)吡咯烷-2-甲酸；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-n-甲基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸{n-(乙氧基羰基)甲基]-n-甲基氨基甲酰基}甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸[n,n-双(2-甲氧基乙基)氨基甲酰基]乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n,n-二甲基氨基甲酰基)乙酯甲酯；2-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]-n-甲基乙酰氨基}乙酸；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(2e)丁-甲基-n-{[(甲基乙基)氧基羰基]甲基}氨基甲酰基)甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸{n-[(乙氧基羰基)甲基]-n-苯甲基氨基甲酰基}甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸{n-[(乙氧基羰基)甲基]-n-苯甲基氨基甲酰基}乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸{n-[(乙氧基羰基)甲基]-n-甲基氨基甲酰基}乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(1s)-1-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(1s)-1-[n,n-双(2-甲氧基乙基)氨基甲酰基]乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(1r)-1-(n,n-二乙基氨基甲酰基)乙酯甲酯；或(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(1s)-1-(n,n-二乙基氨基甲酰基)乙酯甲酯；或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n,n-二乙基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯[n-苯甲基氨基甲酰基]甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-吗啉-4-基-2-氧代乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-丁基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸[n-(2-甲氧基乙基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；2-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰氨基}乙酸；{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰氨基}丁酸；(2e)丁-2烯-1,4-二酸甲酯(n-(1,3,4-噻二唑-2-基)氨基甲酰基)甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n,n-二甲基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-甲氧基-n-甲基氨基甲酰基)甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸双-(2-甲氧基乙基氨基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸[n-(甲氧基羰基)氨基甲酰基]甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-氧代-2-哌嗪基乙酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸甲酯2-氧代-2-(2-氧代(1,3-氧氮杂环戊烷-3-基)乙酯；(2e)丁-2烯-1,4-二酸{n-[2-(二甲基氨基)乙基]氨基甲酰基}甲酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(n-[(甲氧基羰基)乙基]氨基甲酰基)甲酯甲酯；或2-{2-[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酰氨基}丙酸；或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：另参见us2014-0179778a1。在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：在式(iii)化合物的某些实施方案中，化合物为：段落【00411】和【00413】中所述的化合物使用chemistry4-ddrawpro,7.01c版本(cheminnovationsoftware,inc.,sandiego,california)命名。在一个实施方案中，式化合物(iii)可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,148,414b2号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(iv)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r9为c1-6烷基；r10和r11各独立地为氢、c1-6烷基或取代的c1-6烷基；且r12为c1-6烷基、取代的c1-6烷基、c1-6烯基、取代的c1-6烯基、c1-6杂烷基、取代的c1-6杂烷基、c3-8环烷基、取代的c3-8环烷基、c6-8芳基、取代的c6-8芳基，或-or13，其中r13为c1-6烷基、取代的c1-6烷基、c3-10环烷基、取代的c3-10环烷基、c6-10芳基或取代的c6-10芳基；其中各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、＝o、-no2、苯甲基、-c(o)nr142、-r14、-or14、-c(o)r14、-coor14或-nr142，其中各r14独立地为氢或c1-4烷基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，各取代基独立地为卤素、-oh、-cn、-cf3、-r14、-or14或-nr142，其中各r14独立地为氢或c1-4烷基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，各取代基独立地为＝o、c1-4烷基和-coor14，其中r14为氢或c1-4烷基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r9为c1-6烷基；在某些实施方案中，r9为c1-3烷基；且在某些实施方案中，r9为甲基或乙基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r9为甲基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r9为乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r9为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r10和r11中一者为氢且r10和r11中另一者为c1-6烷基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r10和r11中一者为氢且r10和r11中另一者为c1-4烷基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r10和r11中一者为氢且r10和r11中另一者为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r10和r11各为氢。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r12为c1-6烷基；r10和r11中一者为氢且r10和r11中另一者为c1-6烷基；且r9为c1-6烷基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r12为-or13。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r13为c1-4烷基、环己基或苯基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r12为甲基、乙基、正丙基或异丙基；r10和r11中一者为氢且r10和r11中另一者为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r12为取代的c1-2烷基，其中各取代基独立地为-cooh、-nhc(o)ch2nh2或-nh2。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r12为乙氧基、甲基乙氧基、异丙基、苯基、环己基、环己氧基、-ch(nh2)ch2cooh、-ch2ch(nh2)cooh、-ch(nhc(o)ch2nh2)-ch2cooh或-ch2ch(nhc(o)ch2nh2)-cooh。在式(iv)化合物的某些实施方案中，r9为甲基或乙基；r10和r11中一者为氢且r10和r11中另一者为氢、甲基、乙基、正丙基或异丙基；且r12为c1-3烷基、取代的c1-2烷基，其中各取代基为-cooh、-nhc(o)ch2nh2、-nh2或-or13，其中r13为c1-3烷基、环己基、苯基或环己基。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：(2e)丁-2-烯-1,4-二酸乙氧基羰氧基乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯(甲基乙氧基羰氧基)乙酯；或(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(环己基氧基羰氧基)乙酯甲酯；或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯(2-甲基丙酰氧基)乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯苯基羰氧基乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸环己基羰氧基丁酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酯甲酯；或(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-甲基-1-苯基羰氧基丙酯；或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：(2e)丁-2-烯-1,4-二酸乙氧基羰氧基乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯(甲基乙氧基羰氧基)乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯(2-甲基丙酰氧基)乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯苯基羰氧基乙酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸环己基羰氧基丁酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸(环己基氧基羰氧基)乙酯甲酯；(2e)丁-2-烯-1,4-二酸甲酯2-甲基-1-苯基羰氧基丙酯；或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：3-({[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]甲基}氧基羰基)(3s)-3-氨基丙酸，2,2,2-三氟乙酸；3-({[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]甲基}氧基羰基)(2s)-2-氨基丙酸，2,2,2-三氟乙酸；3-({[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2-烯酰基氧基]甲基}氧基羰基)(3s)-3-(2-氨基乙酰氨基)丙酸，2,2,2-三氟乙酸；或3-{[(2e)-3-(甲氧基羰基)丙-2烯酰基氧基]乙氧基羰氧基}(2s)-2-氨基丙酸，氯化物；或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其药学上可接受的盐或立体异构体。在式(iv)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其立体异构体。段落【00437】、【00439】、【00441】和【00442】中所述的化合物使用chemistry4-ddrawpro,7.01c版本(cheminnovationsoftware,inc.,sandiego,california)命名。在一个实施方案中，式(iv)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,148,414b2号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为美国专利申请公开案第2014/0057918号中所公开的前药，诸如式(v)化合物：或其药学上可接受的盐，其中r15为c1-6烷基；且m为2至6的整数。在式(v)化合物的某些实施方案中，r15为甲基。在式(v)化合物的某些实施方案中，r15为乙基。在式(v)化合物的某些实施方案中，r15为c3-6烷基。在式(v)化合物的某些实施方案中，r15为甲基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。在式(v)化合物的某些实施方案中，r15为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。在式(v)化合物的某些实施方案中，化合物为：反丁烯二酸(2-吗啉代乙基)酯甲酯；反丁烯二酸(3-吗啉代丙基)酯甲酯；反丁烯二酸(4-吗啉代丁基)酯甲酯；反丁烯二酸(5-吗啉代戊基)酯甲酯；或反丁烯二酸(6-吗啉代己基)酯甲酯；或其药学上可接受的盐。在式(v)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其药学上可接受的盐。段落【00454】中所述的化合物使用chemistry4-ddrawpro,7.01c版本(cheminnovationsoftware,inc.,sandiego,california)命名。在一个实施方案中，式(v)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利申请公开案第2014/0057918号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(vi)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中：r16为c1-10烷基、c5-14芳基、羟基、-o-c1-10烷基或-o-c5-14芳基；r17、r18和r19各独立地为c1-10烷基、c5-14芳基、羟基、-o-c1-10烷基、-o-c5-14芳基，或其中r20为c1-6烷基；其各自可为任选取代的；且n、p和q各独立地为0-4；其限制条件为r17、r18和r19中至少一者为在式(vi)化合物的某些实施方案中，r20为任选取代的c1-6烷基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r20为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r20为甲基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r16为c1-10烷基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r16为任选取代的c1-6烷基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r16为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r16为任选取代的c5-15芳基。在式(vi)化合物的某些实施方案中，r16为任选取代的c5-c10芳基。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(vi’)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中r16为c1-10烷基、c6-10芳基、羟基、-o-c1-10烷基或-o-c6-10芳基；r17、r18和r19各独立地为c1-10烷基、c6-10芳基、羟基、-o-c1-10烷基、-o-c6-10芳基，或其中r20为c1-6烷基；其各自可为任选取代的；且n、p和q各独立地为0-4；其限制条件为r17、r18和r19中至少一者为在式(vi’)化合物的某些实施方案中，r20为甲基。在式(vi)或式(vi’)化合物的某些实施方案中，化合物为：二反丁烯二酸(二甲基硅烷二基)二甲酯；反丁烯二酸甲酯((三甲氧基硅烷基)甲基)酯；反丁烯二酸甲酯((三羟基硅烷基)甲基)酯；或三反丁烯二酸三甲酯(甲基硅烷三基)酯；或其药学上可接受的盐。在式(vi)或式(vi’)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，式(vi)和式(vi’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2013/119677中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(vii)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中：其中r21为c1-6烷基；且r22和r23各独立地为c1-10烷基或c5-14芳基；其各自可为任选取代的。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r21为任选取代的c1-6烷基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r21为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r21为甲基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r22和r23各独立地为任选取代的c1-10烷基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r22和r23各独立地为任选取代的c1-6烷基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r22和r23各独立地为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r22和r23各独立地为任选取代的c5-14芳基。在式(vii)化合物的某些实施方案中，r22和r23各独立地为任选取代的c5-10芳基。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(vii’)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中r21为c1-6烷基；且r22和r23各独立地为c1-10烷基或c6-10芳基。在一个实施方案中，式(vii)和式(vii’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2013/119677中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(viii)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中：r24为c1-6烷基；r25、r26和r27各独立地为羟基、c1-10烷基、c5-14芳基、-o-c1-10烷基或-o-c5-14芳基；其各自可为任选取代的；且s为1或2。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r24为任选取代的c1-c6烷基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r24为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r24为甲基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r25、r26和r27各为羟基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r25、r26和r27各独立地为任选取代的c1-10烷基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r25、r26和r27各独立地为任选取代的c1-6烷基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r25、r26和r27各独立地为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r25、r26和r27各独立地为任选取代的c5-14芳基。在式(viii)化合物的某些实施方案中，r25、r26和r27各独立地为任选取代的c5-10芳基。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(viii’)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中：r24为c1-6烷基；r25、r26和r27各独立地为羟基、c1-10烷基、c6-10芳基、-o-c1-10烷基或-o-c6-10芳基；且s为1或2。在一个实施方案中，式(viii)和式(viii’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2013/119677中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(ix)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中各r28独立地为c1-6烷基；且r29为c1-10烷基；其各自可为任选取代的。在式(ix)化合物的某些实施方案中，各r28独立地为任选取代的c1-6烷基。在式(ix)化合物的某些实施方案中，各r28独立地为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在式(ix)化合物的某些实施方案中，各r28为甲基。在式(ix)化合物的某些实施方案中，r29为任选取代的c1-6烷基。在式(ix)化合物的某些实施方案中，r29为任选取代的甲基、乙基或异丙基。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2013/119677中所公开的前药，诸如式(ix’)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中r28为c1-6烷基；且r29为c1-10烷基。在一个实施方案中，式(ix)和式(ix’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2013/119677中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为美国专利第8,669,281b1号中所公开的前药，诸如式(x)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r30为未取代的c1-6烷基；la为取代的或未取代的c1-6烷基接头、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；且r31和r32各独立地为氢、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-6炔基、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；或另外，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r30为甲基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r30为乙基。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为取代的或未取代的c1-6烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为取代的或未取代的c1-3烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为甲基取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为二甲基取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为甲基或二甲基取代的c2烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，la为未取代的c2烷基接头。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为未取代的c1-6烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为未取代的c1-3烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为未取代的c1-2烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为c(o)ora取代的c1-6烷基，其中ra为氢或未取代的c1-6烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为s(o)(o)rb取代的c1-6烷基，其中rb为未取代的c1-6烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r32为氢。在式(x)化合物的某些实施方案中，r32为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r32为未取代的c1-6烷基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑基、异噁唑基、三唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的哌啶基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成未取代的哌啶基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成卤素取代的哌啶基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成4-卤素取代的哌啶基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成未取代的吗啉基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成未取代的吡咯烷基环。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31和r32连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为取代的或未取代的c6-10芳基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为未取代的c6-c10芳基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为未取代的苯基。在式(x)化合物的某些实施方案中，r31为未取代的苯甲基。在一个实施方案中，式(x)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,669,281b1号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为美国专利第8,669,281b1号中所公开的前药，诸如式(x’)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r33为未取代的c1-6烷基；la’为取代的或未取代的c1-6烷基接头、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；且r34为氢、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-6炔基、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r33为甲基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r33为乙基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为取代的或未取代的c1-6烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为取代的或未取代的c1-3烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为甲基取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为二甲基取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为甲基或二甲基取代的c2烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，la’为未取代的c2烷基接头。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为未取代的c1-6烷基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为甲基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为未取代的c1-3烷基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为未取代的c1-2烷基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为c(o)ora’取代的c1-6烷基，其中ra’为h或未取代的c1-6烷基。在式(x’)化合物的某些实施方案中，r34为s(o)(o)rb’取代的c1-6烷基，其中rb为未取代的c1-6烷基。在一个实施方案中，式(x’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,669,281b1号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为美国专利第8,669,281b1号中所公开的前药，诸如式(x”)化合物：或其互变异构体或立体异构体，其中a-为药学上可接受的阴离子；r35为未取代的c1-6烷基；la”为取代的或未取代的c1-6烷基接头、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；r36和r37各独立地为氢、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-c6炔基、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；或另外，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环；且r38为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r35为甲基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r35为乙基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为取代的或未取代的c1-6烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为取代的或未取代的c1-3烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为甲基取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为二甲基取代的或未取代的c2烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为甲基或二甲基取代的c2烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，la”为未取代的c2烷基接头。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为未取代的c1-3烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为未取代的c1-2烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为c(o)ora”取代的c1-6烷基，其中ra”为氢或未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为s(o)(o)rb”取代的c1-6烷基，其中rb”为未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑基、异噁唑基、三唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的哌啶基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成未取代的哌啶基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成卤素取代的哌啶基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成4-卤素取代的哌啶基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成未取代的吗啉基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成未取代的吡咯烷基环。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36和r37连同其连接的氮原子一起形成取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为取代的或未取代的c6-10芳基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为未取代的c6-10芳基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为未取代的苯基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r36为未取代的苯甲基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r37为氢。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r37为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r37为未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r38为未取代的c1-6烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r38为未取代的c1-3烷基。在式(x”)化合物的某些实施方案中，r38为甲基。在一个实施方案中，式(x”)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,669,281b1号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为美国专利第8,669,281b1号中所公开的前药，诸如式(xi)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r39为未取代的c1-6烷基；r40和r41各独立地为氢、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-6炔基、取代的或未取代的c6-10芳基、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；r42、r43、r44和r45各独立地为氢、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-6炔基或c(o)orb；且rb为h或取代的或未取代的c1-c6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r39为甲基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r39为乙基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为未取代的c1-6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为未取代的c1-3烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为未取代的c1-2烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为c(o)orb取代的c1-6烷基，其中rb为氢或未取代的c1-6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为s(o)(o)rb取代的c1-6烷基，其中rb为未取代的c1-6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为取代的或未取代的c6-10芳基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为未取代的c6-10芳基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为未取代的苯基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r40为未取代的苯甲基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r41为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r41为取代的或未取代的c1-6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r41为未取代的c1-6烷基。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42、r43、r44和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42为取代的或未取代的c1-6烷基且r43、r44和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42为未取代的c1-6烷基且r43、r44和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r44为取代的或未取代的c1-6烷基且r42、r43和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r44为未取代的c1-6烷基且r42、r43和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42和r44各独立地为取代的或未取代的c1-6烷基且r43和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42和r44各独立地为未取代的c1-6烷基且r43和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42和r43各独立地为取代的或未取代的c1-6烷基且r44和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r42和r43各独立地为未取代的c1-6烷基且r44和r45各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r44和r45各独立地为取代的或未取代的c1-6烷基且r42和r43各为氢。在式(xi)化合物的某些实施方案中，r44和r45各独立地为未取代的c1-6烷基且r42和r43各为氢。在一个实施方案中，式(xi)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,669,281b1号中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为美国专利第8,669,281b1号中所公开的前药，诸如式(xii)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r46为未取代的c1-6烷基；为x为n、o、s或so2；z为c或n；t为0、1、2或3；y为1或2；w为0、1、2或3；v为0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；r47、r48、r49和r50各独立地为氢、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-6炔基或c(o)or52；且r52为氢或取代的或未取代的c1-6烷基；且各r51独立地为氢、卤素、取代的或未取代的c1-6烷基、取代的或未取代的c2-6烯基、取代的或未取代的c2-6炔基、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；或另外，两个连接于同一碳原子的r51连同其连接的碳原子一起形成羰基、取代的或未取代的c3-10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基；或另外，两个连接于不同原子的r51连同其连接的原子一起形成取代的或未取代的c3-c10碳环、取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂环或取代的或未取代的包含一个或两个5或6员环和1-4个选自n、o和s的杂原子的杂芳基。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r46为甲基。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r46为乙基。在式(xii)化合物的某些实施方案中，为在式(xii)化合物的某些实施方案中，为在式(xii)化合物的某些实施方案中，为在式(xii)化合物的某些实施方案中，为在式(xii)化合物的某些实施方案中，r47为取代的或未取代的c1-6烷基且r48、r49和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r47为未取代的c1-6烷基且r48、r49和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r49为取代的或未取代的c1-6烷基且r47、r48和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r49为未取代的c1-6烷基且r47、r48和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r47和r49各独立地为取代的或未取代的c1-6烷基且r48和r49各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r47和r49各独立地为未取代的c1-6烷基且r48和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r47和r48各独立地为取代的或未取代的c1-6烷基且r49和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r47和r48各独立地为未取代的c1-6烷基且r49和r50各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r49和r50各独立地为取代的或未取代的c1-6烷基且r47和r48各为氢。在式(xii)化合物的某些实施方案中，r49和r50各独立地为未取代的c1-6烷基且r47和r48各为氢。在一个实施方案中，式(xii)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利第8,669,281b1号中所公开制备。在式(x)、(x’)、(x”)、(xi)或(xii)化合物的某些实施方案中，化合物为：在化合物(xii)的某些实施方案中，化合物为在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2014/096425中所公开的前药，诸如式(xiii)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中l为具有1至6个碳原子的烷二基；a为so、so2或nr53，且r53为c1-6烷基或c3-6环烷基。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，l为具有2、3或4个碳原子或具有2或4个碳原子或具有2个碳原子的烷二基。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，l为-ch2ch2-。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，a为so或so2。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，r53为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、仲戊基或己基。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，r53为环丙基、环丁基、环戊基和环己基。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，r53为c1-4烷基、c3或c4或c5环烷基。在式(xiii)化合物的某些实施方案中，r53为甲基或异丙基。在一个实施方案中，式(xiii)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2014/096425中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2014/096425中所公开的前药，诸如式(xiv)化合物：或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，式(xiv)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2014/096425中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2014/096425中所公开的前药，诸如式(xv)化合物：在一个实施方案中，式(xv)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2014/096425中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2014/096425中所公开的前药，诸如式(xvi)化合物：或其立体异构体，其中r54和r55各独立地为氢、c1-6烷基或c3-6环烷基；r56和r57各独立地为氢或c1-6烷基；且c和d各独立地为0至3的整数。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，r54和r55各独立地为氢、甲基或乙基。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，r54和r55各独立地为氢或甲基。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，r54和r55均为氢；或r54为氢且r55为甲基。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，c和d各独立地为0或1。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，c和d均为0。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，r56和r57各独立地为c1-5烷基或c1-4烷基。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，r56和r57为叔丁基。在式(xvi)化合物的某些实施方案中，r56和r57相同。在一个实施方案中，式(xvi)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2014/096425中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2014/096425中所公开的前药，诸如式(xvii)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r58、r59、r61和r62各独立地为氢、c1-6烷基或c3-6环烷基；r60为氢、c3-6环烷基或c1-6烷基，其中所述c1-6烷基任选被以下中的一者或多者取代：氨基、nh-c(nh)nh2、羧酰胺、甲酸、羟基、咪唑、吲哚、巯基、甲硫基、苯基、羟苯基，且其中r61和r62中一者连同r60一起任选属于5或6员杂脂族环；且f和g各独立地为0至3的整数，其限制条件为f与g不为0。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，r61和r62各独立地为氢或c1-2烷基。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，r61和r62为氢。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，r61为氢且r62为甲基。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，f和g中至少一者为0。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，g为0。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，r60为取代的c1-6烷基，其中取代基为以下中一者或多者：卤素、硝基、腈、脲、苯基、醛、硫酸酯基、氨基、nh-c(nh)nh2、羧酰胺、甲酸、羟基、咪唑、吲哚、巯基、甲硫基、苯基和羟苯基。在具体实施方案中，取代基为以下中一者或多者：氨基、nh-c(nh)nh2、羧酰胺、甲酸、羟基、咪唑、吲哚、巯基、甲硫基、苯基和羟苯基。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，r60为-ch2-c6h5。在式(xvii)化合物的某些实施方案中，化合物为式xvii’化合物：在一个实施方案中，式(xvii)或(xvii’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2014/096425中所公开制备。在一个实施方案中，反丁烯二酸单烷酯的前药为wo2014/096425中所公开的前药，诸如式(xviii)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中r63为氢、c1-6烷基、c3-6环烷基、c2-6烯基、卤素、氰基、羟基、氨基、羧基、巯基、任选被以下一者或多者取代的5或6员芳基或杂芳基：甲基、叔丁基、羟基、甲氧基、卤素、硝基、腈、胺和羧酰胺。在式(xviii)化合物的某些实施方案中，r63为氢、c1-2烷基、卤素、氰基、氨基或羟基。在式(xviii)化合物的某些实施方案中，r63为氢、羟基或甲基。在式(xviii)化合物的某些实施方案中，r63为甲基。在一个实施方案中，式(xviii)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如wo2014/096425中所公开制备。在式(xiii)、(xvi)、(xvii)或(xviii)化合物的某些实施方案中，化合物为：5.1.3氘化反丁烯二酸酯在一个实施方案中，氘化反丁烯二酸酯为美国专利申请公开案第us2014-0179779a1号中公开的化合物，诸如式(xix)化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中r64和r67各独立地为氢、氘、氘化甲基、氘化乙基、c1-6烷基、苯基、3-7员饱和或部分不饱和单环碳环、具有1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7员饱和或部分不饱和单环杂环或具有1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6员杂芳基环；且r65和r66各独立地为氢或氘，其限制条件为式(xix)化合物含有至少一个氘原子且r64和r67不同时为氢或氘。具体来说，反丁烯二酸酯同位素体为美国专利申请公开案第us2014-0179779a1号中公开的化合物，诸如式(xix’)化合物：或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中r64和r67各独立地为氢、氘、氘化甲基、氘化乙基或c1-6脂族基，且r65和r66各独立地为氢或氘，其限制条件为式(xix’)化合物含有至少一个氘原子且r64和r67不同时为氢或氘。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r64为氢或-ch3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r64为-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r64为-cd2cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r67为-ch2d、-chd2或-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r67为h、-ch3、-ch2d、-chd2或-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r64为氢或-ch3且r67为-ch2d、-chd2或-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r64为-cd3且r67为-ch2d、-chd2或-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r65和r66中至少一者为氘。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r65和r66均为氘。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r65和r66中至少一者为氘且r67为氢、-ch3、-ch2d、-chd2或-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r65和r66均为氘且r67为氢、-ch3、-ch2d、-chd2或-cd3。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，r64为-cd2cd3且r67为h、-ch3、-ch2d、-chd2或-cd3在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，化合物为反丁烯二酸(2h6)二甲酯、反丁烯二酸(2h3)甲酯、反丁烯二酸(2h3)二甲酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)二甲酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)甲酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)乙酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)(2h3)甲酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)(2h6)二甲酯、(2-吗啉代-2-氧代乙基)反丁烯二酸(2,3-2h2)甲酯、(4-吗啉代-1-丁基)反丁烯二酸(2,3-2h2)甲酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)2-(苯甲酰氧基)乙酯甲酯、反丁烯二酸2-(苯甲酰氧基)乙酯(2h3)甲酯、反丁烯二酸(2,3-2h2)(s)-2-((2-氨基-3-苯基丙酰基)氧基)乙酯甲酯或反丁烯二酸(s)-2-((2-氨基-3-苯基丙酰基)氧基)乙酯(2h3)甲酯；或其药学上可接受的盐或立体异构体。在式(xix)或式(xix’)化合物的某些实施方案中，化合物为：或其药学上可接受的盐或立体异构体。在一个实施方案中，式(xix)和(xix’)化合物可使用本领域技术人员已知的方法，例如如美国专利申请公开案第us2014-0179779a1号中所公开制备。氘化反丁烯二酸酯适用作活性剂用于本文中提供的方法，例如治疗神经疾病或治疗与神经疾病相关的损伤。在一个实施方案中，当反丁烯二酸酯中具体位置被指定为具有氘时，应了解该位置上氘的丰度实质上超过为0.015％的氘天然丰度。被指定为具有氘的位置通常在所述化合物中被指定为氘的各原子处具有至少3340(50.1％氘引入)的最小氘富集系数。在其他实施方案中，本文中提供的反丁烯二酸酯的每一指定氘原子的同位素富集系数为至少3500(各指定氘原子上52.5％氘引入)、至少4000(60％氘引入)、至少4500(67.5％氘引入)、至少5000(75％氘引入)、至少5500(82.5％氘引入)、至少6000(90％氘引入)、至少6333.3(95％氘引入)、至少6466.7(97％氘引入)、至少6600(99％氘引入)或至少6633.3(99.5％氘引入)。5.1.4盐在具体方面，在上文描述的反丁烯二酸酯的无毒药学上可接受的盐(其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式或上述任一者的互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合)包括在本文中描述的反丁烯二酸酯的范围内。酸加成盐通过将反丁烯二酸酯的溶液与药学上可接受的无毒酸的溶液混合来形成，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟碱酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、丁二酸盐、顺丁烯二酸盐、龙胆酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐。可接受的碱盐包括铝、钙、锂、镁、钾、钠、锌和二乙醇胺盐。5.2根据本文中提供的方法治疗的神经疾病和损伤本文提供治疗有需要的人类患者的神经疾病的方法，其包括向所述患者静脉内施用包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。本文中提供治疗神经疾病，例如与神经疾病相关的损伤的方法，其包括向有需要的患者静脉内施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个实施方案中，神经疾病为可通过上调nrf2/are路径治疗的疾病。在一个特定实施方案中，神经疾病为中风。在一个特定实施方案中，神经疾病为肌萎缩性侧索硬化。在一个特定实施方案中，神经疾病为亨廷顿病。在一个特定实施方案中，神经疾病为阿尔茨海默病。在一个特定实施方案中，神经疾病为帕金森病。在一个特定实施方案中，神经疾病为多发性硬化。在一个实施方案中，神经疾病为涉及白质的疾病。在另一个实施方案中，神经疾病为涉及脱髓鞘的疾病。在一个特定实施方案中，神经疾病不为多发性硬化。在特定实施方案中，术语“治疗(treating/treatment)”可包括疾病或病症的一种或多种症状或损伤好转、改善、治愈或减轻、维持其缓解或抑制其进展。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗疾病，例如与疾病相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗神经疾病。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在一个实施方案中，体内转化产物为例如与第二化合物缀合的反丁烯二酸酯，其中第二化合物为例如谷胱甘肽、半胱氨酸或蛋白质。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯是经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与神经疾病相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与神经疾病相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过1天、2天、5天、1周、2周、1个月、1年或2年。在特定实施方案中，与神经疾病相关的损伤通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与神经疾病相关的损伤，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度。在一个特定实施方案中，根据本文中描述的方法，在至少2周、1个月、1年、2年的治疗期期间一个或多个时间点评估神经疾病的治疗，例如与神经疾病相关的损伤的好转。在另一个特定实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效恢复或重获或改善由神经疾病减弱的功能，或消除与神经疾病相关的损伤。在某些实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与神经疾病相关的损伤进展或抑制其发展。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的方法，诸如下述方法评估，与未经治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与神经疾病相关的损伤好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。这些方法可包括分配给患者或一组患者执行具体任务的能力以数值的客观和主观量度。在一些实施方案中，根据本文中提供的方法治疗引起与对照值比较统计上显著的与神经疾病相关的损伤的好转。在一个实施方案中，对照值可为在治疗开始前执行具体任务的所评估患者或一组患者中损伤的基线值。在一个实施方案中，对照值可为给予安慰剂的患者执行具体任务所评估的值。在某些实施方案中，与神经疾病相关的损伤好转的统计显著性通过本领域中已知的方法确定。5.2.1中风本文中提供治疗中风，例如一种或多种与中风相关的损伤的方法，其包括向有需要的患者静脉内施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗中风，例如与中风相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗中风。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与中风相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与中风相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过1天、2天、5天、1周、2周、1个月、1年或2年。在某些实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯在从中风发生起至少1小时、3小时、5小时、12小时、1天、2天、5天、1周、2周或1个月内施用给患者。在特定实施方案中，与中风相关的损伤通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与中风相关的损伤，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度。在一个特定实施方案中，根据本文中描述的方法，在至少2周、1个月、1年、2年的治疗期期间一个或多个时间点评估中风的治疗，例如与中风相关的损伤的好转。在另一个特定实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效恢复或重获或改善由中风减弱的功能，或消除与中风相关的损伤。在某些实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与中风相关的损伤进展或抑制其发展。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的方法，诸如下述方法评估，与未经治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与中风相关的损伤好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。这些方法可包括分配给患者或一组患者执行具体任务的能力以数值的客观和主观量度。在一些实施方案中，根据本文中提供的方法治疗引起与对照值比较统计上显著的与神经疾病相关的损伤的好转。在一个实施方案中，对照值可为在治疗开始前执行具体任务的所评估患者或一组患者中损伤的基线值。在一个实施方案中，对照值可为给予安慰剂的患者执行具体任务所评估的值。在某些实施方案中，与神经疾病相关的损伤好转的统计显著性通过本领域中已知的方法确定。在特定实施方案中，本文中提供治疗中风以使与中风相关的损伤好转的方法，其中所述损伤为感觉运动损伤、上肢痉挛、行走损伤、整个身体控制损伤、本体感受、反射损伤、敏捷度损伤、四肢麻痹、耐久力损伤、手握力损伤、手部灵活度损伤、精细手协调能力损失、反射亢进、肌无力、肌张力损伤、步态损伤、运动范围损伤、言语损伤、共济失调、虚弱或疲劳、震颤、四肢功能和活动性损伤、协调或平衡损伤、咀嚼或吞咽损伤、视觉功能损伤、手功能损伤、面神经麻痹或上肢和下肢运动功能损伤。以下公开用于评估中风相关的损伤的方法论述于compendiumofinstructionsforoutcomemeasure,strokedgetaskforce(2011),americanphysicaltherapyassociation,neurologysection。5.2.1.1.视觉功能损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为视觉功能损伤。在一个特定实施方案中，视觉功能损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的视觉功能损伤可通过对比灵敏度测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.2.面神经麻痹在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为面神经麻痹。在一个特定实施方案中，面神经麻痹可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.3.本体感受在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为本体感受。在一个特定实施方案中，本体感受可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.4.全身控制损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为全身控制损伤。在一个特定实施方案中，全身控制损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的全身控制损伤可通过功能独立性测量(fimtm)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的全身控制损伤的好转通过执行fimtm评估，fimtm含有13个运动任务和5个认知任务，以7分次序量表在总体协助(或完全依赖)至完全独立的范围内评级。5.2.1.5.协调或平衡损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为协调或平衡损伤。在一个特定实施方案中，协调或平衡损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的平衡损伤可通过柏格氏平衡量表(bergbalancescale)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.6.步态损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为步态损伤。在一个特定实施方案中，步态损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的步态损伤可经由定时10米步行测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的步态损伤的好转通过使受试者在无帮助下行走10米(32.8尺)且测量患者行走中间6米(19.7尺)所花费的时间来评估。当患者到达2米时开始计时，且当患者脚趾到达8米时停止，以考虑到加速和减速。评分以每秒所走的米数表示。10米行走计时提供步态速度的快照，其被认为是精密测量患者步行能力的科学可靠且有效的测试。5.2.1.7.耐久力损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为耐久力损伤。在一个特定实施方案中，耐久力损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的耐久力损伤可通过6分钟行走测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的耐久力损伤的好转通过比较在治疗前后六分钟内行走的距离来评估。5.2.1.8.共济失调在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为共济失调。在一个特定实施方案中，共济失调可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的共济失调可通过指鼻测试(finger-to-nosetest)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在另一个实施方案中，人类患者中与中风相关的共济失调可通过跟-胫测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.9.行走损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为行走损伤。在一个特定实施方案中，行走损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的行走损伤可通过定时25英尺行走评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的行走损伤的好转通过测量患者完成25英尺行走所花费的时间评估。定时25英尺行走为一种熟知的用于评估行走损伤的方法。其由以下构成：将患者引导至清楚标记25英尺路程的一端，和要求患者尽可能快但安全地行走25英尺。时间由命令开始计算以至开始至患者到达25英尺标记时。通过使患者走回相同距离，立刻再次执行任务。测试评分为2次完整试验的平均值。5.2.1.10.敏捷度损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为敏捷度损伤。在一个特定实施方案中，敏捷度损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.11.手功能损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为手功能损伤。在一个特定实施方案中，手功能损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的手功能损伤可通过杰森-泰勒手功能测试(jebsen-taylorhandfunctiontest)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的手功能损伤的好转通过比较治疗前后完成杰森-泰勒测试的七项任务中每一项的时间来评估。杰森-泰勒手功能测试为具有稳定手损伤的成年人中单侧手功能的常用测试。该测试测量受试者开始完成以下任务每一项的时间量：(1)书写(抄写)24字句子；(2)翻转3”×5”卡片(模拟翻页)；(3)捡起小的常见物件(例如纸夹、瓶盖和硬币)；(4)使用茶匙和五种菜豆模拟进食；(5)堆栈方格；(6)捡起大的轻物件(例如空锡罐)；和(7)捡起大的重物件(重达1磅的满锡罐)。首先测试非优势手；然后测试优势手。5.2.1.12.反射损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为反射损伤。在一个特定实施方案中，反射损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.13.手握力损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为手握力损伤。在一个特定实施方案中，手握力损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的手握力损伤可通过握力测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的手握力损伤的好转通过比较在治疗前后使用测力计来评估。握力测试为鉴别手握力且检测可能由治疗过程引起的改变的一种简单、有效且可靠的量度。每只手的手握力使用测力计测量。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的手握力损伤可通过夹捏测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的手握力损伤的好转通过比较治疗前后夹捏强度来评估。夹捏测试为鉴别手握力且检测可能由治疗过程引起的改变的简单、有效且可靠的量度。每只手的手握力使用测力计测量。测试包括三个组成部分：指尖夹捏、钥匙夹捏和手掌夹捏。夹捏强度使用夹捏计测量。5.2.1.14.反射亢进在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为反射亢进。在一个特定实施方案中，反射亢进可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.15.手部灵活度损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为手部灵活度损伤。在一个特定实施方案中，手部灵活度损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的手部灵活度损伤可通过箱子与木块测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的手部灵活度损伤的好转通过比较比较治疗前后在一分钟内一次一个，从隔板一边移动至另一边的木块的数目来评估。箱子与木块测试为手部灵活度的标准测试。其测量受试者在一分钟内，可跨越盒子中间的隔板，从盒子一边移动至另一边的木块数。命令受试者每次仅移动一个木块。5.2.1.16.精细手协调能力丧失在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为精细手协调能力丧失。在一个特定实施方案中，精细手协调能力丧失可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.17.肌张力损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为肌张力损伤。在一个特定实施方案中，肌张力损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.18.关节活动范围损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为关节活动范围损伤。在一个特定实施方案中，关节活动范围损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.19.虚弱或疲劳在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为虚弱或疲劳。在一个特定实施方案中，虚弱或疲劳可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.20.肌无力在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为肌无力。在一个特定实施方案中，肌无力可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的肌无力可通过5次坐立测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的肌力的好转通过比较治疗前后完成5次坐立测试所花费的时间来评估。5次坐立测试提供功能下肢肌力的测量。患者双臂于胸前交叉且背靠着椅子坐下。命令患者在不接触椅后背的情况下尽可能快地站立和坐下五次。5.2.1.21.上肢痉挛在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为上肢痉挛。在一个特定实施方案中，上肢痉挛可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的上肢痉挛可通过残疾评定量表评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的上肢痉挛可通过改良阿什沃思量表(ashworthscale)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的上肢痉挛的好转通过比较治疗前后，在四肢通过全运动范围移动时检查者察觉到的阻力或肌张力的量的主观评级来评估。改良阿什沃思量表为通常用于测量痉挛的普遍方法。其测量在被动软组织伸展期间的阻力。5.2.1.22.震颤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为震颤。在一个特定实施方案中，震颤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.23.四肢功能和活动性的损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为四肢功能和活动性损伤。在一个特定实施方案中，四肢功能和活动性损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的四肢功能和活动性损伤可通过沃尔夫(wolf)功能运动测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的四肢功能和活动性损伤的好转通过在治疗前后执行沃尔夫功能活动性测试来评估。沃尔夫运动功能测试经由定时和功能任务定量上肢运动能力。其由17个项目或任务组成。任务按照复杂程度排列且从近端至远端关节牵连递进。评估任务的运行时间和运动与功能质量。虽然各项任务定时，过度运行时间通常截短至120秒。运行时间评估的大略分数为在所有任务期间记录的中值时间。5.2.1.24.四肢麻痹在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为四肢麻痹。在一个特定实施方案中，四肢麻痹可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.25.言语损伤(例如构音困难、运用不能或发声困难)在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为言语损伤。在一个特定实施方案中，言语损伤为构音困难、运用不能或发声困难。在某些实施方案中，言语损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.26.咀嚼或吞咽损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为咀嚼或吞咽损伤。在一个特定实施方案中，咀嚼或吞咽损伤为吞咽困难。在一个特定实施方案中，咀嚼或吞咽损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的咀嚼或吞咽损伤可通过使用对比物质的x射线，诸如钡x射线评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的咀嚼或吞咽损伤的好转通过在治疗前后执行钡x射线来评估。钡x射线为本领域中熟知的方法。患者吞咽钡液，钡液涂覆食管，允许医师看到食管形状的变化且评估肌肉活动。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的吞咽损伤可通过动力学吞咽研究评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的咀嚼或吞咽损伤的好转通过在治疗前后动力学吞咽研究来评估。动力学吞咽研究为本领域中公认的方法。患者吞咽不同稠度的钡涂覆的食物。此项测试提供这些食物穿过口腔和沿着咽喉行进时的图像。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的吞咽损伤可通过食道肌肉测试(测压法)评估(在施用之前和/或之后)。在一个实施方案中，与中风相关的咀嚼或吞咽损伤的好转通过在治疗前后执行食道肌肉测试来评估。测压法为本领域中已知的方法。将小管插入患者食管中且连接至压力记录器以在患者吞咽时测量食管的肌肉收缩。5.2.1.27.上肢和下肢运动功能损伤在一个实施方案中，与中风相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为上肢和下肢运动功能损伤。在一个特定实施方案中，上肢和下肢运动功能损伤可使用本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与中风相关的上肢和下肢运动功能损伤可通过富尔-迈耶评估(fugl-meyerassessment)来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。5.2.1.28.测量感觉运动损伤的各种其他测试在其他实施方案中，本文中描述或本领域中已知的与中风相关的损伤，包括运动功能的损伤可使用(不限于)以下评估：2分钟行走测试、六点步测试、下肢功能的肌力测试、下肢肌力测试(lemmt)、阿什沃思评分、9孔柱测试、精细手指运动、上肢功能的快速交替指头或感觉功能的功能系统评分。在特定实施方案中，2分钟行走测试可用于测量行走，lemmt可用于测量下肢肌力，和/或改良阿什沃思测量可用于测量痉挛。gaitritetm技术(例如26尺gaitritetm)可用于测量步态，例如步长和速度。neurocomsmartbalance可用于测量步态和平衡参数，诸如步长。step加速计可用于测量步态。其他已知的上肢功能评估包括(不限于)效能量表-自我报告测量、手持计力法和上肢指数(uei)。可用于测量运动功能的其他评估测试包括(但不限于)：科拉协调测试(kelacoordinationtest)、姿势稳定性测试、肩拖测试、膝伸肌的最大等长收缩力、肌肉耐久力测试、被动伸直腿举起、tempa(老年人的上肢效能测试)、臂、肩和手的失能(dash)调查表和手动能力量度-36(mam-36)。此类评估可在根据本文公开的方法施用反丁烯二酸酯至患者前后执行。5.2.2肌萎缩性侧索硬化本文中提供治疗肌萎缩性侧索硬化(“als”)或葛雷克氏症(lougehrig'sdisease)，例如与als相关的一种或多种损伤的方法，其包括静脉内向有需要的患者施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗als，例如与als相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗als。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与als相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与als相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过2周、1个月、1年或2年。在特定实施方案中，与als相关的损伤通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与als相关的损伤，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度。在一个特定实施方案中，根据本文中描述的方法，在至少2周、1个月、1年、2年的治疗期期间一个或多个时间点评估als的治疗，例如与als相关的损伤的好转。在另一个特定实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效恢复或重获或改善由als减弱的功能，或消除与als相关的损伤。在某些实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与als相关的损伤进展或抑制其发展。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的方法，诸如下述方法评估，与未经治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与als相关的损伤好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。这些方法可包括分配给患者或一组患者执行具体任务的能力以数值的客观和主观量度。在一些实施方案中，根据本文中提供的方法治疗引起与对照值比较统计上显著的与神经疾病相关的损伤的好转。在一个实施方案中，对照值可为在治疗开始前执行具体任务的所评估患者或一组患者中损伤的基线值。在一个实施方案中，对照值可为给予安慰剂的患者执行具体任务所评估的值。在某些实施方案中，与神经疾病相关的损伤好转的统计显著性通过本领域中已知的方法确定。在特定实施方案中，本文中提供治疗als以使与als相关的损伤好转的方法，其中所述损伤为感觉运动损伤、上肢痉挛、行走损伤、整个身体控制损伤、本体感受、反射损伤、敏捷度损伤、四肢麻痹、耐久力损伤、手握力损伤、手部灵活度损伤、精细手协调能力损失、反射亢进、肌肉虚弱、肌张力损伤、步态损伤、运动范围损伤、言语损伤、共济失调、虚弱或疲劳、震颤、四肢功能或活动性损伤、协调或平衡损伤、咀嚼或吞咽损伤、视觉功能损伤、手功能损伤、面神经麻痹或上肢或下肢运动功能损伤。5.2.2.1.下运动神经元功能损伤在一个实施方案中，与als相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为下运动神经元功能损伤，诸如肌无力、肌肉萎缩和震颤或肌颤搐。5.2.2.2.上运动神经元功能损伤在另一个实施方案中，与als相关且根据此处描述的方法治疗的损伤为上运动神经元功能损伤，诸如下肢、面部或颌痉挛；严重行走损伤；任何受影响肢沉重、疲劳、僵硬或缺乏协调；诸如活跃或过度反射的反射损伤。5.2.2.3.延髓als损伤在另一个实施方案中，与als相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤由脑干中运动神经元退化(延髓als)引起，诸如高声和清楚说话的能力损伤(构音困难)或完全不能发声。其他延髓als损伤包括鼻发声质量；由于发声肌肉损伤而难以将词语发音；和呼吸控制减少(wijesekera等,2009,orphanetjraredis.(2)4:3)。在另一个实施方案中，与als相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为难以咀嚼和吞咽(吞咽困难)或在最低程度挑衅下突发笑声或叫喊。5.2.2.4.脊椎als损伤在另一个实施方案中，当脊髓中的运动神经元受影响时引起与als相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤(脊椎als)。此类损伤可为当行走或奔跑时不灵活和绊倒(或最终不能行走或站立)；难以提起物体；手部灵活度损伤；和不能执行日常生活的活动(wijesekera等,2009,orphanetjraredis.(2)4:3)。5.2.2.5.与als相关的损伤的测试与als相关且根据本文中描述的方法治疗的症状和损伤可使用一种或多种下述或本领域中已知的以下方法评估。tufts定量神经肌肉检查(tqne)在一个具体实施方案中，人类患者中与als相关的肌力与功能损伤可通过tufts定量神经肌肉检查(tqne)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。tqne为测量als中强度与功能的标准化测试。该测试涉及使用应变式张力计测量臂中8个肌群的最大随意等长收缩(mvic)。此测量为als中临床试验的标准(ross等,1996年5月,neurology；46(5):1442-4)。als功能评级量表(alsfrs)在一个具体实施方案中，人类患者中与als相关的肌力与功能损伤可通过als功能评级量表(alsfrs)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。alsfrs为用于确定患者各种功能活动的能力的评估的按序评级量表(cedarbaum等1999,j.neurologicalsciences169:13-21)。最大肺活量(fvc)在一个具体实施方案中，人类患者中与als相关的呼吸损伤可通过测量最大肺活量(fvc)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。fvc为可进入肺中或从肺中出来的空气总量的量度，空气总量通过命令患者呼气至肺活量计中来测量。fvc容易执行且为呼吸状态的有意义指示物(czaplinski等,2006,journalofneurology,neurosurgery,andpsychiatry77.3:390-392)。其他评估方法在其他实施方案中，本文中描述或本领域中已知的与als相关的损伤，包括运动功能的损伤可使用(不限于)以下评估：定时25英尺行走测试、6分钟步行测试、2分钟行走测试、六点步测试、下肢功能的肌力测试、下肢肌力测试(lemmt)、阿什沃思评分、改良阿什沃思量表、9孔柱测试、精细手指运动、上肢功能的快速交替指头或感觉功能的功能系统评分。具体来说，定时25英尺行走、6分钟步行测试和/或2分钟行走测试可用于测量行走，lemmt可用于测量下肢肌力，和/或改良阿什沃思量表可用于测量痉挛。gaitritetm技术(例如26英尺gaitritetm)可用于测量步态，例如步长和速度。neurocomsmartbalance可用于测量步态和平衡参数，诸如步长。step加速计可用于测量步态。其他已知的上肢功能评估包括(不限于)效能量表-自我报告测量、手持计力法和上肢指数(uei)。可用于测量运动功能的其他评估测试包括(但不限于)：柏格氏平衡测试(bergbalancetest)、科拉协调测试、姿势稳定性测试、肩拖测试、膝伸肌的最大等长收缩力、肌肉耐久力测试、被动伸直腿举起、temp-a(老年人的上肢效能测试)、臂、肩和手的失能(dash)调查表、定时上和走测试和手动能力量度-36(mam-36)。此类评估可在根据本文公开的方法施用反丁烯二酸酯至患者前后执行。5.2.3亨廷顿病本文中提供治疗亨廷顿病，例如一种或多种与亨廷顿病相关的损伤的方法，其包括向有需要的患者静脉内施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗亨廷顿病，例如与亨廷顿病相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗亨廷顿病。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与亨廷顿病相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与亨廷顿病相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过2周、1个月、1年或2年。在特定实施方案中，与亨廷顿病相关的损伤通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与亨廷顿病相关的损伤，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度。在一个特定实施方案中，根据本文中描述的方法，在至少2周、1个月、1年、2年的治疗期期间一个或多个时间点评估亨廷顿病的治疗，例如与亨廷顿病相关的损伤的好转。在另一个特定实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效恢复或重获或改善由亨廷顿病减弱的功能，或消除与亨廷顿病相关的损伤。在某些实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与亨廷顿病相关的损伤进展或抑制其发展。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的方法，诸如下述方法评估，与未经治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与亨廷顿病相关的损伤好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。这些方法可包括分配给患者或一组患者执行具体任务的能力以数值的客观和主观量度。在一些实施方案中，根据本文中提供的方法治疗引起与对照值比较统计上显著的与神经疾病相关的损伤的好转。在一个实施方案中，对照值可为在治疗开始前执行具体任务的所评估患者或一组患者中损伤的基线值。在一个实施方案中，对照值可为给予安慰剂的患者执行具体任务所评估的值。在某些实施方案中，与神经疾病相关的损伤好转的统计显著性通过本领域中已知的方法确定。在一个实施方案中，亨廷顿病的严重程度或一种或多种与亨廷顿病相关的损伤的严重程度使用统一亨廷顿病评级量表(uhdrs)评估。uhdrs为通过亨廷顿研究组(“hsg”)研发的一种方法，其提供亨廷顿病的临床特征和过程的评估。uhdrs已用作受控临床试验中主要结果量度。uhdrs的组成部分为：1.运动评估2.认知评估3.行为评估4.独立性量表5.功能评估6.总功能能力(tfc)参见亨廷顿研究组(kieburtzk，原著者)。统一亨廷顿病评级量表：reliabilityandconsistency.mov.dis.1996；11:136-142。uhdrs的运动部分为以下运动障碍杂志出版物的增刊：第11卷第1-3期，统一亨廷顿病评级量表：reliabilityandconsistency.mov.dis.1996；11:136-142,增刊磁带。在特定实施方案中，本文中提供治疗亨廷顿病以使与亨廷顿病相关的损伤好转的方法，其中所述损伤为运动损伤、认知损伤或精神损伤，或以下中描述的损伤：aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011)。5.2.3.1.运动损伤在一个实施方案中，与亨廷顿病相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为运动损伤。在一个具体实施方案中，运动损伤为出现不自主运动(舞蹈病)和/或自主运动损伤，其可引起以下一者或多者：手部灵活度下降、手协调、言语不清、吞咽困难、平衡问题和跌倒。在一个实施方案中，运动损伤为以下中描述的损伤：aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第39-50页。在一个实施方案中，运动损伤为张力障碍，其特征在于例如经常与扭转品质相关的重复异常形式的肌肉收缩。在特定实施方案中，张力障碍可包括例如以下一者或多者：张力障碍臂在行走时提升、躯体倾斜、夜间磨牙以及脚在行走时内收。在一个实施方案中，运动损伤为运动徐缓，此意味自动或自主运动减缓。在一个实施方案中，运动徐缓可包括例如以下一者或多者：丧失面部的表达性、缺少臂摇摆、手指轻拍困难和快速交替运动和步态缓慢。在一个实施方案中，损伤运动为抽搐(模仿正常行为片段的突然、短暂、间歇的运动、手势或发声)、肌阵挛(突然、短暂、震动样不自主运动)、震颤(静止、作姿势或自主运动时存在的有节奏的摆动)或僵硬(肌张力增加和被动关节活动范围减少)。在一个实施方案中，运动损伤为丧失自主运动控制，诸如扫视眼运动开始和速度缓慢、手指和手部灵活度困难、手指轻拍缓慢和手快速交替运动。在一个实施方案中，运动损伤为运动不持续，即不能维持自主运动收缩，如例如“挤奶女工的夹紧”或在驾驶时气体踏板上压力不均匀所证明。在一个具体实施方案中，运动不持续可通过评估持续最大眼睑闭合或舌伸出来测定。在一个实施方案中，运动损伤为步态损伤。在一个具体实施方案中，步态更慢且具更宽的步伐。在一个实施方案中，运动损伤为构音困难(发声模糊或缓慢)。在另一个实施方案中，运动损伤为吞咽困难(吞咽有困难)。在另一个实施方案中，运动损伤为膀胱和肠失禁。在某些实施方案中，运动损伤由癫痫发作引起。在一个特定实施方案中，行走损伤可使用下述或本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。在一个实施方案中，舞蹈病的严重程度使用统一亨廷顿病评级量表(uhdrs)评估。aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第40-41页。uhdrs包括用于评估运动病症的子量表。舞蹈病以七个身体区域中的一个评级。总舞蹈病评分为各身体区域评分的总和，且可在0-28范围内。5.2.3.2.认知损伤一个实施方案中，与亨廷顿病相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为认知损伤。在一个具体实施方案中，认知损伤为心理处理的速度和灵活性降低和认知丧失累积。在一个实施方案中，认知损伤为以下中描述的损伤：aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第51-62页。在一个实施方案中，认知损伤为记忆损伤。由于例如处理速率较慢且组织信息的能力减弱，患者难以学习新信息且恢复预先学习的信息。在一个实施方案中，认知损伤为察觉信息能力损伤。在某些实施方案中，此损伤特征为以下损伤中的一种或多种：情绪识别(例如精确鉴别面部表情所传递的情绪的能力)、时间知觉(例如难以估计时间)、气味鉴别(例如能够检测气味，但鉴别气味的能力减弱)、空间知觉(例如身体与墙壁拐角或桌子的关系的判断减弱，导致意外或跌倒)和无意识(例如自己动作和感觉，不能认识到自己的失能和行为)的损伤。在一个实施方案中，认知损伤为执行效率损伤。执行过程在亨廷顿病中普遍且显著受影响。执行功能涉及调节脑中原始认知过程的基本能力。在某些实施方案中，这些基本能力包括(但不限于)认知处理速度、注意力(例如同时做两件事的能力)、计划和组织(例如排序和优先化)、开始(例如起始或开始活动、交谈或行为的能力)、固执(例如患者可坚持特定想法或动作)、冲动控制(例如患者可经历冲动控制困难和问题行为，诸如易怒、突发脾气、不经过思考即行事和不当性行为)和影响认知的其他调节过程。在一个实施方案中，认知损伤为交流，诸如清楚说话(清晰发音)、开始交谈(起始)和组织(例如什么信息进入且什么信息出去)的损伤。在一个特定实施方案中，认知损伤可使用下述或本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。在一个实施方案中，认知损伤使用统一亨廷顿病评级量表(uhdrs)评估。aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第61-62页。为了测量认知，uhdrs使用三个任务：1)符号数字模态测试：该测试要求患者在90秒内尽可能快地匹配多的符号和数字。2)斯特鲁色词测试(stroopcolorwordtest)：该测试要求患者说出盒子颜色、阅读词语且说出词语中墨水颜色。允许每个任务45秒且评分为准确朗读的物项数目。3)口述流畅测试：该测试要求患者在60秒内从指定字母开始大声说许多词语。5.2.3.3.精神损伤在一个实施方案中，与亨廷顿病相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为精神损伤。在一个具体实施方案中，精神损伤为抑郁症、狂躁、强迫症、精神病、额叶功能低下或执行功能障碍综合征。在一个特定实施方案中，额叶功能低下或执行功能障碍综合征特征为以下一者或多者：冷漠、易怒、冲动和强迫。该综合征可对患者婚姻、社会和经济安宁形成严重后果。在一个实施方案中，精神损伤为以下中描述的损伤：aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第63-82页。在一个实施方案中，精神损伤为严重抑郁症、狂躁、强迫症、妄想症或精神病症。在另一个实施方案中，精神损伤为器质性人格综合征(例如行为和人格改变，其可包括冷漠、易怒、抑制解除、固执、滑稽、执念和判断减弱)，又称额叶综合征或执行功能障碍综合征。在另一个实施方案中，精神病损伤为精神错乱、激动或性功能障碍。5.2.4阿尔茨海默病本文中提供治疗阿尔茨海默病，例如一种或多种与阿尔茨海默病相关的损伤的方法，其包括向有需要的患者静脉内施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗阿尔茨海默病，例如与阿尔茨海默病相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗阿尔茨海默病。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与阿尔茨海默病相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与阿尔茨海默病相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过2周、1个月、1年或2年。在特定实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与阿尔茨海默病相关的损伤，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度。在一个特定实施方案中，根据本文中描述的方法，在至少2周、1个月、1年、2年的治疗期期间一个或多个时间点评估阿尔茨海默病的治疗，例如与阿尔茨海默病相关的损伤的好转。在另一个特定实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效恢复或重获或改善由阿尔茨海默病减弱的功能，或消除与阿尔茨海默病相关的损伤。在某些实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与阿尔茨海默病相关的损伤进展或抑制其发展。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的方法，诸如下述方法评估，与未经治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与阿尔茨海默病相关的损伤好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。这些方法可包括分配给患者或一组患者执行具体任务的能力以数值的客观和主观量度。在一些实施方案中，根据本文中提供的方法治疗引起与对照值比较统计上显著的与神经疾病相关的损伤的好转。在一个实施方案中，对照值可为在治疗开始前执行具体任务的所评估患者或一组患者中损伤的基线值。在一个实施方案中，对照值可为给予安慰剂的患者执行具体任务所评估的值。在某些实施方案中，与神经疾病相关的损伤好转的统计显著性通过本领域中已知的方法确定。在特定实施方案中，本文中提供治疗阿尔茨海默病以使与阿尔茨海默病相关的损伤好转的方法。损伤可为认知损伤、功能能力损伤、行为变化、整个身体健康损伤、生活品质下降或下述或本领域中已知或在下述评估与阿尔茨海默病相关的损伤的方法中测定的与阿尔茨海默病相关的任何损伤。5.2.4.1.与阿尔茨海默病相关的损伤在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关且根据本文中描述的方法治疗的损伤为认知损伤、功能能力损伤、行为变化、整个身体健康损伤或生活品质下降。在一些实施方案中，认知损伤为记忆损伤或思维损伤。在一些实施方案中，记忆损伤可为立即回忆、短期记忆或长期记忆中的记忆问题。在一些实施方案中，思维损伤可为表达或理解语言、经由感觉鉴别熟悉物体损伤；协调、步态或肌肉功能差；或执行功能(例如计划、排序或判断)差。在一个特定实施方案中，损伤可使用下述或本领域中已知的一种或多种方法评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。alzheimer’sdiseasefactsheet,nih出版编号11-6423,2011年7月和understandingalzheimer’sdisease:whatyouneedtoknow,nih出版编号11-5441,2011年6月。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤利用以下中的一者或多者评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)：认知评估(诸如阿尔茨海默病评定量表、认知分部(adas-cog)、blessed信息-记忆力-集中力测试(bimc)、blessed定向力记忆力集中力工具、短暂精神状态测试(stms)、临床痴呆评级量表(cdr)、微精神状态检查(mmse))、功能评估(诸如功能活动调查表(faq)、工具性日常生活活动能力(iadl)、身体自我维持量表(psms)和进行性退化量表(pds))和整体评估(诸如改变的临床整体印象(cgic)、临床基于会谈的印象(cibi)和整体退化量表(gds))和基于照护者的评估(诸如阿尔茨海默病中行为病理学评级量表(behave-ad)和神经精神病调查表(npi))。robertp等,reviewofalzheimer'sdiseasescales:isthereaneedforanewmulti-domainscalefortherapyevaluationinmedicalpractice？,alzheimersres.ther.2010年8月26日；2(4):24,adelman和daly,initialevaluationofthepatientwithsuspecteddementia,am.fam.physician.2005年5月1日；71(9):1745-50,和boustanim等,screeningfordementia,systematicevidencereviews,第20期,2003。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过adas-cog子量表测试评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。adas-cog子量表可用于区别具有正常思考过程的人与思维受损的人。其还可评估个体中思考能力的下降程度。adas-cog子量表可确定受试者的思考过程递增好转或下降。adas-cog子量表含有十一个方面，包括单词回忆、命名物体或手指、遵循指令、结构性(绘图能力)练习、意向性(思维过程)练习、定向力、单词辨认、回忆测试指令、口语能力、理解力和治疗前后找词难度。在单词回忆部分，给予受试者三次从展示给其的一列十个单词回忆尽可能多地单词的机会。在命名物体或手指中，将若干实物展示给受试者，诸如花、铅笔和梳子，且受试者被要求说出它们的名字。接着受试者被要求陈述手上每一手指的名称，诸如小手指、拇指等。在遵循指令中，受试者被要求遵循一系列有时多步但简单的命令，诸如“握拳”和“将铅笔放在卡片上”。在结构(绘画能力)练习中，该项任务涉及给人展示四种不同形状，难度逐步加大，诸如重叠矩形，且要求他们每个人绘出。在意向性(思维过程)练习中，测试执行人要求受试者假装受试者已写信给自己，将其折叠，将其放在信封中，密封信封，在信封上写地址且示范放邮票的位置。在定向力中，受试者的定向力通过询问受试者其姓与名、周几、日期、月、年、季节、日时和位置来测量。在单词辨认中，受试者被要求阅读且设法回忆一列十二个字。向受试者呈现那些单词以及若干其他单词且询问是否各单词为其早先看到的单词。在回忆测试命令中，评估个体在无提示或在极少数提示下记住命令的能力。在口语能力中，在整个测试中评估受试者使用语言表达自己的意思的能力。在理解力中，通过测试执行人评估在测试过程中受试者理解单词和语言的能力。在找词难度中，在整个测试中，测试执行人评估受试者在整个自发交谈中找词的能力。doraiswamypm等,memory,language,andpraxisinalzheimer'sdisease:normsforoutpatientclinicaltrialpopulations,psychopharmacol.bull.1997；33(1):123-8；whatisthealzheimer’sdiseaseassessmentscale-cognitivesubscale，alzheimers.about.com。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过blessed信息-记忆力-集中力测试(bimc)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。blessed信息记忆力集中力(bimc)工具主要评估定向力、记忆力和集中力(计数正向和反向且以颠倒次序说出年月)。计数误差且可总计零至28。产生超过10个误差表明认知损伤。adelman和daly,initialevaluationofthepatientwithsuspecteddementia,am.fam.physician.2005年5月1日；71(9):1745-50。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过blessed定向力记忆力集中力工具评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。blessed定向力记忆力集中力工具为bimc的缩短型式，具有评估对时间的定向力、回忆短的短语、反向计数和以颠倒次序叙述月份的六个问题。计算误差的加权分数。如同bimc一样，产生超过10个误差表明认知损伤。adelman和daly,initialevaluationofthepatientwithsuspecteddementia,am.fam.physician.2005年5月1日；71(9):1745-50。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过精神状态短测试(stms)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。精神状态短测试(stms)评估定向力、注意力、回忆、计算、概括、时钟绘图和复制。stms的总评分为38。29或更低的评分表明认知功能减弱。adelman和daly,initialevaluationofthepatientwithsuspecteddementia,am.fam.physician.2005年5月1日；71(9):1745-50,barclayl,shorttestofmentalstatushelpfulindiagnosingdementia,medscapemedicalnews,2003,medscape.com,kokmene等,ashorttestofmentalstatus:descriptionandpreliminaryresults,mayoclinproc,1987年4月；62(4):281-8,和tang-waidf等,comparisonoftheshorttestofmentalstatusandthemini-mentalstateexaminationinmildcognitiveimpairment,arch.neurol.,2003年12月；60(12):1777-81。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过临床痴呆评级量表(cdr)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。cdr为用于表征可应用于阿尔茨海默病和相关痴呆的认知和功能效能的六个方面的5分量表：记忆力、定向力、判断与问题解决、社会事务、住宅与嗜好和个人护理。进行各评级的必要信息经由患者的半结构化访谈和可靠的通知者或间接来源(例如家族成员)获得。cdr表提供引导临床医师基于会谈数据和临床判断进行适当评级的描述性锚。除各领域的评级之外，可经由使用运算法则计算总cdr评分。此评分可用于表征和追踪患者损伤/痴呆程度：0＝正常0.5＝极轻痴呆1＝轻度痴呆2＝中度痴呆3＝严重痴呆bergl.clinicaldementiarating(cdr).psychopharmacol.bull.1988；24:637-639。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过简易精神状态检查(mmse)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。北美最常用的精神状态检查为简易精神状态检查(mmse)。mmse测量认知功能的许多领域，包括记忆力、对地方和时间的定向力、命名、阅读、复制(视觉空间定向力)、书写和遵循三步命令的能力。其可在5至10分钟内执行且从0至30分进行评分。少于24分的评分表示认知损伤，不过测试可针对教育水平进行调整。在受高等教育的个体中mmse可更特定但更不敏感(即更多假阴性但更少假阳性)。adelman和daly,initialevaluationofthepatientwithsuspecteddementia,am.fam.physician.2005年5月1日；71(9):1745-50和folstein等,“mini-mentalstate”apracticalmethodforgradingthecognitivestateofpatientsfortheclinician.journalofpsychiatricresearch,12(3)；189-198。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过功能活动调查表查(faq)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。功能活动调查表(faq)测量可由痴呆减弱的功能活动(例如购物、烹饪、付账单的能力)。faq通过知晓且观测患者的家族成员或朋友回答。“通知者”被要求对患者在10项活动中的效能评级为依赖性、需要帮助或有困难但独立做事的某人。评分在0至30范围内，表示损伤的截止值为9(即，在三项或更多项活动中依赖性)。此信息可适用于临床背景，但仍然需要对患者的认知功能进行评估。adelman和daly,initialevaluationofthepatientwithsuspecteddementia,am.fam.physician.2005年5月1日；71(9):1745-50。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过工具性日常生活活动能力(iadl)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。lawton工具性日常生活活动能力(iadl)量表评估一个人执行人们在起床、穿衣、整理后所进行的活动的能力。这些活动包括(但不限于)烹饪、开车、使用电话或计算机、购物、掌握财政和管理药物。测量八个方面，iadl可在10至15分钟内执行。量表可提供功能下降的预警或发出需要进一步评估的信号。wienerjm等,measuringtheactivitiesofdailyliving:comparisonsacrossnationalsurveys,j.gerontol.1990年11月；45(6):s229-37和robertp等,reviewofalzheimer'sdiseasescales:isthereaneedforanewmulti-domainscalefortherapyevaluationinmedicalpractice？,alzheimersres.ther.2010年8月26日；2(4):24。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过躯体生活自理量表(psms)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。研发躯体生活自理量表以估计目前小区或机构中的年老者的劳动能力丧失以用于计划和评估治疗。量表中的项目特别以可观察到的行为作为目标。首先psms格式为基于adl的六个项目，接着为基于iadl量表的八个项目。用于反应的5分量表在完全的独立至完全依赖范围内。推荐用于测试的年龄为60和超过60。存在工具评级型式和自我执行型式。躯体生活自理量表(psms)。原始观测者评级型式；psychopharmacolbull.1988；24(4):793-4；躯体生活自理量表(psms)。自我评级型式。并入philadelphiageriatriccenter.multilevelassessmentinstrument(mai).psychopharmacol.bull.1988；24(4):795-7。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过进行性退化量表(pds)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。进行性退化量表(pds)含有27个生活品质因素且为自我执行的量表，用于护理者在11个方面中检验患者实现基本adl和iadl的能力。各项目使用100mm双极视觉模拟量表评分，接着由各项目的平均值得到在0至100范围内的总评分。dejongr等,measurementofquality-of-lifechangesinpatientswithalzheimer'sdisease.clinther.1989；11:545-54。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过临床整体印象(cgi)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。临床整体印象评级量表为精神病患者的治疗研究中症状严重程度、治疗反应和治疗功效的常用量度。临床整体印象严重程度量表(cgi-s)为7分量表，其需要临床医师在评估时，相对于临床医师过去关于具有相同诊断的患者的经验对患者疾病的严重程度进行评级。考虑到全部临床经验，在评级时依据精神病严重程度评估患者：1，正常，无病；2，边界精神疾病；3，轻度疾病；4，中度疾病；5，显著疾病；6，严重疾病；或7，极度疾病。临床整体印象-好转量表(cgi-i)为7分量表，其需要临床医师评估患者疾病相对于介入开始时的基线状况已经好转或恶化多少，且评级为：1，好转非常多；2，好转许多；3，最低限度好转；4，无变化；5，最低限度恶化；6，变坏许多；或7，变坏非常多。临床整体印象-功效指数为4分×4分评级量表，其评估治疗的治疗作用为：1，未改变或更坏；2，最低限度；3，中度；4，按副作用标记为无、不显著干扰患者功能、显著干扰患者功能和超过治疗作用。robertp等,reviewofalzheimer'sdiseasescales:isthereaneedforanewmulti-domainscalefortherapyevaluationinmedicalpractice？,alzheimersres.ther.2010年8月26日；2(4):24。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过临床基于会谈的印象(cibi)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。cibi为半结构化访谈，部分基于改变工具的adcs整体印象。其鉴别四种主要类别用于评估：整体、精神/认知状况、行为和日常生活的活动。此四种类别每一者再分成如下文表1中所示的领域。表1各领域通过使用探查手段评估。对于所有领域，提供一些提议探查手段。鼓励面谈者根据需要选择其他探查手段，增强会谈的广泛性。clinicianinterviewbasedimpressionofseverity,morethanmedication.com.au和knopmands,knappmj,graconsi,daviscs:theclinicianinterview-basedimpression(cibi):aclinician'sglobalchangeratingscaleinalzheimer'sdisease,neurology1994,44:2315-2321。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过整体退化量表(gds)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。整体退化量表(gds)为护理者提供关于罹患诸如阿尔茨海默病的原发退化性痴呆者的认知功能的阶段的概述。其分为7个不同阶段。第1阶段-3为痴呆前阶段。第4阶段-7为痴呆阶段。第5阶段开始，个体不再能在无帮助下生存。在gds内，将各阶段编号(1-7)，给予短名(即健忘、早期精神混乱等)，接着简单列出该阶段的特征。护理者可通过观测到个体的行为特征且将所述特征与gds比较来大概了解个体处于疾病过程哪一段。theglobaldeteriorationscaleforassessmentofprimarydegenerativedementia,www.fhca.org和reisberg,b.等,theglobaldeteriorationscaleforassessmentofprimarydegenerativedementia.americanjournalofpsychiatry,1982,139:1136-1139。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过阿尔茨海默病中行为病理学评级量表(behave-ad)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。behave-ad为一种用于评估阿尔茨海默病患者的神经病学测试工具，其提供非认知症状的整体评级。其可用于校验临床药物的功效。robertp等,reviewofalzheimer'sdiseasescales:isthereaneedforanewmulti-domainscalefortherapyevaluationinmedicalpractice？,alzheimersres.ther.2010年8月26日；2(4):24,auer等,theempiricalbehavioralpathologyinalzheimer'sdisease(e-behave-ad)ratingscale,int.psychogeriatr.1996年夏；8(2):247-66,和reisberg等,behavioralpathologyinalzheimer'sdisease(behave-ad)ratingscale,int.psychogeriatr.,1996；8增刊3:301-8；讨论351-4。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过神经精神病调查表(npi)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。神经精神病调查表(npi)评估痴呆患者中存在的10种行为障碍：错觉、幻觉、易怒、焦虑、激动/攻击、欣快、抑制解除、易怒/不稳定、冷漠和异常运动活动。npi使用筛选策略将施用时间最小化、仅检验和评分对筛选问题具有阳性反应的那些行为领域。确定各行为的频率与严重程度。npi上各项目依1至4分频率量表和1至3分严重程度量表评分。接着严重程度评分乘以频率评分，得到在10至120分范围内的总评分。npi信息自熟悉患者行为的护理者处获得。cummingsjl等,theneuropsychiatricinventory:comprehensiveassessmentofpsychopathologyindementia,neurology.1994年12月；44(12):2308-14和boustanim等,screeningfordementia,appendixc.detaileddescriptionofstandardscalesused,systematicevidencereviews,第20期,2003。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过阿尔茨海默病功能改变评估量表(adfacs)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。adfacs为基于基本adl和iadl的16项功能评估工具。经过训练的临床医师或研究助手直接自患者与护理者获得信息。基本adl项目每一者依0(无损伤)至4(严重损伤)的量表评分且各iadl项目依在0(无损伤)至3(严重损伤)范围内的量表评分。16项目量表的总分数在0至54范围内。boustanim等,screeningfordementia,appendixc.detaileddescriptionofstandardscalesused,systematicevidencereviews,第20期,2003。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过高-比-斯量表(gottfries-brane-steenscale，gbs)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。高-比-斯(gbs)量表为通过临床医师，基于患者与护理者的半结构化访谈，评级痴呆症状的27项目全面量表。gbs评估4个方面：智力损伤(定向力、记忆力、集中力[12个项目])、自顾运动功能(6个项目)、情绪反应(3个项目)和行为症状(6个项目)。0至6的7分评分系统用于此量表的27个项目每一者，总评分范围为0至162分，其中评分增加表示临床恶化。boustanim等,screeningfordementia,appendixc.detaileddescriptionofstandardscalesused,systematicevidencereviews,第20期,2003,gottfriescg等,anewratingscalefordementiasyndromes,archgerontolgeriatr1982,1:311-330,和g等,thescale:validity,reliabilityandapplicationinanti-dementiadrugtrials,dement.geriatr.cogn.disord.2001,12:1-14。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过痴呆中日常生活恶化的会谈量表(iddd)评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。此量表评估在小区中生活的患者的基本adl(16个项目)和iadl(17个项目)中的功能丧失。护理者评估依7分量表在各项目中患者损伤的严重程度，其中1至2分表示表示无损伤或轻微损伤，3至4分表示轻度损伤，5至6分表示中度损伤，且7分表示严重损伤。总评分在33至231分范围内。boustanim等,screeningfordementia,appendixc.detaileddescriptionofstandardscalesused,systematicevidencereviews,第20期,2003,katzs等,studiesofillnessintheaged.theindexofadl:astandardizedmeasureofbiologicalandpsychosocialfunction,jama1963,185:914-919,lawtonmp和brodyem:assessmentofolderpeople:self-maintainingandinstrumentalactivitiesofdailyliving,gerontologist1969,9:179-186,和robertp等,reviewofalzheimer'sdiseasescales:isthereaneedforanewmulti-domainscalefortherapyevaluationinmedicalpractice？,alzheimersres.ther.2010年8月26日；2(4):24。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的损伤通过痴呆中资源利用问卷量表(rud)评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。rud量表通过护理者和关于社会服务的使用、住院治疗的频率和持续时间、与保健专业人员的非预定接触、护理者与患者使用相伴药物、护理者护理患者和错过工作所花费的时间量和患者对研究药物的使用的编译数据完成。boustanim等,screeningfordementia,appendixc.detaileddescriptionofstandardscalesused,systematicevidencereviews,第20期,2003。在一个实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的功能能力损伤可使用功能评估来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的功能能力损伤可使用功能评估问卷(faq)来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的功能能力损伤可通过工具性日常生活活动能力(iadl)测试来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的功能能力损伤可通过躯体生活自理量表(psms)测试来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的功能能力损伤可通过渐进恶化量表(pds)测试来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的认知损伤可使用认知评估来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的认知损伤可通过阿尔茨海默病评定量表认知分部(adas-cog)来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的认知损伤可通过blessed信息-记忆力-集中力测试(bimc)来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的认知损伤可通过临床痴呆评级量表(cdr)来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一些实施方案中，人类患者中与阿尔茨海默病相关的认知损伤可通过简易精神状态检查(mmse)来评估(在施用反丁烯二酸酯之前和/或之后)。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤可使用阿尔茨海默病评估量表-认知(adas-cog)子量表评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。阿尔茨海默病评估量表-认知(adas-cog)子量表帮助评估思考过程且区分正常思考过程与减弱的思考过程。其尤其适用于确定思考过程的衰退程度且可基于回答和评分，帮助评估人处于痴呆哪个阶段。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤的好转通过adas-cog子量表评估。adas-cog子量表评估覆盖十一个方面的受试者的认知能力和记忆力，这些领域包括单词回忆、命名物体或手指、遵循指令、结构性(绘图能力)练习、意向性(思维过程)练习、定向力、单词辨认、回忆测试指令、口语能力、理解力和治疗前后找词难度。将adas-cog子量表每个部分的得分加和，得到总评分。在思维功能障碍越大，评分越大。doraiswamypm等,memory,language,andpraxisinalzheimer'sdisease:normsforoutpatientclinicaltrialpopulations,psychopharmacol.bull.1997；33(1):123-8；whatisthealzheimer’sdiseaseassessmentscale-cognitivesubscale，alzheimers.about.com。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤可使用认知能力筛选测试(casi)评估或测定(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤的好转通过casi评估。casi提供关于注意力、集中力、定向力、短期记忆、长期记忆、语言能力、视觉构建、类聚流畅性、概括和判断的定量评估。tengel等,thecognitiveabilitiesscreeninginstrument(casi):apracticaltestforcross-culturalepidemiologicalstudiesofdementia,int.psychogeriatr.1994；6:45-58。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤可使用简易精神状态检查(mmse)评估(在施用反丁烯二酸之前和/或之后)。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤的好转通过mmse来评估。mmse为可用于按部就班并充分评估精神状态的工具。mmse有效地作为将具有认知损伤的患者与无认知损伤的患者分开的筛选工具。另外，当重复使用时，该工具能够测量可得益于介入的认知状态变化。mmse为测试认知功能五个方面的11个问题量度：定向力、记忆力、注意力和计算力、回忆能力和语言能力。总评分在0至30范围内，其中评分越高表明认知状态越佳。在一些实施方案中，评分23或更低表明认知损伤。folstein等,“mini-mentalstate”apracticalmethodforgradingthecognitivestateofpatientsfortheclinician.journalofpsychiatricresearch,12(3)；189-198。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤可使用计算机化记忆力成套测试(cmbt)来评估(在施用反丁烯二酸之前和/或之后)。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤的好转通过cmbt评估。计算机化记忆力套件测试(cmbt)包括若干认知测试，诸如面部识别、名和姓全部获取和姓名-面部关联延迟回忆子量表。其为记忆力评估临床套件的计算机化型式，其仿真日常生活的关键认知任务。sanchesdeoliveirar等,useofcomputerizedteststoassessthecognitiveimpactofinterventionsintheelderly,dementneuropsychol,2014年6月；8(2):107-111和seltzerb等efficacyofdonepezilinearly-stagealzheimerdisease:arandomizedplacebo-controlledtrial,archneurol.2004年12月；61(12):1852-6。在一个实施方案中，与阿尔茨海默病相关的认知损伤可使用多套临床痴呆评级量表总和(cdr-sob)来评估(在施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前和/或之后)。o’bryantse等,stagingdementiausingclinicaldementiaratingscalesumofboxesscores,arch.neurol.,65(8):1091-1095。5.2.5帕金森病本文中提供治疗帕金森病，例如一种或多种与帕金森病相关的损伤的方法，其包括向有需要的患者静脉内施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗帕金森病，例如与帕金森病相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗帕金森病。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与帕金森病相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与帕金森病相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过2周、1个月、1年或2年。在特定实施方案中，与帕金森病相关的损伤通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与帕金森病相关的损伤，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度。在一个特定实施方案中，根据本文中描述的方法，在至少2周、1个月、1年、2年的治疗期期间一个或多个时间点评估帕金森病的治疗，例如与帕金森病相关的损伤的好转。在另一个特定实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效恢复或重获或改善由帕金森病减弱的功能，或消除与帕金森病相关的损伤。在某些实施方案中，通过施用一定量反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与帕金森病相关的损伤进展或抑制其发展。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的方法，诸如下述方法评估，与未经治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与帕金森病相关的损伤好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。这些方法可包括分配给患者或一组患者执行具体任务的能力以数值的客观和主观量度。在一些实施方案中，根据本文中提供的方法治疗引起与对照值比较统计上显著的与神经疾病相关的损伤的好转。在一个实施方案中，对照值可为在治疗开始前执行具体任务的所评估患者或一组患者中损伤的基线值。在一个实施方案中，对照值可为给予安慰剂的患者执行具体任务所评估的值。在某些实施方案中，与神经疾病相关的损伤好转的统计显著性通过本领域中已知的方法确定。在特定实施方案中，本文中提供治疗帕金森病以使与帕金森病相关的损伤好转的方法，其中所述损伤为静止性震颤、运动徐缓、僵硬、姿势不稳定、步态僵硬、写字过小、杆样表述、不需要的加速、弯腰姿势、有探身过去的倾向、张力障碍、精细运动灵巧性和运动协调减弱、整体运动协调减弱、运动缺乏(手臂摇摆减少、静坐不能、讲话问题(诸如嗓音模糊或由缺乏肌肉控制所引起的言语不清)、吞咽困难、性别功能异常、抽筋、流口水、嗅觉损失、便秘、rem行为失常(失眠)、情绪病症、立位低血压(起立时低血压)、睡眠障碍、便秘、膀胱问题、性问题、过度唾液、重量减轻或增加、视力或牙齿问题、疲劳或能量损失、抑郁症、恐惧或焦虑、皮肤问题、认知问题诸如记忆困难、思想缓慢、意识模糊、痴呆或本领域中已知或下文所述与帕金森病相关的任何其他损伤。5.2.5.1.与帕金森病相关的损伤本文公开的方法提供患有帕金森病的患者的治疗。具体来说，方法提供治疗患有帕金森病的患者中一种或多种与帕金森病相关的损伤。帕金森病损伤包括运动症状和非运动症状。帕金森病运动症状可分成原发性运动症状和继发性运动症状。在一些实施方案中，本文公开的方法提供与帕金森病相关的原发性运动症状的治疗。在特定实施方案中，原发性运动症状可为静止性震颤、运动徐缓、僵硬或姿势不稳定。在一些实施方案中，本文公开的方法提供与帕金森病相关的继发性运动症状的治疗。在特定实施方案中，继发性运动症状可为步态僵硬、写字过小、杆样表述或不需要的加速。在一些实施方案中，继发性运动症状为弯腰姿势、有探身过去的倾向、张力障碍、精细运动灵巧性和运动协调减弱、整体运动协调减弱、运动缺乏(手臂摇摆减少、静坐不能、讲话问题(诸如嗓音模糊或由缺乏肌肉控制所引起的言语不清)、吞咽困难、性功能异常、抽筋或流口水。在一些实施方案中，本文公开的方法提供与帕金森病相关的非运动症状的治疗。在一些实施方案中，非运动为嗅觉丧失、便秘、rem行为病症(睡眠病症)、情绪病症、立位低血压(起立时低血压)、睡眠障碍、便秘、膀胱问题、性问题、过度唾液、重量减轻或增加、视力或牙齿问题、疲劳或能量损失、抑郁症、恐惧或焦虑、皮肤问题、认知问题诸如记忆困难、思想缓慢、意识模糊或痴呆。在一些实施方案中，与帕金森病相关的损伤为非运动损伤、震颤、运动徐缓(运动缓慢)僵硬、姿势不稳定、平衡减弱、步态障碍(诸如步态僵硬)、讲话损伤、吞咽损伤、嗓音病症或行走快速打乱。与帕金森病相关的损伤可为下述或本领域中已知的任一者。在一些实施方案中，损伤可使用以下任一者评估：用于威尔逊氏病(wilson'sdisease)的整体评估量表、整体张力障碍量表、改良运动徐缓评级量表、非运动症状量表(nmss)+(包括nmsq)、生活品质基本震颤问卷、精神性运动障碍的评级量表、rush运动障碍评级量表、rush基于视频的痉挛评级量表、ufmg西登哈姆氏舞蹈病评级量表(uscrs)、统一运动障碍评级量表(udysrs)、统一张力障碍评级量表(udrs)、统一多系统萎缩症评级量表(umsars)、统一帕金森病评级量表(mds-updrs)、3d步态分析、计时起走测试(tug)、定时25英尺行走测试(t25fw)和/或步态僵硬问卷(fogq)。naismithsl和lewissj,“dash”symptomsinpatientswithparkinson'sdisease:redflagsforearlycognitivedecline,jclinneurosci.2011年3月；18(3):352-5,morrism等,three-dimensionalgaitbiomechanicsinparkinson'sdisease:evidenceforacentrallymediatedamplituderegulationdisorder,movdisord.2005年1月；20(1):40-50,bonnetam等,nonmotorsymptomsinparkinson’sdiseasein2012:relevantclinicalaspects,parkinsonsdis.2012；2012:198316,martinez-martinp等,assessingthenon-motorsymptomsofparkinson'sdisease:mds-updrsandnmsscale,eurjneurol.2013年4月22日,和mdsratingscales,movementdisorders.org。在一些实施方案中，损伤使用updrs评估。当前updrs包括四个子量表。子量表1覆盖精神作用、行为和情绪。子量表2对日常生活活动评级。子量表3为pd运动表现形式的临床评级。子量表4覆盖疗法并发症。子量表1、2和4的数据自患者和护理者得出，而子量表3的数据基于检查。updrs子量表2和3存在训练带，且回顾这些可提高量度可靠性。然而，除检查者技能外，其他子量表的可靠性取决于患者报告，但存在日常生活活动组成部分子量表2的训练带。总updrs评分和updrs子量表评分并非间隔量表，此意谓关于这些量表的值之间无定量、相等的距离。举例来说，评分4超过2，但不一定指示严重程度的两倍。各评级部分为等级次序量度，而非准确时间间隔改变。perlmutterjs,assessmentofparkinsondiseasemanifestation,currprotocneurosci.2009年10月；第10章,goetzcg,lewittpa,weidenmanm.standardizedtrainingtoolsfortheupdrsactivitiesofdailylivingscale:newlyavailableteachingprogram.mov.disord.2003；18:1455-1458,louised,lyncht,marderk,fahns.reliabilityofpatientcompletionofthehistoricalsectionoftheunifiedparkinson’sdiseaseratingscale.mov.disord.1996；11:185-192,goetzcg,stebbinsgt.assuringinterraterreliabilityfortheupdrsmotorsection:utilityoftheupdrsteachingtape.mov.disord.2004；19:1453-1456,和goetzcg,stebbinsgt,chmurata,fahns,klawanshl,marsdencd.teachingtapeforthemotorsectionoftheunifiedparkinson’sdiseaseratingscale.mov.disord.1995；10:263-266。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的运动损伤或一般活动性损伤为行走损伤。行走损伤包括(但不限于)行走速度损伤、行走不必要的加速、大步时间可变性损伤和双肢支撑可变性损伤。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的一般活动性损伤或行走损伤使用以下评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)：用于威尔逊氏病的整体评估量表、整体张力障碍量表、改良运动徐缓评级量表、非运动症状量表(nmss)+(包括nmsq)、生活品质基本震颤问卷、精神性运动障碍的评级量表、rush运动障碍评级量表、rush基于视频的痉挛评级量表、ufmg西登哈姆氏舞蹈病评级量表(uscrs)、统一运动障碍评级量表(udysrs)、统一张力障碍评级量表(udrs)、统一多系统萎缩症评级量表(umsars)、统一帕金森病评级量表(mds-updrs)、3d步态分析、计时起走测试(tug)、定时25英尺行走测试(t25fw)和/或步态僵硬问卷(fogq)。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的运动损伤或一般活动性损伤为步态损伤。在某些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的损伤为pd患者中步态异常或行走步态异常。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的步态损伤使用以下评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)：用于威尔逊氏病的整体评估量表、整体张力障碍量表、改良运动徐缓评级量表、非运动症状量表(nmss)+(包括nmsq)、生活品质基本震颤问卷、精神性运动障碍的评级量表、rush运动障碍评级量表、rush基于视频的痉挛评级量表、ufmg西登哈姆氏舞蹈病评级量表(uscrs)、统一运动障碍评级量表(udysrs)、统一张力障碍评级量表(udrs)、统一多系统萎缩症评级量表(umsars)、统一帕金森病评级量表(mds-updrs)、3d步态分析、计时起走测试(tug)、定时25英尺行走测试(t25fw)和/或步态僵硬问卷(fogq)。在一些实施方案中，与帕金森病相关的运动损伤为运动障碍、张力障碍和/或运动不稳定。一般而言，运动不稳定为与长期使用药物，诸如左旋多巴相关的运动症状的控制振荡或变化。在一个实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的运动损伤为运动障碍和/或张力障碍。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的步态损伤(例如运动障碍、张力障碍或不稳定)使用以下评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)：用于威尔逊氏病的整体评估量表、整体张力障碍量表、改良运动徐缓评级量表、非运动症状量表(nmss)+(包括nmsq)、生活品质基本震颤问卷、精神性运动障碍的评级量表、rush运动障碍评级量表、rush基于视频的痉挛评级量表、ufmg西登哈姆氏舞蹈病评级量表(uscrs)、统一运动障碍评级量表(udysrs)、统一张力障碍评级量表(udrs)、统一多系统萎缩症评级量表(umsars)、统一帕金森病评级量表(mds-updrs)、3d步态分析、计时起走测试(tug)、定时25英尺行走测试(t25fw)和/或步态僵硬问卷(fogq)。在一些实施方案中，与帕金森病相关的运动损伤为视力损伤(例如眼睛问题或视力困难)。在一些实施方案中，视力相关的帕金森病的损伤包括(但不限于)复视、眼睑不自主闭合、视觉-空间定向退化、幻觉和幻景、青光眼、眼睛过度流泪、疲倦眼睛和彩色视觉和对比灵敏度。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的视力损伤(例如眼睛问题或视力困难)使用pd视力问卷评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)。pd视力问卷包含三个部分：视觉和视觉空间症状、视觉介导的日常生活活动的效能和运动症状。amickmm等,web-basedassessmentofvisualandvisuospatialsymptomsinparkinson’sdisease,parkinsonsdis.2012；2012:564812。在一些实施方案中，与帕金森病相关的运动损伤为多动腿综合征。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的运动损伤(例如多动综合征)使用以下评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)：irls评级量表(irls)、临床整体印象(cgi)量表、患者整体印象(pgi)、睡眠问卷形式a、rls的生活品质(qol)、增加严重程度评级量表(asrs)、视觉模拟量表(vas)和医学结果研究睡眠量表(mos)。irls由10个问题的rls评估组成，格式为0至4，0为“从不”或“无”，且4为“非常严重”或“非常频繁”。rls的严重程度评级为：1-10轻度；11-20中度；21-30严重；和31-40非常严重。cgi具有3个部分：(1)疾病严重程度；(2)整体改善(cgii)或改变(cgic)和(3)功效指数。大部分(如果非全部)研究证实依据cgi-i(或-c)量表具有研究者评级的“改善许多”(2)或“改善很多”(1)的评分的患者比例(定义为依据此7分总整体改善量表的“反应”、1＝改善很多和7＝恶化很多的非疾病特异性结果量度)。aurorarn等,thetreatmentofrestlesslegssyndromeandperiodiclimbmovementdisorderinadults—anupdatefor2012:practiceparameterswithanevidence-basedsystematicreviewandmeta-analyses:anamericanacademyofsleepmedicineclinicalpracticeguideline,sleep,2012年8月1日；35(8):1039-62。在一些实施方案中，与帕金森病相关的运动损伤为僵硬，例如步态僵硬。僵硬为暂时性、不自主地无法开始或持续运动，仅持续几秒，或有时，几分钟。其突然发生，尤其在行走时，如同脚变成粘住地面且还可影响讲话、书写或睁开和闭合眼睛。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的运动损伤(例如僵硬)使用统一帕金森病评级量表(mds-updrs)、3d步态分析、定时25英尺行走测试(t25fw)和/或步态僵硬问卷(fogq)评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)。在一些实施方案中，与帕金森病相关的运动损伤为增加的跌倒。患有帕金森氏的某些人发现其步态变得减弱，其可能步行缓慢，拖曳或遭遇僵硬。所有这些可损害平衡且跌倒变得常见，随着病状进展而渐增。跌倒通常在发作第一症状后5至10年之间开始。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的运动损伤(例如跌倒)使用平衡评估，包括tinetti、柏格氏平衡量表(bbs)、计时起走(tug)、功能步态评估(fga)和/或平衡评价系统测试(bestest)评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)。duncanrp等,accuracyoffallpredictioninparkinsondisease:six-monthand12-monthprospectiveanalyses,parkinsonsdis,2012；2012:237673。在一些实施方案中，与帕金森病相关的损伤为认知损伤。在一些实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的认知损伤使用帕金森病-认知的结果的量表(scopa-cog)、简易精神状态检查(mmse)和/或剑桥认知检查(camcog)评估(施用反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐之前或之后)。scopa-cog由10个项目组成，最大评分为43，其中评分越高，效能越佳。marinusj等,assessmentofcognitioninparkinson'sdisease,neurology.2003年11月11日；61(9):1222-8。5.2.6多发性硬化本文中提供治疗多发性硬化的方法，其包括向有需要的患者静脉内施用至少一种本文公开的反丁烯二酸酯。在一个特定实施方案中，多发性硬化为多发性硬化的渐进形式。在一个特定实施方案中，多发性硬化的渐进形式为原发进行性多发性硬化(pp-ms)。在另一个特定实施方案中，多发性硬化的渐进形式为继发进行性多发性硬化(sp-ms)。在另一个特定实施方案中，多发性硬化为多发性硬化的复发形式。在一个特定实施方案中，多发性硬化的复发形式为复发缓解型多发性硬化(rr-ms)。在一个方面，向有需要的患者静脉内施用治疗有效量的本文公开的反丁烯二酸酯。在另一个特定实施方案中，对患者静脉内施用反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物，量和时间足以治疗多发性硬化，例如与多发性硬化相关的损伤。在一个特定实施方案中，患者为人。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效治疗多发性硬化。在某些实施方案中，静脉内施用反丁烯二酸酯比经口施用反丁烯二酸酯更有效地使反丁烯二酸酯或其体内转化产物(例如分别为反丁烯二酸二甲酯和反丁烯二酸单甲酯)到达脑；即，相对于经口施用，在静脉内施用后实现脑中更大的量。在特定实施方案中，反丁烯二酸酯经口与静脉内施用。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法的治疗为患者中与多发性硬化相关的损伤好转、减少其持续时间、维持其好转或抑制其进展。此可通过在至少或超过1周、2周、1个月、1年或2年的时间段内本领域中已知且可用于评估与多发性硬化相关的损伤的一种或多种方法中读数改良来证明。在某些实施方案中，对患者重复施用至少一种反丁烯二酸酯，历时至少或超过1周、2周、1个月、1年或2年。在特定实施方案中，与多发性硬化相关的损伤或多发性硬化的严重程度通过本领域中已知的一种或多种方法评估。在其他特定实施方案中，本文中描述的方法还包括在施用步骤之前和/或之后评估与多发性硬化相关的损伤或多发性硬化的严重程度，其中通过本领域中已知的一种或多种方法评估损伤。在一个实施方案中，本文中描述的方法还包括在重复施用本文中描述的反丁烯二酸酯之后评估所述损伤的程度或严重程度。在某些实施方案中，通过施用一定量的反丁烯二酸酯治疗患者有效抑制与一种或多种与多发性硬化相关的损伤进展或抑制其发展。在特定实施方案中，本文中提供治疗多发性硬化以达到以下终点中的一个或多个的方法：(a)受试者中降低的复发频率；(b)受试者中降低的复发机率；(c)受试者中降低的按年率计复发率；(d)降低受试者中残疾进展风险；(e)降低的受试者中新或新扩大t2病变的数目；(f)降低的受试者中新未增强tl过高强度病变的数目；或(g)受试者中降低的gd+病变数目；其中改变(a)-(g)是相对于接受安慰剂或未经治疗的受试者。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯以治疗有效量施用给患者。在一个具体实施方案中，如通过本领域中已知的任何方法所评估，与未经治疗或安慰剂治疗的患者比较，施用治疗有效量的反丁烯二酸酯使患者中与多发性硬化相关的终点好转至少约5％、10％、20％、30％、40％或50％。5.3患者群体本文提供治疗有需要的人类患者的神经疾病的方法，其包括向所述患者静脉内施用包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯不具有已知的超敏反应。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在一个实施方案中，患者不同时用反丁烯二酸酯和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。如本文所用，术语“患者”和“受试者”可互换使用。如本文中描述的反丁烯二酸酯被施用给有需要的受试者、患有神经疾病的受试者。在一个特定实施方案中，所述受试者已由执业医师诊断为患有神经疾病。在一个特定实施方案中，人类患者为成年人。在一个实施方案中，人类患者为18至55岁。在一个特定实施方案中，人类患者为女性。在另一个特定实施方案中，人类患者为男性。在一个实施方案中，患者未怀孕。在另一个实施方案中，患者非哺乳母亲。在一个实施方案中，如果患者怀孕，则本文中提供的方法还包括鼓励患者进行妊娠登记的步骤，其监测在怀孕期间暴露于反丁烯二酸酯的女性中怀孕结果。在一个实施方案中，患者对在本文中描述的方法中施用的反丁烯二酸酯，诸如反丁烯二酸二甲酯无超敏反应。在另一个实施方案中，患者对反丁烯二酸酯，诸如反丁烯二酸二甲酯无超敏反应，或对反丁烯二酸酯具有已知的超敏反应。在某些实施方案中，本文中提供的方法还包括在静脉内施用反丁烯二酸酯的步骤后，监测患者对所述反丁烯二酸酯的过敏反应的发展的步骤。在特定实施方案中，过敏反应为例如出现荨麻疹、血管神经性水肿和/或呼吸困难。在一个实施方案中，患者不同时用一种或多种反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯)和任何免疫抑制或抗肿瘤药物治疗。在某些实施方案中，患者不同时用一种反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯)和任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在某些实施方案中，患者不同时用本文中描述的反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯)和携带引起进行性多灶性白质脑病(pml)的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前患者从未用反丁烯二酸酯，例如反丁烯二酸二甲酯处理。在另一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前1、2、3、4、6、8、10或12个月或1、2、3、5、10、20、30、40或50年，患者尚未用反丁烯二酸酯，例如反丁烯二酸二甲酯治疗。在一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前患者从未用任何免疫抑制或抗肿瘤药物治疗。在另一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前1、2、3、4、6、8、10或12个月或1、2、3、5、10、20、30、40、50年，患者尚未用任何免疫抑制或抗肿瘤药物治疗。在另一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前患者从未用任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在另一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前1、2、3、4、6、8、10或12个月或1、2、3、5、10、20、30、40或50年，患者尚未用任何免疫抑制或免疫调节药物或那他珠单抗治疗。在另一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前患者从未用携带引起pml的已知风险的任何药物治疗。在另一个实施方案中，在根据本文公开的方法开始疗法之前1、2、3、4、6、8、10或12个月或1、2、3、5、10、20、30、40或50年，患者尚未用携带引起pml的已知风险的任何药物治疗。在一个实施方案中，免疫抑制或抗肿瘤药物选自以下中的一者或多者：苯丁酸氮芥(chlorambucil)、美法仑(melphalan)、6-巯基嘌呤(6-mercaptopurine)、噻替派(thiotepa)、异磷酰胺(ifodfamide)、达卡巴嗪(dacarbazine)、丙卡巴肼(procarbazine)、替莫唑胺(temozolomide)、六甲蜜胺(hexamethylmelamine)、阿霉素(doxorubicine)、道诺霉素(daunarubicine)、伊达比星(idarubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊立替康(irinotecan)、氨甲喋呤(methotrexate)、依托泊苷(etoposide)、长春新碱(vincristine)、长春花碱(vinblastine)、长春瑞滨(vinorelbine)、阿糖胞苷(cytarabine)、白消安(busulfan)、氨萘菲特(amonifide)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、拓扑替康(topotecan)、氮芥(mustargen)、博来霉素(bleomycin)、洛莫司汀(lomustine)、司莫司汀(semustine)、丝裂霉素c(mitomycinc)、突变霉素(mutamycin)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、氨甲喋呤(methotrexate)、三甲曲沙(trimetrexate)、雷替曲塞(raltitrexid)、氟脱氧尿苷(flurorodeoxyuridine)、卡培他滨(capecitabine)、替加氟(ftorafur)、5-乙炔基尿嘧啶、6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine)、克拉屈滨(cladribine)、喷司他汀(pentostatin)、替尼泊苷(teniposide)、米托蒽醌(mitoxantrone)、洛索蒽醌(losoxantrone)、放线菌素d(actinomycind)、长春地辛(vindesine)、多西紫杉醇(docetaxel)、氨磷汀(amifostine)、干扰素α(interferonalpha)、他莫昔芬(tamoxefen)、甲羟孕酮(edroxyprogesterone)、甲地孕酮(megestrol)、雷诺昔芬(raloxifene)、来曲唑(letrozole)、阿那曲唑(anastrzole)、氟他胺(flutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、视黄酸类(retinoicacids)、三氧化二砷、利妥昔单抗(rituximab)、campath-1、米罗他(mylotarg)、霉酚酸(mycophenolicacid)、塔可莫司(tacrolimus)、糖皮质激素(glucocorticoids)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、格拉默、反丁烯二酸酯、拉喹莫德(laquinimod)、fty-720、干扰素τ(interferontau)、达珠单抗(daclizumab)、英利西单抗(infliximab)、illo、抗-il2受体抗体、抗-il-12抗体、抗-il6受体抗体、cdp-571、阿达木单抗(adalimumab)、依那西普(entaneracept)、来氟米特(ieflunomide)、抗干扰素γ抗体、阿巴西普(abatacept)、氟达拉滨(fludarabine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、硫唑嘌呤(azathioprine)、环孢素(cyclosporine)、静脉内免疫球蛋白、5-asa(美沙拉明(mesalamine))和β-干扰素。在一个实施方案中，免疫抑制或免疫调节药物选自以下中的一者或多者：钙神经素(calcinerurin)抑制剂、皮质类固醇、细胞抑制剂、亚硝基脲、蛋白质合成抑制剂、放线菌素d、蒽环霉素、光神霉素、多株抗体(诸如atgum和即复宁(thymoglobulin))、单株抗体(诸如莫罗单抗-cd3(muromonab-cd3))和巴利昔单抗(basiliximab)、环孢菌素、西罗莫司、雷帕霉素、γ-干扰素、类鸦片、tnf结合蛋白、tnf-α结合蛋白、依那西普、霉酚酸酯(mycophenolate)、芬戈莫德和多球壳菌素。在一个实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的患者不患有确认的引起受损免疫系统功能的全身性医学病状。在一个实施方案中，患者的生命中或自从诊断患有神经疾病以来，未进行过免疫抑制或免疫调节疗法。在一个实施方案中，根据本文中描述的方法治疗的患者不患有多发性硬化。5.3.1中风在一个实施方案中，本文中提供的方法还包括在施用步骤之前选择、鉴别或诊断患有中风的患者的步骤。5.3.2肌萎缩性侧索硬化(“als”)在一个实施方案中，本文中提供的方法还包括在施用步骤之前选择、鉴别或诊断患有als的患者的步骤。在一个实施方案中，患者被诊断为患有家族性als。在另一个实施方案中，所述患者被诊断为患有偶发性als。5.3.3亨廷顿病在一个实施方案中，本文中提供的方法还包括在施用步骤之前选择、鉴别或诊断患有亨廷顿病的患者的步骤。在一个实施方案中，患者被诊断为患有幼年发作型亨廷顿病。儿童期发作的亨廷顿病具有有些不同的特征。舞蹈病为远远更少的显著特征，且可为完全不存在。最初症状通常包括注意力不足、行为病症、学业不及格、张力障碍、运动徐缓和有时震颤。在成年人中很少发现的癫痫发作可在此幼年形式中发现。幼年发作型hd往往遵循更快速过程，存活期少于15年。aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第10页。在一个实施方案中，患者患有早期、中期或晚期亨廷顿病。在早期亨廷顿病中，患者具有大部分机能且可继续做事，例如工作、开车、处理财产和独立生活。损伤可包括(但不限于)以下中的一者或多者：微小不自主运动、微细协调丧失、难以思考复杂问题、有些抑郁、易怒和抑制解除。在中期亨廷顿病，患者丧失做事的能力，例如以下中的一者或多者：工作、开车、管理其自身财政和做其自己的家务事，但将能够做例如以下中的一者或多者：在帮助下吃、穿和注意个人卫生。在一个实施方案中，舞蹈病可为突出的，且患者执行例如有意运动任务的难度增加。患者可具有例如以下中一者或多者的问题：吞咽、平衡、跌倒和重量减轻。在特定实施方案中，对于患者而言，解决问题变得更困难，因为个体无法排序、组织或按优先次序列出信息。在晚期亨廷顿病中，患者在所有日常生活活动中均需要帮助。在一个实施方案中，患者在晚期亨廷顿病中常常无法说话且卧床不起，但可保留一些理解能力。在某些实施方案中，舞蹈病可为严重的。在一些实施方案中，晚期损伤为例如以下中的一者或多者：僵硬、张力障碍和运动徐缓。在另一个实施方案中，精神病症状可存在于晚期亨廷顿病，但由于患者可经历沟通困难而将更难以认识到且治疗。aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第7页。在一个实施方案中，患者具有11-13(阶段i)、7-10(阶段ii)、3-6(阶段iii)、1-2(阶段iv)或0(阶段v)的总功能能力评级量表总分。aphysician’sguidetothemanagementofhuntington’sdisease,lovecky和trapata(编辑),第3版,huntington’sdiseasesocietyofamerica(2011),第8页；shoulson等,assessmentoffunctionalcapacityinneurodegenerativemovementdisorders:huntington’sdiseaseasaprototype,于munsat(编辑):quantificationofneurologicaldeficit.boston:butterworth,1989,第271-283页；thehuntingtonstudygroup.unifiedhuntington’sdiseaseratingscale:reliabilityandconsistency,mov.disord.11,第136-142页(1996)。在一个实施方案中，已确定患者在编码亨廷顿蛋白质的基因中具有超过40个cag重复序列。在另一个实施方案中，已确定患者具有36-39个cag重复序列。在某些实施方案中，使用本领域中已知的任何方法，诸如遗传测试法确定cag重复序列的数目。在一个实施方案中，患者无亨廷顿病的家族史。在另一个实施方案中，患者不知道亨廷顿病的家族史。5.3.4阿尔茨海默病在特定实施方案中，本文中提供的方法还包括在施用步骤之前选择、鉴别或诊断患有阿尔茨海默病的患者的步骤。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有阿尔茨海默病。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者已在与阿尔茨海默病诊断一致的症状发作后执行神经成像(计算机断层扫描摄影术[ct]或mri)。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者在筛选时具有轻度至中度严重程度的痴呆，定义为按照简易精神状态检查(mmse)在16-26分内。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者在筛选之前已稳定给予管理机构批准的阿尔茨海默病药物至少3个月。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者已接受对精神起作用的药物(例如不同于单胺氧化酶抑制剂(maoi)的抗抑郁剂和大部分三环类药物、抗精神病药、抗焦虑药、抗惊厥药、情绪稳定剂等)。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者已稳定给予对精神起作用的药物至少6周。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第1阶段阿尔茨海默病。第1阶段中的患者通常无损伤(例如正常功能)。人未经历任何记忆问题。在一些实施方案中，与医学专业人员的会谈未展示痴呆症状的任何证据。参见alz.org的alzheimer’sassociation。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第2阶段阿尔茨海默病。第2阶段中的患者具有极轻度认知衰退(可为正常年龄相关的改变或阿尔茨海默病的最早征象)。人可能觉得好象其正具有记忆丧失，例如忘记熟字或日常物体的位置。但在体检期间或通过朋友、家庭成员或同事无法检测到痴呆症状。参见alz.org的alzheimer’sassociation。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第3阶段阿尔茨海默病。第3阶段中的患者具有轻度认知衰退(早期阿尔茨海默病可在一些但非所有具有这些症状的个体中诊断)。朋友、家庭成员或同事开始注意到困难。在详细医学会谈期间，医生也许能检测到记忆或专心问题。常见第3阶段困难包括：说出正确词语或姓名有明显的问题、当介绍新人时记住姓名困难、在社会或工作环境下显著更难以执行任务、忘记刚刚阅读的材料、丧失或放错有用物体和计划或组织烦恼增加。参见alz.org的alzheimer’sassociation。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第4阶段阿尔茨海默病。第4阶段的患者通常具有中度认知衰退(轻度或早期阿尔茨海默病)。此时，仔细的医学会谈将能检测到若干领域的明确症状：近来事件健忘、减弱的执行挑战性心算的能力-例如从100间隔7反向计数；执行复杂任务困难更大，诸如为客人计划晚餐、付款或管理财政；忘记自己个人史且变得喜怒无常或孤独，特别是在社交上或精神上挑战的情况。参见alz.org的alzheimer’sassociation。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第5阶段阿尔茨海默病。第5阶段的患者通常具有中等严重认知衰退(中度或中期阿尔茨海默病)。记忆力和思考力的缺口显著，且个体开始需要帮助日常活动。在此阶段，患有阿兹海默氏症者可能无法回忆其自己地址或电话号码或其毕业的中学或大学，对其身份或日期变得不清楚、对不太有挑战的心算有困难；诸如通过减去从40间隔4或从20间隔2反向计数；需要帮助为季节或时机选择适当衣服；仍然记住关于本身和其家庭的显著细节；且仍然无需帮助吃饭或如厕。参见alz.org的alzheimer’sassociation。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第6阶段阿尔茨海默病。第6阶段的患者通常具有严重认知衰退(中等严重或中期阿尔茨海默病)。记忆力继续恶化，可能发生人格改变，且个体需要大范围说明做日常活动。在此阶段，个体可能丧失近来经历以及其周围环境的意识，记住其自己姓名但对其个人史有困难、区别熟悉与不熟悉的面部但记住配偶或护理者的姓名有困难、适当需要帮助穿衣，且可在无监督下犯错，诸如将睡衣放在白天衣服上或鞋穿在错误的脚上；经历睡眠模式的重大改变，例如日间睡眠且晚上不安宁、需要帮助处理如厕细节(例如冲洗厕所、适当擦或处理棉纸)、控制其膀胱或肠日益困难、经历主要人格和行为变化，包括怀疑和错觉(诸如相信其护理者为冒名顶替者)或强迫性、重复行为，如搓手或撕碎棉纸，其往往徘徊或走失。参见alz.org的alzheimer’sassociation。在一个实施方案中，根据本文中提供的方法治疗的患者患有第7阶段阿尔茨海默病。第7阶段的患者通常具有非常严重的认知衰退(严重或晚期阿尔茨海默病)。在此疾病的最终阶段，个体丧失对其环境作出反应、继续进行会谈和最终控制移动的能力。其仍然可讲出单词或短语。在此阶段，个体需要帮助做大部分其日常个人护理，包括吃饭或如厕。其还可能丧失微笑、无需扶持下坐和抬头的能力。其反射变得异常，肌肉生长僵硬，且吞咽减弱。参见alz.org的alzheimer’sassociation。5.3.5帕金森病在特定实施方案中，本文中提供的方法还包括在施用步骤之前选择、鉴别或诊断患有帕金森病、尤其特发性帕金森病的患者的步骤。hoehn和yahr量表为通常用于在广义上描述帕金森氏症状如何进展和残疾相对程度的系统。其最初于1967中杂志neurology中由melvinyahr和margarethoehn发表，且包括第1阶段至第5阶段。从那时起，已添加第0阶段且第1.5阶段和第2.5阶段已被提出且广泛使用。第0阶段-无病征第1阶段-仅一侧症状(单侧)第1.5阶段-单侧以及涉及颈部和脊柱的症状第2阶段-双侧(双边)症状，但无平衡损伤第2.5阶段-轻度双边症状，当给予‘牵引’测试时恢复(医生站在人后面且要求其在向后牵引时维持其平衡)第3阶段-平衡损伤。轻度至中度疾病。身体上无需依附第4阶段-严重残疾，但仍然能够在无帮助下行走或站立第5阶段-除非说明，否则需要轮椅或卧床不起在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第1阶段。在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第1.5阶段。在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第2阶段。在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第2.5阶段。在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第3阶段。在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第4阶段。在一个实施方案中，根据本文公开的方法治疗的患者处于hoehn和yahr量表的第5阶段。5.3.6多发性硬化在一个实施方案中，本文中提供的方法还包括在施用步骤之前选择、鉴别或诊断患有多发性硬化的患者的步骤。在一些实施方案中，多发性硬化形式为复发缓解型、继发进展型、原发进展型或进展复发型多发性硬化。在一个实施方案中，多发性硬化患者为患有ms复发形式的患者。在一个特定实施方案中，患者患有复发缓解型ms(rr-ms)。在另一个实施方案中，多发性硬化患者为患有ms渐进形式的患者。在一个特定实施方案中，患者患有继发进展型ms(sp-ms)。在另一个特定实施方案中，患者患有原发进展型ms(sp-ms)。在另一个特定实施方案中，患者患有继发复发型ms(pr-ms)。5.4给药方案本公开提供用于本文中描述的治疗方法的给药方案。本文提供治疗有需要的人类患者的神经疾病的方法，其包括向所述患者静脉内施用包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在1至1000毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在10至750毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用的反丁烯二酸二甲酯的量在48至240毫克范围内。在一个实施方案中，在所述静脉内施用的步骤中施用治疗有效量的反丁烯二酸二甲酯，所述量少于480毫克。在一个实施方案中，所述施用每日进行。在一个实施方案中，所述施用每周进行一次。在一个实施方案中，所述施用每隔一周进行。在一个实施方案中，所述施用每月进行一次。在一个实施方案中，在至少两周的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少六个月的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，在至少一年的时间段内重复静脉内施用的步骤。在一个实施方案中，所述施用为治疗方案的一部分，其中所述向所述患者静脉内施用与向患者经口施用反丁烯二酸酯的一个或多个步骤交替。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且经口施用的反丁烯二酸二甲酯的量为每日480mg。反丁烯二酸酯可以确定的频率和剂量施用给有需要的受试者。本文中描述的反丁烯二酸酯和药物组合物的量可静脉内一天施用一次，或按每天2、3、4、5或6个剂量分开施用。在一个特定实施方案中，所述反丁烯二酸酯每日、每隔一日、每隔两日、每隔三日、每隔四日、每隔五日或每隔六日以数个剂量静脉内施用。在另一个特定实施方案中，所述反丁烯二酸酯每隔一周、每隔两周、每隔三周或每隔四周静脉内施用。在另一个特定实施方案中，所述反丁烯二酸酯每月、每隔一月、每隔两月、每隔三月、每隔四月或每隔五月静脉内施用。在特定实施方案中，所述施用呈相等剂量。在另一个特定实施方案中，所述施用非相等剂量(例如以在随后治疗期间增加的具体剂量治疗受试者)。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯在治疗期期间仅施用一次。在某些实施方案中，在至少一周的时间段内重复用本文中描述的反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物治疗受试者。在另一个特定实施方案中，在至少一个月的时间段内重复所述治疗。在另一个特定实施方案中，在至少两个月的时间段内重复所述治疗。在另一个特定实施方案中，在至少六个月的时间段内重复所述治疗。在另一个特定实施方案中，在至少一年的时间段内重复所述治疗。在一个具体方面，本文中描述的至少一种反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物经由多个施用途径，包括静脉内施用来施用给有需要的受试者，或至少一种反丁烯二酸酯可与其他药剂(即药物)组合施用(参见部分5.6)。用于产生单一剂型的反丁烯二酸酯的量将取决于具体施用模式而改变。然而，应了解，任何具体受试者的特定剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括采用的特定化合物的活性、年龄、体重、整体健康状况、性别、饮食、施用时间、排泄率、药物组合和治疗医师的判断和所治疗的具体疾病的严重程度。活性反丁烯二酸酯的量还可取决于反丁烯二酸酯共同施用的治疗性或预防性药剂(如果存在)。在一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个特定实施方案中，本文中描述的反丁烯二酸酯或组合物在给药方案过程内以恒定速率静脉内施用。在另一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物在给药方案的过程中以不同速率静脉内施用(例如初始剂量以固定速率，其在随后剂量期间增加或减少)。在另一个实施方案中，本文中描述的反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物以每小时每公斤体重约10至40ml的速率或以每小时每公斤体重约20至30ml的速率施用。在特定实施方案中，本文中描述的反丁烯二酸酯或组合物以1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml、8ml、9ml或10ml的总体积静脉内施用给患者。在另一个特定实施方案中，所述反丁烯二酸酯或组合物以10ml、20ml、30ml、40ml、50ml、60ml、70ml、80ml、90ml或100ml的总体积静脉内施用给患者。在另一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯或包含反丁烯二酸酯的组合物以100ml、200ml、300ml、400ml、500ml、600ml、700ml、800ml、900ml或1000ml的总体积静脉内递送至患者。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯以在约1mg至约1000mg、约10mg至约750mg或约48mg至约240mg范围内的量静脉内施用。在一个具体实施方案中，所述反丁烯二酸酯或组合物以少于480mg或约160mg或更少的量静脉内施用。在一个具体实施方案中，所述反丁烯二酸酯或组合物以每周一次约1,120mg或更少、两周一次2,240mg或更少或一月一次4,800mg或更少的量静脉内施用。如本领域技术人员所认识到，施用的本文中描述的化合物和药物组合物的量还将取决于施用途径、赋形剂使用和与其他治疗性治疗的共同使用，包括使用其他治疗剂(即药物)的可能性而改变。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每日静脉内施用(例如以1.11mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每隔一天静脉内施用(例如以2.22mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯一周三次静脉内施用(例如以2.59mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每周两次静脉内施用(例如以3.89mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每周一次静脉内施用(例如以7.77mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每隔一周一次静脉内施用(例如以15.54mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每隔两周一次静脉内施用(例如以23.31mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每隔三周一次静脉内施用(例如以31.08mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯一月一次静脉内施用(例如以33.30mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯隔月一次静脉内施用(例如以66.61mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每隔两月一次静脉内施用(例如以99.91mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸酯每隔三月一次静脉内施用(例如以133.21mmol或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸酯(例如每天5.00mmol、每天4.16mmol、每天3.33mmol、每天250mmol、每天1.67mmol或每天0.833mmol)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每日静脉内施用(例如以160mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每隔一天静脉内施用(例如以320mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯一周三次静脉内施用(例如以374mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每周两次静脉内施用(例如以560mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每周一次静脉内施用(例如以1,120mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每隔一周一次静脉内施用(例如以2,240mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每隔两周一次静脉内施用(例如以3,360mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每隔三周一次静脉内施用(例如以4,480mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯一月一次静脉内施用(例如以4,800mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯隔月一次静脉内施用(例如以9,600mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每隔两月一次静脉内施用(例如以14,400mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。在一些实施方案中，反丁烯二酸二甲酯每隔三月一次静脉内施用(例如以19,200mg或更少的剂量)，与每日给予口服剂量的反丁烯二酸二甲酯(例如每天720mg、每天480mg、每天360mg、每天240mg或每天120mg)组合。静脉内施用本文中描述的反丁烯二酸酯或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体相较于经口施用相同量的相同反丁烯二酸酯可提供受试者循环系统中个更高水平的所述反丁烯二酸酯。因此，预计静脉内施用本文中描述的反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯)的施用剂量低于实现相同临床作用的经口施用。在一个特定实施方案中，静脉内施用本文中描述的反丁烯二酸酯所施用的剂量比实现适用临床或药效作用的反丁烯二酸酯经口施用低至少两倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少40倍、至少50倍、至少100倍、至少200倍、至少300倍、至少400倍或至少500倍。在特定实施方案中，通过患者血液或血浆中反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯或反丁烯二酸单甲酯)的浓度确定临床或药效作用。在另一个实施方案中，通过患者一个或多个组织(例如脑)中反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯或反丁烯二酸单甲酯)的浓度或量确定临床或药效作用。在另一个实施方案中，所述临床或药效作用为治疗如本文中描述的神经疾病，例如与神经疾病相关的损伤(参见部分5.2)。5.5药物组合物如本文中描述的至少一种反丁烯二酸酯可配制成用于静脉内施用给有需要的受试者的药学上可接受的组合物。用于静脉内施用的适合制剂众所周知。在一个优选实施方案中，所述反丁烯二酸酯于溶液中配制以供静脉内施用，也称为iv施用或iv滴注。在一个特定实施方案中，药物组合物基本上由至少一种如本文中描述的反丁烯二酸酯组成。在另一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在另一个特定实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸单甲酯或其前药。在另一个实施方案中，药物组合物中的唯一药物为反丁烯二酸二甲酯和通过由所述药物组合物中的反丁烯二酸二甲酯降解而产生的任选存在的一种或多种化合物。在另一个特定实施方案中，通过离体降解产生的所述其他化合物为反丁烯二酸单甲酯。本文中描述的至少一种反丁烯二酸酯配制于适于静脉内施用的组合物中。适于静脉内配制的组合物为本领域中已知且包括溶液(例如水溶液)。在特定实施方案中，本文中描述的静脉内组合物包含体积膨胀溶液，包括(但不限于)生理盐水、乳酸化林格氏溶液(lactatedringer’ssolution)、哈特曼溶液(hartmann’ssolution)、葡萄糖、羟乙基淀粉、琥珀明胶等。在另一个特定实施方案中，本文中描述的组合物含有一种或多种缓冲剂，包括(但不限于)碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸二氢钠、柠檬酸、硼酸、索伦森磷酸盐缓冲液(sorenson’sphosphatebuffer)和所述缓冲剂的所有药学上可接受的盐。在一个特定实施方案中，所述组合物包含于无菌溶液中配制的本文中描述的反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯)。在某些实施方案中，所述溶液与血液等张。在另一个特定实施方案中，所述反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯、反丁烯二酸单甲酯或其前药，或它们的氘化形式。适于静脉内施用的药物组合物还描述于下文部分5.5.1和5.5.2中。本文中描述的药物组合物可以药学上可接受的任何静脉内递送形式施用给有需要的受试者。在一个特定实施方案中，所述组合物(例如溶液)经由注射器递送。在另一个特定实施方案中，所述组合物(例如溶液)经由输注袋递送。在另一个特定实施方案中，所述组合物(例如溶液)使用皮下注射器针头、周围套管、中心静脉导管、周围插入管线、挖隧道线或可植入埠递送。在一个实施方案中，药物组合物含有与中那些反丁烯二酸酯不同的反丁烯二酸酯。包含反丁烯二酸二甲酯、反丁烯二酸氢乙酯的钙盐、反丁烯二酸氢乙酯的镁盐和反丁烯二酸氢乙酯的锌盐的组合。在一个特定实施方案中，药物组合物包含反丁烯二酸酯；其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药或上述任一者的氘化形式或上述任一者的互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合；其限制条件为反丁烯二酸酯的盐不存在于药物组合物中。在一个特定实施方案中，药物组合物包含反丁烯二酸酯；其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药或上述任一者的氘化形式或上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合；其限制条件为反丁烯二酸氢乙酯的盐不存在于药物组合物中。在一个特定实施方案中，药物组合物包含反丁烯二酸酯；其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药或上述任一者的氘化形式或上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合；其限制条件为反丁烯二酸氢乙酯的钙盐、反丁烯二酸氢乙酯的镁盐、反丁烯二酸氢乙酯的锌盐和反丁烯二酸氢乙酯的铜盐不存在于药物组合物中。在一个特定实施方案中，药物组合物包含反丁烯二酸酯；其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合或上述任一者的氘化形式或上述任一者的互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合；其限制条件为反丁烯二酸酯的盐不存在于药物组合物中。在一个特定实施方案中，药物组合物包含反丁烯二酸酯；其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合或上述任一基的氘化形式或上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合；其限制条件为反丁烯二酸氢乙酯的盐不存在于药物组合物中。在一个特定实施方案中，药物组合物包含至少一种反丁烯二酸酯；其中反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合或上述任一者的氘化形式或上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，或上述任一者的组合；其限制条件为反丁烯二酸氢乙酯的钙盐、反丁烯二酸氢乙酯的镁盐、反丁烯二酸氢乙酯的锌盐和反丁烯二酸氢乙酯的铜盐不存在于药物组合物中。在一个特定实施方案中，本文中描述的至少一种反丁烯二酸酯作为单一疗法施用；因此，其不与一种或多种活性药剂(即药物)组合施用。在一个具体实施方案中，至少一种本文中描述的反丁烯二酸酯不与任一种或多种或所有以下活性药剂组合施用：血管紧张素转变酶抑制剂(例如wo2013/022882a1中公开的抑制剂)；氨基-金刚烷衍生的nmda受体拮抗剂(例如美金刚、金刚烷乙胺和金刚烷胺(参见例如us2008/0089861)；多发性硬化药物、过氧物酶体增殖物活化受体(ppar)γ激动剂(例如us2013/0158077a1中公开的激动剂)；格拉默乙酸盐或相关共聚物(例如如wo2011/100589a1中公开)；干扰素-β(参见例如wo2011/100589a1)；降低或消除面红的药物，诸如前列腺素调节剂、食用纤维、包含肥大细胞活化和发炎生化物质分泌的抑制剂的组合物、无机盐或如例如wo2007/042035a1中所描述的药物；胍那苄或胍那苄衍生物(例如wo2014/138298a1中公开的胍那苄或胍那苄衍生物)；s-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(samdc)抑制剂、多元胺类似物或多元胺生物合成抑制剂(参见例如wo2014/110154a1中公开的药物)；vla4结合抗体(例如ep2783701a2中公开的抗体)；和血管生成素-2(ang-2)抑制剂(例如ep2307456b1中公开的抑制剂)。5.5.1纳米悬浮液本文提供包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中所述药物组合物为纳米悬浮液。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约1mg/ml至约150mg/ml。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约150mg/ml。在一个实施方案中，药物组合物还包含一种或多种选自小分子稳定剂、聚合物稳定剂和缓冲剂的赋形剂。在一个实施方案中，小分子稳定剂为十二烷基硫酸钠。在一个实施方案中，聚合物稳定剂为羟丙基甲基纤维素(hpmc)。在一个实施方案中，缓冲剂为磷酸盐缓冲液。在一个实施方案中，组合物的ph值在约4至约7范围内。在一个实施方案中，组合物的ph值为约5.0。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯具有约100nm至约250nm的平均粒度(d50)。在一个实施方案中，d50为约180nm。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，其中药物组合物还包含十二烷基硫酸钠、hpmc和磷酸盐缓冲液，其中药物组合物的ph值为约5.0且d50为约180nm。提供于此部分中的药物组合物可用于本文中提供的任何方法中。5.5.2包含环糊精的制剂本文提供包含至少一种选自由以下组成的组的反丁烯二酸酯的药物组合物：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、反丁烯二酸单烷酯的前药、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体，其中所述药物组合物为水溶液，其中所述水溶液包含环糊精，其中所述环糊精为α环糊精或取代的β环糊精。在一个实施方案中，至少一种反丁烯二酸酯选自由以下组成的组：反丁烯二酸二烷酯、反丁烯二酸单烷酯、反丁烯二酸二烷酯与反丁烯二酸单烷酯的组合、上述任一者的氘化形式和上述任一者的药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约1mg/ml至约16mg/ml。在一个实施方案中，反丁烯二酸二甲酯的浓度为约2mg/ml至约4mg/ml。在一个实施方案中，环糊精为取代的β环糊精。在一个实施方案中，取代的β环糊精以约5％(w/v)至约40％(w/v)存在。在一个实施方案中，取代的β环糊精以约20％(w/v)存在。在一个实施方案中，取代的β环糊精为羟丙基β环糊精或磺基丁基醚β环糊精。在一个实施方案中，取代的β环糊精为磺基丁基醚β环糊精。在一个实施方案中，药物组合物包含一种或多种式xx的磺基丁基醚β环糊精：其中r独立地选自h或-ch2ch2ch2ch2so3na，其限制条件为除其中r为-ch2ch2ch2ch2so3na的6或7种情况外，r为h。在一个实施方案中，药物组合物包含captisol。在一个实施方案中，反丁烯二酸酯为反丁烯二酸二甲酯，且其中水溶液包含20％(w/v)captisol，且dmf的浓度为约2mg/ml至约4mg/ml。提供于此部分中的药物组合物可用于本文中提供的任何方法中。5.6组合治疗在特定实施方案中，至少一种本文中描述的反丁烯二酸酯与一种或多种指示用于治疗患者患有的神经疾病的其他化合物组合施用。其他化合物可与至少一种反丁烯二酸酯处于相同或分开的组合物中，且可静脉内或通过不同施用途径(例如经口)递送。在一个特定实施方案中，所述一种或多种其他化合物连续、在本文中描述的反丁烯二酸酯之前、之后或同时施用。在本文中描述的反丁烯二酸酯(例如反丁烯二酸二甲酯)静脉内与经口施用的一个特定实施方案中，可使用本领域中已知的用于口服反丁烯二酸酯的组合物和给药方案(参见例如prescribinginformation,2013年3月；wo2008/097596；wo2010/126605)。6.实施例6.1实施例1：放射性标记的反丁烯二酸二甲酯的静脉内和经口施用本实施例描述对小鼠经口和静脉内施用放射性标记的dmf和如通过成像评估的所得组织分布。6.1.1制备(11c)反丁烯二酸二甲酯的方法下文中提供一种用于制备(11c)反丁烯二酸二甲酯的示例性方法。将反丁烯二酸和氯化铁(ii)溶于亚硫酰氯中且回流24小时。使用分馏来纯化反丁烯二酰基二氯。未反应的亚硫酰氯在74℃下蒸出且占反应混合物的45％。任何挥发性副产物在80℃与150℃之间蒸出。产物反丁烯二酰基二氯在158℃下蒸出，且呈刺激性黄色液体状收集。反丁烯二酰基二氯占反应混合物的约45％-50％。未反应的反丁烯二酸和氯化铁(ii)保留在反应容器中。反丁烯二酰基二氯用氩气冲洗且储存在-20℃下。发现当储存在惰性氛围下时反丁烯二酰基二氯稳定且具反应性多达7天。使11c-二氧化碳捕封于氢化铝锂(10μmol)中以形成11c-甲醇，使反丁烯二酰基二氯(1mg)与11c-甲醇在室温下反应5-10分钟。用10μl水和100μl甲醇淬灭反应混合物以产生11c-反丁烯二酸二甲酯(产率5-10％，衰变校正)。用100μl水淬灭反应混合物以产生11c-反丁烯二酸单甲酯(产率1-3％，衰变校正)。放射性标记的产物使用水稀释至50ml，且通过c-18sep-pak(通过用10ml乙醇和10ml水冲洗预处理)。sep-pak用10ml水冲洗。放射性标记的产物用0.1-0.5ml乙醇溶离，且添加至无菌生理盐水(0.9％)中，得到10％乙醇于无菌生理盐水(0.9％)中的最终制剂。对于经口给予，将400mg/kg非放射性药物溶于0.2ml0.8％美多秀(methocell)中。将例如如上所述合成的放射性标记的药物添加至混合物中，且经由经口管饲法给予。6.1.2(14c)反丁烯二酸二甲酯用于实施例1中的[2,3-14c]dmf从vitraxco.,placentia,ca,usa(批号155-038-000，比活54mci/mmol)获得。6.1.3经口施用与静脉内施用的结果比较为了确定通过体内不同途径施用的dmf的定位和保留，经口或者经由尾静脉注射向小鼠施用同位素标记的dmf。为追踪施用后dmf定位，使用micropetfocus220tm(siemens)进行正电子发射断层照相术(pet)和使用biospin7t(bruker)进行磁共振成像(mr)来对动物成像。使用invicro软件分析从pet实验获得的图像。经口(po)以0.5mg/kg(n＝2)或200mg/kg(n＝3)，或静脉内(iv)以0.5mg/kg(n＝3)向未处理雄性cd1小鼠施用同位素标记(11c)的反丁烯二酸二甲酯(dmf)(参见部分6.1.1)且通过正离子发射断层照相术(pet)或者磁共振(mr)成像。所有动物在图像获取期间均麻醉。在施用(11c)dmf之后各时间点，直至90分钟，对处理的小鼠成像。用po(11c)dmf以0.5mg/kg或200mg/kg处理的小鼠显示主要在消化道和肾中的正信号(分别为图1和2)。相反地，iv施用(11c)dmf的动物显示遍及身体不同组织(包括脑和心脏)的正信号(图3)。这些发现指示与经口施用的dmf相比，静脉内递送的dmf定位于体内不同组织，即使经口递送的组合物为高得多的浓度(即0.5mg/kgiv施用对比200mg/kgpo施用)。所显示的信号可能来源于(11c)dmf或其任何体内转化产物。使用invicro图像分析软件根据组织类型对来自三组处理动物的成像数据进行定量。脑、心脏、肝、肾、肩胛肌肉和全身的目标区域(roi)通过固定体积的椭圆体与所述区域拟合来定义。肩胛肌肉roi为手绘且不代表所有小鼠肌肉，而仅由其相应roi的小区域构成。在0.5mg/kgiv处理动物中，与以0.5mg/kg(图5)或200mg/kg(11c)dmf(图6)处理的po处理的动物相比，信号在大部分组织中更高(图4)。显著地，iv处理的动物的脑中信号(图7)比低或高浓度下po处理的动物的脑中大得多(图8和9)。为定量调查来自脑各区域的信号，通过将专用14区小鼠脑图与各动物的脑区拟合来获得髓质、小脑、中脑、桥脑、皮层、海马、丘脑、下丘脑、纹状体、苍白球、鼻子、胼胝体、白质和心室的roi。实际上，当来自脑的这些特定区域的信号定量时，在po处理的动物的任何区域中几乎未检测到信号(图8和9)。然而，iv处理的动物显示整个观测期内脑所有区域中高水平信号(图7)。这些结果展示iv施用dmf意外地使得脑中dmf的浓度比经口施用dmf时浓度高。为了证实针对脑中ivdmf定位所观测到的作用，将用(11c)dmf处理的小鼠与用(14c)dmf处理的小鼠相比(参见部分6.1.2)。如图10中所示，早在施用后30秒，来自用0.5mg/kgiv(11c)dmf处理的动物的信号定位于许多组织中，包括脑。用0.5mg/kgpo(11c)dmf(图11)或者200mg/kgpo(11c)dmf(图12)处理的动物显示整个处理过程中信号几乎只在消化道中。类似地，当以矢状切面察看时，用0.5mg/kgiv(14c)dmf(图13)处理的动物在施用后10分钟(图13a、b)和60分钟(图13c、d)时显示肾和脑中信号，而用0.5mg/kgpo(14c)dmf(图14)处理的动物在(14c)dmf施用后10分钟(图14a和b)和60分钟(图14c和d)，脑中具有较少信号。这些结果指示与经口施用的(14c)dmf比较，静脉内施用的(14c)dmf意外地快速累积于脑和其他组织中，经口施用导致(14c)dmf基本上不存在于处理动物的脑中。检查处理小鼠中(11c)dmf定位于脑的具体区域指示特定区域发射比其他区域高的信号(图7)。显著地，已知与神经疾病有关的许多区域在用(11c)dmf静脉内处理后发射强信号；例如与嗅区相比，在用(11c)dmf静脉内处理后，纹状体(亨廷顿病、中风)、皮层和海马(阿尔茨海默病、中风)、黑质和脑干(帕金森病、中风)、大脑皮层(中风)和脊髓(als、中风)和小脑(中风)均发射强信号(图7)。因为以0.5mg/kg或者200mg/kg经口施用(11c)dmf大都显示脑中显著较低水平的信号，这些结果指示意外地，静脉内施用dmf可特别地定位至某些与具体神经疾病相关的神经结构。6.2实施例2：经口和静脉内施用的反丁烯二酸二甲酯的药代动力学和药效学的表征本实施例比较了大鼠和小鼠中原型nrf2反应基因对dmf经口和静脉内施用的药效反应。6.2.1dmf经口和静脉内施用spraguedawley大鼠缩写列表表2tbd待测定pk药代动力学pd药效学iv静脉内po经口(经口给予)pet正电子发射断层照相术qwba定量整体放射自显影术dmf反丁烯二酸二甲酯mmf反丁烯二酸单甲酯hpmc羟丙基甲基纤维素akr1b8醛-酮还原酶家族1成员b8gclc谷氨酸盐半胱氨酸连接酶催化亚单位hmox1血红素加氧酶1nqo1nadp(h)脱氢酶醌1osgin1氧化应激诱发的生长抑制剂1txnrd1硫氧还蛋白还原酶1ms多发性硬化cns中枢神经系统qrt-pcr定量实时聚合酶链反应anova方差分析引言实施例1中描述的小鼠pet和qwba研究证明iv施用11c或14c标记的dmf使得放射性快速且选择性分配至cns中，而po给药产生主要限于胃肠道(gi)的更多外周分布。这些成像数据能够表征放射性的解剖学位置，但所成像者的分子身份未知且可为dmf本身、mmf或许多不同dmf缀合物或代谢物。为了确定在dmfiv递送后观测到的成像结果是否与有意义的生物作用(例如nrf2活化)相关，评估连续5日每日给予(iv或po)一次的sprague-dawley大鼠中血浆、cns(前脑和小脑)和周围组织(空肠、肾和脾)中药代动力学和转录药效作用。通过qrt-pcr分析组织以评估已预先表征对dmf/mmf处理作出反应的6种假定nrf2靶基因的转录变化。scannevinrh,chollates,jungmy,shackettm,patelh,bistap,zengw,ryans,yamamotom,lukashevm,rhodeskj.fumaratespromotecytoprotectionofcentralnervoussystemcellsagainstoxidativestressviathenuclearfactor(erythroid-derived2)-like2pathway.jpharmacalexpther.2012年4月；341(1):274-84。进行这项研究以补充下文进一步描述的在野生型小鼠中进行的研究(参见部分6.2.2)，且使未来的药代动力学、药效和功效研究能够利用iv给药模式。概述实施例1中描述的体内正电子发射断层照相术(pet)和定量整体放射自显影术(qwba)研究已证明静脉内(iv)递送反丁烯二酸二甲酯(dmf)使得来源于dmf的放射性选择性分配至中枢神经系统(cns)中，而经口(po，经口施用)使得分布主要定位至胃肠道。为了评估在iv给药下差异生物分布的生物作用，比较了spraguedawley大鼠中经由iv输注对比po施用的dmf，评估脑和外周中药代动力学和药效学。当给药后10分钟评估时，iv施用dmf(30mg/kg)使得主要dmf代谢物反丁烯二酸单甲酯(mmf)广泛分布在测试组织(前脑、小脑、肾、脾、空肠)中。在po施用的dmf100mg/kg)下观测到mmf类似广泛分布在相同组织中。令人感兴趣的是，与po给药相比，尽管iv施用的剂量较低，但mmf在脑中的绝对水平显著更高。此使得与po给药相比，在iv的情况下脑与血浆比率显著更高。其他组织未展现此优先分布。在所有测试的组织中，在给药后2小时和6小时，如通过定量实时聚合酶链反应(qrt-pcr)评估，基因表达显著调节。对于个别测试基因，反应的时间方面(2小时对比6小时)存在差别，以及反应在组织之间存在差异。在评估暴露(在10分钟测量)与药效反应(2小时或6小时)之间的关系时，有证据证明在所有测试组织中正相关。因此，与100mg/kgpodmf相比，以30mg/kgiv施用dmf使得外周暴露和外周中药效反应降低。在脑中，出现相反情况：dmfiv与dmfpo相比具有更高的绝对mmf暴露和转录药效反应。材料与方法所有涉及动物的程序均根据如美国国家卫生研究院(u.s.nationalinstitutesofhealth)采用的实验动物照护与使用指南(guideforthecareanduseoflaboratoryanimals)中建立的标准执行。所有动物方案均经biogenidecinc.实验动物照护与机构动物照护与使用委员会(institutionalanimalcareandusecommittee)批准；biogen由国际实验动物照护评估与授权协会(associationforassessmentandaccreditationoflaboratoryanimalcareinternational)授权认可。8-12周龄雄性sprague-dawley大鼠购自wilmington(ma)的charlesriverlab，且在实验持续时间期间随意给予标准水和食物。大鼠在研究开始前在biogenidec动物园中适应至少5天。化合物配制和动物程序静脉内配制和递送：对于所有iv给药，利用10ml/kg的体积。媒介物：h2o中20％(w/v)captisol溶液。通过添加200gcaptisol至800ml去离子h2o(dh2o)来制备1l媒介物。dmf(30.0mg/kg)：来源；目录号112js4184；06-dec-2013。dmf以3.0mg/ml溶解于媒介物中。首先将物质在搅拌盘上搅拌至媒介物溶液中，接着在室温水浴中进行超声处理5分钟。经口配制和递送：对于所有po给药，利用10ml/kg的体积。媒介物：h2o中0.8％e4m等级羟丙基甲基纤维素(hpmc；媒介物)。将8ghpmc粉末添加至dh2o以产生1l媒介物溶液。具体来说，将500ml热dh2o(85-90℃)添加至8ghpmc中且用平坦的金属均质器搅拌，直至实现澄清无色溶液。使溶液冷却至室温，接着将剩余体积的dh2o添加至1l的最终体积。再一次，用平坦的金属均质器搅拌溶液，直至均质。dmf(100mg/kg)：来源；cilag批号112js4184；2013年12月6日。dmf以10mg/ml悬浮在0.8％hpmc中，用搅拌棒搅动，接着在室温水浴中超声处理5分钟。在实验期间将悬浮液在4℃下搅拌。实验设计、给药方案和组织收集为了评估和比较dmfiv和po给药的作用，如下所述，经由iv尾静脉输注(n＝15)或通过经口管饲法(n＝15)将dmf施用给大鼠，一天一次，连续5日。组：a、e和i：podmf100mg/kg(总共n＝15，5只/组)组b、f和j：ivdmf30mg/kg(总共n＝15，5只/组)组c和g：po媒介物，0.8％hpmc(总共n＝10，5只/组)组d和h：iv媒介物，仅20％captisol(总共n＝10，5只/组)实验时间轴第5天：表3在研究第5天，评估3个时间点：给药后10分钟、2小时和6小时，如时间轴中展示。在每个时间点，将来自各组的5只动物处死。在2小时和6小时时间点，将来自各动物的组e、f、i和j的组织样品分开，其中一半组织经加工以供mmf暴露，且一半经加工以供qrt-pcr。注意媒介物组(c、d、g和h)未经加工以供mmf测量且仅用于qrt-pcr。评估mmf暴露：在10分钟、2小时和6小时，从动物组(组a、b、e、f、i、j)收集血浆和组织(前脑、小脑、空肠、肾和脾)以测量样品中mmf浓度。使用非glp但有效lc/ms/ms测定对mmf进行定量。使用非参数曼恩-惠特尼u检验进行统计比较。评估转录药效改变：给药后2小时和6小时，分别处死来自组c、d、e和f以及g、h、i和j的动物组，且收集组织(前脑、小脑、空肠、肾和脾)以供通过qrt-pcr针对原型nrf2反应基因的表达进行rna分析。血浆和组织中的mmf定量如先前所提及，处死sprague-dawley大鼠，且在给药后10分钟、2小时和6小时收集终末血浆和组织样品，且如下测定血浆、脑、小脑、空肠和肾中的mmf暴露。解剖后组织在干冰上速冻。在快要血液收集时，将4μl250mg/ml氟化钠(naf)于水中的储备混合物添加至肝素锂管中收集的各100μl血液中。储备naf混合物在使用当天制备且在搅拌盘上经由连续搅拌保持为均质悬浮液。将全血添加至管中，接着将样品倒置若干次且储存在湿冰(2℃至8℃)上。所有样品在收集30分钟内在4℃下以1500xg(4200rpm)离心15分钟。接着将血浆转移至预冷却管中，在干冰上立即冷冻且维持冰冻(≤-80℃)直至分析。通过用含有反丁烯二酸甲基乙酯或者作为内标的-4c13-mmf的乙腈进行蛋白质沉淀来提取血浆或组织匀浆样品的等分试样(50μl)。对于组织样品，将均化溶液(具有12.5mg/mlnaf的‘空白’血浆)的等分试样添加至组织样品中。在蛋白质沉淀之前将组织样品在fastprep组织均质器上在6.5m/s下均质化60秒。使用合格lc-ms/ms测定在相应基质中测定血浆、前脑、小脑、空肠、脾和肾样品中mmf的浓度。使用具有涡轮离子喷雾接口(absciex,fostercity,ca)和analyst软件(1.6.1版)的api5500三重四极杆质谱仪实现数据收集和整合。mmf相对于其内标峰值面积比用以使用二次回归在1/x2加权下构建标准曲线。全部四个测定的定量下限(lloq)均为10ng/ml。通过标准和质量控制样品的精确性和准确性监测测定的效能。rna提取和qrt-pct组织rna提取：为了制备rna，将冰冻组织放于2ml具有1.5mlqiazol溶解试剂(qiagen)和3.2mm不锈钢珠粒(biospecproducts,bartlesville,ok)的无rna酶的96孔区块中。在微型球粒搅拌器(biospecproducts)中破坏组织达45秒的四个周期。在氯仿中提取rna且将水相与等体积的70％乙醇混合。将提取的rna施用于rneasy96盘且根据制造商方案(rneasy96通用组织方案，qiagen，hildengermany)通过旋转法来纯化。qrt-pcr：根据制造商方案(lifetechnologies,carlsbad,ca)使样品逆转录成cdna，且通过实时聚合酶链反应(qpcr)分析。使用大鼠靶基因引物和6-famtm染料标记的mgbtm探针(lifetechnologies)。含有100ngcdna、900nm各引物和250nmtaqman探针的反应物在quantstudio12k-flex系统(lifetechnologies)上在95℃下循环一次，历时10分钟，接着95℃下10秒和60℃下1分钟，循环40次。所有样品均以gapdh为标准化基因一式三份测量。来自lifetechnologies的taqman引物/探针组包括：akr1b8(rn00756513_m1)；gclc(rn00689046_m1)；hmox1(rn01536933_m1)；nqo1(rn00566528_m1)；txnrd1(rn01503798_m1)；osgin1(rn00593303_m1)和gapdh(rn01775763_g1)。使用比较ct法进行最终分析以计算倍数变化且在每个时间点，将样品相对于媒介物对照标准化。在所有图中，描绘平均倍数变化(±标准偏差)。使用anova与图基多重比较检验进行统计比较以评估在既定施用途径内在2小时或6小时媒介物与dmf处理的大鼠之间的差异。结果血浆和组织暴露如图15中所示，给药后10分钟，在通过po(100mg/kg；20860±8777ng/ml，156.8±66μm)或iv(30mg/kg；12880±4456ng/ml，96.8±33.5μm)施用dmf的动物中血浆中的mmf暴露稳固。iv给药后平均血浆mmf水平比用po给药实现的平均血浆mmf水平低38％，但此差异不显著(图15a)。在2小时，在接受dmfpo(2248±997ng/ml，16.9±7.5μm)和iv(7.8±2.7ng/ml，0.1±0.0μm)的动物中血浆mmf水平实质上下降，且此时，po给药后的水平显著高于iv给药的动物中的水平。在6小时时间点，dmfpo给药后血浆中mmf水平在5只动物中的3只中可检测(30±31ng/ml，0.2±0.2μm)；其余2只大鼠中水平低于定量水平。在6小时时间点，在来自dmfiv施用的大鼠的血浆样品中mmf不可检测。前脑中(图15c)，给药后10分钟，与po给药的mmf水平(862±391ng/ml,6.5±2.9μm)相比，iv给药的动物中mmf水平显著更高(1984±564ng/ml，14.9±4.2μm)。在小脑中观测到类似结果(图15d)，其中与dmfpo给药(1206±644ng/ml，9.1±4.8μm)相比，dmfiv实现显著更高的mmf水平(2740±1195ng/ml，20.6±9.0μm)。然而，截至2小时，来自iv给药的动物的脑mmf水平低于定量水平，而po给药的动物仍具有可测量的mmf水平(前脑：211±103ng/ml，1.6±0.8μm；小脑：243±118ng/ml，1.8±0.9μm)。所有暴露在文中均提供为平均值±标准偏差(n＝5)。给药后六小时，在前脑或小脑中mmf不可检测。在空肠、肾和脾中，在10分钟，中值mmf水平存在数值差异，然而，当比较po和ivdmf给药途径时这些差异不显著(图15b、e、f)。dmfpo给药后两小时，mmf水平显著减少，但在肾、空肠和脾中可检测。然而，ivdmf给药后2小时，在任何组织中mmf均不可检测。iv或podmf给药后六小时，在任何组织中mmf不可检测。在比较组织与血浆mmf暴露的比率时，在po和iv给药之间以及组织之间观测到差异。在前脑和小脑中，与iv给药的大鼠相比，在po给药的大鼠中观测到显著更低的mmf穿透(图15g，分别为p<0.005和p<0.0001)。在肾中，相对于po给药，iv给药后中值比率数值上更高，但此差异不显著。空肠、肾和脾中组织穿透比率无显著差异；然而，应注意这些样品展现相当大的可变性(空肠比率数据未示出)。在cns和外周组织中的药效作用在2小时和6小时时间点评估nrf2依赖性转录改变揭示与用dmfiv(30mg/kg)处理的动物相比，用dmfpo(100mg/kg)处理的动物之间的定性反应的差异。此外，在2个给药组内，收集组织之间存在差异。前脑中，给药后2小时和6小时，ivdmf给药引起nqo1、osgin1、akr1b8和hmox1显著调节(图16)。dmfpo给药仅调节两种基因：2小时和6小时osgin1和仅2小时的akr1b8。小脑中转录反应类似于前脑(图17)。ivdmf给药后，给药后2小时和6小时，观测到nqo1、osgin1、akr1b8和hmox1显著调节。小脑中gclc和txnrd1的转录反应也显著增加，但仅在后者6小时时间点。dmfpo给药显著调节小脑组织中3种基因：2小时和6小时的osgin1、2小时的akr1b8和6小时时间点的hmox1。在肾中，dmfiv给药引起nqo1和txnrd1在2小时和6小时显著调节，且hmox1仅在2小时显著调节(图18)。dmfpo给药后，在2小时和6小时时间点，相对于媒介物对照，nqo1、hmox1和txnrd1存在显著变化。osgin1仅在2小时时间点显著调节。脾中转录变化类似于在肾中观测到的变化，其中在dmfpo给药后2小时和6小时nqo1、osgin1、akr1b8、gclc和txnrd1均显著增加(图19)。dmfiv给药后，注意到在2小时与6小时时间点脾中显著转录增加，且仅在2小时时间点观测到akr1b8和txnrd1显著变化。还在dmfiv给药后6小时发现nqo1显著变化。在任一给药模式后未观测到脾中hmox1表达变化。空肠中表达水平变化定性类似于其他外周组织。dmfiv给药后，观测到在6小时nqo1和hmox1显著增加，且在2小时osgin1表达显著增加(图20)。dmfpo给药引起在给药后2小时与6小时osgin1、akr1b8和txnrd1显著增加。podmf给药后，仅在6小时时间点，nqo1表达增加，而在2小时时间点，观测到gclc和hmox1显著增加。暴露-药效反应关系为了评估暴露与药效反应之间的可能关系，若干组织中的绝对mmf暴露针对基因表达倍数变化绘图。此方法具有固有限制；由于mmf半衰期短且形成药效反应需要时间，所以无法在同一动物中测量此两种特性。对于此分析，在给药后2小时或6小时，在10分钟的单点暴露针对在另一组动物中测量的药效反应比较。对于大部分评估组织(前脑、肾和脾)，mmf暴露与药效反应存在明确的正相关(图21a-i)。因此，在大鼠脑中，在dmfiv给药引起更高暴露下，与dmfpo给药后在动物中所见相比，存在更大量值转录反应。在外周，观测到相反情况：dmfpo给予的动物与dmfiv给予的大鼠比较具有更高的暴露和转录改变。一种例外是在脾中和对nqo1表达的作用(图21g)，其中po给药后更高的mmf暴露不引起更大转录反应。最终，由于空肠中测量的高度变化的暴露(图15b)，故针对暴露:反应关系，不评估这些数据。结论若干神经退化性疾病具有发炎和氧化应激作为中枢病理学成因。在临床前和临床研究中已证明口服dmf活化nrf2路径，且此可至少部分介导治疗ms中的治疗作用(linkerra,leedh,ryans,vandamam,conradr,bistap,zengw,hronowskyx,bukoa,chollates,ellrichmanng,brückw,dawsonk,goelzs,wieses,scannevinrh,lukashevm,goldr.fumaricacidestersexertneuroprotectiveeffectsinneuroinflammationviaactivationofthenrf2antioxidantpathway.brain.2011年3月；134(第3部分):678-92；scannevinrh,chollates,jungmy,shackettm,patelh,bistap,zengw,ryans,yamamotom,lukashevm,rhodeskj.fumaratespromotecytoprotectionofcentralnervoussystemcellsagainstoxidativestressviathenuclearfactor(erythroid-derived2)-like2pathway.jpharmacolexpther.2012年4月；341(1):274-84；l.amaravadi,s.gopal,r.gold,r.j.fox,a.mikulskis,m.lukashev,j.kong,m.stephan,k.t.dawson.effectsofbg-12onamarkerofnrf2pathwayactivation:pharmacodynamicresultsfromthephase3defineandconfirmstudies.周四,2012年10月11日,15:30-17:00.ectrims2012,lyonfrance)。临床前证据表明增加mmf暴露(在外周和cns中)在神经退化性模型中功效更高；然而，由于经口施用当前制剂下剂量限制的耐受性，人类给药无法实质上增加超过当前水平。因此，如果存在一种机制选择性地增加相对cns暴露，同时维持与现有外周暴露相关联的型态，则此可经由增加cns细胞对毒性氧化和发炎应激的抵抗力而增强在神经退化性疾病中的功效。实施例1中所呈现的大鼠成像数据证明iv施用的dmf引起dmf或dmf体内转化产物选择性分配至cns中，同时经口递送产生更局限于胃肠道的分布。上文描述的研究的结果证实dmfiv施用引起生物学上活性mmf更大程度相对分配至脑中，此可与在相对于po给药，较低总dmf剂量实现的cns中药效反应增加相当，且因此血浆和外周暴露水平较低。还研究dmfiv给药的初步安全性，且经由尾静脉注射每日一次给药重复5天后，尾中无治疗相关的组织病理学发现(数据未示出)。6.2.2dmf经口和静脉内施用c57bl/6小鼠缩写列表表4ms多发性硬化cns中枢神经系统nrf2核因子(红细胞衍生2)样2pk药代动力学pd药效学iv静脉内po经口(经口给予)dmf反丁烯二酸二甲酯mmf反丁烯二酸单甲酯hpmc羟丙基甲基纤维素akr1b8醛-酮还原酶家族1成员b8gclc谷氨酸盐半胱氨酸连接酶，催化亚单位hmox1血红素加氧酶1nqo1nadp(h)脱氢酶醌1osgin1氧化应激诱发的生长抑制剂1cbc全血细胞计数anova方差分析dh2o去离子水引言实施例1的小鼠中pet和qwba研究展示静脉内(iv)施用11c或14c标记的dmf使得放射性快速且选择性分配至cns中，而po给药产生主要限于胃肠道(gi)的更多外周分布。这些成像数据能够表征放射性的解剖学位置，但放射性核素的分子身份未知且可为dmf、mmf或其他反丁烯二酸酯结合物或代谢物。为了确定在dmfiv递送后观测到的成像结果是否与有意义的生物作用(例如nrf2活化)相关，在血浆、cns和外周组织中评估药代动力学和转录药效作用。cns中过度氧化应激已确定为若干神经退化性病症中的病理学因素，且中和此毒性应激的治疗策略可用于众多种疾病中。如果iv递送的dmf可增强cns中nrf2相关的转录反应和随后促存活路径超过在经口施用下可实现情形，则iv施用途径可提供cns相关疾病中增强的有益作用。概述实施例1中呈现的体内正电子发射断层照相术(pet)和定量整体放射自显影术(qwba)研究证明反丁烯二酸二甲酯(dmf)的静脉内(iv)递送使得来源于dmf的放射性选择性分配至中枢神经系统(cns)中，而经口(po，经口施用)使得分布主要定位胃肠道内。为了评估在iv给药下差异生物分布的可能生物作用，比较小鼠中iv对比po施用的dmf，评估血浆、脑和外周组织中药代动力学和药效特性。po与iv施用途径均引起血浆、脑和外周组织中稳固的反丁烯二酸单甲酯(mmf，dmf的生物活性主要代谢物)暴露。相对于iv施用的dmf(17.5或30mg/kg)，dmfpo施用的剂量越高(100mg/kg)，mmf的血浆和组织浓度显著越高。两种iv剂量的集中比较揭示血浆、肾、空肠和脾中暴露剂量反应，而非脑中。比较组织穿透，与po相比，iv给药下mmf的脑与血浆比率显著增强，此与来自成像研究的发现一致。在dmf施用的po与iv途径后在脑和外周组织中观测到显著的药效转录作用。尽管与podmf给药相比，iv后脑中绝对mmf水平较低，但转录反应具有类似量值，表明脑中药效反应不简单与mmf水平相关联。在外周组织中的mmf暴露与转录反应之间存在正相关。在比较ivdmf施用与ivmmf施用的作用时，ivdmf后，与ivmmf施用相比，mmf脑与血浆比率显著更高，且此外仅ivdmf给药使得脑中药效反应显著增加。dmf与mmf使得外周组织中产生显著转录药效变化。还评估了药效改变的持久性，且每日一次ivdmf给药连续5日后的反应类似于单个剂量后观测到的反应。还在连续给药5日后在尾部中进行试点组织病理学，且未鉴别到明显的病理(数据未呈现)。在单个剂量和每日一次重复5次iv剂量后评估血细胞型态，以评估循环细胞群体的变化。在单个剂量后观测到对若干参数的显著影响，但单独媒介物作用类似于接受dmf的组。每日一次5个剂量ivdmf后，淋巴细胞和单核细胞下降，显著不同于接受媒介物的小鼠。总之，经由iv输注施用时dmf在脑中产生显著药效作用。这些转录变化类似于po给药后诱发的作用；然而，po给药的总水平高3.3倍，此引起诸如肾和空肠的外周组织中相对暴露和药效作用更高。如果假定dmf/mmf的最大安全全身暴露类似于目前用于多发性硬化(ms)的暴露，如果通过iv输注实现类似全身暴露，则脑中暴露和转录作用可能增强，此可赋予神经退化性疾病的额外益处。材料与方法所有涉及动物的程序均根据如美国国家卫生研究院采用的实验动物照护与使用指南中建立的标准执行。所有动物方案均经biogenidecinc.机构动物照护与使用委员会批准，biogen由国际实验动物照护评估与授权协会授权认可。11-13周龄雌性c57bl/6小鼠购自jacksonlaboratories(barharbor,me)，且在实验持续时间期间随意给予标准水和食物。所有小鼠在研究开始前在biogenidec动物园适应至少一周。化合物配制和动物程序静脉内配制和递送：媒介物：20％每1l媒介物由200克(g)captisol在去离子水(dh2o)中制得。给药体积为10ml/kg至尾静脉中。dmf(17.5mg/kg和30mg/kg)：dmf(cilag批号i12js4184；06-dec-2013)经由搅拌棒搅拌以1.75mg/ml或3mg/ml溶解，接着在室温水浴中超声处理5-10分钟。在室温下溶液用搅拌棒搅拌实验整个时间。给药体积为10ml/kg至尾静脉中。mmf(27.08mg/kg)：mmf(sigma651419)经由用搅拌棒搅拌以2.708mg/ml溶解，接着在室温下在水浴中超声处理5分钟。在室温下溶液用搅拌棒搅拌实验整个时间。调整mmf剂量以补偿与dmf比较较低的分子量，从而确保两组之间递送同等“反丁烯二酸酯”。给药体积为10ml/kg至尾静脉中。经口配制和递送：媒介物：0.8％e4m等级羟丙基甲基纤维素(hpmc)：8ghpmc粉末添加至每公升dh2o中。最初，500ml热dh2o(85-90℃)添加至8ghpmc中且用平坦的金属均质器搅拌，直至实现澄清无色溶液。使溶液冷却至室温，接着添加dh2o(室温)，直至实现1l最终体积。再一次，用平坦的金属均质器搅拌溶液，直至均质。给药体积为10ml/kg。dmf(100mg/kg)：dmf(cilag批号i12js4184；2013年12月6日)经由用搅拌棒搅拌以10mg/ml悬浮在0.8％hpmc中，接着在室温水浴中超声处理5-10分钟。在4℃下悬浮液用搅拌棒搅拌实验整个时间。剂量体积为10ml/kg。血浆和组织中mmf定量血浆或组织匀浆样品的等分试样(25μl)通过用含有作为内标4c13-mmf的乙腈进行蛋白质沉淀来提取。对于组织样品，将均化溶液(具有12.5mg/mlnaf的血浆)的等分试样添加至组织样品中。在蛋白质沉淀之前组织样品在fastprep组织均质器上在6.5m/s下均质化60秒。血浆、脑、空肠和肾样品中mmf的浓度使用合格lc-ms/ms测定在相应基质中测定。使用具有涡轮离子喷雾接口(absciex,fostercity,ca)和analyst软件(1.6.1版)的api5500三重四极杆质谱仪实现数据集合和整合。mmf相对于其内标峰值面积比用以使用二次回归，在1/x2加权下构建标准曲线。分别地，三种组织测定的定量下限(lloq)为1ng/ml，且血浆测定的定量下限为10ng/ml。通过标准和质量控制样品的精确性和准确性监测测定的效能。rna提取和定量pcr组织rna提取：为了制备rna，将冰冻组织放于2ml具有1.5mlqiazol溶解试剂(qiagen)和3.2mm不锈钢珠粒(biospecproducts,bartlesville,ok)的无rna酶的96孔区块中。在微型球粒搅拌器(biospecproducts)中破坏组织达45秒四个周期。rna用氯仿提取且水相与等体积的70％乙醇混合。提取的rna施用于rneasy96盘且根据制造商方案(rneasy96通用组织方案，qiagen，hildengermany)，通过旋转法来纯化。定量实时聚合酶链反应(qrt-pcr)：根据制造商方案使用大容量cdna反转录试剂盒(lifetechnologies,carlsbad,ca)使样品逆转录成cdna，且通过qrt-pcr分析。使用小鼠靶基因引物和6-famtm染料标记的mgbtm探针(lifetechnologies)。含有100ngcdna、900nm各引物和250nmtaqman探针的反应物在quantstudio12k-flex系统(lifetechnologies)上在95℃下循环一次，历时10分钟，接着95℃下10秒和60℃下1分钟，循环40次。所有样品均一式三份测量，其中gapdh为标准化基因。来自lifetechnologies的taqman引物/探针组包括：akr1b8(mm00484314_m1)；gapdh(mm03302249_g1)；gclc(mm00802655_m1)；hmox1(mm00516005_m1)；nqo1(mm01253561_m1)；和osgin1(mm00660947_m1)。使用比较ct法来计算倍数变化且将样品相对于时间匹配的媒介物对照标准化。全血细胞计数(cbc)在给药后指示时间点，将全血样品(250μl)收集在edta管中，且维持在4℃下，直至在charlesriverlaboratories进行cbc差异分析(在从收集时间起的24-36小时内分析)。dmfiv多剂量可耐受性的尾组织病理学在研究终止时(第5天)从dmf和媒介物组收集小鼠尾，用于研究潜在注射部位反应。组织样品保存在10％中性缓冲福尔马林(nbf)中，接着转移至translationalpathologylaboratory以加工成石蜡块，制备载玻片和苏木素伊红染色。通过biogenideccomparativepathology部门进行染色载玻片的组织病理学评估(本文中未提供数据)。结果静脉内施用dmf后药代动力学和药效学(研究1)为了评估dmfiv施用的作用，dmf在20％captisol中配制且经由尾静脉注射输注至小鼠，且与接受dmfpo施用的小鼠比较。在给药后10分钟和2小时评估mmf暴露水平，而在给药后2小时分析药效转录反应。基于先前研究，选择po剂量，证明100mg/kg为多个小鼠模型中的有效剂量，且在假定dmf在媒介物中的溶解度下基于最大可能剂量，选择iv组的高剂量(30mg/kg)。选择dmfiv(17.5mg/kg)作为较低iv剂量。组1：iv媒介物(总共n＝8，4只/时间点)组2：ivdmf17.5mg/kg(总共n＝8，4只/时间点)组3：ivdmf30mg/kg(总共n＝8，4只/时间点)组4：po媒介物(总共n＝8，4只/时间点)组5：podmf100mg/kg(总共n＝8，4只/时间点)表5收集时间mmf暴露药效学10分钟血浆、脑、空肠、肾未进行2小时血浆、脑、空肠、肾血浆、空肠、肾(qrt-pcr)在10分钟时间点，将来自各组的4只动物处死，其中收集血浆和组织(脑、空肠和肾)以确定mmf暴露。给药后两小时，处死其余4只动物，且收集血浆和组织。将来自2小时时间点的组织样品分开，其中各样品一半用于mmf暴露分析，且一半用于rna提取和qrt-pcr，以评估nrf2靶基因的表达。在给药后10分钟，测量dmf100mg/kgpo施用(64725±16147ng/ml；498±124μm)后血浆中mmf的稳固暴露，而dmf以17.5mg/kg(6910±1459ng/ml；53±11μm)或30mg/kg(14275±1994ng/ml；110±15μm)iv给药后mmf的血浆水平显著较低(图22a)。在脑、肾和空肠中，与dmfiv(17.5)相比，po给药下mmf水平也显著更高(图22b、c、d)。在脑和空肠而非肾中，与dmfiv(30mg/kg)相比，dmfpo组中mmf水平也显著更高。在dmfiv组之间血浆或任何组织中无显著差异。在2小时，来自已接受ivdmf的小鼠的血浆中未检测到mmf，且接受podmf的小鼠中血浆mmf水平显著减少(307±431ng/ml；2±3μm)。在2小时任何组织中均未检测到mmf。在血浆、空肠和肾中，与iv30mg/kg组相比，iv17.5组中mmf水平平均低43％，然而，如上所示，基于包括血浆组的预先指定的anova多重比较分析，这些差异不显著。一种仅直接比较两个iv剂量组(t检验)的替代事后分析揭示这些差异为显著的(p<0.05)，此与两种剂量水平的差异一致且指示在iv给药后这些组织中存在暴露剂量-反应。然而，在两个dmfiv剂量组之间脑中mmf水平不存在显著差异，差别在彼此10％内。此可指示mmf运输至脑存在可饱和机制，但重要的是，注意到此分析仅在单一时间点测量单一dmf代谢物mmf，且其他dmf衍生的反丁烯二酸酯物质可以在iv剂量之间变化的浓度下存在且可能具有不同的药代动力学。在比较组织与血浆mmf暴露的比率时，在po和iv给药之间、iv剂量之间以及组织之间观测到差异。在脑中，观测到在17.5mg/kgiv给药下穿透比po给药显著更高(分别为18.7±7.4对比5.9±1.5；p<0.01)(图22e)。然而，30mg/kgiv剂量的比率(8.1±1.9)未显著不同于po剂量。在肾中，与po(16.3±8.5)相比，两种iv剂量的比率更高(17.5mg/kg，32.0±4.3和30mg/kg，42.7±11.4)，且更高iv剂量，显著不同(p<0.05)(图22f)。空肠中剂量组之间组织穿透比率无显著差异(图22g)。评估2小时时间点的药效变化揭示dmfpo对比iv施用途径之间以及组织之间的反应差异。脑中po给药后，发现相对于媒介物对照3种基因被显著调节：akr1b8(1.2±0.1)、nqo1(1.1±0.1)和osgin1(3.6±0.8)(图23a-e，下文表7)。以17.5mg/kgiv给药后，观测到akr1b8(1.4±0.1)、gclc(1.1±0.1)、nqo1(1.2±0.1)和osgin1(3.1±0.6)被显著调节，且以30mg/kgiv给药后观测到akr1b8(1.3±0.1)、hmox1(1.3±0.1)、nqo1(1.2±0.1)和osgin1(5.0±0.7)被显著调节。观测到2种基因的剂量-反应，其中对于hmox1和osgin1，在dmfiv17.5对比30mg/kg给药之间观测到显著差异(p<0.01)(图23c、e)。在肾中，在dmfpo给药后，相对于媒介物对照，gclc(1.7±0.4)、hmox1(7.1±1.8)、nqo1(1.8±0.3)和osgin1(3.8±0.9)显著增加(图25a-e，下文表7)。iv给药后诱发的肾变化更适度，dmf30mg/kg给药后仅akr1b8(1.6±0.2)和gclc(1.4±0.3)显著增加，且在dmf17.5mg/kg情况下nqo1(1.6±0.4)和osgin1(1.9±0.4)表达显著增加。在空肠中，在po给药后，akr1b8(5.7±2.8)、hmox1(2.9±0.6)和nqo1(2.1±0.4)相对于媒介物对照均显著增加(图25a-e，下文表7)。dmf30mg/kgiv给药后，nqo1(1.3±0.2)相较于媒介物以及相较于dmfiv17.5mg/kg显著增加。空肠中dmf17.5mg/kgiv给药下未观测到基因表达显著变化。在比较mmf暴露于dmf施用的po途径与iv途径的药效反应时，观测到一些趋势。应注意由于dmf/mmf的快速药代动力学需要短时间点(<2小时)，且观测转录产物水平调节需要更长时间点(≥2小时)，所以这些暴露药效关系在相同动物中未测量。因此，利用来自一组动物的10分钟的平均暴露，与另一组中2小时的转录倍数变化比较，计算比率。在脑中，osgin1和akr1b8无明确的暴露-反应关系(图26a、b)。尽管相对于dmfpo给药，iv给药后脑mmf暴露显著较低，但观测到类似量值药效反应。另外，尽管dmfiv17.5与30mg/kg之间的脑mmf暴露类似，但转录反应存在差异，其中与17.5mg/kg相比，30mg/kg下osgin1具有显著更高的倍数变化。这些数据可指示除mmf之外，其他生物活性dmf衍生反丁烯二酸酯物质存在于脑中，但在mmf特异性lc/ms/ms测定中未测量。另外，可能存在更复杂的剂量反应关系，其在单一时间点暴露分析中未捕捉到，其可能与跨越血脑障壁传送和不同反丁烯二酸酯物质的代谢相关。肾和空肠中的hmox1反应和空肠中的akr1b8展现暴露依赖性转录反应(图27c、e、f)。然而，肾中nqo1反应类似，尽管暴露显著差异，此可能表明已通过较低iv剂量实现的此基因的最大诱发平台期(图26d)。静脉内施用dmf和mmf后的药代动力学和药效学(研究2)为了证实和扩大从上述研究1的发现，进行第二个研究以评估iv施用后dmf(30mg/kg)的暴露和药效特性。作为比较物，mmf(27.08mg/kg，与30mg/kgdmf同等的“反丁烯二酸酯”)也包括在这项研究内。在给药后10分钟和2小时评估mmf暴露水平，而在给药后2小时和6小时分析转录药效反应。在给药后10分钟、2小时和6小时进行具有差异图的全血细胞计数(cbc)。组1：iv媒介物(总共n＝12，4只/时间点)组2：ivdmf30mg/kg(总共n＝12，4只/时间点)组3：ivmmf27.08mg/kg(总共n＝12，4只/时间点)表6给药后十分钟，将来自各组的4只动物处死，且收集血浆和组织(脑、肾、空肠和脾)以定量mmf暴露水平，以及收集全血以进行cbc。给药后两小时，处死各组的另外4只动物，且收集血浆、全血和组织。将来自2小时时间点的组织样品分开，其中各样品一半用于mmf暴露分析，且一半用于rna提取/qrt-pcr，以评估nrf2靶基因的表达。给药后六小时，处死各组的最后4只动物，且收集全血和组织。给药后10分钟，dmfiv施用后血浆mmf暴露(11768±2261ng/ml，90.5±17.4μm)与mmfiv给药后mmf血浆水平无显著不同(13050±6850ng/ml；100.4±52.7μm)(图27a)。在肾、空肠和脾中，ivdmf与mmf施用之间mmf水平无显著差异(图27c、d、e)。与经由iv给药接受dmf的动物相比，接受mmf的动物中脑mmf水平存在31％差异，但此差异不显著(图27b)。在2小时，在通过iv施用接受dmf或mmf的小鼠的血浆或任何组织中均未检测到mmf。在比较组织与血浆mmf暴露的比率时，观测到与mmf给药(7.2±3)相比，ivdmf给药(13.1±1.8)的脑穿透显著更高(p<0.05)(图27f)。肾、空肠或脾中dmf与mmf施用之间的组织穿透比无显著差异。评估2小时和6小时时间点的药效变化揭示ivdmf与mmf施用之间反应的差异。在脑中，dmf给药后2小时，发现仅osgin1显著调节(2.7±0.9)(图28e)。在给药后6小时，相对于媒介物对照，在接受dmfiv的动物中，hmox1(1.2±0.1)、nqo1(1.6±0.2)和osgin1(1.5±0.2)显著增加(图28c、d、e，下文表7)。此处不重复预先鉴别的iv30mg/kg施用的dmf(图23a)下akr1b8表达的显著增加(图28a)，但检测小量值的显著变化(研究1中<1.5倍)取决于对照与处理组的个别数据组中的变化性。相对于媒介物对照，mmfiv施用后无任何基因的转录显著增加。在6小时时间点，与mmfiv施用相比，dmf使得基因hmox1、nqo1和osgin1均显著增加(图28c、d、e，下文表7)。在肾中，iv施用的mmf给药后2小时，相对于媒介物对照，gclc(1.9±0.7)、nqo1(1.6±0.4)和osgin1(2.4±0.8)的转录产物水平均显著增加(图29b、d、e，下文表1)。在2小时时间点，未观测到dmf施用显著变化。mmf经由iv输注给药后六小时，相对于媒介物对照，akr1b8(1.5±0.1)、gclc(2.3±0.6)、nqo1(2.3±0.3)和osgin1(1.4±0.0)显著增加(图29a、b、d、e，下文表1)。在肾中，dmfiv施用后六小时，相对于媒介物对照，akr1b8(1.3±0.1)、nqo1(2.5±0.1)和osgin1(1.4±0.1)显著增加(图29a、d、e，下文表1)。iv给药后两小时，在空肠中，相对于媒介物对照，针对mmf和dmf，分别观测到akr1b8(2.4±0.7、2.0±0.3)、nqo1(1.5±0.2、1.5±0.3)和osgin1(1.6±0.1、1.3±0.1)的表达显著增加(图30a、d、e，下文表1)。这些变化中比较mmf与dmf，仅osgin1变化显著(p<0.05)。mmf经由iv施用给药后六小时，相对于媒介物对照，gclc(1.5±0.1)、nqo1(1.7±0.1)和osgin1(1.2±0.1)显著增加(图30b、d、e，下文表1)。经由iv输注施用dmf后六小时，相对于媒介物对照，akr1b8(3.8±1.5)、gclc(1.3±0.1)和nqo1(1.9±0.3)显著增加(图30a、b、d，下文表1)。在比较dmf对比mmfiv施用后的表达水平时，给药后2小时，gclc、hmox1和osgin1存在显著差异。给药后6小时接受dmf和mmf在动物之间仅gclc存在显著差异。在比较ivdmf对比mmf施用的暴露与药效反应时，应再次注意由于短化合物药代动力学与形成药效转录反应所需的更长时间之间的时间分离，所以这些“pk/pd”关系并非取自相同动物。利用10分钟的平均暴露和2或6小时的转录倍数变化计算比率。在脑中，比较dmf和mmfiv施用时，2小时的osgin1和6小时的nqo1存在明确的暴露-反应关系(图31a、b)。在两种情况下，相对于mmfiv，dmfiv产生更高mmf暴露，以及更高标准化的转录倍数变化。在肾中，相对于dmfiv，mmfiv给药引起6小时hmox1和2小时osgin1更高暴露，以及更大标准化倍数变化(图31c、e)。肾中6小时nqo1和空肠中6小时nqo1和2小时osgin1，相对于dmfiv给药，尽管mmfiv给药后mmf暴露更高，但观测到类似的转录反应(图31d、g、h)，且在6小时akr1b8情况下，mmfiv施用具有较低标准化倍数变化(图31f)。表7.dmf和mmfiv给药的药效变化的概述；研究1和研究2。表1为相对于时间匹配的媒介物对照，指示组织中指示基因的倍数变化的概述表。数值指示平均倍数变化±标准偏差(n＝4)。与媒介物显著的变化以粗体指示，用灰色突出显示(单向anova与图基多比较检验)。作为研究2的一部分的静脉内施用dmf或mmf后血液参数的预备分析为了确定经由静脉内输注施用dmf30mg/kg或mmf27.08mg/kg后对血细胞群体是否存在任何有害作用，将在给药后10分钟、2小时和6小时收集的来自4只小鼠/组的全血送至charlesriverlaboratories进行具有差异的全血细胞计数(cbc)。虽然仅从4只动物/组很难得出任何重要结论，但似乎在2小时时间点白细胞普遍减少(图32a)。嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的此细胞数减少不特别与dmf或mmf处理一致，因为在媒介物对照组中也观测到类似减少(图32b-f)。此表明不与dmf或mmf施用相关的媒介物相关现象。在6小时时间点一些细胞群体似乎恢复一些(淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞)，而其他与10分钟时间点相比显著更低(嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞)。对红细胞、血红蛋白、血细胞比容、平均红细胞容积或血小板无作用(图33a-e)。由于此预备研究中样品的总变化性和复制数目低，所以血细胞部分的统计分析未完成。多剂量静脉内dmf施用与wbc计数(研究3)为了确定dmf多剂量iv施用的作用和耐受性，进行研究3以评估每日一次iv5个剂量后dmf(30mg/kg)的药效特性且研究在尾部注射部位附近组织病理学改变的出现。具有差异图的cbc在最后一次给药后10分钟经由面静脉抽血进行，且在最后一次给药后2小时，在来自相同动物的组织中分析药效nrf2转录反应。还在预备毒物学研究中在尾巴区域上进行了组织病理学。组1：iv媒介物(n＝4)组2：ivdmf30mg/kg(n＝5)表8组织收集时间药效学最后一次给药后10分钟全血(cbc)最后一次给药后2小时脑、肾、空肠、脾(qrt-pcr)来自此多剂量研究的药效数据与单次剂量反应一致，其中脑中转录反应明显增加。在脑中，最后一次给药后2小时，ivdmf30mg/kg给药后osgin1(相对于媒介物对照2.5±0.6标准化倍数变化)和hmox1(1.7±0.2)增加(图34b、d)。在空肠中，看到akr1b8(3.3±0.75)增加(图34a)。在dmf多天iv给药后分析的组织中其他转录产物一般未受影响(图34a-e)。收集小鼠尾部的切片以用于组织分析。连续5天一天一次iv施用dmf30mg/kg产生的变化类似于媒介物对照小鼠中所观测到，由以下组成：嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的最低限度至轻度血管周混合发炎浸润物；急性失血；和偶然血栓形成(数据未呈现)。媒介物对照与dmf处理小鼠的类似变化与程序和/或媒介物相关反应一致。为了确定在dmf30mg/kg或媒介物多剂量iv施用后对血细胞群体是否存在任何有害作用，在最后一次(第五次)给药后10分钟收集全血，且送至charlesriverlaboratories进行具有差异的全血细胞计数(cbc)。虽然仅从4-5只动物/组很难得出任何重要结论，但似乎在dmf处理的情况下在最后一次给药后2小时白细胞普遍减少(图35)。具体来说，观测到在dmf处理的情况下淋巴细胞(38％)和单核细胞(60％)显著下降。与以上论述的研究2一致，在这项研究中对红细胞、血红蛋白、血细胞比容、平均红细胞容积或血小板无作用。结论若干神经退化性疾病具有发炎和氧化应激作为中枢病理学成因。在临床前和临床研究中已证实口服dmf活化nrf2路径，且此可至少部分介导治疗ms中的治疗作用(linkerra,leedh,ryans,vandamam,conradr,bistap,zengw,hronowskyx,bukoa,chollates,ellrichmanng,brückw,dawsonk,goelzs,wieses,scannevinrh,lukashevm,goldr.fumaricacidestersexertneuroprotectiveeffectsinneuroinflammationviaactivationofthenrf2antioxidantpathway.brain.2011年3月；134(第3部分):678-92；scannevinrh,chollates,jungmy,shackettm,patelh,bistap,zengw,ryans,yamamotom,lukashevm,rhodeskj.fumaratespromotecytoprotectionofcentralnervoussystemcellsagainstoxidativestressviathenuclearfactor(erythroid-derived2)-like2pathway.jpharmacol.exp.ther.2012年4月；341(1):274-84；l.amaravadi,s.gopal,r.gold,r.j.fox,a.mikulskis,m.lukashev,j.kong,m.stephan,k.t.dawson.effectsofbg-12onamarkerofnrf2pathwayactivation:pharmacodynamicresultsfromthephase3defineandconfirmstudies.2012年10月11日周四,15:30-17:00.ectrims2012,lyonfrance)。临床前证据表明增加mmf暴露(在外周和cns中)在神经退化性模型中功效更高；然而，由于经口施用当前制剂下剂量限制的耐受性，人类给药无法实质上增加超过当前水平。因此，如果存在一种机制选择性地增加相对cns暴露，同时维持与现有外周暴露相关联的型态，则此可经由增加cns细胞对毒性氧化和发炎应激的抵抗力而增强在神经退化性疾病中的功效。实施例1中所呈现的成像数据证明iv施用的dmf引起dmf或dmf衍生化合物选择性分配至cns中，同时经口递送产生更局限于胃肠道的分布。此报告中描述的研究的结果证实与podmf给药比较，dmfiv施用引起生物学上活性mmf更大程度分配至脑中，总体上引起在较低总dmf剂量下实现的cns药效反应，和对应血浆暴露。所有基因和剂量的暴露-反应关系有些不清楚，且针对表征所有dmf衍生代谢物的生物分布、药代动力学和身份的可能未来研究可提供更多对这些关系的了解。结果概述研究1：单次给予dmfpo(100mg/kg)或iv(17.5或30mg/kg)●10min的血浆暴露与全部施用剂量成相对线性关系。●dmfpo给药后，与dmfiv给药相比，血浆、脑、肾和空肠中血浆和组织中mmf水平显著更高。两个iv给药的事后分析揭示血浆、肾和空肠中显著暴露剂量反应。dmfiv施用下mmf脑暴露无剂量反应，因为17.5和30mg/kg剂量引起类似的mmf暴露。●比较血浆与脑比率；dmfiv(17.5mg/kg)产生的比率为100mg/kgpo产生的比率的约双倍。dmfiv(30mg/kg)的脑穿透比类似于po。肾中dmfiv(17.5mg/kg)比率未不同于po，但dmfiv(30mg/kg)显著高于po。空肠中任何组织穿透比率无差异。●在脑中，2小时，dmfiv诱发akr1b8、gclc、hmox1、nqo1和osgin1的mrna显著变化。17.5与30mg/kgdmf之间存在osgin1和hmox1诱发的剂量-反应，但akr1b8、gclc和nqo1没有。po给药诱发akr1b8、nqo1和osgin1的表达显著变化。●在肾中，2小时，iv施用的dmf在30mg/kg下诱发akr1b8和gclc显著变化，且在17.5mg/kg下诱发nqo1和osgin1显著变化。dmfpo诱发gclc、hmox1、nqo1和osgin1的表达显著变化。●在空肠中，2小时，po施用的dmf诱发akr1b8、hmox1和nqo1显著变化。iv施用的dmf在30mg/kg下诱发akr1b8和nqo1显著变化。未观测到iv施用的dmf在17.5mg/kg下显著的基因调节。●在脑中不存在明显的暴露:药效学关系；绝对组织mmf暴露越高，并不对应于pd反应越高。在外周组织中，po给药下暴露越高，pd诱发越大。研究2：单次给予dmfiv(30mg/kg)或mmfiv(27.08mg/kg)●在所有组织中10分钟时mmf的绝对暴露在dmfiv与mmfiv组之间类似。然而，与mmfiv相比，dmfiv的脑穿透比率显著更高。在肾、空肠或脾中，未观测到dmfiv与mmfiv相比更高的组织穿透比率。●在脑中，给药后2小时，dmfiv诱发osgin1显著增加，且给药后6小时，nqo1、hmoxl和osgin1显著增加。mmfiv未诱发任何显著反应。在6小时时间点，对hmox1、nqo1和osgin1的反应在dmf与mmfiv施用之间显著不同。●在肾中，经由iv输注施用的dmf和mmf引起akr1b8(6小时)、nqo1(6小时)和osgin1(6小时)类似的显著增加。iv施用的mmf诱发gclc(2和6小时)和nqo1(2小时)和osgin1(2小时)额外显著增加。●在空肠中，经由iv输注施用的dmf和mmf引起akr1b8(6小时)、gclc(6小时)、nqo1(2小时和6小时)和osgin1(2小时)显著增加。经由iv输注施用的mmf引起osgin1(6小时)额外显著增加。●在肾和空肠中不存在dmfiv或mmfiv的明显暴露:药效学关系。脑中存在暴露:药效学关系的一些证明，因为与mmfiv比较，dmfiv引起更高mmf脑暴露，且具有相应更大的药效作用。●血细胞型态的预备分析揭示包括媒介物的所有三组中处理的实质作用。媒介物组中dmf或mmf无一致差别。研究3：连续5天每日一次给予dmfiv(30mg/kg)●连续5天每日一次dmfiv给药后，观测到脑中给药后2小时hmox1、osgin1和gclc水平显著增加，类似于单个剂量后的反应。在和空肠中也观测到akr1b8、nqo1和osgin1水平显著增加。●在第5天最后一剂后尾巴的预备组织病理学分析未揭示任何处理相关的发现(本文中数据未呈现)。●第五次dmfiv剂量后十分钟，相对于媒介物对照，淋巴细胞和单核细胞数显著降低，而其他细胞群体未改变。6.3实施例3：神经疾病的动物模型如以上实施例1和2中所示，与dmf经口施用时相比，当静脉内施用时dmf意外地更多累积在脑中而非外周组织中，且更大量在脑中。基于这些数据，可预测静脉内施用的dmf与经口施用的dmf相对比，关于对中枢神经系统的作用，将具有更有效的体内作用，此为诸如中风、肌萎缩性侧索硬化、亨廷顿病、阿尔茨海默病和帕金森病的神经疾病的疗法所需。因此，可预期当dmf施用神经疾病的动物模型中时，静脉内施用的dmf将展示与经口施用的dmf比较，在相同剂量下药效作用更显著，或静脉内施用的dmf将展示与较高剂量下经口施用的dmf比较，较低剂量下类似的药效作用。6.3.1评估神经疾病中dmf的治疗功效的动物模型6.3.1.1中风这项研究的主要目标为评估静脉内递送的反丁烯二酸二甲酯(dmf)对缺血性和出血性中风的小鼠和/或大鼠模型的影响。在诱发中风之前动物将用ivdmf或安慰剂进行预处理。此外，还评估了中风后ivdmf对比安慰剂的处理。dingy,chenm,wangm,liy,wena.posttreatmentwith11-keto-β-boswellicacidamelioratescerebralischemia-reperfusioninjury:nrf2/ho-1pathwayasapotentialmechanism.mol.neurobiol.2014年10月28日[印刷前电子版]；ashabig,khalajl,khodagholif,goudarzv和m,sarkakia.pre-treatmentwithmetforminactivatesnrf2antioxidantpathwaysandinhibitsinflammatoryresponsesthroughinductionofampkaftertransientglobalcerebralischemia.metab.brain.dis.2014年11月21日[印刷前电子版]；和zhaox,sung,tingsm,songs,zhangj,edwardsnj,aronowskij.cleaningupafterich:theroleofnrf2inmodulatingmicrogliafunctionandhematomaclearance.j.neurochem.2014年10月18日[印刷前电子版]。大部分缺血性中风发生在大脑中动脉(mca)区域中，且许多动物中风模型集中在此动脉。大脑中动脉闭塞(mcao)的管腔内单丝模型涉及手术细丝插入颈外动脉且正向拧至颈内动脉(ica)，直至尖端阻封mca起点，引起血流停止和随后mca区域中脑梗塞。mcao技术将用于模拟永久或瞬时闭塞。对于瞬时mcao，在一定时间间隔(30min、1h或2h)后移除缝线，实现再灌注。对于永久mcao，细丝留在原地(24h)。为了评估脑梗死程度，切除的脑切片将用氯化2,3,5-三苯基四唑鎓盐(ttc)。使用ttc染色的图像分析来定量地确定药物作用。将评估梗塞前与梗塞后药物处理二者的治疗作用。chiangt1,messingro,chouwh.mousemodelofmiddlecerebralarteryocclusion.j.vis.exp.2011年2月13日；(48).pii:2761。6.3.1.2.肌萎缩性侧索硬化这项研究的主要目标为评估静脉内递送的反丁烯二酸二甲酯(dmf)对肌萎缩性侧索硬化(als)的小鼠模型的影响。als为特征在于上和下运动神经元损失的晚期发作型神经退化性疾病。sod1突变引起als的基因遗传形式(rosen,d.r.,siddique,t.,patterson,d.,figlewicz,d.a.,sapp,p.,hentati,a.,donaldson,d.,goto,j.,o'regan,j.p.,deng,h.x.等(1993).mutationsincu/znsuperoxidedismutasegeneareassociatedwithfamilialamyotrophiclateralsclerosis.nature362,59-62.)。小鼠中sod1-g93a的表达导致类似于人类疾病的疾病表型，包括运动神经元损失、麻痹和过早死亡(gurney,m.e.,pu,h.,chiu,a.y.,dalcanto,m.c.,polchow,c.y.,alexander,d.d.,caliendo,j.,hentati,a.,kwon,y.w.,deng,h.x.等,(1994).motorneurondegenerationinmicethatexpressahumancu,znsuperoxidedismutasemutation.science264,1772-1775)。目前，仅一种药物批准用于治疗als，且其仅为患者提供少量的存活益处。动物雌性sod1-g93a小鼠将购自jacksonlaboratories。所有小鼠将为转基因阳性。每个给药组将使用十六只小鼠。将从第50天至第55天开始给药。转基因确认和组分配各sod1-g93a小鼠将携带可变数目的转基因复本。复本数目将影响疾病发作和进展，将通过定量pcr监测复本数目。对各组平衡复本数目。另外，将同窝出生者分配在各组之间。给药小鼠将每日经口或者静脉内给予媒介物或dmf一次。监测运动疾病发作将通过三种方法监测sod1-g93a的疾病发作和进展。所有方法将以盲法方式进行。将每日记录体重。将每日检查小鼠的疾病发作，如腿震颤或在尾提升后后肢弯曲减少所定义。还在第12、14和16周依据加速转棒检验评估小鼠。对于此检验，小鼠将首先适应以2rpm旋转300秒的棒，一天一次，历时两天。对于实际测试，小鼠将置于90秒内从2rpm加速至40rpm的棒上。到达全速后，测试又持续30秒。小鼠将每天测试三次且记录最长时间。无法在棒上保持20秒的小鼠将被排除，不进行进一步测试。终点定义当小鼠未能在15秒内从两边向右时，将确定小鼠已到达实施人道安乐死的终点标准。统计分析对于转棒和体重，将通过双向anova比较数值。将通过断点分析进一步评估体重。断点分析通过完成一系列线性回归拟合来鉴别曲线的拐点。在最低残差下上升和下降斜率的曲线拟合的交叉点定义为断点。对于各小鼠，将确定断点。接着通过studentt检验比较两组。将使用mantel-cox对数等级检验法测试发作和存活差异。将完成并入同窝出生者状态的cox比例危险检验的进一步检验。预计静脉内施用的dmf比经口施用的dmf更有效。6.3.1.3.亨廷顿病a.亨廷顿病转基因小鼠模型中神经保护作用n171-82q品系的转基因hd小鼠和非转基因同窝出生者将用经口施用的dmf、静脉内施用的dmf或10周龄的媒介物处理。将施用30mgdmf/kg的iv剂量，且将施用100mgdmf/kg的口服剂量。小鼠将置于转棒(“转棒”)上。小鼠从转棒掉下的时间长度将记录为运动协调的量度。小鼠行进的总距离还将记录为总运动力的量度。预计静脉内施用dmf的n171-82q转基因hd小鼠比施用媒介物或经口施用dmf的小鼠保持在转棒上更长时间段，且行进更远。b.亨廷顿病的丙二酸盐模型参与能量产生路径的一系列可逆和不可逆酶抑制剂已用于产生诸如帕金森病和亨廷顿病的神经退化性疾病的动物模型。具体来说，琥珀酸脱氢酶(一种影响细胞能量体内平衡的酶)的抑制剂已用于产生亨廷顿病的模型。kumarp,kaloniah,kumara.huntington'sdisease:pathogenesistoanimalmodels.pharmacol.rep.2010年1月-2月；62(1):1-14。在丁哌卡因(2mg/kg)、美索比妥(brevital)(50mg/kg，腹膜内)和异氟烷麻醉下将大鼠麻醉，且置于立体定位框中且准备进行纹状体内注射。在以下对应于立体定位坐标的左纹状体中单一部位注射丙二酸盐的单一注射：ap：离前囟点+7.0mm；侧面：离中线2.8mm；dv：离前囟点颅骨表面-5.5mm。丙二酸盐(于生理盐水中)将以2.0μl中2.0μmol的剂量在4分钟内使用注射泵注射。在输注后将注射针留在原地又1.0分钟，且将缓慢抽出以使输注物沿针道回流最少。将大鼠在加热板上保持温热直至从麻醉醒来。(green和greenamyre.characterizationoftheexcitotoxicpotentialofthereversiblesuccinatedehydrogenaseinhibitormalonate.j.neurochemistry(1995),64(1):430-4436)。在立体定位注射丙二酸盐前24小时所有雄性sprague-dawley大鼠将给予dmf，大鼠此后将每日经口或静脉内给予，直至研究结束，总共6(实验1)或7(实验2)个剂量的dmf。最后一次给药后三十分钟，所有动物将通过co2处死，且其脑将快速移除且储存在含20％蔗糖的pbs中至少1小时，接着转移至含30％蔗糖的pbs中隔夜。第二天，将所有脑埋入oct中且储存在-80℃下。处理组将如下给药：媒介物，经口30mg/kg，经口100mg/kg，静脉内15mg/kg，和静脉内30mg/kg。立体定位丙二酸盐注射后四天，阿朴吗啡(1.0mg/kg)将通过皮下注射给予，且以15分钟时间间隔确定同侧转动行为，历时60min。病变大小的细胞色素氧化酶组织化学和分析培养基将由500ml0.1m磷酸盐缓冲液(ph7.4)中200mg细胞色素c和200mg3,3’-二氨基联苯胺盐酸盐(dab)组成。将载玻片在37℃下培育90分钟且用pbs洗涤两次(2-5分钟)，接着移除至4％中性缓冲三聚甲醛，历时20分钟。将切片用pbs冲洗两次(2-5分钟)，接着用蒸馏水冲洗两次(2-5分钟)，脱水，在二甲苯中清除且盖上盖玻片。使用open-lab图像分析系统将各切片上病变面积定量。整个纹状体上取切片且每只大鼠将分析总共二十个25μm切片。面积测量求和且乘以交叉距离(200μm)以确定每个受试者的病变体积。免疫荧光显微术对于通过免疫荧光分析的组织，将动物麻醉且用4％三聚甲醛经心灌注。将移除脑且在4℃下后固定隔夜。接着将组织转移至含30％蔗糖的pbs中。将连续25-μm冰冻切片插入冠状平面，且空气干燥至明胶涂覆的玻璃载玻片上。所有组织切片均在pbs中洗涤且在室温下用5％正常山羊血清于0.1％tritonx-100/pbs中的溶液阻断45分钟。接着切片与神经元的单株抗-neun(1:500；millipore,temecula,ca,usa)和星形细胞的多株抗神经胶质纤丝酸性蛋白(gfap)(1:600)一起于阻断溶液中在4℃下培育隔夜。二级抗体在室温下培育1小时。用openlab和spectrum软件获取所有免疫荧光图像。统计分析病变体积的数据将通过单向方差分析(anova)，接着图基检验分析，以评估处理组与媒介物组之间的差异。mmf暴露的药代动力学分析组织样品均质化：将研究和空白脑样品转移至组织管(tt1)(购自covaris,inc)中且连接于硅酸硼玻璃管且置于干冰上，至少15分钟。使用cryoprep系统(covarisinc.)粉碎样品且转移至玻璃管，接着均质化。对于每1份(即100mg)组织，将具有15mg/mlnaf的2份(即200μl)水添加至各玻璃管中。组织在4℃下使用covarise210均质化，每个样品约3分钟。covaris设置如下：工作循环20％，强度10和循环数/爆发(burst)1000。均质化后，将1份(即100μl)乙腈添加至各玻璃管中，此将等于预先添加的水体积。均浆将再用e210均质化，每个样品30秒。在同一天提取前均质化组织将储存在冰上(均质化稀释因子＝4)。剩余样品将储存在-80℃下。样品制备：将研究血浆样品保存在冰上。将该样品暴露于室温的总时间为每次提取少于4.5小时。根据预定规划，将50μl样品等分试样(研究样品、空白对照、校准用标准或qc样品)手动转移至96孔盘中。将50:50乙腈:水的5μl等分试样添加至空白和仅研究样品的孔中。将200μl内标外加溶液添加至各管中，双空白除外，其中将添加200μl100％乙腈。接着盘涡旋约60秒，且在3000rpm下离心10分钟。将150μl体积的上清液转移至新96孔注射盘中，且上清液在氮气下蒸干。干提取物将在150μl含10％乙腈、0.1％甲酸的水中复原。盘涡旋2分钟，且负载至自动取样器上进行注射以通过lc-ms/ms确定mmf浓度。lc-ms/ms测定：使用具有leapctcpal冷冻自动取样器和watersatlantisdc18柱(50×2.1mm，3μm)的agilent1200二元泵来分析样品。在分析期间使用的流动相将为：流动相a：含0.1％甲酸的水；流动相b：含0.1％甲酸的乙腈。流速为400-500μl/min且注射体积为约30μl。检测器将为appliedbiosystems/mdssciexapi4000三重四极杆质谱仪。仪器将配备有负离子模式的tis源且以mrm模式监测分析物。q1和q3分别以单位/低分辨率操作，且mmf和mef(内标)的ms/ms转变质量为128.8->70.9和142.8->70.9。未知样品的浓度将针对标准计算。在亨廷顿病动物模型中预计静脉内施用的dmf比经口施用的dmf更有效。6.3.1.4.阿尔茨海默病表达swedishad突变基因、happk670n、m671l的杂合转基因小鼠(tg2576；hsiao,learning&memory2001,8,301-308)将用作阿尔茨海默病的动物模型。将动物安放在标准条件下，具有12:12光/暗循环，且食物和水随意取用。在9月龄开始，小鼠分成三组。头两组动物将经口或静脉内接受dmf六周。剩余对照组将静脉内接受媒介物六周。在所有实验组中，经2周，使用相同次序进行行为测试：(1)空间颠倒学习、(2)运动力、(3)恐惧状况和(4)撞击敏感度。空间学习模式和颠倒学习的获取将在dmf施用开始5天期间使用如bardgett等,brainresbull2003,60,131-142中所描述的水t迷宫试验。在第1-3期间使小鼠习惯水t迷宫，且任务获取在第4天开始。在第4天，在迷宫一个选择臂中训练小鼠寻找逃脱平台，直至连续追踪进行6至8次正确选择。颠倒学习阶段将在第5天进行。在颠倒学习阶段期间，在与在第4天逃脱平台位置相反的选择臂中训练小鼠寻找逃脱平台。使用与任务获取期间相同的效能标准和试验内时间间隔。将评估大步行运动以确定空间颠倒学习模式的结果不受步行能力影响。两天休息期后，在第8天在配备有对运动敏感的检测器的网格的腔室中评估水平步行运动，排除垂直和精细动作运动。在一小时时间期间将测量水平维度上伴随检测器同时阻断和未阻断的运动数目。将使用在第9天开始的恐惧状况模式测试前后关系和提示记忆的动物能力。测试将在腔室中进行，所述腔室含有一块浸透发出气味的溶液，诸如薄荷浸出物的脱脂棉，脱脂棉置于格形地面下方。在第9天执行5分钟、3个试验80db、2800hz音调足底电击次序以训练动物。在第10天，通过将各小鼠送回腔室而不暴露于音调和足底电击，且记录每10秒冰冻行为的存在或不存在达8分钟，来测试背景记忆。冰冻将定义为没有除呼吸外的运动，诸如步行、用鼻吸气或刻板行为。在第11天，将测试动物对交替背景和对听觉提示的反应。将椰子提取物置于杯中且呈现80db音调，但不递送足底电击，接着在试验开始头两分钟期间确定对交替背景的反应的冷淡存在或缺少。接着试验剩余8分钟，连续呈现音调，且确定对音调的反应冷淡的存在或缺少。在第12天，将测试动物以评估其对条件刺激，即足底电击的敏感性。在行为测试的最后一天后，将动物麻醉且移除脑，后固定隔夜，且经由海马切开切片。将切片染色以使β-淀粉样蛋白斑块成像。将使用适当统计法分析数据。预计用静脉内施用的dmf处理的动物与安慰剂动物或经口施用dmf的动物比较，学习和记忆功能改善。6.3.1.5.帕金森病为了评估静脉内(iv)施用的dmf的作用，dmf将配制于中且经由尾部静脉输注注射至大鼠或小鼠中，且与通过经口管饲法(po)接受dmf的大鼠或小鼠比较。将测试dmf的两个iv剂量，17.5和30mg/kg，以及与经由po施用的dmf(100mg/kg)一起的仅媒介物对照或媒介物(hpmc)。组1：iv媒介物组2：ivdmf17.5mg/kg组3：ivdmf30mg/kg组4：po仅媒介物组5：podmf100mg/kga.mptp诱发的神经毒性mptp或1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶为一种在人类与实验动物中产生帕金森氏综合征的神经毒素。mptp神经毒性的机制的研究展示其涉及通过单胺氧化酶对单胺氧化酶mptp抑制剂的活性形成的主要代谢物mpp+的产生阻断小鼠与灵长类动物中mptp的神经毒性。mpp+的毒害神经作用对多巴胺能神经元的特异性似乎由于突触多巴胺转运体对mpp+的吸收。此转运体的阻断剂预防mpp+神经毒性。已证明mpp+为粒线体复合物i活性的相对特异性抑制剂，在鱼藤酮(retenone)结合位点结合至复合物i和减弱氧化磷酸化。体内研究已展示mptp可耗尽小鼠中纹状体atp浓度。已证明纹状体内施用给大鼠的mpp+显著耗尽atp以及增加注射部位限于纹状体的乳酸盐浓度。增强atp产生的化合物可在小鼠中防止mptp毒性。tieuk1,perierc,caspersenc,teismannp,wudc,yansd,nainia,vilam,jackson-lewisv,ramasamyr,przedborskis.d-beta-hydroxybutyraterescuesmitochondrialrespirationandmitigatesfeaturesofparkinsondisease.j.clin.invest.2003年9月；112(6):892-901。dmf将经口或静脉内施用动物，诸如小鼠或大鼠，历时3周，接着用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(mptp)处理。mptp将以适当剂量、给药时间间隔和施用模式施用，历时1周，接着处死。对照组将接受单独生理盐水或者mptp盐酸盐。处死后将两个纹状体迅速解剖且置于冷却0.1m高氯酸中。随后将对组织进行超声处理且使用荧光计测定来分析等分试样的蛋白含量。还对多巴胺、3,4-二羟苯基乙酸(dopac)和高香草酸(hva)进行了定量。多巴胺和代谢物的浓度将表示为nmol/mg蛋白质。防止mptp、hva和/或多巴胺耗尽诱发dopac耗尽的化合物具神经保护性，因此可用于治疗帕金森病。b.氟哌丁苯诱发的运动减少化合物逆转多巴胺拮抗剂(诸如氟哌丁苯)在啮齿动物中行为镇静作用的能力视为一种有效筛选具有潜在抗帕金森病作用的药物的方法(mandhane等,eur.j.pharmacol.1997,328,135-141)。因此，本发明的化合物阻断氟哌丁苯诱发的小鼠中自主活动量不足的能力可用于评估体内与潜在抗帕金森病功效。将用于实验的小鼠圈养在受控环境中且在实验使用前使其适应新环境。在测试前一个半(1.5)小时，将对小鼠施用0.2mg/kg氟哌丁苯，此为使基线自主活动量降低至少50％的剂量。在测试前5-60min，将经口或经由静脉内施用dmf。接着将动物个别地置于干净明亮的具有平坦带孔盖的聚碳酸酯笼中。通过将笼置于含有联接于计算机以将光束中断列表的3×6阵列的光电池的框架内来测定水平自主活动量。使小鼠不受干扰以探索1h，且在此时间段内进行光束中断数目用作自主活动量的指示物。将来自静脉内施用dmf的小鼠的数据与未接受dmf的对照动物和经口接受dmf的对照动物的数据比较并且评估统计上显著的差异。预计静脉内施用的dmf比经口施用的dmf对自主活动量改善更多。c.6-羟基多巴胺动物模型帕金森病中所见的神经化学缺陷可通过局部注射多巴胺能神经毒素6-羟基多巴胺(6-ohda)至含有黑质纹状体神经元的细胞体或者轴突纤维的脑区域中来再现。通过仅在脑一侧上使黑质纹状体路径单侧病变，观测到运动抑制的行为不对称。虽然单侧病变的动物仍然可动且能够自我维持，但病变侧上剩余多巴胺敏感性神经元变得对刺激过度敏感。此通过观测到在全身性施用多巴胺激动剂(诸如阿朴吗啡)后，动物展示在与病变侧对侧的方向上明显旋转而证实。在6-ohda病变大鼠中化合物诱发对侧旋转的能力已被证实为预测药物治疗帕金森病功效的灵敏模型。将雄性sprague-dawley大鼠圈养在受控环境中且在实验使用前使其适应新环境。在手术前十五分钟，对动物腹膜内注射去甲肾上腺素能吸收抑制剂地昔帕明(25mg/kg)以防止对非多巴胺神经元的破坏。接着将动物置于麻醉腔室且使用氧气与异氟烷的混合物麻醉。动物在失去知觉后将被转移至立体定位框架，其中麻醉将经由面罩维持。将头顶剃毛且使用碘溶液杀菌。干燥后，沿着头皮中线做2cm长切口，且皮肤屈折且夹回以暴露颅骨。接着在注射部位上方穿过颅骨钻小孔。为使黑质纹状体路径病变，将注射套管缓慢降低至右内侧前脑束上方前后-3.2mm、离前囟点内侧-1.5mm和硬膜以下7.2mm深度的位置。降低套管后两分钟，以0.5μl/min速率经4min输注6-ohda，以提供8μg的最终剂量。套管将再留在原地5min以促进在缓慢抽出前扩散。接着将皮肤缝合，将动物从立体定位框架取出送回其畜舍。将允许大鼠术后恢复两周，接着进行行为测试。使用不锈钢碗(45cm直径×15cm高)的转子流量计系统测量旋转行为，不锈钢碗盖有透明树脂玻璃盖，该盖围封碗边缘且延伸至29cm的高度。为了评估旋转，将大鼠置于连接于与位于碗上方的光学转子流量计连接的弹簧系绳的布护套中，光学转子流量计评估向左或向右的运动为部分(45°)或者完全(360°)旋转。为了减少施用测试化合物期间的应激，最初使大鼠习惯设备15分钟，连续四天。测试当天，将经口或者静脉内给予大鼠dmf。在即将测试时，向动物皮下注射低于临限值的剂量的阿朴吗啡，接着置于装置中且记录1小时内的旋转次数。在一小时测试期期间完全对侧旋转的总数将用作抗帕金森病药物功效的指数。预计静脉内施用的dmf比经口施用的dmf更有效。6.3.2肌萎缩性侧索硬化和亨廷顿病的动物模型中反丁烯二酸二甲酯的功效以下实验展示神经疾病的动物模型中在经口施用后dmf的功效。6.3.2.1.肌萎缩性侧索硬化概述这项研究的主要目标为评估经口施用的反丁烯二酸二甲酯(dmf)对肌萎缩性侧索硬化(als)的小鼠模型的功效。已证实dmf活化nrf2抗氧化反应路径。已证实nrf2路径的遗传活化在als小鼠模型中减慢疾病进展。als的一种遗传起因为超氧化物歧化酶(sod1)基因突变。表达特定突变体sod1-g93a的小鼠出现年龄依赖性运动神经元丧失，从而引起瘫痪和过早发病。sod1-g93a小鼠为als广泛使用的模型。sod1-g93a小鼠通过经口管饲法给予媒介物或者每天100mg/kgdmf，在约第50天开始。在第85天、第100天和第115天通过转棒评估运动效能。通过临床观察和体重监测健康状态。在三个时间点中的任一个，转棒效能在给予媒介物与dmf的组之间无显著差异。体重略微受dmf影响。虽然峰值体重日期无变化，但断点分析显示重量增加与重量减轻之间的拐点显著变化。dmf对这些小鼠中疾病发作或存活率无显著影响。材料与方法动物三十二个雌性sod1-g93a小鼠购自jacksonlaboratories(品系2726)。所有小鼠为转基因阳性。每个给药组使用十六只小鼠。在第50天至第55天开始给药。所有程序均按照nih实验动物照护与使用指南进行，且经biogenidec研究所动物照护与使用委员会(iacuc协议编号0408-2011)批准。转基因确认和组分配各sod1-g93a小鼠携带可变数目的转基因复本。复本数目影响疾病发作和进展，通过定量pcr监测复本数目。对各组平衡复本数目。另外，将同窝出生者分配在各组之间。测试物品和给药将反丁烯二酸二甲酯以10mg/ml悬浮在0.8％羟丙基甲基纤维素(hpmc)中。对小鼠每日一次给予媒介物或dmf。给药体积为10ml/kg，通过经口管饲法引入。监测运动疾病发作通过三种方法监测sod1-g93a的疾病发作和进展。所有方法均以盲法方式进行。每日记录体重。每日还检查小鼠的疾病发作，如腿震颤或在尾提升后后肢弯曲减少所定义。还在第12、14和16周依据加速转棒测试评估小鼠。对于此测试，小鼠将首先适应以2rpm旋转300秒的棒，一天一次，历时两天。对于实际测试，小鼠置于90秒内从2rpm加速至40rpm的棒上。到达全速后，测试又持续30秒。小鼠每天测试三次且记录最长时间。无法在棒上保持20秒的小鼠被排除，不进行进一步测试。终点定义当小鼠未能在15秒内从两边向右时，确定小鼠已到达实施人道安乐死的终点标准。统计分析对于转棒和体重，将通过双向anova比较数值。将通过断点分析进一步评估体重。断点分析通过完成一系列线性回归拟合来鉴别曲线的拐点。在最低残差下上升和下降斜率的曲线拟合的交叉点定义为断点。对于各小鼠，确定断点。接着通过studentt检验比较两组。使用mantel-cox对数等级检验法测试发作和存活差异。完成并入同窝出生者状态的cox比例危险检验的进一步检验。结果用dmf(经口，每日100mg/kg)处理sod1-g93a小鼠不改变转棒效能。媒介物与dmf组的效能在第14周和第16周之间减少，与疾病发作一致(图36)。如通过肢倾斜评估，dmf(经口，每日100mg/kg)不显著改变发作(图37a)。dmf(经口，每日100mg/kg)不延长sod1-g93a小鼠的存活(图37b)。考虑同窝出生者，cox比例危害分析未揭示任何化合物作用，不过发现同窝出生者匹配为存活的重要因素(p<0.001)。断点分析指示重量增加至重量减轻的转变显著延迟(p<0.05)(图38)。体重丧失反映肌肉质量丧失。总之，在sod1-g93a小鼠中在测试剂量和频率下dmf无法改善运动效能或延长存活。dmf确实延迟体重丧失，但益处很小。如以上所论述，预计在此动物模型中静脉内施用的dmf比经口施用的dmf更有效。参考文献：gurney,m.e.,pu,h.,chiu,a.y.,dalcanto,m.c.,polchow,c.y.,alexander,d.d.,caliendo,j.,hentati,a.,kwon,y.w.,deng,h.x.等(1994).motorneurondegenerationinmicethatexpressahumancu,znsuperoxidedismutasemutation.science264,1772-1775.neymotin,a.,calingasan,n.y.,wille,e.,naseri,n.,petri,s.,damiano,m.,liby,k.t.,risingsong,r.,sporn,m.,beal,m.f.等(2011).neuroprotectiveeffectofnrf2/areactivators,cddoethylamideandcddotrifluoroethylamide,inamousemodelofamyotrophiclateralsclerosis.freeradicalbiology&medicine51,88-96.rosen,d.r.,siddique,t.,patterson,d.,figlewicz,d.a.,sapp,p.,hentati,a.,donaldson,d.,goto,j.,o'regan,j.p.,deng,h.x.等(1993).mutationsincu/znsuperoxidedismutasegeneareassociatedwithfamilialamyotrophiclateralsclerosis.nature362,59-62.scott,s.,kranz,j.,e.,cole,j.,lincecum,j.,m.,thompson,k.,kelly,n.,bostrom,a.,theodoss,j.,al-nakhala,b.m.,vieira,f.g.等(2008).design,power,andinterpretationofstudiesinthestandardmurinemodelofals.amyotrophiclateralsclerosis9.thierry,b.,patrick,b.,jean-louis,a.和rebecca,m.p.(2010).olesoxime(tro19622):anovelmitochondrial-targetedneuroprotectivecompound.pharmaceuticals3.vargas,m.r.,johnson,d.a.,sirkis,d.w.,messing,a.和johnson,j.a.(2008).nrf2activationinastrocytesprotectsagainstneurodegenerationinmousemodelsoffamilialamyotrophiclateralsclerosis.thejournalofneuroscience:theofficialjournalofthesocietyforneuroscience28,13574-13581.6.3.2.2.亨廷顿病概述当前研究的主要目标为评估反丁烯二酸二甲酯(dmf)对作为亨廷顿病动物模型的大鼠中丙二酸盐诱发的纹状体病变的可能神经保护作用。已证明dmf活化nrf2抗氧化反应路径且为bg-12(一种当前研究用于治疗多发性硬化的口服制剂)中的活性成分。进行两个分开实验且在此处报告。第一个实验研究两种剂量dmf(30mg/kg和100mg/kg)对通过纹状体内施用丙二酸盐所产生的纹状体病变大小的神经保护作用。进行第二个实验以阐述dmf对纹状体病变大小的神经保护作用的剂量-反应函数且探索在丙二酸盐诱发的纹状体病变动物中的功能恢复。此第二个实验包括四个处理组：媒介物、50mg/kg、75mg/kg和100mg/kgdmf，经由经口管饲法，每日给予一次。在异氟烷麻醉下在左纹状体中单次立体定位注射丙二酸盐前24小时所有雄性sprague-dawley大鼠接受其第一剂量的dmf，此后对大鼠每日给予，直至研究结束，总共4(实验1)或5(实验2)个剂量的dmf。注射丙二酸盐后三天和最后一次剂量后30min，处死所有动物，且移除其脑且储存在20％蔗糖中至少1小时，接着转移至30％蔗糖中隔夜，第二天，将所有脑埋入oct中且储存在-80℃下。通过针对细胞色素c氧化酶的组织化学方法确定纹状体病变体积。在第二个实验中，还通过用一定剂量阿朴吗啡激发动物来诱发旋转行为来测量功能恢复。最后一次dmf剂量后30分钟且注射丙二酸盐四天后，处死动物。给予75或者100mg/kgdmf的动物分别显著降低丙二酸盐诱发的病变体积44％和61％。另外，还在用100mg/kgdmf处理的动物中见到旋转行为显著减少41％。如丙二酸盐诱发病变的动物中神经元特异性免疫染色所证明，在用dmf处理的动物中还存在神经元的显著保护。这些发现表明dmf的体内神经保护，因为此化合物能够减小大鼠纹状体中丙二酸盐诱发的病变的大小，且维持神经元和行为功能。材料与方法动物：使用在实验开始时重275-300克的四十五只成年雄性sprague-dawley大鼠(charlesriver,wilmington,ma)。21只大鼠用于实验编号1(每组7只大鼠，三种处理)，且56只大鼠用于实验编号2(每组14只大鼠，四种处理)。所有程序均按照nih实验动物照护与使用指南进行，且经biogenidec研究所动物照护与使用委员会(iacuc协议编号0349-2010)批准。在啮齿动物中丙二酸盐诱发的纹状体病变：在丁哌卡因(2mg/kg)、美索比妥(50mg/kg，腹膜内)和异氟烷麻醉下将大鼠麻醉，且置于立体定位框中且准备进行纹状体内注射。在以下对应于立体定位坐标的左纹状体中单一部位注射丙二酸盐的单一注射：ap：离前囟点+7.0mm；侧面：离中线2.8mm；dv：离前囟点颅骨表面-5.5mm。将丙二酸盐(于生理盐水中)以2.0μl中2.0μmol的剂量在4分钟内使用注射泵注射。在输注后使注射针留在原地又1.0min，且将缓慢抽出以使输注物沿针道回流最少。将大鼠在加热板上保持温热直至从麻醉醒来(green和greenamyre,1995)。在立体定位注射丙二酸盐前24小时所有雄性sprague-dawley大鼠接受dmf，此后对大鼠每日经口或静脉内给予，直至研究结束，总共6(实验1)或7(实验2)个剂量的dmf。注射丙二酸盐后三天(实验1)或四天(实验2)和最后一次剂量后30min，通过co2处死所有动物，且快速移除其脑且储存在含20％蔗糖的pbs中至少1小时，接着转移至含30％蔗糖的pbs中隔夜。第二天，将所有脑埋入oct中且储存在-80℃下。第一个实验包括三个处理组：媒介物、30mg/kg和100mg/kg，且第二个实验包括四个处理组：媒介物、50mg/kg、75mg/kg和100mg/kg。通过阿朴吗啡诱发的旋转行为：立体定位丙二酸盐注射后四天，阿朴吗啡(1.0mg/kg)将通过皮下注射给予，且以15min时间间隔确定同侧转动行为，历时60min。病变大小的细胞色素氧化酶组织化学和分析：培养基将由500ml0.1m磷酸盐缓冲液(ph7.4)中200mg细胞色素c和200mg3,3’-二氨基联苯胺盐酸盐(dab)组成。将载玻片在37℃下培育90分钟且用pbs洗涤两次(2-5分钟)，接着移除至4％中性缓冲三聚甲醛，历时20分钟。将切片用pbs冲洗两次(2-5分钟)，接着用蒸馏水冲洗两次(2-5分钟)，脱水，在二甲苯中清除且盖上盖玻片。使用open-lab图像分析系统将各切片上病变面积定量。整个纹状体上取切片且每只大鼠将分析总共二十个25μm切片。将面积测量求和且乘以交叉距离(200μm)以确定每个受试者的病变体积。免疫荧光显微术对于通过免疫荧光分析的组织，将动物麻醉且用4％三聚甲醛经心灌注。移除脑，且在4℃下后固定隔夜。接着将组织转移至含30％蔗糖的pbs中。将连续25-μm冰冻切片插入冠状平面，且空气干燥至明胶涂覆的玻璃载玻片上。所有组织切片均在pbs中洗涤且在室温下用5％正常山羊血清于0.1％tritonx-100/pbs中的溶液阻断45分钟。接着切片与神经元的单株抗-neun(1:500；millipore,temecula,ca,usa)和星形细胞的多株抗神经胶质纤丝酸性蛋白(gfap)(1:600)一起于阻断溶液中在4℃下培育隔夜。二级抗体在室温下培育1小时。所有免疫荧光图像均用openlab和spectrum软件获得。测试物品、对照和组织学化学供应品：dmf(实验编号1：货号16293-33；实验编号2：货号16275-15)和配制媒介物(0.8％羟丙甲纤维素)。丙二酸二钠单水合物(sigma-aldrich，货号108k5314)。阿朴吗啡(sigma-aldrich，批号096k1414，m.w.＝312.8)。除丙二酸盐外，所有测试物品经配制以在1.0mlkg体重下注射。对于组织学，3,3’-二氨基联苯(dab)(sigma-aldrich，货号s88505,m.w.＝214.27)、来自牛心脏的细胞色素c(sigma-aldrich，货号070m7001v，m.w.＝12,327个碱基)。统计分析：病变体积的数据将通过单向方差分析(anova)，接着图基检验分析，以评估处理组与媒介物组之间的差异。mmf暴露的药代动力学分析：组织样品均质化将研究和空白脑样品转移至组织管(tt1)(购自covaris,inc)中且连接于硅酸硼玻璃管且置于干冰上，至少15分钟。使用cryoprep系统(covarisinc.)粉碎样品且转移至玻璃管，接着均质化。对于每1份(即100mg)组织，将具有15mg/mlnaf的2份(即200μl)水添加至各玻璃管中。组织在4℃下使用covarise210均质化，每个样品约3分钟。covaris设置如下：工作循环20％，强度10和循环数/爆发1000。均质化后，将1份(即100μl)乙腈添加至各玻璃管中，此将等于预先添加的水体积。均浆将再用e210均质化，每个样品30秒。在同一天提取前均质化组织将储存在冰上(均质化稀释因子＝4)。剩余样品储存在-80℃下。样品制备研究血浆样品在冰上。将所述样品暴露于室温的总时间每次提取少于4.5小时。根据预定规划，将50μl样品等分试样(研究样品、空白对照、校准用标准或qc样品)手动转移至96孔盘中。50:50乙腈:水的5μl等分试样添加至空白和仅研究样品的孔中。将200μl内标外加溶液添加至各管中，双空白除外，其中将添加200μl100％乙腈。接着盘涡旋约60秒，且在3000rpm下离心10分钟。将150μl体积的上清液转移至新96孔注射盘中，且上清液在氮气下蒸干。干提取物将在150μl含10％乙腈、0.1％甲酸的水中复原。盘涡旋2分钟，且负载至自动取样器上进行注射以通过lc-ms/ms确定bio-022817浓度。lc-ms/ms测定使用的hplc系统由具有leapctcpal冷冻自动取样器的agilent1200二元泵组成。使用watersatlantisdc18柱(50×2.1mm，3μm)。在分析期间使用的流动相将为：流动相a：含0.1％甲酸的水；流动相b：含0.1％甲酸的乙腈。流速为400-500μl/min，且注射体积为约30μl。检测器将为appliedbiosystems/mdssciexapi4000三重四极杆质谱仪。仪器将配备有负离子模式的tis源且以mrm模式监测分析物。q1和q3分别以单位/低分辨率操作，且bio-022817和mef(内标)的ms/ms转变质量为128.8->70.9和142.8->70.9。未知样品的浓度将针对标准计算。结果实验1展示用100mg/kgdmf处理将丙二酸盐诱发的病变体积降低55％(图39a)。图39a中的值表示对照平均％且误差条表示sem。每组n＝7。实验2展示用75或100mg/kgdmf处理将丙二酸盐诱发的病变体积分别降低44％和61％(图39b)。图39b中的值表示对照平均％且误差条表示sem。实验2展示用100mg/kgdmf处理引起阿朴吗啡诱发的旋转行为相对于媒介物处理组显著下降41％(图40)。图40中的棒条表示60分钟时间段内平均旋转且误差条表示sem。图41展示用于免疫荧光的病变大鼠脑切片染色的代表性成像。在注射区域近端，与用100mg/kgdmf处理的动物(图41b、d)相比，施用媒介物的动物中存活神经元数目增加(图41a、c)。星形细胞似乎在媒介物与dmf处理动物中靠近病变边界处均存活。图像放大10x。最后一次dmf剂量之后30分钟，所有动物均收集血浆、脑脊髓液(csf)和脑组织(小脑)以确定各隔室中反丁烯二酸单甲酯(mmf，dmf的主要代谢物)的水平(图42)。各组中所有动物的平均值以ng/mlmmf呈现。误差条指示标准误差。组具有14或15只动物，如先前指示。图42展示与脑以及csf相比，血浆中所有dmf施用剂量下mmf的浓度均显著更高。总之，两个实验指示用100mg/kgdmf处理将丙二酸盐诱发的病变体积显著降低至少55％。第二个研究中增加动物数目揭示在75mg/kgdmf处理下病变体积显著减少44％。此外，在用100mg/kgdmf处理的动物中旋转行为显著减少41％，表明在处理下行为/运动功能维持。用100mg/kgdmf处理的丙二酸盐病变动物证明显著神经保护，因为使用神经元特异性抗体(neun)用于免疫荧光显微术揭示在丙二酸盐注射部位近端的区域中神经元保存。给予dmf的动物的血浆、csf和脑mmf浓度具有剂量依赖性增加，表明化合物到达目标组织，即脑。如以上所论述，预计在此动物模型中静脉内施用的dmf比经口施用的dmf更有效。参考文献green和greenamyre.characterizationoftheexcitotoxicpotentialofthereversiblesuccinatedehydrogenaseinhibitormalonate.j.neurochemistry1995:64(1):430-4436.thatchergr等,novelnitratesasnomimeticsdirectedatalzheimer’sdisease.j.alzheimer’sdisease2004:6:s75-s84.fancellur等,neuroprotectiveeffectsmediatedbydopaminereceptoragonistsagainstmalonate-inducedlesionintheratstriatum.neurosci.2003:24:180-181.xiaxg等,dopaminemediatesstriatalmalonatetoxicityviadopaminetransporter-dependentgenerationofreactiveoxygenspeciesandd2butnotd1receptoractivation.journalofneurochemistry2001:79:63-70.linkerr等,fumaricacidestersexertneuroprotectiveeffectsinneuroinflammationviaactivationofnrf2antioxidantpathway.brain2011:134:678-692.6.4实施例4：用于静脉内施用dmf的制剂6.4.1dmf的纳米悬浮液概述dmf纳米悬浮液(150mg/ml，d50约180nm)通过在ph5.0磷酸盐缓冲液中隔夜研磨dmf、羟丙基甲基纤维素(hpmc)和十二烷基硫酸钠(sds)的混合物来制备。使用高效液相色谱法(hplc)、显微术和粒度分布(psd)检查纳米悬浮液在环境温度下的化学和物理稳定性。所得结果表明纳米悬浮液在环境温度下化学和物理稳定长达7天。纳米悬浮液适合于例如需要dmf>5mg/ml的iv制剂。dmf纳米悬浮液的制备纳米悬浮液如下制备：将1.5gdmf、100mghpmce6(dowchemical，货号vl31012n22)和20mgsds(fisherscientific，货号090217)添加至50mlcorning430290离心管中。将5.0mlph5.0磷酸盐缓冲液(fisherscientific，货号100498)添加至管中。此外，还将zro2珠粒(约10ml)添加至管中。将样品在fisherscientific多管涡旋器中在2500rpm下涡旋60min且经由光学显微图像检查粒度。再添加5.0mlph5磷酸盐缓冲液且将样品进一步研磨隔夜。由于研磨隔夜，样品的温度为约60℃。经由显微图像和mastersizer2000确定粒度。粒度通过使用malvernmastersizerhydro2000s粒度分析仪(malverninstruments,england)的激光衍射技术进行粒度分析。使用分散在环境温度下用dmf预饱和4小时的0.2％teepol610s(aldrich)水溶液中的化合物来确定粒度。稳定性将悬浮液储存在室温下且在第1天和第7天取样。检查样品的稳定性，对于化学稳定性使用hplc方法，对于物理稳定性使用psd和显微图像(数据未提供)。化学稳定性：dmf纳米悬浮液的化学稳定性展示于表9和图43中。结果表明纳米悬浮液化学稳定长达7天。表9.dmf纳米悬浮液的稳定性(面积％)a等度hplc方法用于dmf化学稳定性研究；柱：varianelichrosorbrp18，250mm×4.6mm；流动相a：含0.1％磷酸的水(70％)；流动相b：甲醇(30％)；运行时间：10min；流速：1.0ml/min；注射体积：10μl；柱温度：35℃；检测器波长：210nm，带宽4nm。b研磨隔夜后形成约3％mmf(dmf降解产物)。由于研磨期间的温度较高可能发生降解。物理稳定性：当样品在环境温度下储存长达7天时从psd(图44a(第1天)(150mg/ml，d50约180nm)和图44b(第7天)(d50约175nm)和显微图像(数据未提供)未观测到纳米悬浮液的粒度变化。因此，纳米悬浮液物理稳定至少7天。6.4.2呈溶液的dmf制剂概述研究在环境温度下有或无各种赋形剂的情况下dmf在水中的溶解度且概述于表10中：表10发现dmf在环糊精媒介物中的溶解度(溶液4-8)随环糊精百分比增加而增加。此外，发现dmf在水中的溶解度随研究温度而增加(在20℃下2.7mg/ml)。在37℃下dmf在水、模拟胃液(sgf)和模拟肠液(sif)中的水溶解度分别为2.84mg/ml、2.95mg/ml和3.11mg/ml。dmf的溶解度在ph4柠檬酸盐缓冲液中3.32mg/ml至ph8硼酸盐缓冲液中4.02mg/ml范围内变化。dmf在水性介质中的稳定性具ph依赖性。在37℃下，发现在弱酸性条件下溶液中dmf稳定，其中最大稳定性在约ph4。当在37℃下溶液ph值超过7时，dmf在溶液中的稳定性迅速减小。观测到的dmf的主要降解产物为反丁烯二酸氢甲酯和反丁烯二酸。当溶液储存在环境温度下时20％captisol溶液中dmf在0.2mg/ml下稳定长达2天且在4.0mg/ml下长达7天。包含20％captisol的iv制剂适合于例如需要<4mg/mldmf的iv制剂。生理盐水和d5w制剂适用于例如需要<2mg/ml的iv制剂。在某些实施方案中，新近制备此类生理盐水和d5w制剂。在水中的溶解度使用悬浮平衡法，在20、35和50℃下确定dmf在水中的24小时平衡溶解度。在测量温度下搅动约20mgdmf在1ml水中的悬浮液24小时。接着样品在测量温度下经由0.2μm过滤装置过滤，且使用hplc确定滤液浓度。通过ft-raman技术证实平衡固体为与起始物质相同的形式。发现dmf溶解度随研究温度而增加(表11)。表11dmf在水中的溶解度温度(℃)溶解度(mg/ml)202.7353.5505.5在37℃下在水性介质中的溶解度在37℃下，通过制备水、模拟胃液(sgf，无胃蛋白酶)、模拟肠液(sif，无胰酶)或ph2、4、6、8和10缓冲液中饱和溶液来确定dmf在水性介质中的溶解度。制剂在37℃下在isotemp烘箱中旋转24小时，接着经由0.2μm过滤器过滤且通过hplc确定溶液中dmf的量。在37℃下，dmf在水、sgf和sif中的水溶解度分别为2.84mg/ml、2.95mg/ml和3.11mg/ml。且dmf的溶解度在ph4柠檬酸盐缓冲液中3.32mg/ml至ph8硼酸盐缓冲液中4.02mg/ml范围内变化(表12)表12.37℃下dmf在不同水性介质中的溶解度**溶解度如美国药典27中定义描述：描述性术语1份溶解物所需的溶剂份数(mg/ml)极易溶低于1(>1000)易溶1至10(100～1000)可溶10至30(33.3～100)略溶30至100(10～33.3)微溶100至1000(1～10)极微溶1000至10,000(0.1～1)实际上不溶或不溶大于或等于10,000(<0.1)水溶液中溶液稳定性水中储备dmf溶液以0.4mg/ml浓度制备。使用0.2mg/ml浓度溶液进行溶液稳定性研究，其通过混合等体积储备溶液和个别研究介质来实现。研究在水、sif、sgf、ph2、4、6和10的水性缓冲液中的溶液。储存在37℃或环境温度下的样品在预定时间点取出且通过hplc分析。实验结果表明dmf在水性介质中的稳定性具ph依赖性。在37℃下，发现在弱酸性条件下溶液中dmf稳定，其中最大稳定性在约ph4(表13)。当在37℃下溶液ph值超过7时，dmf在溶液中的稳定性迅速减小。在ph10硼酸盐缓冲溶液中，在初始浓度前降解的大半dmf能够通过hplc确定。观测到的dmf的主要降解产物为反丁烯二酸氢甲酯和反丁烯二酸。表13在37℃和环境温度下dmf在不同溶液中的稳定性。n/a＝不可得用于临床前研究的dmfiv制剂研发根据以下程序研发dmfiv制剂，其适合于目标浓度为约5mg/ml的临床前研究：1.测试dmf在若干纯溶剂(dmso、乙醇、丙二醇和peg400)中的溶解度，其适合于iv给药制剂(表14)。结果呈现于表15中。2.测试5mg/ml透明溶液是否可基于赋形剂在不同动物物种中的典型最大用量实现(表14)。举例来说，2％dmso(0.1ml/kg/5ml/kg×100％＝2.0％)、10％peg400(1ml/kg/5ml/kg×50％＝10％)和20％captisol(磺丁基醚环糊精)(5ml/kg/5ml/kg×20％＝20％)可用于啮齿动物iv制剂，采用5ml/kg的剂量。3.因为peg400提供dmf的最佳溶解度，所以测试dmf在具有不同赋形剂的10％peg400中的溶解度。所述研究通过制备peg400储备溶液且用不同媒介物稀释该溶液来进行(表16)。结果表明即便3.0mg/ml透明溶液仍无法通过使用具有大部分赋形剂的10％peg400实现，但20％captisol和15％hpbcd可能为最佳选择，因为两者均在2.8mg/ml下产生透明溶液。4.测试dmf在15％hpbcd和20％captisol中的溶解度。结果表明约5mg/mldmf透明溶液可通过使用20％captisol实现(表17)。表14.不同动物物种中赋形剂的典型最大用量。s.neervannan；expertopin.drugmetab.toxicol.20062(5)第715-731页表15.dmf在适合于iv制剂的一些溶剂中的溶解度。表16.dmf在具有不同媒介物的10％peg400中的溶解度。表17.dmf在15％hpbcd和20％captisol中的溶解度。dmf在hpbcd、captisol、生理盐水和d5w中的溶解度测试测试dmf在5％hpbcd、40％hpbcd、5％captisol和40％captisol中的溶解度以研究环糊精百分比对dmf溶解度的作用。还测试了dmf在d5w(5％葡萄糖水溶液)和生理盐水(0.9％nacl溶液)中的溶解度实现低浓度dmfiv制剂的可能性。在环境温度下通过制备饱和溶液确定dmf在这些介质中的溶解度。将制剂在环境温度下旋转24小时，接着经由0.45μm过滤器过滤且通过hplc确定溶液中dmf的量。表18.dmf在hpbcd、captisol、d5w和生理盐水中的溶解度。dmf在20％captisol中的稳定性和溶解度测试基于以上论述的信息，选择20％captisol用于进一步研究。在室温下通过在20％captisol中制备饱和溶液来确定dmf在20％captisol中的溶解度。在50℃下加热制剂5-10min，接着冷却至室温。此时形成沉淀且样品经0.2μm过滤器过滤且通过hplc确定溶液中dmf的量。dmf在20％captisol中的溶解度为4.11mg/ml。研究0.2和4.0mg/mldmf20％captisol溶液的稳定性。储存在环境温度下的样品在预定时间点(0天、2天和7天)取出且通过hplc分析。结果表明当溶液储存在环境温度下时dmf20％captisol溶液在0.2mg/ml下稳定长达2天且在4.0mg/ml下长达7天。表19.在环境温度下dmf20％captisol的稳定性a等度hplc方法用于dmf化学稳定性研究；柱：varianelichrosorbrp18，250mm×4.6mm；流动相a：含0.1％磷酸的水(70％)；流动相b：甲醇(30％)；运行时间：10min；流速：1.0ml/min；注射体积：10μl；柱温度：35℃；检测器波长：210nm，带宽4nm。用于制备供静脉内施用的dmf溶液的示例性方案下文展示一种用于制备适于静脉内施用的dmf溶液的示例性方案。处理和使用条件用于临床前研发警告：研究新药-不用于人。受联邦法限制于研究用途。仅用于临床试验用途。仅由合格研究者使用。处理：研究新药。根据msds处理化合物。注意事项：○不要冷冻○在储存期间样品避免直射光○样品储存在22℃±5℃○推荐少于3.5mg/ml的溶液，因为在环境温度下dmf在20％captisol中的溶解度为4.1mg/ml。dmfiv制剂(溶液)制备○向已校准的烧杯中添加适当量的dmf以制备所需浓度的1公升溶液。○添加媒介物至1l体积。○添加磁性搅拌棒且在50℃下中速搅拌，直至实现溶液(约5-10min)。○冷却至环境温度○用nalgene快速流动过滤器(0.2μmapes膜，thermoscientific)或同等过滤器过滤溶液媒介物制剂20％(w/w)captisol媒介物：○向已校准的烧杯添加200gcaptisol○添加800g去离子水○在磁性搅拌盘上在500-600rpm下搅拌直至实现澄清无色溶液。材料○容器/盖板：○溶液储存：fisherscientificfisherbrand琥珀色环境广口瓶(02-912-005)(或同等物)施用说明1.)从储存处取出制剂。2.)参考关于适当测试物品浓度和给药时程的方案。各动物应经由静脉内输注获得适当剂量水平。3.)将任何剩余制剂送回储存处。以引用的方式并入本文中引用的各种参考文献，诸如专利、专利申请和公开案，它们的公开内容据此以引用的方式整体并入。当前第1页12当前第1页12